专题1基因工程教学内容

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专题1基因工程
2、DNA连接酶
来源
E•coli DNA连接酶 粘性末端
T4 DNA连接酶
粘性末端和平末端
与DNA聚合酶、热稳定DNA聚合酶有什么异同?
3、载体 种类:质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等
条件:
组成:
①能在细胞中稳定存在并复制
目的基因、标记基因
②1―多个限制酶切位点
启动子、终止子
③标记基因
④无害
三、过程
1、获取目的基因 从基因文库中获取目的基因 PCR技术扩增 人工合成
序列、功能、位置、转 录产物mRNA、表达产 物蛋白质等
如何利用PCR技术扩增目的基因?
条件:
过程:
缓冲液 模板 两种引物 热稳定DNA聚合酶
变性: 加热至90―95℃ 复性: 冷却至55―60℃ 延伸: 加热至70―75℃
4种脱氧核苷酸
2、构建基因表达载体(核心)
3、将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法 双子叶植物和裸子植物
植物细胞 基因枪法
单子叶植物
花粉管通道法 我国独创
动物细胞 显微注射法(受精卵) 微生物细胞 Ca 2+ 处理法
4、目的基因的检测与鉴定 ①分子水平 DNA分子杂交技术 DNA 、mRNA
抗原―抗体杂交技术 ②个体水平
预期蛋白质的功能
设计蛋白质的结构
推测其氨基酸序列
推测其脱氧核苷酸序列(基因、DNA)
来自百度文库
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四、应用 植物 抗性植物(抗虫、病、逆性等)
改良品质(番茄延熟、提高营养、控制花色等)
动物 改善品质(提高生长速率、营养成分等) 生产药物(乳腺生物反应器等) 作为器官移植的供体
基因治疗:
五、蛋白质工程 根据人们对蛋白质功能的特定需求, 以蛋白质分子的结构规律与生物功能的关系为基础, 通过基因修饰或基因合成, 对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质的过程。
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