家畜胚胎移植ppt课件
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家畜胚胎移植ppt课件
3.检卵（Egg picking）
• 将冲卵液回收之后，尽快置于放大10-15倍 的实体显微镜下，检查收集到的卵数，并 用一细吸管将卵移至新鲜培养液内，在放 大40-200倍的复式显微镜下，进行形态学 观察，选出适合于移植的正常卵（附图5）。 形态不正常者（附图6）及发育延迟2天以 上的卵（参考附表3、4），都不可用于移 植，因为少数形态异常的卵虽然可以发育 成正常胎儿，但毕竟是属于例外情况。
羊的手术法移卵
羊的手术法移卵
（2）非手术法移卵
• 自从1982年以来，非手术法已被某些胚移中心用 于商业性移植，但将胚胎送到子宫角内需要有一 定经验。为了提高成功率，Elsden（1982）将其 总结为四步。 • ①将胚胎吸入0.25ml细管中，位于两个气泡之 间。 • ②将细管装入卡苏枪，枪外由一塑料套保护。 • ③将受体保定好，进行硬膜外麻醉，由直肠触 摸黄体位于何侧。 • ④将胚胎送到黄体同侧的子宫角中部。
超排效果好的卵 巢黄体
超排效果不好 的卵巢黄体
受体的同期发情( Synchroestrus of recipient )
• 无论在何种家畜或任何品种，为了使胚胎移植获 得成功，必须使受体母畜与供体的发情同期化， 使二者的生殖器官处于相同的生理阶段。受体与 供体发情开始的时间越接近，移植的受胎率越高。 这是因为妊娠初期的子宫环境在不断发生变化， 而特定时间的环境只适合于发育阶段相应的胚胎 生存；也可能是因为非同期胚胎不能对受体产生 促黄体作用。为了获得最佳受胎效果，应将受体 与供体的发情时间之差控制在12h之内，如果超 过±24h（牛）或±48h（绵羊和山羊），妊娠率 即急剧下降。
羊受体的同期发情处理方案
天数 1 置栓 11 12 13－17 20
胚胎移植精品PPT课件
能 3)受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥 4)胚胎与受体建立正常的联系,但遗传物质没有改
变.
4 选择 供体母牛
受体母牛
.
胚 本胎 程移 序植
的
基
……同期发情处理……
超数排卵
供体公牛 配种 冲卵
质量检查、培养
胚胎移植 妊娠检查
分娩（胚胎移植的犊牛）
5.胚胎移植成功与否要有两个条件
（1）胚胎移植一般应在同种的雌性供体 和受体之间进行。
……
.
.
为什么胚胎移植能成功?
移动到任何一头动物子宫内都能发育吗?
同种动物发情排卵后,在一端时间内供体\受体具有 相同的生理环境
为什么能收集到胚胎?
早期胚胎一定时间内处于游离状态
供体和受体会不会发生排斥/
同种动物之间基本上不排斥
为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性?
胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗传特 性不受受体的影响
.全能细胞
全能细胞
.
多能、专能.
.
.分类
• 全能细胞
– 桑椹胚及以前 – 能发育成完整个体
• 多能干细胞 (胚胎干细胞)
分类 – 内细胞团细胞、原始性腺细胞分离出来
– 能分化出动物体内的任何组织
• 专能干细胞(成体干细胞)
– 如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等 – 能分化出特定的组织
.分别指什么, 分化程度, 潜能；核全能性；目前初始化
.还存在什么问题
阅读
• 课本P79倒数第一段 • 归纳存在什么问题
.
.性别鉴定
.
.性别鉴定2
.
.还可以胚胎嵌合体
三.胚胎干细胞
1.概念:简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺 中分离出来的一类细胞.
变.
4 选择 供体母牛
受体母牛
.
胚 本胎 程移 序植
的
基
……同期发情处理……
超数排卵
供体公牛 配种 冲卵
质量检查、培养
胚胎移植 妊娠检查
分娩（胚胎移植的犊牛）
5.胚胎移植成功与否要有两个条件
（1）胚胎移植一般应在同种的雌性供体 和受体之间进行。
……
.
.
为什么胚胎移植能成功?
移动到任何一头动物子宫内都能发育吗?
同种动物发情排卵后,在一端时间内供体\受体具有 相同的生理环境
为什么能收集到胚胎?
早期胚胎一定时间内处于游离状态
供体和受体会不会发生排斥/
同种动物之间基本上不排斥
为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性?
胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗传特 性不受受体的影响
.全能细胞
全能细胞
.
多能、专能.
.
.分类
• 全能细胞
– 桑椹胚及以前 – 能发育成完整个体
• 多能干细胞 (胚胎干细胞)
分类 – 内细胞团细胞、原始性腺细胞分离出来
– 能分化出动物体内的任何组织
• 专能干细胞(成体干细胞)
– 如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等 – 能分化出特定的组织
.分别指什么, 分化程度, 潜能；核全能性；目前初始化
.还存在什么问题
阅读
• 课本P79倒数第一段 • 归纳存在什么问题
.
.性别鉴定
.
.性别鉴定2
.
.还可以胚胎嵌合体
三.胚胎干细胞
1.概念:简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺 中分离出来的一类细胞.
胚胎移植(课堂PPT)
23
三.胚胎移植的生理学基础
1同种动物的供体和受体排卵后，生殖器官 的 生理变化 是相同的。
2早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建 立组织上的联系，而是处于 游离 状态。
3受体对移入子宫的外来胚胎基本上不 发生 免疫排斥反应 。 4 供体胚胎可与受体子宫建立正常的 生理 和
组织 联系，但其 遗传特性 不受影响。
（精子），使其在（试管）中受精。
注：但发育的主要场所是（母体）
2
2、胚胎体外培养：
• 概念：将受精卵在人工环境下培养成早期 胚胎。
• 培养液成分： 水、无机盐、有机物、维生素、激素、
氨基酸、核苷酸以及动物血清等。
3
哺乳动物体外受精后培养成的早期胚胎
？
怎样做才能胚将胎它移们植孕育成幼体？
4
5
6
胚胎移植
7
1890年，英国剑桥大学的生物学家W·希普将2个纯种安哥 拉兔的早期胚胎移植到一只已和同种交配的比利时兔的输 卵管内。结果生出4只比利时子兔和2只纯种安哥拉子兔。
安哥拉兔
这是世界上第一例胚胎移植，胚胎移植技术由此创始8。
• 1、供体和受体牛职能各是什么？供体公牛、母牛和受体母 牛如何进行选择？为什么要用促性腺激素处理供体母牛？ 为什么需要对供体母牛和受体母牛进行同期发情处理？
• 2、排卵、冲卵分别是指什么？为什么能把供体母牛子宫 内的胚胎冲洗出来？
• 3、收集的胚胎移植到受体母牛的子宫内，会发生免疫排 斥反应吗？受体母牛产下怎么样的犊牛？为什么？
• 4、胚胎移植的实质是什么？胚胎移植的优势是什么？
9
是将雌性动物的 早期胚胎 或体外受精得到的 胚胎 移植 到同种的、生理状态相同 的其他雌性动 物体内生产 后代 的技术。
三.胚胎移植的生理学基础
1同种动物的供体和受体排卵后，生殖器官 的 生理变化 是相同的。
2早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建 立组织上的联系，而是处于 游离 状态。
3受体对移入子宫的外来胚胎基本上不 发生 免疫排斥反应 。 4 供体胚胎可与受体子宫建立正常的 生理 和
组织 联系，但其 遗传特性 不受影响。
（精子），使其在（试管）中受精。
注：但发育的主要场所是（母体）
2
2、胚胎体外培养：
• 概念：将受精卵在人工环境下培养成早期 胚胎。
• 培养液成分： 水、无机盐、有机物、维生素、激素、
氨基酸、核苷酸以及动物血清等。
3
哺乳动物体外受精后培养成的早期胚胎
？
怎样做才能胚将胎它移们植孕育成幼体？
4
5
6
胚胎移植
7
1890年，英国剑桥大学的生物学家W·希普将2个纯种安哥 拉兔的早期胚胎移植到一只已和同种交配的比利时兔的输 卵管内。结果生出4只比利时子兔和2只纯种安哥拉子兔。
安哥拉兔
这是世界上第一例胚胎移植，胚胎移植技术由此创始8。
• 1、供体和受体牛职能各是什么？供体公牛、母牛和受体母 牛如何进行选择？为什么要用促性腺激素处理供体母牛？ 为什么需要对供体母牛和受体母牛进行同期发情处理？
• 2、排卵、冲卵分别是指什么？为什么能把供体母牛子宫 内的胚胎冲洗出来？
• 3、收集的胚胎移植到受体母牛的子宫内，会发生免疫排 斥反应吗？受体母牛产下怎么样的犊牛？为什么？
• 4、胚胎移植的实质是什么？胚胎移植的优势是什么？
9
是将雌性动物的 早期胚胎 或体外受精得到的 胚胎 移植 到同种的、生理状态相同 的其他雌性动 物体内生产 后代 的技术。
家畜胚胎移植
较理想的超排效果 • 正因为影响超排的因素较多，所 正因为影响超排的因素较多， 以很难使每头母畜都获得预期效 果，这就使得超排成为胚胎移植 中最难控制的一个环节。 中最难控制的一个环节。在实践 中只要能使一半以上的处理母畜 得到满意结果，就认为是成功的。 得到满意结果，就认为是成功的。
较理想的超排效果
超排方法
• 在发情周期的一定时期，用 在发情周期的一定时期， PMSG或FSH促进卵泡发育， 促进卵泡发育， 或 促进卵泡发育 于发情开始后12-16h和20-24h 于发情开始后 和 各配种（输精）一次， 各配种（输精）一次，并于第 一次配种后静脉注射hCG或LH， 一次配种后静脉注射 或 ， 以便排出多数卵子。 以便排出多数卵子。
受体的同期发情( 受体的同期发情 Synchroestrus of recipient )
• 诱发同期发情的理想药物首推前列腺素 PGF2α及其类似物。其剂量根据 种类和 及其类似物。 及其类似物 其剂量根据PG种类和 用法不同而异。在国外， 用法不同而异。在国外，普遍采用氯前列 烯醇(cloprostenol)500µg肌注。国内多用 肌注。 烯醇 肌注 15甲基 甲基PGF2α肌注，用量为 肌注， 甲基 肌注 用量为2mg。 。 • 倘若在400头以上的大牛群中进行胚胎移 倘若在 头以上的大牛群中进行胚胎移 因为每天都可能遇到发情母牛， 植，因为每天都可能遇到发情母牛，就可 以尽量选留自然发情的母牛作为受体， 以尽量选留自然发情的母牛作为受体，不 需要进行同期发情处理。 需要进行同期发情处理。
收集胚胎（ 收集胚胎（Collection eggs） ）
• 收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间， 收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间， 从超排供体回收其胚胎，以备给受体移植， 从超排供体回收其胚胎，以备给受体移植， 亦称胚胎回收或胚胎采集，简称采卵。 亦称胚胎回收或胚胎采集，简称采卵。采 卵的效果与采集时间、 卵的效果与采集时间、方法和检卵技术均 有关系。 有关系。
第十六章家畜胚胎发育课件
发生的关系。
探索利用干细胞技术修复和再生 受损组织或器官的可能性，以及 这些技术在治疗先天性疾病和出
生缺陷方面的应用前景。
THANKS
感谢观看
胚胎生物技术还可以应用于家畜细胞培养和组织工程，为家畜损伤修复和器官移植 提供新的解决方案。
胚胎发育研究对家畜育种的意义
胚胎发育研究对家畜育种具有重要的 意义，通过了解胚胎发育的规律和机 制，可以更好地指导家畜繁殖和育种 实践。
胚胎发育研究还有助于探索家畜繁殖 和育种的新技术和方法，推动家畜育 种的创新和发展。
胚胎发育研究有助于发现和鉴定与生 产性能和抗病能力等性状相关的基因 和分子标记，加速家畜育种的进程。
05
家畜胚胎发育的未来研究方向
胚胎发育的分子机制研究
深入研究胚胎发育过程中基因 表达的调控机制，包括转录因 子、表观遗传修饰等对胚胎发 育的影响。
探索胚胎发育过程中细胞命运 决定的分子机制，了解细胞如 何从多能干细胞分化为各种组 织和器官。
家畜胚胎发育的调控机制
基因表达调控
在胚胎发育过程中，基因表达的 调控是一个关键环节，通过基因 表达的调控可以影响胚胎的形态
发生和分化。
信号转导
信号转导是胚胎发育过程中另一个 重要的调控机制，通过信号转导可 以调节细胞的生长、分化和凋亡等 过程。
表观遗传学调控
表观遗传学调控是指通过DNA甲基 化、组蛋白修饰等手段对基因表达 进行调控，从而影响胚胎的正常发 育。
揭示胚胎发育过程中细胞间通 讯的分子机制，了解细胞如何 通过信号转导和细胞间相互作 用来调控胚胎发育。
胚胎发育与环境因素的相互作用研究
研究环境因素（如营养、激素、化学物 质等）对胚胎发育的影响，以及这些因 素如何通过影响基因表达和细胞功能来
探索利用干细胞技术修复和再生 受损组织或器官的可能性，以及 这些技术在治疗先天性疾病和出
生缺陷方面的应用前景。
THANKS
感谢观看
胚胎生物技术还可以应用于家畜细胞培养和组织工程，为家畜损伤修复和器官移植 提供新的解决方案。
胚胎发育研究对家畜育种的意义
胚胎发育研究对家畜育种具有重要的 意义，通过了解胚胎发育的规律和机 制，可以更好地指导家畜繁殖和育种 实践。
胚胎发育研究还有助于探索家畜繁殖 和育种的新技术和方法，推动家畜育 种的创新和发展。
胚胎发育研究有助于发现和鉴定与生 产性能和抗病能力等性状相关的基因 和分子标记，加速家畜育种的进程。
05
家畜胚胎发育的未来研究方向
胚胎发育的分子机制研究
深入研究胚胎发育过程中基因 表达的调控机制，包括转录因 子、表观遗传修饰等对胚胎发 育的影响。
探索胚胎发育过程中细胞命运 决定的分子机制，了解细胞如 何从多能干细胞分化为各种组 织和器官。
家畜胚胎发育的调控机制
基因表达调控
在胚胎发育过程中，基因表达的 调控是一个关键环节，通过基因 表达的调控可以影响胚胎的形态
发生和分化。
信号转导
信号转导是胚胎发育过程中另一个 重要的调控机制，通过信号转导可 以调节细胞的生长、分化和凋亡等 过程。
表观遗传学调控
表观遗传学调控是指通过DNA甲基 化、组蛋白修饰等手段对基因表达 进行调控，从而影响胚胎的正常发 育。
揭示胚胎发育过程中细胞间通 讯的分子机制，了解细胞如何 通过信号转导和细胞间相互作 用来调控胚胎发育。
胚胎发育与环境因素的相互作用研究
研究环境因素（如营养、激素、化学物 质等）对胚胎发育的影响，以及这些因 素如何通过影响基因表达和细胞功能来
胚胎移植PPT课件
（5）绵羊和山羊 于发情开始后第13（绵羊）或16（山 羊）天一次肌肉或皮下注射PMSG 1000-2000 IU，或 者每天肌肉注射FSH-P，连续注射4天，总剂量为1824mg。于开始注射促性腺激素后36-48小时，一次肌 肉注射PGF2α或类似物。母羊一般于注射PG后24-36 小时发情。发情开始时一次静脉注射hCG 1000单位。 （6）猪 于发情第13、14或15天肌肉注射氯前列烯醇 100μg，8小时后再注射同样剂量的氯前列烯醇。在 第一次注射氯前列烯醇后24小时，肌肉注射PMSG 750-1000IU。72小时后，肌肉注射500-1000IU hCG。 一般于注射hCG后38-50小时排卵。
2）胚胎移植是胚胎工程各项技术的基础
体外受精、显微受精、动物克隆、转基 因动物的产生等最终要通过胚胎移植技 术来实现
三.胚胎移植技术的发展简史
• 3.1早期阶段 • 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔 的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内 ，分别获得仔兔2只。 • 3.2初级阶段 • 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵 羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左 右。
3．促进动物的进出口
通过运输冷冻胚胎可以代替种畜的进出口活动。 这样做可以大大节约购买、运输和检疫种畜所 需的费用。此外，由外地引进胚胎而繁殖的家 畜，因为是从小就在当地生长发育，故较容易 适应本地区的环境，也可自养母得到一定的免 疫能力。
4．某些感染性疾病的控制和不妊症的治疗
已经证明，胚胎移植是向无特异性病原体（ specificpathogen-free, SPF）猪群引入新鲜血液的一种安全 手段。然而，其条件是，必须事先知道有关的特异 性病原体不能够经胚胎或冲卵液传播。同样，在其 他动物也有可能从感染某种疾病的母畜获得“干净” 胚胎进行移植，以便拯救一些理想的基因。 在优秀母畜容易发生习惯性流产或难产，以及由于其 他原因（如年老体弱）不宜负担妊娠过程的情况下， 也可采用胚胎移植使其繁殖正常后代。
动物产科学课件 胚胎移植
（五）ET所需条件
1、胚胎来源：从良种母畜获得大量胚胎； 2、数量足够的受体母畜； 3、技术条件：包括人员的技术水平及所需
的设备。
（六）ET程序
（一且其生殖机能还需 要处于较高的水平。牛、猪产后两个月以上才能作 为供体。
2、受体母畜
移植约2周后，注意观察是否返情。
30d用B型超声波确定妊娠 2个月后可用直肠检查法确定妊娠 怀孕母牛要注意做好妊娠期的管理及接产工作。
母兔取出2个4细胞胚胎，移植到一头纯种比利时母 兔输卵管上端(用同种公兔交配后3h), 结果生出了4 只比利时种仔兔和2只纯种安哥拉仔兔。
这一结果说明早期发育的胚胎更换到另一个体的 输卵管(或子宫角)内，如果胚胎的发育阶段和所处 的环境条件相适应，它完全可以继续正常发育，并 成长为一个新个体。
胚胎移植大事记
（2）每侧子宫角需冲洗100-150ml。冲洗液的导出 应顺畅，并尽可能回收全部注入的容量。
母牛非手术冲卵示意图
3、子宫体冲卵法 冲卵管通过子宫颈后，充气把部卵管拉紧，固定 在宫体和子宫颈内。子宫充满液体后回收，按摩 子宫角前端，两角同时回收，反复5~6次。
4、供体母牛采卵后的处理 向子宫内注射抗菌素或前列腺素
提供胚胎的个体——供体 接受胚胎的个体——受体
胚胎移植程序图
为了使供体♀多排卵，通常采用超排。
国外将常规的胚胎移植称为超数排卵胚胎移植或称为多排
卵胚胎移植。
目前，用体外生产胚胎技术或克隆技术等方法也可以生产
胚胎，扩大了优质胚胎的来源，降低了ET的成本。
（一）发展概况
1890年剑桥大学Walter Heape从一头纯种安哥拉
胎的遗传特性和性别在母畜体内受精时就已经决 定了，受体母畜只是给移入的胚胎提供了一个孕 育的环境，胚胎的遗传特性不受受体母畜的影响。
胚胎移植的操作程序课件(共27张PPT)《畜禽繁殖》同步教学(中国农业出版社)
胚胎移植的操作程序
供体选择
供体应该是良种母畜，最好是青壮年母畜 ，具备遗传优势，生产性能或经济价值高，谱 系清楚，健康无病，营养良好，体质健壮。
经产母畜应在生殖机能恢复正常后方可作 为供体。
受体选择
受体母畜可选用非优良品种的个体，但要求体格 健壮，营养状况良好，处于未孕状态，无生殖系统疾 病。青年母畜和经产母畜均可作为胚胎移植受体。
在一般情况下，难以找到足够数量的自然发情母 畜作受体，所以多采用对受体母畜进行同期发情处理 。
同期发情
利用某些外源激素人为控制并调整一群母 畜发情周期的过程，使之在预定的时间内集中 发情，以便有计划地合理组织胚胎移植所进行 的同期化处理方法，也称同期发情。
超数排卵
在母畜（供体）发情周期的某一时期，用 外源性的促性腺激素处理，从而促使其卵巢上 较正常有更多个卵泡同时发育，并且能够同时 或准同时排出多个具有受精能力的卵子，这一 技术称为超数排卵。
冲洗时必须考虑排卵时间、配种时间，根据发育阶 段确定胚胎的具体位置，才能得到较高的收集率。
胚胎的采集
胚胎采集方法： （1）胚胎手术法：适用于羊、猪和其他中小动物； （2）胚胎非手术法：适用于牛、马等大动物； （3）胚胎离体生殖道回收法：小鼠、大鼠等实验动
物。
312 排卵时间和胚胎发育速度
畜别 排卵时间
供体的超数排卵
（图片来源于网络）
供体的发情鉴定与配种
结束超数排卵处理后，密切观察供体的发情征状 ，每天早、 中、晚至少观察3次。为了获得较多发育 正常的胚胎，应根据育种的需要，使用活率高、密度 大的优质精液，输精次数增加到2~3次，两次输精间隔 为8~10h。
胚胎的采集
胚胎的采集:在超数排卵动物发情配种后一定时间 把受精卵或早期胚胎从超排配种动物的生殖道中冲洗 出来，并收集在器皿内。
供体选择
供体应该是良种母畜，最好是青壮年母畜 ，具备遗传优势，生产性能或经济价值高，谱 系清楚，健康无病，营养良好，体质健壮。
经产母畜应在生殖机能恢复正常后方可作 为供体。
受体选择
受体母畜可选用非优良品种的个体，但要求体格 健壮，营养状况良好，处于未孕状态，无生殖系统疾 病。青年母畜和经产母畜均可作为胚胎移植受体。
在一般情况下，难以找到足够数量的自然发情母 畜作受体，所以多采用对受体母畜进行同期发情处理 。
同期发情
利用某些外源激素人为控制并调整一群母 畜发情周期的过程，使之在预定的时间内集中 发情，以便有计划地合理组织胚胎移植所进行 的同期化处理方法，也称同期发情。
超数排卵
在母畜（供体）发情周期的某一时期，用 外源性的促性腺激素处理，从而促使其卵巢上 较正常有更多个卵泡同时发育，并且能够同时 或准同时排出多个具有受精能力的卵子，这一 技术称为超数排卵。
冲洗时必须考虑排卵时间、配种时间，根据发育阶 段确定胚胎的具体位置，才能得到较高的收集率。
胚胎的采集
胚胎采集方法： （1）胚胎手术法：适用于羊、猪和其他中小动物； （2）胚胎非手术法：适用于牛、马等大动物； （3）胚胎离体生殖道回收法：小鼠、大鼠等实验动
物。
312 排卵时间和胚胎发育速度
畜别 排卵时间
供体的超数排卵
（图片来源于网络）
供体的发情鉴定与配种
结束超数排卵处理后，密切观察供体的发情征状 ，每天早、 中、晚至少观察3次。为了获得较多发育 正常的胚胎，应根据育种的需要，使用活率高、密度 大的优质精液，输精次数增加到2~3次，两次输精间隔 为8~10h。
胚胎的采集
胚胎的采集:在超数排卵动物发情配种后一定时间 把受精卵或早期胚胎从超排配种动物的生殖道中冲洗 出来，并收集在器皿内。
胚胎移植PPT课件
胚胎移植
第一节 概念、意义和发展简史
一．概念
胚 胎移 植 （ embryo transfer ） 俗 称 “ 借 腹怀 胎”，是指于着床前自一母体（供体）收集 胚胎，移植到另一母体（受体）内完成妊娠 的过程。 在畜牧业上，供体一般为优秀母畜，而受体 一般为品质较差些的母畜。
二. 胚胎移植的意义
1．提高优秀种畜的繁殖率
2）胚胎移植是胚胎工程各项技术的基础
体外受精、显微受精、动物克隆、转基 因动物的产生等最终要通过胚胎移植技 术来实现
三.胚胎移植技术的发展简史
• 3.1早期阶段 • 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔 的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内 ，分别获得仔兔2只。 • 3.2初级阶段 • 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵 羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左 右。
• 排卵少有两个原因： ⑴ 是哺乳动物，特别是家畜的妊娠期较长， 排卵的机会很少； ⑵是主要家畜都不是多胎动物，每次排卵排 除的卵母细胞数只不过 1-2 个。单纯的胚胎 移植只能解决第一个问题，使动物重复地发 生暂时妊娠，而人为缩短动物的妊娠周期。 而第二个问题的解决途径就是超数排卵。
5．诱发肉牛（羊）怀双胎
• 可向已经配种的母畜排卵对侧的子宫角内移植一个 胚胎，使配种后未受胎的母畜妊娠，而使本来已受 胎的母畜怀双胎。这种方法既提高了供体母畜的繁 殖力，也提高了受体母畜的繁殖力。但要注意，奶 牛和种用肉牛的繁殖不能采用这种方法，因为“双 生兼雌”（free martinism）现象会造成母犊的生殖机 能异常。
2018/8/21 14
第二节 胚胎移植的生理学基础 与基本原则
一.
胚胎移植的生理学基础 二. 胚胎移植的基本原则
第一节 概念、意义和发展简史
一．概念
胚 胎移 植 （ embryo transfer ） 俗 称 “ 借 腹怀 胎”，是指于着床前自一母体（供体）收集 胚胎，移植到另一母体（受体）内完成妊娠 的过程。 在畜牧业上，供体一般为优秀母畜，而受体 一般为品质较差些的母畜。
二. 胚胎移植的意义
1．提高优秀种畜的繁殖率
2）胚胎移植是胚胎工程各项技术的基础
体外受精、显微受精、动物克隆、转基 因动物的产生等最终要通过胚胎移植技 术来实现
三.胚胎移植技术的发展简史
• 3.1早期阶段 • 1890-1900 W.Heape将安哥拉兔和荷兰兔 的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内 ，分别获得仔兔2只。 • 3.2初级阶段 • 1900-1950 主要由英美科学家在家兔、绵 羊、山羊小家畜方面研究，成功率35%左 右。
• 排卵少有两个原因： ⑴ 是哺乳动物，特别是家畜的妊娠期较长， 排卵的机会很少； ⑵是主要家畜都不是多胎动物，每次排卵排 除的卵母细胞数只不过 1-2 个。单纯的胚胎 移植只能解决第一个问题，使动物重复地发 生暂时妊娠，而人为缩短动物的妊娠周期。 而第二个问题的解决途径就是超数排卵。
5．诱发肉牛（羊）怀双胎
• 可向已经配种的母畜排卵对侧的子宫角内移植一个 胚胎，使配种后未受胎的母畜妊娠，而使本来已受 胎的母畜怀双胎。这种方法既提高了供体母畜的繁 殖力，也提高了受体母畜的繁殖力。但要注意，奶 牛和种用肉牛的繁殖不能采用这种方法，因为“双 生兼雌”（free martinism）现象会造成母犊的生殖机 能异常。
2018/8/21 14
第二节 胚胎移植的生理学基础 与基本原则
一.
胚胎移植的生理学基础 二. 胚胎移植的基本原则
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家畜胚胎移植
胚胎移植的重要意义
• • 1.从低产母畜得到高产后代。 2.加速国外引进品种的繁殖和新品种的 培育，比用现有品种进行长期杂交育种更 为有效而经济。 • 3.加速家畜改良的进度。过去由于不能 充分利用优良母畜的卵子，使得改良工作 受到很大障碍。例如，一头母牛一般只能 年产一只犊，一生中所产的犊牛很少超过8 头。利用胚胎移植技术一年内则能从一头 优秀母牛得到十几头犊牛。
胚胎移植的重要意义
• 8.胚胎移植可以满足畜牧业现代化的需 要。现代化畜牧业的最本质的特征是生产 效率大为提高。从表现形式上看，最突出 的特点是三化，即家畜良种化、饲养管理 科学化、生产方式工厂化。只有达到三化， 才能保证高度的生产效率，体现畜牧业的 现代化。
胚胎移植的基本步骤 • 胚胎移植的过程，在各种家畜 基本相同，都是要经过供体超 排处理、受体同期发情处理、 配种（输精）、收集胚胎（采 卵）和移植胚胎（移卵）五个 步骤。
影响超排效果的因素
• （3）用药时间：发情周期阶段、产后阶段 及季节不同，超排结果均有差别。在正常 周期中，用药的周期天数可参考附表2。 • （4）重复超排：一般而言，供体对前3次 超排处理的反应相似，但有些个体对重复 超排的反应不佳，可能是由于促性腺激素 产生了抗体。为了提高重复超排的效果， 一是延长激素处理的间隔，二是尽量采用 同种动物的促性腺激素，以减少抗体的产 生。
胚 胎 移 植 的 基 本 步 骤
供体的超数排卵( Superovulation of Donor )
• 在母畜发情周期的适当时期，用促性腺激 素进行处理，诱发其卵巢上有大量卵泡同 时发育并排卵，称为超数排卵，简称超排。 • 超排技术通常用于单胎家畜，如牛、绵羊 和山羊等，其目的是让优良母畜排出大量 卵子，充分发挥其繁殖潜力，因而是胚胎 移植中的一个重要环节，也是首要环节。
超排方法
• 在发情周期的一定时期，用 PMSG或FSH促进卵泡发育， 于发情开始后12-16h和20-24h 各配种（输精）一次，并于第 一次配种后静脉注射hCG或LH， 以便排出多数 10 11 12 13 15-16 每 8小 时配 一次 首配 后33.5d 置栓 20 7:00 停食 腹腔 镜检 查 手术 冲胚 PG0. 1mg
换栓 7:00 7:00 试配首 配后 7:00 FSH FSH FSH 1.5ml 1.5ml LRHA3 2.5ml 19:00 19:00 10-20 Mg 19:00 FSH FSH FSH 1.5ml 1.0ml 每8小 PG0. 时配一 1.5ml 1mg 次
影响超排效果的因素
• 影响超排的主要因素有三个方面。 • （1）家畜本身：母畜个体差异可导致超排反应不 同，这与家畜的种类、品种、年龄、体重及营养情况 都有关系。 • （2）促性腺激素：所用激素的种类、用量和注射 程序，尤其是制品中两种促性腺激素（FSH/LH ) 的 比例差异，是影响胚胎数量及质量的重要因素；用量 的大小则与超排的多少直接有关，如果用量过大，往 往会使卵泡发育过多，以致发生排卵延迟或不能排卵。 但怎样才算适宜，却是一个比较难以掌握的问题。一 般要求促卵泡发育激素和排卵激素保持适当比例，比 较公认的是PMSG:hCG或FSH:LH= 2：1（3：13:2）。同FSH相比，PMSG导致的反应较差，个体间 差异也较大（Monniaux等，1983）。
超排效果好的卵 巢黄体
超排效果不好 的卵巢黄体
受体的同期发情( Synchroestrus of recipient )
• 无论在何种家畜或任何品种，为了使胚胎移植获 得成功，必须使受体母畜与供体的发情同期化， 使二者的生殖器官处于相同的生理阶段。受体与 供体发情开始的时间越接近，移植的受胎率越高。 这是因为妊娠初期的子宫环境在不断发生变化， 而特定时间的环境只适合于发育阶段相应的胚胎 生存；也可能是因为非同期胚胎不能对受体产生 促黄体作用。为了获得最佳受胎效果，应将受体 与供体的发情时间之差控制在12h之内，如果超 过±24h（牛）或±48h（绵羊和山羊），妊娠率 即急剧下降。
胚胎移植的重要意义
• 4.增加双胎率，加速繁殖。例如，提高母 牛的双胎率，增加肉牛头数和牛肉生产， 提高绵羊双羔率和增加窝重等。 • 5.使不孕母畜获得生育能力。例如，对 于因有解剖或内分泌缺陷而不能怀孕的母 畜，可以根据具体情况专门作为供体或受 体，继续发挥其繁殖作用。 • 6.通过胚胎冷冻及远距离输送，可以大 大减少进出口家畜的费用。
胚胎移植的重要意义
• 7．促进基础理论方面的研究。例如，在 科学理论方面，它给繁殖生理学、生物化 学、遗传学、细胞学、胚胎学、免疫学、 动物育种和进化等方面，开辟了新的试验 研究途径。猪胚胎移植的主要用途，就是 在无特定病原猪群中引进无疾病的遗传物 质，促进优良育种群的繁殖。其供体应是 经后裔鉴定具有优良性状的成年母猪。
较理想的超排效果
• 正因为影响超排的因素较多，所 以很难使每头母畜都获得预期效 果，这就使得超排成为胚胎移植 中最难控制的一个环节。在实践 中只要能使一半以上的处理母畜 得到满意结果，就认为是成功的。
较理想的超排效果
• 超排数目的多少，对于受精、胚胎回
收及胚胎品质均有影响。较理想的要求 是达到10-12个，因为如果可用胚胎按 65％计算，就可以采得6～7个，平均 妊娠率按60％计算，则可获得3～4头 犊牛，在经济上比较合算。当母牛黄体 数目多达13至21个以上时，受精率及 回收率均有下降趋势，受胎率也随着下 降。
较理想的超排效果
• 在商业性胚胎移植中，当前一般水平是每 头供体牛（包括无反应的牛）平均提供4 5个好的胚胎。使用GnRH改进正常超排方 案的各种尝试，都未能提高超排的数量和 质量。 • 有时从1头供体可以采到40个以上的受精卵， 但却常常得不到1枚可供移植的胚胎。但也 有例外情况，例如Shea等（1976）从一头 排37个卵的母牛回收到34个胚胎，获得19 头犊牛。
胚胎移植的重要意义
• • 1.从低产母畜得到高产后代。 2.加速国外引进品种的繁殖和新品种的 培育，比用现有品种进行长期杂交育种更 为有效而经济。 • 3.加速家畜改良的进度。过去由于不能 充分利用优良母畜的卵子，使得改良工作 受到很大障碍。例如，一头母牛一般只能 年产一只犊，一生中所产的犊牛很少超过8 头。利用胚胎移植技术一年内则能从一头 优秀母牛得到十几头犊牛。
胚胎移植的重要意义
• 8.胚胎移植可以满足畜牧业现代化的需 要。现代化畜牧业的最本质的特征是生产 效率大为提高。从表现形式上看，最突出 的特点是三化，即家畜良种化、饲养管理 科学化、生产方式工厂化。只有达到三化， 才能保证高度的生产效率，体现畜牧业的 现代化。
胚胎移植的基本步骤 • 胚胎移植的过程，在各种家畜 基本相同，都是要经过供体超 排处理、受体同期发情处理、 配种（输精）、收集胚胎（采 卵）和移植胚胎（移卵）五个 步骤。
影响超排效果的因素
• （3）用药时间：发情周期阶段、产后阶段 及季节不同，超排结果均有差别。在正常 周期中，用药的周期天数可参考附表2。 • （4）重复超排：一般而言，供体对前3次 超排处理的反应相似，但有些个体对重复 超排的反应不佳，可能是由于促性腺激素 产生了抗体。为了提高重复超排的效果， 一是延长激素处理的间隔，二是尽量采用 同种动物的促性腺激素，以减少抗体的产 生。
胚 胎 移 植 的 基 本 步 骤
供体的超数排卵( Superovulation of Donor )
• 在母畜发情周期的适当时期，用促性腺激 素进行处理，诱发其卵巢上有大量卵泡同 时发育并排卵，称为超数排卵，简称超排。 • 超排技术通常用于单胎家畜，如牛、绵羊 和山羊等，其目的是让优良母畜排出大量 卵子，充分发挥其繁殖潜力，因而是胚胎 移植中的一个重要环节，也是首要环节。
超排方法
• 在发情周期的一定时期，用 PMSG或FSH促进卵泡发育， 于发情开始后12-16h和20-24h 各配种（输精）一次，并于第 一次配种后静脉注射hCG或LH， 以便排出多数 10 11 12 13 15-16 每 8小 时配 一次 首配 后33.5d 置栓 20 7:00 停食 腹腔 镜检 查 手术 冲胚 PG0. 1mg
换栓 7:00 7:00 试配首 配后 7:00 FSH FSH FSH 1.5ml 1.5ml LRHA3 2.5ml 19:00 19:00 10-20 Mg 19:00 FSH FSH FSH 1.5ml 1.0ml 每8小 PG0. 时配一 1.5ml 1mg 次
影响超排效果的因素
• 影响超排的主要因素有三个方面。 • （1）家畜本身：母畜个体差异可导致超排反应不 同，这与家畜的种类、品种、年龄、体重及营养情况 都有关系。 • （2）促性腺激素：所用激素的种类、用量和注射 程序，尤其是制品中两种促性腺激素（FSH/LH ) 的 比例差异，是影响胚胎数量及质量的重要因素；用量 的大小则与超排的多少直接有关，如果用量过大，往 往会使卵泡发育过多，以致发生排卵延迟或不能排卵。 但怎样才算适宜，却是一个比较难以掌握的问题。一 般要求促卵泡发育激素和排卵激素保持适当比例，比 较公认的是PMSG:hCG或FSH:LH= 2：1（3：13:2）。同FSH相比，PMSG导致的反应较差，个体间 差异也较大（Monniaux等，1983）。
超排效果好的卵 巢黄体
超排效果不好 的卵巢黄体
受体的同期发情( Synchroestrus of recipient )
• 无论在何种家畜或任何品种，为了使胚胎移植获 得成功，必须使受体母畜与供体的发情同期化， 使二者的生殖器官处于相同的生理阶段。受体与 供体发情开始的时间越接近，移植的受胎率越高。 这是因为妊娠初期的子宫环境在不断发生变化， 而特定时间的环境只适合于发育阶段相应的胚胎 生存；也可能是因为非同期胚胎不能对受体产生 促黄体作用。为了获得最佳受胎效果，应将受体 与供体的发情时间之差控制在12h之内，如果超 过±24h（牛）或±48h（绵羊和山羊），妊娠率 即急剧下降。
胚胎移植的重要意义
• 4.增加双胎率，加速繁殖。例如，提高母 牛的双胎率，增加肉牛头数和牛肉生产， 提高绵羊双羔率和增加窝重等。 • 5.使不孕母畜获得生育能力。例如，对 于因有解剖或内分泌缺陷而不能怀孕的母 畜，可以根据具体情况专门作为供体或受 体，继续发挥其繁殖作用。 • 6.通过胚胎冷冻及远距离输送，可以大 大减少进出口家畜的费用。
胚胎移植的重要意义
• 7．促进基础理论方面的研究。例如，在 科学理论方面，它给繁殖生理学、生物化 学、遗传学、细胞学、胚胎学、免疫学、 动物育种和进化等方面，开辟了新的试验 研究途径。猪胚胎移植的主要用途，就是 在无特定病原猪群中引进无疾病的遗传物 质，促进优良育种群的繁殖。其供体应是 经后裔鉴定具有优良性状的成年母猪。
较理想的超排效果
• 正因为影响超排的因素较多，所 以很难使每头母畜都获得预期效 果，这就使得超排成为胚胎移植 中最难控制的一个环节。在实践 中只要能使一半以上的处理母畜 得到满意结果，就认为是成功的。
较理想的超排效果
• 超排数目的多少，对于受精、胚胎回
收及胚胎品质均有影响。较理想的要求 是达到10-12个，因为如果可用胚胎按 65％计算，就可以采得6～7个，平均 妊娠率按60％计算，则可获得3～4头 犊牛，在经济上比较合算。当母牛黄体 数目多达13至21个以上时，受精率及 回收率均有下降趋势，受胎率也随着下 降。
较理想的超排效果
• 在商业性胚胎移植中，当前一般水平是每 头供体牛（包括无反应的牛）平均提供4 5个好的胚胎。使用GnRH改进正常超排方 案的各种尝试，都未能提高超排的数量和 质量。 • 有时从1头供体可以采到40个以上的受精卵， 但却常常得不到1枚可供移植的胚胎。但也 有例外情况，例如Shea等（1976）从一头 排37个卵的母牛回收到34个胚胎，获得19 头犊牛。