胚胎移植操作规程
胚胎移植知识点总结
胚胎移植知识点总结一、胚胎移植的技术原理1. 受精卵的获取:受精卵可以通过体外受精(IVF)或者一系列生殖技术来获取。
2. 胚胎培育:胚胎会在实验室中进行培育,通常在受精卵的第三或者第五天移植到女性子宫内。
3. 移植过程:医生会使用一根细长的管子将受精卵或者早期胚胎转移到女性子宫内。
二、胚胎移植的适用人群1. 男性不育:胚胎移植可以帮助那些因为男性不育问题无法自然怀孕的夫妇。
2. 女性不孕:女性因为多种原因(如输卵管堵塞、卵巢功能障碍)导致不孕的情况,也可以通过胚胎移植来解决。
3. 夫妇双方都有生育问题:在夫妇双方都存在生育问题的情况下,胚胎移植是一种有效的辅助生殖技术。
三、胚胎移植的操作步骤1. 胚胎培育:受精卵会在实验室中进行培育,医生会观察胚胎的发育情况,并选择最具发育潜力的胚胎进行移植。
2. 宫腔检查:在进行胚胎移植之前,医生会对女性子宫内膜进行检查,确保子宫内膜的状态适合胚胎的着床。
3. 移植过程:医生会在女性子宫内插入一根细长的管子,将受精卵或者早期胚胎转移到子宫内。
四、胚胎移植的成功率1. 年龄因素:女性年龄是影响胚胎移植成功率的关键因素,年轻女性的成功率更高。
2. 胚胎发育情况:胚胎的发育情况也会影响成功率,医生会选择最具发育潜力的胚胎进行移植。
3. 子宫内膜状态:子宫内膜的状态也会影响成功率,如果子宫内膜较厚、松软且富有营养,胚胎着床的成功率会更高。
五、胚胎移植的风险和注意事项1. 多胎妊娠:胚胎移植可能导致多胎妊娠的风险,医生在移植时通常会限制移植胚胎的数量,以减少多胎妊娠的风险。
2. 流产风险:胚胎移植后仍然存在一定的流产风险,尤其是对于年龄较大的女性来说。
3. 心理和经济压力:胚胎移植可能需要多次尝试才能成功,这会给夫妇带来心理和经济上的压力。
总的来说,胚胎移植是一种帮助那些因为生理原因无法自然怀孕的夫妇实现生育愿望的重要技术手段。
虽然胚胎移植的成功率有一定的限制,但随着医疗技术的不断进步和完善,胚胎移植的成功率也在不断提高。
胚胎移植的技术流程
胚胎移植的技术流程胚胎移植是一种辅助生殖技术,旨在帮助那些无法自然受孕的夫妇实现生育梦想。
它涉及将受精卵或胚胎移植到女性子宫内,以促进妊娠和分娩。
下面将详细介绍胚胎移植的技术流程。
1. 体外受精(IVF):胚胎移植的第一步是进行体外受精。
这是一种在实验室中将精子和卵子结合的过程。
女性首先接受促排卵药物,以增加卵子的数量。
然后,经过超声引导下,医生使用细针将卵子从女性的卵巢中提取出来。
此后,收集来的卵子与精子一起放置在培养皿中,以期望受精发生。
2. 胚胎培养:受精卵将在培养皿中的特定条件下培养,通常需要2-5天的时间。
在此期间,胚胎将逐渐发育成多个细胞的胚胎,并通过细胞分裂形成一个囊胚。
3. 选择健康胚胎:在培养过程中,医生会评估胚胎的健康状况和发育情况。
通常情况下,医生会选择最健康、发育最好的胚胎进行移植,以增加妊娠成功的机会。
4. 子宫内膜准备:在胚胎移植前,女性需要进行子宫内膜准备。
这通常包括服用雌激素和孕酮药物,以促进子宫内膜的增厚和准备。
这种准备过程可能需要2-4周的时间。
5. 胚胎移植:一旦子宫内膜准备就绪,胚胎移植将进行。
这通常是一个简单的过程,在没有麻醉的情况下完成。
医生使用细管将胚胎小心地放入女性的子宫内。
根据需要,可以移植一个或多个胚胎。
6. 休息和观察:胚胎移植后,女性需要休息一段时间,并接受观察。
医生可能会建议女性避免剧烈运动和紧张情绪,以增加妊娠成功的机会。
7. 孕激素支持:在胚胎移植后的几周内,女性需要继续服用孕酮等孕激素药物,以支持子宫内膜和胚胎的健康发展。
8. 妊娠检测:大约两周后,女性可以进行血液或尿液检测,以确定是否成功妊娠。
如果结果呈阳性,那么胚胎移植已经成功。
需要注意的是,胚胎移植过程中可能会发生一些并发症,如子宫内膜感染、多胎妊娠等。
因此,在进行胚胎移植前,医生会对夫妇的身体状况进行全面评估,并提供适当的建议和指导。
总结起来,胚胎移植是一项复杂而精细的技术,需要医生和患者的共同努力。
胚胎移植
胚胎移植
1.准备移植滴:至少在移植前半小时准备。
用平衡好的移植液在直径为6cm的培养皿内做
两个体积分别约为0.3和0.5ml的滴,至于培养箱内待用。
2.挑选形态评价级别高的胚胎在0.3ml滴内洗2-3次移入0.5ml移植滴内。
在培养皿盖上
贴上写有患者夫妇双方姓名的标签。
将移植滴及剩余的胚胎放回培养箱内等待移植和冷冻。
3.双人(移植护士及实验室人员)核对患者夫妇双方姓名无误。
核对移植胚胎数(解冻移
植应核对解冻胚胎数目)。
4.胚胎的装载:连接移植管和注射器针管,在体式显微镜下将胚胎吸入移植管,并确认胚
胎在移植管中间的一段培养液中。
胚胎的装载如图所示。
图胚胎装载入移植管
5.配合手术大夫将胚胎移入患者宫腔内。
在体式显微镜下一边观察一边反复吹吸移植管,
检查有无带出的胚胎,若有则再次移植并检查。
6.移植胚胎数目:
a.严格按照卫生部规定:35岁以下,第一次移植,最多移植2枚胚胎。
年满35岁或非第一次移植最多移植3枚胚胎。
b.对于因子宫发育异常或其它医学原因不宜多胎妊娠的患者,请大夫在病历内注明,
移植2枚胚胎或单囊胚移植。
绵羊胚胎移植技术规程
绵羊胚胎移植技术规程1 范围本标准规定了供体羊的选择、超数排卵及人工授精、手术冲胚技术及胚胎质量鉴定、受体羊的选择及饲养管理、胚胎内窥镜移植。
本标准适用于京、津、冀地区绵羊的胚胎生产和鲜胚移植。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
NY/T 816-2004 肉羊饲养标准NY 5030 无公害食品畜禽饲养兽药使用准则DB 12/ T137—2012肉用绵羊饲养管理技术规范3 术语和定义下列术语与定义适用于本标准。
3.1 胚胎移植(Embryo Transfer)将良种母羊的早期胚胎从母羊的子宫或输卵管取出,移植到另一只生理状态相同的母羊的子宫或输卵管内,使之发育成个体。
3.2 供体羊(Donor Sheep)指提供或生产胚胎的母羊。
3.3 受体羊(Receptor Sheep)接受胚胎的母羊。
3.4 捡胚(Embryo collection)通过实体显微镜,将胚胎从收集到的子宫回收液中捡出。
3.5 腹腔内窥镜输精(Laparoscopic insemination)借助腹腔内窥镜将精液输入发情母羊的子宫内。
4技术要素4.1 药物、器械和实验室要求4.1.1 试剂与药瓶所用的试剂、药品见附录A4.1.2 设备、器械和环境所需的设备与耗材见附录B。
胚胎实验室:为胚胎在体外操作专用实验室,应保持室内无菌、无尘,室内温度保持在20-25℃,避免阳光直射。
手术室:主要进行胚胎收集,地面要防滑,清洁、消毒,在与胚胎实验室隔墙上安装传递窗,手术室室内温度在15℃以上。
4.2 同期发情和超数排卵4.2.1 供体羊选择4.2.1.1 供体羊品种优良、生产性能好;4.2.1.2 遗传稳定、谱系清楚;4.2.1.3 体质健壮。
繁殖机能正常,无遗传和传染性疾病。
年龄在1岁至4岁为宜;4.2.1.4 具有畜牧部门颁发的种畜禽鉴定合格证书。
简述胚胎移植基本操作流程
简述胚胎移植基本操作流程胚胎移植是一种常见的生殖医学技术,被广泛应用于辅助生殖技术中。
它是将胚胎从一个个体移植到另一个个体的过程,目的是实现胚胎的着床和发育,从而达到妊娠和生育的目的。
基本的胚胎移植操作流程包括胚胎的收集、评估、准备、移植和后续观察等环节。
胚胎的收集是胚胎移植的第一步。
胚胎可以通过体外受精(IVF)或其他辅助生殖技术获得。
在IVF过程中,女性接受超排卵治疗,促进卵巢发育并采集成熟的卵子。
卵子和精子在体外受精后,形成受精卵。
受精卵经过培养,发育成为多个细胞的团块,称为胚胎。
收集胚胎通常在受精后的2-6天进行。
接下来,对收集到的胚胎进行评估。
胚胎评估的目的是选择最有发育潜力的胚胎进行移植,提高移植成功率。
胚胎评估可以通过外观观察和胚胎质量评分等方式进行。
外观观察主要是观察胚胎的细胞数目、细胞均匀性、细胞碎片程度等指标。
胚胎质量评分则是根据一定的评分系统,对胚胎的发育程度、细胞成熟度、细胞形态等进行评估。
准备工作是胚胎移植的关键步骤之一。
首先,需要为受体准备良好的子宫内膜环境。
这通常通过给予激素治疗来实现,以促进子宫内膜的增厚和充血,为胚胎的着床提供良好的条件。
其次,胚胎的准备也很重要。
胚胎在移植前需要经过一定的处理,如培养液的清洗、液体的更换等,以保证胚胎的稳定状态。
胚胎移植是胚胎移植过程中的核心步骤。
在移植过程中,医生会使用显微镜和专用的显微注射器等工具,将胚胎转移到受体的子宫腔内。
通常情况下,胚胎移植是通过阴道途径进行的,无需开刀。
医生会将胚胎放置在一根细长的导管中,然后通过导管将胚胎缓慢地注入子宫内膜。
移植完成后,受体需要休息一段时间,以减少身体活动对胚胎着床的影响。
进行后续观察是胚胎移植的最后一步。
这是为了监测胚胎的着床情况和发育情况,判断移植是否成功。
通常,在移植后的10-14天,可以进行血液或尿液中的hCG(人绒毛膜促性腺激素)检测,以确定是否妊娠。
如果妊娠成功,将进行更进一步的孕期监测和管理。
胚胎移植操作规程
1 1 范围本标准规定了绵羊的胚胎生产和移植的供体羊的选择和饲养管理、供体羊的超数排卵及人工授精、手术冲卵技术及胚胎质量鉴定、冻胚的解冻、受体羊的选择及饲养管理、胚胎手术移植技术和妊娠受体羊的饲养管理技术。
本标准适用于秦皇岛地区绵羊的胚胎生产和移植。
2 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
DB 1303/T 098-2000 羊的人工授精技术操作规程3 3 供体羊的选择和饲养管理3.1 3.1 供体羊的选择a)a)体羊品种优良、生产性能好;b)b)传性稳定、谱系清楚;c)c)体质健壮。
繁殖机能正常,无遗传和传染性疾病。
年龄在2岁至7岁为宜;d)d)具有畜牧部门颁发的种畜禽鉴定合格证书。
3.2 3.2 供体羊的饲养管理3.2.1 3.2.1 保持饲养环境稳定,饲养环境卫生、干燥、棚舍温度适宜。
避免应激反应。
3.2.2 3.2.2 制定合理的供体羊日粮配方,保证正常的营养平衡。
3.2.3 3.2.3 满足供体羊清洁饮水的需要。
4 4 供体羊的超数排卵及人工授精4.1 4.1 超数排卵4.1.1 4.1.1 超数排卵的季节和发情周期:绵羊最适超数排卵季节为9月下旬至11月上旬。
绵羊的发情周期在15d—17.5d。
供体母羊在超数排卵前需观察1—2个完整的发情周期。
4.1.2 4.1.2 用于超数排卵的激素选择FSH—P(垂体促滤泡素) LH—P(垂体促黄体生成素) ICI80996(氯前列烯醇)4.1.3 4.1.3 激素剂量(注射总量/只)FSH—P剂量(肌注):120IU—160IULH—P剂量:根据FSH的注射剂量,肌注100—120IU。
ICI80996:肌注0.08mg/次,注射两次/d。
冻胚移植流程
冻胚移植流程冻胚移植是一种辅助生殖技术,也是一种常见的生育治疗方法。
它适用于因不孕不育而需要辅助生殖的夫妇,也适用于有遗传病史的夫妇。
冻胚移植是指将在体外受精后剩余的健康胚胎冷冻保存,待适当时机再将其移植到女性子宫内,以达到妊娠的目的。
下面将为大家介绍冻胚移植的具体流程。
首先,冻胚移植需要进行胚胎冷冻保存。
这一步通常在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中完成。
在女性的卵巢采卵后,医生会将采集到的卵子与男性的精子进行体外受精,形成胚胎。
通常情况下,不是所有的胚胎都会在第一次移植中使用,因此剩余的健康胚胎会被冷冻保存起来,以备后续移植使用。
其次,冻胚移植需要进行子宫内膜准备。
在冻胚移植的周期中,女性需要进行一系列的药物治疗,以促进子宫内膜的生长和准备。
这些药物包括促排卵药、黄体酮和雌激素等。
通过这些药物的使用,可以使子宫内膜在移植时达到最佳状态,有利于胚胎的着床和发育。
接着,进行冻胚移植手术。
一旦子宫内膜准备就绪,医生会选择一个合适的时间点进行冻胚移植手术。
这个手术通常是一个微创手术,无需开腹,通过阴道将冷冻保存的胚胎移植到子宫内。
整个手术过程通常只需要几分钟,患者无需住院,可以在当天出院。
最后,进行移植后的辅助治疗。
冻胚移植手术完成后,女性需要进行一段时间的休息和恢复。
在这段时间内,医生会根据患者的具体情况,进行相应的辅助治疗,以提高移植胚胎的着床率和妊娠率。
这些辅助治疗可能包括口服药物、注射药物或其他辅助生殖技术。
总的来说,冻胚移植是一种安全、有效的生育治疗方法。
通过以上介绍的流程,相信大家对冻胚移植有了更清晰的了解。
希望能够帮助到有需要的夫妇,实现他们的生育愿望。
试管婴儿移植流程及注意事项
试管婴儿移植流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!试管婴儿移植是一种辅助生殖技术,用于帮助那些自然受孕困难的夫妇实现生育梦想。
超长方案移植冻胚流程
超长方案移植冻胚流程1. 简介超长方案移植冻胚流程是一种辅助生殖技术,用于辅助不孕不育患者实现生育愿望。
该流程包括取出冷冻的胚胎、解冻、移植并进行后续的监测和支持。
2. 流程步骤2.1 取出冷冻的胚胎首先,从胚胎冷冻库中取出需要移植的冻胚。
这些冻胚是之前通过体外受精技术获得,并在适当的时机进行了冷冻保存。
2.2 解冻冷冻胚胎接下来,冷冻的胚胎需要进行解冻。
解冻的过程应该根据特定的冷冻方法进行,以确保胚胎的存活率和质量。
2.3 移植冷冻胚胎一旦冷冻胚胎解冻完毕,就可以进行移植手术。
移植手术主要包括以下步骤:•患者准备:患者需要接受适当的准备,包括个人卫生和身体状态的调整。
•麻醉:根据具体情况,可以选择全身麻醉或局部麻醉。
•操作:通过一根软管或导管将冷冻胚胎植入患者的子宫内膜。
2.4 监测和支持移植后,患者需要接受进一步的监测和支持。
这包括定期检查激素水平、进行超声检查等,以确保胚胎成功着床和发育。
3. 注意事项在进行超长方案移植冻胚流程时,需要注意以下事项:•患者的身体状况:移植前应确保患者身体状况良好,没有严重的疾病或感染。
•胚胎质量:选择高质量的冻胚进行移植,以提高成功率。
•解冻技术:解冻冷冻胚胎时,应使用适当的技术和方法,以确保胚胎的存活和质量。
•术后护理:移植后,患者需要遵循医生的建议,进行定期的检查和护理,以促进胚胎的着床和发育。
•心理支持:由于辅助生殖技术的复杂性和不确定性,患者在整个过程中可能会面临心理压力。
提供必要的心理支持和咨询是非常重要的。
4. 优缺点分析4.1 优点•提高了不孕不育患者的生育成功率。
•可以利用之前冷冻保存的胚胎,避免每次都需要进行体外受精过程。
•对一些特殊患者,如接受化疗或放疗的癌症患者,提供了获得后代的机会。
4.2 缺点•成功率不高:尽管移植冷冻胚胎是一项成熟的技术,但仍然存在着成功率不高的问题。
•需要时间:整个流程需要一定的时间,而且可能需要多次尝试才能成功。
胚胎移植项目实施方案
胚胎移植项目实施方案项目背景随着现代医学技术的不断进步和普及,生育障碍已经成为影响女性和家庭生活质量的较为普遍的问题。
在治疗生育障碍的过程中,胚胎移植技术已经成为较为成熟和有效的一种手段。
因此,如何提升胚胎移植的治疗效果和操作质量成为了当前需要探索的问题。
项目目标本项目的目标是建立一套科学、规范的胚胎移植项目实施方案,以提高胚胎移植技术的治疗效果和操作质量。
项目内容1. 胚胎移植前的准备工作在胚胎移植前,需要对患者的生殖系统进行检查和评估,包括女性子宫内膜的厚度和质量,确定胚胎移植的最佳时间等。
同时,还需要对胚胎进行评估,选择质量合适的胚胎进行移植操作。
2. 胚胎移植的操作流程胚胎移植的操作流程包括样本采集、准备工作、手术操作等环节。
在样本采集过程中,需要注意采集样本的数量和质量;在准备工作中,需要注意对器具和操作环境的严格消毒和清洁等工作;在手术操作中,需要注意手术操作的规范和标准化,确保手术过程的安全和有效。
3. 胚胎移植后的注意事项胚胎移植后,需要对患者进行必要的观察和护理。
需要对患者的情况进行详细记录和报告,并进行必要的医疗干预。
项目成果本项目的成果包括一份完整的胚胎移植项目实施方案,涵盖胚胎移植前、中、后的所有操作流程和注意事项。
同时,还建立了一套完整的质量管理制度,对医院胚胎移植技术的操作质量和治疗效果进行监控和评估。
项目预期效果本项目的预期效果包括:•提高胚胎移植技术的治疗效果和操作质量;•降低胚胎移植操作的风险和不良反应;•建立起质量控制机制,规范医疗操作流程;•提升医院的服务水平和社会口碑。
项目总结胚胎移植是一项比较复杂的医疗技术,需要医生具备丰富的临床经验和科学的操作理念。
本项目通过建立一套科学、规范的胚胎移植项目实施方案,提高了医生的操作质量和治疗效果,同时为医院的整体服务质量提供了保障。
简述胚胎移植的技术操作程序
简述胚胎移植的技术操作程序
胚胎移植的技术操作程序主要包括以下步骤:
1. 术前准备:在移植前,患者需要进行全面的身体检查,确保没有影响移植的疾病或因素。
医生也会向患者详细介绍移植的步骤和注意事项,确保患者对移植过程有充分的了解。
2. 激素准备:在移植前,医生会根据患者的具体情况,制定相应的激素准备方案,以确保患者的子宫环境适合胚胎移植。
3. 胚胎培养:在移植前,胚胎需要在实验室中培养一段时间,以确保胚胎的质量和数量达到移植的标准。
4. 胚胎选择:医生会根据胚胎的质量、数量和发育情况,选择最适合移植的胚胎。
5. 移植过程:在移植时,医生会将移植管插入患者的子宫内,将胚胎注入子宫内。
整个过程需要在无菌条件下进行,以确保胚胎的存活和患者的健康。
6. 移植后护理:在移植后,患者需要按照医生的建议进行适当的休息和护理,以确保胚胎顺利着床和发育。
总之,胚胎移植的技术操作程序需要严格遵守无菌操作、科学管理、依法合规的原则,确保胚胎移植的安全和有效性。
胚胎移植实验流程
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在进行胚胎移植实验之前,有大量的准备工作需要完成。
冻胚移植的流程和步骤
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试管人工移植流程
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试管移植实验室操作流程
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冻融胚胎移植流程
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胚胎移植技术的使用教程
胚胎移植技术的使用教程胚胎移植技术(Embryo transfer technique)作为生殖医学领域的重要一环,已经在助孕、遗传疾病筛查、动物繁育等诸多领域发挥着重要作用。
本文将对胚胎移植技术的使用教程进行探讨,帮助读者进一步了解这一技术的原理、步骤和应用。
胚胎移植技术是指将经过人工授精或体外受精的胚胎嵌入到母体或接收者体内,使其继续发育成为一个健康的个体。
使用胚胎移植技术时,首先需要从供体中获得受精卵或早期胚胎,并对其进行评估,以确定其适用性。
然后,在一定的条件下,将胚胎通过细管等装置嵌入到接收者体内,使其在接收者体内继续发育。
胚胎移植技术一般分为人类胚胎移植和动物胚胎移植两种。
在人类胚胎移植中,常见的应用包括试管婴儿、同性恋伴侣生育等。
在动物胚胎移植中,常见的应用包括种马配种、动物繁育等。
这两种应用场景在操作步骤上存在一定的差异,下面将分别进行介绍。
在人类胚胎移植中,首先需要获得受精卵或早期胚胎。
这通常需要通过体外受精(IVF)等技术手段,将男性精子和女性卵子细胞在体外结合,形成早期胚胎。
接下来的步骤包括选择发育良好的胚胎,准备接收者母体,并进行胚胎移植。
胚胎移植时,可以采用外科手术的方式或无创途径,将胚胎嵌入到子宫内膜内。
最后,对接收者进行观察和护理,帮助胚胎在母体内良好发育。
动物胚胎移植和人类胚胎移植类似,但在具体操作上存在一些差异。
首先,动物胚胎移植中,供体和接收者动物可以是不同物种。
这意味着需要在操作过程中更加注意胚胎的适应性和异种免疫等问题。
其次,在动物胚胎移植中,常采用手术的方式将胚胎嵌入到接收者子宫内。
手术时,需要注意操作的细微和快速,以提高胚胎移植的成功率。
胚胎移植技术在助孕、遗传疾病筛查等方面有着广泛的应用。
在助孕中,胚胎移植可以帮助不能自然受孕的夫妇实现生育愿望。
在遗传疾病筛查中,胚胎移植可以通过对胚胎基因的筛查,避免将遗传疾病传递给下一代。
此外,在动物繁育中,胚胎移植可以快速提高繁育效率,保持优良基因。
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1 1 范围本标准规定了绵羊的胚胎生产和移植的供体羊的选择和饲养管理、供体羊的超数排卵及人工授精、手术冲卵技术及胚胎质量鉴定、冻胚的解冻、受体羊的选择及饲养管理、胚胎手术移植技术和妊娠受体羊的饲养管理技术。
本标准适用于秦皇岛地区绵羊的胚胎生产和移植。
2 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
DB 1303/T 098-2000 羊的人工授精技术操作规程3 3 供体羊的选择和饲养管理3.1 3.1 供体羊的选择a)a)体羊品种优良、生产性能好;b)b)传性稳定、谱系清楚;c)c)体质健壮。
繁殖机能正常,无遗传和传染性疾病。
年龄在2岁至7岁为宜;d)d)具有畜牧部门颁发的种畜禽鉴定合格证书。
3.2 3.2 供体羊的饲养管理3.2.1 3.2.1 保持饲养环境稳定,饲养环境卫生、干燥、棚舍温度适宜。
避免应激反应。
3.2.2 3.2.2 制定合理的供体羊日粮配方,保证正常的营养平衡。
3.2.3 3.2.3 满足供体羊清洁饮水的需要。
4 4 供体羊的超数排卵及人工授精4.1 4.1 超数排卵4.1.1 4.1.1 超数排卵的季节和发情周期:绵羊最适超数排卵季节为9月下旬至11月上旬。
绵羊的发情周期在15d—17.5d。
供体母羊在超数排卵前需观察1—2个完整的发情周期。
4.1.2 4.1.2 用于超数排卵的激素选择FSH—P(垂体促滤泡素) LH—P(垂体促黄体生成素) ICI80996(氯前列烯醇)4.1.3 4.1.3 激素剂量(注射总量/只)FSH—P剂量(肌注):120IU—160IULH—P剂量:根据FSH的注射剂量,肌注100—120IU。
ICI80996:肌注0.08mg/次,注射两次/d。
4.1.4 4.1.4 超数排卵方法FSH—P 3天注射法以母羊发情之日作为发情周期的0d,在母羊发情周期的第13d或13.5d(周期大于17.5d的羊在第13.5d)开始,每天早:(6:00—7:00)和晚(18:00—19:00)各注射1次FSH,连续3天,递减注射。
FSH、LH用生理盐水稀释。
在第5、6次注射FSH—P时,同时肌肉注射ICI80996。
确定供体羊发情后立即注射LH。
如果FSH—P未注射完供体羊已发情,停止注射FSH—P,立即注射LH。
4.1.5 4.1.5 供体羊发情鉴定在第6次注射FSH—P时即对超排供体羊观察发情。
观察时间:早(6:00-7:00),晚(18:00-19:00)。
观察方法:试情公羊扎好试情布,放入母羊群中试情,每30-40只供体羊需1只试情公羊,以母羊站立接受试情公羊爬跨作为发情的标准。
4.2 4.2 人工授精4.2.1 4.2.1 种公羊的选择标准品种优良,谱系清楚,遗传性稳定、生产性能良好,健康无病。
精液品质符合DB 1303/T 098-2000的规定。
4.2.2 4.2.2 人工授精操作要求a)采精前对种公羊外生殖器清洗消毒。
采精、精液稀释、输精用的器皿严格灭菌、消毒。
b)稀释后的精液温度要保持在25℃-30℃的环境中。
c)输精前,母羊外阴部必须经过清洗消毒。
d)输入的鲜精授精精液活力在0.7以上,每次输精有效精子数不少于30×106。
输精次数不少于2次。
e)选择合适的输精枪和准确的输精部位。
4.2.3 4.2.3 人工授精的最适合时间确认发情时立即进行第一次输精,之后每间隔12h输精1次,一般输2-3次。
5 5 手术冲卵技术及胚胎质量鉴定5.1 5.1 手术冲卵5.1.1 5.1.1 所需主要器材手术台 1 ;剃须刀 1 ;创布 2-3块;止血纱布若干;剪毛剪 1;手术刀柄 1;手术剪 1;止血钳 3-4;巾帕钳 4;持针器 1;肠钳(带乳胶管) 1;手术刀片若干;缝合线;缝合针;镊子 2;φ120mm表面皿若干;φ180mm表面皿若干;6#-8#头皮针(尖端磨钝)若干;18#-20#头皮针(尖端磨钝)若干;φ10mm透明硅胶管若干;10ml注射器 2-3;20ml注射器 2-3;φ8mm玻璃管若干;φ35mm培养器若干。
5.1.2 5.1.2 冲卵所需药品酒精、碘酊、新洁尔灭、0.9%生理盐水、青霉素、链霉素、液体石蜡、肝素5.1.3 5.1.3 冲卵液(保存液)的准备购置杜氏磷酸缓冲液(PBS),PBS液中加0.4%的牛血清白蛋白即为保存液,可用于胚胎的体外操作和保存,也可直接作为冲卵液使用于手术法冲胚和移植。
5.1.4 5.1.4 手术冲卵技术步骤按附录A做好采胚记录5.1.4.1 5.1.4.1 制作喇叭口导卵管a)将φ8mm的玻璃管断成10cm-12cm长度,洗净、烘干。
b)将玻璃管中段放在酒精灯上灼烧,拉长为10cm,直径约3mm-4mm即可。
c)冷却后将中间拉细部分截断,将截下部分的一端(φ3mm)在酒精灯上烧结圆滑,但不能变形。
d)在离圆滑端3cm处,用酒精灯缓慢加热,使之弯曲成1200即可。
5.1.4.2 5.1.4.2 手术冲卵法5.1.4.2.1 5.1.4.2.1 手术前24h停止饲喂草料,只满足饮水。
5.1.4.2.2 5.1.4.2.2 保定、麻醉:将母羊仰卧保定,局部麻醉。
5.1.4.2.3 5.1.4.2.3 手术部位:在离乳房前端约2cm处,腹中线的两侧均可。
5.1.4.2.4 5.1.4.2.4 术部剪毛:剪毛范围约20cm×20cm。
用肥皂水清洗手术部,同时用剃须刀剃净毛茬,再用清水洗净。
5.1.4.2.5 5.1.4.2.5 术部消毒:首先用0.1%的新洁尔灭清洗手术部位;然后用5%碘酊棉球对手术部位由中心向外扩散消毒、凉干;最后用75%酒精棉球对手术部位由里到外消毒、脱碘、凉干。
5.1.4.2.6 5.1.4.2.6 避开血管,用手术刀于术部纵向切开6cm-8cm长的刀口,将皮下结缔组织分离,暴露肌膜。
5.1.4.2.7 5.1.4.2.7 用手术刀将肌膜轻轻切开,暴露肌肉层,再用刀柄后端将肌肉层和腹膜钝性剥离开。
5.1.4.2.8 5.1.4.2.8 在骨盆腔,膀胱周围触摸子宫角并将卵巢、子宫引出切口外,分别记录两侧卵巢黄体和滤泡数。
5.1.4.2.9 5.1.4.2.9 输卵管冲胚在超排母羊发情后66h-72h从输卵管采集2-8细胞胚胎,进行鲜胚移植。
方法:用6#-8#头皮针从子宫输卵管接合部的子宫端导入到输卵管峡部,将喇叭口导卵管从输卵管喇叭口插入3cm-4cm,导卵管远端与¢120mm表面皿相接,助手事先用10ml注射器抽取5ml-8ml冲卵液,与头皮针相接,把冲卵液缓缓推入输卵管,胚胎即随同冲卵液自输卵管回收到表面皿中,另一侧输卵管冲胚操作方法同上。
5.1.4.2.10 5.1.4.2.10 冲胚完毕后,用一定浓度的肝素溶液喷洗内脏,洗掉凝血块。
用25℃-30℃的生理盐水将内脏冲洗干净;将5ml-10ml(25℃-30℃)灭菌液体石蜡注入腹腔,以防粘连。
5.1.4.2.11 5.1.4.2.11 供体母羊创口采用三层缝合法。
即腹膜、肌肉连续缝合;皮肤结节缝合,针脚间距1cm。
在肌肉与皮肤间撒适量青、链霉素粉,以防创口感染。
5.1.4.2.12 5.1.4.2.12 手术后母羊需观察24小时后才能跟群放牧。
手术器械在使用前用0.5%新洁尔灭液浸泡0.5h;术者分工要明确,严格按外科手术规则进行自身消毒,不得接触其他无关的物品;整个采胚过程的操作要迅速、准确、仔细,避免生殖器官暴露过久,切记频繁、重复触摸和拉扯生殖器官,以防脏器粘连。
5.2 5.2 胚胎质量鉴定5.2.1 5.2.1 检卵把盛有冲卵回收液的表面皿放在立体显微镜下,仔细观察,不可遗漏,将检出的胚胎放入盛有保存液的¢35mm培养皿中。
超排母羊发情后66h-72h用输卵管冲胚法采集2细胞、4细胞、8细胞及少数16细胞胚胎。
上述发育期按国际胚胎移植协会规定的数码均表示为2。
5.2.2 5.2.2 胚胎的质量鉴定——形态学方法处于发育期2细胞的胚胎,卵裂球轮廓清楚,球体饱满,透明度适中,数目吻合即可定为1级;1/3卵裂球死亡可定为2级;1/2卵裂球死亡可定为3级;其余定为4级。
1、2、3级胚胎均可用于鲜胚移植。
6 6 冻胚的解冻进行冻胚移植时,购置的冷冻胚胎在移植前需进行解冻操作。
6.1 6.1 胚胎解冻所需的仪器、器材立体显微镜、温度计、解冻用水杯、0.25ml塑料细管、吸卵管、细管推杆、装管器、¢100mm塑料培养皿、0.22μm针头式细菌滤器。
6.2 6.2 胚胎解冻所需溶液保存液:含0.4%牛血清白蛋白的PBS液。
解冻液:1M蔗糖/保存液。
6.3 6.3 胚胎解冻方法胚胎解冻方法应根据胚胎冷冻方法而定,一般采取的方法是1.5M乙二醇/保存液(含1M蔗糖)冷冻胚胎的解冻:胚胎→32℃水浴10秒→擦干细管→用70%酒精棉球擦拭细管,晾干→剪去细管塞→移植(胚胎解冻后2-3分钟内移入受体)。
6.4 6.4 胚胎发育期与受体移植时间的对应关系胚胎发育期受体移植时间(发情之日为0h)紧缩桑椹胚(M) 5.5±0.5d早期囊胚(EB) 5.5±0.5d囊胚(B) 6.0±0.5d扩张囊胚(EXB) 6.5±0.5d7 7 受体羊的选择及饲养管理要求7.1 7.1 受体羊的选择a)情周期,无繁殖机能疾病,经检疫无传染疾病,健康、膘情在七成以上。
b)年龄在1.5岁-6岁之间。
7.2 7.2 受体羊的饲养要求受体羊单独组群加强饲养,保持环境相对稳定,避免应激反应。
8 8 胚胎手术移植技术8.1 8.1 受体羊的同期化发情处理8.1.1 8.1.1 同期化发情处理方法药品:ICI80996(氯前列烯醇),0.2mg/2ml/支剂量:0.07mg/只/次方法:二次注射法(肌注)第一次注射在任意一天;第二次注射在第一次注射后7d,第二次注射后24-96h观察发情。
受体羊发情之日为0d,按胚龄要求进行移植。
8.1.2 8.1.2 2细胞——扩张囊胚的胚胎,鲜胚移植时供、受体羊发情的同期化要求8.1.2.1 8.1.2.1 供、受体羊均采用试情公羊确认发情。
观察时间:每天早、晚各一次。
8.1.2.2 8.1.2.2 把供体羊发情之日定为0d,与供体羊同时发情的受体羊定为0h受体。
比供体羊提前12h发情的定为+12h受体,提前24h的定为+24h受体。
比供体羊推迟12h发情的受体定为-12h 受体,推迟24h的定为-24h受体。