单抗与多抗的区别及比较
单克隆抗体和多克隆抗体的区别
单克隆抗体和多克隆抗体的区别一、单克隆抗体（一）单克隆抗体单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。
通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤（hybridoma）抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B 细胞杂交瘤。
1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上，创建立杂交瘤技术，他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠B细胞融合，成为杂交细胞系，既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性，又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。
将这种杂交瘤作单个细胞培养，可形成单细胞系，即单克隆。
利用培养或小鼠腹腔接种的方法，便能得到大量的、高浓度的、非常均一的抗体，其结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的，而且在培养过程中，只要没有变异，不同时间所分泌的抗体都能保持同样的结构与机能。
这种单克隆抗体是用其他方法所不能得到的。
（二）优势和局限性1．单克隆抗体的优点(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
(2)可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。
(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体，所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法，如IRMA和ELISA等。
(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
2．单克隆抗体的局限性(1)单克隆抗体固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。
由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应，所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。
(3)制备技术复杂，而且费时费工，所以单克隆抗体的价格也较高。
（三）应用1．检验医学诊断试剂作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。
单抗的临床应用
单抗的临床应用临床诊断自单抗问世以来，由于其特异性强、重复性好、操作简便易行，所以在大部分常规血清学检查中，取代了多克隆抗体而广泛应用于免疫学诊断。
体内微量成分和药物的测定放射免疫测定和酶标免疫测定法已被广泛应用，作为体内激素或药物等微量成分的测定。
用单抗取代传统的多抗，使感度、精度和重复性大为提高，例如转铁蛋白、肾素、甲状腺素(T 4)、三碘甲状腺素(T3)、干扰素、补体成分C3、cAMP、cGMP、生长素、绒毛膜促性腺激素(HCG)、促性腺激素(FSH)、胰岛素、IgG、IgE、地高辛、氨茶碱、苯巴比妥、氨基糖甙类抗生素、维生素B12等单抗。
癌症诊断甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CFA)在正常胎儿血清中大量存在，成人血中含量显著减少，而癌症患者则显著增加，被认为是癌症的标志。
甲胎蛋白(AFP)是用于肝癌和畸胎瘤诊断的癌标志抗原，分子中约含4%糖链，根据糖链的差别已能区别出来源于肝癌的AFP和来源于肝硬化的AFP，从而可以期待能细致区分不同AFP的糖链结构的单抗。
蛇毒鉴别毒蛇种类很多，其毒素的性质各不相同，应用相应的蛇毒单抗，便可迅速做出正确的诊断，从而采取相应的治疗。
传染病诊断流感、狂犬病、麻疹、疱疹、肝炎、流行性出血热等致病病毒，疟疾、血吸虫、锥虫等寄生虫和一些细菌等，用相应的单抗能正确地予以诊断，并能鉴别其抗原亚型。
如乙型肝炎病毒和流感病毒可以分成若干亚型，如果制成单抗就能鉴别出不同亚型，不仅对诊断有意义，而且在流行病学上也有重要意义。
体内定位诊断利用肿瘤单抗与其相应肿瘤抗原反应的特异性和放射性同位素可以进行体外探测等特点发展起来的放射免疫显像技术，是近年来开展对肿瘤及其转移灶或复发灶进行定位或定性诊断的无创伤性新技术。
其原理是从动物或组织培养中获得各种抗肿瘤抗体，采用合适的同位素标记后注入相应肿瘤患者体内，标记抗体可随血流到达肿瘤部位，与肿瘤抗原发生特异性结合。
放射性标记抗体随时间延长在相应肿瘤组织中的浓度越聚越高，以此了解肿瘤的大小、形状、位置、数量，还可帮助确定病变性质。
单抗药物治疗前景
单抗药物治疗前景单抗药物是一类能够靶向特定分子或细胞表面受体的药物，通过结合这些受体来抑制疾病的发展和进展。
随着生物技术的不断发展和进步，单抗药物在临床治疗中的应用越来越广泛，展现出巨大的治疗潜力。
本文将探讨单抗药物治疗的前景，包括其优势、应用领域和未来发展方向。
单抗药物治疗的优势单抗药物具有许多优势，使其成为当前治疗许多疾病的首选药物之一。
首先，单抗药物具有高度的靶向性，能够精准地作用于特定的受体或分子，减少对正常细胞的损伤，降低治疗过程中的副作用。
其次，单抗药物具有较长的半衰期，可以减少药物的使用频率，提高患者的依从性。
此外，单抗药物还具有较好的生物稳定性和良好的组织渗透性，能够在体内长时间保持稳定的药物浓度，增强治疗效果。
总的来说，单抗药物在治疗过程中具有较高的安全性和有效性，为患者带来更好的治疗体验。
单抗药物治疗的应用领域单抗药物在临床治疗中已经被广泛应用于多种疾病的治疗中，包括肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病等。
在肿瘤治疗中，单抗药物可以通过靶向肿瘤细胞表面的受体或分子，抑制肿瘤的生长和扩散，提高患者的生存率和生存质量。
在自身免疫性疾病治疗中，单抗药物可以调节免疫系统的功能，减少自身免疫反应，缓解疾病症状。
在感染性疾病治疗中，单抗药物可以直接作用于病原体，阻断其侵入和复制，加速病情的好转。
可以预见，随着单抗药物技术的不断完善和临床疗效的进一步验证，其应用领域将会不断扩大，为更多疾病的治疗提供新的选择。
单抗药物治疗的未来发展方向未来，单抗药物在治疗领域的发展方向主要包括以下几个方面。
首先，随着个体化医疗的兴起，单抗药物的研发将更加注重个体差异性，开发针对不同患者的个性化治疗方案，提高治疗的精准度和有效性。
其次，单抗药物的多肽化和多功能化设计将成为未来的研究热点，通过改变单抗的结构和功能，实现对多种疾病的联合治疗，提高治疗效果。
此外，单抗药物与其他治疗手段的联合应用也将成为未来的发展趋势，通过多种治疗手段的协同作用，实现疾病的更好控制和管理。
单抗与多抗的区别
单抗与多抗的区别
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抗体（Antibody）是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链（H链）；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链（L链）。
链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。
具体如下图所示：
由于一个大蛋白分子表面具有多种抗原决定簇，因此免疫动物后，这些不同的决定簇分别诱导动物产生不同的抗体，每种抗体的特异性不同。
单抗（单克隆抗体）是有单个细胞起源的细胞克隆分泌的，所以只针对蛋白抗原的单一抗原决定簇，而多抗（多克隆抗体）是有多个不同克隆的B细胞产生的，是多种细胞的混合物，但其中的每一种抗体也只是针对一种决定簇。
单抗与多抗的制备区别
首先要从抗体的产生来探讨。
把某一抗原免疫某种动物而得到单抗或多抗。
如果用经免疫过的动物的脾细胞获得杂交瘤细胞，则得到单克隆抗体（简称“单抗”），如果用动物的血清，则得到多克隆抗体（简称“多抗”）。
单抗与多抗的应用区别
单抗：识别单个抗原表位，所以特异性高。
但如果所识别的抗原表位被破坏，则会影响实验结果，这也是单抗的缺点之一。
（未必出结果，但是出了结果就很有说服力）
多抗：虽然存在交叉反应的问题，但由于识别多个抗原表位，所以即使有
少数几个抗原表位被破坏，仍然不会影响实验结果，这是多抗的优点之一。
（容易出结果，对未必是真实的结果）。
免疫荧光染色
一、免疫荧光标记技术：免疫荧光（immunofluorescence technic）Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。
这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibodytechnique）。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。
这两种方法总称免疫荧光技术，因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合，用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体，但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用，所以人们习惯称为荧光抗体技术，或称为免疫荧光技术。
以荧光抗体方法较常用。
用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织如检查未知抗原，先用已知未标记的特异抗体（第一抗体）与抗原标本进行反应，用水洗去未反应的抗体，再用标记的抗抗体（第二抗体）与抗原标本反应，使之形成抗原—抗体—抗体复合物，再用水洗去未反应的标记抗体，干燥、封片后镜检。
如果检查未知抗体，则表明抗原标本是已知的，待检血清为第一抗体，其它步骤的抗原检查相同。
标记的抗抗体是抗球蛋白抗体，同于血清球蛋白有种的特异性，如免疫抗鸡血清球蛋白只对鸡的球蛋白发生反应，因此，制备标记抗体适用于鸡任何抗原的诊断。
免疫组织化学：免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。
主要过程免疫组织化学的全过程包括：1.抗原的提取与纯化；2.免疫动物或细胞融合，制备特异性抗体以及抗体的纯化；3.将显色剂与抗体结合形成标记抗体；4.标本的制备；5.免疫细胞化学反应以及呈色反应；6.观察结果。
应用的基本原则免疫组织化学染色在生物医学研究中具有十分广泛的作用。
单抗多抗比较
单抗多抗比较首先，单抗与多抗因为各自鲜明的特点，具有不同的优势（见表一）。
单抗特异性高，而且一旦制备成功就可以永续生产完全一致的抗体，因而可以对其特异性进行系统、全面的验证，能广泛地应用于各种应用，并且完全保证抗体的一致性，是公认的抗体“金标准”。
多克隆抗体在特异性方面无法与单抗相比拟，而且即便是用相同抗原制备的不同批次的多抗也不能保证其一致性，因而多抗在特异性、一致性方面有很大局限。
然而，因为多抗相比较单抗仍然有制备时间短、首次制备成本低的特点，在一些情况下也是一种选择。
从Abmart的“应用保证套餐”中可以看出，对于多克隆抗体，可以保证的应用局限于ELISA应用；而对于单克隆抗体，Abmart可提供从ELISA到WB、IP、IF、ICC、IHC等一系列的应用保证服务。
有人可能会问，“也有很多的多抗可以成功用于WB、IP等应用，为什么Abmart不提供这些应用保证的多抗呢?”这是因为，通过表达蛋白作免疫原制备单抗，可以对获得的单克隆细胞株群进行筛选，可以获得能满足不同抗体应用要求的单抗（即获得多株单克隆细胞株，可以分别或者同时满足不同抗体应用要求）。
而对于多抗来讲，一旦确定了免疫原并免疫了动物，其产生的抗体的特异性等是不可控的，因而无法保证一定能获得成功应用的抗体。
因此，如果客户要求所定制的抗体能保证成功应用于WB、IP、IF、ICC、IHC等，应选择Abmart的单抗定制服务，我们可以为客户筛选成功用于上述应用的单抗，或提供众多的细胞株供客户进行筛选以获得可用于更多应用要求的抗体。
综合以上因素，我们建议客户在以下情况都应选择定制单抗：希望确保抗体能成功应用于WB、IP、IF、ICC、IHC等对抗体的特异性要求高（比如用于IF/ICC等）抗体的用量比较大或者需要长期使用一致的抗体需要所制备的抗体能满足多种应用要求（WB/IP/IF/ICC等）从长远来讲，Abmart致力于实现用与制备多抗相当的成本与时间来为客户提供单抗定制服务，使客户无需再为选择单抗还是多抗而烦恼，让所有的人都能够享受到单克隆抗体技术所带来的高质量的实验方法与手段。
单抗药物治疗前景
单抗药物治疗前景单克隆抗体（monoclonal antibodies，简称单抗）是一类通过单一的B细胞克隆生成的抗体，具有特定的靶向性和高度的纯度。
自20世纪70年代首次建立以来，单抗药物已迅速发展成为现代生物治疗的重要组成部分，尤其在肿瘤学、免疫学和感染等领域展现出显著的临床效用。
随着科学技术的进步与研究的不断深入，单抗药物的发展前景广阔。
单抗药物的基本概念单抗药物是通过一种名为“融合细胞”技术生产的。
这种技术将能产生特定抗体的B细胞与可无限增殖的肿瘤细胞融合，从而获得同时具有增殖能力和特异性抗体产生能力的细胞。
通过这一过程产生的抗体具有以下几种主要特点：特异性：能够明确识别并结合其靶标分子，不同于多克隆抗体，后者可能对多个靶标产生反应。
一致性：每种单抗在结构和功能上都是一致的，可以在不同批次中保持稳定性。
高效性：针对特定靶标进行精准打击，降低对正常细胞的损伤，从而减少副作用。
由于这些优势，单抗药物在多种疾病治疗中表现尤为突出，特别是在肿瘤、风湿免疫性疾病和过敏反应等领域。
单抗药物在肿瘤学中的应用靶向治疗单抗作为靶向治疗的重要组成部分，通过特异性结合癌细胞表面的抗原，可以有效诱导癌细胞凋亡，激活免疫反应。
例如，曲妥珠单抗（Herceptin）通过靶向HER2阳性乳腺癌细胞，显著提高了患者生存率；阿瓦斯汀（Avastin）作为VEGF抑制剂，能够抑制肿瘤血管生成，从而阻止肿瘤生长。
联合疗法近年来，越来越多的研究表明，将单抗与化疗或放疗联合应用，可以改善疗效并提高患者生存率。
例如，在非小细胞肺癌患者中，恩杂鲁胺与化疗联用显示出比单独化疗更优越的效果。
此外，在癌症免疫治疗中，检查点抑制剂如纳武利尤单抗（Opdivo）的成功应用，也为未来单抗与其他治疗方式的联合提供了灵感。
个性化治疗单抗药物使得个性化治疗成为可能。
通过基因测序等技术筛查患者肿瘤表面特征，可选择最适合患者的单抗进行治疗，从而提高治疗效果并减少不必要的副作用。
第三章 人工抗体的制备
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五、单克隆抗体的应用
（一）在血清学技术方面。
（二）在免疫学基础研究方面。
（三）在肿瘤治疗方面。如生物导弹。
（四）在抗原纯化方面。
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第三节 基因工程抗体
一、概念： 利用基因工程技术制备的抗体分子，称为基因工程抗体。这是分子水平的抗体。
优势：去除或减少 无关结构，保留或 增加天然抗体特异 性和生物学活性。
五、全套抗体基因库
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第四节 催化抗体
一、概念： 是具有催化活性的免疫球蛋白，也叫抗体酶。具有抗体的高度选择性和酶的高效催化性。
优点： 具有抗体的高
度选择性和酶的高
效催化性。
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二、催化抗体的制备：
如：细胞融合法、基因工程抗体技术、引入辅助因子法等。
三、催化抗体的应用：
如：在抗肿瘤方面的应用。在戒毒上也有重要应用价值。
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基本制备过程：
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一、嵌合抗体：
是指在同一抗体分 子中含有不同种属来 源抗体分子片段的抗 体。
嵌合抗体多为“鼠-
人”类型。
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二、重构抗体：
将鼠抗体超变区基因嵌入人抗体Fab骨架区编码基因中，再将 此DNA片段与人Ig恒定区基因相连，转染杂交瘤细胞，并表达嵌合的V 区抗体。
三、单链抗体：
单
需适当选择 产生高纯度抗体
无 悬浮培养：0.01~0.05
中空纤维： 小鼠
体外培养液：无7
三、建立B细胞杂交瘤与单克隆抗体生产基本过程
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四、单克隆抗体的优势
高度均一性： 纯度很高的均一性抗体
高度专一性： 只对抗原分子上某一抗原决定簇起反应。
单抗和多抗在ifa应用中的差异
单抗和多抗在ifa应用中的差异单抗（单克隆抗体）和多抗（多克隆抗体）是在免疫荧光染色技术（IFA）应用中常用的两种抗体类型。
它们在结构、制备、特异性和应用范围等方面存在一些差异。
首先，单抗是由单个抗体分子组成的，制备过程中只使用一个单克隆细胞系。
单抗具有高度特异性，能够识别和结合到特定的抗原表位上，因此在IFA应用中具有较高的灵敏性和准确性。
而多抗是由多个不同抗体分子组成的，制备过程中使用多个多克隆细胞系。
多抗具有多样性，能够识别和结合多个抗原表位，因此在IFA应用中具有较宽的特异性和适用范围。
其次，单抗制备过程相对复杂，主要由以下几个步骤组成：免疫原制备、免疫小鼠、细胞融合、克隆和纯化。
而多抗制备相对简单，通常只需免疫小鼠，然后采集血清进行纯化。
单抗生产过程中的纯化步骤较多，使得单抗相对更纯。
再次，由于单抗制备过程中只使用一个单克隆细胞系，因此单抗的特异性和一致性较高，每个单抗批次的性能和结果较为稳定。
而多抗由于使用多个克隆细胞系，可以产生大量不同的抗体，因此多抗的特异性和一致性较低。
每个多抗批次的性能和结果可能有一定的差异，需要进行筛选和验证以确保其适用性。
最后，单抗在IFA应用中常用于检测单个特定的抗原，例如检测某个细胞表面标志物的表达或病原体的抗原。
而多抗在IFA应用中常用于广谱筛选和某种系列抗原的快速检测，例如检测细菌、病毒或其他病原体的存在。
单抗的灵敏性和准确性更高，适用于一些需要高度特异性检测的情况，而多抗的特异性相对较低，适用于一些需要快速筛选的情况。
综上所述，单抗和多抗在IFA应用中存在一些差异。
单抗具有高度特异性和一致性，制备过程较为复杂，适用于需要高度特异性检测的情况。
而多抗具有多样性和适用范围较宽，制备过程相对简单，适用于需要广谱筛选的情况。
当选择抗体用于IFA时，需要根据特定的实验需求来选择单抗还是多抗。
免疫组织化学
免疫组织化学简介免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。
主要过程免疫组织化学的全过程包括：1.抗原的提取与纯化；2.免疫动物或细胞融合，制备特异性抗体以及抗体的纯化；3.将显色剂与抗体结合形成标记抗体；4.标本的相关操作免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。
它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。
免疫组化技术近年来得到迅速发展。
50年代还仅限于免疫荧光技术，50年代以后逐渐发展建立起高度敏感，且更为实用的免疫酶技术。
仪器设备1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉；2）水浴锅试剂1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L，KH2PO4 1.4mmol/L。
2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠3g，柠檬酸0.4g。
3）0.5mol/L EDTA缓冲液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O，用10 mmol/L NaOH调至pH8.0,加水至1000ml。
4）1mol/L的TBS缓冲液（pH8.0）：在800ml水中溶解121gTris碱，用1N的HCl调至pH8.0,加水至1000ml。
5）酶消化液：a、0.1%胰蛋白酶液：用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。
b、0.4%胃蛋白酶液：用0.1N的HCl配制。
单克隆抗体和多克隆抗体的区别
单克隆抗体和多克隆抗体有很多区别首先1.制备上的区别经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞，经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳性克隆株，最后进行细胞培养或将细胞注入到动物（一般为balb/c小鼠）腹腔中用腹水培养，收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。
而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐，只需将抗原（纯度越高越好）直接注入到动物体内进行免疫，经过3~4次免疫，ELISA测其效价合格后，收集血液离心得到上清，纯化后即能得到多克隆抗体。
因此制备多抗的周期就比单抗的短，首次制备价格也比单抗要低。
2.应用上的区别单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。
单克隆抗体的特异性高，一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体，因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。
但如果所识别的抗原表位被破坏，实验的结果将会受到很大的影响，这也是单抗的缺点之一。
而多克隆抗体的特异性较差，即使是使用相同的抗原制备多抗，不同批次间也会存在差异，因而在特异性、一致性方面有很大的局限。
所以在用多抗做免疫检测时，更容易造成背景，例如在WB中有杂带，在IHC中背景较深等等。
虽然还存在着交叉反应*的问题，但由于多抗识别多个抗原表位，即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变，实验的结果也不会受到影响。
在相同条件下，使用多抗可以提高检测的灵敏度，对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。
单抗与多抗的区别是什么摘要：本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义，并介绍单抗、多抗在制备流程、特点及应用上的区别。
单抗与多抗的定义抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇，也称为抗原表位。
一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇，因此，机体也可以产生多种不同的抗体。
由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。
而由多个B淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体。
单抗与多抗的区别
单抗与多抗的区别单抗与多抗的区别较多，不同的抗体优缺点不一样，那个单抗与多抗有什么样的优缺点呢？医学教育网整理了单抗与多抗的区别，希望供临床医学检验主管技师参考学习。
多抗和单抗优缺点比较多克隆抗体能识别任一抗原上的多个表位，而单克隆抗体仅检测任一抗原上的一个表位。
但是它们两者有着属于各自的优点和缺点。
多克隆抗体的优点多克隆抗体可有助于放大低表达水平的靶蛋白信号，因为靶蛋白可在多个表位上结合不止一个抗体分子。
但是这会给定量实验造成不利影响，因为结果将变得不准确。
由于能识别多个表位，多克隆抗体可在IP/ChIP中得到更好的结果。
比单克隆抗体更能容许抗原中的微小变化。
它们会识别出与免疫原蛋白质具有高同源性的蛋白质，或者从非免疫原物种的组织样品中筛选靶蛋白，例如当未测试物种中的抗原性质未知时，有时会使用多克隆抗体。
医'学教育网搜集整理这也使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。
多克隆抗体通常是检测变性蛋白质的首选。
多表位通常可提供更为有力的检测。
多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域，因为抗血清通常可识别多个结构域。
不足之处易于产生批次间差异。
产生大量非特异性抗体，有时可能在某些应用中产生背景信号。
多表位使得检测免疫原序列以确定是否有任何交叉反应性非常重要。
客观事实识别任一抗原上的多个表位。
获得的血清将包含不同亲和力抗体的异质复合体混合物。
多克隆抗体主要由IgG亚类组成。
肽免疫原通常用于产生靶向唯一表位的多克隆抗体，特别适合高同源性的蛋白家族。
抗体制备制备所需技术和技能不高。
制备时间短。
多克隆抗体不适用于探测抗原的特定结构域，因为多克隆抗血清通常可识别多个结构域。
单克隆抗体的优点杂交瘤制得后，就成为了恒定的再生源，所有批次都将相同–对确保实验步骤和结果的一致性和标准化非常有帮助。
单克隆抗体通常在切片和细胞染色造成的背景较低。
因为它们以更强特异性检测一个靶表位，所以不太可能与其它蛋白质发生交叉反应。
高中生物单克隆抗体知识点
高中生物单克隆抗体知识点单克隆抗体是高中生物选修教材中动物细胞工程教学内容的重点和难点，有哪些知识点要记住?下面店铺给大家带来高中生物单克隆抗体知识点，希望对你有帮助。
高中生物单克隆抗体基础知识点一、区别单克隆抗体和多克隆抗体多克隆抗体：抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
当病原体入侵人体，能够刺激机体免疫系统产生大量的多种抗体，那么这一堆抗体就是多克隆的。
单克隆抗体(MAb)：是针专一的抗原决定簇产生的抗体，单克隆技术又名杂交瘤技术，起源于1975年，由G.KÖhler和Milstein创立。
主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞，生产抗体。
此类抗体是专一的，或者说是同一种蛋白质，因此是单克隆的。
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要步骤(1)抗原制备;(2)免疫动物;(3)免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备;(4)细胞融合;(5)杂交瘤细胞的选择培养;(6)杂交瘤细胞的筛选;(7)杂交瘤细胞的克隆化;(8)单克隆抗体的检定;(9)分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立;(10)单克隆抗体的大量制备。
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的具体过程1、免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。
一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。
抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。
2、细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。
将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇。
在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。
单克隆抗体与常规抗血清的性质比较
单克隆抗体与常规抗血清的性质比较单克隆抗体与常规抗血清的性质比较
单克隆抗体与常规抗血清的性质比较
无关的Ig多少或几乎无
其它血清蛋白有少，培养物上清常有10％
胎牛血清
Ag-Ab结合免疫原的全部成分的全部
抗原决定簇免疫原中的一种成分的一个抗原决定簇
特异性亲和力的重复性不同批号间有变化无变化
与其它抗原的交叉反应与带有共同抗原决定簇的
抗原有部分交叉一般无。
结合到共同决定簇则是完全的
单克隆抗体与抗血清相比，具有哪些优势？
常规抗血清的特点是用量大，成本高，质量低。
单克隆抗体（MAb）与抗血清（又称多克隆抗体，PAb）最主要的区别是MAb 为单一种B 细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。
它的特异性是针对一个抗原决定簇的。
制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中去分离纯化得到它，而是用分离产生抗体的B 细胞克隆的方法得到。
其主要优点是：
(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。
(2)可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。
(3)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
单克隆抗体与常规抗血清的性质比较如下表所示：。
如何选择抗体的种属及特异性
说说抗体选择的那些事儿随着生命科学的发展，围绕蛋白进行的研究越来越多，抗体试剂在实验中的重要性越来越举足轻重。
面临着纷呈复杂的抗体试剂市场，如何选择到适合自己实验的抗体就变得尤为重要。
一、关于特异性的选择：特异性的选择主要需要考虑四个方面：蛋白特异性、种属特异性、实验方法特异性、标记物的特异性。
1、蛋白特异性：针对需要检测的蛋白查找抗体，几个细节要区分，重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测，对抗体的要求是不一样的，注意查看抗体说明书的检测说明。
如果重组蛋白不是全长表达，则需要注意抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。
内源性蛋白最好能清楚其剪切与修饰的方式，特殊表型的蛋白需要进行序列比对，并结合抗体免疫原序列，查看交叉反应的情况。
磷酸化蛋白检测需要确定具体位点，不同位点的磷酸化意味着可能有不同的机制存在，不宜一概而论。
2、种属特异性：同种蛋白不同物种，有着或大或小的差异。
目前大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或设计多肽抗原的，根据蛋白的同源性情况与其他种属发生交叉反应。
需要参照说明书注明的可反应种属信息。
一些稀有种属很难找到抗体，可以通过蛋白的序列比对，选择同源序列免疫的抗体，不过一般这种情况生产商不会受理其关于质量的申诉，如果可以申请到免费的抗体样品，则利于抗体选择。
3、实验方法特异性：目前使用抗体的实验方法有很多，不同的使用方法过程中，因为对蛋白样品的处理方式不一样，蛋白的含量有差异，对抗体的识别表位和效价要求都是不一样的。
具体的根据说明书注明的产品应用方法进行选择。
但是生产商一般不会将每个抗体都进行各种实验的检测，目前检测比较多的只是WB、IHC、IF等，如果针对具体的实验方法没有找到合适的抗体的，可以结合蛋白序列分析和抗体的抗原信息，选择尽可能有效果的抗体。
同样，申请到免费的抗体样品是个很好的途径。
4、标记物的特异性一般基于实验操作的实验方法不会使用带有标记的一抗，比如WB、IHC等，都是通过二抗类的试剂标记达到结果呈现的目的。
生物显微技术复习题
生物显微技术复习题复习题（一）1.简述制作石蜡切片制作的基本步骤。
答：（1）取材（2）固定（3）洗涤（4）脱水（5）透明（6）透蜡与包埋（7）切片（8）贴片(展片、捞片)（9）染色（10）封片2.固定的意义和目的有哪些？答：（1）意义：在制作切片的过程中，取材后应将组织材料立即固定，才能进行制片，固定是制片极为重要的一步。
（2）目的：○1使各成分凝固和沉淀下来；○2防止自容和腐败；○3使不同成分产生不同的折光率，便于显微镜观察；○4硬化组织,便于切片；○5媒染—使细胞易于着色。
3.（1）最常用的单纯固定液是哪种？答：甲醛和乙醇。
（2）解析Bouin氏液、Zebker氏液的成分？答：○1Bouin氏液：饱和苦味酸水溶液75ml、甲醛水溶液25ml、冰醋酸5ml；○2Zebker氏液：升汞5g、重铬酸钾2.5g、蒸馏水100ml、冰醋酸5ml。
（3）Bouin氏液固定后，为了加速清除固定后组织块上的黄色，可在洗涤液中加入少量氨水或＿＿。
4.最常用的脱水剂是酒精，最常用的透明剂是二甲苯。
5.包埋前透明和染色后透明的目的各是什么？答：(1)包埋前透明:将脱水剂替换出来，使石蜡能顺利进入材料中。
（2）染色后透明:脱去组织中的水，防止封片时出现雾状膜。
6.软蜡和硬蜡的熔点范围各是多少？一般包埋时使用的石蜡的熔点是多少？答:（1）软蜡：42~45℃、45~50℃；硬蜡：52~54℃、54~60℃（2）动物材料常用的石蜡熔点为52-56ºC；植物材料为54-60ºC。
复习题（二）1.一般制作石蜡切片时切片厚度是多少？答：4~10微米。
2.为什么切片要进行染色?答：使组织或细胞的某一部分染上与其他部分不同深度的颜色或不同的颜色，产生不同的折光率，便于利用光学显微镜进行观察。
3.封固的目的是什么？常用的封固剂有哪些？主要适用于哪些情况？答：（1）封固的目的：便于保存和观察；（2）常用的封固剂：○1含水封固剂：如甘油，甘油明胶和Apath糖浆等，用于未染色的材料、脂肪染色、异染染色等。
单克隆抗体与多克隆抗体配对ELISA方法比较
・研究报告・
ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＢＵＬＬＥＴＩＮ ２００９年第１ １期
单克隆抗体与多克隆抗体配对ＥＬＩＳＡ方法比较
张小兵１
邸禄芹２
吴萌１
闫静辉１
（１河北省生物研究所，石家庄０５００８１；２河北医科大学第三医院，石家庄０５００５１）
摘要：
以人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）为抗原，制备出对ＨＣＧ的多克隆抗体和特异性单克隆抗体，并进行抗体纯化和
和４８１１。
２．２．２单克隆抗体的制备及纯化５株杂交瘤细 胞株分别注射到小鼠腹腔诱发腹水，每只获取４—
８
ｍｌ的优质腹水，腹水效价为４０万一８００万。分别
取２—３ ｍ１进行纯化，获得抗体约２５０斗ｌ一３００恤ｌ。 纯化后蛋白含量１５．６
ｍｇ／ｍｌ一２３．５
ｍｓ／ｍｌ，凝胶成 在包被ＦＳＨ和
像分析纯度达到８４％一８７％。 ２．２．３单克隆抗体的免疫学特性
万方数据
２００９年第１１期
张小兵等：单克隆抗体与多克隆抗体配对ＥＬＩＳＡ方法比较
１２７
２结果与讨论
２．１
酶后，效价为８０万，工作浓度调整到１：１万。 ２．４双抗夹心ＥＬＩＳＡ检测结果
２．４．１
兔抗ＨＣＧ多克隆抗体的获得 共免疫１只新西兰大白兔。免疫３次后，测定
基本方案各优化结果
基本方案１各优化
效价达到１：４０万以上，一次性获得抗血清５６
收稿日期：２００９・０７—１３ 作者简介：张小兵（１９７３一），男，河北景县人，高级工程师，主要从事生物技术的应用研究；Ｅ—ｍａｉｌ：９ｘｉａｏｂｉｎ９９＠ｓｉｎｓ．ＣＯｌｌｌ
通讯作者：同静辉（１９６３－），男，河北辛集市人，副研究员，主要从事细胞生物学及抗体工程技术的研究；Ｅ—ｍａｉｌ：Ｙａｎｊｉｎ＃ｕｉ＠１２６．ｃ锄
单抗与多抗的区别及比较
单抗多抗比较表多抗单抗对免疫原的要求免疫原纯度越高越好不纯的免疫原也能得到高纯度的抗体特异性高抗原亲和纯化稳定性较好相对较差对理化条件敏感标准化较难不同批次的抗体质量差异大易于标准化批次间差异小识别多表位只有一个抗原表位交叉反应很常见难避免非特异反应不常见可避免非特异反应凝集反应大多数没有沉淀反应大多数没有成本交叉反应
单抗、多抗比较表 多抗 免疫原纯度越高越好
高（抗原亲和纯化）
单抗 不纯的免疫原也能得到高纯度的 抗体 高
较好
相对较差，对理化条件敏感
较难，不同批次的抗体质量差异大 易于标准化，批次间差异小
多表位 很常见，难避免非特异反应 有
只有一个抗原表位 不常见，可避免非特异反应 大多数没有
有
大交叉反应：从理论上说，用小鼠抗原制备的抗体应只能用于小鼠，但是由于动物种属之间，特别是相近的动物之 间存在着同源性（如大鼠与小鼠），这样会导致抗体发生交叉反应，即用一种动物抗原制备的抗体也可与其它一些 物种的抗原反应。
如果对抗体的特异性要求高，用量较大或需要长期使用一致的抗体，制备的抗体应用要求多（WB/IP/IF/ICC 等)， 可以选择制备单克隆抗体。若对抗体的特异性要求不高，需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做 ELISA 检测，可以选择制备多克隆抗体。
对免疫原的要求
特异性 稳定性 标准化 识别 交叉反应 凝集反应 沉淀反应 成本 周期
区别
制备的区别
经过特定抗原处理过的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞，经 HAT 培养基筛选、 ELISA 检测效价后就得到阳性克隆株，最后进行细胞培养或将细胞注入到动物（一般为 balb/c 小鼠）腹腔中用腹 水培养，收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐，只需将抗原（纯 度越高越好）直接注入到动物体内进行免疫，经过 3~4 次免疫，ELISA 测其效价合格后，收集血液离心得到上清， 纯化后即能得到多克隆抗体。因此制备多抗的周期就比单抗的短，首次制备价格也比单抗要低。
单抗，双抗，ADC——IgG亚型怎么选？
单抗，双抗，ADC——IgG亚型怎么选？前言自1997年第一个抗肿瘤药物利妥昔单抗首次获批以来，其高度特异性和卓越的药代动力学特征引起了制药行业的极大关注，抗肿瘤抗体通过以下几种机制发挥抗肿瘤特性，包括：（1）增强/激活Fc介导的效应功能（ADCC、ADCP、CDC）；（2）阻断肿瘤生长信号；（3）抑制肿瘤血管生成；（4）诱发肿瘤细胞凋亡信号；（5）激活免疫细胞。
IgG抗体由Fab区和Fc区组成，Fab区主要作用是特异性识别抗原，发挥免疫功能。
Fc区可以识别并结合表达Fc受体的免疫细胞及血液中补体进而发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用（ADCC），抗体依赖的细胞介导的细胞吞噬作用（ADCP）以及补体依赖的细胞毒作用（CDC）（表1）等效应功能；Fc还可以结合新生IgG转运受体（FcRn）从而使抗体在体内不被轻易清除而延长了其在机体内的半衰期。
1. IgG亚型抗体生物学功能的区别人的1gG包括：1gG1、1gG2、1gG3、1gG4四个亚型，虽然所有的亚型在氨基酸水平上超过90%的同一性，但每个亚型在铰链区长度、链间二硫键数量（图1)和Fc效应功能方面都有独特的特性。
1gG1与FcγR 亲和力最高，其次分别是1gG3、IgG2和1gG4。
FcγR 包括6种亚型（FcγRI、FcγRIIA、FcγRIIB、FcγRIIC、FcγRIIIA、FcγRIIIB)，它们在细胞分布与Fc的亲和力以及由此产生的生物活性方面存在差异。
除FcγRI是一种对IgG具有高亲和力的活化受体，可以被单体IgG 激活外，所有其他FcγRs只有与特异性抗原复合物接触时才能被IgG 的Fc区功能性激活。
FcγRIIB是唯一的抑制性FcγR。
FcγRIIB在许多免疫细胞上表达，包括B细胞、单核细胞、巨噬细胞、DC细胞和肥大细胞。
活化FcγRs的最佳方式是FcγRIIA和FcγRIIIA，FcγRIIA主要在单核细胞和巨噬细胞上表达，而FcγRIIIA主要在NK细胞上表达。
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制备的区别
经过特定抗原处理过的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞，经 HAT 培养基筛选、 ELISA 检测效价后就得到阳性克隆株，最后进行细胞培养或将细胞注入到动物（一般为 balb/c 小鼠）腹腔中用腹 水培养，收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐，只需将抗原（纯 度越高越好）直接注入到动物体内进行免疫，经过 3~4 次免疫，ELISA 测其效价合格后，收集血液离心得到上清， 纯化后即能得到多克隆抗体。因此制备多抗的周期就比单抗的短，首次制备价格也比单抗要低。
单抗与多抗的区别比较
活性蛋白整体方案
描述：随着单抗与多抗的广泛应用，人们对两者的关注度也越来越高，单抗和多抗的区别、它们各自的优缺点也成 为人们关注的焦点。本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义，单抗、多抗制备的大致流程以及它们各自的 特点和应用。
定义
抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇，也称为抗原表 位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇，因此，机体也可以产生多种不同 的抗体。由单一 B 细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体， 称为单克隆抗体。而由多个 B 淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激 并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体。从某种角度而言，多抗是 多种单抗的混合物。
如果对抗体的特异性要求高，用量较大或需要长期使用一致的抗体，制备的抗体应用要求多（WB/IP/IF/ICC 等)， 可以选择制备单克隆抗体。若对抗体的特异性要求不高，需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做 ELISA 检测，可以选择制备多克隆抗体。
对免疫原的要求
特异性 稳定性 标准化 识别 交叉反应 凝集反应 沉淀反应 成本 周期
单抗、多抗比较表 多抗 免疫原纯度越高越好
高（抗原亲和纯化）
单抗 不纯的免疫原也能得到高纯度的 抗体 高
较好
相对较差，对理化条件敏感
较难，不同批次的抗体质量差异大 易于标准化，批次间差异小
多表位 很常见，难避免非特异反应 有
只有一个抗原表位 不常见，可高
短
长
*交叉反应：从理论上说，用小鼠抗原制备的抗体应只能用于小鼠，但是由于动物种属之间，特别是相近的动物之 间存在着同源性（如大鼠与小鼠），这样会导致抗体发生交叉反应，即用一种动物抗原制备的抗体也可与其它一些 物种的抗原反应。
单抗制备流程图
应用的区别
单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高，一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗 体，因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。但如果所识别的抗原表位被破坏，实验的结果将会受到很大的影
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活性蛋白整体方案 响，这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特异性较差，即使是使用相同的抗原制备多抗，不同批次间也会存在 差异，因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫检测时，更容易造成背景，例如在 WB 中 有杂带，在 IHC 中背景较深等等。虽然还存在着交叉反应*的问题，但由于多抗识别多个抗原表位，即使是有少数 几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变，实验的结果也不会受到影响。在相同条件下，使用多抗可以提高检测的灵 敏度，对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。
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