植物组织培养重点
植物组织培养要点
近几 年各 地都 实施 了新 课 改 , 浙江 省 也增 设
化, 在加 热过程 中 , 还原 糖 的生 成量 随温度 的提高
逐渐增 大 , 使还原 糖 的生 成量 高于原来 的量 , 而 从
导致 实 验 失 败 。 5 加 强 探 究 式 实 验 教 学
了选 修一 《 命 科 学 与 实 践》 1 生 共 3个 学 生 实 验 。
・
3 8 ‘
E u a in lE u p n d E p r n 12 d c t a q i me t o An x e i me t Vo 6, No. 4,2 0 01
.
至 58 . 。若 p H过 偏低 , 培养基 不凝 固 ; p 则 若 H偏
高 , 培养 基硬 度过 大 , 则 不利 于植 物生 长 。 由于培
摘 要
040 640
从 培 养 基 配 制 、 种操 作 、 菌 苗培 养 、 栽 4个方 面总 结 了植 物 纽 培 的 实验要 点 。 接 无 移
关 键 词 培 养 基 配 制 接 种 操 作 组 配 苗培 养 炼 苗 移栽
菊花组 培 实验 是 生 物 新 课 程 选 修 1中 的 内 容, 实验 主要 分 四步进 行 : 养基配 制 , 培 接种 操作 , 无 菌苗 培养 , 栽 。根 据植 物组培实 验经验 , 移 和川 布兰公 司技术专 家 的指导 , 将 每一 步 骤 中应 该 现
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基:是离体植物(外植体)赖以生长、分化的基础,是根据植物的需求,人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养:把细胞或生物体的一部分,置于液体培养基中使其发育,并不断振荡,使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养:是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养:从母体植株上将叶组织(包括叶原基在内)切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒:在一定范围内,用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养:是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上,来改变花粉的发育程序,使其分裂形成细胞团,进而分化成杯状体,然后再生植株,或形成愈伤组织,由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养:是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
(培养过程中,不断注入新鲜培养基,排掉等体积用过的培养基,或者抽取悬浮培养物,使培养物的营养物质得到不断补充,从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养:指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养,建立单细胞培养物的培养方式。
(细胞生长在固定体积的培养基中,当主要营养物质耗尽时,细胞的分裂和生长即停止。
)二、简答题1、MS培养基特点。
答:MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,具有高含量的氮、钾,尤其是硝酸盐用量大,还有一定数量的铵盐,其养分的数量和比例合适,不需要添加更多的有机附加物,就能满足植物组织对矿质营养的要求,加速愈伤组织和培养物的生长,当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答:①和传统的生产方式相比,具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点;②具有人为可控性,可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质;③具有很高的生产效率。
高中生物选修一植物组织培养知识点总结
中学生物选修一植物组织培育学问点总结生物是高考考试中重要的科目之一,尤其是植物组织培育这个学问点,是高考考试中必考学问点。
下面是为大家整理的中学生物学问点,希望对大家有所帮助!中学生物选修一学问点课题一菊花的组织培育植物组织培育的基本过程细胞分化:在生物个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
离体的植物组织或细胞,在培育了一段时间以后,会通过细胞分裂,形成愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形态态的薄壁细胞。
由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化,或者叫做去分化。
脱分化产生的愈伤组织接着进行培育,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫做再分化。
再分化形成的试管苗,移栽到地里,可以发育成完整的植物体。
植物细胞工程具有某种生物全套遗传信息的任何一个活细胞,都具有发育成完整个体的实力,即每个生物细胞都具有全能性。
但在生物体的生长发育过程中并不表现出来,这是因为在特定的时间和空间条件下,通过基因的选择性表达,构成不同组织和器官。
植物组织培育技术的应用有:实现优良品种的快速繁殖;培育脱毒作物;制作人工种子;培育作物新品种以及细胞产物的工厂化生产等。
细胞分化是一种长久性的变更,它有什么生理意义?使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向特地化,有利于提高各种生理功能的效率。
比较根尖分生组织和愈伤组织的异同影响植物组织培育的条件材料:不同的植物组织,培育的难易程度差别很大。
植物材料的选择干脆关系到试验的成败。
植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响试验结果。
菊花组织培育一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。
一般来说,简单进行无性繁殖的植物简单进行组织培育。
选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好,简单诱导脱分化和再分化。
养分:离体的植物组织和细胞,对养分、环境等条件的要求相对特别,须要配制相宜的培育基。
常用的培育基是MS培育基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
(每个3分,共24分)1、植物组织培养:在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
2、细胞的全能性:指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化:离体培养条件下生长的器官、组织、细胞,经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体:从活体植物上切取下来,用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养:对分离的到的单个细胞进行培养,诱导其分裂增殖,形成细胞团,再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体,直至长成完整植株的技术。
6、胚状体:亦称体细胞胚。
指在组培过程中,由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构,能够一次性形成再生植株。
7、平板培养:是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中,使其与培养基充分配合,再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物:指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物,其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化:细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化,进行器官形成,产丛生芽或胚状体,形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%;B 50~60%;C 70~80%;D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt;B IAA;C NAA;D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏;B 高压灭菌的时间;C 高压灭菌的温度;D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标:1.了解植物组织培养的基本概念和意义;2.掌握植物组织培养的基本原理、方法和步骤;3.能够根据实验要求进行植物组织培养的实验操作。
二、教学重点:1.植物组织培养的基本原理和方法;2.植物组织培养的实验操作。
三、教学难点:1.植物组织培养的实验操作技巧;2.植物组织培养的常见问题及解决方法。
四、教学内容及教学步骤:1.植物组织培养的基本概念和意义(10分钟)讲解植物组织培养的概念、特点和意义,引导学生认识植物组织培养在农业、园艺和生物科学领域的重要作用。
2.植物组织培养的基本原理(15分钟)介绍植物细胞和组织的培养原理,包括细胞分裂、组织分化和激素调控等方面的基本知识。
3.植物组织培养的基本方法和步骤(30分钟)3.1材料准备解释所需要的实验器具、培养基成分和化学试剂等材料的选择和准备。
3.2植物组织的获取与处理讲解植物组织的获取方法,包括茎尖、叶片和种子等不同组织的处理方法。
3.3组织培养基的制备介绍培养基的成分和配方,讲解培养基的调配方法和无菌操作技巧。
3.4组织培养的操作步骤详细演示组织培养的具体操作步骤,包括无菌操作、组织切割、接种和培养条件设置等。
4.实验操作(60分钟)将学生分成小组,提供植物组织培养实验所需的材料和器具,指导学生进行组织培养的实验操作。
注:实验前需提前准备无菌操作室和培养箱等设备。
五、教学评价体系:1.实验操作的规范程度;2.实验结果的准确性和可靠性;3.对植物组织培养中常见问题的解决能力。
六、教学过程设计:本教案主要以理论授课和实验操作相结合的方式进行。
首先通过理论讲解,让学生了解植物组织培养的基本概念、意义和原理,掌握植物组织培养的基本方法和步骤。
然后,将学生分组进行实验操作,指导学生完成组织培养实验,同时进行实时指导和纠正,帮助学生掌握实验技巧和解决实验中的常见问题。
七、教学反思:植物组织培养是植物生物技术领域的重要研究内容,对于培育新品种、研究植物生长发育机制等具有重要意义。
植物组织培养概论
广义概念
人工培养植物体一 部分(即外植体 ) 生成完整植株。
愈伤组织:在离体培养过程中在人工培养基 上从外植体上长出来的,改变了它们原有的特性, 具有分生能力的能迅速增殖的无特定结构和功能 的细胞团。多在植物体切面上产生。
外植体:是指从植物体上分离下来的用于植 物组织培养的接种材料,它包括植物体的各种器 官、组织、细胞和原生质体等。
思考题:
1.什么是组织培养?组织培养的原理是什么?
2.组织培养分哪几种类型? 3.组织培养有哪些特点?
四、植物组织培养的理论基础
细胞全能性理论
植物每一个具有 完整细胞核的体细胞, 都含有植物体的全部 遗传信息,在适当条 件下,具有发育成完 整植株的潜在能力。
植物细胞全能性的表达
分裂 细胞 分化 再 分 化 器官 分裂
组织
脱分化
已分化组织细胞
分裂 植株
植物细胞全能性的实现
• 植物的生活史:
受 精 卵 早期胚 胎发育 合 分化 子 胚 组 织 形成 器 构成 植 物 体
茎段培养成苗示意图
茎段培养成苗示意图
组织培养:为狭义的植物组织培养,是对植物体的 各部分组织进行培养,如茎尖分生组织、形成层、• 木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织 等等;或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培 养。二者均通过再分化诱导形成植株。
组织培养
愈伤组织培养 分生组织培养 薄壁组织培养 输导组织培养
团按照一定密度在液体培养基中进行培养增殖的技术。
平板培养:是指将一定密度的悬浮细胞接种到一薄
层固体培养基中进行培养的技术。
看护培养:是指利用生长的愈伤组织所产生的物质
来培养单细胞或者异种愈伤组织等的方法。
微室培养:是指人工制造一个微室,将单细胞培养
植物组织培养知识点总结
堂清日结31、原生质是细胞内生命物质的总称。
原生质层指的是细胞膜和液泡膜以及两层膜之间的细胞质。
去掉细胞壁的植物细胞就是原生质体,所以一个动物细胞就相当于一个原生质团。
2、原生质层的融合过程体现了细胞膜的流动性。
3、植物体细胞融合的实质:原生质体的融合,植物体细胞融合完成的标志:细胞壁的再生。
新细胞壁的产生与细胞内高尔基体相关。
4、植物组织培养中愈伤组织的形成是细胞分裂的结果。
5、植物细胞工程通常所采用的技术手段:植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术。
6、植物体细胞杂交的过程:1)酶解法去除细胞壁,获得原生质体2)利用物理或者化学法诱导原生质体的融合3)再生细胞壁,获得杂种细胞。
4)利用植物组织培养技术,通过脱分化和再分化获得杂种植物。
7、微型繁殖技术:也叫快速繁殖技术即快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
该技术与传统繁殖技术相比,具有:①繁殖速度快;②“高保真”(因为是无性繁殖);③不受自然生长季节的限制(因为在具有一定人工设施的室内生产)等特点。
堂清日结41、作物脱毒材料:分生区细胞作物脱毒方法:进行植物组织培养作物脱毒结果:获得脱毒苗脱毒苗的特点:不会或极少感染病毒。
2、人工种子的组成:胚状体(或不定芽或顶芽或腋芽)+人工薄膜;要获得人工种子,需将离体的器官、组织或细胞培养至再分化阶段。
3、人工种皮中应具有的有效成分:适量的养分、无机盐、有机碳源、农药、抗生素、有益菌等,为了促进胚状体的生长发育,还可以向人工种皮中加入植物生长调节剂。
4、单倍体育种原理:染色体变异方法:花药离体培养采用的技术:植物组织培养技术优点:后代无性状分离、明显缩短育种年限突变体的利用育种原理:突变(基因突变、染色体变异)优点:能够产生新性状植物体细胞杂交育种原理:染色体变异优点:克服远缘杂交不亲和的障碍5、植物组织培养中易获得突变体的原因:培养的细胞一直处于分生的状态,易受培养条件和外界压力(如射线、化学物质等)的影响。
植物组织培养与细胞培养知识重点
第一个发明的培养基为White 培养基培养基中的铁盐采用Fe-EDTA 形态IAA/CTK比例高时,促进生根培养,比例低时,促进芽的分化植物组织培养:(广义)人工控制条件下培养形成再生植株(狭义)对植物组织器官产生愈伤组织进行培养直至生成完整植株。
外植体:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料愈伤组织:在离体培养的条件下切口处形成的一团具有分生能力的不规则的细胞团分化:细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变形成各类组织和器官的过程脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下恢复分生能力恢复到分生组织状态的过程再分化:由脱分化的细胞重新形成各类组织和器官的过程初代培养:诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体(形似胚,具有配的功能)过程继代培养:更换新鲜培养基繁殖同一类型材料生根培养:将芽苗转移到生根培养基上培养形成完整植株驯化培养:将组培苗经人工炼苗驯化使其能够在苗床上生长器官培养:是指对植物体各种器官的离体培养离体胚培养:指从植物种子中分离出胚组织进行离体培养的技术细胞悬浮培养:将植物的细胞或细胞小聚体悬浮在液体培养基上进行培养,使之在体外繁殖、生长、发育,并在培养过程中能保持很好的分散性的技术原生质体培养:指从细胞中分离出来的原生质体经过离体培养使其分裂、增殖进而分化成完整植株的技术。
器官发生:又名器官形成,是指植物根茎叶花果实等器官的分化与形成灭菌:用物理或化学方法,杀死物体表面或空隙间的微生物消毒:杀死,消除或抑制部分微生物,使之不发生作用褐化:接种后外植体表面产生酚、醌类棕褐色物质,细胞停止代谢生长玻璃化:离体植物嫩茎或叶呈半透明水状,生理失调不能进行光合作用指示植物:能够对病毒汁液产生迅速和特有的反应的某类转株寄主植物细胞的全能性:每个植物细胞都具有母体的全部遗传特性;每一个细胞都可以在特定条件下发育成与母体一样的植株灭菌方法:物理法:灼烧、常压蒸煮,紫外线,超声波,微波,过滤清洗。
化学法:升汞,过氧化氢,甲醛,酒精,高锰酸钾,漂白粉,次氯酸钠,抗菌素四大母液:大量元素母液,微量元素母液、铁盐母液、有机物质母液、激素母液实验室安排:贮藏室、药品室、洗涤间、消毒室、接种室,准备室、暗室、分析室、培养室离体培养基本设备:天平、酸度计、移液管、容量瓶、三角瓶添加活性炭的目的:活性炭具有吸附作用,可吸附非极性物质和色素大分子物质,茎尖初代培养使可防止褐化,促进生根,防止玻璃化苗几种维生素:VB1:有利于植株生根,促进愈伤组织产生VB6:促进根的生长VC:防止褐化VB5:影响植物代谢和胚的发育VE、VB12各培养基的特点:White:无机盐浓度低,适宜于生根培养;MS:无机盐浓度高,为比较稳定的离子平衡溶液,其养分的数量和比例比较合适,可满足植物的营养和生理需要,硝酸盐含量相对较高,广泛应用于植物器官,花药,细胞和原生质体培养,效果良好;B5:含较低的铵对不少培养物的生长有抑制作用。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标1. 了解植物组织培养的定义、原理和应用。
2. 掌握植物组织培养的基本步骤和操作技巧。
3. 能够独立完成植物组织培养的实验操作。
4. 培养学生的创新意识和实践能力。
二、教学内容1. 植物组织培养的定义和原理2. 植物组织培养的应用领域3. 植物组织培养的基本步骤4. 植物组织培养的操作技巧5. 植物组织培养的实验操作三、教学方法1. 讲授法:讲解植物组织培养的定义、原理和应用。
2. 演示法:展示植物组织培养的实验操作。
3. 实验法:学生动手完成植物组织培养的实验操作。
4. 小组讨论法:学生分组讨论植物组织培养的应用领域和实验操作中的问题。
四、教学准备1. 教室环境:教室应保持干净、整洁,通风良好。
2. 实验材料:植物组织培养实验所需的植物材料、仪器设备和试剂。
3. 教学器材:黑板、投影仪、教学PPT等。
五、教学过程1. 导入:通过展示植物组织培养的图片,引起学生兴趣,提问学生对植物组织培养的了解。
2. 讲解:讲解植物组织培养的定义、原理和应用,重点讲解植物组织培养的基本步骤和操作技巧。
3. 演示:展示植物组织培养的实验操作,让学生直观地了解实验过程。
4. 实验:学生分组进行植物组织培养的实验操作,教师巡回指导,解答学生的问题。
5. 讨论:学生分组讨论植物组织培养的应用领域和实验操作中的问题,分享彼此的成果。
6. 总结:教师总结植物组织培养的重要性和应用前景,强调实验操作的注意事项。
7. 作业:布置植物组织培养相关题目,巩固所学知识。
教学反思:本教案通过讲解、演示和实验等教学方法,使学生了解植物组织培养的定义、原理和应用,掌握植物组织培养的基本步骤和操作技巧。
在教学过程中,注意引导学生主动参与实验操作,培养学生的实践能力。
通过小组讨论,激发学生的创新意识和团队合作精神。
总体来说,本教案能够有效地实现教学目标,提高学生的学习兴趣和积极性。
但在实验过程中,要注意安全事项,确保学生的安全。
植物组织培养教案
植物组织培养教案一、教学目标1. 让学生了解植物组织培养的原理和过程。
2. 培养学生运用科学方法进行实验操作的能力。
3. 培养学生关注植物组织培养在生产和生活中的应用。
二、教学内容1. 植物组织培养的定义和原理。
2. 植物组织培养的过程。
3. 植物组织培养技术的应用。
三、教学重点与难点1. 重点:植物组织培养的原理、过程和应用。
2. 难点:植物组织培养技术的操作和应用。
四、教学方法1. 采用讲授法讲解植物组织培养的原理和过程。
2. 采用实验法培养植物组织,让学生动手操作。
3. 采用案例分析法分析植物组织培养在生产和生活中的应用。
五、教学准备1. 实验室设备:无菌操作台、培养皿、镊子、剪刀、植物激素等。
2. 实验材料:植物组织、消毒液、培养基等。
3. 教学课件和案例资料。
教案内容:一、导入(5分钟)1. 引导学生关注植物组织培养在生产和生活中的应用。
2. 提问:什么是植物组织培养?为什么需要进行植物组织培养?二、讲解(10分钟)1. 讲解植物组织培养的原理。
2. 讲解植物组织培养的过程:离体组织、愈伤组织、胚性细胞团、植株再生。
三、实验操作(15分钟)1. 分组,每组准备一份植物组织样本。
2. 指导学生进行无菌操作,将植物组织接种到培养基上。
3. 学生动手操作,观察并记录植物组织的生长情况。
四、案例分析(10分钟)1. 展示植物组织培养在生产和生活中的应用案例。
2. 引导学生分析案例中植物组织培养的关键技术和应用效果。
五、总结与反思(5分钟)1. 学生总结植物组织培养的原理、过程和应用。
2. 教师提问,检查学生对植物组织培养的理解和掌握程度。
六、作业布置(5分钟)2. 让学生查阅资料,了解植物组织培养在生产和生活中的应用。
七、课后反思(教师)1. 总结课堂教学效果,发现问题并及时改进。
2. 收集学生作业,了解学生掌握情况,为下一步教学做好准备。
八、课后作业(学生)1. 完成实验报告。
2. 查阅资料,了解植物组织培养在生产和生活中的应用。
植物组织培养复习
植物组织培养复习1、概念:组织培养:利⽤植物离体器官、组织或细胞(包括原⽣质体),在适宜的⼈⼯培养基上和⽆菌条件下进⾏培养,使其⽣长、增殖、进⽽发育形成⼩植株的⽅法。
也称之为离体培养(In vitro culture)。
愈伤组织:原指植物在受伤后,于伤⼝表⾯形成的⼀团薄壁细胞。
在组织培养中,指在⼈⼯培养基上由外植体长出来的⼀团⽆序⽣长的薄壁细胞。
外植体:由活植物体上切取下来的可以⽤于组织培养的组织或器官2、为什么说愈伤组织是最为常见的培养⽅式?原因:⼤部分组织培养经历callus再⽣途径长出植株;callus可以⽤于悬浮培养和原⽣质体培养。
3、组织培养的类型有哪些?a按培养⽅法:固体培养、液体培养、看护培养、微室培养、包埋培养等b按培养过程:初代培养、继代培养4、组织培养在园艺业(农业)上的应⽤有哪些?a倍性育种:花药培养、胚乳培养b突变体筛选:愈伤组织培养c创造新种质:细胞融合d克服胚败育:胚培养e植物性药物和⽣物制品的⽣产5、在组织培养技术的发展中做出巨⼤贡献的⼈。
6、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些基本仪器?有何⽤途?烘箱,冰箱,灭菌锅,超净⼯作台,酸度计,摇床,显微镜,天平,培养箱。
玻璃器⽫,微孔过滤器,细胞计数器,接种⽤具。
7、⼀个正规的组织培养实验室应具备哪些房间?洗涤室(区),制备室(区),灭菌室(区),贮放室(区),操作室(区),培养室(区),观察室(区),药品室(区)8、详细叙述组织培养过程中的基本技术规程洗涤,灭菌,⽆菌操作~9、培养基的类型有哪些?a按性质分:基本培养基,完全培养基b按状态分:固体培养基,液体培养基10、培养基的主要成分有哪些?各有何作⽤?a⽆机营养成分:⼤量元素(氮,磷,钾,钙,镁,硫)微量元素(硼、锰、锌、钼、铜、钴、氯、铁)b有机营养成分:含氮有机物(维⽣素、氨基酸)碳源和能源,植物激素c其他成分:活性炭,琼脂,抗⽣素,缓化剂11、配制培养基的基本步骤及注意事项有哪些?选择,配置(取样,加成分,测PH)12、什么是⼈⼯种⼦?有哪些特点与优点?⼈⼯种⼦:(artificial seeds)亦称体细胞种⼦。
植物组织培养(全)
胚培养是器官培养的一种。选用的外植体是成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养。其具体方法是将取出放在液体或固体培养基上培养,由于胚包含在胚珠和子房里,因而进行胚胎培养时,常常是将胚珠和子房放在培养基上培养。
胚培养用途:1.拯救胚2.研究胚的发育营养研究3.一些特殊的领域的研究。
(4)细胞和原生质体培养
二是要给予它们适当的刺激,即给予它们一定的营养物质,并使它们受到一定的激素的作用。
全能性体现的两个过程
一个已分化的细胞要表现它的全能性,必须经历两个过程,即首先要经历脱分化过程,然后再经历再分化过程。
再分化的过程有两种方式:
一是器官发生方式 二是胚胎发生方式
2.激素(植物生长调节剂)调控
后来证明,激素可调控器官发生的概念对于多数物种都可适用,只是由于在不同组织中这些激素的内生水平不同,因而对于某一具体的形态发生过程来说,它们所要求的外源激素的水平也会有所不同。
⑤1958年,Wickson和Thimann指出,应用外源细胞分裂素可促成在顶芽存在的情况下处于休眠状态的腋芽的生长。
当把茎尖接种在含有细胞分裂素的培养基上以后,将可使侧芽解除休眠状态,而且,能够从顶端优势下解脱出来的不只是那些既存于原来茎尖上的腋芽,此外,还有由原来的茎尖在培养中长成的侧枝上的腋芽,结果就会形成一个郁郁葱葱的结构,里面包含了数目很多的小枝条,其中每个小枝条又可取出来重复上述过程,于是在相当短的时间内,就可以得到成千上万的小枝条。当把这些小枝条转够到另外一种培养基上诱导生根以后,即可移植于土壤中。
奠基阶段(从20世纪30年代中至20世纪50年代末)
30年代中期,植物组织培养领域两个重要的发现,其一是认识了B族维生素对植物生长的重要意义;二是发现了生长素--一种天然的生长调节物质。
植物组织培养复习重点
考试重点(大部分是课后作业):题型:填空,判断,名词解释,问答(1)植物组织培养的广义和狭义概念?答:广义概念是指对植物的器官,组织,细胞及原生质体进行离体培养的技术。
狭义概念是指对植物的组织(如分生组织,表皮组织、薄壁组织等)及其培养产生的愈伤组织进行离体培养的技术。
(2)植物组织培养分类及其主要特点?答:根据外植体来源和培养对象不同,植物组织培养的研究类型可以分为5种,分别是器官培养,组织培养,细胞培养,胚胎培养,原生质体培养。
主要特点:⑴无菌条件;⑵成分完全确定的人工培养基;⑶起始材料处于离体状态;⑷克隆;⑸组培苗叶片表面一般都缺乏角质层或蜡质层,且气孔都是张开的;⑹环境温度、光照强度和时间等都是人为设定的;(3)植物组织培养的应用及展望?答:应用:植物离体快繁,无病毒苗木培育,培育新品种或创制新品种,次生代谢物生产,种质资源保存及制作人工种子。
展望:组培容器大型化,组培技术简单化,组培环境自然化(4)细胞全能性、脱分化、再分化概念?答:细胞全能性:离体细胞在适当条件下分化形成再生植株的能力。
脱分化:也称去分化,是指在离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
再分化:是指离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化,形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官,甚至形成完整植株的过程。
(5)植物激素配比模式?答:生长素/细胞分裂素:高有利于根的形成;中无定向结构生长;低有利于芽苗生长;(6)体细胞胚胎发生的概念、方式、机理和特点?答:概念:植物离体培养细胞产生胚状体的过程。
方式:直接途径:从外植体某些部位的胚性细胞直接诱导分化出体细胞胚胎。
间接途径:外植体先脱分化形成愈伤组织,再从愈伤组织的某些细胞分化出体细胞胚胎。
机理:特点:①双极性;②(与母体组织或外植体的维管束系统无直接联系,处于较为孤立状态,)即存在生理隔离。
组培考试重点
1.名词解释愈伤组织;原生质体;再分化;外植体;离体器官发生;污染;植物无糖组织培养;看护培养;胚状体;连续培养细胞全能性;脱分化;植物组织培养;褐化;植物脱病毒;植物器官培养;人工种子;细胞悬浮培养;脱毒苗;植物离体快繁;玻璃化;继代培养;植物离体快繁2.填空题1.植物组织培养过程中,最常用的培养基是?常用?和?调节pH,大多数植物的pH要求调节在?范围内。
2、植物组织培养按培养对象分为?、?、?、?、?等几种类型。
3、在原生质体的酶溶液中,需要加入一定量的?,其作用是保持原生质体膜的稳定。
4、培养基的灭菌要求压力为?、温度为?、维持时间为?。
5、组织培养中常用的有吲哚乙酸(IAA),2,4-二氯苯乙酸(2,4-D),吲哚丁酸(IBA),萘乙酸(NAA),它们的作用强弱顺序为?> ?> ?> ?。
6、在细胞培养中,常由分散性较好的_____?__ 来制备单细胞,也可以用____?___ 从植物不同组织直接制备单细胞。
7、活性炭在植物组织培养中的作用是?。
8、组织培养植株的再生途径有两条:一是?发生,另一是?发生。
9、可以通过?、?、?、?、?等措施预防褐变的发生。
10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质预热不稳定,不能使用?的灭菌方法,而要采取?方法灭菌。
11、悬浮培养的材料必须达到?、?和?等三个要求。
12、植物组织培养技术的三大难题分别为?、?和?。
13、6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进?的生长,这时?占主导地位;比值高时促进?的生长,这时?占主导地位。
14、具有防止褐变作用的维生素是?。
3.判断题1. 环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求80%-90%的相对湿度。
()2. 幼年细胞比成年细胞和组织诱导愈伤组织更容易。
()3. 一般来说,光照强度较强,幼苗容易徒长,而光照强度较弱幼苗生长的粗壮。
( )4. 培养基中的铁盐,常用不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物,以防在PH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。
组培重点名词解释、填空
一、名词解释(20)1、植物组织培养:是指用无菌方法,使植物体的离体器官(根、茎、叶、花、果实等)、组织(形成层、分生组织、花药组织、韧皮部、皮层等)和细胞(体细胞和生殖细胞)在人为提供的条件下生长和发育的培养技术的总称。
2、细胞全能型:离体的体细胞,具有母体植株的遗传物质,在适宜的条件下,能按其母株的表型完整地加以表达。
在形态建成上具有再生成完整植株的潜势,在代谢上具有合成原植物体所含有的代谢产物的能力。
3、培养基:人工配制的、适合于植物生长发育的“人工土壤”。
它含有植物生长所需的各种无机营养元素、有机营养元素、水分、植物生长调节物质以及培养基的支持体等。
4、母液(贮备液):在组织培养工作中,配制培养基是日常工作,为简便起见,将配方中的药品一次称量供一段时间使用,即配一些浓溶液,用时稀释,这种浓溶液就是贮备液或母液5、外植体:把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体6、快速繁殖:在无菌条件下,利用植物体的一部分,包括细胞,组织或器官,在人为控制的营养和环境条件下快速繁殖植物的方法。
7、顶芽萌发:又称器官型再生,是指由培养的顶芽或腋芽直接萌发形成小茎后,再诱导小茎生根而形成完整植株的过程。
8、胚状体发生型:是指外植体在适宜的培养环境中,形成类似于合子胚结构的胚状体或体细胞胚。
体细胞胚与合子胚一样具有胚根和胚芽两极性。
成熟的胚状体可以像合子胚一样长出根、芽,萌发再生植株。
9、不定器官发生型:离体培养条件下不定器官的发生可以通过直接或间接途径由外植体表面分化出不定芽或不定根等器官,并进一步发育成完整植株。
10、原球茎形成型:原球茎形成型是兰属植物特有的再生植株途径。
兰属植物外植体接种于培养基上,经过一段时间的培养便能形成原球茎,然后每一个原球茎可以进一步发育成完整植株,且原球茎可以进一步增殖。
11、玻璃化:是指无菌苗生长异常,茎叶呈透明或半透明的水浸状,植株矮小肿胀、失绿、叶片皱缩成纵向卷曲,脆弱易碎的现象。
植物组织培养
植物组织培养重点名词解释:1、植物组织培养:是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术。
又称为植物离体培养2、外植体(explant):用于离体培养的那部分植物器官、组织或细胞。
3、愈伤组织(callus):是指外植体因受伤或在离体培养时,其细胞进行活跃的分裂增殖而形成的一种无特定结构和功能的组织。
4、离体生态学(in vitro ecology):是指研究离体培养环境条件控制的科学,其研究对象是培养基、植物材料和人工环境条件。
5、植物细胞全能性(totipotency):是指任何携带完整遗传信息的植物活细胞都具有表达其所有遗传信息的能力,能够发育成完整的植株。
胞需经过脱分化和再分化过程才能表现其全能性。
6、脱分化(dedifferentiation):成熟细胞或分化细胞转变为分生状态(即形成愈伤组织)的过程。
7、再分化(redifferentiation):成熟细胞或分化细胞脱分化转变为愈伤组织后重新分化成异质细胞的过程。
8、植物茎段培养是指对植物的带有一个以上定芽或不定芽的外植体(包括块茎、球茎、鳞茎在内的幼茎切段)进行离体培养的技术。
9、茎尖培养(shoot tip culture or apical meristem culture)是指对植物顶端的原分生组织和它衍生的分生组织的培养。
10、叶培养的意义:研究叶形态建成、光合作用、叶绿体形成等;叶细胞全能性;原生质体融合;无性繁殖系;诱变育种。
11、离体叶组织发育途径:直接产生不定芽,由愈伤组织产生不定芽,胚状体和其他。
12、植物器官培养是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。
13、植物胚胎培养是指对植物的胚、胚乳、胚珠和子房等进行离体培养,使其发育成完整植株的技术。
包括:胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
14、胚乳培养是指将胚乳组织从母体上分离出来,通过离体培养,使其发育成完整植株的技术15、胚珠培养是将胚珠从母体分离出来,无菌条件下让其进一步生长发育,使其形成植株的技术。
植物组织培养知识点归纳
植物组织培养知识点归纳1第1章植物组织培养:指植物器官、组织、细胞、原生质体等的培养。
体内使用人工培养基使它们生长成完整的植物2,外植体:在植物组织培养中,为无菌细胞、组织、器官等。
从活植物中提取并接种在培养基上的称为外植体。
3,愈伤组织:指在人工培养基上无序地从外植体中生长出来的大量薄壁细胞。
4.1的应用。
1农业应用。
幼苗的快速繁殖。
无病毒培养3。
(1)倍性育种,缩短育种年限,具有明显的杂种优势;(2)克服远缘杂交(胚胎培养)的不亲和性和不育性;(3)种质保存(4)变异2的创造,在遗传学、分子生物学、细胞生物学、组织学、胚胎学、基因工程、生物工程等方面的应用。
用于基因工程创造植物新种质用于植物生长发育的理论研究,包括生理学、病理学、胚胎学、细胞和分子生物学等。
3。
使用组织培养材料作为植物生物反应器第2章1,全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞都具有形成完整植物所必需的所有遗传信息以及发育成完整植物的能力。
2,细胞分化:指导致细胞形成不同结构和功能变化或潜在发育模式的过程3,去分化:指在体外生长的细胞、组织或器官逐渐失去原来的结构,恢复分生组织状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织的过程4,再分化:指去分化细胞恢复其分化能力并形成具有特定结构和功能的细胞、组织、器官甚至植物的过程5,植物组织培养中经常遇到的问题及解决方法1,污染与预防:1,真菌污染后,如果孢子已经形成,必须在高压灭菌后丢弃然而,在细菌污染的情况下,只要及时发现,材料仍然可以使用,并且材料上部不易受细菌影响的部分被切割和转移。
2.用抗生素等抗菌剂处理会影响植物材料的正常生长第二,的褐变和防止(1)选择合适的外植体(2)适宜的培养条件(3)用抗氧化剂连续转移(4),玻璃化和防止(1)提高培养基中的溶质水平和降低培养基中的水势;(2)减少培养基中氮化合物的量;(3)增加光照;(4)增加容器通气量和施用CO2肥料对降低试管苗玻璃化有明显效果。
高中生物植物的组织培养技术知识点总结
⾼中⽣物植物的组织培养技术知识点总结 植物组织培养技术是⾼中⽣物的⼀个重要组成部分,学⽣需要掌握相关知识点,下⾯是店铺给⼤家带来的⾼中⽣物植物的组织培养技术知识点,希望对你有帮助。
⾼中⽣物植物的组织培养技术基础知识点 1、植物组织培养过程: (1)原理:植物细胞具有全能性。
(2)过程: 2、⽤途: (1)微型繁殖 微型繁殖就是⽤于快速繁殖优良品神的植物组织培养技术,也叫快速繁殖技术。
繁殖过程中的分裂⽅式是有丝分裂,亲、⼦代细胞内DNA不变,所以能够保证亲、⼦代遗传特性不变。
(2)作物脱毒 作物脱毒是利⽤茎尖、根尖等⽆毒组织,进⾏微型繁殖,所获幼苗是⽆毒的。
(3)⼈⼯种⼦:通过组织培养技术,可把植物组织的细胞培养成在形态及⽣理上与天然种⼦胚相似的胚状体,也叫作体细胞胚。
这种体细胞胚有于叶、根、茎分⽣组织的结构。
科学家把体细胞胚包埋在胶囊内形成球状结构,使其具备种⼦机能。
所以,⼈⼯种⼦是⼀种⼈⼯制造的代替天然种⼦的颗粒体,可以直接播种于⽥间。
①制作⽅法:⼈⼯种⼦是利⽤植物组织培养获得胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等,然后包上⼈丁种⽪就形成了⼈⼯种⼦,如图: ②优点:可使在⾃然条件下不结实或种⼦昂贵的植物得以繁殖;保持亲本的优良性状,因该过程为⽆性繁殖;节约粮⾷,减少种⼦的使⽤;可以控制添加⼀些物质,如除草剂、农药、促进⽣长的激素、有益菌等。
周期短,易储存和运输,不受⽓候和地域的限制。
(4)细胞产物的⼯⼚化⽣产:从⼈⼯培养的愈伤组织细胞中提取某种成分,如紫草素、⾹料等。
⾼中⽣物植物的组织培养技术重要知识点 1、植物细胞的全能性 (1)概念:具有某种⽣物全部遗传信息的任何⼀个细胞,都具有发育成完整⽣物体的潜能。
(2)原理:细胞内含有本物种的全部遗传信息。
(3)全能性表达条件:具有完整的细胞结构,处于离体状态,提供⼀定的营养、激素和其他适宜外界条件。
2、作物新品种培育 (1)单倍体育种: ①过程:植株(AaBb)通过减数分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四种类型);对花粉进⾏花药离体培养(技术是植物组织培养);得到单倍体植株;对其幼苗时期进⾏秋⽔仙素处理;得到了正常的纯合⼆倍体植株(AABB、Aabb、aaBB、aabb四种类型)。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
器官培养:即离体器官的培养。
植株培养:对完整植株材料的培养。
组织或愈伤组织培养:是对植物体的各部分组织进行培养或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养,二者均通过再分化诱导形成植株.细胞培养:是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养.原生质体培养:是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。
初代培养:芽、茎段、叶片、花器等外植体在离体培养条件下诱导愈伤组织、侧芽或不定芽、胚状体过程植物组织培养:是指通过无菌操作分离植物体的一部分(外植体),接种到培养基上,在人工控制的条件下(包括营养、激素、温度、光照、湿度)进行培养,使其产生完整植株的过程。
愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞,在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在植物体切面上产生。
外植体:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
植物细胞全能型:任何具有完成细胞核的植物细胞,能拥有形成一个完整植株所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
脱分化:已分化好的细胞在人工诱导条件下,恢复分生能力,回复到分生组织状态的过程。
再分化:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程,重新形成各类组织和器官的过程。
胚状体:在离体过程中产生一种形似胚(具有明显的根端和芽端),功能与胚相同的结构。
褐变现象:指在接种后,其表面开始褐变,有事甚至会使整个培养基褐变的现象。
继代培养材料的玻璃化:当植物材料不断的进行离体繁殖时,有些培养物的嫩芽,叶片往往会呈半透明水迹状,这种现象通常成为玻璃化。
人工种子:通过植物组织培养的方法获得的具有正常发育能力的材料,外被有特定的物质,在适宜的条件下可以发芽成苗的植株幼体。
植板密度:形成的细胞团数/植板的细胞总数×100%对称融合:双方原生质体均带有核基因组和细胞质基因组的全部遗传信息。
非对称融合:指一方亲本的全部原生质与另一方亲本的部分核物质及细胞质物质重组产生不对称杂种。
继代培养:是初代培养之后的连续数代的扩繁培养过程。
目的:繁殖出相当数量的无菌苗,最后达到边繁殖边生根的目的。
细胞悬浮培养:将游离的植物细胞按一定的细胞密度悬浮在液体培养基中进行培养的方法。
根据培养基的类型分为: 固体培养(琼脂、卡拉胶等固化),半液半固体培养(固液双层),液体培养(震荡、旋转或静置培养)。
液体培养的优点:不使用凝固剂,节约生产成本,营养吸收充分;操作过程简化。
组织培养按培养对象可分为:植株培养,器官培养,组织培养,细胞培养,原生质体培养。
植物组织培养一般过程:初代培养,继代培养,生根培养,驯化移栽。
植物组织培养的特点:培养条件可以人为控制,生长周期短,繁殖率高,管理方便,利于工厂化生产和自动化控制。
组织培养技术在农业生产上的应用主要体现于以下几个方面:快速繁殖优良苗木;获得脱毒苗;育种上应用;工厂化育苗。
1902年,德国著名的植物生理学家和植物学家哈伯兰特提出了高等植物细胞全能性。
1958年,美国植物学家斯图尔德等人,用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养,得到了完整植株,证明了细胞全能性。
怀特于1943年发表了《植物组织培养手册》专著,使植物组织培养开始成为一门新兴的学科。
腺嘌呤与生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一,这一比例高时,产生芽,这一比例低时,则形成根,相等则不分化。
标准的组培实验室包括:1、洗涤室,器具的洗涤,干燥和消毒,2、配置室,进行药品的保存,配置,消毒,分装等,3、灭菌室,培养基及使用器具的消毒与灭菌,4、接种室,进行材料的接种,内置超净工作台或接种箱,外设缓冲间,放置拖鞋,工作服,工作帽,5、培养室,将接种的材料进行无菌培养生长的场所,6、细胞学观察实验室、进行培养材料的组织学,细胞学的观察照相等。
高压灭菌锅的使用方法:1、加热,灭菌前检查灭菌锅内水量是否充足,然后将培养基放于灭菌锅内,盖好盖,关闭放气阀,打开电源,加热开温,2、排气,当温度开至0.5kg/cm2 时,打开放气阀彻底排出锅内空气,然后关闭放气阀,促使压力继续上升,3、温度控制,当锅内压力升至1.1kg/cm2 时,计时15-20分钟,计时结束后,关闭电源,4、出锅,当灭菌锅自然冷却后,取出培养基,放置于接种室备用。
MS培养基特点:1、无机盐离子浓度高,硝酸盐含量较高,2、用于植物的器官,花药,细胞和原生质体培养(大多数双子叶植物)。
B5培养基特点:1、含有较低的铵,可能对不少培养物的生长有抑制作用,2、双子叶植物尤其是木本植物组培可选择。
White培养基特点:1、无机盐数量较低,2、适于生根培养。
N6培养基特点:1、成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高,3、适合花药培养。
KM-8P培养基特点:1、有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,2、广泛用于原生质体培养,包括融合的培养。
培养基成分:水,无机盐(大量元素,微量元素),有机物(碳水化合物,维生素,氨基酸,肌醇,天然复合物),植物生长调节物质(植物激素,植物生长调节剂),培养材料的支持物(琼脂),其他辅助型物质(抗生物质,抗氧化物,活性炭)。
培养基的制备:1、选择合适的培养物,2、母液的配置,3、量取母液,4、称量蔗糖,琼脂放入600ml蒸馏水的锅内,加热使其溶化,5、加入母液,混合均匀,6、定容,7、调PH,8、分装入瓶,9、封口,10、灭菌备用。
灭菌种类:物理方法:干热(烘烧和灼烧),湿热(常压或高压蒸馏煮),射线处理(紫外线,超声波,微波),过滤,清洗和大量无菌水冲洗等。
化学方法:使用升汞,甲醛,过氧化氢,高锰酸钾,漂白粉,次氯酸钠,酒精化学药品处理。
褐变现象产生原因:1、植物品种,由于多酚氧化酶活性上的差异,不同品种间的褐变现象不同,2、生理状态,由于外植体的生理状态不同,在接种后褐变程度也有所不同,一般来说,幼嫩的组织在接种后褐变程度不明显,而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重,3、培养基成分,浓度过高的无机盐会使某些观赏性植物的褐变程度增加,此外,细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性,从而使褐变现象加深,4、培养条件不当,如果光照过强,温度过高,培养时间过长等,均可使多酚氧化酶的活性提高,从而加速被培养的外植体的褐变程度。
防止,减轻褐变现象发生的措施:1、选择合适的外植体,一般来说,最好选择生长处于旺盛的外植体,这样可以使褐变现象明显减轻,2、合适的培养条件,无机盐成分,植物生长物质水平,适宜温度及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。
玻璃化产生原因:1、不同种类品种间试管苗的玻璃化程度有差异,2、当培养基细胞分裂素水平较高时易出现玻璃化现象,3、培养容器中空气湿度过高,透气性较差时易出现玻璃化现象。
解决方法:1、减少培养基中的溶质水平,以降低培养基的水势,2、减少培养基中含氮化合物的用量,3、增加光照,4、增加容器通风,进行CO2施肥,5、降低培养温度,进行变温培养,6、降低培养基中的细胞分裂素含量,可以考虑加入适量脱落酸或少量聚乙烯醇。
胚乳培养的主要目的:获得无子结实的三倍体植株。
体细胞胚胎同步化的方法:1、化学抑制法,2、低温抑制法,3、渗透压选择法,4、机械过筛选择法(过滤),5、应用植物胚性细胞分级仪。
保证训化移栽存活率的方法:1、培育壮苗,2、选择合适的移栽介质,3、注意移栽方式,4、加强栽后的环境调控。
胚培养的意义:1、用于胚的挽救,2、打破种子休眠,3、克服珠心胚的干扰,4、诱导胚状体及胚性愈伤组织,5、种子生活力的快速测定。
重要的脱毒方法及基本原理:1、热处理脱毒,原理,当植物组织处于高于正常温度的环境中时,组织内部的病毒受热后部分或全部钝化,不能生成或生成的病毒很少,以致病毒含量不断降低,从而达到脱毒的目的,2、微茎尖培养脱毒,原理:感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低,生长点则几乎不含或含病毒很少,3、热处理结合茎尖培养脱毒,4、微体嫁接脱毒,5、抗病毒药剂脱毒。
以脱毒为目的微茎尖培养的材料要求:消毒,剥离幼叶和叶原基,切取0.1-0.2mm大小,仅留一两个叶原基的茎尖分生组织。
脱毒苗的检测方法:1、指示植物法,利用病毒在其他植物(指示植物)上产生特定症状(枯斑和空斑)作为鉴别病毒存在与否和种类的方法。
2、抗血清鉴定法:植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白,是一种较好的抗原,给动物注射后会产生抗体,这种抗原和抗体所引起的凝集成沉淀反应就叫做血清反应。
3、电子显微镜检查法,4、酶联免疫测定法。
花粉、花药培养的异同:1、培养目的相同,均获得小孢子植株,2、花药培养属于器官培养,花粉培养属于细胞培养,3、花药培养没有药壁组织干扰,可计数小孢子产生率,可观察雄核发育的全过程,单倍体产量高,但技术复杂。
离体授粉的方法:1、胚珠试管受精2、子宫离体授粉3、雌蕊离体授粉花粉花药培养的作用:1、在植物育种中使后代迅速结。
2、提高目标基因型选择效率。
3、排除杂种优势对后代选择的干扰。
4、遗传研究的良好实验材料体系。
5、突变体的筛选。
6、消除至死基因。
7、选育新型自交系。
8、遗传转化的受体材料。
离体条件下的小孢子发育:1、营养细胞发育途径:营养细胞重复分裂形成单倍体。
2、生殖细胞发育途径:由生殖细胞重复分裂形成单倍体。
3、营养细胞与生殖细胞并进发育途径:由营养细胞和生殖细胞各自独立分裂,共同形成单倍体。
4、花粉均等分裂途径:营养细胞和生殖细胞通过核融合,形成多倍体植株。
小孢子正常发育途径:小孢子母细胞经减数分裂形成四分孢子,然后经单核早期、单核靠边期、双核期,最后达到三核期而成为成熟花粉。
花粉花药预处理方法:①高低温处理。
②化学物质处理。
③其他:包括γ射线、离心、磁场等。
低温处理最常用。
单细胞的分离途径:①由植物细胞分离单细胞。
②由愈伤组织分离单细胞单细胞的分离方法:①机械法②酶解法单细胞培养的方法:①平板培养②看护培养③微室培养④条件培养基培养法影响单细胞培养的因素:①培养基成分②细胞植板密度细胞悬浮培养的方法:①分批培养②连续培养③半连续培养细胞培养的应用:①筛选突变体②生产次级代谢物③诱导多倍体④生产人工种子分离原生质体所用的酶类:①纤维素酶②果胶酶③半纤维素酶原生质体培养的过程:原生质→细胞再生→细胞分裂→细胞团芽和根原生质体培养的方法:①细胞植板法②半固体培养基法③琼脂糖法④多用液体培养基法原生质体活性试验:①以胞质环流作为代谢活跃进行的指标②以氧的摄入量作指标,可通过指示呼吸代谢强度的氧电极进行测定。
③以光合活性做指标④以完整的质膜排斥伊月蓝的能力做指标。
⑤以二乙酸荧光素的染色能力为指标:荧光素双醋酸酯(FDA)染色法原生质体融合方法:1、自发融合2、诱发融合①化学融合a、NaNO3融合。