天然药物化学试验讲义
天然药物化学实验讲义-长沙医学院
天然药物化学实验指导（供药学及药学相关专业使用）主编：马宁主审：朱绍雄副主编：魏丹丹李娟参编：王建芬徐芳肖志勇李媛肖海英肖艳刘卫平李云贵吴柱刘明长沙医学院药物化学教研室二O一O年六月前言《天然药物化学实验指导》是依据《天然药物化学》（第五版）理论教材，结合我院四年制本科药学专业学生的培养目标、实验教学大纲以及实验教学的实际情况，由药物化学教研室整理编写而成。
本教材主要目的是通过实验教学，使学生对理论知识的理解更加深入，掌握得更加牢固，通过实际操作加强对学生基本操作技能的训练，培养学生的动手能力，和分析问题解决问题的能力，使学生从中获得从事天然药物化学科研与生产实践活动的能力。
根据教学以及学生实际能力等方面的需要，本指导在原版教材基础上增加了验证性实验、综合性实验和设计性实验，切实提高实验教学的质量。
本教材共分两部分，第一部分介绍了天然药物化学实验技术，着重讲述了天然药物活性成分提取、分离和结构鉴定的原理和操作方法。
第二部分是实验部分，共十二个实验，实验内容包括苯丙素类、醌类、黄酮类、萜类、挥发油和生物碱等主要天然产物类别代表药物的提取、分离，鉴别原理和实验操作，其中新增了设计性和综合性实验相结合的挥发油提取分离实验；新增绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别实验的设计性实验；新增薄层板的制备活度测定及应用、秦皮中有效成分的提取分离和鉴别、穿心莲内酯的提取分离鉴定、薯蓣皂苷元的提取分离鉴别等验证性和综合性实验。
本教材的内容丰富，重点突出，实用性强，能满足四年制药学本科的实验教学，并且书后附有天然药物化学常用试剂、配制方法和常用有机溶媒的性质与回收方法，以方便读者查阅。
由于编者水平有限，编写时间仓促，书中难免有不妥之处，敬请使用本实验指导的老师和同学批评指正。
编者 2010年6月目录实验须知 (1)第一章天然药物化学实验技术 (5)第一节经典的提取和分离方法 (5)第二节结晶和重结晶 (9)第三节层析分离方法 (11)第二章实验部分 (18)实验一中草药化学成分的鉴别法 (18)实验二薄层板的制备、活度测定及应用 (25)实验三秦皮中七叶苷、七叶内酯的提取分离和鉴别 (28)实验四虎杖中游离羟基蒽醌类成分的提取分离和鉴别 (31)实验五芦丁的提取分离和鉴别 (36)实验六黄芩中黄芩苷的提取分离和鉴别 (40)实验七挥发油成分的提取和鉴别 (44)实验八穿心莲内酯的提取分离鉴别与亚硫酸氢钠加成物的制备 (48)实验九女贞子中齐墩果酸的提取分离和鉴别 (54)实验十薯蓣皂苷元的提取分离和鉴别 (57)实验十一粉防己生物碱的提取分离和鉴别 (60)实验十二绞股蓝总皂苷的提取分离和鉴别(设计性实验) (65)附录一中草药化学成分检出试剂配制法 (67)附录二常用有机溶媒的性质 (74)实验须知一、天然药物化学实验的特点1．实验周期长。
天然药物化学实验讲义
青岛科技大学化工学院天然药物化学实验讲义第二版药剂教研室编二○○六年目录目录 (1)天然药物化学实验须知 (2)天然药物化学实验技术 (4)实验一大黄中蒽醌类成分的提取、分离和制剂鉴别 (30)实验二绞股蓝总皂苷的提取和制剂鉴别 (35)实验三汉防己生物碱的提取、分离和鉴别 (38)实验四芸香苷的提取、分离和鉴定 (444)实验五中药制剂薄层色谱鉴别的应用 (49)附录 (55)天然药物化学实验须知（一）实验要求1．实验前应认真预习，做好预习笔记，明确实验目的，掌握实验原理，了解实验步骤，安排好当天实验计划。
2．实验时要遵守实验室制度，按照操作要求，认真操作，正确使用各种仪器，努力掌握基本操作技术。
养成及时记录的习惯，观察到的现象和结果以及有关的重量、体积、温度或其它数据，应立即如实记录。
3．实验室内保持安静、整洁。
不许大声喧嚷，不许吸烟，不迟到不随便离开。
随时注意反应情况和做好下一步的准备工作。
保持桌面、仪器、水槽、地面四洁。
废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽和丢到窗外。
4．实验后要认真分析实验现象，作出合理结论，写出实验报告，提取纯化产品包好，贴上标签，交给老师。
必要时还需进一步查阅某些尚未理解的理论和知识。
5．每次实验完毕，值日生负责整理公用仪器，将实验台及地面打扫干净，倒清废物缸，检查水电开关，关好门窗。
（二）实验室规则1．在实验室中要穿白大衣，实验中不准做与实验无关的事。
2．必须遵守实验室的各项制度，听从教师指导，尊重实验室工作人员。
3．实验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后才能开始实验。
4．使用仪器时要轻拿、轻放，贵重仪器未经教师允许不得擅自动用。
一旦损坏仪器应及时报损、补领，不得乱拿，乱用别人的仪器。
5．公用仪器和药品，用完后立即归还原处，不可调错瓶塞，以免污染。
仪器使用完毕应清理干净。
节约用水、用电，节约试剂，严格掌握药品用量。
（三）实验室安全注意事项1．实验前应检查仪器是否完整无损，装置是否正确。
天然药物化学实验讲义
《天然药物化学实验讲义》实验须知天然药物化学实验教学是天然药物化学课程的重要组成部分，是使学生进一步理论联系实际，掌握天然药物有效成分提取、分离和检定的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力。
养成严密科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节。
为此，提出下列实验须知：1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。
若发生事故应立即报告指导教师。
2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划，争取准时结束。
实验过程应养成及时记录的习惯。
凡是观察到的现象和结果及有关的重量、体积、温度或其他数据，应立即如实记录，实验完毕后，认真总结，写好报告，提取纯化所得单体产物包好，贴上标签（日期、样品名称、纯度、mp、bp、TLC、重量）交给老师。
3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。
4．公用仪器及药品用完后立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。
节约用水、用电、药用试剂。
严格药品用量。
5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。
实验一薄层板的制备、活度测定及应用一、目的要求1．掌握硅胶薄层板的制备及薄层层析的操作方法2．掌握硅胶薄层活度的测定方法3．应用薄层层析法检测识中草药化学成分二、实验材料薄层层析用硅胶G，硅胶F，羧甲基纤维素钠，0.01%二甲基黄（Dimethy-yellow. P-Dimethylaminoazobenzene），苏丹红（Sudan Ⅲ），靛酚蓝（Indophenol blue 4-Tapnthoquinone-4-dimethyl aminoaniline），苯，微量点样管，10×20cm玻璃板20块，碾钵7套。
天然药物化学总论讲义
第一章总论教学时数：6学时目的与要求：掌握天然药物化学的概念、研究内容；掌握天然药物化学成分提取分离的原理及方法；了解天然药物生物合成途径；熟悉天然药物化学成分结构研究的主要程序及采用的方法；了解天然药物化学的发展史、现状及发展和学习天然药物化学的重要意义。
重点与难点：天然药物化学的概念、研究内容；天然药物化学成分提取分离的原理及方法；天然药物化学成分结构研究的主要程序及采用的方法。
§ 1－1 绪论一、天然药物化学的含义及研究内容1、天然药物化学的含义及研究内容天然药物化学是运用现代科学的理论与方法研究天然物中有效成分的结构特点，理化性质，提取分离方法，结构鉴定及生物合成途径等内容的一门实践性科学。
由于现代科学技术进步，特别是将波谱解析方法（NMR、MS、IR、UV）用于推导化合物的结构，甚至用X－晶体衍射来确定化合物结构的发展，以及分离手段的进步，天然药化的发展速度大为加快，发现的新化合物数目大为增加，微量成分、水溶性成分的分离、提纯；稳定性差的活性物资的分离等也不再是难题了。
天然药物化学本身也已不再是原先的分离提取、结构鉴定，而是逐步发展成生物活性测定指导下的分离提取、结构鉴定，及半合成修饰和全合成紧密结合的一门学科。
目前我国天然药物化学研究依其目的不同可分为3个方面：①以阐明药用生物有效成分，获得具有新结构的化合物或具有生物活性的单体为目的，进行提取分离条件、结构鉴定、一般活性研究；②以解决自然资源有限的活性化合物或其前体的来源为目的，进行半合成及生物转化研究；③以获得高效低毒的创新药为目的，以天然活性化合物为先导物，合成一系列结构类似物进行构效关系研究。
由此可见，天然药物研究已经从最初对天然来源活性化合物被动全盘地接受到积极主动地改进，研究在不断深入。
单体：即化合物。
指具有一定分子量、分子式、理化常数和确定的化学结构式的化学物质。
有效成分：具有生物活性、能起防病治病作用的化学成分。
天然药物化学实验讲义(四实验)
目录天然药物化学实验须知 (2)天然药物化学实验项目 (7)实验一黄柏中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定 (7)实验二槐米中芸香苷的提取、分离与鉴定 (11)实验三八角茴香中挥发油的提取、分离与鉴定 (15)实验四茶叶中咖啡因的提取、分离与鉴定 (19)天然药物化学基本操作技能 (23)天然药物化学实验天然药物化学实验须知（一）实验目的1.验证理论，加深对理论知识的理解。
2.掌握回流提取、连续回流提取、两相溶剂萃取（分液漏斗法）、溶剂回收、薄层色谱等基本操作技能。
3.熟悉结晶法、柱色谱法、化学成分预试验等实验技术。
4.了解四大光谱（紫外、红外、核磁共振、质谱）的基本操作规程。
5.培养观察、分析和解决问题的实际工作能力以及科研动手能力。
（二）实验要求1.实验前，认真阅读实验内容及其相关知识，掌握实验原理、各步操作方法以及实验注意事项。
2.天然药物化学实验时间长及操作多，实验前应作好有关实验内容在时间上的计划，尽量做到实验紧凑有序。
3.尊重实验指导老师，听从实验安排。
4.不迟到，不早退。
因急事中途离开实验室，必须向老师请假。
6.以科学的实事求是态度，认真及时记录操作步骤、实验现象、有关数据、实验结果等。
7.认真如实地填写实验报告，及时上交。
（三）实验室规则1.进实验室必须穿工作服。
2.进实验室后，首先清点本次实验所用仪器设备、溶剂、试剂，熟悉存放位置。
3.实验室严禁吸烟、饮食。
不做与实验无关的事情。
4.实验室应保持安静，不许在实验室大声谈笑、嬉戏打闹。
5.严格遵守安全规则和各种仪器操作规程。
对性能和操作不熟悉以及与本次实验无关的仪器设备，不要随便安装使用，贵重仪器设备，未经老师允许，不得随意动用。
6.正确取用药品、溶剂和试剂，避免交叉污染，确保实验的准确性。
7.实验药品、试剂以及仪器，用后及时归还原位，不要乱拿乱放。
8.保持实验室的干净整洁，实验药渣以及纸屑等固体废弃物投入垃圾箱，易污染环境的废弃液倒入废液缸，有毒、易燃、易挥发的废弃液倒入指定的有盖废液瓶中，一般废弃液冲入下水道。
天然药物化学试验讲义
天然药物化学试验讲义天然药物化学实验武汉⼤学药学院2008.2.21⽬录天然药物化学实验须知 (1)实验⼀薄层板的制备 (2)实验⼆薄层⾊谱应⽤ (4)实验三芦丁的提取与鉴定 (7)实验四草⾖蔻挥发油的提取与鉴定 (12)实验五⼩蘖碱的提取与鉴定(设计性实验) (14)参考⽂献 (16)天然药物化学实验须知在天然药物化学实验中，所⽤的药品、试药、试剂、溶剂⼤多具有挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、甚⾄爆炸性，实验操作⼜经常在加温、加压等情况下进⾏，需要各种热源、电器或其它仪器，操作不慎易造成⽕灾、爆炸、中毒、触电等事故。
但只要加强爱护国家财产和保障⼈民⽣命安全的责任⼼，提⾼警惕，消除隐患，注意实验规则，完全可以避免⼀切事故的发⽣。
实验规则1. 实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作规程。
随时记录实验项⽬及其现象，以撰写正式实验报告。
2 .实验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后⽅可进⾏实验。
实验时不准做与实验⽆关的事情，严禁吸烟，不得擅⾃离开实验室，并应随时注意反应情况，仪器是否漏⽓、破裂等。
3. 药品仪器都是国家财产，须节约爱护使⽤；公⽤物品，⽤后⽴即放归原处，以便他⼈使⽤。
不可调错瓶塞，以免污染。
器⽫⽤后要洗刷⼲净。
4. 操作易燃性有机溶剂，回流、蒸馏、减压蒸馏时，不能明⽕直接加热，要放沸⽯或⼀端封死的⽑细管。
若在加热时发现未放沸⽯则应冷却后再加，防⽌爆沸冲出。
减压系统应装有安全瓶。
加液时应停⽕或远离⽕源，勿漏⽓开⼝，冷凝⽔要通畅。
启封易挥发溶剂瓶盖时，脸⾯要避开瓶⼝慢慢开⼝，以防⽓体冲脸上，危机尊容。
5.有毒、腐蚀性药品应妥善保管，操作后要⽴即洗⼿。
勿沾及五官、创⼝及⾝体暴露部位，以免中毒、损伤⽪肤。
6.实验中，应在通风橱中使⽤毒⽓或腐蚀性⽓体，必要时，可戴防护⽤具进⾏⼯作。
7.若将玻璃管插⼊塞中时，可在塞孔中涂些⽔或⽢油等润滑剂，⽤布包住玻璃管使其旋转⽽⼊，防⽌折断割伤。
8.实验台上勿放置与实验⽆关物品，随时保持⽔槽、仪器、桌⾯、地⾯整洁。
天 然 药 物 化 学 实 验 讲 义[1]
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天然药物化学实验讲义苏州大学药学系天然药物化学实验讲义目录 (1)实验一氧化铝活度测定 (2)实验二薄层层析展开剂的选择 (5)实验三麻黄中麻黄碱的提取、分离，检识 (6)实验四槐米中芸香苷的提取、分离，检识 (9)实验五虎杖中大黄素提取、分离、检识 (13)实验六中药中化学成分的预试 (17)实验一氧化铝活度测定一、目的要求1．掌握薄层层析制板方法2．了解吸附剂的活度测定法二、实验原理薄层板根据在制备过程中是否加入粘合剂分为粘合薄层和非粘合薄层二种，加入粘合剂的为硬板，不加粘合剂的多为软板（亦有为硬板，如纤维素板）。
粘合剂常用的有羧甲基纤维素钠（CMC-Na）或煅石膏（G）。
加羧甲基纤维素钠制备的板机械强度较好，但对一些需加热的腐蚀性显色剂不适用。
加石膏制备的板性能相反，机械强度较差，但适合于使用需加热的腐蚀性显色剂。
对层析用吸附剂活度的测定，主要是利用吸附剂自身对某些偶氮染料吸附力的大小和在薄层板上展开距离来确定，故用测量比移值的方法来确定吸附剂的极性大小和强度级数.三、实验材料1．材料：氧化铝（层析用，中性70~325目）、四氯化碳（重蒸馏）、偶氮苯（Ajobenjene）、对甲氧基偶氮苯（P-methoxyajobenjene）、苏丹黄（sudan I benjen-azo-β- naphthot）、苏丹红（SudanII tetra-ajobenjen-β--naphthot）、对氨基偶氮苯（P-aminoajobenene）、薄层层析用硅胶G、羧甲基纤维素钠（CMC-Na）2．仪器：天平、研钵、药匙、玻璃板（大、中、小）、烘箱、干燥器、点样毛细管、小层析缸四、实验内容（一）薄层层析薄层板的制备1．氧化铝薄层取表面光滑，直径均一的玻璃棒一支，依据所制备薄层的宽度、厚度要求，在玻璃棒两端各包上橡皮胶，也可以套上塑料管或橡皮管，一般以0.25（用于分析分离）~1mm（用于制备分离）为宜。
在一端已包好的橡皮胶上，再多包5~6层橡皮胶或一段橡皮管，作为涂铺时的固定边，以防止滑动时边缘不整齐。
天然药物化学实验讲义
天然药物化学实验讲义目录一、芦荟粗多糖的提取及鉴定二、大黄中蒽醌苷元的提取、分离与鉴别三、槐米中芦丁、槲皮素的提取、分离与鉴别四、八角茴香挥发油的提取及鉴别五、黄柏中生物碱的提取、分离和鉴别六、茶叶中咖啡因的提取前言《天然药物化学实验》是一门实践性很强的课程，理论教学与实验教学是一个不可分割的完整体系。
通过实验课的学习使学生能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，掌握由天然药物中提取、分离、精制有效成分，并对其进行鉴别的基本方法和技能，提高学生独立动手、观察分析、解决问题的能力，培养学生严谨的科学态度和良好的科研作风。
实验一芦荟粗多糖的提取及鉴定一、实验目的1、水提醇沉法提取多糖的原理和方法2、掌握高速冷冻离心机、旋转蒸发器等仪器的用法3、了解芦荟多糖在医药中的应用二、实验原理芦荟的多糖类可增强人体对疾病的抵抗力，治愈皮肤炎、慢性肾炎、膀胱炎、支气管炎等慢性病症，抑制、破坏异常细胞的生长的作用，从而达到抗癌目的。
植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖，所以本实验采用水提醇沉法提取芦荟中的粗多糖。
三、试剂、材料及仪器1、试剂：盐酸、无水乙醇、丙酮、乙醚、葡萄糖对照品、苯酚、浓硫酸2、材料和仪器：芦荟叶、烧杯、移液管、量筒、容量瓶、玻璃棒、旋转蒸发仪、电子天平、真空泵、电热恒温水浴锅、紫外-可见分光光度计、高速离心机、真空冷冻干燥机。
四、实验方法与步骤1、取芦荟鲜叶50g，洗净，去掉叶尖和叶底，在蒸馏水水中浸泡0.5h,已除去由表面滲出的黄色液体。
然后切去表皮，将内层凝胶（匀浆后）置于烧杯中，加入三倍蒸馏水，置于55℃恒温水浴锅中加热浸提4h。
2、浸提液离心分离（2500r/min，5min）并过滤（直接6层纱布过滤），将所得液汁减压浓缩（至30ml），用6mol/L的盐酸调pH值3.2左右，向经过调酸处理的芦荟凝胶浓缩汁中缓慢加入6倍量的95％乙醇，边加边搅拌大约需要15～30min，室温下静置2h，离心分离(2500r/min，7min)得多糖沉淀。
天然药物化学实验讲义
实 验 一苦参中氧化苦参碱和苦参碱的提取、分离、鉴定一、目的要求1、掌握用离子交换法提取生物碱的原理和方法。
2、掌握和熟练应用渗漉提取法及索式提取器连续回流提取操作。
3、掌握生物碱的常规定性检识方法。
二、概述苦参系豆科植物苦参（Sophora fiavescens ）的根，具有清热利湿、祛风杀虫、解毒等功效。
生物碱是苦参中的主要有效成分，主要有苦参碱、氧化苦参碱、羟基苦参碱、苦参醇碱、苦参烯碱、安那吉碱、巴普叶碱等。
其中以氧化苦参碱含量最高，在苦参总碱中，氧化苦参碱的含量约占70%左右。
N N ONN O OH苦参碱 氧化苦参碱 苦参醇碱 苦参碱有四种形态，可溶于冷水、苯、乙醚或二硫化碳，难溶于石油醚，用H 2O 2处理可转变为氧化苦参碱。
氧化苦参碱为无色柱状结晶，可溶于水、氯仿、乙醇，难溶于乙醚、石油醚，用SO 2处理可转变为苦参碱。
三、实验原理苦参生物碱有一定碱性，可与酸结合成盐，因此用酸水提取后，总生物碱呈阳离子状态而被阳离子交换树脂所交换，再用氨水碱化后使生物碱游离，以有机溶剂回流提取。
四、实验内容1、提取苦参粗粉(100g)以0.1%盐酸100ml 湿润半小时，装入渗漉筒中， 以0.1%盐酸900ml 渗漉，速度1-2滴/秒。
渗漉液通过装湿重60g(约60ml)的阳离子交换树脂柱交换，交换速度1-2滴/秒。
（注意测定不同交换时间pH值的变化，并进行沉淀反应测定）吸碱树脂将树脂倒入烧杯中，以蒸馏水洗至洗液无色抽滤后室温晾干。
将树脂置烧杯中，加入浓氨水，拌匀（加氨水量以手握成团但不粘手为度），密闭放置碱化树脂放置20分钟，装入滤纸袋置索氏提取器中以二氯甲烷连续回流提取2.5小时，回收二氯甲烷至尽，蒸尽水分。
残留物以丙酮回流残留物，抽滤，溶液回收部分丙酮，加盖放置，结晶，抽滤，干燥粗品总碱结晶2、色谱鉴定色谱板：预制硅胶板样品：精品总碱乙醇溶液（自制）对照品；氧化苦参碱的乙醇溶液展开剂：氯仿：甲醇：氨水（实验室准备）显色剂：改良碘化铋钾试剂结果：样品斑点与对照品斑点比较位置并计算R f值。
天然药物化学实验讲稿
天然药物化学实验讲稿第⼀章黄柏中⼩檗碱的提取、分离与鉴定教学⽬的要求掌握黄柏中⼩檗碱(季胺型⽣物碱)的提取原理和⽅法。
掌握⼲法装柱和湿法装柱的操作⽅法1、掌握鉴定⼩檗碱(已知化合物)的⼀般⽅法。
教学重点难点季铵型⽣物碱的理化性质及提取⽅法。
2、渗漉法的操作过程及注意事项。
3、结晶法的注意事项4、掌握薄层⾊谱鉴定的⽅法实验⼀黄柏中盐酸⼩檗碱的提取（⼀）实验原理根据黄柏中含粘液质较多的特点，⾸先⽤⽯灰乳使粘液质⽣成难溶于⽔的钙盐，⽤碱⽔⾃黄柏中提出⼩檗碱，再加盐酸使其转化为盐酸⼩檗碱沉淀析出。
⼩檗碱能缓缓溶解于⽔中，在冷⼄醇中的溶解度不⼤，但易溶于热⽔或热⼄醇，难溶于苯、氯仿、丙酮。
⼩檗碱与酸结合脱去⼀分⼦⽔⽽成盐。
⼩檗碱盐酸盐在冷⽔中溶解度⼩，较易溶于沸⽔，⼏不溶于⼄醇，⼩檗碱的硫酸盐、磷酸盐在⽔中溶解度较⼩，与⼤分⼦有机酸⽣成的盐在⽔中的溶解度很⼩。
黄柏中主要含有⼩檗碱，其结构如下OO NH O OMe OMeCHO季铵式（红棕⾊）醇式（黄⾊）醛式（黄⾊）⼩檗碱的三种互变异构体川黄柏含⼩檗碱约1.37％～5.8％，关黄柏含⼩檗碱约0.60％～1.64％。
(⼆)实验⽅法实验⼆黄柏中盐酸⼩檗碱的纯化及鉴定⼀、纯化1.湿法装柱⾊谱法吸附剂：中性氧化铝(100～200⽬)35g置于烧杯中，加⼊50ml 95％⼄醇，调成浆状，湿法装柱。
上样：取50～100mg⾃制盐酸⼩檗碱，溶于少量95％热⼄醇中，加⼊⾊谱柱中。
洗脱：95％⼄醇洗脱，收集开始流出的鲜黄⾊带，即为纯化的盐酸⼩檗碱。
2.结晶法抽率上次提取液，将得到的滤饼⽤少量⽔加热溶解，趁热抽率，滤液放冷等待析晶，再抽率得到晶体，即盐酸⼩檗碱纯品。
⼆、薄层⾊谱鉴定将提取分离出的盐酸⼩檗碱样品与盐酸⼩檗碱的对照品共薄层⾊谱，⽐较其Rf值是否⼀致。
吸附剂：硅胶G薄层板展开剂：①苯⼀醋酸⼄酯⼀异丙醇⼀甲醇⼀⽔(6：3：1.5：l.5：0.3)，氨蒸汽饱和。
②氯仿-甲醇-氨⽔(15：8：1) 显⾊剂：改良碘化铋钾试剂1、渗漉前为什么要加⼊⽯灰乳搅拌？2. 提取时加氯化钠的作⽤是什么？3、在制备薄层⾊谱板时有哪些注意事项？第四章芦丁的提取、分离、精制和鉴定1、掌握碱溶酸沉法提取黄酮类化合物的原理及操作。
天然药物化学实验课
实验三 槐米中芦丁的提取分离、鉴定及槲皮素的制备
芦丁又叫芸香苷，广泛存在于植物中。其中以槐花米和荞麦叶中含量 最高，使用最多的是槐花米。
槐花米为豆科植物槐（Sophora japonica L.）的未开放花蕾。味苦性凉、 具有清热凉血、止血的功效。炒炭常用来治疗各种出血症，如肠风便血、 痔血、尿血、崩漏下血等。
实验二 大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定
大黄是常用中药，具有泻下攻积、清热泻火、解毒止血、活血化淤的 功效。大黄种类较多，药典收载的大黄品种是蓼科植物掌叶大黄、唐 古特大黄及药用大黄的根及根茎。大黄药材中主要含有蒽醌类化合物 及其苷，其中蒽醌苷类化合物是其泻下攻积作用的主要成分，某些游 离的蒽醌如大黄酸、大黄素具有明显的抗菌活性。
12 3标
1 号极性大，高度小，为大黄酸；2 号与标准品高度一致，为大黄素；3 号 为混合物
（2）呈色反应 a. 碱液反应 分别取三部分萃取物的乙醇溶液少量，置于有穴白瓷板孔穴中加 2%NaOH 溶液数滴，观察颜色变化。 b.醋酸镁反应 分别取三部分萃取物的乙醇溶液少量，置于白瓷板孔穴中，滴加 0.5%醋酸 镁乙醇溶液数滴，观察颜色变化。
（2）连续回流提取的特点 a.以少量的溶剂一次加入，便可将有效成分提取完全。
b.索氏提取器容量小，故只适于少量原料的提取。 c.该法提取液受热时间长，因此对受热易分解的成分不宜用此法。
1.装有原料的滤纸筒 2.提取器 3.溶剂蒸气上升管 4.虹吸回流 管
三、实验内容（12 学时） 1．提取
补骨脂种子粗粉 15g 置于索氏提取器的滤纸筒中用 100ml 乙醇连续回流提取 2 小时
抽滤，水洗至中性
沉淀
NaOH 水溶液
（主要含有大黄素）
加 HCl 酸化，调 PH=2，抽滤，水洗
天然药物化学实验讲义
《天然药物化学实验讲义》实验须知天然药物化学实验教学是天然药物化学课程的重要组成部分，是使学生进一步理论联系实际，掌握天然药物有效成分提取、分离和检定的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力。
养成严密科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节。
为此，提出下列实验须知：1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。
若发生事故应立即报告指导教师。
2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划，争取准时结束。
实验过程应养成及时记录的习惯。
凡是观察到的现象和结果及有关的重量、体积、温度或其他数据，应立即如实记录，实验完毕后，认真总结，写好报告，提取纯化所得单体产物包好，贴上标签（日期、样品名称、纯度、mp、bp、TLC、重量）交给老师。
3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。
4．公用仪器及药品用完后立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。
节约用水、用电、药用试剂。
严格药品用量。
5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。
实验一薄层板的制备、活度测定及应用一、目的要求1．掌握硅胶薄层板的制备及薄层层析的操作方法2．掌握硅胶薄层活度的测定方法3．应用薄层层析法检测识中草药化学成分二、实验材料薄层层析用硅胶G，硅胶F，羧甲基纤维素钠，0.01%二甲基黄（Dimethy-yellow. P-Dimethylaminoazobenzene），苏丹红（Sudan Ⅲ），靛酚蓝（Indophenol blue 4-Tapnthoquinone-4-dimethyl aminoaniline），苯，微量点样管，10×20cm玻璃板20块，碾钵7套。
天然药物化学讲义
第一章总论〔一〕常用溶剂的特点：环己烷，石油醚，苯，氯仿，乙醚，乙酸乙酯，正丁醇，丙酮，乙醇，甲醇，水大极性：小————大亲脂性：大————小亲水性：小————1．比水重的有机溶剂：氯仿2．与水分层的有机溶剂：环己烷~ 正丁醇3．能与水分层的极性最大的有机溶剂：正丁醇4．与水可以以任意比例混溶的有机溶剂：丙酮~ 甲醇5．极性最大的有机溶剂：甲醇6．极性最小的有机溶剂：环己烷7．介电常数最小的有机溶剂：石油醚8．常用来从水中萃取苷类、水溶性生物碱类成分的有机溶剂：正丁醇9．溶解范围最广的有机溶剂：乙醇〔二〕各种提取方法：及特点常见的提取方法有：溶剂提取法、水蒸气蒸馏法、升华法。
其中，溶剂提取法应用最广。
1．溶剂提取法（1〕溶剂提取法的原理：根据相似者相溶原理，选择与化合物极性相当的溶剂将化合物从植物组织中溶解出来，同时，由于某些化合物的增溶或助溶作用，其极性与溶剂极性相差较大的化合物也可溶解出来。
（2〕各种溶剂提取法提取方法溶剂操作提取效率使用范围备注溶剂浸渍法水或有机溶不加热效率低各类成分，尤出膏率低，易剂遇热不稳定发霉，需加防成分腐剂渗漉法有机溶剂不加热脂溶性成分消耗溶剂量大，费时长煎煮法水直火加热水溶性成分易挥发、热不稳定不宜用回流提取法有机溶剂水浴加热脂溶性成分热不稳定不宜用，溶剂量大连续回流提有机溶剂水浴加热节省溶剂、效亲脂性较强用索氏提取取法率最高成分器，时间长超临界流体超临界流体收率高对热不稳定萃取法常用 CO2的极性大分子量大的连续回流提取法的原理：溶剂回流及虹吸原理2 水蒸气蒸馏法：适用于具有挥发性、能随水蒸汽蒸馏而不被破坏、难溶或不溶于水的成分的提取，如挥发油、小分子的香豆素类、小分子的醌类成分，麻黄碱。
3升华法：固体物质受热不经过熔融，直接变成蒸汽，遇冷后又凝固为固体化合物，称为如升华。
中草药中有一些成分具有升华的性质，可以利用升华法直接自中草药中提取出来。
樟脑、咖啡因。
二、别离与精制：及特点〔一〕根据物质溶解度差异进行别离1．结晶及重结晶法利用不同温度可引起物质溶解度的改变的性质以别离物质。
Exp1天然药物化学实验讲义
目 录
• 实验概述 • 实验准备 • 实验操作 • 实验结果与数据分析 • 实验总结与展望
01 实验概述
实验目的
掌握天然药物化学实 验的基本操作和技能。
了解天然药物化学成 分的生物活性及其在 医药、保健品等领域 的应用。
学习从天然植物中提 取、分离和鉴定有效 成分的方法。
实验结果
通过本实验，学生可以分离和鉴定出天然药物中的多种化学成分，并对 其结构特点和生物活性进行初步了解。实验结果可为后续的天然药物研 究和开发提供基础数据。
实验中遇到的问题及解决方案
问题1
溶剂萃取时出现乳化现象。
解决方案
在萃取过程中加入适量的盐或改 变萃取温度，以消除乳化现象。
问题2
色谱分离时谱峰拖尾或分叉。
加强实验教学中的师生互动， 鼓励学生自主设计实验方案， 培养其创新能力和团队合作精 神。
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试剂的配制方法
按照试剂的配制方法，准 确配制试剂，确保实验结 果的准确性。
试剂的储存和处理
根据试剂的特点，选择合 适的储存和处理方式，以 保证实验的顺利进行。
实验仪器设备检查
仪器设备的种类和数量
根据实验需要，选择合适的仪器设备种类和数 量。
仪器设备的性能和状态
确保仪器设备的性能和状态良好，能够满足实 验要求。
实验原理
天然药物化学成分的提取
利用不同溶剂和物理方法（如超声波、加热 等）将植物中的有效成分提取出来。
分离纯化
通过溶解度差异、分子量大小、吸附等原理，采用 重结晶、萃取、柱层析等技术对提取物进行分离纯 化。
鉴定方法
利用光谱（如红外光谱、核磁共振谱）、质 谱和化学方法对分离得到的化合物进行结构 鉴定。
天然药物化学实验讲义
天然药物化学实验讲义天然药物化学实验讲义重庆医科⼤学药学院⽬录⼀、黄柏中⽣物碱的提取、分离和鉴别⼆、槐⽶中芦丁、槲⽪素的提取、分离与鉴别三、穿⼼莲中穿⼼莲内酯的提取、分离与鉴别四、⼋⾓茴⾹挥发油的提取及鉴别五、⼤黄中蒽醌苷元的提取、分离与鉴别六、苦参⽣物碱的提取、分离与鉴别前⾔《天然药物化学实验》是⼀门实践性很强的课程，理论教学与实验教学是⼀个不可分割的完整体系。
通过实验课的学习使学⽣能印证并加深理解课堂讲授的理论知识，掌握由天然药物中提取、分离、精制有效成分，并对其进⾏鉴别的基本⽅法和技能，提⾼学⽣独⽴动⼿、观察分析、解决问题的能⼒，培养学⽣严谨的科学态度和良好的科研作风。
N +O O OMe OMe 实验⼀黄柏中⼩檗碱的提取、分离和鉴别【实验⽬的】1.掌握从黄柏中提取⼩檗碱的原理和⽅法。
2.掌握⼩檗碱的理化性质和鉴别⽅法3.熟TLC 的基本操作以及在中药有效成分提取分离中的应⽤。
【实验原理】 1.⼩檗碱(berberine)，含量为1.4%-4%(川黄柏含量较⾼)性状：黄⾊结晶，有5.5个结晶⽔，mp145℃。
溶解性：能缓缓溶于冷⽔中（1:20），微溶于冷⼄醇（1:100），易溶于热⽔和熱⼄醇，微溶或不溶于苯、氯仿和丙酮，硝酸盐极难溶于⽔，盐酸盐微溶于冷⽔（1:500）但较易溶于沸⽔，硫酸盐和枸橼酸盐在⽔中溶解度较⼤（1:30），盐酸⼩檗碱为黄⾊结晶，含2分⼦结晶⽔，220℃时分解并转变为棕红⾊⼩檗红碱，285℃时完全熔融。
2.⼩檗碱为季铵碱，其游离型在⽔中溶解度较⼤，其盐酸盐在⽔中溶解度较⼩。
利⽤⼩檗碱的溶解性及黄柏中含黏液质的特点，⾸先⽤⽯灰乳沉淀黏液质，⽤碱⽔提出⼩檗碱，再加盐酸使其转化为盐酸⼩檗碱沉淀析出。
【实验仪器与试剂】1.1000、500、100、10ml 烧杯，10ml 试管，试管架，托盘天平，量筒，三⾓漏⽃，洗瓶，布⽒漏⽃，电炉，10×20cm 薄层板，10×20cm 薄层⾊谱缸，点样⽑细管，紫外灯（仪），玻棒，⽜⾻匙，纱布，脱脂棉。
《天然药物化学实验讲义》
《天然药物化学实验讲义》实验须知实验一薄层板的制备、活度测定及应用实验二粉防已生物碱的提取、分离与鉴定实验三掌握掌叶防已碱的提取及硫酸延胡索乙素的制备实验四虎杖中游离羟基蒽醌成分的提取和分离实验五芦丁的提取、分离与鉴定实验六秦皮中七叶苷、七叶内酯的提取、分离和鉴定实验七薯蓣皂苷元的提取和鉴别实验八中草药成分鉴别法附录一常用试剂及配制方法附录二常用有机溶媒的性质及回收方法实验须知1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。
若发生事故应立即报告指导教师。
3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。
4．公用仪器及药品用完后立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。
节约用水、用电、药用试剂。
严格药品用量。
5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。
实验一薄层板的制备、活度测定及应用一、目的要求1．掌握薄层板的制备及薄层层析的操作方法2．掌握吸附剂活度测定的原理及方法3．应用薄层层析法检测识中草药化学成分二、薄层板的制备1．不加粘合剂的薄层涂布法（1）氧化铝薄层将吸附剂置于薄层涂布器中，调节涂布器的高度，向前推动，即得均匀薄层。
本实验主要用下述简易操作涂布薄层，取表面光滑，直径统一的玻璃一支，依据所制备薄层的宽度、厚度要求，在玻璃棒两端套上厚度为0.3~1mm的塑料圈或金属环，并在玻璃棒一端一定距离处套上较厚的塑料圈或金属环，以使玻璃棒向前推动时能保持平行方向，操作时，将氧化铝粉均均地铺在玻璃板上，匀速向前推动。
（2）纤维素薄层一般取纤维素粉1份加水约5份，在烧杯中混合均匀后，倒在玻璃板上，轻轻振动，使涂布均匀，水平放置，待水分蒸发至近干，于100±2℃干燥30~60分钟即得。
(整理)天然药物化学实验详解
《天然药物化学实验讲义》实验须知天然药物化学实验教学是天然药物化学课程的重要组成部分，是使学生进一步理论联系实际，掌握天然药物有效成分提取、分离和检定的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力。
养成严密科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节。
为此，提出下列实验须知：1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。
若发生事故应立即报告指导教师。
2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划，争取准时结束。
实验过程应养成及时记录的习惯。
凡是观察到的现象和结果及有关的重量、体积、温度或其他数据，应立即如实记录，实验完毕后，认真总结，写好报告，提取纯化所得单体产物包好，贴上标签（日期、样品名称、纯度、mp、bp、TLC、重量）交给老师。
3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。
4．公用仪器及药品用完后立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。
节约用水、用电、药用试剂。
严格药品用量。
5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。
实验一薄层板的制备、活度测定及应用一、目的要求1．掌握硅胶薄层板的制备及薄层层析的操作方法2．掌握硅胶薄层活度的测定方法3．应用薄层层析法检测识中草药化学成分二、实验材料薄层层析用硅胶G，硅胶F，羧甲基纤维素钠，0.01%二甲基黄（Dimethy-yellow. P-Dimethylaminoazobenzene），苏丹红（Sudan Ⅲ），靛酚蓝（Indophenol blue 4-Tapnthoquinone-4-dimethyl aminoaniline），苯，微量点样管，10×20cm玻璃板20块，碾钵7套。
天然药物化学实验讲义
实验一虎杖中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定虎杖为蓼科植物虎杖的根及根茎。
别名阴阳莲，花斑竹。
味苦、性微寒。
能清热解毒、祛风利湿、利尿通淋、祛痰、止咳、通经等。
主要用于湿热黄疸、风湿痹痛、淋浊带下、经闭、烫伤。
虎杖中含有较多的羟基蒽醌类成分及二苯乙烯类成分。
其中主要有大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素-6-甲醚、大黄素3-D-葡萄糖苷、白藜芦醇、白藜芦醇苷及β-谷甾醇、鞣质等。
虎杖得主要药理作用有抗菌、抗病毒及镇咳平喘、常用来治疗急性炎症、烧烫伤、肝炎、气管炎等。
一、实验目的和要求1、掌握pH梯度法萃取分离酸性成分的一般方法；2、掌握硅胶薄层层析的基本方法和操作；3、了解蒽醌类成分的一般性质及鉴别反应。
二、实验原理根据虎杖中游离蒽醌酸性不同，采用乙醇提取、转溶于乙醚，再以不同酸度的碱水自乙醚中分别萃取不同酸性的蒽醌，以达到分离混合蒽醌类成分的目的。
三、仪器、试剂与材料（略）三、实验步骤1、乙醇总提取物的制备取虎杖粗粉50g，于1000ml圆底烧瓶中，以95%乙醇回流提取3次，第1次用乙醇100ml，回流1小时，第二次用乙醇60ml，回流30min，第三次用乙醇50ml，回流30min，合并乙醇提取液，放置，如有沉淀生成，再抽滤1次。
减压回收乙醇至糖浆状，得乙醇总提取物，将此乙醇总提取物趁热转移至250ml三角烧瓶中，并以少量热乙醇洗涤圆底烧瓶后并入三角烧瓶中。
2、总游离蒽醌的提取在盛有乙醇总提取物的三角烧瓶中加入50ml乙醚，不断振摇后放置，将上层乙醚溶液倾入另一500ml 三角烧瓶中，瓶内剩余糖浆状物再以乙醚10ml，振摇，放置，倾出乙醚液。
同法操作6次左右，至乙醚呈色较浅时为止，合并乙醚提取液，如果浑浊，抽滤1次。
乙醚溶液即含有游离蒽醌。
取2ml乙醚液水浴挥干乙醚后，用5ml丙酮溶解，以作薄层层析鉴定用。
3、各个蒽醌的分离（1）强酸性成分—大黄酸的分离将含有游离蒽醌的乙醚溶液移至250ml的分液漏斗中，加5%NaHCO3水溶液10ml，振摇萃取（NaHCO3水溶液先用pH试纸测其pH值），放置待分层，放出下层NaHCO3水溶液，置于另一三角烧瓶中。
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天然药物化学实验武汉大学药学院2008.2.21目录天然药物化学实验须知 (1)实验一薄层板的制备 (2)实验二薄层色谱应用 (4)实验三芦丁的提取与鉴定 (7)实验四草豆蔻挥发油的提取与鉴定 (12)实验五小蘖碱的提取与鉴定(设计性实验) (14)参考文献 (16)天然药物化学实验须知在天然药物化学实验中，所用的药品、试药、试剂、溶剂大多具有挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、甚至爆炸性，实验操作又经常在加温、加压等情况下进行，需要各种热源、电器或其它仪器，操作不慎易造成火灾、爆炸、中毒、触电等事故。
但只要加强爱护国家财产和保障人民生命安全的责任心，提高警惕，消除隐患，注意实验规则，完全可以避免一切事故的发生。
实验规则1. 实验前必须预习实验内容，了解实验原理和操作规程。
随时记录实验项目及其现象，以撰写正式实验报告。
2 .实验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后方可进行实验。
实验时不准做与实验无关的事情，严禁吸烟，不得擅自离开实验室，并应随时注意反应情况，仪器是否漏气、破裂等。
3. 药品仪器都是国家财产，须节约爱护使用；公用物品，用后立即放归原处，以便他人使用。
不可调错瓶塞，以免污染。
器皿用后要洗刷干净。
4. 操作易燃性有机溶剂，回流、蒸馏、减压蒸馏时，不能明火直接加热，要放沸石或一端封死的毛细管。
若在加热时发现未放沸石则应冷却后再加，防止爆沸冲出。
减压系统应装有安全瓶。
加液时应停火或远离火源，勿漏气开口，冷凝水要通畅。
启封易挥发溶剂瓶盖时，脸面要避开瓶口慢慢开口，以防气体冲脸上，危机尊容。
5.有毒、腐蚀性药品应妥善保管，操作后要立即洗手。
勿沾及五官、创口及身体暴露部位，以免中毒、损伤皮肤。
6.实验中，应在通风橱中使用毒气或腐蚀性气体，必要时，可戴防护用具进行工作。
7.若将玻璃管插入塞中时，可在塞孔中涂些水或甘油等润滑剂，用布包住玻璃管使其旋转而入，防止折断割伤。
8.实验台上勿放置与实验无关物品，随时保持水槽、仪器、桌面、地面整洁。
9.实验结束时，应将门、窗、水、电、煤气关好，室内打扫干净，并清点仪器后方可离开实验室。
安全防火须知1.实验室存放易燃性有机溶剂时要远离火源，存量不得超过500ml。
2.在进行易燃性有机溶剂实验时，须按照操作规程进行。
不可将易挥发、易燃性有机溶剂倒入水槽或废液缸内。
3.烘箱内不能烘盛有易燃性溶剂的器皿。
4.消防器材、砂箱、石棉布、灭火器等应放在方便固定的地点，不能随意移动，均应处于备用状态。
5.万一不慎着火，要沉着冷静积极抢救。
应立即切断室内电源和火源，用石棉布将着火部位盖严，使其隔绝空气而熄灭。
或视火势情况选用适当灭火器材进行灭火。
在实验室使用二氧化碳灭火器较好，它具有不腐蚀、不导电等优点。
实验室常见的事故如下，应予以特别注意：1.蒸馏或回流时，发现未放沸石，未等溶液冷却就补加沸石，结果溶液冲出瓶外，容易引起火灾。
2.蒸馏易燃物时，未通冷却水，大量蒸气逸出易引起火灾。
3.蒸馏易燃物时塞子漏气引起火灾。
4.用三角烧瓶做减压装置的受器，结果炸裂。
5.减压操作结束后，放气太快，使压力计冲破。
6.使用真空干燥器时，未关闭真空泵就直接开干燥器的放气阀，结果使泵内的机油被吸到干燥器中，使样品被污染等。
实验一薄层板的制备一、目的要求1 掌握各种薄层板的制备方法；2 了解各种薄层板的制备原理、特点及应用范围。
二、制备方法1．不加粘合剂的薄层涂布法（1）氧化铝薄层将吸附剂置于薄层涂布器中，调节涂布器的高度，向前推动，即得均匀薄层，本实验主要用下述简易操作涂布薄层，取表面光滑，直径均一的玻璃棒一以，依据所制备薄层的宽度、厚度要求，在玻璃棒两端套上厚度为0.3~1mm的塑料圈或金属环，并在玻璃棒一端一定距离处套上较厚的塑料圈或金属环，以使玻璃棒向前推动时能保持平行方向，操作时，将氧化铝粉均匀地涂布在玻璃板上。
（2）纤维素薄层一般取纤维素粉1份加水约5份，在烧杯中混合均匀后，倒在玻璃板上，轻轻振动，使涂布均匀，水平放置，待水分蒸发至近干，于100±2℃干燥30~60分钟即得。
（3）聚酰胺薄层取锦纶丝（无色干净废丝即可）用乙醇加热浸泡2~3次，除去腊质等，称取洗净的锦纶丝1克，加85%甲酸5ml，在水浴上加热使溶。
再加70%乙醇6ml，继续加热使完全溶解成透明胶状溶液。
将此溶液适量倒在水平放置的，用清洁液洗净在玻璃片上，并自然向周围摊匀，使盘中的水蒸气能熏湿薄层，盘子加玻璃板盖严密，薄层放置约1小时完全固化变不透明白色，再放数小时后，再泡在水流中洗去甲酸，先在空气中晾干，后在烘箱中80℃恒温加热活化15分钟，冷后置干燥器贮存备用。
无粘合剂氧化铝薄层的简易铺层法A．调节薄层宽度、厚度的塑料圈或金属环B．防止玻棒左右滑动的固定环C．玻璃板D．氧化铝薄层2．加粘合剂薄层的涂布法（1）硅胶G薄层取硅胶G或硅胶GF1份，置烧杯中加水约3份混合均匀，放置片刻，随即用药匙取一定量；分别倒在一定大小的玻璃片上（或倒入涂布器中），推动涂布、均匀涂布成0.25~0.5mm厚度，轻轻振动玻璃板，使薄层面平整均匀，在水平位置放置，待薄层发白近干，于烘箱中100℃烘干活化0.5~1小时，冷后贮于干燥器内备用。
活化烘干温度时间可依需要调正。
一般鉴识水溶性成分或一些极性大的成分时，所用薄层板只在空气中自然干燥，不经活化即可贮存备用。
（2）硅胶（H）羧甲基纤维素钠（CMC-Na）薄层，取羟甲基纤维素钠0.2g，溶于25ml 水中，在水浴上加热搅拌使完全溶解*倒入烧杯中加薄层层析用硅胶（颗粒度10~40μ的约6~8g），混合成均匀的稀糊，按照硅胶G薄层涂布法制备薄层。
或取0.8%羧甲基纤维素钠10毫升，倒入广口瓶（高约10~12cm）中，然后逐步加入薄层层析用硅胶3.3克，不断振摇成均匀的稀糊，把两块载薄片面对面地合在一起，这样每片只有一面与硅胶糊接触。
使薄片浸入硅胶稀糊中，然后慢慢取出，分开二块薄片，将末粘附硅胶糊的那一面水平放在一张清洁的纸上，让自然阴干100℃下烘30分钟，冷后于干燥器内备用。
未消耗的硅胶稀糊可贮存在广口瓶加盖，以供再用。
氧化铝G薄层、氧化铝羧甲基纤维素钠薄层制备方法同上，一般所需氧化铝量比硅胶稍多。
目前国内外市场上均有预先制好的薄层板，底板用玻璃、塑料、铝片等，可按需要用划玻璃刀划割，也有用剪刀剪成所要的大小，使用方使，价格贵些。
3．特殊薄层的制备根据分离工作的特殊需要，可制以下几种特制薄层。
（1）酸、碱薄层和pH缓冲薄层为了改变吸附剂的酸碱性，以改进分离效果，可在吸附剂中加入稀酸溶液（如0.1~0.5N 草酸溶液）代替水制成酸性氧化铝薄层使用，硅胶微呈酸性，可在铺层时用稀碱溶液（如0.1~0.5N氢氧化钠溶液）代替水制成碱性的硅胶薄层，当用乙酸钠、磷酸盐等不同PH的缓冲液代替水铺层，制成一定PH缓冲的薄层。
（2）络各薄层硝酸银薄层的制法，可在吸附剂中加入5~25%硝酸银水溶液代替水制成均匀糊状，再按常法铺成薄层。
制成薄层避光阴干，于105℃活化半小时后避光贮存。
制成的薄层以不变成灰色为好，可保存三天内应用。
也可先把硝酸银用少量水溶解，再用甲醇稀释成10%溶液，把预先制好的硅胶GA薄层浸入此溶液中约1分钟，取出避光阴干按上法活化、贮存。
实验二薄层色谱应用一、实验目的1 掌握薄层色谱的点样、展开及显色检识的操作方法；2 了解薄层色谱在鉴别各类天然产物中化学成分中的应用；3 了解在薄层上进行原位化学反应的方法。
二、实验内容（一）定性点滴反应1．样品（1）薄荷油（4）甘草次酸乙醇液（2）苦参碱乙醇液（5）原儿茶酸乙醇液（3）芦丁甲醇溶液2．检出试剂（1）三氯化铁1%乙醇溶液（4）碘化铋钾试液（2）三氯化铝1%乙醇溶液（5）香草醛一硫酸溶液（3）醋酐-浓硫酸试液3．试验方法取硅胶CMC-Na薄层板1~2块，用软铅笔按下图划线，将各样品先滴加于相应的格子中，再将各剂分别自空白起逐格点加试剂，观察并记录反应变化。
（二）鉴别中草药中的化学成分1. 丹参中丹参酮ⅡA的检识（1）硅胶CMC-Na 薄层板（2）样品: ①丹参乙醚提取物②丹参酮ⅡA 对照品（3）展开剂①苯②乙酸乙酯③苯-乙酸乙酯（19:1）由展层结果判断选用何种展开剂为最合适？2.苦参中氧化苦参碱的检识（1）2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板（2）样品: ①苦参中提取的总生物碱②氧化苦参碱（3）展开剂氯仿:甲醇: 浓氨试液(5:0.6:0.3) 10℃以下放置的下层液（4）显色剂碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液记录实验结果.（三）薄层析上原位化学反应本法是直接在薄层板上进行有机化学反应，又称原位反应薄层，先将样品滴加在薄层板上，然后滴上适当的溶剂展开反应物。
有时先在试管内进行反应，而后在薄层板上进行层析检识。
根据原化合物的R f值再联系反应产物的层析行为，R f值，可供鉴别一个化合物或者提供鉴定一个化合物或提供鉴定一个化合物极有价值的线索。
应用这些特殊反应只消耗未知物极微量的样品却提供了大量的有关结构鉴别的信息，操作简便。
如氧化、还原、脱水、水解、卤代、酶的催化作用、酯化、硝化、衍生物的制备、混合反应等均可在薄层板上进行。
例：1．酯化反应（1）取原儿茶酸乙醇溶液，在一薄层上点加两个相同样点，其中一份样点的原点上，再点加试剂：醋酐—吡啶（3:1），待溶剂挥散后，再重复点加试几次，干后，以氯仿—丙酮（8:2）展层。
（用碘蒸气熏显色，可见其中点加醋酐吡啶试剂的样点已展开在前，而未加试剂的样点仍近起始线）。
为什么二者R f值不同？（2）取原儿茶醛乙醇溶液，在同一薄层上点加两个相同样点，其中一份样点的原点上，再加醋酐一吡啶（3:1），待试剂挥散后，再重复点加试剂数次，用氯仿一丙酮（8:2）展层。
用2、4二硝基苯肼显色。
加酰化剂前后样品点有什么变化？2．成盐反应取原儿茶酸乙醇溶液，在同一薄层板的起始线上点加两个相同样点。
其中一份样在点样的原点上，再点加10%碳酸氢钠溶液（另一份不加），以氯仿一丙酮一甲醇（8:2:1）展层，并用三氯化铁乙醇溶液喷雾显色。
可见其中点加碳酸氢钠的样点Rf值已有变化，未加碱的样点照常展开。
为什么？3．苯腙反应取原儿茶醛乙醇溶液，在同一薄层上点加两个相同样点，其中一份样点的原点上，再点加2，4一二硝基苯肼试剂，给以热风以促进成踪反应，然后以氯仿一丙酮（8:2）展层，可见出现两个棕红色斑点在红棕色斑点下，再喷以三氯化铁试剂，又出现紫兰色斑点，上面的红棕色斑点是原儿茶醛与2，4一二硝基苯肼所形成的，下面紫兰色斑点是剩下的部分末成腙的原儿茶醛，2，4一二硝基苯肼的斑点呈黄色，R f值最大。
由原位反应的结果判断原来化合物的结果上有何基团特征？并绘出薄层色谱图。
实验三芦丁的提取与鉴定芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。