Primer5设计PCR引物的步骤
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Primer 5 设计引物打开软件
复制基因序列
粘贴
选项AS is- OK
点击primer 按钮，弹出菜单后点击search按钮
选择PCR primer，Pairs 参数，并选择所需PCR产物长度，OK
会弹出搜索结果菜单，点击OK
在搜索出的结果列表里选择TM合适、GC含量高、无各种BUG的引物，点击edit primer，将所得引物复制
而后点击S/A按钮，并继续点击edit primer，复制反向引物，引物设计达成。