实验课药物对离体豚鼠回肠的作用
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验15.药物对离体豚鼠回肠的作用
Experiment 15. Effects of drugs on isolating guinea pig ileum
实验目的
• 观察胆碱能神经递质acetylcholine (Ach、乙酰胆碱）， 炎症介质histamine (His、组胺）对离体豚鼠回肠平滑 肌的作用。
NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。
1. 材料
1.3 仪器：
离体装置：
双层玻璃浴槽（20ml）、张力换能器 、微距调节夹 恒温水浴箱、多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统
2. 方法
2.1 准备
清洗浴槽：清洗后,将台氏液装至刻度； 检查温度：37℃±0.5 ℃； 检查通氧: 单个小泡溢出; 打开电脑：选中桌面RM6240图标
2. 阿托品：为M胆碱受体拮抗剂。阿托品与平滑肌细胞膜 M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体结合，从而阻断 乙酰胆碱对M-受体的激动作用。
实验原理
3. 组胺:组胺是一种血管活性胺。与平滑肌细胞膜H1受体结 合，通过激活G蛋白-磷酸脂酶C系统，使细胞内Ca2+增 高，平滑肌收缩。
4. 氯苯那敏（扑尔敏）：为组胺H1受体拮抗剂。扑尔敏与 平滑肌细胞膜H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的 激动作用。
• 观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体 拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）对乙酰 胆碱、组胺的拮抗作用。
实验原理
激动剂与拮抗剂的作用机制：
1. 乙酰胆碱：小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆 [Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱受 体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。
Ach
Atr+Ach
His收缩幅度（g）
His
Chl+His
3.3 结果
表2. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响
组别
标本数
收缩幅度（g）
乙酰胆碱
10
阿托品+乙酰胆碱
10
组胺
10
氯苯那敏+组胺
10
*P<0.05:**P<0.01;***P<0.001与乙酰胆碱比较。#P<0.05: # #P<0.01; # # #P<0.001与组胺比较。
实验15. 药物对离体豚鼠回肠的作用
1. 结构式摘要（目的、方法、结果、结论） 2. 材料和方法： 3. 实验结果：
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图（图题在图的下方） 3.2 表1
表1. 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
实验小组
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Ach收缩幅度（g）
2.6 加药
2. 方法
ACh 换液
atropine ACh ACh 组胺
换液 扑尔敏
组胺
稳定10-20min
药物对离体豚鼠回肠作用曲线图
BaCl2 atropine
(每次换液后稳定5-10min)
2. 方法
2.7 观察记录
① 待离体回肠稳定10～20分钟后，记录一段正常收缩曲线，然后依次加下列药物。 加入一种药液后，观察并记录收缩曲线，然后用台氏液连续冲洗三次，待基线恢复 到用药前的水平，记录一段基线，再加入第二种药液。注意每次换液后，浴槽液体 的容量应相等。 ② 加入10-2g/L ACh 0.2ml，观察并记录其收缩曲线，然后换液。 ③ 重复以上ACh剂量，待收缩达最高点时，加入1g/L atropine 0.2ml，观察并记录 其收缩曲线，待曲线降至基线或基本稳定后，再加入相同浓度的ACh，观察并记录 其收缩曲线。 ④ 加入10-2 g/L His 0.3ml，观察并记录其收缩曲线，待曲线基本稳定后，换液。 ⑤ 加入10-3 g/L chlorpheniramine溶液0.2ml，5分钟后，加入10-2 g/L His 0.3ml ， 观察并记录其收缩曲线。 ⑥ 加入10g/L BaCl2 溶液1ml，观察其反应，当作用达最高点并稳定后，加入1g/L atropine溶液0.2ml，观察并记录其收缩曲线。
将回肠标本的下 端连线系于标本 固定钩上，
放入麦氏浴槽 中
选中桌面 RM6240图标 选择“实验”-生理科学实验-肠肌 工具--快速归零--调 “ 0”
调节螺母
旋转调节螺母， 调张力至1g。
将回肠标本的上 端连线打一活结， 勾在张力换能器 的悬臂梁钩上
2. 方法
2.5 RM6240系统的使用：
1.实验---生理科学实验--- 肠肌 2.记录、实验中用暂停, 实验结束用停止 3.标记：每次加药做标记 4.测量方法：选测量方法选择键---峰峰值测量 5.剪辑：选中---剪切 6.导出：文件---当前屏图像输出
3.4 结果叙述
4. 讨论 根据实验结果分析Ach、阿托品、His、氯苯那敏对离体豚鼠
回肠平滑肌的作用及作用机制。
5. 参考文献 [1] 作者.书名.版本(第一版略).出版地：出版者,出版年.起-止页（专著） [2] 作者.文章题目.刊名,年,卷(期): 起-止页 （期刊）
His
Chl+His
1
2
3
4
5
6
7Fra Baidu bibliotek
8
9
10
X
s
X: fx -AVERAGE s:fx-STDEV
P:fx-TTEST
2. 方法
2.9 统计
参考《生理科学实验教程》 p149应用Excel进行数据统计分析 t-检验
以x s 表示
注意事项：
实验结束将资料另存为D盘或E盘，不要存在C盘或桌面，以免误退出 程序时实验数据丢失。
归零
调节换能器张力（1g）
稳定20分钟
2. 方法
2.3 制作回肠标本：
找到回盲部， 在离回盲部 1cm处剪断回 肠，取出回肠 约10cm左右一 段，置于盛有 台氏液的培养 皿中，将回肠 剪成1-1.5cm的 小段。
线长50cm左右 回肠标本
0.5-1cm
2. 方法
2.4 回肠标本张力调节
将回肠标本的下端连线系于肠标本 固定钩上，然后放入麦氏浴槽中； 将RM6240系统处在记录状态； 再将回肠标本的上端连线系结在张 力换能器的悬臂梁钩上； 用微距调节夹调节回肠张力至1g左 右。
1. 材料
1.2 药品与试剂
10-2g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride）溶液； 1g/L硫酸阿托品（atropine sulfate）溶液； 10-2g/L磷酸组织胺（histamine phosphate）溶液； 10-3g/L氯苯那敏（chlorpheniramine）溶液； 10g/L BaCl2溶液。 台氏液（Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2,
3. 结果
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图（图题在图的下方） 3.2 表1. 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
表2. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响(数据统计表）
4.讨论
思考题 根据实验结果分析Ach、阿托品、His、氯苯那敏对离体豚鼠回肠 平滑肌的作用及作用机制。
实验报告要求：
2. 方法
2.8 数据处理
1.数据测量：从加药前的基线到最高点的收缩幅度，测得峰峰值。 2.收集数据：离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据收集 3.导出实验图：文件---当前屏图像输出
收集数据
离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
实验小组
Ach收缩幅度（g）
Ach
Atr+Ach
His收缩幅度（g）
实验原理
5. 氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆 [Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高，另一方面BaCl2兴奋胆 碱能N受体， N受体有神经型和肌肉型， N受体激动时 改变Na+、 K+、 Ca2+通道的电生理学特性，使肌肉收 缩。
1. 材料
1.1 实验动物 Dunkin-Hartley 豚鼠(guinea pig)
选择“实验”---生理科学实验---肠肌
2. 方法
2.2 实验步骤：
清醒豚鼠
轻击头部后股动脉放血
打开腹腔
取出回肠
制作回肠标本
一端固定在通气钩上
置含有37℃台氏液的浴槽中
通氧
另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接
连接RM6240生物信号采集处理系统
选择“实验”---生理科学实验---肠肌
Experiment 15. Effects of drugs on isolating guinea pig ileum
实验目的
• 观察胆碱能神经递质acetylcholine (Ach、乙酰胆碱）， 炎症介质histamine (His、组胺）对离体豚鼠回肠平滑 肌的作用。
NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。
1. 材料
1.3 仪器：
离体装置：
双层玻璃浴槽（20ml）、张力换能器 、微距调节夹 恒温水浴箱、多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统
2. 方法
2.1 准备
清洗浴槽：清洗后,将台氏液装至刻度； 检查温度：37℃±0.5 ℃； 检查通氧: 单个小泡溢出; 打开电脑：选中桌面RM6240图标
2. 阿托品：为M胆碱受体拮抗剂。阿托品与平滑肌细胞膜 M-受体结合，阻断乙酰胆碱与M-受体结合，从而阻断 乙酰胆碱对M-受体的激动作用。
实验原理
3. 组胺:组胺是一种血管活性胺。与平滑肌细胞膜H1受体结 合，通过激活G蛋白-磷酸脂酶C系统，使细胞内Ca2+增 高，平滑肌收缩。
4. 氯苯那敏（扑尔敏）：为组胺H1受体拮抗剂。扑尔敏与 平滑肌细胞膜H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的 激动作用。
• 观察M胆碱受体拮抗剂atropine(阿托品)和组胺H1受体 拮抗剂chlorpheniramine(氯苯那敏、扑尔敏）对乙酰 胆碱、组胺的拮抗作用。
实验原理
激动剂与拮抗剂的作用机制：
1. 乙酰胆碱：小剂量时有M胆碱受体激动作用。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca2+通道开放，Ca2+内流↑，肌浆 [Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高。大剂量时也有.N胆碱受 体激动作用，使胃肠道平滑肌兴奋。
Ach
Atr+Ach
His收缩幅度（g）
His
Chl+His
3.3 结果
表2. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响
组别
标本数
收缩幅度（g）
乙酰胆碱
10
阿托品+乙酰胆碱
10
组胺
10
氯苯那敏+组胺
10
*P<0.05:**P<0.01;***P<0.001与乙酰胆碱比较。#P<0.05: # #P<0.01; # # #P<0.001与组胺比较。
实验15. 药物对离体豚鼠回肠的作用
1. 结构式摘要（目的、方法、结果、结论） 2. 材料和方法： 3. 实验结果：
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图（图题在图的下方） 3.2 表1
表1. 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
实验小组
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Ach收缩幅度（g）
2.6 加药
2. 方法
ACh 换液
atropine ACh ACh 组胺
换液 扑尔敏
组胺
稳定10-20min
药物对离体豚鼠回肠作用曲线图
BaCl2 atropine
(每次换液后稳定5-10min)
2. 方法
2.7 观察记录
① 待离体回肠稳定10～20分钟后，记录一段正常收缩曲线，然后依次加下列药物。 加入一种药液后，观察并记录收缩曲线，然后用台氏液连续冲洗三次，待基线恢复 到用药前的水平，记录一段基线，再加入第二种药液。注意每次换液后，浴槽液体 的容量应相等。 ② 加入10-2g/L ACh 0.2ml，观察并记录其收缩曲线，然后换液。 ③ 重复以上ACh剂量，待收缩达最高点时，加入1g/L atropine 0.2ml，观察并记录 其收缩曲线，待曲线降至基线或基本稳定后，再加入相同浓度的ACh，观察并记录 其收缩曲线。 ④ 加入10-2 g/L His 0.3ml，观察并记录其收缩曲线，待曲线基本稳定后，换液。 ⑤ 加入10-3 g/L chlorpheniramine溶液0.2ml，5分钟后，加入10-2 g/L His 0.3ml ， 观察并记录其收缩曲线。 ⑥ 加入10g/L BaCl2 溶液1ml，观察其反应，当作用达最高点并稳定后，加入1g/L atropine溶液0.2ml，观察并记录其收缩曲线。
将回肠标本的下 端连线系于标本 固定钩上，
放入麦氏浴槽 中
选中桌面 RM6240图标 选择“实验”-生理科学实验-肠肌 工具--快速归零--调 “ 0”
调节螺母
旋转调节螺母， 调张力至1g。
将回肠标本的上 端连线打一活结， 勾在张力换能器 的悬臂梁钩上
2. 方法
2.5 RM6240系统的使用：
1.实验---生理科学实验--- 肠肌 2.记录、实验中用暂停, 实验结束用停止 3.标记：每次加药做标记 4.测量方法：选测量方法选择键---峰峰值测量 5.剪辑：选中---剪切 6.导出：文件---当前屏图像输出
3.4 结果叙述
4. 讨论 根据实验结果分析Ach、阿托品、His、氯苯那敏对离体豚鼠
回肠平滑肌的作用及作用机制。
5. 参考文献 [1] 作者.书名.版本(第一版略).出版地：出版者,出版年.起-止页（专著） [2] 作者.文章题目.刊名,年,卷(期): 起-止页 （期刊）
His
Chl+His
1
2
3
4
5
6
7Fra Baidu bibliotek
8
9
10
X
s
X: fx -AVERAGE s:fx-STDEV
P:fx-TTEST
2. 方法
2.9 统计
参考《生理科学实验教程》 p149应用Excel进行数据统计分析 t-检验
以x s 表示
注意事项：
实验结束将资料另存为D盘或E盘，不要存在C盘或桌面，以免误退出 程序时实验数据丢失。
归零
调节换能器张力（1g）
稳定20分钟
2. 方法
2.3 制作回肠标本：
找到回盲部， 在离回盲部 1cm处剪断回 肠，取出回肠 约10cm左右一 段，置于盛有 台氏液的培养 皿中，将回肠 剪成1-1.5cm的 小段。
线长50cm左右 回肠标本
0.5-1cm
2. 方法
2.4 回肠标本张力调节
将回肠标本的下端连线系于肠标本 固定钩上，然后放入麦氏浴槽中； 将RM6240系统处在记录状态； 再将回肠标本的上端连线系结在张 力换能器的悬臂梁钩上； 用微距调节夹调节回肠张力至1g左 右。
1. 材料
1.2 药品与试剂
10-2g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride）溶液； 1g/L硫酸阿托品（atropine sulfate）溶液； 10-2g/L磷酸组织胺（histamine phosphate）溶液； 10-3g/L氯苯那敏（chlorpheniramine）溶液； 10g/L BaCl2溶液。 台氏液（Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2,
3. 结果
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用曲线图（图题在图的下方） 3.2 表1. 离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
表2. 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响(数据统计表）
4.讨论
思考题 根据实验结果分析Ach、阿托品、His、氯苯那敏对离体豚鼠回肠 平滑肌的作用及作用机制。
实验报告要求：
2. 方法
2.8 数据处理
1.数据测量：从加药前的基线到最高点的收缩幅度，测得峰峰值。 2.收集数据：离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据收集 3.导出实验图：文件---当前屏图像输出
收集数据
离体豚鼠回肠实验10个小组的原始数据列表
实验小组
Ach收缩幅度（g）
Ach
Atr+Ach
His收缩幅度（g）
实验原理
5. 氯化钡：肌肉兴奋剂。Ba2+经钙通道进入胞浆，使肌浆 [Ca2+]↑，平滑肌收缩幅度增高，另一方面BaCl2兴奋胆 碱能N受体， N受体有神经型和肌肉型， N受体激动时 改变Na+、 K+、 Ca2+通道的电生理学特性，使肌肉收 缩。
1. 材料
1.1 实验动物 Dunkin-Hartley 豚鼠(guinea pig)
选择“实验”---生理科学实验---肠肌
2. 方法
2.2 实验步骤：
清醒豚鼠
轻击头部后股动脉放血
打开腹腔
取出回肠
制作回肠标本
一端固定在通气钩上
置含有37℃台氏液的浴槽中
通氧
另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接
连接RM6240生物信号采集处理系统
选择“实验”---生理科学实验---肠肌