黄芪多糖提取方法的研究-2012

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囝小肽善冢技或论坛黄芪多糖提取方法的研究

董文阳周岩民

南京农业大学动物医学院

摘要黄芪多糖（ＡＰＳ）为黄芪主要活性成分之一，具有促生长、抗氧化、抗应激和提高免疫力等多种功效。介绍对ＡＰＳ的６种提取方法，包括水提取法、碱醇提取法、超声波提取法、微波提取法、超高压提取法扣超滤法，及每种方法的提取效果，并就ＡＰＳ提取方丢的研究进展做一综述。

关键词黄芪黄芪多糖提取

中图分类号：Ｓ８１６．７文献标志码：Ｂ文章编号：１００２—２８１３（２０１２）０７—００３２—０３

黄芪是历代常用的补益中药，为豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根，具有补中益气、拔毒排脓、敛疮生肌和利水退肿之功效。黄芪多糖（ＡＰＳ）是黄芪中最重要的天然有效成分，包括葡聚糖和杂多糖：葡聚糖有水溶性的１／，一（１—４）（１＿＋６）葡聚糖和水不溶性的ｉｆ，一（１＿４）葡聚糖；杂多糖多为水溶性酸Ｊ睦杂多糖，主要由葡聚糖、鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成，少量含有葡醛酸，有些杂多糖仅由葡萄糖和阿拉伯糖组成。药理研究表明：ＡＰＳ具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射及调节血糖等作用；还能促进免疫器官功能和抗体生成，增加机体的非特异性抵抗能力。因其抗菌和抗病毒效果良好，临床常用作免疫增强荆。自２０世纪８０年代以来，为了进一步开发利用ＡＰＳ，许多学者对ＡＰＳ的提取工艺进行了大量研究，以期找出一种更合理和更可行的提取方法。在此就目前已有的多种提取方法进行综述。

１一般工艺流程

ＡＰＳ是溶于水，不溶于醇的大分子化合物，现行的工艺都是用水煮后将ＡＰＳ提取出来，再用乙

收稿日期：２０１２—０２—０８

通信作者：周岩民

３２饲料研究ＦＥＥＤＲＥＳＥＡＲＣＨＮＯ．０７．２０１２醇将多糖从提取液中沉淀、分离并精制出来。一般工艺条件是用８～１２倍量水，煎煮２－３次，每次１－２ｈ。其工艺流程图如下：

２前处理工艺

提取ＡＰＳ前一般需对原料黄芪进行物理处理，如：切成黄芪饮片或黄芪粉末。许多学者对其前处理工艺进行研究后发现，通过对原料黄芪进行化学处理或生物学处理可显著提高ＡＰＳ的收率。

２．１醇处理法

该方法又称醇除水提取法，在提取ＡＰＳ时，先以乙醇为溶剂对黄芪原料进行回流。张昀等先将药材加人５倍量的９５％乙醇回流，除去黄芪中黄芪总皂苷；提取ＡＰＳ时，以１０倍量蒸馏水１００ｏＣ回流３ｈ，过滤，处理，获得ＡＰＳ（收率６．２１％）。吴永平等先用６倍量的９０％乙醇水浴回流提取３次，每次１ｈ；待乙醇挥干后，加５倍量的水，隔水加热提取３次，每次２ｈ；合并水提液，处理获得ＡＰＳ（收率２８．５４％）ｏ以上２种研究方法相似，但收率相差较大，可能与所用乙醇的质量浓度、量、加水量、提取时间和次数有关，具体原因尚待研究。

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２．２酶处理法

酶技术近年来广泛用于天然植物有效成分提取，其优势在于酶可以比较温和地分解植物组织，提高有效成分的释放速度，从而提高其提取率。郑立颖等研究表明：加入不同质量浓度的纤维素酶能显著提高ＡＰＳ的收率，将黄芪用０．３％、０．４％和０．５％纤维素酶预处理后，用传统水提法，ＡＰＳ的收率较对照组分别增加了３１４．８％、３９２．６％和３４２．６％。陈学伟等通过试验得到酶解的最佳条件：酶解时间１２０ｍｉｎ，酶用量０．８％，酶解温度为７５℃。所获提取液中多糖含量为９．７８％，比传统水溶醇沉法收率提高了３倍。

成玲等研究认为：纤维素酶对细胞壁有很高的穿透性，它可以进入细胞壁内部并将其溶解膨胀，并且这种作用具有高度选择性，它可以在不破坏多糖成分的条件下将其充分释放出来。纤维素酶在中药材的前处理中发挥了很大的作用，发展前景十分广阔，在生产应用上具有现实意义。

３萃取工艺

３．１水提取法

水提取法一般是用水煎煮过滤得提取液，合并滤液，经浓缩和醇沉等处理得ＡＰＳ。该方法的优势在于操作简便，但多糖收率和含量都较低，加之提取过程要耗费大量的有机溶剂，增加了提取成本，制约了ＡＰＳ的进一步开发利用。

３．１．１水溶醇沉法

水溶醇沉法又称水煎煮法，目前Ａｌａｓ的提取多采用水溶醇沉法。葛朝亮等研究得出的最佳工艺为加水量１２：１，提取时间０．５ｈ，提取次数２次，提取液浓缩后加无水乙醇沉淀，得ＡＰＳ（收率２．７％）。倪艳等进行优化试验，确定了最佳工艺：以１２倍量水，提取３次，每次１．５ｈ。罗毅等研究得出的最佳工艺为水煎３次，每次１ｈ，每次加８倍量水。水溶醇沉法简便易行，但其收率和多糖纯度均较低。３．１．２温水提取法

孙瑞敏等改进了传统的水溶醇沉提取ＡＰＳ的方法：称取黄芪根短杆或黄芪粉末，加入到５。８倍量蒸馏水中，在６２～６８℃下浸取ｌ～３ｈ；过滤后９５％乙醇沉淀，分离提纯，得ＡＰＳ（收率８。２％）。该研究还提出乙醇与提取液最好的体积比应为２：１，减少了能源消耗，节约了资源，降低了成本也提高

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了质量。温水提取法简便、环保、成本低且适合生产。３．１．３水回流提取法

聂小华等采用水回流提取法提取ＡＰＳ：先称取黄芪粉末，加入１０倍量水，回流ｌｈ，离心；药渣再用８倍量水回流４０ｍｉｎ，离心；合并提取液，浓缩，醇沉并除杂质得ＡＰＳ。赵强强等采用田口试验设计法对水回流提取法进行了优化，考察了加水量、提取时间和提取次数对提取的影响，得出最佳条件：加６倍量的水，提取１．５ｈ，提取３次，得ＡＰＳ（平均收率为３．４９％）。

３．１．４碱水提取法

刘永录等采用Ｎａ０Ｈ溶液提取法：取黄芪药材４００ｇ，分别加１２和１０倍量ｐＨ为１２的Ｎａ０Ｈ水溶液煎煮２次，抽滤；调ｐＨ为中性，合并提取液，浓缩，醇沉并除杂质得ＡＰＳ。Ｎａ０Ｈ溶液提醇沉法的多糖收率为７。７３％，略高于以Ｃａ（ＯＨ）ｚ溶液同法提取的多糖收率（７．１２％），显著高于以蒸馏水同法提取的多糖收率（３．６４％）。

李红民等采用ｐＨ为９—１０的Ｃａ（ｏＨ）２溶液煮沸提取Ａｌａｓ，提取液浓缩时调ｐＨ约为６．５，浓缩得到ＡＰＳ粗提物，其提取率为１１．７％，是以蒸馏水同法提取所获收率（３．６％）的３．２５倍，是以Ｎａ２Ｃ０３水溶液同法提取所获收率（５．７％）的２．０５倍，可推得碱性条件对提取ＡＰＳ更为有利。

３．２碱醇提取法

田洛等首先提出碱醇提取ＡＰｓ的方法：准确称取黄芪饮片，用５％乙醇与黄芪药材按１０：１的量，在ｐｉｌｌ２的Ｎａ２Ｃ０３溶液中９０℃下提取２次，每次１．５ｈ，过滤，合并滤液，浓缩沉糖，得ＡＰＳ（收率１９．１５％）；利用红外光谱对３种方法提取的残渣进行分析证明，碱醇法残渣中多糖成分的残留量最低，提取效果较好。刘富岗等采用Ｎａ０Ｈ醇提取ＡＰＳ：取黄芪药材饮片５０ｇ，分次加Ｎａ０Ｈ调ｐＨ至１２的５％醇液５００和６００ｍＬ，加热回流２次，分别为３和２．５ｈ，处理后得ＡｌａＳ；该提取法收率为１３．０４％，高予以Ｃａ（ＯＨ）２同法提取的收率（７．９６％），显著高于以蒸馏水同法提取的收率（３．６７％）。

碱醇提醇沉的提取率要明显高于直接水提法的原因目前尚无定论。刘永录等认为这是因为碱对植物细胞壁起到破壁作用，且在碱性条件下纤维间的

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