液相色谱柱使用经验谈
液相色谱柱的使用
液相色谱柱的使用1、Hamilton离子排斥色谱柱中应封存淋洗液保管，保管温度4—10摄氏度，使用温度20—60摄氏度。
2、Hamilton离子排斥色谱柱应在pH2—12范围内使用，淋洗液及样品浓度均不能超出此范围。
进口ShodexIC色谱柱应在pH3—12范围内使用，淋洗液及样品浓度均不能超出此范围。
3、Hamilton离子排斥色谱柱大使用压力不能超出15MPa。
4、拆下Hamilton离子排斥色谱柱时，应在色谱柱温度降至室温后拆下，拆下后立刻以堵头密封。
5、含有重金属的样品，应以阳离子交换树脂处置后，去除重金属才略进样。
6、含有有机物的样品，应过C18固相萃取柱后进样。
7、样品硬度较高时，应先去除样品中的钙镁离子。
8、样品进样前必须以0.22m微孔滤膜过滤或一次性针头过滤器过滤。
9、室温保管色谱柱时，应每周通淋洗液一次。
10、杭州亚莱博为您供给Hamilton离子色谱柱的售前售后服务。
液相色谱柱的使用色谱柱在使用前，可以进行柱的性能测试，并将结果保管起来，作为今后评价柱性能变更的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是依照色谱柱出厂报告中的条件进行（出厂测试所使用的条件是较佳条件），只有这样，测得的结果才有可比性。
1、样品的前处置：a、可以使用流动相溶解样品。
b、使用予处置柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45？m的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制：液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而实现分别的目的，因此要求流动相具备以下的特点：a、流动相对样品具有肯定的溶解本领，保证样品组分不会沉淀在柱中（或长时间保管在柱中）。
b、流动相具有肯定惰性，与样品不产生化学反应（特别情况除外）。
c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分别效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命（可运用提高温度的方法降低流动相的黏度）。
液相色谱柱使用注意事项
色谱柱使用注意事项
一、色谱柱有方向：
柱子标签上箭头指示方向为，流动相溶液流动方向。
若方向
反，会影响柱效和使用寿命。
二、新柱子使用：
新柱子使用前，先要活化，具体方法：
1、把柱子接在泵上，检测器一端不接（注意）。
废液直接从
柱子另一端流出。
2、用纯甲醇溶液，以1ml/min，流速冲洗20—30分钟，即
可。
三、日常保养及维护（柱子连接色谱系统）
要根据不同的情况对色谱柱进行保养：
①反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，
实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30min，洗掉色谱柱中的
盐，再用色谱甲醇冲洗30min。
注意：不能用纯水冲洗柱子，
应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
②长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的
溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，并将购买
新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存温度: 室温。
液相色谱柱的使用和维护保养
液相色谱柱的使用和维护保养液相色谱柱是一种广泛使用的分离技术，可用于分离和测定复杂混合物中的组分。
由于液相色谱柱具有精确分离、操作简便、分离效率高等特点，因此，越来越多的实验室都开始使用该技术。
在使用液相色谱柱时，正确的维护保养非常关键。
本文将介绍液相色谱柱的使用方法和维护保养技巧，以便确保您的分离实验能够得到最佳的结果。
一、液相色谱柱的使用1. 准备工作使用液相色谱柱之前，必须先进行预备工作。
这包括：清洗和准备液相色谱柱以免携带有污染物。
准备需要分离和测定的样品。
准备适当的流动相。
流动相必须符合样品的性质。
液相色谱柱的流动相应该是无色的，纯净的水或相应的缓冲液，并具有必要的缓冲能力。
根据柱的尺寸来选择适当的样品注射量。
2. 柱的装配通常情况下，液相色谱的柱是由管状的柱壳、填充柱节、柱端固定件和柱段之间的密封件组成。
在对柱进行装配的时候，对组件应该加强检查以保证每一个元件的质量。
柱被放置在可控压力的色谱装置中，直到达到设定的温度，流动相通过柱床高度。
在样品通过柱床的过程中，要确保流动相的速度恰好足够将所有的组分都分开并在规定的时间内溶出。
3. 分析过程准备工作完成后，可以开始进行样品的分离实验。
在整个过程中，以下措施应予以注意：在样品从样品室进入色谱柱之前，流动相必须在柱中流动。
否则，在注入样品时，将有空气囤积在柱床中，会在透射检测器处产生噪音。
更换液相色谱柱的流动相时需要小心，因为对于一些化学品来说，即使是微量的杂质也会对结果产生影响。
如果发现柱床粘住或困住，不应使用力量来拉动柱子，而应该使用相反方向的流动相，以使样品回到某一个位置，并反向流动一会，这样可以避免样品损坏柱子床。
二、液相色谱柱的维护保养液相色谱分析的成功与否，除了预备工作和分析过程外，还与样品的制备、取样位置以及样品进入液相色谱柱中的流动相的条件等因素有关。
因此，经常做好液相色谱柱的保养工作，可以有效防止柱子损坏，延长其寿命并保证实验结果的准确。
液相色谱柱使用说明
液相色谱柱使用说明液相色谱柱是一种常见的色谱技术应用于分离和分析化合物的工具。
本文将为您详细介绍液相色谱柱的使用说明，包括如何选择合适的柱子、柱子的安装步骤、样品的准备和加载、柱子的使用注意事项以及柱子的保养和储存方法。
1.选择合适的液相色谱柱在选择液相色谱柱之前，需要考虑以下几个因素：-样品的性质和分离要求：不同的柱子对不同性质的化合物有着不同的分离效果。
根据样品的极性、大小和稳定性等因素，选择合适的柱子（例如反相柱、正相柱、离子交换柱等）。
-流动相的选择：根据样品溶解度和分离要求，选择合适的流动相（溶剂、缓冲液等）。
2.液相色谱柱的安装步骤-将柱床冲洗干净：使用纯溶剂（如甲醇、乙醇等）反复冲洗柱床，直至流出的溶液无色透明。
-将液相色谱柱连接至色谱仪：在连接针嘴前，先用一根塑料贴纸封住柱子的两端，然后将针嘴旋入液相色谱柱的出口。
-将柱子连接到色谱仪：将柱子放入色谱仪的支架上，并确保柱子的连接口与色谱仪的进样器连接正确。
3.样品的准备和加载-样品的准备：将样品溶解在适当的溶剂中，使其达到合适的浓度，并在必要时进行过滤或稀释。
-样品的加载：使用自动进样器或手动进样器，将样品加载到液相色谱柱中。
避免过量的样品装载和过高的进样速度。
确保样品溶液完全进入柱子，并记录样品加载的详细信息。
4.液相色谱柱的使用注意事项-避免干涸：始终保持柱子中的液相色谱柱湿润，避免出现干涸和损坏的情况。
在使用完毕后，必要时用合适的溶剂进行洗脱，然后用空气或氮气进行保护。
-遵循柱子的使用范围：柱子通常有推荐的温度和压力范围。
超出这些范围可能会导致柱子性能下降或甚至损坏。
-避免高浓度的盐类溶液：高浓度的盐类溶液可能对柱子产生不良影响，导致柱子的损坏或压力升高。
5.液相色谱柱的保养和储存方法-定期清洗：根据使用频率，定期清洗液相色谱柱。
使用纯溶剂进行冲洗，以去除残留的样品和杂质。
-保持柱子湿润：柱子在存储期间应保持湿润。
用合适的溶剂进行洗脱，并用盖子密封柱子的两端，以避免柱床干燥。
液相色谱柱使用注意事项
液相色谱柱使用注意事项在使用液相色谱柱时，需要注意以下事项以保证柱子的性能和使用寿命。
1.流动相流动相是液相色谱分离的基础，应选择与样品相容、纯度高、稳定性好的流动相。
在使用前，应进行过滤和脱气处理，以避免对柱子造成损害。
2.柱子选择根据不同的样品和分离要求，应选择合适的液相色谱柱。
选择时需要考虑柱子的类型、粒径、孔径、填料等参数。
对于复杂的样品，建议使用具有更强分离能力的反相柱。
3.柱子清洁在使用前，应对液相色谱柱进行清洁，以去除柱子内部的杂质和污染物。
清洁时应使用温和的清洁剂，如甲醇、乙醇等，并避免使用强烈的清洁剂或酸碱溶液。
4.操作温度液相色谱柱应在规定的操作温度下使用。
过高的温度可能导致柱子的性能下降或损坏，而过低的温度则可能导致样品分离效果不佳。
在使用过程中，应密切关注柱温的变化。
5.压力变化压力变化是液相色谱分离的关键参数之一。
在使用过程中，应密切关注压力的变化情况。
若出现压力波动或异常升高，应立即采取措施解决问题，以免对柱子造成损害。
6.流动相流速流动相流速是影响液相色谱分离效果的重要因素之一。
应根据分离要求和样品性质选择合适的流速。
过快的流速可能导致柱子的性能下降或损坏，而过慢的流速则可能导致样品分离效果不佳。
7.样品处理在进样前，应对样品进行处理，以去除杂质和干扰物质。
处理方法包括样品萃取、净化、浓缩等。
处理时应避免对样品造成污染或损失。
8.柱子储存在使用完毕后，应对液相色谱柱进行妥善的储存。
储存时应避免阳光直射、高温、潮湿等不利环境条件。
同时，应定期对柱子进行检查和维护，以保证其性能和使用寿命。
液相色谱柱的使用和维护
前言液相色谱的分离原理是,在色谱柱流动相中样品的不同组分与固定相发生吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和等作用,由于作用力的大小、强弱不同,各种组分在固定相中滞留的时间也不同,因而先后从以固定相中流出而得到分离。
因此液相色谱分离的关键之一是色谱柱中的固定相。
柱效的好坏直接影响目标化合物的分析和检测。
但在液相色谱运行过程中,色谱柱极易发生问题,因此掌握正确使用和维护色谱柱的知识非常必要。
色谱柱使用过程中容易发生柱堵塞引起系统压力过高;柱效低引起峰拖尾、变宽;柱污染、损坏导致鬼峰等问题。
引起这些问题的内在原因有:(1) 硅羟基的死吸附。
色谱柱的基材硅胶粒子表面存在硅胶羟基。
任何物质在色谱柱中都存在双分配效应,即在流动相与固定相之间进行分配,又在流动相与硅羟基之间进行分配。
被分析物质被硅羟基吸附称为非特异性吸附,或称死吸附。
当硅羟基对被分析物质的吸附趋近于饱和状态时,色谱柱柱效下降,峰形出现拖尾、变宽。
(2)重金属。
色谱柱的基材硅胶粒子无论纯度多高，无论怎样处理,都会有不少于5x10- 6的重金属以金属氧化物的形式残存在硅胶粒子的表面,这些金属氧化物很容易与其它化合物形成螯合物,使其被氧化,产生不对称峰或拖尾峰。
例如儿茶素和大多数中药,因含有多酚结构,极易被金属氧化物氧化,影响其分离效果。
(3) 碳流失。
固定相经长期使用,会有部分碳链被流动相洗脱下来,随流动相一起流出色谱柱外, 造成碳流失。
(4)缓冲液中盐的析出。
在做色谱分析时,有时流动相中会含有缓冲盐溶液。
分析结束后,如果没有先用含一定配比的水相流动相冲洗,而直接用纯有机相冲洗,瞬间柱子中的微环境是高有机相、低水相。
这时流动相中的缓冲盐溶液极易析出盐,将柱子堵塞,使柱压升高,柱效下降。
(5)色谱柱变干。
如果对色谱柱保存不当,使色谱柱中的保存液全部挥发,柱子内部变干,造成色谱柱的损伤,影响分离效果。
2色谱柱的使用新柱使用前应先检查产品包装、外观是否完好。
液相色谱柱的使用及再生
液相色谱柱的使用及再生一、液相色谱柱的使用方法1.准备工作：在使用液相色谱柱之前，需要先进行柱前洗涤。
首先，将色谱柱和相关装置安装到系统中，并连接好进样器。
然后，使用纯溶剂通过色谱柱，将柱内的固定相洗涤干净。
这可用于去除残留的杂质和吸附在固定相上的杂质。
2.样品进样：将待分析样品溶解在合适的溶剂中，通过自动进样器或手动进样器将样品进样到柱中。
在进样过程中，要保证样品与液相色谱柱内的固定相充分接触，以获取准确的分析结果。
3.溶剂梯度：对于复杂的样品混合物，通常需要使用溶剂梯度来实现目标物质的分离。
溶剂梯度可以通过改变溶剂的组成比例或流速来实现。
在液相色谱仪中，可以使用梯度装置来实现自动的溶剂梯度。
4.分析条件控制：在进行液相色谱分析时，需要根据目标物质的特性来选择合适的分析条件，如流速、温度、检测器类型等。
这些条件将直接影响分析结果的准确性和重复性。
5.数据分析和解释：分析结束后，可以通过数据处理软件对所得数据进行处理和解释。
常见的数据处理方法包括峰面积计算、质量浓度计算、波长选择等。
二、液相色谱柱的再生技术1.清洗：随着柱使用时间的增加，固定相表面可能会积累附着物质，影响分离效果。
这时可以使用一些溶剂来清洗柱。
选择的清洗溶剂应该与分析柱内的固定相相溶，但不会溶解固定相。
常用的清洗溶剂包括醇类、有机溶剂和酸碱溶液等。
清洗过程中要保持流速适中，以充分冲洗柱内的固定相。
2.修饰：一些情况下，固定相表面可能出现活性减弱的情况，导致分离能力下降。
这时可以使用修饰剂来修复柱的活性。
修饰剂通常是一种能与固定相反应的化学物质，可以局部刷新固定相表面，恢复柱的活性。
3.再生：当固定相活性无法恢复，或者由于固定相老化等原因，完全更换液相色谱柱是常见的再生方法。
再生过程包括柱前洗涤、柱后洗涤、柱填充等多个步骤，需要根据具体柱的特性和使用情况来进行。
总结：液相色谱柱的使用方法和再生技术对于液相色谱分析的准确性和重复性具有重要意义。
液相色谱柱的常见问题与解决方法及解决方案
液相色谱柱的常见问题与解决方法及解决方案液相色谱柱在使用过程中常见的问题有柱压上升、峰拖尾变宽、分别效果下降等。
一般情况下这些都是色谱柱使用时间过长引起的正常现象，只需对色谱柱进行清洗与再生便可解决。
但是假如柱压蓦地上升，则需要检查色谱柱是否显现问题。
可能的原因有以下几点：1.柱头的过滤筛板被污染解决方法：卸下柱头螺丝，将过滤筛板取下，放置在30%左右的稀硝酸中，然后用超声波清洗10分钟。
再将过滤筛板放入超纯水，超声清洗约10分钟，之后将过滤筛板重新装回色谱柱。
2.填料被污染解决方法：①卸下柱头螺丝，将前端被污染的填料用专用小匙挖出，然后重新填入相同的填料。
②选择合适的流动相，按色谱柱使用的方向冲洗，冲洗量须大于色谱柱体积的20倍，将污染物溶解并冲杰出谱柱，然后，依照色谱柱标明的箭头方向使用。
3.缓冲盐溶液碰到纯有机相析出盐结晶，堵塞色谱柱解决方法：先用冲洗色谱柱，将盐晶体溶解并冲杰出谱柱，然后换高浓度甲醇水溶液或其他有机溶剂作为流动相。
4.流动相的PH值偏差过大，造成固定相溶解或结构被破坏解决方法：此时很难将色谱柱修复通常需要直接更换色谱柱。
高效液相色谱仪常见问题及解决方法高效液相色谱仪作为一种高精密仪器，假如在使用过程中不依照正确操作的话，就简单导致一些问题。
其中常见的有柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。
一、液相色谱仪压力过低压力过低的现象一般是由于系统泄漏，处理方法：找寻各个接口处，特别是色谱柱两端的接口，把泄漏的地方旋紧即可。
当然还有一个原因就是泵里进了空气，但此时表现的往往是压力不稳，忽高忽低，更严重一点会导致泵无法吸上液体。
处理方法：打开Purge阀，用3～5ml/min的流速冲洗，假如不行，则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。
二、液相色谱仪柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要紧密注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分别效果及保留时间等紧密相关。
所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。
高效液相色谱仪与色谱柱使用中应注意的事项
高效液相色谱仪与色谱柱使用中应注意的事项答案：色谱柱是高效液相色谱仪的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透粉性，延长柱子的使用寿命非常重要。
因此对高效液相色谱仪色谱柱的维护是关键。
高效液相色谱仪色谱柱是消耗品，因此尽可能地仔细使用会延长色谱柱的寿命。
1、色谱柱使用前注意事项色谱柱的储存液无特殊说明均为评价报告所示的流动相。
在使用前一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
如胺基(NH2)氰基(CN)柱均为正相条件下评价，所以如果使用条件为反相条件时，请用一中介流动相(如异丙醇)。
先置换掉柱内的储存液，然后再应用反相条件对于C18固定相采用的是甲醇-水为评价流动相，若要使用含盐浓度较高的流动相，使用前请用超纯水或甲醇含量相对较低的甲醇-水顶替掉原来的评价流动相，否则会对色谱柱造成极大的伤害，将会明显地减少色谱柱使用寿命。
2、色谱的使用方向高效液相色谱仪色谱柱标签上的箭头所示方向是评价时流动相流动的方向，使用过程相流动的方向也按此方向。
3、流动相流动相中所用的各种有机溶剂要尽可能地使用色谱，或至是分析纯试剂配流动相水Z好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45或0.22m的滤膜过滤一次则更好，这一点对含盐的流动相尤为重要。
另外装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
总之，必须保证所使用的流动相和色谱系统是足够的清洁。
4、样品样品也要尽可能的清洁，同样可选用样品过滤器或样品预处理(SPE柱)对样品进行预处理;若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，如无特殊要求，所有的溶剂和样品应严格脱水。
5、PH值以常规硅胶为基质的键合相填料高效液相色谱柱通常的PH值适用范围是2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界(特别是在8.0≤PH≤10.0时)条件下使用高效液相色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于高效液相色谱仪色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并*置换掉原来所使用的流动相。
液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理 液相色谱操作规程
液相色谱柱的使用注意事项流动相和样品处理液相色谱操作规程液相色谱柱的使用注意事项：流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特别说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是液相色谱柱的使用注意事项：流动相和样品处理 1. 色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特别说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出，堵塞色谱柱。
2. 流动相：1）在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。
流动相确定要使用色谱级别的溶剂。
如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避开细菌产生。
2）流动相使用前需用微孔滤膜过滤,除去流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。
缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避开溶解度变化造成产生新的沉淀。
不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。
还可以使色谱柱更简单平衡）。
3）流动相需脱气后使用，可避开因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。
假如测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区分，应当使用过度分布的形式进行平衡。
避开由于流动相的蓦地变化造成柱压加添过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。
正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。
4）流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水*好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
假如将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应当定期清洗或更换。
5）以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0—8.0，BDSC18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0—10.0、当必需要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立刻用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
高效液相色谱柱注意事项
高效液相色谱柱注意事项高效液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分构成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的调配系数,在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的调配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分别成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
高效液相色谱柱注意事项：1、柱效和保护柱拿到一根新柱时，肯定要先看其使说明，然后测柱效，定期检测柱效，保存在新色谱柱上得到的色谱图，并记录条件，定期检测仪器的谱带展宽。
若应用于在线监测，应对色谱柱供应在线的物理保护和化学保护，例如采取安装在线过滤器，自装填料保护柱和预装保护柱等。
在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计，优点是基本不影响柱效，在需要高柱效的时候常用，常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。
缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效，特别是在用微柱时，常用的是普通自装填料的保护柱。
近新出的一些保护柱例如Sentry—guard保护柱，它的特点是高质量、高效填料、加添分析柱效、对脏样品载荷本领大，能延长保护柱的寿命，手可拧紧接头，安装时不需要工具，省时省，可换芯式设计，能采用各种不同的填料，重要适用于特别脏特别多而杂的样品本底，例如生化样品，环境样品和食品等，或者不想做太多的圃相萃取，不想降低柱效果等情况。
2、清洗对所做的样品要有充分的了解，用对该样品洗脱本领强的流动相清洗，对于硅胶柱，先用甲醇洗去极性杂质，然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100—20OraL依次活化，对于键和相柱，一般用甲醇一氯仿一甲醇一水依次冲洗，每种色谱柱有特定的清洗方法，肯定要看其使用说明。
3、存放存放前除掉杂质和盐，采用合适的存放溶剂，避开色谱柱床的干枯，避开机械振动，防止细菌生长，注意存放的温度。
液相色谱柱的使用注意事项及再生
液相色谱柱的使用注意事项及再生1、色谱柱的使用说明：（1）、色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。
在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。
在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。
（2）、流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。
如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。
另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。
以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDS C18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。
当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。
（3）、样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。
在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。
2、色谱柱的保存（1）、反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。
注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）、长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存的温度最好是室温。
3、色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
液相色谱柱的使用注意事项及再生
液相色谱柱的使用注意事项及再生注意事项：1.柱子的贮存：液相色谱柱在非使用状态下应尽量避免暴露在空气中，空气中的灰尘和湿气会影响柱子的性能和寿命。
因此，柱子应存放在其原始包装中，并防止受潮。
2.近似与探头：在使用之前，必须对柱子和探头进行连接和融合。
在操作中，要确保柱子和探头之间无泄漏，否则会影响分析的准确性。
3.流速控制：流速是液相色谱分析中很关键的一点。
流速过高会导致柱子产生过高的压力，甚至超过其承载能力，从而导致柱子破裂。
因此，在进行液相色谱分析时必须要控制好流速。
4.保持温度稳定：液相色谱柱对温度敏感，温度的变化会影响分离效果。
因此，在液相色谱分析中必须保持柱子的温度稳定。
5.避免样品堵塞：柱子中的微孔会很容易受到样品的堵塞，导致柱子无法正常使用。
因此，必须确保样品中无固体杂质，并且在注射之前先过滤样品，以避免样品堵塞柱子。
柱子再生方法：1.水洗法：将柱子安装在逆相液相色谱系统中，用纯水进行洗脱，如果必要可以加入少量的乙酸、甲酸或其他有机溶剂进行洗脱。
该方法适用于非极性化合物的柱子。
2.有机溶剂洗脱法：将柱子连同柱底栓安装在逆相液相色谱系统中，用纯有机溶剂或者含有有机溶剂的溶液进行洗脱。
该方法适用于极性化合物的柱子。
3.极性液洗法：将柱子置于极性液相溶剂中，如醇类、酸类或含有酸性成分的有机溶剂中进行洗脱。
该方法适用于阴离子柱等需要去除离子物质的柱子。
4.特殊洗脱法：对于一些具有独特功能的柱子，如固体相萃取柱、色譜柱等，可以根据其特殊性质采用相应的洗脱方法。
除了以上的再生方法，还有一些更加复杂的再生方法，如使用酸碱溶液、有机溶剂进行再生等。
用户在使用液相色谱柱时，应根据柱子的具体情况及实际分析样品的特性选择合适的再生方法。
总之，液相色谱柱的正确使用和再生对于高效可靠地进行液相色谱分析具有重要影响。
使用者应严格按照操作规范进行操作，并根据不同柱子的特性进行合适的柱子再生方法，以延长柱子的使用寿命和保证分析的准确性。
常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是一种重要的分析仪器，在化学、药物研发、环境科学等领域广泛应用。
正确的使用和维护保养可以延长色谱柱的寿命，提高色谱分离的效果。
一、使用液相色谱柱的注意事项1.选择合适的柱使用液相色谱柱前，需要根据分析目标和样品性质选择适合的柱型和填料。
常用的柱型有反相柱、离子交换柱、正相柱等。
不同的柱具有不同的分离机理和性能，选择合适的柱可以提高分离效果。
2.准备好适当的溶剂系统液相色谱的溶剂系统通常由溶剂A和溶剂B构成。
在使用液相色谱柱之前，需要准备好适当的溶剂系统，并将溶剂通过泵送到色谱柱中。
溶剂的选择应根据柱和样品性质来确定，通常要尽量避免对柱产生腐蚀或损害的溶剂。
3.校准柱的流速在使用液相色谱柱之前，需要对柱进行流速校准。
根据柱的规格和品牌，确定适当的流速范围。
过高或过低的流速都会影响分离效果和柱的寿命。
通常，可以通过控制泵的流速和封堵时间来调整柱的流速。
4.准备样品在使用液相色谱柱进行分析之前，需要准备好样品。
样品可以是纯净物质，也可以是复杂的混合物。
样品的准备和预处理会影响分离效果和柱的寿命。
合适的样品准备方法包括稀释、过滤、目标成分的预处理等。
5.正确设置色谱仪的条件在使用液相色谱柱之前，需要根据柱的特性和样品的性质，正确设置色谱仪的条件。
包括流速、柱温、检测器、梯度和等时并行等。
设置合适的条件可以提高柱的寿命和分离效果。
二、液相色谱柱维护保养1.定期保养色谱柱为了保证液相色谱柱的寿命和分离效果，需要定期进行柱的保养。
在每次使用完柱后，需要冲洗柱，将样品和残留物彻底清除。
冲洗柱时可以使用适当的溶剂或清洗液，根据需要选择正向或反向洗涤。
一般推荐用高纯度的有机溶剂冲洗柱。
2.避免柱的过载和超压过载和超压是液相色谱柱常见的问题。
过高的样品浓度或过高的流速都可能导致浓度过载，产生色谱峰畸变或柱堵塞。
超压则会导致柱的损坏或泄漏。
需要根据柱的规格和样品的性质，控制样品浓度和流速，避免过载和超压。
液相色谱柱维护与使用指南
液相色谱柱维护与使用指南色谱柱是整个液相分离系统的核心，而色谱柱的安装，活化/平衡，使用，维护/清洗以及保存是发挥色谱柱性能的重要过程。
笔者收集了Waters,Phenomenex,纳谱分析（国产）以及安捷伦的液相色谱柱使用指南。
笔者综合几家的使用指南，总结如下：1 .安装现代色谱柱上一般都会标明流向，我们应该按照流向进行正确安装,后期也许可以进行反冲,但前期还是尽量不要反冲。
当安装新色谱柱时，必须确保连接管路与新色谱柱匹配。
如果色谱柱末端与系统接头匹配不佳，新色谱柱的性能会受到不良影响（诸如：柱效下降、峰形拖尾等）或者发生渗漏。
同时色谱柱的接头应照最大压力进行选择，如下图为安捷伦推荐的接头。
最大系统压力 推荐的接头部件号最高400barInfmity1abQuickTurn 接头（手紧式）接头：5067-5966最高800barInfmity1abQuickTurn 接头（带有安装工具）接头：5067-5966安装工具：5043-0915 最高1300barInfinity1abQuickConnect 快速连接接头接头：5067-5965如需了解更多信息和部件号，请参见《Agi1entInfinity1ab 接头产品样本》（5991-5164CHCN ）。
2 .活化/平衡通常，色谱柱出厂时保存于100%乙精中。
将色谱柱更换至其它流动相体系之前，务必要确保流动相的兼容性。
为避免流动相缓冲液在色谱柱或色谱系统中析出，使用五倍柱体积的水/有机溶剂混合溶液冲洗色谱柱，其中有机溶剂含量与所需缓冲盐流动相的有机溶剂含量相同或更低（例如，使用60%的甲醇水溶液冲洗色谱柱和系统，然后再更换为60%甲醇/40%缓冲液的流动相）。
对于反相分离来说，完成平衡至少用10倍柱体积的流动相（参见下表中的色谱柱体积）。
当反压达到恒定且色谱柱基线稳定时，可认为该柱达到完全平衡。
对于具有较短的化学链（例如C8、苯基、CN ）固定相的色谱柱，应小心确保在使用色谱柱之前对其进行了彻底的平衡。
常用液相色谱柱使用与维护保养
常用液相色谱柱使用与维护保养液相色谱柱是分离和分析中常用的仪器配件之一，它的使用和维护保养对于实验结果的准确性和可靠性有着至关重要的作用。
本文将介绍常用液相色谱柱的使用和维护保养方法。
一、液相色谱柱的使用方法1.准备工作：在使用前，需要对液相色谱柱进行准备工作。
首先，检查柱的外观是否完好无损，如果发现任何损坏或污染，应立即更换。
其次，检查柱装置是否牢固，连接是否紧密。
最后，将固定相和移动相装入柱中，确保固定相充分均匀地填充在柱内。
2.柱的条件调节：根据实验需要，调节液相色谱柱的柱温、流速和柱压等参数。
在调节柱温时，应注意避免温度过高或过低对柱的损害。
调节流速时，应根据样品性质和分离效果选择合适的流速。
控制柱压时，要确保柱内压力稳定在可接受范围内，避免超过柱的承压能力。
3.样品进样：将待测样品注入进样口或进样器中，注意避免空气进入柱，避免对柱的污染。
可以选择外部进样或直接进样的方法，具体方法根据实验要求和样品性质进行选择。
4.运行柱：在启动液相色谱仪前，先将柱进行预冲洗。
预洗液可以选择与移动相相同的溶剂。
启动液相色谱仪后，根据实验要求设定好运行条件，开始进行实验。
在实验过程中，要及时观察色谱图的变化，根据实验需要调节柱温、流速等参数。
5.柱的保存：在柱使用完毕后，将固定相充分冲洗干净，保证柱内固定相的干燥和保存。
然后，将柱装入保护柱架中，避免碰撞和损坏。
柱的保管环境要保持清洁、干燥、避光和稳定的温度。
二、液相色谱柱的维护保养方法1.柱的清洗：在使用液相色谱柱之前，需要先清洗柱以去除可能存在的污染物。
清洗方法包括预洗和后洗。
预洗可以选择与移动相相同的溶剂，将溶剂通过柱时，将固定相表面的杂质冲洗掉。
后洗可以选择与前一个样品不同的溶剂，将固定相和样品残留物进行清洗。
2.避免柱的干燥：柱在使用过程中，应尽量避免柱的干燥，因为柱的干燥会对固定相造成损害。
在柱停用时，应及时用溶剂进行冲洗并封存起来，以保持柱内的湿润状态。
高效液相色谱柱的使用与维护
高效液相色谱柱的使用与维护
液相色谱法是一种研究物质组成的非常有用的分析方法，液相色谱柱是其中重要的组成部分。
高效液相色谱柱具有高分辨率、高灵敏度和快速分析能力等优点，在物质结构分析、比较分析、药物质量真实性检测等方面得到了广泛的应用。
高效液相色谱柱包括筒体、固定相、移动相和柱口等原件，其功能是使溶剂中的被分析物质分离并聚集在移动相中，以获得良好的精确度和灵敏度。
因此，在使用高效液相色谱柱的时候，需要正确的使用和维护。
一、高效液相色谱柱的正确使用
1、正确选择液相色谱柱。
在选择液相色谱柱的时候，必须正确考虑柱型、长度、内径、固定相、移动相等因素，保证实验数据的准确性。
2、正确安装液相色谱柱。
在安装柱子之前，应该先检查它的外观，确保没有任何损伤，然后根据实验要求正确安装柱子、柱体、柱头、柱柄，并紧固螺丝，以确保实验的准确性。
3、正确操作液相色谱柱。
在操作液相色谱柱之前，应该先做好实验准备，检查仪器的各项参数，建立校正曲线，并根据实验要求正确调整移动相的流量和温度，以保证测得准确和可靠的实验数据。
二、高效液相色谱柱的正确维护
1、定期检查液相色谱柱。
定期检查柱子的外观，确保没有任何损伤，检查柱体、柱头、柱柄和螺丝的松紧情况，并且按照实验要求
正确维护柱子。
2、定期清洗液相色谱柱。
定期清洁柱子，以避免污垢滋生，降低仪器的精度和准确度，并减少仪器的维护次数。
3、定期更换柱子。
液相色谱仪色谱柱使用时需要注意哪些细节 液相色谱如何做好保养
液相色谱仪色谱柱使用时需要注意哪些细节液相色谱如何做好保养在液相色谱仪的日常分别分析工作中，其色谱柱的正确使用和维护特别紧要，色谱柱使用是否得当，直接影响色谱柱的寿命及液相色谱仪的使用效果，在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护仪器。
1、柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。
必需防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。
2、假如仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根柱，这样有助于延长柱子的寿命。
3、避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
4、应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然。
5、如使用柱温掌控装置时，应注意在通人流动相后才能升温。
6、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会快速降低柱效。
7、选择使用适合的流动相，以避开固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解。
8、避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。
保护柱一般是填有相像固定相的短柱。
保护柱可以而且应当常常更换。
9、保存液相色谱仪的色谱柱时应将柱内充分乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。
禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。
安捷伦液相色谱仪的日常维护及保养1、手动进样器：平常应当注意使用二次蒸馏水和甲醇在装载状态及进样分析状态清洗；假如显现漏液现象，原因极可能为转子密封垫磨损或污染，一般要申请维护和修理或更换配件。
2、排液阀：此处不能完全密封或漏液时一般是其中的垫片污染或磨损，可卸下后取出其垫片用异丙醇超声波清洗或更换垫圈。
inertsil sil色谱柱使用
inertsil sil色谱柱使用
Inertsil SIL色谱柱是由GL Sciences公司生产的一类柱子，用
于高效液相色谱（HPLC）分析。
该柱子基于硅胶（silica gel）填充剂，具有较大的孔隙体积和较高的表面积，可以提供较高的样品载量和分离效率。
Inertsil SIL色谱柱通常用于分析中等至高极性的化合物，如有
机酸、酚类化合物、氨基酸和肽类等。
它适用于多种应用领域，包括医药、食品、环境和生物分析等。
在使用Inertsil SIL色谱柱时，应注意以下几点：
1. 柱子的预处理：在使用前要进行柱子的预处理，一般是通过洗涤柱子来去除柱子表面的杂质。
可以使用有机溶剂和缓冲液进行洗涤。
2. 样品制备：样品要尽可能纯净，避免杂质干扰。
对于不溶于流动相的样品，可以选择适当的溶剂溶解。
3. 流动相的选择：根据分析物的性质选择适当的流动相，通常是有机溶剂和缓冲液的混合物。
可以根据柱子的使用手册或参考文献来确定最合适的流动相条件。
4. 列柱温度：柱子的温度对分离效果有一定影响，可以在一定范围内调整柱子的温度，以获得最佳的分离效果。
5. 检测器选择：根据分析物的性质选择合适的检测器，常见的
有紫外检测器（UV）、荧光检测器和质谱检测器等。
在使用Inertsil SIL色谱柱时，还需要遵循标准的色谱操作流程和实验室安全规范，以确保实验结果的准确性和安全性。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
液相色谱柱使用经验谈
色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
1.样品的前处理：
a.最好使用流动相溶解样品。
b.使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c.使用0.45祄的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2.流动相的配制：
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：
a.流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
b.流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c.流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d.流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。
如，使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
e.流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。
f.在流动相配制好后，一定要进行脱气。
除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3.流动相流速的选择：
因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。
对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。
对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml/min，对于内径为
4.0mm柱，流速0.8mL/min为佳。
当选用最佳流速时，分析时间可能延长。
可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间（如，使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量）。
注意：
a.由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。
b.对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相，没有提纯的己烷不得使用。
用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧)，去离子水及双蒸水中含有酚类杂质，有可能影响分析结果。
c.含水流动相最好在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。
最好加入叠氮化钠，防止细菌生长。
d.流动相要求使用0.45 祄滤膜过滤，除去微粒杂质。
e.使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。