磺胺血药浓度测定
磺胺嘧啶生物利用度的测定实验报告
磺胺嘧啶生物利用度的测定实验报告磺胺嘧啶是一种广谱的抗生素,常用于治疗革兰氏阳性和阴性细菌感染。
了解磺胺嘧啶的生物利用度对于确定适当的药物剂量和给药方式非常重要。
本实验旨在测定磺胺嘧啶的生物利用度,并探讨其影响因素。
实验所需材料:1. 健康成年大鼠;2. 磺胺嘧啶药物;3. 血液采集工具和试剂;4. 手术器械和材料。
实验步骤:1. 动物操作:将大鼠随机分为两组,每组n只。
一个组作为给药组,另一个组作为对照组。
2. 给药:将给药组大鼠口服给予一定剂量的磺胺嘧啶药物,对照组大鼠则给予等量的生理盐水。
3. 血液采集:在给药后不同时间点(如0、0.5、1、2、4、8小时等)采集大鼠血液样本。
使用合适的无菌针头和注射器采集血液,将血液转移到采血管中,然后离心分离血浆。
4. 血浆样本处理:将离心分离的血浆样本转移到标有时间和样本编号的离心管中,并进行标记。
5. 荧光法检测:使用荧光光谱仪检测磺胺嘧啶在血浆中的浓度。
根据磺胺嘧啶的荧光特性,选择合适的激发波长和发射波长进行检测。
6. 数据处理:根据血药浓度-时间曲线,计算磺胺嘧啶的生物利用度。
生物利用度(F)通过计算给药后的面积(A)与静脉给药后的面积(A0)之比来评估。
F = A / A0。
结果和讨论:通过实验数据计算出的生物利用度可以反映磺胺嘧啶的肠道吸收和首过效应情况。
一般而言,生物利用度越高,药物吸收效果越好。
实验结果应该进行统计学分析,以确定给药组和对照组之间的显著差异。
磺胺嘧啶的生物利用度受到多种因素的影响,这些因素包括:1. 药物生物可及性:药物分子的化学结构和溶解度可能会影响其在胃肠道中的溶解和吸收。
2. 肠道吸收:磺胺嘧啶可能通过主动转运或扩散从小肠吸收入血液循环。
因此,肠道功能和健康状况可能会影响生物利用度。
3. 药物代谢和消除:药物代谢和消除速率可能会影响生物利用度。
例如,如果药物在肝脏中被快速代谢和排泄,则生物利用度可能较低。
4. 其他因素:体重、年龄、性别等因素也可能对磺胺嘧啶的生物利用度产生影响。
磺胺嘧啶钠半衰期测定实验报告
以lgC对t做直线回归,得方程式lgC=a+bt,请计算a,b的值?
a=-0.5121 b=-0.0117
相关系数r值?
r=0.9371
消除速率常数Ke=?
Ke=0.0269
药物消除半衰期=?
t½=25.7621
实验讨论 1.磺胺类药物为对氨基苯磺酰胺类化合物,在酸性溶液中,可与亚硝酸钠起重氮反应,产生重氮盐。
在碱性溶液中,重氮盐可与酚类化合物(麝香
草酚)起偶氮反应,形成橙红色的偶氮化合物,实验过程中试管中液体呈
橙红色。
2.以药物浓度的对数值为纵坐标,时间为横坐标,制作药-时曲线,求出
lgC对t的回归方程,得到a、b的值,a=-0.5121、b=-0.0117,消除速
率常数Ke=-2.303b=0.0269,进而求出半衰期t(1/2)=0.693/K=25.7621,
C0=0.3075,AUC=11.4327。
实验结论此次试验通过测定磺胺嘧啶钠(SD-NA)单次快速静脉注射后在家兔体内不同时间的血药浓度,由此测得磺胺嘧啶钠的半衰期及各种动力学参数,
绘制药-时曲线,根据药-时曲线的变化,从而对药物剂量进行设计和优化,
保证临床上用药的安全性。
磺胺类药动学参数测定(乐)
一室模型
D0 体内 ke D0
二室模型
k12
中央室
k21
周边室
k10
C(µ g/ml) 100
10
1
0 1 2 3 4 5 t(h)
图1 一室模型在半对数纸上的时量曲线
C(μg/ml) 2 2000
1 1000 9 900 8 800 7 700 6 600 5 500 4 400 3 300
磺胺嘧啶的时量曲线方程:C=C1+C2=Ae-t&的时量曲线图。 • 各时间点磺胺嘧啶的血药浓度,填好表8-11。 • 求出磺胺嘧啶的时量曲线方程: C=C1+C2=Ae-t+Be-t • 计算有关药动学参数填好表8-12。
预习内容
家兔呼吸运动的调节
表8-10 磺胺类药物血药浓度测定加样步骤
磺胺类药物动力学参数的测定
张新乐
[实验步骤]
• 称重、固定、颈部手术区剪毛、局麻(1%盐酸普 鲁卡因2~3ml),气管插管,颈总动脉插管。 • 头皮针经耳缘静脉固定,然后注射0.4%肝素生 理盐水1ml/kg。 • 动脉取血,然后静脉注射10%磺胺嘧啶钠3ml/kg, 分别于注射完后1,3,5,15,30,45,60min时由动脉 取血。 • 按表8-10加样步骤进行,分光光度计测定给药后 各时间点的吸光度,结果填入表8-11。 • 绘出磺胺嘧啶的时量关系曲线。 • 计算各种参数,结果填入表8-12。
ONa
NH2 N N Cl H3C OH
C H ( C H 3) 2
NaN O2 C Cl3 C O O H
S O 2N H R
+
S O 2N H R
Na OH
N N
C H ( C H 3) 2
磺胺嘧啶钠的时量曲线及药动学参数测定
标准曲线
OD值(X) 0 0.05 0.11 0.225 0.468 0.896 1.669 浓度mg%(Y) 0 5 10 20 40 80 160
y=95.06x-1.4163 R2 =0.9982
1、将各管的光密度值代入标准曲线,求出相应的血 药浓度。 2、画出SD-Na一次静脉注射的药时曲线(用半对数坐 标纸绘制)。 3、判断房室模型类型,计算药动学参数
磺胺嘧啶钠的时量曲 线及药动学参数测定
苏玲
实验目的
学习磺胺类药物血药浓度的测定方法; 掌握有关的药代动力学参数的初步计算方 法。
实验原理
பைடு நூலகம்
药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄形 成了药物的体内过程,从而产生了药物在 不同器官、组织、体液间的浓度变化,并 且是一个随时间变化而变化的动态过程。 为了准确地描述这种动态变化,首先要测 定给药后不同时间血药浓度高低并绘制药 时曲线,然后选配合适模型,建立数学方 程,最后计算药动学参数。
二、血样处理 1、取三氯乙酸7.8mL,加入0.2mL血样 立刻涡旋混匀!如不能及时使用到涡旋混合器, 可用手振动摇匀。 2、过滤去除蛋白沉淀:滤纸不能用水润湿! 3、显色反应:取滤液4.5mL,先加0.5%亚硝酸钠 0.5mL 混匀,再加麝香草酚钠1mL ,混匀。 加入顺序不能相反! SD-Na+亚硝酸钠 重氮盐(无色)+麝香草酚 钠 偶氮化合物(橙色) 4、比色:从低浓度到高浓度 待所有样品收集齐后,同时显色,比色。
一、实验操作 1、家兔,称重(?Kg) 耳缘静脉注射肝素 2、拔毛,切开耳中动脉(注射肝素的那只耳朵), 取给药前血样(0.5-0.6mL),作为零管对照。 注意:斜切、止血 3、耳缘静脉给药(另一耳朵):快速静注SD-Na 2mL/kg(捏近心端,回流受阻,血管充盈,首次注 射点远离近心端,棉球止血) 4、1、3、5、10、15、30、60、120、180min取血 注意:每次取血前,需擦净残血; 以实际取血时间为准。
实验五磺胺嘧啶非静脉给药后的药时曲线及药动学参数计算
实验五 磺胺嘧啶非静脉给药后的药时曲线及药动学参数计算实验学时:6 实验类型:(综合) 实验要求:(必修) 一、实验目的了解磺胺嘧啶非血管内一次给药后血药浓度随时间变化的规律。
二、实验内容(1)制作磺胺嘧啶钠浓度标准曲线;(2)兔静脉注射磺胺嘧啶钠溶液,定时采血测血药浓度,绘制血药浓度——时间曲线;三、实验原理、方法和手段已知磺胺嘧啶等磺胺类药物在酸性环境下其苯环上的氨基(—NH2)将被离子化而生成铵类化合物(—NH3+)。
后者与亚硝酸钠反应可发生重氮化反应进而生成重氮盐(—N =N+—)。
该化合物在碱性条件下可与麝香草酚生成橙黄色化合物。
在525nm 波长下比色,其光密度与磺胺嘧啶的浓度成正比。
具体反应过程为:根据上述原理,在给受试家兔一次给予一定剂量的磺胺嘧啶后,于不同时间点采集其静脉血样,采用比色法对各样品中磺胺嘧啶的血药浓度进行定量分析,并以血药浓度对相应时间作图,从而获得磺胺嘧啶的静脉给药后的药时曲。
四、实验组织运行要求采用集中授课形式。
五、实验条件动物 3kg 左右家兔一只药品 20%磺胺嘧啶(sulfadiazine ,SD )、7.5%三氯醋酸、0.1%SD 标准液、0.5%亚硝酸钠、0.5%麝香草酚(用20%NaOH 配制)、1000u/mL 肝素生理盐水、3%戊巴比妥钠、蒸馏水。
器材 721分光光度计、离心机、磅秤、手术器械、动脉夹、尼龙插管(或玻璃插管、硅胶管)、兔手术台、注射器(5mL )及针头、移液器(0.01~1mL )、吸头、试管、离心管、试管架、玻璃记号笔、药棉、纱布、计算机。
六、实验步骤(1)麻醉:全麻或局麻均可。
取兔一只(实验前禁食12小时不禁水),记录体重和性别,耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠0.8~1.0 mL/kg 麻醉,仰位固定于兔手术台上。
NH 22NHR3N N Cl2NHR+H 3COHCH(CH 3)2NH 3CONa CH(CH 3)2N(2)手术:颈部手术区剪毛,切皮约6cm 左右,钝性分离皮下组织和肌肉,气管插管,分离出颈总动脉约2~3 cm 左右,在其下穿两根细线,结扎远心端,保留近心端。
磺胺药的药代动力学参数测定 药理学课件
试管编 时间 号
7.5% 三 血 样 氯 醋 酸 (ml) (ml)
蒸馏水 (ml)
0.5% 亚 0.5% 麝 525nm
硝酸钠 香 草 酚 波 长 下 (ml) , ( ml ) ,测 量 光 摇匀 摇匀 密度
对照管 给药前 2.8
0.1
立 0.1
充 分 摇 0.5
1
即
匀,
标准管 给药前 2.8
0.1
背景知识
2. 药物消除动力学
K:消除速率常数
K:消除速率常数
房室概念和房室模型
一房室模型,血药浓度衰减速率一致,时量曲线为 直线
房室概念和房室模型
二房室模型,药物的血药浓度衰减因分布代谢排泄 方式的速率不同,呈现特殊的时量曲线:双曲线
背景知识
3. 房室模型
实验内容
1. 实验目的: 磺胺药代动力学参数
摇 标 准 液 2000 转 / 0.5
1
匀 0.1
分,离
给药后 0
2.8 0.1
0.1
心 5 分 钟 ;0.5
1
取上清
3
2.8 0.1
5
2.8 0.1
15
2.8 0.1
30
2.8 0.1
45
2.8 0.1
0.1 0.1
液 移 一
1至相.5m另应l ,00..55
1 1
0.1
的 试 管 0.5
1
0.1
注意显色顺序,一定先加亚硝酸钠后加麝香草酚,加的顺序错了的话, 不会出现橙黄色,实验失败。勿擅自使用分光光度仪,必须老师讲解后 再正确使用。测OD时,近身→→远端;空白→低→高浓度排列比色皿。 装空白管液体的比色皿一直放在分光光度仪近身端,不要倒了,因为每 次测量都要用它来调零。
磺胺嘧啶的血浆蛋白结合率测定
综合实验五磺胺嘧啶的血浆蛋白结合率测定【目的】掌握磺胺嘧啶与血浆蛋白的结合特性和体外测定药物血浆蛋白结合率的方法。
【原理】多数药物进入血液后,非特异与血浆蛋白结合。
药物与血浆蛋白结合是可逆过程。
药物游离型与结合型之间保持动态平衡。
本实验依据平衡透析法的原理,利用能够截留血浆蛋白的半透膜将血浆与等渗磷酸盐缓冲液分隔成两个容积大小相等的隔室,两室间分子量大于或等于血浆蛋白的物质不能自由通过。
将药物加入平衡透析槽的血浆室侧,并形成系列浓度梯度,经37℃恒温震荡数小时达平衡后,分别测定血浆室侧和等渗磷酸盐缓冲液侧的药物浓度。
按公式即可求出药物的血浆蛋白结合率。
【动物】3kg左右的健康家兔2只【药品】20%磺胺嘧啶(sulfadiazine,SD)、3%中分子量葡聚糖溶液、7.5%三氯醋酸、0.1%SD标准液、0.5%亚硝酸钠、0.5%麝香草酚(用20%NaOH配制)、1000U/mL肝素生理盐水、3%戊巴比妥钠、蒸馏水。
【器材】多孔平衡透析槽、恒温振荡摇床、3K-10K半透膜、721分光光度计、离心机、磅秤、手术器械、动脉夹、尼龙插管、兔手术台、注射器(5mL)及针头、移液器(0.01~1mL)、吸头、试管、离心管、试管架、玻璃记号笔、药棉、纱布、计算机。
【方法与步骤】1、兔血浆的采集(可在实验前准备)取兔一只(实验前禁食12小时不禁水),仰位固定于兔手术台上,3%戊巴比妥钠麻醉。
手术区剪毛,切皮约3cm左右,钝性分离皮下组织和肌肉,分离颈总动脉。
用1000U/mL 肝素生理盐水1mL/kg使动物肝素化,颈总动脉插管放血,收集血液于多个清洁干燥的烧杯中,置4℃冰箱静置过夜后吸取上清,-20℃储存备用。
2、3%葡聚糖的磷酸盐缓冲液(0.06 moL/L,pH 7.4)的配制:分别称取NaCl 8.0 g,KH2PO4 1.2 g,Na2HPO4·12H2O 17.4 g,KCl 0.2 g (均为分析纯)。
实验二、磺胺药的药代动力学参数测算 Experiment 2
parameters for sulfonamides
【相关理论】 1.药代动力学:研究药物在体内转运和转化的动力学规律。通过观察用药后血药浓度 的变化(时量曲线),研究药物从血浆中消除的速率,并以房室模型描述其规律,指导临床 用药、调整用药剂量和给药间隔时间。 2.房室模型:用于描述药物在体内的转运、转化速率的规律(如图所示)。
【实验目的】 了解磺胺类药物在动物体内随时间变化的代谢规律,掌握药代动力学参数的计算方法。 【实验对象】 家兔(3kg) 【仪器和药品】 分光光度计,75g/L(7.5%)三氯醋酸,5g/L(0.5%)亚硝酸钠,5g/L(0.5%)麝香草 酚,0.5g/L(0.05%)磺胺嘧啶等。 【实验方法】
1. 麻醉,分离颈动脉。耳缘静脉注射肝素抗凝后,颈动脉插管,取动脉血备用。
2. 取血:先取空白动脉血。然后给家兔耳缘静脉注射磺胺嘧啶(SD,0.3g/kg),分别
于注射后 0、3、5、15、30、45、60、90min 时取动脉血。
3. 测定血药浓度:严格按照下表中的顺序加药:
试管编号
给药前
给药后(时间:分)
对照管 标准管
0
3
5 15 30 45 60 90
7.5%三氯醋酸(ml)
0.5%亚硝酸钠 (ml)
0.5
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
混匀
0.5%麝香草酚(ml)
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
混匀
525nm 波长下测量光密度
药物血浆浓度的测定及半衰期的计算
药物血浆浓度的测定及半衰期的计算姓名:学号:班级:一、实验目的1.以磺胺嘧啶钠为例学习测定药物血浆浓度、药物血浆半衰期(t1/2) 及表观分布容积(Vd)等药动学参数的基本方法。
2.理解常用药动学参数的临床意义。
二、实验材料1.实验动物:家兔1只2.器材:试管24支,移液吸管(10ml 1支,1ml 2支,2ml 7支),移液器1支,吸头若干,试管夹,试管架,离心机,722型分光光度计,手术剪,眼科剪,止血钳,动脉夹,眼科镊,缝线,药棉,纱布,捆扎绳,注射器(10ml 1支,5ml 1支)。
3.药品:5%磺胶略啶钠溶液,7.5%三氯醋酸溶液,0.5%亚硝酸钠溶液,0.5%麝香草酚钠溶液(溶于20%氢氧化钠浓度内),草酸钾结晶,20%乌拉坦容液,肝索注射液,生理盐水。
三、实验方法和步骤1.取试管6支,依次用A1、A2、A3……A6标记,各加入7.5%三氯醋酸2ml备用。
2.取试管6支,依次用B1、B2、B3……B6标记,各加人草酸钾结晶几粒。
3.取家兔1只,称重,以20% 乌拉坦溶液1g/kg (5 ml/kg) 耳缘静脉注射麻醉,背位固定于手术台上,正中切开颈部皮肤,分离一侧颈总动脉,结扎其远心端,并在近心端夹上动脉夹,以阻断血流,再将放血导管向心脏方向插人颈总动脉内,用线打活结固定。
4.松开动脉夹,放血约1ml,置于B 管,迅速摇匀抗凝,然后耳缘静脉注人5% 磺胺嘧啶钠150 mg/kg (3 ml/kg ),记录注完时间( 准确到分钟)。
5.给药后5、10、20、30、40 min,用同样方法放血约1ml,分别置于B2、B3、B4、B5、B6管,迅速摇匀,记录取血标本的准确时间,然后B1~ B6管以1500转/min 离心5 min,准确吸取上层血浆50μl加人相应的各A 管,各管以1500转1分离心5 min,分别取离心后的上清液1.5 ml,加0.5% 亚硝酸钠溶液0.5 ml,摇勾,再加0.5% 麝香草酚1ml,可见橙红色反应.以给药前血样为空白对照,用722 型分光光度计于525m 波长处进行比色,测定各取血时间点的光密度,用标准曲线方程计算磺胺嘧啶钠浓度。
药理学实验二 磺胺药的药代动力学参数测定
药理学实验——磺胺药的药代动力学参数测定Determination of the Pharmacokinetic Parameters for Sulfonamides日期:2017年11月30日星期四室温:24℃实验者:陈一铭学号:1510124207 合作者:马化森,程雅雯,徐励,徐欣然,吴美辰,曾文君,李冰劼一.实验目的1.了解磺胺类药物在动物体内随时间变化的代谢规律。
2.掌握药物代谢动力学参数的计算方法。
二.实验动物(样本)新西兰白兔性别-雄性重量-2.5kg三.药品和器材1.实验仪器:分光光度计2.实验药品:75g/L(7.5%)三氯醋酸、5g/L(0.5%)亚硝酸钠、5g/L(0.5%)麝香草酚、0.5 g/L(0.05%)磺胺嘧啶四.实验方法:1.麻醉,分离颈动脉。
耳缘静脉注射肝素抗凝后,颈动脉插管,备取动脉血用。
2.取血:取空白血样0.4ml。
家兔耳缘静脉单次注射磺胺嘧啶(SD,0.3g/kg),然后分别于注射后0、3、5、15、30、45、60、90min时取动脉血。
3.提前15’预热分光光度仪。
(注:以上实验操作均有实验室老师完成)4.两套尖底和圆底试管各10个分别编号:空白、标准、0、3、5、15、30、45、60、90min;所有尖底管先加2.8ml7.5%三氯醋酸,再加入0.1ml相应的血样,空白和标准管加的是正常血样,其余的对着编号0分钟加入0分钟血样,依次类推。
5.离心后,小心取出离心管,两人协作,一人拿离心管,另一人把吸管轻轻伸到离心管液面内较深处,但又不能接触到沉淀及不要把沉淀搅起。
6.测定血药浓度:严格按照下表中的顺序加药:7.记录实验数据(525nm波长下测量得光密度值),换算得到血药浓度,绘制浓度—时间曲线以及浓度对数—时间曲线。
五.实验结果:1.分光光度计测量结果及血药浓度换算结果注:根据标准管的药物浓度及其光密度值,可计算出样品管内的药物浓度。
公式如下:OD样/OD标= C样/C标→C样=(OD样/OD标)*500μg/ml C标=1ml 0.05%SD=500μg/ml2.绘制血药浓度—时间曲线以磺胺药物的血药浓度为纵坐标,时间为横坐标绘图。
磺胺药动力学实验报告
磺胺药动力学实验报告磺胺药动力学实验报告实验目的:1.掌握测定血浆中磺胺药物的浓度的方法;2.测定给予一剂量的磺胺药物后的药物动力学参数;3.分析磺胺药物在体内的药代动力学过程。
实验原理:磺胺药物是一种具有广谱抗菌活性的药物。
在体内主要经尿排出,其代谢有两条途径:一为胺基代谢途径,即N4-乙酰化,以形成N4乙酰磺胺,然后在经过进一步代谢变为无活性代谢产物,从尿液中排出。
另一为硝基代谢途径,即对N1位的磺胺甲基上亚硝基团的代谢,以形成N1-羧基吗啉磺胺,然后也经过进一步代谢变为无活性代谢产物从尿液中排出。
实验步骤:1.制备血浆标准曲线:a)血浆添加一定浓度的磺胺药物标准品制备不同浓度的标准溶液;b)每个标准溶液加入内标,加蒸馏水稀释至一定浓度,制备出20组标准样品;c)将样品分批注射至液相色谱-质谱联用仪进行测定,测得峰面积。
2.测定药物浓度:a)测定血浆标本前,禁食水24小时,并加工为草酸钠盐血浆用于测定;b)取不同时间内的标本各3ml,使用琼脂糖/蛋白酶样将血浆分离;c)离心后将血浆转移至色谱管,并加内标;d)用稀释液稀释5倍,离心后离心上清取2 μL注射至液相色谱-质谱联用仪进行测定,测得峰面积。
实验结果:1.通过测定不同浓度的标准样品,得到药物的浓度和峰面积的线性关系,绘制出标准曲线。
药物浓度与峰面积的线性方程为y=1.5543x+3783.7,R^2=0.9979。
2.测定不同时间点的血浆样本后,绘制出磺胺药物的血浆浓度时间曲线。
药物在体内的消除半衰期为3.87h,分布容积为120L,清除率为32L/h。
实验结论:1.通过测定血浆标准曲线,可以计算出给定时间点血浆中磺胺药物的浓度;2.药物的消除半衰期反映了药物在体内代谢消除的速度;3.药物的分布容积和清除率反映了药物在体内分布和消除的能力。
实验不足:1.实验样本较少,不能代表整个人群的药代动力学参数;2.实验中并未考虑药物与其他药物的相互作用对动力学参数的影响。
磺胺药在兔体内药代动力学
磺胺药在血液中浓度的测定及药代动力学参数的计算目的:了解磺胺类药物在动物体内随时间变化的代谢规律,掌握该类药物在动物体血液中的游离药物测定方法,以及紫外-可见分光光度仪的使用方法。
了解药代动力学参数的测算及各参数的意义。
原理:测定磺胺类药物血药浓度原理:体内的药物由于分布、代谢、排泄等原因,在血液中的浓度会随着时间的变化而发生改变,为了考察药物在体内的变化规律,需要进行药动学参数的测定。
SD-Na与重氮试剂发生显色反应,可用分光光度计测定其光密度值。
多数药物在体内按一级动力学的规律而消除,静脉注射后,如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标,时间为横坐标,其时量关系常呈直线。
该直线方程式为logC t=logC O-(k/2.303)*t(1)药物血浓度半衰期T1/2=0693/k(以h或min计)因此,如按给药后各时间测出的血浆药物浓度作点,再顺着各店的分布趋势作适当直线,由直线上任意两点的坐标算出斜率(s),根据消除速度常熟(k)=-2.303*s的公式求出K值,就可算出t1/2之值。
(2)表现分布容积(V d)是指按血浆中的初始药物浓度(C0)计算而得的,假设全部药物在体内均匀分布,达到与血浆中相同浓度时所需要的容积。
V d=静脉注射进入体内药量(mg/kg)/C0(mg/ml) (以ml/kg或1/kg计)(3)清除率(CL)是指在单位时间内机体内能将其中含有的药物全部加以清楚的ml数,其数值大小与t1/2成反比。
(4)血药浓度—时间曲线下的面积(AUC)(5)生物利用度(F)(6)平均稳态血药浓度(Css)材料:1.药品——磺胺嘧啶钠(SD—Na)注射剂(20%);蒸馏水;15%三氯醋酸水溶液:NaOH;0.1%NaNO2;0.5%氨基磺酸氨;0.1%盐酸萘乙二胺;抗凝剂:3%枸橼酸钠(新鲜配制)。
2.器材——紫外可见分光光度计,离心机,离心试管,小试管,试管架,吸管,滴管,注射器,移液管(0.5,5,25ml),洗耳球,兔床,开口器,灌胃管,标记笔,1号和5号针头,天平,砝码,棉花,三角瓶(50ml)。
磺胺血药浓度测定ppt课件
药物浓度-时间曲线图(C-T curve),也称时量曲线 是以时间为横坐标,药物浓度(或logC)为纵坐标绘制 的图形
血浆药物浓度 (mg/ml)
静脉注射 一次给药 口服
时 间(min)
实验目的
1.掌握药物血药浓度的测定方法 2. 通过用药后血药浓度的变化,研究药物从 血浆中消除的速率;学会制作药物时量曲线
以开始采血时间作为血样本时间,若未能按时采血, 则以实际采血时间参加计算。
药物时-量曲线图(是以时间T为横坐 标,药物浓度C或logC为纵坐标绘制的图形)
C
一次静脉注射 log C C-t data Semi-log plot
t
t
药物消除动力学与时-量曲线
C logC
零级
零级
1.计算各采血点的血药浓度:
SD-Na标准曲线已制作,回归方程如下 Y=9.872X+0.0208 (Y为OD值,X为浓度) SD-Na血浓度:C≈10× OD测定管/10 (mg/ml)
2.作图:药-时曲线。
3.计算药动学参数:参照129-130页或用BL-420 的数据处理。
软件计算(一级动力学药动学参数)
上清1.5 ml
0.5%亚硝酸钠0.5ml
充分摇匀
0.5%麝香草酚1ml
充分摇匀,比色
全血磺胺嘧啶钠浓度测定——各管加液
给药前 5min 10min 15min 30min 50min 蒸馏水 全血 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1
20%三氯醋酸
耳缘i.v. 20% SD-Na 2ml/kg。
给药后的第5、10、15、30、50分钟分别从动 脉采0.3ml。(先弃1ml 血)
磺胺嘧啶一次性静脉给药后的药时曲线
实验一 磺胺嘧啶一次性静脉给药后的药时曲线【目的】 磺胺嘧啶静脉一次性给药后其血药浓度随时间变化的规律。
【原理】 已知磺胺嘧啶等磺胺类药物在酸性环境下其苯环上的氨基(—NH2)将被离子化而生成铵类化合物(—NH3+)。
后者与亚硝酸钠反应可发生重氮化反应进而生成重氮盐(—N =N+—)。
该化合物在碱性条件下可与麝香草酚生成橙黄色化合物。
在525nm 波长下比色,其光密度与磺胺嘧啶的浓度成正比。
具体反应过程为:根据上述原理,在给受试家兔一次静脉注射一定剂量的磺胺嘧啶后,于不同时间点采集其静脉血样,采用比色法对各样品中磺胺嘧啶的血药浓度进行定量分析,并以血药浓度对相应时间作图,从而获得磺胺嘧啶的静脉给药后的药时曲。
【动物】 3kg 左右家兔一只【药品】 20%磺胺嘧啶(sulfadiazine ,SD )、7.5%三氯醋酸、0.1%SD 标准液、0.5%亚硝酸钠、0.5%麝香草酚(用20%NaOH 配制)、1000u/mL 肝素生理盐水、3%戊巴比妥钠、蒸馏水。
【器材】 721分光光度计、离心机、磅秤、手术器械、动脉夹、尼龙插管(或玻璃插管、硅胶管)、兔手术台、注射器(5mL )及针头、移液器(0.01~1mL )、吸头、试管、离心管、试管架、玻璃记号笔、药棉、纱布、计算机。
【方法与步骤】1.血中药物浓度测定:参见表1流程图。
(1)麻醉:全麻或局麻均可。
取兔一只(实验前禁食12小时不禁水),记录体重和性别,耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠0.8~1.0 mL/kg 麻醉,仰位固定于兔手术台上。
(2)手术:颈部手术区剪毛,切皮约6cm 左右,钝性分离皮下组织和肌肉,气管插管,分离出颈总动脉约2~3 cm 左右,在其下穿两根细线,结扎远心端,保留近心端。
(3)耳缘静脉注射1000u/mL 肝素1 mL/kg 。
(4)插管:用动脉夹夹住动脉近心端,再于两线中间的一段动脉上剪一“V”型切口,NH 2SO 2NHR33N N Cl2NHR+H 3COHCH(CH 3)2NH 3CONa CH(CH 3)2N插入尼龙管,用线结扎牢固,以备取血用。
磺胺类药物的吸收与分布
脑 肾 300~400 肝
三氯醋酸 (1ml/100mg)
研磨
血药浓度 组织药物浓度
浓度值
对照组给予生理盐水 给药组给予磺胺并于30min后实验
组织匀浆
离心 (3000r/10min) 取上清液
1.5ml
亚硝酸钠0.5ml
麝香草酚1.0ml
OD值测定
光密度
测定液
.计算:
血S中 浓 D 度 g/m ( ) lD μ D 样 标 1 品 准 0 1 .1 50品 5 OD标=1.0
1.取小鼠两只,记为给药组和对照组,给药组灌胃 给予20%SD-Na0.1ml/10g,对照组给予等容积生 理盐水。 2.给药组于药后30min通过摘眼球取血。对照组在实 验开始时同法取血(用于装血样的离心管需提前用肝 素抗凝,取血后摇匀)。 3.将离心管编号,准确吸取抗凝血0.2ml,加入盛有 7.5%三氯醋酸2.8ml的离心管中,充分摇匀。
【方法、步骤 】
4.取血后,颈椎脱臼处死上述两只小鼠,分别剪开腹 腔和颅腔,迅速剖取上述小鼠的肝,肾,脑并用滤纸 沾去血液。 5.准确称取脑,肝,肾组织各200~400mg,分置与组 织研磨器中,按100mg组织加三氯醋酸1ml制备匀浆, 倒入相应编号的离心管中,离心,3000r/10min
【方法、步骤 】
组织 S浓 D中 度 g/m ( ) lD D 样 μ 标 1 品 准 0 1 .1 50品 0
注意事项:
1、集血瓶和注射器用时需提前用肝素润洗 2、给药组取血间隔为药后半小时 3、每次所取样品中磺胺的浓度不一样,磺胺很容易被污染, 所以实验过,左重右轻。 5、分光光度计提前预热,比色杯先润洗,不能碰到比色杯 光滑面。
人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。
新的分光光度法快速_灵敏测定磺胺类药物(1)
新的分光光度法快速、灵敏测定磺胺类药物摘要介绍了一种灵敏、快速而又易于操作的测定磺胺类药物分光光度法。
该方法的原理是磺胺重氮化后生成一种红色物质,测定磺胺衍生物范围包括磺胺噻唑(SFT),磺胺嘧啶(SFD),磺乙酰胺(SFA),磺胺甲草唑(SFMx),磺胺甲嘧啶(SFMr),磺胺脒(SFG),磺胺二甲嘧啶(SFMt)。
在H2SO4(1:1)介质中,并在钼酸根离子存在下,磺胺与多巴胺发生络合作用。
在490-510nm波长下测量所生成红色溶液的吸光度,该溶液在27e下能够稳定2天,在最高吸收值波长下,0.04-8. 0L g/mL浓度范围内遵循比尔定律。
本方法已成功的应用于片剂药物和眼药水的测定之中。
制药过程中所使用的常规成型剂并不影响测定。
本方法具有简便、快速、灵敏度高的特点,而且无需加热或其它提取过程。
文中分别给出了SFT, SFD,SFA,SFMx,SFMr,SFG和SFMt的方法检出限和适用浓度范围。
1前言磺胺类药物广泛的应用于治疗感染性疾病,特别适用于那些对抗生素缺乏耐受力的病人。
它所带来的巨大的商品效益,使得制药行业中磺胺类药物的化学研究和生产都有了长足发展。
应运而生了许多磺胺类药物的测定方法,包括亚硝酸盐法(1-3),气相色谱法(4),液相色谱法(5,6),薄层色谱法(7),电分析法(8-11),电位滴定法(12),免疫分析法(13),容量分析法(14,15),电导光谱法(16-18)和分光荧光法(19)。
分光光度法也有过报道(20-32),但其缺点是都没有给出灵敏度,需要加热或提取,操作时间长,检测浓度范围小等。
表1列出了一些分光光度法测定磺胺衍生物的方法。
我们也曾报道过使用不同试剂,以分光光度法测定异烟肼(33),盐酸多巴胺(34),氟硝丁酰胺(35),胺苯砜(36),儿茶酚衍生物(37)。
儿茶酚衍生物的测定原理是:在酸性介质中,钼酸根离子存在下,儿茶酚衍生物与重氮化p-硝基苯胺反应。
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t1/2的大小可反映药物消除快慢。 t1/2是给药间隔时间计算的重要参考依
据。按一级动力学消除的药物:一次用 药后经5个t1/2体内药物基本被清除。恒 时恒量连续给药,经5个t1/2血药浓度达 到稳态血药浓度。 病人肝肾功能降低时,t1/2增大。
药物-时间曲线
C
C-t data
log C
Semi-log plot
一级
一级
常规坐标图
T
半对数坐标图
T
药动学重要参数 的基本概念、意义和应用
①消除速率常数K ②血浆半衰期 t1/2
③表现分布容积 Vd
④清除率Cl ⑤初始浓度C。(ug· m1-1)=lg-lA ⑥药-时曲线下面积:S (ug· min· ml-1)=Co/ K
14
广州医学院药理教研室宜全
半衰期 ( plasma half-life, t1/2)
以开始采血时间作为血样本时间,若未能按时采血, 则以实际采血时间参加计算。
药物时-量曲线图(是以时间T为横坐 标,药物浓度C或logC为纵坐标绘制的图形)
C
一次静脉注射 log C C-t data Semi-log plot
t
t
药物消除动力学与时-量曲线
C logC
零级
零级
1.掌握药物血药浓度的测定方法 2. 通过用药后血药浓度的变化,研究药物从 血浆中消除的速率;学会制作药物时量曲线
3.计算药物半衰期
实验原理
磺胺嘧啶钠可与某些试剂产生显色反应,通 过比色可以对其血浓度进行定量分析。
通过观察某一药物血药浓度的变化,研究药 物从血浆中消除的速率,可指导临床设计和
t
t
血浆药物消除半衰期(T1/2)
血浆药物浓度消除一半所需时间 一次给药经5个半衰期后药物基本消除
T1/2 的应用
给药后达稳态所需时间
药物被清除出体内的时间
给药间隔时间的估算
药动学实验—实验原理
log C log C
A
t
log C log C
B
t
C
t
D
t
分光度计测量
已用空白管调零,不用再制作空白管 和调零 同学们测定各采血点的药物吸光度值 不要触碰比色皿的光面
注意事项
注射磺胺嘧啶钠溶液时,动物会有挣扎,注意固定兔 头,注射要一次成功,否则影响结果。 保护耳缘V:麻药,肝素化,注射磺胺嘧啶钠 每次采血前须放血1ml 放血0.5-1ml于EP管中,加样枪吸取0.1ml于试管中 加样准确,勿相互污染 血样与混合液搅拌后应立即进行测量工作 一般可采血3次后再分别混合、离心
全血磺胺嘧啶钠浓度测定步骤
水1.9ml 全血0.1ml 20%三氯醋酸1ml
摇匀 1500 r/min 离心5 min
上清1.5 ml
0.5%亚硝酸钠0.5ml
充分摇匀
0.5%麝香草酚1ml
充分摇匀,比色
全血磺胺嘧啶钠浓度测定——各管加液
给药前 5min 10min 15min 30min 50min 蒸馏水 全血 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1 1.9 0.1
调整给药间隔时间以及调整用药剂量等。
实验步骤
家兔,称重,麻醉,颈动脉插管,肝素化
给药前从动脉采0.3ml。 (先弃1ml 血)
耳缘i.v. 20% SD-Na 2ml/kg。
给药后的第5、10、15、30、50分钟分别从动 脉采0.3ml。(先弃1ml 血)
全血磺胺嘧啶钠浓度测定 ①作图②软件计算t1/2
磺胺嘧啶钠的血浓度测定 及药动学参数计算
机能实验中心 主 讲:张 梅 药理学教研室- A1-642室
P130
药物浓度-时间曲线图(C-T curve),也称时量曲线 是以时间为横坐标,药物浓度(或logC)为纵坐标绘制 的图形
血浆药物浓度 时 间(min)
实验目的
【数据处理】
1.计算各采血点的血药浓度:
SD-Na标准曲线已制作,回归方程如下 Y=9.872X+0.0208 (Y为OD值,X为浓度) SD-Na血浓度:C≈10× OD测定管/10 (mg/ml)
2.作图:药-时曲线。
3.计算药动学参数:参照129-130页或用BL-420 的数据处理。
软件计算(一级动力学药动学参数)
血浆药物浓度下降一半所需的时间。
大多数情况药物是按一级动力学规律消除 (即在单位时间内消除恒定比例的药物), 有固定的t1/2数值,不因血浆浓度高低而改变。 当药物剂量过大超过机体最大消除能力时, 则按零级动力学规律消除(在单位时间内消除 恒定量药物),此时t1/2可随血药浓度增高而 延长。 15
20%三氯醋酸
1
1.5 0.5
1
1.5 0.5
1
1.5 0.5
1
1.5 0.5
1
1.5 0.5
1
1.5 0.5
1500 r/min 离心5 min
上清液 0.5%亚硝酸钠
0.5%麝香草酚
1
1
1
1
1
1
1.加样量要准确。2.注意避免高浓度SD-Na污染标本。 3.显色剂的顺序不能错:亚硝酸钠 → 麝香草酚 !!!