08@碘淀粉比色法
淀粉酶活力的测定方法
淀粉酶活力的测定方法淀粉酶是一类能够催化淀粉水解的酶，在生物体内和工业生产中都具有重要的作用。
准确测定淀粉酶的活力对于研究酶的性质、生物体的代谢过程以及相关工业应用都具有重要意义。
下面将介绍几种常见的淀粉酶活力测定方法。
一、碘淀粉比色法碘淀粉比色法是一种较为经典且常用的测定方法。
其原理是淀粉经淀粉酶水解后，剩余的淀粉与碘液反应生成蓝色复合物，颜色的深浅与剩余淀粉的量成正比。
通过比色法测定反应后溶液的吸光度，即可计算出淀粉酶的活力。
具体操作步骤如下：首先，准备一系列含有不同浓度淀粉溶液的试管，并向其中加入适量的淀粉酶溶液，在一定的温度和 pH 条件下反应一段时间。
然后，迅速向各试管中加入碘液，使反应终止。
最后，使用分光光度计在特定波长下测定各试管溶液的吸光度。
根据事先绘制的标准曲线，将吸光度值转换为剩余淀粉的浓度，从而计算出淀粉酶水解淀粉的量，进而得出淀粉酶的活力。
这种方法的优点是操作相对简单、成本较低，但缺点是灵敏度相对较低，对于低活力的淀粉酶测定可能不够准确。
二、DNS 法（3,5-二硝基水杨酸法）DNS 法是另一种常用的测定淀粉酶活力的方法。
其原理是淀粉在淀粉酶的作用下水解为还原糖，还原糖能与 3,5-二硝基水杨酸在碱性条件下共热，被还原成棕红色的氨基化合物。
在一定范围内，还原糖的生成量与淀粉酶的活力成正比，通过比色测定棕红色物质的吸光度，即可计算出淀粉酶的活力。
操作过程如下：将淀粉溶液与淀粉酶溶液在适宜条件下反应一定时间后，取出适量反应液，加入DNS 试剂，在沸水浴中加热一段时间，使反应充分进行。
冷却后，使用分光光度计测定溶液在特定波长下的吸光度。
与碘淀粉比色法相比，DNS 法的灵敏度较高，能够更准确地测定低活力的淀粉酶，但操作过程相对复杂一些。
三、斐林试剂法斐林试剂法也是基于淀粉水解产生还原糖的原理。
斐林试剂由硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液组成，还原糖能将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子，生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
碘比色法测定淀粉含量
碘比色法测定淀粉含量
碘比色法是一种常用的测定淀粉含量的方法。
淀粉与碘形成复合物时，会呈现深蓝色的颜色，根据颜色的深浅可以推测淀粉的含量。
测定步骤如下：
1. 准备样品：将待测的样品（如食物、植物组织等）制成适当的浓度，使其能够被较为准确地测定。
2. 提取淀粉：采用热酸提取法或酶解法将样品中的淀粉提取出来。
其中热酸提取法是将样品加入盐酸或硫酸中，加热至淀粉糊状后进行提取。
酶解法则是使用淀粉酶将样品中的淀粉分解为葡萄糖后进行提取。
3. 碘溶液制备：制备适量的碘溶液，一般是用碘酸钾和碘化钾制备。
4. 反应：将提取的淀粉溶液与碘溶液混合，等反应一段时间后，观察溶液的颜色变化。
颜色越深，说明淀粉含量越高。
5. 分光光度计测定：使用分光光度计，将混合溶液置于光管中，通过比较混合溶液的吸光度与已知浓度淀粉溶液的吸光度，可以得出待测样品中淀粉的含量。
需要注意的是，测定淀粉含量时需保证操作准确，并根据测定
的样品选择适当的提取方法。
此外，测定时要排除其他物质对测定结果的干扰，如物质的颜色、光散射等。
淀粉测定原理
淀粉测定原理
淀粉测定原理是基于淀粉与碘反应产生蓝紫色复合物的特性。
淀粉是由α-葡聚糖分子组成的多糖类物质，在存在碘的条件下，会与碘分子形成蓝紫色的复合物。
这种复合物的形成是因为碘分子可以在淀粉的螺旋状结构中形成插入和键合。
复合物的形成会导致可见光的吸收和散射特性发生变化，使溶液呈现出蓝紫色。
在淀粉测定中，常用碘溶液作为指示剂。
碘溶液可以通过在碘酸钾溶液中加入适量的碘片而得到。
测定时，先将待测样品中的淀粉提取出来，然后与适量的碘溶液反应。
反应完成后，溶液呈现出蓝紫色。
根据淀粉的含量不同，溶液的颜色深浅也会有所差异。
为了定量测定淀粉的含量，可以通过比色法来进行。
比色法是将待测样品的溶液与已知含量的淀粉标准溶液进行比较。
根据标准溶液的颜色深浅与淀粉含量的关系，可以确定待测样品中淀粉的含量。
除了比色法外，还可利用光电比色法、滴定法和红外光谱法等方法进行淀粉的测定。
其中光电比色法是利用光电比色仪器来测定淀粉溶液对特定波长光线的吸收程度。
滴定法是将已知浓度的碘溶液滴加到待测的淀粉溶液中，直到出现蓝紫色停止滴定，从而计算出淀粉的含量。
红外光谱法则是利用不同波数的红外光线对淀粉分子的特征振动进行分析，从而确定淀粉的含量。
总的来说，淀粉的测定原理是基于淀粉与碘反应产生蓝紫色复合物的特性，通过测量复合物的光学性质来确定淀粉的含量。
碘-淀粉比色法测定AMY程序的设置与操作方法
碘-淀粉比色法测定AMY程序的设置与操作方法
贺先奇
【期刊名称】《医疗装备》
【年(卷),期】2003(016)008
【摘要】@@ 用法国UV-VIS2型半自动生化分析仪对碘-淀粉比色法测定淀粉酶(AMY)时,由于该计算方法中需先进行试剂空白(空白管)吸光度(A)减去样品管A,故按常规的程序设计思路,该机无法直接打印结果,也不能按汪晓峰所介绍的方法来解决,因我们所使用的分析仪不含定标键和调零键
【总页数】1页(P38)
【作者】贺先奇
【作者单位】解放军第三一六医院,北京,100093
【正文语种】中文
【中图分类】TH7
【相关文献】
1.碘蓝比色法测定玉米直链淀粉含量的探讨(对国标法GB8648-87直链淀粉测定的评介) [J], 赵增煜;黄晓杰;张春红
2.蛋白对碘—淀粉比色法测定血清淀粉酶的干扰及排除 [J], 刘兆军;吴红光
3.碘淀粉比色法测定环境样中微量碘 [J], 王翔
4.碘——淀粉比色法测定α—淀粉酶的半自动分析法 [J], 谭天秋
5.碘-淀粉比色法测定淀粉酶在ISP-半自动生化仪上的应用及其基质液的简便保质方法的探讨 [J], 陈占良;曹萍;李贞洁
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淀粉的检测方法
淀粉的检测方法淀粉是一种常见的碳水化合物，广泛存在于植物中，是人们日常饮食中重要的营养物质。
然而，有时我们需要对食品或其他物质中的淀粉进行检测，以确保其质量和安全性。
下面将介绍几种常见的淀粉检测方法。
首先，常见的淀粉检测方法之一是碘液法。
这种方法利用碘液与淀粉发生蓝色复合物的特性来进行检测。
具体操作步骤是将待检测样品溶解在水中，然后滴加碘液。
如果样品中含有淀粉，碘液会与淀粉发生反应，溶液会变成蓝色。
这种方法简单易行，且对淀粉的检测效果较好，因此被广泛应用于食品和生物化学实验中。
其次，还有一种常见的淀粉检测方法是酶法。
这种方法利用淀粉酶对淀粉的水解作用来进行检测。
具体操作步骤是将待检测样品与淀粉酶混合，经过一定时间后，加入酚酞指示剂。
如果样品中含有淀粉，酶会将淀粉水解成葡萄糖，而葡萄糖与酚酞发生反应生成红色产物。
通过比色法或光度法测定红色产物的含量，就可以间接测定样品中淀粉的含量。
这种方法对淀粉的检测效果较好，且适用范围广，被广泛应用于食品、医药和生物化学领域。
另外，还有一种常见的淀粉检测方法是密度法。
这种方法利用淀粉与碘液形成的复合物在不同浓度的蔗糖溶液中的沉降速度不同来进行检测。
具体操作步骤是将待检测样品与碘液混合后，加入不同浓度的蔗糖溶液，然后观察混合物的沉降情况。
如果样品中含有淀粉，由于淀粉与碘形成的复合物密度较大，会在蔗糖溶液中沉降较快。
这种方法简单易行，且对淀粉的检测效果较好，被广泛应用于食品和生物化学实验中。
综上所述，淀粉的检测方法有碘液法、酶法和密度法等多种。
不同的方法有着各自的特点和适用范围，可以根据实际需要选择合适的方法进行检测。
在进行淀粉检测时，需要注意操作规范，避免外界因素对检测结果的影响，以确保检测结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的淀粉检测方法对您有所帮助。
生化检验辅导：淀粉酶测定(AMY)
（一）方法（1）碘一淀粉比色法测定：B血清（或血浆）中a一淀粉酶（a-AMY）催化淀粉分子中α-1，4糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1，6糖苷支链的糊精。
在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与空白管比较、从而推算出淀粉酶的活性单位。
（2）对一硝基苯麦芽七糖苷法：以对-硝基苯麦芽七糖苷为底物，经α-淀粉酶催化，水解为游离的寡糖（G5、G4、G3）及葡萄糖单位减少的对一硝基苯寡糖苷（4NP—G2、4NP-G3、4NP-G2）；4NP-G2、4NP-G3及一部分4NP-G4，受α-葡萄糖苷酶催化，水解为对一硝基酚和葡萄糖。
对一硝基酚的生成量，在一定范围内与R-淀粉酶活力成正比；但其摩尔数仅为酶解底物（4NP-G7）的三分之一，还有三分之二结合在4NP-G4中。
PNP（对一硝基苯酚）的生成引起405nm处吸光度的上升，上升速率与AMY的活力成正比。
（3）2-氯一4一硝基苯麦芽三糖苷法CNP（2一氯一4一硝基苯酚）的生成引起405nm处吸光度的上升，上升速率与AMY的活力成正比。
（二）生理变异成年人血中AMY与性别、年龄、进食关系不大，新生儿AMY缺乏。
满月后才出现此酶，逐步升高，约在5岁时达到成人水平，老年人AMY开始下降，约低25%。
（三）参考值碘一淀粉比色法：血清80～l80U／L；尿液100～1200U／L对一硝基苯麦芽七糖苷法：血清淀粉酶220 U／L（37℃）尿淀粉酶1200U／L（37℃）（四）临床意义淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过肾小球滤过。
1.升高：（1）急性胰腺炎：血和尿中的AMY显著增高。
发病后8～12h血清AMY开始增高，12～24h达高峰，2～5天下降至正常。
尿AMY约于发病后12～24h开始升高，下降比血清AMS慢，因此，在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。
特别是急性胰腺炎时。
碘一淀粉比色法结果如超过500U有意义，达350U时应怀疑此病。
地下水—碘化物的测定—淀粉分光光度法
FHZDZDXS0072 地下水碘化物的测定淀粉分光光度法F-HZ-DZ-DXS-0072地下水—碘化物的测定—淀粉分光光度法1 范围本方法适用于地下水中碘离子的测定。
最小检测量为0.5μg，若取20mL水样测定，最低检测浓度为2.5μg /L。
测定范围：25μg/ L～500μg /L。
2 原理在磷酸介质中，加入溴水可以将溶液中存在的碘离子定量地氧化为碘酸根离子。
反应生成的碘酸根离子与碘化钾作用生成碘，碘再与淀粉作用生成蓝色化合物，借以进行比色或光度测定。
过量的溴用甲酸钠破坏。
过剩的甲酸钠，在酸性介质中经煮沸可以除去。
3 试剂除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为二次去离子水。
3.1 饱和溴水：在少量蒸馏水中滴加液态溴（Br2）,直到溶液上层出现橙色溴的蒸气，于磨口瓶中保存（用时现配）。
3.2 磷酸溶液（1+2）。
3.3 甲酸钠溶液（HCOONa,200g/L）。
3.4 碘化钾溶液（KI，10g/L）。
3.6 碘离子标准溶液3.6.1 碘离子标准贮备溶液，0.20 mg/mL：称取0.2616g碘化钾（KI，99.99%）溶于少量蒸馏水中，移入1000mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
此溶液1.00mL含0.20mg碘离子。
3.6.2 碘离子标准溶液，1.00μg /mL：吸取5.00mL碘离子标准贮备溶液（0.20mg/mL）于1000mL 容量瓶中，用蒸馏水中稀释至刻度，摇匀。
此溶液1.00mL含1.00μg碘离子。
3.7 淀粉溶液（5g/L）：称取0.5g可溶性淀粉，加100mL蒸馏水，加热搅拌，直至溶液清亮透明。
4 仪器设备分光光度计。
5 试样制备5.1 取澄清原水样进行测定。
试样量20mL。
6 操作步骤6.1 水样分析取20.0mL水样于100mL烧杯中，加入6滴磷酸溶液（1+2），加10滴饱和溴水，放在电热板上，加热至恰沸腾时取下，趁热加入10滴甲酸钠溶液（200g/L），搅拌，此时溶液中溴的颜色应完全褪去。
直链淀粉测定方法汇总
直链淀粉测定方法汇总相关实验证明，谷物淀粉的许多性质都取决于其直连淀粉与直链淀粉的比值，并且对于许多淀粉加工产品来说，直链淀粉含量是影响其加工性能和产品品质的关键因素。
因此，直链淀粉含量的测定具有重要的意义。
而测量直链淀粉含量的方法有很多，如碘比色法、近红外光谱分析法、伴刀豆球蛋白法、国家标准法、仪器法等，下面对这几种方法做以简单的介绍。
1、碘比色法据了解，该测定方法在实验室测定样品数目相对较少的情况下还是可行的，但因为技术性强、操作复杂、耗费时间，无法实施有效、快捷的准确检测，对大批量样品检测相当困难。
2、近红外光谱分析法该测定方法虽然能够满足高代大批量样本的测定，具有快速、微量、无损性检测能特点，但是在进行实验时需要耗费较大的人力物力，且不能用于直链淀粉含量的精确测定和特殊材料(直链淀粉含量很低或很高的材料)的评价，不适合作为样品和所测项目经常变化的分散性样品检测的手段。
3、国家标准法直链淀粉含量检测在被列入国家标准中的方法主要有4项，具体有GB7648-87法、NY/T 83 -1988法、GB/T15683-1995、GB/T17891-1999法，据试验证明，这四种测定方法在不同程度上都存在一定的缺陷，以GB/T15683-1995法为例，该方法的大缺陷是测定时间过长，仅仅一个脱脂过程就要花费2天，为实验检测带了很大的不方便。
4、仪器法仪器法指的是利用直连淀粉测定仪来对直连淀粉含量的测定，直连淀粉测定仪是一款集计算机技术、分光光度技术于一体的快速、在线检测仪器。
该仪器具有分析速度快、准确度高、重现性好等特点，可以满足大批量的大米直链淀粉含量检测分析的要求。
以上就是对直链淀粉测定方法的简单总结与概述，在这四种方法中，应用比较广泛的就是仪器法，也就是利用直链淀粉测定仪来测定，目前市场上有很多直链淀粉测定仪的生产厂家，据了解，托普云农DPCZ-II直连淀粉测定仪可用于大米，玉米，小麦等谷物的直链淀粉品质的快速、在线检测，也可用来测试和评价进口大米的品质，提高粮食部门和食品生产部门检测水平与效率，控制粮食质量与成本。
测定淀粉酶活性的两种方法的比较研究
测定淀粉酶活性的两种方法的比较研究一、简述淀粉酶是一种能够催化淀粉分解为糖类物质的生物催化剂，其在食品工业、生物塑料生产以及医药等领域具有广泛的应用价值。
为了更好地了解和评估淀粉酶的活性，本研究将比较分析两种常用的测定淀粉酶活性的方法：碘量法和比浊法。
该方法系通过加入碘与淀粉样液来测量淀粉的水解程度，但是它无法避免一些还原性物质的干扰。
比浊法是基于酶反应产生胶体体系的形成，据此原理可测定淀粉酶活力。
本实验旨在比较这两种方法在测定淀粉酶活性时的优缺点，并分析其可能的原因，以期找到一种更为理想和高效的测定手段。
1. 淀粉酶的简介及重要性淀粉酶是一种能够催化淀粉分解为糖类物质的生物催化剂，它在食品工业、发酵工业以及生物塑料工业等领域具有广泛的应用。
淀粉酶的活性是衡量其性能的重要指标，催化效率越好。
研究淀粉酶活性的方法对于这些行业的发展具有重要意义。
淀粉酶在食品工业中扮演着关键角色。
在制作面条、饼干等食品时，需要确保食品中的淀粉得到充分分解，从而提高食品的口感和品质。
淀粉酶能够有效分解淀粉，使其转化为糖类物质，为食品提供甜味和黏性，因此它是食品工业中不可或缺的酶制剂。
淀粉酶在发酵工业中也有重要应用。
发酵工程中常用的糖化酶就是一种淀粉酶，它能够将淀粉转化为葡萄糖，为微生物提供能量和生长所需的碳源。
通过使用不同类型的淀粉酶，可以对不同种类的微生物进行定向发酵，生产出各种有用的产品，如抗生素、酶制剂等。
淀粉酶在生物塑料工业中也有潜在的应用前景。
生物可降解塑料是一种环保型的生物塑料，其降解过程需要淀粉酶的参与。
通过利用淀粉酶降解塑料中的淀粉成分，可以降低塑料对环境的污染，为实现可持续发展提供新的途径。
淀粉酶在各个领域都具有重要的应用价值。
研究淀粉酶活性的方法，对于推动相关领域的技术进步和产业发展具有重要意义。
2. 淀粉酶活性测定的方法和目的在淀粉酶活性的研究中，有多种方法可用于测定酶活力。
本部分将详细介绍两种常见的淀粉酶活性测定方法：碘量法和比色法，并阐述它们的目的。
检测淀粉的实验方法
检测淀粉的实验方法淀粉是一种常见的碳水化合物，存在于许多植物中，如稻谷、小麦、土豆等。
然而，在实验室中，准确检测淀粉的含量是非常重要的，特别是在食品行业和生物学研究中。
因此，寻找一种准确可靠的实验方法来检测淀粉的存在和浓度是科学家们一直在追求的目标。
本文将介绍一种常见的实验方法——碘液检测法，它能够简便而有效地检测淀粉的存在。
通过这种方法，我们能够快速、准确地判断样品中淀粉的含量，为后续的实验研究提供可靠的数据基础。
一、引言- 引入主题淀粉是一种常见的碳水化合物，广泛存在于植物中。
它在食品、制药和工业领域中都有重要的应用。
然而，有时候我们需要进行淀粉的检测，以确保产品的质量或者进行科学研究。
淀粉的检测方法有很多种，其中一种简单而有效的方法是使用化学试剂进行检测。
在本实验中，我们将介绍一种常用的化学试剂检测淀粉的方法。
通过这种方法，我们可以快速、准确地检测样品中的淀粉含量。
这对于生物学研究、食品监测以及工业生产等领域都具有重要意义。
接下来，我们将详细介绍该方法的步骤和原理，希望能为大家提供一种简便可靠的淀粉检测方案。
- 指出研究淀粉含量的必要性淀粉作为一种重要的碳水化合物，广泛存在于植物中，并且在食品、工业和医药等领域具有重要的应用价值。
因此，准确测定淀粉的含量对于了解植物生长、食品质量和工业生产过程具有重要意义。
首先，研究淀粉含量有助于对植物生长的了解。
淀粉在植物中作为主要的能量储存物质，对于植物的生长发育起着重要的作用。
通过测定不同植物器官中的淀粉含量，我们可以评估植物体内能量的分配情况，从而了解不同器官在生长过程中所起的作用，以及植物在不同环境条件下对能量的利用策略。
其次，对食品中的淀粉含量进行研究可以评估食品的质量。
淀粉是许多食品如面粉、米饭和面条等的重要成分之一。
食品中淀粉的含量直接影响其口感、质地和储存性能。
因此，准确测定食品中的淀粉含量可以帮助评估食品的质量，指导食品加工和储存过程中的优化控制，确保食品的品质和安全性。
α-淀粉酶(α-AL活性检测试剂盒(碘-淀粉比色法)说明书__可见分光光度法UPLC-MS-6003
α-淀粉酶（α-AL）活性检测试剂盒（碘-淀粉比色法）说明书可见分光光度法UPLC-MS-600350T/24S试剂名称规格保存条件试剂一粉剂×1瓶2-8℃保存试剂二液体10mL×1支2-8℃保存试剂三液体30mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前加入12.5mL试剂三，置于常温水中并加热至煮沸，期间不断搅拌粉剂至溶解，用不完的试剂2-8℃保存8周；2、标准品：10mg淀粉标准品。
临用前加10mL试剂三，置沸水浴中振荡溶解，配成1mg/mL淀粉标准液，2-8℃保存四周。
淀粉酶负责水解淀粉，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。
α-淀粉酶(EC3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。
α-淀粉酶催化淀粉分子中的α-1,4糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖以及糊精等，碘可以与未被水解的淀粉结合，生成在570nm下有特征吸收峰的复合物，其深浅可计算出淀粉酶的活力单位。
α-AL耐热，但是β-淀粉酶可在70℃钝化15min。
因此粗酶液经过70℃钝化15min，就只有α-AL能够催化淀粉水解。
Unhydrolyzed Starch+Iodine Blue Complex（570nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：称取约0.1g样本，加1mL蒸馏水匀浆；匀浆后在室温下放置提取15min，每隔5min振荡1次，使其充分提取；6000g，室温离心10min，吸取上清液即为淀粉酶原液。
2、液体：直接检测。
（若有浑浊则离心后进行测定）二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
探究人唾液淀粉酶的最适PH(碘-淀粉比色法)
探究人唾液淀粉酶的最适PH（碘-淀粉比色法）欧奇灿学号：201680075 临床医学“5+3”2班3组摘要：唾液淀粉酶是由唾液腺分泌的一种水解酶，可作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖原等α-1,4-葡聚糖等，属于α-淀粉酶的一种。
酶学与医学联系紧密，测定酶的最适pH，有利于我们把酶学知识运用于临床诊断与应用治疗。
本实验尝试用碘-淀粉比色法测定唾液淀粉酶最适pH，加深对酶学知识的理解。
关键词：缓冲液；唾液淀粉酶；分光光度计前言：人体内各种代谢反应，都离不开酶的催化作用，酶量的改变以及酶活性的改变都会引起人体化学反应的异常或紊乱，因此酶在人体内是否能发挥正常活性关系着人体内环境的稳定。
而pH是影响酶活性的一个重要因素，因此，通过探究实验探究人唾液淀粉酶的最适pH，不仅可以检测我们的生物化学实验操作能力和探究能力，也可以加深我们对酶学知识的理解。
正文:【实验原理】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质，其化学结构上具有许多极性基团，在不同酸碱环境中，这些基团的解离状态不同，所带电荷也不同。
只有当酶处于一定的解离状态，才能和作用物结合。
因此，溶液的pH对酶活性影响很大。
若其他条件不变，酶只有在一定的pH范围内才能表现出催化活性。
在某pH时，酶催化活性最大，此pH称为酶作用的最适pH。
当溶液的pH偏离最适pH时，酶活性降低，甚至失活。
淀粉经唾液中淀粉酶的水解，生成糊精和麦芽糖。
在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其颜色深浅与空白管颜色的差值和唾液淀粉酶的活力成正比。
在底物过量的条件下，相同时间内，在温度、酶浓度相同、pH不同的条件下，越接近最适 pH的反应体系中酶活性越高，消耗淀粉的量越大，剩余淀粉与过量碘液生成的颜色越浅，吸光度越小。
本实验利用分光光度计测出各管的吸光度后，取处于降低与升高趋势之间的较小吸光度范围对应的 pH 值即为唾液淀粉酶的最适pH。
【仪器与试剂】仪器材料：试管架，试管，烧杯，一次性纸杯，移液枪，刻度吸管，洗耳球，胶头滴管，pH试纸，恒温水浴箱，分光光度计试剂药品：2.5g/L淀粉溶液，碘液，0.2mol/L NaH2PO4、0.2mol/LNa2HPO4，唾液，纯净水【实验步骤】1、唾液的获取纯净水先漱口1～2次，然后含一大口水约2分钟，其间做咀嚼运动，然后将水和唾液一同收集至烧杯中。
检验淀粉的方法
检验淀粉的方法一、碘液法。
碘液法是一种常用的检验淀粉的方法。
首先，将碘液滴在待检测的食物样品上，如果食物中含有淀粉，碘液会变成蓝色或黑色。
这是因为淀粉分子内部有许多螯合碘的羟基，形成了碘淀粉蓝色化合物，使得食物呈现出蓝色或黑色。
这种方法简单易行，可以快速检验出食物中是否含有淀粉。
二、碘淀粉蓝色法。
碘淀粉蓝色法是一种定性检验淀粉的方法。
首先，将少量的淀粉加入试管中，然后加入适量的水和碘液，摇匀后观察试管内的颜色变化。
如果试管内的液体呈现出蓝色，则说明淀粉已经溶解并形成了碘淀粉蓝色化合物。
这种方法可以快速确定样品中是否含有淀粉，是一种简便有效的检验方法。
三、加热法。
加热法是一种定性检验淀粉的方法。
首先，将待检测的食物样品加入试管中，然后加入适量的水摇匀。
接着将试管放入热水中加热，观察样品的变化。
如果样品变成了淀粉糊状，说明食物中含有淀粉。
这种方法简单易行，可以快速检验出食物中是否含有淀粉。
四、酶法。
酶法是一种定量检验淀粉的方法。
首先，将待检测的食物样品加入试管中，然后加入适量的酶溶液，摇匀后放置一段时间。
接着加入适量的酚酞指示剂，摇匀后观察试管内的颜色变化。
如果试管内的液体呈现出红色，则说明食物中含有淀粉。
这种方法可以准确测定样品中淀粉的含量，是一种常用的检验方法。
总结：检验淀粉的方法有碘液法、碘淀粉蓝色法、加热法和酶法等。
这些方法各有特点，可以根据实际需要选择合适的方法进行检验。
无论是定性检验还是定量检验，都可以有效地检测出食物中是否含有淀粉。
在食品加工和科研工作中，正确使用这些方法可以保证食品质量和科研成果的准确性，对于保障人们的健康和促进科学研究都具有重要的意义。
04碘淀粉比色法测定唾液淀粉酶
碘-淀粉比色法测定唾液淀粉酶一 实验目的1、 掌握比色法测定a-淀粉酶的原理；2、 掌握分光光度计的正确使用方法；二 实验原理1、比色法作为一种定量分析的方法，是以生成有色化合物的显色反应为基础，通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法。
常用的比色法有两种：目视比色法和光电比色法，两种方法都是以朗伯-比尔定律 (A ＝εbc)为基础。
2、血清中α-淀粉酶催化淀粉分子中α-1，4糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1，6糖苷键支链的糊精。
ａ-淀粉酶淀粉 葡萄糖+麦芽糖+糊精+碘液 蓝色复合物在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与未经酶促反应的空白管比较，从而推算出淀粉酶的含量。
3、酶活力的大小、即酶量的多少用酶活力单位（U ）（active unit ）表示。
1961年国际生物化学学会酶学委员会提出采用统一的“国际单位”（IU ）来表示酶的活力，规定为：在最适条件（25℃）下，每分钟内催化1微摩尔（μmol ）底物转化为产物所需的酶量定为一个活力单位，即1IU = 1μmol /min 。
这样酶的含量就可用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶活力单位来表示（U/g 或U/ml ）。
4、 计算公式：A A 1.65100AMY A 55X-=⨯⨯⨯空白管吸光度测试管吸光度空白管吸光度 其中，A A A -空白管吸光度测试管吸光度空白管吸光度代表测定管淀粉的大致水解程度，大小范围为0～l 。
当测定管淀粉未被水解时，其蛋白酶活性为0；当测定管淀粉被完全水解时，其值为1。
1.61515151100X⨯⨯⨯⨯中，5151100⨯⨯”为碘一淀粉比色法中淀粉酶活性的单位定义-100ml 唾液中的淀粉酶，在37度5min 水解淀粉5mg 为1个单位，1.6151X ⨯⨯表示实验的测试条件：X 代表稀释后的唾液量，稀释倍数根据个人的情况而定，若50倍稀释唾液0.1ml ，则唾液量为0.002ml ，反应时间为5分钟，1.6g/L 淀粉溶液1.0ml ，即淀粉量为1.6mg 。
08@碘淀粉比色法
【原理】 血清中α淀粉酶催化淀粉分子中α-1，4 糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有 α-1，6糖苷键支链的糊精。在底物过量的 条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀 粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与未 经酶促反应的空白管比较，从而推算出淀 粉酶的活力单位。
【器材】 试管、微量加样器、恒温水浴箱、离心机、分 光光度计等 [操作]取2支试管，按表进行淀粉酶操作 加入物(ul)
实验 血清淀粉酶测定 碘淀粉比色
[目的]
了解临床测定血清淀粉酶的意义。 掌握本法测定血清淀粉酶的基本原理和方法。
临床生化淀粉酶测定
淀粉酶又称α－1，4葡聚糖水解酶，作用于多糖分子中的 1，4糖苷键，生成麦芽糖和葡萄糖。可由肾脏排泄，淀粉酶 在人体内的分布很广，但主要存在于胰腺，唾液腺及其分泌 液中，对食物中多糖化合物的消化起重要作用。血清淀粉酶 主要有两种同工酶，即同工酶P（来源于胰腺），及同工酶S （来源于唾液腺及其它组织）。血清淀粉酶增高对急性胰腺 炎有诊断价值。多年来，由于它的测定方法简单，快速，一 直被用于胰腺炎的诊断和急腹症的鉴别诊断，但其总酶活力 测定缺乏灵敏性和特异性，而其同工酶分析则有助于克服这 些缺点。淀粉酶活性测定方法大致分为粘度测量法、比浊法、 碘量法、糖化法和染料释放法5种，其中碘淀粉比色法操作简 便，结果可靠在临床上得到广泛的应用。
1、比色法测乳酸脱氢酶 正向反应生成的丙酮酸与溶于酸的2，4二 硝基苯肼作用生成丙酮酸－二硝基苯腙， 后者在酸性环境中呈草黄色，在碱性溶液 中显棕红色，颜色的深浅与丙酮酸的浓度 成正比，与标准浓度的丙酮酸生成的苯腙 进行比色，可推算LDH的活力。 单位定义：以100ml血清，37度，作用底物 15min，产生1umol丙酮酸为一个金氏单位。
碘淀粉比色法测定环境样中微量碘
碘淀粉比色法测定环境样中微量碘
王翔
【期刊名称】《干旱环境监测》
【年(卷),期】1995(009)004
【摘要】试验了碘的倍增反应用于微量碘的测定，用淀粉指示剂显色，最大吸收
峰位于６２０ｎｍ，摩尔吸光系数可达１×１０＾５Ｌ·ｍｏｌ＾－１·ｃｍ＾－１。
０￣６μｇ碘／１０ｍｌ符合比耳定律，可用于盐湖水、矿泉水、油田水和食盐、海产品中微量碘的测定。
【总页数】2页(P220-221)
【作者】王翔
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】X830.2
【相关文献】
1.碘蓝比色法测定玉米直链淀粉含量的探讨(对国标法GB8648-87直链淀粉测定的评介) [J], 赵增煜;黄晓杰;张春红
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用碘淀粉实验报告
一、实验目的1. 了解碘淀粉反应的原理和现象；2. 掌握碘淀粉实验的操作步骤；3. 培养实验操作技能和观察能力。
二、实验原理碘与淀粉在一定条件下会发生蓝色反应，这是由于碘分子嵌入淀粉分子的螺旋结构中，形成了一种复合物，使溶液呈现蓝色。
本实验通过观察淀粉溶液与碘的反应，验证碘淀粉反应的存在。
三、实验材料1. 淀粉溶液；2. 碘溶液；3. 滴管；4. 试管；5. 洗涤液；6. 水浴锅。
四、实验步骤1. 取一支试管，加入2ml淀粉溶液；2. 用滴管取少量碘溶液，滴入试管中；3. 观察溶液颜色变化，记录实验结果；4. 用洗涤液清洗试管，重复上述步骤，验证实验结果。
五、实验结果1. 实验一：将碘溶液滴入淀粉溶液中，溶液迅速变为蓝色；2. 实验二：重复实验一，结果相同。
六、实验分析通过实验观察，发现淀粉溶液与碘溶液反应后，溶液变为蓝色，说明碘与淀粉发生了蓝色反应。
这是因为碘分子嵌入淀粉分子的螺旋结构中，形成了复合物。
实验结果与预期相符，验证了碘淀粉反应的存在。
七、实验结论1. 碘与淀粉在一定条件下会发生蓝色反应；2. 实验操作步骤正确，实验结果可靠。
八、实验讨论1. 实验过程中，若溶液颜色变化不明显，可能是因为碘溶液浓度较低，可以尝试增加碘溶液的浓度；2. 实验过程中，注意观察溶液颜色变化，及时记录实验结果；3. 实验结束后，清洗实验器材，保持实验室卫生。
九、实验拓展1. 探究不同浓度碘溶液对实验结果的影响；2. 研究其他化合物与淀粉的反应；3. 利用碘淀粉反应制作淀粉碘化物指示剂。
十、实验反思本次实验通过观察碘淀粉反应，使我更加深入地了解了化学反应的原理和现象。
在实验过程中，我学会了如何正确操作实验器材，提高了实验操作技能。
同时，我也认识到实验过程中要注意观察和记录，以确保实验结果的准确性。
在今后的实验学习中，我将继续努力，不断提高自己的实验能力和科学素养。
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1、比色法测乳酸脱氢酶 正向反应生成的丙酮酸与溶于酸的2，4二 硝基苯肼作用生成丙酮酸－二硝基苯腙， 后者在酸性环境中呈草黄色，在碱性溶液 中显棕红色，颜色的深浅与丙酮酸的浓度 成正比，与标准浓度的丙酮酸生成的苯腙 进行比色，可推算LDH的活力。 单位定义：以100ml血清，37度，作用底物 15min，产生1umol丙酮酸为一个金氏单位。
3、血清碱性磷酸酶的磷酸苯二钠法测定
碱性磷酸酶在碱性环境中作用于磷酸苯二 钠，使之水解释放出酚和磷酸。酚在碱性 溶液中与4-氨基安替比林作用，经铁氰化钾 氧化形成红色醌类化合物，根据红色的深 浅确定ALP活性。 单位定义：100ml血清在37度与底物作用15 分钟，产生1mg酚为1个金氏单位。
再充分混匀后，波长630nm ，以蒸馏水调零。
试剂空白管溶液作拟标准液定标，测定 标准和测定管溶液的吸光度值，按公式计 算测定结果。 【计算公式】 血清淀粉酶＝空白管吸光度－测定管吸 光度/空白管吸光度 ×1000
血清淀粉酶= ×1000 尿液淀粉酶= ×2000
【正常参考范围】 血清：80～180u/L，尿液：100～1200u/L
3，唾液含有高浓度淀粉酶，须防止带入。
4，淀粉产品不同，其空白吸光度可有明显差异，一般空白 吸光度应在0.4以上。 5，缓冲淀粉溶液若出现混浊或絮状物，表示缓冲淀粉溶液 受污染或变质，不能再用，应重新配制。 6，本法亦适用于其他体液淀粉的测定，尿液先作20倍稀释 后测定。
【评价】
本法线性范围＜400U，批内3.1-9.0%，批间 12.4-15.1%，与对-硝基苯麦牙庚糖苷法比较，在 酶活性低时相关性较好，但酶活性较高时相关性 差，因此，该法不能认为是淀粉酶测定的理想方 法，但由于该法简单，易行，不需特殊设备，试 剂价廉，仍然为我国目前应用较为广泛的方法。
2、血清谷—丙转氨酶活性的测定（改良赖氏法）
血清中的谷-丙转氨酶（ALT），在37℃、pH7.4的条件 下，可催化基质（底物）液中的丙氨酸与α-酮戊二酸生成 谷氨酸和丙酮酸，丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝 基苯肼发生加成反应，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，进而 在碱性环境中生成红棕色的苯腙硝醌化合物，其颜色的深 浅在一定范围内与丙酮酸的生成量，亦即与ALT活性的高 低成正比关系。据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较， 便可算出或通过标准曲线查出血清中ALT的活性。 1个卡门氏单位的定义是：在温度25℃，pH7.4，波长 340nm，光径1cm的条件下，1ml血清使NADH的吸光度下 降0.001的转氨酶活性。可见卡门氏单位不是用物质的量浓 度，而是用物质的吸光度表示酶的活性单位的。
酶的活性：酶催化化学反应的能力，其衡量的 标准是酶促反应速度的大小。 在特定的条件下，每分钟催化1umol底物转化 为产物所需的酶量为1个国际单位。（1976） 1催量指特定条件下，每秒钟使1mol底物转化 为产物所需的酶量。（1979）
【临床意义】
增高：淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌。流行性腮腺炎， 特别是急性胰腺炎时，血和尿中的AMS(淀粉酶)显著
增高，急性胰腺炎发病后8-12小时血清AMS开始增高， 12-24小时达高峰，2-5天下降至正常。如超过500U有意 义，350达U时应怀疑此病。而尿AMS约于发病后12-24 小时开始升高，下降也比血清AMS慢，因此，在急性胰 腺炎后期测定尿AMS更有价值。如急性阑尾炎、肠梗阻、 胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可见血 清AMY增高，但常低于500U。
降低：由于正常人血清中AMS主要由肝产生，故血清与 尿中AMS同时减低主要见于肝炎、肝硬化、肝癌及急性 和慢性胆囊炎等。肾功能障碍时，血清AMS也可降低。
【注意事项】ຫໍສະໝຸດ 1,酶活性在400U以下时，与底物的水解量成线性，如测定管 吸光度小于空白管吸光度一半时，应加大血清稀释倍数或 减少稀释血清加入量，测定结果乘以稀释倍数 2,草酸盐、枸椽酸盐、EDTA-NA2及氟化钠对AMY活性有抑 制作用，肝素无抑制作用。
实验 血清淀粉酶测定 碘淀粉比色
[目的]
了解临床测定血清淀粉酶的意义。 掌握本法测定血清淀粉酶的基本原理和方法。
临床生化淀粉酶测定
淀粉酶又称α－1，4葡聚糖水解酶，作用于多糖分子中的 1，4糖苷键，生成麦芽糖和葡萄糖。可由肾脏排泄，淀粉酶 在人体内的分布很广，但主要存在于胰腺，唾液腺及其分泌 液中，对食物中多糖化合物的消化起重要作用。血清淀粉酶 主要有两种同工酶，即同工酶P（来源于胰腺），及同工酶S （来源于唾液腺及其它组织）。血清淀粉酶增高对急性胰腺 炎有诊断价值。多年来，由于它的测定方法简单，快速，一 直被用于胰腺炎的诊断和急腹症的鉴别诊断，但其总酶活力 测定缺乏灵敏性和特异性，而其同工酶分析则有助于克服这 些缺点。淀粉酶活性测定方法大致分为粘度测量法、比浊法、 碘量法、糖化法和染料释放法5种，其中碘淀粉比色法操作简 便，结果可靠在临床上得到广泛的应用。
【原理】 血清中α淀粉酶催化淀粉分子中α-1，4 糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有 α-1，6糖苷键支链的糊精。在底物过量的 条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀 粉结合成蓝色复合物，其蓝色的深浅与未 经酶促反应的空白管比较，从而推算出淀 粉酶的活力单位。
【器材】 试管、微量加样器、恒温水浴箱、离心机、分 光光度计等 [操作]取2支试管，按表进行淀粉酶操作 加入物(ul)
【操作】 1.血清先用生理盐水作10倍稀释。0.1ml血清＋0.9ml蒸馏水。 加入物(ml) 测定管 对照管 缓冲淀粉溶液 (37度预温5min) 1.0 1.0 血清 － 0.2 37度水浴7.5min 碘应用液 1.0 1.0 蒸馏水 6.2 6.0 2.混匀，以波长660nm，蒸馏水调零，读取各管吸光度。 单位定义 100ml血清中的淀粉酶，在37度15min水解淀粉5mg为1个单位。 【计算】 淀粉酶＝空白管吸光度－测定管吸光度/空白管吸光度 *0.4/5*15/7.5*100/0.02 如进行时间进程曲线其相应的时间应取不同的值。
试 剂 ul
血
测定管 （u） 20ul 500ul
清
空白管 （B） — 500ul
尿 液
测定管 （u） 20ul 空白管 （B） —
标本(血 清或尿液) 淀粉酶缓冲液
1000ul 1000ul
充分混匀后， 置与37℃水浴箱中，保温7.5min
显色终止液ml
3.0 3.0 5.0 5.0 测血清AMS时，向空白管补加20ul血清（目的是使其颜色与测 定管相近）