斐林试剂热滴定定糖法
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费林试剂热滴定定糖法
xx 生科四班201100140120 同组者:xx
【实验目的】
1. 初步掌握费林试剂热滴定定糖法的原理和方法。
2. 正确掌握滴定管的使用方法和热滴定的终点。
【实验原理】
1. 还原糖
还原糖(reducing sugar ):羰基碳(异头碳)没有参与形成糖苷键能够还原斐林(H.von Fehling)试剂或托伦斯(B.Tollens)试剂(银氨溶液)的糖称为还原糖,所有的单糖(除二羟丙酮和五碳糖,即核糖和脱氧核糖),不论醛糖、酮糖都是还原糖。大部分双糖也是还原糖,蔗糖例外。斐林试剂是含 Cu2+络合物的溶液,被还原后得到砖红色 Cu
O的沉淀。托伦斯试剂被还
2
原后(银镜反应)能生成单质银,在试管壁上可看到“银镜”。分子结构中含有还原性基团(如游离醛基`半缩醛羟基或游离羰基)的糖,叫还原糖,如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖。
一般情况下,单糖的还原能力主要来自它的醛基,如葡萄糖,而多糖则大多因为半缩醛羟基的存在。还原后,自己会变成糖酸。如葡萄糖就会变成葡萄糖酸。
2. 费林试剂
费林试剂由氢氧化钠的质量分数为 0.1 g/mL 的溶液和硫酸铜的质量分数为 0.05 g/mL 的溶液,还有酒石酸钾钠配制而成的。它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。因此,斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在与否。
3. 实验方法
本实验采用费林试剂热滴定法,费林试剂是氧化剂,由甲、乙两种溶液组成。甲液含硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂);乙液含氢氧化钠,酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。当甲、乙两溶液混合时,硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。在碱性溶液中,酒石酸钾钠与沉淀的氢氧化铜作用
形成可溶性的络合物。
【实验仪器】
1. 移液管(5、10 毫升)
2. 100 毫升容量瓶
3. 水浴锅
4. 铁架台
5. 胶头滴管
【实验材料】
1.面粉
2. 酚酞试剂
3. 菲林试剂(甲、乙液)
4. 10%氢氧化钠
5. 标准葡萄糖(1mg/ml)
6. 6M HCl
7. 烧杯
8. 玻璃棒
9. 碱式滴定管
10. 电炉
11. 分析天平
【实验操作】
1. 总糖的提取
准确称取面粉 1 克,加入 6mol/L 盐酸 10 毫升,蒸馏水 15 毫升,混匀。沸水浴加热半小时后,取出几滴水解液用碘化钾-碘溶液检查水解是否完全,若已经水解完全,则不呈现蓝色。冷却后用 10%氢氧化钠中和至中性溶液,定容至100 毫升。准确吸取该溶液 10ml,移入 100ml容量瓶内并定容至刻度,即为测定总糖的样品液。
2. 空白测定
准确吸取费林甲、乙液各 5ml 和蒸馏水 5ml 放入 100 毫升的锥形瓶中,再用滴定管加入6ml 的标准葡萄糖液,混匀后加热,沸腾后,记录下滴定管的起始刻度,每滴 1-2 秒的速度由滴定管滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在30s 内颜色又变成深红色为止。记录滴定完后滴定管的刻度,并同时记录滴定所需时间。平行测定三次,直至所得的平均数与各组的差值<0.05ml。
3. 总糖的测定
准确吸取样品液 5ml 放于 100ml 锥形瓶内,加入费林甲液、乙液各 5ml,为使测定的时间与空白测定的时间基本一致,向锥形瓶内加入 3ml 的标准葡萄糖液,然后按测定空白同样操作进行滴定(控制流速,使滴定时间与空白滴定的时间基本一致),记下耗用标准葡萄糖的毫升数。平行测定三次,直至所得的平均数与各组的差值<0.05ml。
2、3 步中所加试剂如下表:
空白滴定样品滴定
次数 1 2 3 平
均1 2 3 平
均
费林甲/ml 5 5 5 / 5 5 5 /
费林乙/ml 5 5 5 / 5 5 5 /
蒸馏水/ml 5 5 5 / / / / /
样液/ml / / / / 5 5 5 /
预加葡萄
糖/ml
8 8 8 / 4 4 4 /
消耗葡萄
糖/ml
1.75 1.50 1.45 1.57 1.25 1.30 1.15 1.23
【计算】
样品m=1.0025g V1=9.57
V2=5.23
还原糖(或总糖)%=
5
×
)
克
(
称取的
×)
毫升
/
克
(
标准葡萄糖液浓度
×
V2)
-
(V1
样品量
稀释倍数
=86.58%
【分析讨论】
1. 原理分析
本实验采用费林试剂热滴定法,费林试剂由甲、乙两种溶液组成。甲液
含硫酸铜和次甲基
蓝(氧化还原指示剂);乙液含氢氧化钠,酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。当甲、乙两溶液混合时,
硫酸铜与氢氧化钠反应生成天蓝色的氢氧化铜沉淀。在碱性溶液中,酒石酸钾钠与沉淀的氢氧
化铜作用形成可溶性的络合物。热滴定中滴入标准葡萄糖液直至蓝色变成黄色且在 30s 内颜色
又变成深红色为止,记录下数据处理即可得面粉中的糖含量。
2. 步骤分析
1) 为使空白测定与样品测定的时间一致,在样品滴定之前应提前加入一定
量的葡萄糖;
2) 在滴定过程中,应注意在颜色由蓝色变为紫色时,应减慢滴速,当颜色
变为土黄色时,立
即停止加入葡萄糖,颜色会再度变回紫色时,不应再滴加葡萄糖;
3) 在水解面粉时应确保面粉完全水解,即加入碘液后不再出现特殊的蓝色,
此外,水解液应
中和为中性。
3. 误差分析
本实验至少有以下几种原因可能导致实验误差的出现:
1) 实验过程中容量瓶定容后,没有摇匀,导致局部浓度过高;
2) 全部滴定过程并没有完全在沸腾状态下快速进行,导致不断的还原、氧
化,而使滴定终点
延后。
3) 各组滴定的时间不一致,空气中的 O
2
对实验结果造成了影响;
4) 对滴定终点的把握不够精确,导致超过滴定终点,使得实验数据产生较
大偏差;
5) 面粉未完全水解成为葡糖,水解后的葡糖溶液不为中性,也会给实验结