大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案

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大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案

实验原理：1、大肠杆菌的性质:大肠杆菌是G无芽抱直杆菌，在大多数培养基上表现出不同的特性。

在麦康凯琼脂平板上是凸起光滑湿润的粉红菌落，革兰氏染色镜检为红色短杆菌。

三糖铁琼脂上的反应为斜面和底部都变黄，产气，不产生硫化氢。

生化特性为发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖，不发酵蔗糖。

MR试验，口引噪试验为阳性，VP试验为阴性，不产生H2S,不能利用xx酸盐。

半固体中沿穿刺线向四周生长。

2、沙门氏杆菌的性质：-沙门氏杆菌是G直杆菌。

在麦康凯平板上为细小半透明、圆形、无色小菌落，三糖铁斜面下层变黄色，上层仍为红色，穿刺处为变黑产生H2S。

能发酵葡萄糖产酸产气，能利用枸椽酸盐，不发酵乳糖不利用蔗糖肌醇，MR阳性，VP阴性，不产呵噪，不分解尿素。

实验材料：含有大肠杆菌和沙门氏菌的猪肝脏、培养基（琼脂平板培养基、三糖铁琼脂斜面培养基、麦康凯琼脂、生化培养基、SQ、器械（剪刀、记号笔、接种环、酒精灯、显微镜、试管、玻片、培养皿）、药品（消毒酒精、结晶紫、碘液、酸酒精、品红、松柏油）实验内容及操作程序：一、培养基制备：制备普通琼脂培养基、麦康凯平板、SC增菌培养基、生化培养基，制备方法见附1.二、标本制备：(1) 取新鲜猪肝脏一小块，火焰表面消毒。

(2) 用浸过消毒液的剪刀剪开一个小口于消过毒的猪肝脏。

(3) 用接种环在剪开的肝脏小口沾取肝脏液，分别画线于麦康凯培养基和接种于SC中，37 C恒温培养24小时。

三、细菌分离培养：(1) 取出培养了24小时的麦康凯平板。

挑选麦康凯平板上的凸起光滑湿润的粉红菌落染色镜检，看是否为红色短杆菌，若是，即疑似为大肠杆菌，则取其接种于另一麦康凯平板，37 C恒温培养24小时。

(2) 取出培养了24小时的SC增菌培养基，染色镜检，看是否有疑似沙门氏菌，有则取其中细菌画线接种于麦康凯平板上，37 C恒温培养24小时。

四、细菌的鉴定纯化：(1) 检查疑似大肠杆菌的培养基是否长满了粉红色菌落，染色镜检。

禽源大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性检测

禽源大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性检测
李淑芳，曹慧，黄燕霞，陈冬杰，邹海鹏，迟明飞，陈伟垣，谢文斌（广东海洋大学动物医学系，广东湛江５２４０８８）
摘要：为了解湛江市禽源致病菌大肠杆菌和沙门氏菌对禽肉产品的污染程度及其耐药性，采集市售禽肉中的肝脏样
３５Ｅ．ｃｏｌｉｓｔｒａｉｎｓ，７ＥＨＥＣＯ１５７：Ｈ７ｓｔｒａｉｎｓａｎｄｌ１Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｓｔｒａｉｎｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｉｆｅｄｂｙｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｔｅｓｔ．ＴｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＥ．ｃｏｌｉｗａｓ４３．２１％，ｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＥＨＥＣ０ｌ５７：Ｈ７ｗａｓ８．６４％，ａｎｄｔｈｅｉｓｏｌａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＳａｌｍｏｎｅｌｌａｗａｓ１３．５８％．Ａｔｏａｌｔｏｆ２ｌＥ．ｃｏｌｉｓｔｒａｉｎｓａｎｄｌ１Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｓｔｒａｉｎｓｉｓｏｌａｔｅｄｉｎ
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｉｏｔｎａｎｄＤｒｕｇ — ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉａｎｄＳａｌｍｏｎｅｌｌａｆｒｏｍＰｏｕｌｔｒｙ

上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌的耐药性及耐药基因的研究的开题报告

上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌的耐药性及耐药
基因的研究的开题报告
一、课题背景和研究意义：
近年来，疾病的发病率和死亡率不断地上升，猪源大肠杆菌和沙门
氏菌等细菌感染已成为危害人类健康和生产的重要原因。

这些细菌的抗
生素耐药性已成为研究的热点，对于临床用药和动物饲养管理等方面具
有重要的指导意义。

因此，本文将研究上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏
菌的耐药性及耐药基因，从而更好地预防和治疗相关的疾病。

二、研究内容和方法：
（1）猪源大肠杆菌和沙门氏菌的分离与鉴定。

从上海地区的养猪场、市场和屠宰场等采集猪肠道和粪便样品，并通过标准鉴定方法进行分离
和鉴定。

（2）耐药性的检测。

利用药敏实验对分离的大肠杆菌和沙门氏菌进行药敏试验，并采用文盘扩散法、细胞培养法等方法对耐药性进行分析。

（3）耐药基因的检测。

采用聚合酶链式反应法（PCR）对耐药基因的存在进行检测，并采用DNA序列分析的方法对PCR产物进行验证和鉴定。

三、预期成果和意义：
通过对上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌的耐药性及耐药基因的研究，预期可以得到以下几点成果：
（1）了解上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌耐药性和耐药基因的分布情况。

（2）探讨上海地区猪源大肠杆菌和沙门氏菌的耐药机制，并为相关疾病的预防和治疗提供科学依据。

（3）为上海地区动物饲养管理提供参考，促进养殖业的健康发展。

综上所述，本研究拟从大肠杆菌和沙门氏菌耐药性和耐药基因方面开展研究，具有一定的学术和实践意义，值得深入进行探索。

鹌鹑致病性大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离鉴定与药敏试验

畜牧与饲料科学
ＡｎｍａｉｌＨｂａｙａｄＦｅｃｅｃｌｒｎｅｄＳｉｎｅ
２０，１１）１６５０１３（：５一ｌ８
鹌鹑致病性大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离鉴定与药敏试验
王红琳，杨峻，邵华斌，玲，罗艾地云，罗青平，国元，蓉蓉，温张张琳
培养、生化试验、小鼠致病性试验和药敏试验。结果：经过实验室诊断确诊为大肠杆菌和沙门氏菌混合感染：ｌ用３种常用抗菌药物对分离菌株进行了药敏试验。果表明，肠杆菌对庆大霉素、达欣、霉素等药物高度敏感：门氏菌对结大复新沙复达欣、霉素、新氟哌酸等药物高度敏感。结论：药敏试验结果为规模化鹌鹑养殖场临床合理用药提供了科学依据。
Ｔｅｐｔｏｅｉａｔｒｅｅｉｏａｅｒｍｈｉｅｎｅｒｏｉｅｓｄｑａｌａｄｉｃｂｔｄｗｉｈｅｅｔｅｍｅｉｍ，ｈｎｔｅｈａｈｇｎｃｂｃｅｉｗｒｓｌｔｄｆａｏｔｅｌｒａｄｈａｔｆｓａｅｕｉｎｎｕａｅｔｔｅｓｌｃｉｄｕｔｅｈｖｄｓｈｖ
ＤｒｇＳｎｉｉｉｙＴｅｔｕｅｓｔｖｔｓ
ＷＡＧＨｎ－ｉ，ＡＮｎＳＡｕ－ｉ，ＵｉｇＡｉｙｎＬＯＱｎ－ｉ，ＮＧｏｙａ，ＨＮＮｏｇｌＹＧＪ，ＨＯＨａｂｎＬＯＬｎ，Ｉ－ｕ，ＵｉｇｐｎＷＥｕ－ｕｎＺＡＧｎｕＤｇ

粪便标本中肠道致病菌的分离与鉴定程序

粪便标本中肠道致病菌的分离与鉴定程序哎呀，今天我们来聊聊一个有点“特别”的话题，关于粪便标本中那些神秘的小家伙，肠道致病菌的分离与鉴定。

乍一听，大家可能会觉得有点不太美好，毕竟谁愿意和粪便扯上关系呢？但了解这些菌菌的背后故事可有趣多了，绝对让你大开眼界！咱们得知道，肠道里的细菌就像是一个大家庭，里面有些是好朋友，像肠道益生菌，帮我们消化，维护健康；但有些就不那么友好了，它们就是那些臭名昭著的致病菌。

一旦这些坏家伙在我们的肚子里扎下根，嘿，后果可就不堪设想了。

肚子疼、拉肚子、发烧，这些都可能是它们在搞鬼。

为了搞清楚这些“坏蛋”到底是谁，我们就得用到粪便标本，别担心，这个过程其实比想象中简单有趣得多。

说到采样，首先要准备一个干净的小容器，最好是一次性那种，听说卫生很重要。

采样的时候要记得，尽量避免尿液或其他杂质的混入，毕竟咱们要的是纯正的“货”。

然后，就把这些标本送到实验室，等着实验室的小伙伴们来“审问”这些细菌。

在实验室里，首先会用培养基来培育这些粪便里的细菌。

培养基就像是细菌的“自助餐”，只要你给它们提供了舒适的环境，它们就会茁壮成长。

像是加上一些营养成分，调节一下温度，再给点时间，这些小家伙就会在培养皿里成群结队地出现，真是热闹非凡。

就是细菌的分离与鉴定。

这一步就像在“找朋友”，实验室的小伙伴们会用一些小工具，把那些长得像“群星闪耀”的细菌分别挑出来。

用专业的技术手段，比如涂布法、分离培养法，慢慢地将它们一个个找出来。

这可不是简单的事情哦，得眼明手快，毕竟有时候它们还真是狡猾。

一旦分离成功，接下来就是鉴定了。

这里会用到一些生化试验，像是培养、染色，甚至是基因测序。

这些方法就像是给细菌做“身份证”，一一验证它们的身份。

有的细菌可能会告诉你，它们叫“大肠杆菌”，有的则可能是“沙门氏菌”，每个名字背后都藏着不同的故事和特性。

当所有的结果都出来后，咱们就能知道肠道里到底发生了什么。

可能会有个别的致病菌跳出来，让人吓一跳，但有时候也可能只是普通的肠道菌群，没什么大问题。

雪豹大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的分离及鉴定

雪豹大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的分离及鉴定何顺福【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2016(032)002【总页数】1页(P66)【作者】何顺福【作者单位】西宁野生动物园,青海西宁810000【正文语种】中文2014年8月，西宁野生动物园繁育的2只3月龄雪豹出现腹泻，经过抗生素药物对症治疗数天后效果不佳，随后青海大学农牧学院动物医学系传染病实验室对患病雪豹的腹泻粪便进行了采集，采取常规的病原分离及药敏试验技术进行微生物学诊断，最后，确诊为大肠杆菌与沙门氏菌混合感染，药敏试验结果显示此次分离的病菌对左氧氟沙星、头孢曲松、依诺沙星敏感。

1.1 材料1.1.1 病料采集发病雪豹的粪便，待检。

1.1.2 培养基伊红亚甲蓝平板、SS平板、TSA平板和TSB肉汤培养基。

1.1.3 试验动物健康小白鼠10只。

1.1.4 药敏纸片 14种药敏纸片。

1.2 方法1.2.1 病料的采集采集西宁野生动物园发病雪豹粪便无菌种到TSB肉汤中37℃培养18～24h。

1.2.2 病菌的分离、纯化分别划线种于伊红亚甲蓝平板、SS平板和TSA平板进行分离、纯化。

1.2.3 生化试验将纯化后的分离株种到葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、鼠李糖、棉子糖、阿拉伯糖、木糖、卫矛醇、肌醇、山梨醇、水杨苷、MR、V-P、明胶、鸟氨酸脱羧酶肉汤、硫化氢、西蒙氏枸橼酸钠、硝酸盐、半固体和尿素等各种生化培养基中进行生化鉴定。

1.2.4 动物致病性试验将纯化后的分离株种到鲜血琼脂斜面培养基上，37℃培养18～24h制成菌悬液，并与麦氏浊管进行比浊，选取浓度为3.0×109个/ml的菌悬液分别腹腔注射6只小白鼠，0.2ml每只作为实验组。

同时应用0.22μm细菌滤器分别对上述菌悬液过滤，各取滤液腹腔注射4只小白鼠，0.2ml每只，作为对照组。

对注射后的小白鼠隔离饲养，观察发病及死亡情况，对死亡白鼠立即进行剖检，观察病理学变化，无菌采取肝脏、脾脏组织涂片、染色。

犊牛腹泻病中细菌的分离鉴定与药敏试验 - 牛病防治

犊牛腹泻病中细菌的分离鉴定与药敏试验-牛病防治犊牛腹泻是一种常见的犊牛病症、引起犊牛腹泻得病因有多方面，有管理因素（喂初乳过晚，喂犊牛的奶温过低，喂奶不经稀释直接喂牛犊，喂奶没有定量，环境以及气温突变）。

根据对洛阳地区牛场的调查，在排除其它病因后，对腹泻犊牛进行细菌的分离与鉴定，并做了药敏试验，以便挑出敏感药物，进行针对性治疗。

菌株分别取自白马寺、升升乳业、洛宁王村、偃师、伊川高山等地养殖场犊经过病原菌的分离鉴定，发现有一头牛是大肠杆菌和沙门氏菌的混合感染，其它七头为大肠杆菌感染，有两头为非细菌性感染。

分析的原因有两点：一，由于养殖户的知识有限，他们不能科学合理的使用抗生素；二，由于细菌本身发生了变化，特别是它们能够获取其它耐药菌株的耐药基因。

一、大肠杆菌的生物学特性大肠杆菌是肠杆菌科中一组革兰氏阴性，无芽胞，除少数例外为周身鞭毛，能运动，兼性厌氧，发酵葡萄糖，分解乳糖的细菌。

本菌是一切温血动物肠道后段常在菌。

肉食兽与杂食兽肠道中携带本菌的数量，远比草食动物多。

部分菌株具有致病性和条件致病性，引起肠道疾病或肠道外感染。

大肠埃希氏菌大小为1.1-1.5×2.0-6.0，两端钝圆，有的近似球杆状，不行成芽孢，有鞭毛，运动或不运动，多数菌株有荚膜或微荚膜。

一些菌株的菌体表面有一层具有黏附性的纤毛，黏附性纤毛是一种毒力因子。

1.犊牛腹泻病近年来，随着奶牛业的快速发展，犊牛腹泻病已经成为关系到奶牛业兴衰的一种疾病，犊牛腹泻指的是正在吃奶的小牛出现腹泻的一种病症，一般在出生一个月内发病最高，多侵害出生后两周内的犊牛，一年四季均可发生，本病是造成犊牛生长发育不良和死亡的主要疾病之一，是新生犊牛的杀手，约占犊牛发病率的80%[1]。

2.犊牛腹泻病的危害洛阳地区的牛厂为洛阳市民和周边人民提供优质的牛肉和牛奶，犊牛的健康率和成活率直接影响着人民的健康和农民的增收，这段时间犊牛的腹泻发生率明显上升，给养殖户带来了很大的经济损失，本文旨在确定发病原因，测定分离细菌对药物的敏感性，筛选出敏感的抗菌药物，从而为洛阳地区的犊牛腹泻病的有效防治提供科学的依据。

大肠杆菌的分离鉴定

• 结果：再加试剂甲、乙各2滴，在30s内出现红色即为阳性；若无颜色出现，加少量的锌渣，随后出现红色，则是真正的红色
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11
斜面和深层均为红色
斜面为红色；深层为黄色；若产生H2S，为黑色
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3
分离鉴定---麦康凯培养基
• 原理：在培养基中含有胆盐，可抑制大部分革兰氏阳性菌的生长，培养基含乳糖，大肠杆菌能分离乳糖，使pH下降（中性指示剂5.5--7.5，红--黄）形成红色菌落，而沙门氏菌和志贺氏菌，不能分解乳糖，菌落小且为无色
大肠杆菌的分离鉴定、药敏实验及生化实验
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1
目的要求
• 熟悉鉴别培养基的原理 • 了解大肠杆菌的主要生理生化特性
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2
一、鉴别培养
菌种培养基类别
麦康凯培养基
大肠杆菌
红色菌落
沙门氏杆菌
无色或浅黄色菌落
SS琼脂培养基
红色菌落
浅黄色菌落
伊红美兰琼脂培养基
三塘铁培养基
紫红色或紫黑色并带有金粉红色菌落属光泽菌落
在培养基中含有胆盐可一直大部分革兰氏阳性菌的生长培养基含乳糖大肠杆菌能分离乳糖使ph下降中性指示剂5575红黄形成红色菌落而沙门氏菌和志贺氏菌不能分解乳糖菌落小且为无色两试管斜面移植时左手斜持菌种管和被将接种琼脂斜面管使管口相齐管底放在拇指和食指间松动两管棉塞将管口进行火焰灭菌使其靠近火焰将接种环深入管内现在无菌生长的培养基上接触使之冷却再挑取少量的细菌后拉出接种环立即伸入另一管斜面培养基上勿碰到斜面和管壁直达斜面底部从底部开始划曲线向上到斜面顶端管口火焰灭菌塞好棉塞接种完毕
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4
术式
两试管斜面移植时，左手斜持菌种管和被接种管，管口相齐，管底放在拇指和食指间，松动两管棉塞，将管口进行火焰灭菌，使其靠近火焰，将接种环深入管内，先在无菌生长的培养基上接触使之冷却，再挑取少量的细菌后，拉出接种环，立即伸入另一管斜面培养基上，勿碰到斜面和管壁，直达斜面底部，从底部开始划曲线，向上到斜面顶端，管口火焰灭菌，塞好棉塞，接种完毕。接种环火焰灭菌后，放下接种棒最后在斜面管壁上注明日期、接种者。置370C，温箱培养

家禽大肠杆菌和沙门氏菌分离及药敏试验

家禽大肠杆菌和沙门氏菌分离及药敏试验方法鸡大肠杆菌病主要依靠药物防治，但药物的大量使用带来了大肠杆菌多重耐药性和药物残留等诸多问题。

目前世界许多地方开展了调查研究试验材料1.病料来源。

养殖户送检样本有典型大肠杆菌和沙门氏菌病变的病死鸡，孵化后期死亡鸡胚（没有出壳鸡苗）作病料。

毛蛋没有出壳小鸡小鸡卵黄囊青年鸡病料2.细菌分离用的培养基：麦康凯培养基、普通培养基、SS培养基、亚硫酸铋培养基等二、试验方法1.大肠杆菌的分离培养。

无菌采取死鸡的肝、孵化后期死胚卵黄囊（没有出壳鸡苗）在麦康凯平板上分区划线37℃培养12~24小时，在麦康凯培养基上生长出边缘整齐稍凸起、表面光滑湿润、直径1～2毫米的红色圆形菌落，革兰氏阴性，接种到SS培养基37℃培养12~24小时，生长出粉红菌落。

亚硫酸铋琼脂大肠杆菌不生长。

2.沙门氏菌分离培养。

无菌采取死鸡的肝、孵化后期死胚卵黄囊在在麦康凯平板上分区划线37℃培养12~24小时，然后挑取麦康凯琼脂平板上淡黄色半透明单个菌落，接种到SS培养基37℃培养12~24小时，生长出黄色半透明或黑色菌落。

亚硫酸铋琼脂沙门氏菌生长绿色单个菌落。

如图：SS培养基沙门氏亚硫酸铋琼脂沙门氏菌麦康凯培养基大肠杆菌SS培养基大肠杆菌和沙门氏菌普通培养基大肠杆菌和沙门氏菌三．药敏试验分离到的大肠杆菌和沙门氏菌混合在一起，涂匀营养培养基，选用的药敏片做好标号，平整贴在培养基上37℃培养12~24小时，观察细菌抑菌圈大小，选抑菌圈越大药物敏感度越高，使用疗效越好。

同时考虑某些药物肠道不吸收问题。

四．药敏分析及预防：该地区的大肠杆菌和沙门氏菌对粘杆菌素、痢菌净、氟苯尼考、硫酸阿米卡星、头孢噻呋、硫酸新霉素较敏感。

合理搭配抗生素使用减少细菌耐药性的产生，临床上长期大量使用不规范抗菌药物，致使大肠杆菌沙门氏菌耐药菌株不断产生，敏感的药物越来越少，也可以据本场的大肠杆菌和沙门氏菌血清型做疫苗预防。

这提示我们每隔一定时间要对本地区的大肠杆菌耐药性进行检测，以便更好地选择敏感有效的药物，以控制该病的流行。

鹌鹑大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离与鉴定

美兰（ＥＭＢ琼脂、康凯（ｃＯｋｙ琼脂、）麦ＭａＣｎｅ）Ｓ—Ｓ琼脂、绿肉汤增菌液、白胨水、萄糖煌蛋葡
蛋白胨水、橼酸盐琼脂、发酵管．．枸糖ＭＲ试剂、 —Ｐ试剂、哚试剂、酸盐还原试剂．Ｖ吲硝
０前言
大肠杆菌病（ｏｉａｉｏｉ和沙门氏菌病（ａｎｌｓ）别是由致病性大肠杆菌和沙Ｃｌｃｌｓ）ｂｌｓＳｌｅｏｉ分ｍｏｌｓ
门氏菌属的细菌引起的消化道传染病，行广，病率和死亡率较高，年来，着鹌鹑养殖流发近随业的发展，关鹌鹑疾病的报道也陆续增多，国内对鹌鹑的细菌性疾病，其是混合感染有但尤
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第２４卷第２期２００２年６月
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ＶＯ．４ＮＯ．１２２
ＪｕｎｌｆＡｇｉｕｔｒｌＳｉｎｅＹａｂａｉｅｓｔｏｒａｏｒｃｌａｃｅｃｎｉｎＵｎｖｒｉｙｕ
收稿日期：２００２—０４—２０
作者简介：张宗植（９０）男（鲜族）吉林龙井人，吉市动物卫生监督所助理兽医师１７一，朝，延
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第２期
张宗植，：鹑大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离与鉴定等鹌

大肠杆菌与沙门氏菌鉴定

大肠杆菌与沙门氏菌的鉴定08动检1班：魏静翟阿官李盼盼尚延丽田方方崔亚婷一、实验目的与要求1、通过本实验了解大肠杆菌及沙门氏菌的主要生化特性与培养特性2、掌握大肠杆菌与沙门氏菌的鉴别方法二、实验器材及试剂温箱、显微镜、载玻片、营养琼脂、接种环、灭菌平皿、麦康凯培养基、无菌试管、伊红美兰培养基、三糖铁培养基、革兰氏染色剂、棉签、火柴等三、实验内容1、直接镜检法：1）操作步骤：a）用棉签沾取适量样液直接涂在载玻片上b）用革兰氏染色剂染色c）显微镜下观察2）预期实验结果：a）大肠杆菌：大肠杆菌为革兰氏阴性菌，中等大小，两端略圆的短粗杆菌，成单个存在，也有成双排列；周身鞭毛，能运动，有时两端着色较浓，要注意与巴氏杆菌区分开来。

b）沙门氏菌：沙门氏菌也为革兰氏阴性菌，无芽孢，大小通常为0.7~1.5um*2.0~5.0um，菌端钝圆，散在，偶有短丝状，无荚膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外均有周身鞭毛，能运动，绝大多数菌株有菌毛。

2、分离培养法：将样液分别划线接种在麦康凯培养基、伊红美兰培养基上，温箱培养24h后观察生长情况，根据菌落的形态、颜色、大小等方面的差异来鉴别大肠杆菌和沙门氏菌。

1）麦康凯培养基（预期实验结果）：a）大肠杆菌：鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润；b）沙门氏菌：无色至浅橙色，透明或半透明，菌落中心有时为暗色。

2）伊红美兰培养基（预期实验结果）：a）大肠杆菌：紫黑色菌落，有的有金属光泽b）沙门氏菌：形态特征与在麦康凯培养基上的相似2、三糖铁培养基穿刺试验1）操作方法：将待检样液穿刺接种于三糖铁培养基中，培养18~24h后，取出观察2）预期实验结果：a）大肠杆菌：穿刺后不变黑，表面呈黄色b）沙门氏菌：穿刺底部有气体，穿刺后变黑，中间为黄色表面为红色3、乳糖发酵试验1）操作方法：将待检样液接种于乳糖发酵管内放于温箱内培养18h后，观察结果2) 预期实验结果：a）大肠杆菌：产酸产气b）沙门氏菌：不产酸产气。

大肠杆菌和沙门氏菌的鉴别诊断要点。

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肠道沙门氏菌的分离鉴定方法

肠道沙门氏菌的分离鉴定方法
1. 直接培养法呀！就像在一片肥沃的土地上播种，等着肠道沙门氏菌这个“小家伙”冒出来。

比如说，把样本放在合适的培养基上，给它提供一个舒适的“家”，然后看看它会不会现身。

这多简单直接呀！
2. 染色鉴定法嘞！这就好比给肠道沙门氏菌这个神秘的“小精灵”披上一件特别的外衣，让它无处可藏。

像用特定的染色剂一染，它的真面目就显露出来啦，是不是很神奇呀？
3. 生化试验法哟！就如同一场对肠道沙门氏菌的挑战赛，看它能不能通过各种“关卡”。

比如进行各种生化反应的测试，符合特定表现的，那肯定就是它呀！你说有趣不有趣？
4. 血清学鉴定法呐！这不就是在茫茫“菌”海中精准找到肠道沙门氏菌的秘密武器嘛！通过血清与它反应，就像找到了一把钥匙能打开正确的那扇门，一下子就把它认出来啦！
5. 分子生物学方法嘿！这就好像拥有了一双超级透视眼，能直接看到肠道沙门氏菌的基因“密码”。

利用各种高科技手段，深入分析它的本质，厉害吧？
6. 噬菌体鉴定法呀！这不就是肠道沙门氏菌的“天敌”出现啦！专门针对它的噬菌体，就像一个聪明的猎手，能准确抓住它。

是不是特别神奇呢？
7. 自动化仪器鉴定法哦！这简直就是偷懒的好办法嘛，把一切交给机器这个“智能小助手”。

它可以快速又准确地帮我们找出肠道沙门氏菌，多省事儿呀！
我的观点结论就是：这些肠道沙门氏菌的分离鉴定方法各有各的奇妙之处，根据不同的情况选择合适的方法，就能把这个“小调皮”给抓住啦！。

大肠杆菌和沙门氏菌的鉴别方法

大肠杆菌和沙门氏菌的鉴别方法
分辨大肠杆菌和沙门氏菌，就像是侦探破案，得用些巧妙的办法。

想象一下，你有几种特别的“侦探工具”：
神奇培养皿：
彩虹土（麦康凯琼脂）：大肠杆菌在这上面能造出粉色小山丘，因为它喜欢吃一种叫乳糖的糖，而沙门氏菌不喜欢，所以它们不会在这上头变色。

变色泥（EMB琼脂）：大肠杆菌弄出来的“泥巴”会有黑心或者闪着绿光，沙门氏菌就不那么爱显摆，颜色没那么炫。

三合一秘制酱（TSI琼脂）：看气泡、变色，就像观察魔法反应，大肠杆菌和沙门氏菌会有不一样的“魔法表演”。

黑洞板（BS平板）：沙门氏菌能造出黑黑的小点，让板子底下发黑，大肠杆菌则不行。

化学魔术：
IMViC小把戏：通过几项小实验，看它们吃不吃某些东西，排什么颜色的“气”，就能看出大肠杆菌和沙门氏菌的不同喜好。

尿素游戏：大肠杆菌像个小魔术师，能变尿素的戏法，沙门氏菌就不会这一招。

抗体侦探：
免疫磁珠：用特制的小球球，上面有专门抓细菌的“手”，一抓一个准，不同细菌抓的手法不一样。

DNA破解：
PCR超级放大镜：这招高级，直接读细菌的遗传密码，用特定的“字母组合”去配对，找出是谁家的细菌。

用这些方法，科学家们就能像福尔摩斯一样，一步步揭开细菌的身份之谜。

每种方法都有它的妙处，根据需要，选最合适的那个来用。

病料中可疑病原菌的分离

病料中可疑病原菌的分离、培养与鉴定病料：怀疑为大肠杆菌、沙门氏菌或葡萄球菌感染的鸡或鸭画线方法2.细菌的移植挑取平板中的单个菌落制菌片作G染色镜检确定单菌落接种普通琼脂和麦康凯斜面37℃ 24-48h生化鉴定细菌纯培养划线方法3.生化鉴定纯培养接种生理生化培养基37℃ 24-48h鉴定1.单糖发酵管接种：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖、蔗糖2. 生理生化培养基接种：(1)普通肉汤37℃ 24-48h生长观察及Indole试验(2)蛋白胨水37℃ 24-48h Indole 试验(3)葡萄糖蛋白胨水37℃ 24-48h MR/VP(4)三糖铁培养基37℃ 24-48h 观察底层/斜面是产酸,还是产碱，底层是否产气/H2S附:葡萄球菌形态染色：球形或稍呈椭圆形，直径1.0um左右，排列成葡萄状。

葡萄球菌无鞭毛，不能运动。

无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。

易被常用的碱性染料着色，革兰氏染色为阳性。

其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，以及耐药的某些菌株可被染成革兰氏阴性。

培养特性：营养要求不高，在普通培养基上生长良好，在含有血液和葡萄糖的培养基中生长更佳，需氧或兼性厌氧，少数专性厌氧。

28~38℃均能生长，致病菌最适温度为37℃，PH为4.5~9.8，最适为7.4。

在肉汤培养基中24小时后呈均匀混浊生长，在琼脂平板上形成圆形凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，不透明的菌落。

不同种的菌标产生不同的色素，如金黄色、白色、柠檬色。

色素为脂溶性。

葡萄球菌在血琼脂平板上形成的菌落较大，有的菌株菌落周围形成明显的完全透明溶血环（β溶血），也有不发生溶血者。

凡溶血性菌株大多具有致病性。

生物学反应：多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖，产酸不产生气。

致病性菌株能分解甘露醇。

大肠杆菌大肠杆菌（Escherichia coli，E.coli）革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。

周生鞭毛，能运动，无芽孢。

能发酵多种糖类产酸、产气。

描述大肠杆菌与沙门氏菌在麦康凯培养基上形成的菌落颜色差异原理

描述大肠杆菌与沙门氏菌在麦康凯培养基上形成的菌落颜
色差异原理
大肠杆菌与沙门氏菌是两种常见的肠道细菌，它们在麦康凯培养基上形成的菌落颜色差异是由于它们的代谢特性和生理反应的差异导致的。

麦康凯培养基是一种常用的选择性培养基，用于分离和鉴定肠道细菌。

它含有一种称为碱性溴蓝的指示剂，该指示剂会在特定条件下发生颜色变化，从而可以区分不同菌种。

大肠杆菌和沙门氏菌在麦康凯培养基上的区别主要体现在它们的代谢产物和酶的表达上。

首先，大肠杆菌是一种产气菌，它在进行葡萄糖发酵时会产生气泡，并产生大量酸性代谢产物。

这些酸性代谢产物会使麦康凯培养基中的碱性溴蓝指示剂变为黄色。

因此，大肠杆菌在麦康凯培养基上形成的菌落呈黄色。

相反，沙门氏菌是一种无气菌，它不进行葡萄糖发酵，因此不会产生气泡。

此外，沙门氏菌具有较强的硫化物产生能力，可以将培养基中的硫化物还原成硫化氢气体。

硫化氢气体与碱性溴蓝指示剂反应会生成黑色沉淀物。

因此，沙门氏菌在麦康凯培养基上形成的菌落呈黑色。

总结起来，大肠杆菌在麦康凯培养基上形成的菌落是黄色的，而沙门氏菌形成的菌落是黑色的。

这种差异是由于它们的代谢特性和生理反应不同导致的。

通过观察菌落颜色的变化，可以初步鉴定和区分大肠杆菌和沙门氏菌这两种常见的肠道细菌。