血型检定检测卡标准操作程序

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ABO、RHD血型检定试剂卡标准操作程序(微柱凝胶免疫检测法)

深圳市宝安区松岗人民医院检验科

操作规程文件号:SGYYJ-3-XK-007

第三版

共3页

2014年10月01日起实施

有效期至2017年09月30日

本规程每3年复审一次

复审日期:2017年9月30日

复审人:钟青

规程编写者:钟青

审批者:曾宪威

批准日期:2014年10月1日

文件分发部门和/或个人:

检验科;主任:曾宪威

血库:钟青

ABO、RHD血型检定试剂卡标准操作程序

(微柱凝胶免疫检测法)

1.目的:保证检测结果准确、可靠。

2.适用范围:血型血清学检测,标本类型为血清。

3.负责人:曾宪威操作人:授权检验人员。

4.原理:微柱凝胶免疫技术应用于血清学检测,阳性结果红细胞在上层,阴性结果红细胞在低层。

5.性能参数:灵敏度比试管法,玻片法有数十倍以上提高。

6.标本要求:

(1)标本类型:全血。

(2)标本采集:见标本采集手册。

(3)标本储存和运输:室温放置不超过2小时,4-8℃不超过72小时,-20℃保存期6个月,应避免反复冻融,室温运输。

(4)标本拒收状态:细菌污染、溶血或严重脂血标本不能用作测定。

7.容器和添加剂类型:血常规管或凝血管。

8.所需设备:离心机。

9.试剂:标准抗A血清,标准抗B血清,标准A型红细胞,标准B型红细胞,标准抗D血清。

10.校准程序(计量学溯源性):

11.程序步骤::

11.1 微柱凝胶试验卡的6个凝胶微管标号;

11.2 将待检者0.5%红细胞悬液分别加入第1至第3管或第4至第6管中,每管50ul。

11.3 即刻使用专用离心机离心5分钟,900rpm2分钟,1500rpm3分钟,取出肉眼判定结果。

11.4 结果判定:阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。反应强度:特异性红细胞抗原抗体复合

物位于胶面为强阳性反应;复合物在胶中为弱阳性反应;愈靠近胶底部颗粒愈小,反应愈弱。阴性结果:被检红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉降于微柱凝胶的尖底部。

11.5 结果分析:血型抗原判定:见下表

表1。微柱凝胶免疫检测ABO、RH血型抗原检定

11.6 注意事项

11.6.1 抗A管略呈蓝色,抗B管略呈黄色,抗D略呈灰色;

11.6.2 RBC标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应,尽可能应用当日

采集的新鲜血。过夜血或陈旧血,必须首先用该标本做阴性对照试验。

11.6.3 清标本:必须充分去纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,

阻碍RBC沉淀,呈假阳性反应。

11.6.4 微柱凝胶管中出现溶血,强烈提示为RBC抗原抗体反应,也不排除其它

原因所致溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论。

12. 质量控制程序:

13. 干扰(如乳糜血、溶血、胆红素血)和交叉反应:乳糜血、胆红素血基本不影响本实验的测定。

14. 生物参考区间:A型,B型,AB型,O型,RH阳性,RH阴性。

15. 患者检验结果的可报告区间:各种血型都有可能。

16. 警告/危急值(当适用时):无。

17. 实验室解释:为临床输血提供依据。

18. 其它:

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