外周血淋巴细胞微核检测
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外周血淋巴细胞微核检测
佛山市中医院检验科 陈海生
概念：
微核是位于细胞浆中独立于主核的核小体 主核完全脱离,直径约为主核的1 /20～1 /3。 形态是较规整的圆形或椭圆形小体。染色质 结构与主核相似,边缘光滑,染色同染色质或 稍淡,无明显折光性。在生物、物理、化学等 外界因素作用下,细胞染色体丢失或断裂,在 细胞分裂后期,这种染色体如果仍留在子细胞 质内,形成一个或几个规则的次核,即为微核
国外研究-微核与恶性疾病
据研究：提示白血病患者存在染色
体断裂、丢失等异常,表现为染色体 不稳定性改变,导致同位、临位原癌 基因激活,抑癌基因失活,而发生肿 瘤。
国内研究-微核与恶性疾病
国内研究报道：一组恶性实体肿瘤患者
的淋巴细胞微核率明显增高,超过正常对 照组10倍以上。有专家立项“人类微核 项目”(HUMN)的研究,针对日本、意大利、 瑞典为主的实体肿瘤患者,其中包括肺、 胃肠、肝胆、胰腺、乳腺肿瘤。结果显 示:高微核率与肿瘤发生高度相关,膀胱 癌与肾癌的相对危险度(RR)可达8.123。
国外研究-微核与恶性疾病
国外新近研究显示：未经治疗白血病患
者的微核率明显高于正常对照组,分别为: 正常对照组(0.187 ±0.175) ‰、急性 淋巴细胞白血病(3.165±1.147) ‰、急 性髓系白血病(3.155 ±1.124) ‰、慢 性淋巴细胞白血病(3.103 ±1.105) ‰。
微核与癌前病变
动物实验已经证实,不论是成体或是胚胎
期在出现恶性肿瘤前首先在血细胞或其 他类型细胞中出现微核。微核先于癌前 出现,更早于临床症状及体征。可以利用 微核作为人体早期致癌危险性的监测。 为癌症及时发现与诊断、积极实行早期 干预治疗提供依据。
微核与MDS
骨髓异常增生综合征(MDS)是一组骨 髓造血干/祖细胞克隆性异常疾病,临床 表现为一系或多系血细胞减少,骨髓或外 周血细胞有病态造血,表现为同时或先后 出现红系、粒系和巨核系发育异常。其 部分可以向白血病转化,实际是血液系统 的癌前病变。因此,骨髓异常增生综合征 的早期诊断及监测其转化具有重要意义。
专家在对MDS患者中RA、RAS、RAEB和
RAEBT各型的随访监测中,发现MDS即将转 变为白血病时微核率及微核细胞率显著增高, 可达到白血病水平。表明微核率增高,高度预 示MDS向白血病转化,达到一定水平时,可以 作为MDS转化为白血病诊断指标之一。
微核与MDS
微核与MDS
微核计数标准：在油镜下观察
1000 个淋巴细胞，按国家标准 确定微核，即微核大小为主核 的1/20～1/3，与主核核膜完全 分离，形态较规正，圆形或椭 圆形，染色性与主核相似或稍 淡，无明显折光性。进行以下 指标的检测。
外周血淋巴细胞微核检测在良性、癌 前病变及恶性疾病中的意义
目前恶性肿瘤的发生率逐年升高。 恶性肿瘤是癌细胞的恶性克隆性异常,其 发生与机体细胞内的遗传物质损伤有着 密切关系。由于微核与染色体畸变高度 相关,近年来微核检测在恶性疾病研究方 面受到极大重视。
(卫星核)
微核的形成
微核形成与染色体断裂、缺失,以及染色体畸
变的发生高度相关,检测微核可以间接反映染 色体受损情况。 通常检测微核反映机体所受环境诱变剂、致 癌剂、X射线及其他有害因素所引起的染色体 损伤程度
参数
①微核人员检出率:检出淋巴细胞微核的人员占 该组总人数的百分率。 ②微核阳性检出率:超出微核正常值上限的人数 占该组总检出人数百分率 ③微核细胞率:每1 000个淋巴细胞中含微核的 淋巴细胞数量 ④微核率:每1 000个淋巴细胞的微核数量。 后两者均以千分率表示。
微核与MDS
骨髓造血干/祖细胞克隆性改变反映了病
程演变是一个伴随染色体异常的渐变过 程。微核是滞留在细胞质中的染色体断 片或染色单体。
微核与MDS
因此,微核是染色体畸变在细胞中的一种
表现形式,它在一定程度上反映了机体染 色体的损伤程度。近年来微核检测在MDS 方面的研究日益增多。
微核与MDS
微核与恶性疾病
反复地或长期地处于致染色体突变环境
下的高危人群,可发生染色体的异常。 微核可以反映染色体的损伤,所以机体在 致癌环境下可首先表现为微核率增多,这 种异常的累积导致染色体突变,最终导致 恶性肿瘤的发生。
微核与恶性疾病
因此,微核检测可提前告知染色
体可能发生畸变,警戒高危人群, 脱离高危环境,防止继续处于高 危状态,最终出现染色体异常,导 致肿瘤发生。所以微核检测的意 义重在于预测和监测,具有早期 预测筛查恶性疾病发生的重要意 义。
微核与MDS
染色体异常是导致造血细胞异常的直接
原因。MDS患者在诊断时, 40%～60%有染 色体异常,随着病程的进展可高达80%。 总之,染色体异常在MDS中的RA或RARS发 生率相对较低( 15% ～ 30% ) , 而且多 为单一异常; 在RAEB 或RAEBT的发生率 高达45% ～60% ,而且多为复杂异常，并 且随着病程进展,可出现异常克隆增多或 出现新的异常。
方法
一.淋巴细胞普通培养法
二.微量血直接推片法 三.明胶制片法
Fra Baidu bibliotek 方法
采取耳垂血0.1ml,肝素抗凝,与1/2 量的
3% 明胶放入离心管中, 加盖混匀, 垂直 至于37oC 水浴箱中自然沉降40 分钟左 右。吸取上清液，注入离心管中， 1000rpm/5 分钟，弃上清，取沉淀物推 片，干后，甲醇固定1 分钟，瑞- 姬氏 染色1 0 分钟。
佛山市中医院检验科 陈海生
概念：
微核是位于细胞浆中独立于主核的核小体 主核完全脱离,直径约为主核的1 /20～1 /3。 形态是较规整的圆形或椭圆形小体。染色质 结构与主核相似,边缘光滑,染色同染色质或 稍淡,无明显折光性。在生物、物理、化学等 外界因素作用下,细胞染色体丢失或断裂,在 细胞分裂后期,这种染色体如果仍留在子细胞 质内,形成一个或几个规则的次核,即为微核
国外研究-微核与恶性疾病
据研究：提示白血病患者存在染色
体断裂、丢失等异常,表现为染色体 不稳定性改变,导致同位、临位原癌 基因激活,抑癌基因失活,而发生肿 瘤。
国内研究-微核与恶性疾病
国内研究报道：一组恶性实体肿瘤患者
的淋巴细胞微核率明显增高,超过正常对 照组10倍以上。有专家立项“人类微核 项目”(HUMN)的研究,针对日本、意大利、 瑞典为主的实体肿瘤患者,其中包括肺、 胃肠、肝胆、胰腺、乳腺肿瘤。结果显 示:高微核率与肿瘤发生高度相关,膀胱 癌与肾癌的相对危险度(RR)可达8.123。
国外研究-微核与恶性疾病
国外新近研究显示：未经治疗白血病患
者的微核率明显高于正常对照组,分别为: 正常对照组(0.187 ±0.175) ‰、急性 淋巴细胞白血病(3.165±1.147) ‰、急 性髓系白血病(3.155 ±1.124) ‰、慢 性淋巴细胞白血病(3.103 ±1.105) ‰。
微核与癌前病变
动物实验已经证实,不论是成体或是胚胎
期在出现恶性肿瘤前首先在血细胞或其 他类型细胞中出现微核。微核先于癌前 出现,更早于临床症状及体征。可以利用 微核作为人体早期致癌危险性的监测。 为癌症及时发现与诊断、积极实行早期 干预治疗提供依据。
微核与MDS
骨髓异常增生综合征(MDS)是一组骨 髓造血干/祖细胞克隆性异常疾病,临床 表现为一系或多系血细胞减少,骨髓或外 周血细胞有病态造血,表现为同时或先后 出现红系、粒系和巨核系发育异常。其 部分可以向白血病转化,实际是血液系统 的癌前病变。因此,骨髓异常增生综合征 的早期诊断及监测其转化具有重要意义。
专家在对MDS患者中RA、RAS、RAEB和
RAEBT各型的随访监测中,发现MDS即将转 变为白血病时微核率及微核细胞率显著增高, 可达到白血病水平。表明微核率增高,高度预 示MDS向白血病转化,达到一定水平时,可以 作为MDS转化为白血病诊断指标之一。
微核与MDS
微核与MDS
微核计数标准：在油镜下观察
1000 个淋巴细胞，按国家标准 确定微核，即微核大小为主核 的1/20～1/3，与主核核膜完全 分离，形态较规正，圆形或椭 圆形，染色性与主核相似或稍 淡，无明显折光性。进行以下 指标的检测。
外周血淋巴细胞微核检测在良性、癌 前病变及恶性疾病中的意义
目前恶性肿瘤的发生率逐年升高。 恶性肿瘤是癌细胞的恶性克隆性异常,其 发生与机体细胞内的遗传物质损伤有着 密切关系。由于微核与染色体畸变高度 相关,近年来微核检测在恶性疾病研究方 面受到极大重视。
(卫星核)
微核的形成
微核形成与染色体断裂、缺失,以及染色体畸
变的发生高度相关,检测微核可以间接反映染 色体受损情况。 通常检测微核反映机体所受环境诱变剂、致 癌剂、X射线及其他有害因素所引起的染色体 损伤程度
参数
①微核人员检出率:检出淋巴细胞微核的人员占 该组总人数的百分率。 ②微核阳性检出率:超出微核正常值上限的人数 占该组总检出人数百分率 ③微核细胞率:每1 000个淋巴细胞中含微核的 淋巴细胞数量 ④微核率:每1 000个淋巴细胞的微核数量。 后两者均以千分率表示。
微核与MDS
骨髓造血干/祖细胞克隆性改变反映了病
程演变是一个伴随染色体异常的渐变过 程。微核是滞留在细胞质中的染色体断 片或染色单体。
微核与MDS
因此,微核是染色体畸变在细胞中的一种
表现形式,它在一定程度上反映了机体染 色体的损伤程度。近年来微核检测在MDS 方面的研究日益增多。
微核与MDS
微核与恶性疾病
反复地或长期地处于致染色体突变环境
下的高危人群,可发生染色体的异常。 微核可以反映染色体的损伤,所以机体在 致癌环境下可首先表现为微核率增多,这 种异常的累积导致染色体突变,最终导致 恶性肿瘤的发生。
微核与恶性疾病
因此,微核检测可提前告知染色
体可能发生畸变,警戒高危人群, 脱离高危环境,防止继续处于高 危状态,最终出现染色体异常,导 致肿瘤发生。所以微核检测的意 义重在于预测和监测,具有早期 预测筛查恶性疾病发生的重要意 义。
微核与MDS
染色体异常是导致造血细胞异常的直接
原因。MDS患者在诊断时, 40%～60%有染 色体异常,随着病程的进展可高达80%。 总之,染色体异常在MDS中的RA或RARS发 生率相对较低( 15% ～ 30% ) , 而且多 为单一异常; 在RAEB 或RAEBT的发生率 高达45% ～60% ,而且多为复杂异常，并 且随着病程进展,可出现异常克隆增多或 出现新的异常。
方法
一.淋巴细胞普通培养法
二.微量血直接推片法 三.明胶制片法
Fra Baidu bibliotek 方法
采取耳垂血0.1ml,肝素抗凝,与1/2 量的
3% 明胶放入离心管中, 加盖混匀, 垂直 至于37oC 水浴箱中自然沉降40 分钟左 右。吸取上清液，注入离心管中， 1000rpm/5 分钟，弃上清，取沉淀物推 片，干后，甲醇固定1 分钟，瑞- 姬氏 染色1 0 分钟。