无菌服清洁与灭菌效果验证方案措施

无菌检验 方法学验证方案
辽宁爱母医疗科技有限公司 2010 年 9 月

文件名称 文件编号 起草部门
无菌检验方法学验证方案
起草人
起草日期
总页数 备注
审核部门
审核人
生产技术部主管
起草部门主管
审批部门
审批人
总工办负责人
质量部主管
审核意见
审核日期
审批意见
审批日期

1、验证对象、范围及时间 2、目的 3、实施验证的人员分工及职责 4、可接受标准 5、验证操作方法 6、验证结论 7、结果分析与评价 8、漏项与偏差表 9、再验证周期 10、最终批准 11、附录
目录
1、验证对象及范围

本实验是关于产品无菌检查试验的验证。参照《中国药典2005年版》二
部附录无菌检查方法进行试验。结果采用直接接种法对人工污染的六种菌株
进行试验，产品对枯草芽孢杆菌、生孢梭菌有不同程度的抑菌作用。采用薄
膜过滤法用0.9%氯化钠100mL进行样品稀释，然后用500mL的pH7.0氯化钠缓冲
液分几次冲洗，可消除其抑菌成分。验证结果应显示对产品无菌试验方法。
2、目的 本方案的目的在于为分析评价无菌检验方法，以确认采用适宜的检验
方法。
3、实施验证的人员分工及职责
表 1 无菌检验方法学验证小组职责分工
验证职责
负责部门
负责人
起草验证方案
起草验证报告
无菌检验方法学验证实施
检验
审核验证方案和验证报告
批准验证方案和验证报告
4、接受标准
已对生化检验人员进行专业培训。
5、验证操作方法
5、1 概述
本产品为三类医疗器械无菌产品。无菌检查法是对该产品质量控制的重要
检查项目，《2005年版药典》要求建立产品的无菌检查法时要进行方法学的
验证，来确认所采用的方法适用。按照《中国药典2005年版》要求，以金葡
球菌，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌、生孢梭菌、白色念珠菌，黑曲霉菌作

为实验菌种，对甲磺酸罗哌卡因注射液无菌检查方法进行了验证实验。
5、2 验证主要文件
文件名称
编号
实际情况
《无菌工作服管理规程》
AM·SMP·De23-05-I
《初始污染菌检验》
5、3 无菌服洗衣消毒灭菌程序
纯化水浸泡
加洗涤剂
适量
15 分钟
洗涤
脱水
2 分钟
纯化水漂洗
消毒
0.1 新洁尔灭浸泡 15 分钟
纯化水漂洗
5 分钟
3 分钟
脱水
晾干
放入无菌袋
灭菌
121℃，30min
放入传递窗
缓冲区指定地点
5、4 取样 将浸有灭菌生理盐水的棉拭子在无菌服的门衣襟、袖上来回涂抹 10 次
（往返为一次）采样面积为 5cm×5cm，将棉拭子放入 10ml 灭菌生理盐水的试 管中。
5、6 检验方法
将已采集的样品在 6h 内送检，将每个采样管震打 80 次，混匀，10 倍递减
稀释，对每个稀释度（取 3 个稀释度）分别取 1ml 放于灭菌平皿内，用普通
琼脂培养基作倾注培养，每个样品平行接种两块平皿,置 37℃恒温箱培养 48h，
计数平板上细菌菌落数，观察结果。
5、7 检验项目
5、7、1 外观检查目测法可接受标准：清洗后无菌服外观清洁，无可见的残留 物或残留气味。

5、7、2 微生物合格标准：细菌总数≤50CFU/标样（25cm2） 附：1.验证记录
2.检验报告单 6、验证结论
7、结果分析与评价
评定人：
日期：
审核人：
日期：
8、漏项与偏差值
9、再验证周期
9、1 正常生产时，每年应进行一次再验证。
9、2 自动杀菌净手器大修或主要零部件更换时必须进行再验证。 10、最终批准
批准人： 11、附录:
日期：

2010-8-5 初稿