磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
PBS缓冲液配制

PBS缓冲液配制0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml 青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
PBS缓冲液配制
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PBS缓冲液配制0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl 8.0g ; KCl 0.2g ; Na2HPO4 1.44g ; KH2PO4 0.24g ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到 7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠(0.1g/100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
(完整版)磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
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磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号:大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
磷酸盐缓冲液配制方法
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磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pHPBS缓冲液(~):NaCl 137mmol/L,KCl L,Na2HPO4 L, KH2PO4 L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=的配制:先配 0.2M PB (pH=,100ml):取19ml L的 NaH2PO4, 81ml L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)92 8 90 1085 1551 4945 5538 6233 6728 7223 7719ml 81ml16 8413 877 930.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1L即可。
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
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磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号:大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
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磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号:大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
磷酸盐缓冲液配制方法
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磷酸盐缓冲液配制方法 Company number:【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pHPBS缓冲液(~):NaCl 137mmol/L,KCl L,Na2HPO4 L, KH2PO4 L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=的配制:先配 0.2M PB (pH=,100ml):取19ml L的 NaH2PO4, 81ml L 的 Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB (PH=):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB (PH=):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至%(g/100ml)即可。
另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)92 890 1085 1551 4945 5538 6233 6728 7223 7719ml 81ml16 8413 877 930.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1L即可。
磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
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磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
PBS缓冲液配制

0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100u/ml 青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
?NaCl8.0g;KCl0.2g;Na2HPO41.44g;KH2PO40.24g;加蒸馏水至1000ml,调节pH到7.4(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入0.1%叠氮钠(0.1g/100mlPBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用0.01%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PH???????????7.6?????7.4????????7.2???????7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO42.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO40.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl8g,KCl0.2g,Na2HPO4•12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7. 4,加水定容至1L,常温保存备用。
(完整版)磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号:大中小订阅0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
pbs-缓冲液的配置

称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
“PBS”缓冲液试剂:NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。
若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)pH0.2mol/L NaH2PO4(ml)0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.793.56.55.892.08.05.990.010.06.087.712.3 6.185.015.0 6.281.518.5 6.377.522.5 6.473.526.5 6.568.531.5 6.662.537.5 6.756.543.5 6.851.049.06.945.055.07.039.061.0 7.133.067.0 7.228.072.0 7.323.067.0 7.419.081.0 7.516.084.0 7.613.087.0 7.710.589.5 7.88.591.57.97.093.08.0 5.394.73、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液),两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
pbs 缓冲液的配置
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1、0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
2、磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)试剂:NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。
若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.07.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.9 7.0 93.08.0 5.3 94.73、0.1mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PB)试剂:NaH2PO4·2H2ONa2HPO4·12H2O配制方法:先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液),两者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸盐缓冲液。
磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液配制方法磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 49557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 9394.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4,81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl 调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
PBS缓冲液配制

PBS缓冲液配制磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、 KCl、 Na2HPO4和 KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
NaCl ; KCl ; Na2HPO4 ; KH2PO4 ;加蒸馏水至 1000ml,调节pH 到(用Na2HPO4或KH2PO4调节)。
用于免疫反应时可加入 %叠氮钠(100ml PBS);当试剂中含有辣根过氧化物酶时,严禁使用叠氮钠,可改用%柳硫汞。
PBS缓冲液配方PHH2O 1000 1000 1000 1000NaClNa2HPO4NaH2PO4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。
所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl ,Na2HPO4•12H2O , KH2PO4 ,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至,加水定容至1L,常温保存备用。
PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用。
现用现配。
如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH在左右,明显偏酸。
PBS缓冲液配制

PBS缓冲液配制
0.01M磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
PBS缓冲液配方
PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2 NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4
根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸)。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。
PHቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ.0的PBS配方详细
1. NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L 2.向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。4.高温高压灭菌后,室温保存。注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
磷酸盐缓冲液配制方法

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法之杨若古兰创作0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最初加蒸馏水定容至1 L.保管于4℃冰箱中即可.须要留意的是,通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可.然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按响应比例适当浓缩即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水浓缩至1000ml 即可.0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水浓缩至1000ml 即可.0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水浓缩至1000ml 即可.若须要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可.另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.8 92 85.9 90 106.1 85 156.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.9 7 930.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最初加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至多20分钟),保管存于室温或4℃冰箱中.须要留意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话,则须要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素以后再调PH、定容、灭菌消毒.PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2根据经验来看,新颖配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,特别在炎天,其电离常数发生了改变,在经过日夜的时间后,PH值会明显改变(我亲自测过偏酸).所以做实验的同学可要留意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性.所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制成绩.每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,留意从头换新液.PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保管备用.PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用.现用现配.如果是把所有固体加大十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍浓缩,那么,在刚配好浓缩液时,PH在6.5摆布,明显偏酸.不克不及用盐酸调.虽然可以用氢氧化钠颗粒调,但是有更方便的方法.十倍浓缩当前,PH主动升高到所须要的值.不须要其它任何处理.这个可以先取少量试一试,配好以后再测一次~2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解.3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L.4. 高温高压灭菌后,室温保管.留意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如须要,可在配方中弥补1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2.0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)的配制:甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠9.465g7.099g,加蒸馏水至1000ml ;乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g6.803g,加蒸馏水至1000m1.将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保管,用时甲、乙两液各按分歧比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI5.29 2.5 97.55.59 5.0 95.05.91 10.0 90.06.24 20.0 80.06.47 30.0 70.06.64 40.0 60.06.81 50.0 50.06.98 60.0 40.07.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可.。
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实验方案镧铈对铜胁迫下豌豆种子萌发和生长的影响(Ⅲ)、Ce(Ⅲ)对重金属胁迫下种子萌发影响的显效剂量筛选(1)浓度梯度设计:LaCl3/ CeCl 3溶液配置:先配置1g•L-1的LaCl3/ CeCl 3溶液母液,然后将母液分别稀释成浓度为5、10、20、40,60 mg•L-1梯度浓度,调节PH(HCL/NAOH)至6.5,对照(CK)为PH调节至6.5的去离子水。
重金属Cuso4浓度的设置:10、25、50、100、200、400 mg•L-1,对照用蒸馏水。
(2)试材培养种子预处理:选取均匀饱满的豌豆种子用0.1%HgCl2溶液消毒15min,分别用自来水和去离子水洗净,常温下晾干备用。
(3)实验设置:CK,La,Ce,Cu(共4组18个浓度57个样品)(4)试材处理:选取LaCl3、CeCl3和CuSO4各个梯度溶液溶液,豌豆种子经预处理后用各个梯度溶液浸没处理,对照用蒸馏水,置于25±1℃浸种24h后,将处理后种子均匀排列在直径9cm、垫有2层滤纸的培养皿中,每处理加入一定量水培养(以没过种子2/3为标准),每处理3皿重复,每皿20粒。
指标测定方法:种子发芽第三天测α—淀粉酶,第四天测发芽势,前三天测发芽指数和发芽率,第五天测量根长、茎长,第六天测根系活力、叶绿素含量、可溶性蛋白质、可溶性糖、SOD、POD、CA T、MDA.2.La(Ⅲ)和Ce(Ⅲ)对重金属胁迫下种子萌发及保护酶的影响(1)试材培养种子预处理:选取均匀饱满的豌豆种子用0.1%HgCl2溶液消毒15min,分别用自来水和去离子水洗净,常温下晾干备用。
(2)实验设置:在上一步骤中分别筛选出LaCl3、CeCl3的低剂量、适宜剂量、高剂量三个有效浓度和CuSO4的一个有效浓度,分别记为A1,A2,A3;B1,B2,B3;C。
(3)实验步骤:有以下几组:A+C:A1+C、A2+C、A3+CB+C:B1+C、B2+C、B3+CA+B+C:A1+B1+C 、A1+B2+C 、A1+B3+C、A2+B1+C、A2+B2+C、A2+B3+C、A3+B1+C 、A3+B2+C、A3+B3+C酸盐缓冲液(PBS)配制方法磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2M)pH 0.2M Na2HPO4/ml 0.2M NaH2PO4/ml7.0 61.0 39.07.7 89.5 10.57.8 91.5 8.5Na2HPO4·2H2O分子量=178.05 0.2M溶液含35.61g/LNa2HPO4·12 H2O分子量=358.22 0.2M溶液含71.64g/LNaH2PO4·H2O分子量=138.01 0.2M溶液含27.6g/LNaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.2M溶液含31.21g/L0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2) PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L,KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L。
保存于4℃冰箱中即可。
母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的Na2HPO4, 即可。
然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如:0.1M PB(PH=7.4):取500ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至1000ml 即可。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至1000ml 即可。
若需要NaCl的话,加入NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。
另:其它各种另PH值的0.2M PB(100ml)配方:pH 0.2M NaH2PO4(ml)0.2M Na2HPO4(ml)7.0 38 627.8 8.5 91.50.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO412H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)的配制:甲液:0.05mol/L Na2HPO4溶液:称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸馏水至1000ml ;乙液:0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1。
将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保存,用时甲、乙两液各按不同比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI7.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0实验01根系活力的测定(TTC法)(二)仪器设备:1. 分光光度计;2. 分析天平(感量0.1mg);3. 电子顶载天平(感量0.1g);4. 温箱;5. 研钵;6. 三角瓶50ml;7. 漏斗;8. 量筒100ml;9. 吸量管10ml;10. 刻度试管10ml;11. 试管架;12. 容量瓶10ml;13. 药勺;14. 石英砂适量;15. 烧杯10ml、1000ml。
(三)试剂:1. 乙酸乙酯(分析纯)。
2. 次硫酸钠(Na2S2O4),分析纯,粉末。
3.1%TTC溶液准确称取TTC1.0g,溶于少量水中。
定容到100ml。
用时稀释至各需要的浓度。
4. 磷酸缓冲液(1/15mol/L,pH7)。
5. 1mol/L硫酸用量筒取比重1.84的浓硫酸55ml,边搅拌边加入盛有500ml蒸馏水的烧杯中,冷却后稀释至1000ml。
6. 0.4mol/L 琥珀酸称取琥珀酸4.72g,溶于水中,定容至100ml即成。
三、实验步骤(1)TTC标准曲线的制作取0.4%TTC溶液0.2ml放入10ml量瓶中,加少许Na2S2O4粉摇匀后立即产生红色的甲月替。
再用乙酸乙酯定容至刻度,摇匀。
然后分别取此液0.25ml、0.50ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml置10ml容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度,即得到含甲月替25μg、50μg、100μg、150μg、200μg的标准比色系列,以空白作参比,在485nm波长下测定吸光度,绘制标准曲线。
(2)称取根尖样品0.5g,放入10ml烧杯中,加入0.4%TTC溶液和磷酸缓冲液的等量混合液10ml,把根充分浸没在溶液内,在37℃下暗保温1~3h,此后加入1mol/L硫酸2ml,以停止反应。
(与此同时做一空白实验,先加硫酸,再加根样品,其他操作同上)。
(3)把根取出,吸干水分后与乙酸乙酯3~4ml和少量石英砂一起在研钵内磨碎,以提出甲月替。
红色提取液移入试管,并用少量乙酸乙酯把残渣洗涤二、三次,皆移入试管,最后加乙酸乙酯使总量为10ml,用分光光度计在波长485nm下比色,以空白试验作参比测出吸光度,查标准曲线,即可求出四氮唑还原量。
四、结果计算四氮唑还原强度(mg/g(根鲜重)/h)=四氮唑还原量(mg)/[根重(g)×时间(h)] 实验02 脯氨酸含量的测定(二)仪器设备:1. 722型分光光度计;2. 研钵;3. 100ml小烧杯;4. 容量瓶;5. 大试管;6. 普通试管;7. 移液管;8. 注射器;9. 水浴锅;10. 漏斗;11. 漏斗架;12. 滤纸;13 剪刀。
(三)试剂1. 酸性茚三酮溶液:将1.25g茚三酮溶于30ml冰醋酸和20ml6mol/L 磷酸中,搅拌加热(70℃)溶解,贮于冰箱中;2. 3%磺基水杨酸:3g磺基水杨酸加蒸馏水溶解后定容至100ml;3. 冰醋酸;4. 甲苯。
三、实验步骤1. 标准曲线的绘制(1)在分析天平上精确称取25mg脯氨酸,倒入小烧杯内,用少量蒸馏水溶解,然后倒入250ml容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,此标准液中每ml含脯氨酸100μg。
(2)系列脯氨酸浓度的配制取6个50ml容量瓶,分别盛入脯氨酸原液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5及3.0ml,用蒸馏水定容至刻度,摇匀,各瓶的脯氨酸浓度分别为1,2,3,4,5及6μg/ml。
(3)取6支试管,分别吸取2ml系列标准浓度的脯氨酸溶液及2ml 冰醋酸和2ml酸性茚三酮溶液,每管在沸水浴中加热30min。
(4)冷却后各试管准确加入4ml甲苯,振荡30S,静置片刻,使色素全部转至甲苯溶液。
(5)用注射器轻轻吸取各管上层脯氨酸甲苯溶液至比色杯中,以甲苯溶液为空白对照,于520nm波长处进行比色。
(6)标准曲线的绘制:先求出吸光度值(Y)依脯氨酸浓度(X)而变的回归方程式,再按回归方程式绘制标准曲线,计算2ml测定液中脯氨酸的含量(μg/2ml)。
2. 样品的测定(1)脯氨酸的提取:准确称取不同处理的待测植物叶片各0.5g,分别置大管中,然后向各管分别加入5ml3%的磺基水杨酸溶液,在沸水浴中提取10min,(提取过程中要经常摇动),冷却后过滤于干净的试管中,滤液即为脯氨酸的提取液。