生物化学09级期末复习题.docx

期末复习题

1、说明盐析和盐溶的含义。

盐析(satting-out):随着盐浓度的继续升高，例如，达到饱和和半饱和的程度，蛋白质的溶解度逐渐变小，彼此之间相互凝聚而发生沉淀，此现象称作盐析。

盐溶(salting-in):在盐溶液很稀的范围内，随着盐浓度的增加，球状蛋白质的溶解度也随之增加，此现象称作盐溶。

2、哪些氨基酸可以在①pH4、②pH6、和③pH7具有效的缓冲能力？

3、为什么生物体内的许多蛋白质以寡聚体形式存在？

4、用强酸型阳离子交换树脂分离下述每对氨基酸，当用PH7.0的缓冲液洗脱时，指岀下述每对氨基酸中先从柱上被洗脱下来的氨基酸，并说明理市。①天冬氨酸和赖氨酸。②精氨酸和甲硫氨酸。③谷氨酸和缠氨酸。④甘氨酸和亮氨酸。⑤丝氨酸和丙氨酸。

5、说明凝胶过滤的原理及应用。

凝胶过滤是指利用高度水化的，具有不同大小孔径的网状结构的惰性多聚物颗粒作为层析柱的填充物，把分子大小不同的蛋白质混合物上样到柱层析上，混合物中的各组分随着洗脱液的流动，按分子大小以不同的速度向下移动，从而把各组分分开。常用的有葡聚糖凝胶(sephadex,)或琼脂糖凝胶(sepharose)作为层析柱的填充物。

蛋白质分离纯化

6、说明为什么血红蛋白能够在组织中最大限度地释放氧，而在肺部能够最大限度地吸收氧的？

02、C02> H\ BPG

7、一系列球状蛋白质，分子量从10 000到100 000,随着分子量的增加，亲水残基与疏水残基的比率有什么变化，为什么？

8、i湖酶活性中心的结构和意义。简要说明酶与底物之间相互作用力与酶促反应的关系。

9、什么是核酶？

具有催化活性的RNA,即化学本质是核糖核酸(RNA),却具有酶的催化功能。核酶的作用底物可

以是不同的分子，有些作用底物就是同一RNA分子中的某些部位。核酚

的功能很多,有的能够切割RNA,有的能够切割DNA,有些还具有RNA连接酶、磷酸酶等活性。与蛋白质酶相比，核酶的催化效率较低，是一种较为原始的催化酶。

核酶(ribozyme)是具有催化功能的RNA分子。核酶乂称核酸类酶、酶RNA、

类酶RNAo

10、说明米氏方程和米氏常数的含义及应用。

Vo二Vmax[S]/(Km+[S])

米氏常数Km：达到最大反应速度一半时的底物浓度。单位与底物浓度单位相同。

Km是酶的一个基本的特征性常数，不同酶有不同的Km。Km只与酶的性质有关，与酶的浓度无关，但与pH、温度等因素有关；

选择最适底物

酶与底物的亲和力

从Km的大小可知正确测定酶活力时所需的底物浓度。

11、分别说明竞争性抑制作用、非竞争性抑制和反竞争性抑制的特点，Km和Vmax的变化。

竞争性抑制剂(competitive inhibition )与底物竞争酶的活性中心，阻止底物与酶的结合, 这类抑制作用称为竞争性抑制。竞争性抑制的效应在于增大Km,而不改变Vmax。

反竞争性抑制剂只能同和底物结合的酶(ES)结合。反竞争性抑制的效应在于Km和Vmax 都按比例降低。

非竞争性抑制剂既能同自由酶结合又能同和底物结合的酶(ES)结合。单纯的非竞争性抑制的效应在于不改变Km,降低Vmax。

12、什么是蛋白质(酶)的协同效应？协同效应的结构基础是什么？

由多个亚基组成的酶中一个亚基结合底物或效应物之后构象发生变化，从而影响其它亚基也发生构象变化，这种效应是一个亚基结合底物或效应物之后产生，可以指令其它亚基增高或降低对底物或效应物的亲和力，这种现象成为亚基间的协同效应。(建议用自己的话回答)

13、什么是变构调节酶？什么是共价调节酶

别构酶(也称变构酶)(allosteric enzyme)结构特点

1为寡聚体酶，即多体酶，含二个或多个亚基，比一般单体酶要大得多和复杂得多。

2含有活性部位和调节(别构)部位：活性部位负责对底物的结合与催化，调节部位负责调节酶催化反应的速度。

3每一种别构酶的调节部位只能与它的专一性调节物或效应物分子非共价地结合。

共价调节酶(covalent regulatory enzyme)是一类由其它酶对其结构进行可逆共价修饰，使其处于活性和非活性的互变状态，从而调节酶活性。共价调节酶一般都存在相对无活性和有活性两种形式，两种形式之间互变的正、逆向反应由不同的酶催化。磷酸化是可逆共价修饰中最常见的类型。

14、简要说明DNA双螺旋结构的基本要点和DNA双螺旋结构的重要意义。

1两条多核昔酸链是反向平行的，即两条多核昔酸链走向是相反的。旋转绕同一个公共轴形成右手螺旋。直径2nmo

2两条多核昔酸链的糖•磷酸骨架位于双螺旋的外侧，碱基位于链内。每条链上的相邻的碱基彼此以平行的平面堆积。

3两条反向平行的链对于碱基合适的空间组合是很重要的.在天然DNA分子中，二条链间按照A与T; G与C的碱基配对规则互补配对。A与T之间形成两个氢键，G与C之间形成三个氢键。

4相邻的碱基对之间的轴距为0.34mn；每个螺旋的轴距为3・4nm。

5沿螺旋轴方向看去，双螺旋有两个宽度不同的沟槽，一个大构，一个小沟。这两个沟使碱基外露其大小足够容纳蛋白质分子，有利于核酸和蛋白质相互作用。

15、简要说明在DNA热变性过程中，影响Tm的因素。

1 DNA均一性同质DNA均一性高，变性的温度范围越窄，异质DNA变性的温度范围较宽。

2 G-C含量与Tm值成正比。

3 介质中离子强度。离子强度高，Tm高。

16、什么是DNA复性。简要说明影响DNA复性速度的因素。

DNA在变性后，慢慢冷却，两条单链则可重新结合,回复到双螺旋结构，这一过程称为

复性(renahiFation)。