PE多标酶标仪
PHERAstar Plus 自动聚焦荧光发光仪
PHERAstar Plus 自动聚焦荧光多功能酶标仪是目前市场上检测速度最快、灵敏度最高的高通量筛选用酶标仪特性:● 应用荧光强度、高效时间分辨荧光、荧光偏振、化学发光和生物发光等进行的多模式测试,并且可以进行BRET、FRET等测试.● 基于透镜的创新光学设计和同时双发射检测技术的结合,适用于所有的微板模式,最多可至1536孔,均可在1分PHERAstar Plus钟内完成测读● 自动聚焦功能, 最佳信噪比● 45℃孵育,多种振荡模式● 极佳的扫描,终点和动力学测试● 测试特异性光线模式欲寻一个测试包含所有的滤光片控制和分析软件:BMG LABTECH的多功能酶标仪软件包同时提供实验步骤设计与数据分析功能。
并完全符合FDA 21CFR Part 11。
控制软件能让用户自定义设定仪器的参数和实验步骤,功能包括实时数据显示、检测孔的独立标记、优化动力学分析、用户自定义微孔板、精确的多模式自动进样、振荡和读数,以及可以跟其它分析软件兼容的多模式数据输出功能。
数据分析软件MARS能为用户展示数据、单图、光谱和2D/3D的标准曲线图。
数据可以通过预设的模板进行处理,也可以对通过改变统计数据来进行处理。
该软件同样能够制作标准曲线,并可根据如下曲线拟合函数计算得到EC50、IC50和r2值:线性回归拟合4-参数拟合点对点拟合分段回归拟合三次样条函数拟合2nd和3nd多项式拟合MARS软件包对标准曲线进行一步步的推算,所以很容易得到如:S/N,Delta F%和Z’等重要参数。
利用标准拟合等式即可快速的进行酶动力学数据分析,让MARS软件更为完善。
只需按一下鼠标,通用型的微孔板测读器软件包就能为用户提供快速、简单的实验结果,实验步骤设计,和用户自定义数据处理。
PHERAstar Plus 自动聚焦荧光多功能酶标仪指标参数:香港伯齐科技有限公司广州伯齐生物科技有限公司400 600 9639 marketing@香港北京上海广州厦门昆明。
酶标仪常见技术和应用
细胞活力检测
细胞活性检测 – MTT、XTT法
• MTT-黄色染料 ↓被活体细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶还原 • 形成蓝紫色结晶-甲瓒 ↓DMSO溶解 检测OD570(OD630作为背景参照) 细胞质 线粒体 细胞核 cell
©2012 For research use only. Not for use in diagnostic procedures. Trademarks mentioned herein are property of Molecular Devices, LLC or their respective owners.
光吸收的基本检测类型
• 特定波长检测: DNA、RNA及蛋白质浓度
• 比色测定: 检测反应的产物产生的颜色变化(450nm) 酶联免疫吸附试验(ELISA)
• 浊度检测: 检测样品中微颗粒产生的光的散射 细菌的生长(600nm)
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21/02/2014
Coቤተ መጻሕፍቲ ባይዱparison of Microplate Readers with Absorbance Detection
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医疗用注塑产品明细
医疗用注塑产品明细医疗用注塑产品种类繁多,主要包括以下几类:1. 注射器:注射器是医疗领域最常见的注塑产品,用于药物的注射和输液。
注射器材质通常为透明或半透明的聚丙烯(PP)或聚乙烯(PE),具有良好的耐化学性和耐热性。
2. 输液袋:输液袋用于存放和输送药物,通常采用聚丙烯(PP)或聚乙烯(PE)等材质制成。
输液袋要求具有良好的密封性能、耐穿刺性和透明度。
3. 医用瓶:医用瓶用于储存和运输药物,如口服溶液、注射剂等。
医用瓶通常采用聚乙烯(PE)或聚酯(PET)等材质制成,具有较高的强度和耐化学性。
4. 医疗器械配件:许多医疗器械的部件采用注塑工艺制造,如内窥镜、呼吸机、心脏支架等。
这些部件要求具有较高的精度、强度和耐用性。
5. 医疗耗材:医疗耗材是注塑产品在医疗领域的重要应用之一,包括一次性手套、口罩、止血带等。
这些产品要求具有良好的舒适性、防护性能和生物相容性。
6. 生物诊断产品:生物诊断产品,如酶标仪、生物传感器等,也采用注塑工艺制造这些产品要求具有高精度、稳定性和可靠性。
7. 医疗包装:医疗包装是注塑产品在医疗领域的另一个重要应用,包括药品包装、医疗器械包装等。
医疗包装材料要求具有良好的密封性、阻隔性和生物相容性。
8. 康复器材:康复器材,如拐杖、轮椅、助行器等,也有采用注塑工艺制作的。
这些产品要求具有较高的强度、耐磨性和舒适性。
9. 医疗设备:某些医疗设备如超声波设备、核磁共振设备等,也可能采用注塑工艺制造部件。
这些部件要求具有高精度、稳定性和耐用性。
10. 个人防护装备:个人防护装备如防护服、防护面罩、眼罩等,在疫情防控等方面具有重要应用。
这些产品要求具有防护性能、舒适性和耐用性。
以上仅为医疗用注塑产品的一部分明细,实际上,注塑产品在医疗领域的应用还有很多。
随着医疗行业的发展和技术的进步,注塑产品在医疗领域的应用将更加广泛。
酶标仪在加样仪中比对、性能确认的运用
s a mp l e r e s u l t s a r e c l o s e r .Con c l us i o n Av o i d mi s s i n g e n z y me - l i n k e d d e t e c t i o n i n s t r u me n t f a c t o r s t r i g g e r e d ,i mp r o v e
2 0 1 3 年 1 月 第 3 卷 第 1 期
・ 制剂与技术 ・
酶标仪在加样仪中比对 、性能确认 的运用
林厦门 3 6 1 0 0 0 [ 摘要 J目的 建立全 自动加样仪仪 器 的比对 、 性 能确认 的可靠 、 简易方法 。 方法 利用酶标仪 比色方法对全 自动加
S a mp l e r i n s t r u me n t c o mp a r i s o n , p e r f o r ma n c e c o n f i r ma t i o n , t o l e a k a g e o f t h e a u t o ma t i c s a mp l e r s t a t u s r e g u l a r l y o r
pe r f o r ma n c e q ua l i ic f a t i on a pp l i c a t i o n
L / N Y o n g c a i
Xi a me n Bl o o d C e n t e r o f L a b o r a t o r y Me d i c i n e , Xi a me n 3 61 0 0 0 , C h i n a
样 仪进行仪器 的比对 、 性能确认 , 以期对全 自动加样仪 状态进 行定期或 时时监控 , 以避免加样 过程 的漏加 而引起非
多功能酶标仪操作流程
多功能酶标仪操作流程酶标仪是一种常用的实验设备,广泛应用于生物学、医学等领域。
多功能酶标仪结合了吸光度测量、荧光测量、发光测量等多种测量模式,能够满足不同实验需求。
下面将介绍多功能酶标仪的操作流程。
一、准备工作1. 清洁酶标仪:使用干净的纸巾或者专用擦拭布轻轻擦拭仪器外壳及工作台面,确保无灰尘和杂质。
2. 开启仪器:按下电源开关,等待酶标仪启动。
启动后,系统会进行自检,确保仪器正常工作。
3. 准备实验样本:根据实验设计的需要,准备好待测样本及相应的试剂。
二、设置参数1. 选择测量模式:根据实验需求,选择合适的测量模式,如吸光度测量、荧光测量或发光测量。
2. 设置波长:根据实验所需测量的波长范围,设置合适的波长。
可通过菜单栏或者旋钮进行设置。
3. 检查校准:使用预先校准好的标准品进行波长校准和背景校准,确保准确的测量结果。
4. 设置实验参数:根据实验要求,设置吸光度、荧光或发光相关参数,如积分时间、增益等。
三、测量样本1. 样品装载:将待测样本稀释至合适浓度,并分别装入专用的石英比色皿、荧光皿或发光皿中。
2. 放置样品:将装有样品的皿放置在仪器工作台上,注意对位和固定,确保与检测光源完全接触。
3. 开始测量:按下测量按钮,酶标仪会根据设置的参数自动进行测量,待测量过程完成后,结果将显示在仪器屏幕上。
四、结果分析1. 数据记录:将测量结果记录下来,包括吸光度、荧光值或发光值等,根据实验需要可进行多次测量并取平均值。
2. 数据处理:进一步根据实验设计要求,对测量结果进行数据处理和分析,如绘制标准曲线、计算浓度等。
3. 结果解读:根据实验目的和研究问题,对结果进行解读,得出相应的结论。
五、清洁和关闭1. 清洁皿和工作台:将使用过的皿清洁干净,可使用去离子水或者适当的清洁剂清洗,并用纸巾擦拭干燥。
2. 关闭仪器:长时间不使用酶标仪时,应将仪器关闭,按下电源开关即可完成关闭流程。
本文介绍了多功能酶标仪的操作流程,包括准备工作、设置参数、测量样本、结果分析以及清洁和关闭等步骤。
酶标仪
近年来,随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来,乱花渐欲迷人眼。
除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN,还出现了众多后来者插足此市场,如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。
各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线,特性各不相同,选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱。
本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
1.滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多,但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。
一般来说,酶标仪可以分为滤光片型和光栅型两大类。
当然也有一些型号,例如Synergy4和EnVision等在一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可,另一模块实现不了的。
所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以实现大部分实验的需要。
目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的,例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔(荧光素,384孔/80ul)。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制,不可能满足日益增加的实验类型的检测需要,而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究,所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司,其光栅习惯上称为单光栅。
由于光纯度的不足,在光栅的后面又加入了一组带阻滤片,对杂光进行二次过滤,达到了5×10-4的杂光率,基本与纯粹的滤光片系统一致。
后来TECAN又发展出了双光栅技术,通过两次光栅滤光,杂光率降到了10-6。
infinite M200使用手册-酶标仪
长:457mm 宽:425mm 高:253mm
14Kg 15.8Kg
12
环境条件 环境温度 操作时 非操作时 相对湿度 过压级别 污染级别
用途 嘈声水平 处置方式
15℃--30℃ 59℉--86℉ -20℃--+60℃ –4℉--+140℉ 小于 90% 无冷凝 Ⅱ 2 实验室用仪器 <60dBA 电子废弃物(传染性废弃物)
9
仪器背面接口示意图
1. 仪器风扇 2. 电源风扇 3. 电源开关 4. 电源接口 5. 认证标签 6. 配置标签 7. 仪器名称和信息 8. 保修标签 9. USB 接口 10.加液器接口
!注意:撕毁或者除去保修标签,将使保修合同失效
10
2. 3 移机和运输
如果需要移动仪器,请先打开计算机,打开仪器电源,运行操作软件,用 操作软件依次弹出微孔板托架,比色杯架(M200),滤光片架(F200),确定 仪器内部没有存留微孔板、比色杯、滤光片架或其它外来实验耗材,然后关闭操 作软件,关闭仪器和计算机电源,拔下仪器的电源线和 USB 数据线。
3
附录 2 附 2NanoQuant 模块的使用方法 附 2.1 NanoQuant 概述………………………………………………………60 附 2.2 NanoQuant 模块的使用方法…………………………………………60 附 2.3 NanoQuant 板的维护…………………………………………………67
4
1. 概况
1.1 仪器概述
Tecan Infinite 200 是 Tecan 公司生产的全自动多功能微孔板阅读器, 支持 ANSI/SBS 标准的 6 孔板至 384 孔板,与 Tecan 自动工作站兼容。
Tecan Infinite 200 分为两个型号: Infinite M200 采用光栅设计; Infinite F200 采用滤光片设计。
多功能酶标仪常见配置及参数
Infinite M200 PRO1.一般参数:支持的检测模式:光吸收、荧光顶部底部、时间分辨荧光(TRF)、连续发光、瞬时发光、双色发光、BRET、光吸收和荧光波长扫描1.1 光源:UV高能闪烁氙灯,10^8次闪烁寿命,自带光强监测、校准,免维护无需预热1.2 光栅杂光率:<10^-61.3 支持板型:6-384孔板,预设常用品牌型号;自动扫描并定义特殊规格板型,NanoQuant微量检测板,4位卧式比色杯,立式比色杯(选配)1.4 孔内多点读数(光吸收/荧光顶底):6-384孔板,最多15×15个点(依板型模式可有不同),覆盖全孔,7种点布局1.5 温度控制:环境温度+5℃至42℃(选配)1.6 振荡:线性或圆形可选;振幅1-6mm,0.5mm步进;1-1000秒可调1.7 多标记多模式检测:单个实验中可进行无限制的多波长、多模式检测(光吸收、荧光、发光、波长扫描)1.8 最快读板速度:96孔板:20秒;384孔板:30秒1.9 波长扫描速度(FI EX/EM):150秒;450-550nm,5nm步进,96孔板1.10 认证:DLReady,Transcreener Red FI2.光吸收模块2.1 波长范围:230-1000nm,1nm连续可调2.2 波长选择:双光栅2.3 带宽:<5nm(λ≦315nm),<9nm(λ>315nm)2.4 波长准确性:<±0.3nm(λ≦315nm),<±0.5nm(λ>315nm)2.5 波长重复性:<±0.3nm(λ≦315nm),<±0.5nm(λ>315nm)2.6 检测器:紫外硅光电二级管2.7 检测范围:0-4 OD2.8 检测分辨率:0.0001 OD2.9 检测准确性:<0.5% @260nm2.10 检测精确性:<0.2% @260nm2.11 260/280nm精度:±0.073.荧光模块3.1 波长范围:Ex 230-600nm,Em 330-600nm,1nm步进3.2 波长选择:Quad4四光栅3.3 带宽:Ex <5nm(λ≦315nm),<9nm(λ>315nm);Em<20nm3.4 光栅杂光率:<10^-63.5 波长准确性:<±1nm(λ≦315nm),<±2nm(λ>315nm)3.6 波长重复性:<±0.5nm(λ≦315nm),<±1nm(λ>315nm)3.7 检测器:光电倍增管(PMT),可选紫外和红外敏感型3.8 荧光灵敏度:顶部:170 amol/孔,(1.7 pM;384孔板),Fluorescein;底部:1.2 fmol/孔,(6 pM;96孔板),Fluorescein3.9 检测线性范围:7个数量级,扩展范围模式3.10 增益(Gain)值:1-255,四种模式:手工、自动、从孔计算、扩展范围3.11 顶部荧光Z轴聚焦:14800μm-23000μm连续可调,手工设定或自动探测,最强信号或最高信噪比两种模式4.时间分辨荧光模块4.1 灵敏度:90 amol/孔,(0.9 pM;384孔板),Europium4.2 延迟时间Lag time:0-2000 μs4.3 积分时间Integration time:10-2000 μs5.发光模块5.1 波长范围:380-600nm5.2 检测器:低暗电流单光子计数光电倍增管5.3 发光灵敏度:连续发光:225 amol ATP/孔,(9 pM;low volume 384孔板);5.4 瞬时发光:12 amol ATP/孔,(218 fM;384孔板)5.5 检测范围:6-8个数量级(扩展动态范围功能)5.6 积分时间:100-20,000 ms5.7 孔间干扰:<0.01%,黑板6.Nanoquant微量检测板模块6.1 用途:核酸定量:dsDNA,RNA,ssDNA,cDNA,Oligos等;蛋白定量:280nm;核酸纯度:260/280nm 或260/230nm;荧光探针标记效率:Cy3,Cy5,Alexa 555,Alexa 647及其他6.2 样品量:2μL6.3 材质:全金属与聚光石英6.4 光程:严格0.5 mm,误差<±5μm6.5 检测范围:1-2900 μg/ml,dsDNA6.6 准确度:CV<3%6.7 重复性:CV<1%6.8 清洁:70%乙醇擦拭,或超声水浴,无需重新校准6.9 样品数量:16个6.10 检测时间:核酸定量:~1 分钟;荧光探针标记效率:~1分45秒7.气体控制模块7.1 范围:CO2:0 - 15%;O2:0.1 - 21%7.2 数据监控:实时测量内部气体浓度,精确到0.1%,LCD屏幕显示7.3 数据记录:通过i-control软件记录气体浓度变化7.4 海拔校准:自动-500米至4000米海拔高度校准8.软件模块配置Magellan软件预设多种实验模板,Nanoquant专有应用,内置DNA/RNA定量及纯度计算,图形界面,拖放式操作,检测结果直接导出至Excel,中文软件操作,强大的数据处理功能,可以进行定性、定量、波长扫描、动力学检测、IC/EC50等复杂计算。
碧云天酶标仪用户手册说明书
质量保证........................................................................................................................................... 4
重要说明........................................................................................................................................... 5
1.2 仪器的光路系统.......................................................................................................7
1.3 规格和参数(包括 RS-232C 接口参数,打印机等) ...........................................8
2.4 屏幕介绍...................................................................................................................9
2.5 定义.........................................................................................................................10
3.5.5 记录查询.........................................................................................................32
infinite 200pro酶标仪原理
infinite 200pro酶标仪原理"无限连续200pro酶标仪"是一种常用的实验仪器,用于检测和测量样品中特定蛋白质、核酸或其他生物大分子的含量。
本文将详细介绍无限连续200pro酶标仪的工作原理,并逐步解释其测量过程。
第一步:原理概述无限连续200pro酶标仪基于酶标法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)原理工作。
酶标法是一种灵敏且特异性很高的生物化学测量方法,常用于梅毒、艾滋病、流感等疾病的诊断,以及蛋白质含量的测定。
在酶标法中,待测分子与特定的抗体或抗原反应生成免疫复合物,接着通过将酶标记物(通常是酶)与此免疫复合物结合,使其与目标物质关联。
然后,加入相应的显色物质,当酶作用于显色物质时,会产生指示颜色的反应。
最后,通过测量反应物的颜色强度,可以推断出待测物质的浓度。
第二步:仪器结构无限连续200pro酶标仪通常由光源、滤光系统、探测器、数据分析软件等组成。
1. 光源:提供适当的波长光线以进行后续测量。
常用的光源有氘灯和钨灯。
2. 滤光系统:用于选择特定波长的光线通过,以确保测量的准确性。
这包括各种滤光片或光栅。
3. 探测器:用于测量反应物质的光信号。
常见的探测器有光电二极管(Photodiode)或光电倍增管(Photomultiplier tube)。
4. 数据分析软件:用于收集、处理和分析测量数据,并提供相关结果的输出。
第三步:测量原理无限连续200pro酶标仪的测量原理基于颜色发生反应的特征。
具体步骤如下:1. 样品处理:准备待测样品,并根据实验需要进行预处理,例如洗涤、稀释等。
2. 分配试管:将每个待测样品分配到指定的酶标板孔。
3. 加入酶标抗体:加入与待测物质特异结合的酶标抗体(可能是抗原或抗体)。
4. 孵育:将酶标板置于恒定温度下,留一定时间使酶标抗体与待测物质充分反应。
5. 洗涤:通过洗涤,去除未结合的抗体。
tecan酶标仪参数
tecan酶标仪参数摘要:一、Tecan酶标仪简介二、Infinite 200 PRO的主要特点三、Infinite 200 PRO的技术参数1.光源2.光栅杂光率3.支持板型4.孔内多点读数5.温度控制6.振荡7.多标记多模式检测8.最快读板速度9.波长扫描速度10.认证四、光吸收模块1.波长范围2.波长选择3.带宽4.波长准确性正文:Tecan酶标仪是一款在科研领域广泛应用的检测设备,其全新开发的Infinite 200 PRO在继承前代产品优良品质的基础上,进一步提升了性能,以满足当今研究领域科学家的需求。
Infinite 200 PRO的最大特点是采用了光栅和滤光片技术,使得其应用领域更加广泛,检测解决方案更加灵活和可扩展。
此外,该产品还采用了先进的模块化设计,用户可以根据需求自由选择功能模块,并且可以在未来根据需要进行升级,打造适合自己的完美检测仪器。
在技术参数方面,Infinite 200 PRO支持的检测模式包括光吸收、荧光顶部底部、时间分辨荧光(TRF)、连续发光、瞬时发光、双色发光、BRET、光吸收和荧光波长扫描等。
光源采用UV高能闪烁氙灯,具有108次闪烁寿命,自带光强监测、校准,免维护无需预热。
光栅杂光率仅为10-6,保证了检测的准确性。
Infinite 200 PRO支持多种板型,包括6-384孔板,预设常用品牌型号;自动扫描并定义特殊规格板型,NanoQuant微量检测板,4位卧式比色杯,立式比色杯(选配)。
孔内多点读数可达6-384孔板,最多1515个点(依板型模式可有不同),覆盖全孔,具有7种点布局。
温度控制范围为5至42摄氏度(选配),振荡方式有线性或圆形可选,振幅1-6mm,0.5mm步进,1-1000秒可调。
在多标记多模式检测方面,Infinite 200 PRO允许在单个实验中进行无限制的多波长、多模式检测(光吸收、荧光、发光、波长扫描)。
最快读板速度可达96孔板:20秒;384孔板:30秒。
如何选择酶标仪
如何选择酶标仪近年来,随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来,乱花渐欲迷人眼。
除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN,还出现了众多后来者插足此市场,如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。
各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线,特性各不相同,选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
一、滤片Vs光栅多功能酶标仪的分类方法众多,但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。
一般来说,可以分为滤光片型和光栅型两大类。
当然也有一些型号,例如Synergy4和EnVision 等,一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。
但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可,另一模块实现不了的。
所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以实现大部分实验的需要。
目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的,例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔(荧光素,384孔/80ul)。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制,不可能满足日益增加的实验类型的检测需要,而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究,所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司,其光栅习惯上称为单光栅。
由于光纯度的不足,在光栅的后面又加入了一组带阻滤片,再把杂光过滤一遍,达到了5×10-4的杂光率,基本与纯粹的滤光片系统一致。
多功能酶标仪(共50张PPT)
抗原抗体反应
抗原与抗体的反应统称为免疫学反应。 在体内进行的抗原抗体反应称为免疫反 应,在体外进行的抗原抗体反应称为血 清学反应。 没有抗原的刺激,机体不能产生抗体; 利用抗体可以检测抗原物质。
ELISA法特点
ELISA法是建立在抗原与抗体免疫学反 应的基础上,因而,具有特异性。
酶标仪的分析原理与分光光度法一样, 服从朗伯比尔定律。物质的含量与显色 液的颜色深浅成正比,而颜色深浅可用 吸光度表示,所以物质的含量与吸光度 值成正比。
酶标记抗原或者抗体发生免疫学反应后 ,与底物的结合物,在特定波长下有最 大吸收,可通过测定显色液的吸光度对 待测物进行定量。
ELISA法知识
多功能酶标仪的实验应用
ATP检测 微生物生长 绿荧光蛋白分析 药代毒性分析 膜渗透分析 荧光偏振分析
三、酶标仪操作
1. 注意事项
2. 酶标板
3. 操作要点
1.注意事项
1)反复研读试剂盒说明,熟悉操作步骤。 2)加样的准确性。操作中须注意显色剂和
终止的加量准确,最好使用加样枪加液 以保证比色时吸光度的准确性。枪头不 要混用。 3)洗涤时间。一般按照说明书要求,起码 洗涤5次,切要把残液甩干。
由于测定中需要酶标记抗原或抗体,酶 分子与抗原或抗体分子的结合物可以催 化底物分子发生反应,产生放大作用, 正因为此种放大作用而使本法具有很高 的敏感性。
2.常用的ELISA分析
一般酶标仪比色应该首选双波长。 但每批微量反应板对抗原或抗体蛋白质的吸附性能是有显著差别的。 推开测定盖,将酶标板小心正确放到测定槽内,合住盖。 返回原显示,set analysis 的□D/S □Filt□Mix,按enter出现set analysis的Mode。 测定完成后,取出酶标板,合上盖,关仪器开关和电源,盖上防尘罩。
Elisa检测相关器材用料的选择
一、酶标板材质选择一)、聚苯乙烯最常用的固相载体为聚苯乙烯材料,聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能。
抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性,聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。
在ELISA测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学反应。
抗原、抗体和其它生物分子通过多种机制吸附至载体表面,这包括通过疏水键、流水/离子键的被动吸附,通过引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合,以及通过表面改性后的亲水键结合。
二)、聚氯乙烯聚氯乙烯与聚苯乙烯是类似的塑料,也可作为ELISA固相载体,聚氯乙烯板的特点为质软板薄,可切割,价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。
聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有时也略高。
三)、Uv分析板聚苯乙烯和聚氯乙烯板在紫外区有很强的吸收不能用于蛋白核酸的定量。
Uv分析板可直接读取核酸及蛋白的浓度,在260nm/280nm本底干扰低,但是UV板价格昂贵。
二、Elisa常用酶系统一)、辣根过氧化酶(HRP)HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD。
是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成的一种卟啉蛋白质。
主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有最高吸收峰;辅基是深棕色的含铁卟啉环,在403nm波长处有最高吸收峰。
HRP的纯度用RZ(Reinheit Zahl,意为纯度数)表示,是403nm的吸光度与280nm的吸光度之比,高纯度的HRP的RZ≥3.0。
1、HRP催化反应原理式中DH2为供氢体,H2O2为受氢体。
HRP对受氢体的专一性很高,除H2O2外,仅作用于小分子醇的过氧化物和尿素的过氧化物。
后者为固体,作为试剂较H2O2方便。
许多化合物可作为HRP的供氢体,ELISA常用的供氢体底物为邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)和(ABTS)。
2、常用底物1)、OPD(orthopenylenediamine,邻苯二胺)为在ELISA中应用最多的底物,灵敏度高,比色方便。
酶标仪室内质量控制
Ke r y wo ds: ir pl e r a r ̄ a iy c m c o- at e de qu ]t onto rl
酶 标 仪 是 临床 检验 科 和血 站 常 用 的免 疫 学 检 测 仪 器 之
infinite_f50酶标仪_原理_概述及解释说明
infinite f50酶标仪原理概述及解释说明1. 引言1.1 概述引言部分旨在介绍本文所讨论的主题- Infinite F50酶标仪的原理、概述和解释说明。
该部分将提供一般性的背景信息,使读者对该设备有一个初步的了解。
1.2 文章结构本文分为五个主要部分:引言、Infinite F50酶标仪原理、Infinite F50酶标仪概述、Infinite F50酶标仪解释说明以及结论。
在每个部分中,将详细探讨与该主题相关的具体内容和重要方面。
1.3 目的本篇文章的目的是全面介绍Infinite F50酶标仪,包括其原理、特点、工作流程以及使用范围和应用领域。
同时,也会提供关于数据分析、结果解读方法,常见问题与解决方案,用户操作指南和注意事项等方面的详细说明。
通过阅读本文,读者将能够充分了解并掌握Infinite F50酶标仪在科学研究和实验室应用中的重要性和使用方法。
以上是“1. 引言”部分内容。
2. Infinite F50酶标仪原理:2.1 酶标仪的作用和基本原理酶标仪是一种常用于生物化学和分子生物学实验室中的仪器,用于定量测量反应物质浓度。
它可以通过检测酶催化产物的吸光度变化,来确定样品中目标物质的浓度。
基本原理是利用酶催化反应的特性,将样品与特定底物一起加入酶标板孔中,在适当条件下触发酶促反应。
该反应会导致底物被转化为产物,并且产物的生成量与目标物质在样品中的浓度成正比。
然后通过测量产生的产物吸光度变化,就可以推断出目标物质在样品中的浓度。
2.2 Infinite F50酶标仪的特点Infinite F50酶标仪具有以下特点:- 高灵敏度:采用先进光学系统和高灵敏度探头,能够检测微量产物吸光度变化。
- 多功能操作:可进行多种类型的酶促反应,如各种酶活性分析、DNA/RNA含量测定等。
- 自动化程度高:设备配备了自动进样和数据处理功能,提供快速、准确的结果。
- 可调参数:用户可以根据实验需求灵活调整温度、时间等参数。
Victornivo多功能酶标仪操作指南
Victor nivo多功能酶标仪操作指南一、开机1、打开微信预约系统,点击“开始使用”;2、等电脑打开后,打开仪器开关3、3、打开电脑上浏览器,在地址栏输入192.168.0.2,回车,仪器开始初始化、操作软件与仪器连接并自检。
4、在跳出的对话框内输入用户名(随便填),连接成功后在浏览器界面的左上角会显示Connection状态。
二、检测参数设置进入仪器主界面,选择protocol,会有一系列方法,为系统自带不可更改程序,可以copy为自己程序,然后再编辑;为可更改程序,点击edit可自行更改程序。
常用程序设置为:1、点击create new新建一个程序2、根据自己的实验要求先设置A程序名称(protocol name),B板式(plate format),C板的准确类型(plate list),D注释(comment),E根据自己需要布板3、点击parametres,编辑参数在软件主界面最左侧为选择自己需要的检测技术-----FI(荧光)、FP(荧光偏振)、TRF(时间分明光)、LUM(化学发光)、ABS (吸光度)每一个检测技术有三种方法:终点法endpoint (常用),孔内扫描scan 、Z 轴高度扫描Z-focus scan选择主检测程序时同样可选择temperature (最低25度)、shaker 和dispensing 步骤4、点击endpoint 后在中间显示,可增减程序,然后在最右侧可以编辑检测方法5、编辑检测参数(以FI 为例)波长检测方式:单光单发射(single label )常用双激发单发射(Dual excitation filter )一激发两发射(Dual emission filter )激发光(excitation filter )发射光(emission filter )分色镜:尽量选激发和发射光中间的波长可复制、删除和移动程序程序设置区滤光片可选范围测试方向:Top;光从顶部发射Bottom;光从底部发射测试时间:每孔检测时间(一般不用改变)Z轴扫描:一般不用改变6、动力学检测parametres参数设置动力学检测分为板动力学plate kinetics,意思是循环测几次选中的区域;孔动力学well kinetics,意思是一个孔循环测几次再测下一个孔。
PE多标酶标仪
– 白血病:
免疫细胞分型等
• 细胞学检查
– 细胞毒试验等多种检测项目,细胞质及组织化学分析等多种检测项目
– 酶类检测及细胞受体检测(包括MHC,HLA等多种检测)
• 科研工具
– 单标记检测,双标记检测,三标记检测,四标记检测
DELFIA技术为临床检测带来的先进性
技术
特点
检验先进性
时间分辨 特异性荧光与非特异性荧光 光谱分辨 分离
• 遗传科检查
– 产前筛查:
hAFP/ HCG ,PAPPA
– 新生儿筛查:
Neo-TSH,Neo-T4,Neo-IRT,Neo-17a-OH Prog,PKU
– 核酸探针及基因杂交检测,多标记定量PCR检测。
• 肝炎系列
– 甲肝,乙肝,丙肝
• 血液科检测
– 贫血检查:
Ferritin,Vit B12,Folic acid
Cortisol
• 妇产科检查
– FSH,LH,HCG,ProlactinE2,E3,Testo,Prog,SHBG
• 肿瘤科检查
– AFP,CEA,PSA,hTG,β-2 Micro,NSE,PAP,PSA(Free/Total),PSA EQM, CA-50,CA-125,CA-199,CA-153*,CA-724*,CY-211*
1.2 检测单元
• 光敏二极管: 检测范围230nm-950nm,用于吸光度的检测
• 光电倍增管(PTM): 检测范围230nm-850nm,用于化学 发光,荧光和时间分辨荧光的检测。
• 超敏PTM(未配):用于极敏感的化学发光检测和HTS Alpha Screen。
1.3 反射模块和滤光片
从软件 中可以 看到机 器上安 装的滤 光片和 反射模 块
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• 极敏感化学发光检测装置(超敏PTM):可做敏 感度非常高的化学发光检测
• 激光器:做Alpha Screen检测的必须条件 • 额外激光器: 增强的时间荧光分辨检测, 包LANCE
Cortisol
• 妇产科检查
– FSH,LH,HCG,ProlactinE2,E3,Testo,Prog,SHBG
• 肿瘤科检查
– AFP,CEA,PSA,hTG,β-2 Micro,NSE,PAP,PSA(Free/Total),PSA EQM, CA-50,CA-125,CA-199,CA-153*,CA-724*,CY-211*
1.2 检测单元
• 光敏二极管: 检测范围230nm-950nm,用于吸光度的检测
• 光电倍增管(PTM): 检测范围230nm-850nm,用于化学 发光,荧光和时间分辨荧光的检测。
• 超敏PTM(未配):用于极敏感的化学发光检测和HTS Alpha Screen。
1.3 反射模块和滤光片
从软件 中可以 看到机 器上安 装的滤 光片和 反射模 块
4.目前待解决的问题
• 扩展所能进行的检测项目,深入对于新方法的研究应用 • 如需完善检测功能需要选配相应的滤光片和反射模块 • 具体实验方案的建立实施需要一定的实践经验,并根据所
需进行的检测对设置进行调整 • 报告格式中的内容不能完全自行设置,可能需要联系工程
师解决
应用
• 蛋白质定量分析 • 酶活性的检测 • 基因分析 • 蛋白质相互作用研究
时间分辨荧光用于临床和科研检测的试剂种类
• 内分泌科检查
– 甲状腺系列:
TSH,Ultra TSH,T3,T4,FT3,FT4,TBG,TG
– 糖尿病系列:
Inห้องสมุดไป่ตู้ulin, C-Peptie
– 生长激素类:
hGH
– 其他:
• 定义:以镧系元素作为标记物所建立的免疫测定技术。
• 时间分辨荧光免疫原理图:
原理
• 用三价稀土离子及其螯合物作为示踪物,代替荧光物质、 同位素、酶和化学发光物质,标记抗原、抗体、激素、核 酸探针等物质。
• 当免疫反应发生后,根据稀土离子螯合物的荧光光谱的特 点 (特异性强、荧光光谱的Stokes位移、寿命长),用时 间分辨荧光分析仪,测定免疫反应最后产物的荧光强度。
• ( 2 ) 激发光谱带较宽,可以增加激发能,提高灵敏度。
• ( 3 ) 发射光谱带很窄,5 0 %发射谱带约10nm,利用滤光 片,只允许峰值波长± 5 n m谱段通过供测量,在如此窄 的谱段内,非特异荧光很少,可有效降低本底荧光,且能 量损失也不大。
• ( 4 ) 镧系离子螯合物的荧光寿命很长,约 1 m s 。在时间 分辨荧光仪上测量时,脉冲光源激发后,可适当延迟一段 时间,待其他短半衰期( 1 ~ 1 0 n s ) 的非特异荧光完全 衰变后再测量,从而极大地降低了本底荧光,实现了时间 分辨,大大提高了检测灵敏度。
FI
FITC measurement
FITC 485
FITC 535
/
FITC/general
DELFIA-TRF
Eropium
UV(TRF) 340
Europium 615
/
LANCE/ DELFIA
LANCE-TRF
homogeneous TRF
UV(TRF) 320
APC 665
Cy5 620
• (5) 镧系离子由激发态跃迁到基态时发射荧光,在测量 时问内可反复激发镧系离子,相当于大大提高了标记比活 性。
• (6)此外,TRFA技术的分析动态范围宽,可达 4 ~ 5 个 数量级标记物制备简单,稳定性好,有效使用时间长,不 受半衰期影响;标记蛋白质时反应条件温和,蛋白质活性 受损少;测量快速,易于自动化。
• 遗传科检查
– 产前筛查:
hAFP/ HCG ,PAPPA
– 新生儿筛查:
Neo-TSH,Neo-T4,Neo-IRT,Neo-17a-OH Prog,PKU
– 核酸探针及基因杂交检测,多标记定量PCR检测。
• 肝炎系列
– 甲肝,乙肝,丙肝
• 血液科检测
– 贫血检查:
Ferritin,Vit B12,Folic acid
通用反射模块:均可使用 紫外反射模块(UV mirror module): 能获得更好的检测限 双色反射模块:最优化的用于不同螯合物的检测
DELFIA-TRF的设置方案
LANCE-TRF的设置方案
2.4 荧光偏振检测
• 需要两次检测 • 光源:闪光灯 • 滤光片:激发光需要经过用于荧光偏振的滤光片
• 根据荧光强度和相对荧光强度比值,判断反应体系中分析 物的浓度,达到定量分析的目的。
T R F A技术的特点:来自镧系元素螯合物的固有特点
• ( 1 ) 激发光与发射光之间的 stokes 位移大,易利用干涉 滤光片进行波长分辨,前者的散射光对后者的干扰可以基 本排除。
利用镧系元素光谱特点,将 发射荧光与激发荧光分辨开 来,实现零本底的又一保障
发射荧光与激发荧光分离
零背景、高特异性
解离-增 荧光性大大提高 强 稳定的荧光螯合物
原子标记 标记位点多,可达20个 对标记物结构及活性影响小 无衰变 受环境影响小
多标记 单,双,三,四标记
线性范围更宽 重复性更好
高稳定性,高精确度 试剂保质期至少一年 标准曲线保留时间长 同一批次只需两点定 标
同一试剂盒可同时测 多个项目
– 白血病:
免疫细胞分型等
• 细胞学检查
– 细胞毒试验等多种检测项目,细胞质及组织化学分析等多种检测项目
– 酶类检测及细胞受体检测(包括MHC,HLA等多种检测)
• 科研工具
– 单标记检测,双标记检测,三标记检测,四标记检测
DELFIA技术为临床检测带来的先进性
技术
特点
检验先进性
时间分辨 特异性荧光与非特异性荧光 光谱分辨 分离
PE多标酶标仪
定量检测发光或吸光标记的应用于研究和药 物发现的完整平台。
主要内容
• 1. PE多标记分析仪光学系统 — —实现各种功能应用的基础
• 2. PE多标记分析仪的主要功能
• 3. 新的免疫分析方法
• 4. 待解决的问题
1. PE多标记分析仪光学系统
光学系统简图
光电倍增管 检测单元
反射模块 (顶部)
和均相时间荧光分辨(HTRF) • 带有两个泵的加样器及腔室温度控制器
2. PE多标记分析仪的主要功能
主要功能
2.1 吸光度检测 2.2 化学发光检测 2.3 荧光强度检测 2.4 荧光偏振检测 2.5 时间分辨荧光检测 *以红色表示实现该功能需要购买的配件
2.1 吸光度检测:
(1)光源:通用光源-闪光灯 (2)光学配件:相应检测波长的滤光片或单色器
发射光:分别需要S和P偏振的滤光片 • 反射模块:荧光偏振专用
设置方案
2.5 化学发光
(1)不使用光源和激发光相应滤光片 (2)发射光滤光片:化学发光专用滤光片 (3)反射模块:化学发光反射模块
设置方案
2.6 总结:实现新功能所需的光学配件
检测类别 检测名称 激发光滤片 发射光滤片1 发射光滤片2 反射模块
• (7)LANCE技术:通过使用供体和受体荧光团标记,TRFRET 检测将时间分辨 (TR) 和荧光共振能量转移 (FRET) 原理的优势结合到了一起。当两个荧光团标记相互趋近时, 能量将从供体转移到受体。因此,当相互极为靠近时(~ 9 nm 或更少),供体荧光的激发将导致受体荧光的发射。 受体荧光的发光级别与供体受体络合物形成的程度成比例。
LANCE/ DELFIA Dual
FP
FP Fluorescein Dual
FITC FP 480
FITC FP P-pol 535
FITC FP S-pol 535
FITC FP Dual
注:红色为本机没有的
3.新的免疫分析方法介绍
Time-resolved fluorescence (时间分辨荧光)
样品
光源 滤光片
光路选择器
反射模块 (底部)
光敏二极管 检测单元
核心部件:
1.1 光源 1.2 检测单元 1.3 反射模块和滤光片
1.1光源
通用光源:闪光灯,一个紫外的氙闪光管,光谱范围为 230nm-1100nm.
特殊光源:337nm的氮激光发射器,作为可选的第二光源 应用于均一时间分辨荧光检测中。(本机型没有)
2.2 荧光强度检测
(1)光源:通用光源-闪光灯
(2)光学配件:相应荧光标记的激发光和发射光滤光片或者单 色器(带有遮光滤光片)
(3) 二色镜:发射光的信号可比普通反射镜增强3倍 (可选)
设置方案
2.3 时间分辨荧光检测(TRF) (240-850 nm)
(1) 光源:通用光源-闪光灯 (2) 相应激发光和发射光的滤光片 (3) 反射模块:
反射模块
作用:引导光到达检测标本,并收集来自检测标本的光线至 检测器。 分类: 1.通用反射模块:
特点:反射50%的光(所有波长),通过50%的光。 2. 二色镜(可选):
特点:反射低于一定波长的光,通过高于该波长的光。可 确保用合适的激发光波长对检测样品进行激发,和在正确的 波长下进行检测。
1.4 可以选配的硬件(暂不需要)