果蝇杂交实验实验报告

果蝇杂交实验【实验目的】

通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。

【实验原理】

1. 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用

以

果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下：

雌蝇→减数分裂→卵

受精

雄蝇→减数分裂→精子

羽化（第八天）

（可活26～33天）产第一批卵

蛹（第四天）

第二次蜕皮第一批卵孵化

（第二天）（第零天）

第一次蜕皮幼虫

（第一天）

果蝇的生活周期和各发育阶段的经过时间

果蝇的性别及突变性状的鉴别：

果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。

色体上，直刚毛对焦刚毛为完全显性。用具有这两对相对性状的纯合亲本杂交，其性状的遗传行为应符合自由组合定律。

4. 生物某些性状的遗传常与性别联系在一起，这种现象称为伴性遗传（sex-linked inheritance），这是由于支配某些性状的基因位于性染色体上。果蝇属XY型生物，共有四对染色体，第一对为性染色体，其余三对为常染色体。雌果蝇的性染色体构型为XX，、雄果蝇为XY。控制果蝇眼色的基因位于X染色体上，在Y染色体则没有与之相应的等位基因。将红眼（+）果蝇和白眼（w）果蝇杂交，其后代眼色的表现与性别有关。而且，正反交的结果不同。

5. 不完全连锁基因在形成配子时，随同源染色体非姊妹染色体单体之间发生交换而交

换，产生一定频度的重组型配子，在子代中表现一定比例的重组性状，通过观察和统计测交子代各种表型的个体数，可估算出连锁基因间的交换率，由此确定基因在染色体上的相对位置，绘制出连锁遗传图。已知果蝇（Drosophila melanogaster）的红眼（+）对白眼（w）是显性，直刚毛（+）对焦刚毛（sn）是显性，长翅（+）对小型翅（m）是显性，控制这三对相对性状的基因都位于X染色体上，若将白眼（w）、焦刚毛（sn）、小型翅（m）三隐性突变体雌蝇（X w sn m X w sn m）与红眼（+）、直刚毛（+）、长翅（+）野生型雄蝇（X+++Y）杂交，则F1可产生三杂合体雌蝇（X w sn m X+++）和三隐性雄蝇（X w sn m Y）。由于Y染色体上不携带相应的等位基因，因而表现出X染色体上三个隐性基因所控制的性状，相当于一个三隐性纯合体。用F1代杂交（相当于测交）,F2代表现出的8种表型及数目与F1雌蝇产生的8种配子及数目一致，通过观察和统计F2代（相当于测交子代）8种表型的个体数，就可估

，麻醉

2～3

。

的大量精子，雌蝇一次交配所得的精子，足够它多次排出的卵受精，因此在做杂交试验时，雌蝇必须选用处女蝇（没有交配过的雌蝇）。雌蝇孵出后12小时内不会交配，这个时间内把果蝇全部倒出，分出雌雄蝇，单独饲养，这时收集的雌蝇是处女蝇。杂交时把所需品系的雄蝇直接放到处女蝇培养瓶中，贴好标签，注明两亲本的基因型及交配日期，进行培养。7～8天后倒掉亲本（一定要倒干净，以免亲代和子代混淆），待F1成蝇羽化后开始计算，观察性状。可靠的计数及观察是培养开始的20天以内（再晚F2也可能有了）。若须继续实验，观察F2，可在F1内挑出雌雄数对，另外培养，因为这次是用F1作亲本，进行个体间互交，所以这时不是处女蝇也可以。但如要把F1雌蝇与另一品系雄蝇杂交时，还要严格地选取处女蝇，方法同上。

3. 原种培养

在作新的留种培养时，应事先检查一下果蝇有没有混杂，以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶5～10对，移入新瓶时，须将培养瓶横卧，然后用毛笔将麻醉的果蝇从白瓷板上轻轻扫入，待果蝇醒过来后再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在饲料上。原种每2～4周换一次培养基（依温度而定，10～15℃约4周换一次，20～25℃约二周换一次）。每一原种培养至少保留两套，培养瓶的标签上要写明突变名称，培养日期等。作原种培养温度可控制在10～15℃，培养时避免日光直射。

果蝇在适宜条件下会产子代，在肉眼能看到幼虫时就可把亲本倒掉，几天以后，新的成蝇便产生。待成蝇有了足够保种的数量后，要调换培养瓶，作为下一代的亲本，继续培

再将培养瓶直立，贴上标签：

将杂交瓶放在20℃～25℃恒温箱内培养。 （4）培养7～8d ，倒掉杂交亲本（倒掉的果蝇最好处死）。 （5）再过4～5d ，F 1代成蝇出现，观察F 1代性状是否和预期结果一致。 （6）收集6～10对F 1代果蝇放入一新培养瓶，在20℃～25℃恒温箱内继续培养，以便观察F 2代（正反交作相同处理）。

（7）继续培养7～8d 后，移去F 1代。

（8）再4～5d ，F 2代成蝇出现，开始观察并统计F 2代的性状表现类型及数目。 【结果统计分析】

反交

♀bb X +++ X +++ ? BBX w-m-sn

Y ♂ 日期： 姓名：

正交 ♀BBX w-m-sn X w-m-sn ?bbX +++Y ♂ 日期： 姓名：

（二）统计分析

1.分离定律

图谱分析

P: BB（灰体）×bb（黑体）F1: Bb(灰体)

自交F2：BB Bb bb

灰体黑体

理论比值： 3 ： 1

实际正交数量：7803 2693

比值： 2.90 ： 1

反交数量：7598 2701

比值： 2.81 ： 1

2

灰体直刚毛黑体直刚毛灰体焦刚毛黑体焦刚毛理论比值：9 ： 3 ： 3 ： 1

实际数量：5807 2003 1791 698 比值：8.32 ： 2.87 ： 2.57 ： 1

2