常见血液病的血细胞散点图分析
血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义
Baso保持原状
嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液, Baso内的蛋白为酸性蛋白,因此在该
溶液中受到保护,而其他有核细胞则被 溶解成裸核
纵坐标:前向散射光(FSC) 反 映细胞大小
横坐标:侧向散射光(SSC) 反映细胞内部复杂程度
血细胞分析原理及白细胞散点图 临床意义
嗜碱 其它有 核细胞
10
NRBC通道分析原理
血细胞分析原理及白细胞散点图 临床意义
主要原理
DIFF WBC/BASO NRBC
半导体激光
荧光染色(聚次甲基+噁嗪 )
FSC前向散射光:细胞大小 SSC侧向散射光:复杂程度(细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息) SFL侧向荧光:核酸含量(DNA 、RNA)
血细胞分析原理及白细胞散点图 临床意义
二、散点图案例分析
血细胞分析原理及白细胞散点图 临床意义
嗜碱性粒细胞增多症
在BASO散点图上,嗜碱区 域出现大量散点,另外
DIFF散点图上,中性区域
的左下方也为嗜碱区域, 也 出现了大量的散点。
BASO%:仪器13.4%
镜检13.5%
血细胞分析原理及白细胞散点图 临床意义
AML-M1(例1)
IMI散点图也显示大量原始细胞和幼稚粒 细胞。
NRBC散点图:红色散点 镜检发现3%的原始细胞,91%的早幼粒
细胞、3.5%的中幼粒细胞,0.5%晚幼 粒细胞。
血细胞分析原理及白细胞散点图 临床意义
AML-M4
DIFF散点图,白细胞区域出现大量 灰白色散点,完全融合,不分类。 大
致分成两群,一群为原始细胞, 一 群为幼稚粒细胞。 IMI散点图也显示大量原始细胞和幼 稚粒细胞。
红色散点,仪器报警提示有大量 原 始细胞和幼稚粒细胞。
常见血液病的血细胞散点图分析只是课件
异常/异性淋巴细胞-ALY ▪ 人工镜检结果
缺铁性贫血-IDA
缺铁性贫血-IDA
β-地中海贫血
维生素B12缺乏症
寄生虫感染
粒细胞缺乏症
粒细胞缺乏症
慢性粒细胞白血病-CML
慢性粒细胞白血病-CML
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
慢性淋巴细胞白血病-CLL
慢性淋巴细胞白血病-CLL
急性淋巴细胞白血病-ALL
急性淋巴细胞白血病-ALL
急性原始粒细胞白血病-M2
急性原始粒细胞白血病-M2
急性单核细胞白血病-M5
急性单核细胞白血病-M5
仔细注意血液分析仪的散点图,有利于我 们对常见血液病的初步判断,但是进一步确 诊还是要看血液室的血涂片和骨髓涂片的结 果,以及结合临床症状的分析。
Thank You! 谢谢!
二 常见血液病的散点图分析
以BS5500为例
单核细胞区 MON
异型淋巴细 胞区ALY
淋巴细胞区 LYM
中性粒+嗜碱
巨大未成熟
粒细胞区
细胞区LIC
NEU+BAS
低
角
度
散
射
信
号
体 积 大 小
(
中性粒核左 移细胞区LEF
SHIF
嗜酸性粒细 胞区EOS
高角度散射信号(内部复杂程度)
嗜碱性粒细 胞区BAS
3.光散射法血小板检测原理 Mie 理 论 ( Mie theory of light scatter for
homogeneous spheres):当球形化的血小板 一个一个通过激光照射区时: 高 角 度 ( 5° ~ 15° ) 光 散 射 : 检 测 细 胞 折 射 指 数 (reactive index,RI); 低角度(2°~3°)光散射:测量细胞大小。 大血小板与各种碎片如果体积相似,但由于内容物不 同,RI相差较大,故能鉴别。
血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义
NRBC散点图:红色散点 镜检发现有90%的原始细胞、3% 的早
幼粒细胞哦、1%中幼粒细胞。
流式细胞仪检测结果显示细胞表 面标志
CD13和CD33阳性,为髓 细胞性白血
病。
第十六页,编辑于星期日:十三点 四十分。
AML-M3
DIFF散点图显示白细胞完全融合且不分 类。
第二十五页,编辑于星期日:十三点 四十分。
疟原虫感染的散点图(一)
散点图特点:嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢,间距小。
原因:疟原虫裂殖体破裂,疟色素从感染的血细胞中释放出来,继而被白细胞吞噬,吞噬 了疟色素的白细胞侧向散射光强度改变,显示在散点图靠近中性粒细胞一侧,但也被仪器 以Eo特有的红色标示出来。
其他1 492份散点图基本正常。因为是真性EO增多,表现在散点图上是EO 数量增加, 为正常分类散点图(图3)。
戴燕,万海英等. XE-2100血细胞分析仪嗜酸粒细胞异常散点图报警筛选疟原虫感染的研究.中华检验医学杂志,2008,31
(7):763-766
第二十七页,编辑于星期日:十三点 四十分。
谢谢
急性T淋巴细胞白血病
DIFF散点图淋巴与单核完 全 融合,IMI散点图几乎没
有红色散点,仪器提示异 常淋 巴/原始淋巴细胞。
镜检发现有59.5%的异常淋 巴细胞。
本例被诊为ATL。
第二十三页,编辑于星期日:十三点 四十分。
CLL
淋巴与单核区域分界不 清,仪器提示淋巴细胞 增多/原始淋巴。
第三页,编辑于星期日:十三点 四十分。
主要原理
DIFF
WBC/BASO
NRBC
半导体激光 荧光染色(聚次甲基+噁嗪 )
血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义
异型淋 巴细胞 异型淋巴细胞增
高与 多种病毒感 染及变态 反应有 关。
常见有:传染性 单核 细胞增多症、 病毒性 肺炎、病 毒性肝炎、 肾综 合征出血热等病 毒性感染。
特点:胞体增大, 胞 质增多、嗜碱 性增强
,细胞核母细胞化, 荧光强度最强。
疟原虫感染的散点图(一 )
散点图特点:嗜酸性粒细胞群向中性粒细胞靠拢,间距小。 原因:疟原虫裂殖体破裂,疟色素从感染的血细胞中释放出来,继而被白细胞吞噬,吞
PL
T 在WBC膜上打 4DS 孔 对核酸染色
纵坐标:侧向荧光(SFL) 反映核酸含量 横坐标:侧向散射光(SSC) 反映细胞内部复杂程度
溶血素中加入有机酸,与嗜酸粒细胞内的碱 性蛋白粘附,使Eo颗粒的复杂程度增加,在 SSC显示复杂程度是最大的。
化学粘附
嗜酸粒细 胞
大分子有机 酸
大分子有机酸与嗜 酸 粒细胞中的碱 性颗粒 发生化学 粘附
致分成两群,一群为原始细胞, 一群为幼稚粒细胞。
IMI散点图也显示大量原始细胞和 幼 稚粒细胞。
AML-
M5b DIFF散点图淋巴与单核
融为一体,不分类,
IMI 散点图显示大量原始细胞
和幼稚粒细胞。
镜检发现59%的原始细 胞,
0.5%的早幼粒细胞,单 核细胞24.5%。
慢粒危象
DIFF散点图OTHER区域出现大 量散点,中性粒细胞上方也有 少 量散点,IMI散点图也出现 大量
RNA/DNA荧光 染色原理
成熟白细胞:高荧光特 性
网血织小红板细:胞:微弱弱荧荧光光特特 性成熟RBC 性 无荧光特
:
性 极高荧光
原始细胞 :
幼稚细胞 :
特性 极高荧 光特性
血细胞直方图和散点图的临床意义
网织红细胞参数
网织红细胞绝对值计数更能反映骨髓增生,它是网织红细胞百分数与红细胞计数的乘积,参考值为(24~84)×109/L。
溶血时,由于大量网织红细胞进入血循环,网织红细胞可增至6%~8%以上,急性溶血时,可高达20%左右,严重者可在50%以上,绝对值常超过100× 109/L。
肾衰竭
WBC 3.9 MCV 108.7
RBC 2.90 MCH 36.9
HGB 10.7 MCHC 34.0
HCT 31.5 RDW 29.7 R
高脂血症
WBC 7.4 MCV 78.1
HGB 15.7 MCHC 34.6
血细胞直方图和散点图的临床意义
一、什么是直方图?
直方图是通过血细胞计数仪测量而提供的血细胞体积分布图形,这些图形可以表示出细胞群体分布情况。
库尔特原理
1
检测区域
点击此处添加正文
2
红细胞
点击此处添加正文
3
红细胞通过小孔
点击此处添加正文
4
Oscilloscope
点击此处添加正文
5
示波镜
点击此处添加正文
VCS检测
V 是以库尔特原理检测细胞的体积 获得的是完全的细胞体积
VCS - DC
01
02
体积检测(V)
2
1
C 运用高频探针检测细胞的内部结构 获得细胞核复杂程度的信息 区分分叶核和非分叶核细胞
VCS - RF
细胞内部结构检测(C)
VCS - Laser
S 是运用一个宽角度的散射范围(10 -70)来测量细胞的颗粒特性 更好地根据颗粒特性区分淋巴细胞、中性粒细胞和嗜酸细胞
血液分析仪散点图和直方图解读20160813
1分钟
5分钟
10分钟
直方图粗糙 血小板聚集
直方图光滑
直方图光滑
标本混匀不充分会对结果有什么影响
轻轻混匀:一手抓 住试管上部,通过 碗关节摇动试管混 匀标本。混匀不充 分,抗凝效果不好
轻轻地混匀,散点图杂乱,不分类
用力混匀:左手抓 住试管上部,右手 食指弹试管底部, 让标本产生上下翻 滚的效果
用力混匀,散点图正常
PLT
血小板增加
PLT
PLT < 60x109/L PLT > 600x109/L
血小板聚集 血小板凝集
DIFF散射图
从DIFF散射图上来判断
PDW,PL(%),PU(%),PMF 对分析参数进行代数计算和数
V,PLT,PLCR,MPV,PU 量比较
血小板直方图异常? 触发规则:
P-LCR > 45% & MPV > 13fl PL 12 fl
•问题
有用户问:为什么有些标本在XS上面不能分类,而在一些 三分类上面能分类呢?
一些三分类白细胞直方图只有 两个峰,在中间用两个界标硬 分割出一块区域作为中间细胞, 这种三分类不能敏感筛选出异 常标本,容易漏检
因为XS是荧光五分类,对于异 常标本更加敏感,对于异常标 本的筛选能力更强,有些异常 标本里面异常细胞,导致散点 图异常分布,仪器判断该标本 为异常标本,此外仪器会有异 常细胞报警,不分类是为了要 求用户必须去镜检确认,从而 避免异常标本的漏检
・
原理: SLS-血红蛋白法
HGB通道
血红蛋白(四聚体)
亲水基
疏水基
珠蛋白
亚铁血红素
(月桂基硫酸钠)
珠蛋白的
结构改变
(变性)
一分钟看懂血常规散点图和直方图!
一分钟看懂血常规散点图和直方图!
转自:基层检验网
转载已获授权
现在很多五分类仪器的DIFF(白细胞分类计数)中都有WBC散点图,同时RBC计数通道有红细胞和血板直方图,这些图里面包含的信息量很大,对结果的解读有很大帮助,为此你又对它了解多少?本文以sysmex XT-1800i为例进行讲解。
散点图怎么看
(项目所用方法及通道)
运用流式细胞计数法和其它生物粒子的物理和化学性质进行检测。
血液标本经吸取稀释后,进行化学染色,血细胞在鞘流内的试剂包裹下排成一行通过检测小孔,并有半导体激光束照射到血细胞上。
当血细胞经过激光通路时,光束在每个血细胞的不同方向上产生光散射,通过检测散射光,将光信号转化为电脉冲,可以得到有关细胞体积大小和材质的信息,进而描画出二维的散点图。
当光照射到经过荧光染色的血细胞等的荧光材料上时,就会产生比入射光波长更长的光。
随着染液浓度的增加,荧光强度也随之增长。
通过测量荧光强度,可以得到有关血细胞染色程度的信息。
通过上图,我们可以看出中性、单核、淋巴、嗜酸、嗜碱等细胞的分布位置与强度。
通过上图,我们可以看到异型淋巴和幼稚粒细胞所在位置
上图反应有核红细胞所在的区域红细胞直方图
正常红细胞直方图
常见异常红细胞直方图
血小板直方图
仪器在2-30fl范围内分析血小板。
正常血小板直方图呈左偏态分布,血小板主要集中在2-15fl内。
仪器使用3条鉴别线来进行血小板粒度解析,分别为2-6fl和12-30fl之间自动决定的浮动鉴别线(LD、UD),以及固定鉴别线12fl。
【小结】常见血细胞分析仪的检测原理与直方图散点图
【小结】常见血细胞分析仪的检测原理与直方图散点图小编将以国内占有率排在前两位的希森美康(SYSMEX)和迈瑞(MINDRAY)的仪器为例来进行说明,这两个品牌的血细胞分析仪加起来占据了国内市场的一大半。
考虑到现在五分群仪器已经十分普及,本文不涉及白细胞直方图的有关内容。
血细胞分析仪检验图形:根据检测原理不同,分为直方图和散射图两种细胞分布图形。
【第一部分】血细胞直方图(Histogram)希森美康/迈瑞血细胞分析仪常规检测红细胞/血小板的技术为电阻抗原理,又称库尔特原理):如上图所示,悬浮在电解质溶液中的血细胞相对于电解质溶液是非导电的颗粒,当体积不同的血细胞(或类似颗粒)通过计数小孔时,可引起小孔内外电流或电压的变化,形成与血细胞数量相当、体积大小相应的脉冲电压,从而间接区分出血细胞群,并分别进行计数。
血细胞直方图,其横坐标为血细胞体积大小,纵坐标为不同体积细胞的相对频率,是表示细胞群体分布情况的统计图形。
它可以显示出某一特定细胞群的平均细胞容积、细胞分布情况及有无明显异常细胞群的存在。
直方图观察的内容:①峰的位置,反映主细胞群的位置有无异常。
②峰的高低,大致反映主细胞群数量的多少。
③峰底的宽度,反映细胞群容积大小的不均一性或离散程度大小,如RDW、PDW等。
④有无异常峰出现,和正常直方图相比有异常峰出现,多提示血液中有异常细胞群或干扰因素存在。
⑤峰的起始处或结尾处有无异常,若有多提示有干扰因素。
(一)红细胞直方图正常红细胞直方图是一条近似正态分布的单峰曲线,通常位于36~360 fl 范围内,横坐标表示RBC体积,纵坐标表示不同体积红细胞出现的频率。
正常红细胞集中在50~200 fl 范围内,可见两个细胞群体:一个是红细胞主群,从50~125 fl ,为一个两侧基本对称、较狭窄,呈现倒扣钟状的正态分布曲线;另一群是大细胞群,位于主群右侧不与X 轴重合拖尾部分,分布在125 fl ~200 fl 区域,又称“足趾部”,是一些大红细胞、网织红细胞、红细胞的二聚体、多聚体及白细胞的混合物。
血细胞分析原理及白细胞散点图临床意义
整理版
9
出现有核红时
红系增生活跃时,外周血易见较多的NRBC,在WBC 计数时不被溶解,常被计入淋巴细胞中。
WBC的修正
整理版
10
WBC增多对RBC 计数的干扰
RBC:阻抗法RBC值含WBC WBC>100*109/L时,需校正红系统参数 贫血越严重,对RBC影响越大
整理版
11
血红蛋白 光电比通色道法
) DIFF散点图淋巴与单核区域融
合,提示出现原始细胞 报警提示异常淋巴细胞/原始细
胞,异淋? 镜检:47%原始淋巴细胞,未见
异淋。血片POX(-)。 2018.4.MDS急淋变
整理版
22
急性T淋巴细胞 白血病 DIFF散点图淋巴与单核完
全融合,IMI散点图几乎没 有红色散点,仪器提示异 常
整理版
3
主要 原理
DIFF WBC/BASO NRBC
半导体激光
荧光染色(聚次甲基+噁嗪 )
FSC前向散射光:细胞大小 SSC侧向散射光:复杂程度(细胞的颗粒 和细胞核等内含物的信息) SFL侧向荧光:核酸含量(DNA 、RNA)
整理版
4
DIFF通道分 析原理
4DL(阴离子表面活性剂)
整理版
7
WBC/BASO 通道分 析原理
S–FB溶血剂 (酸性,低渗)
溶解RBC
PLT
除嗜碱性粒细胞以外的白细胞处理成 裸核形态
Baso保持原状
嗜碱粒细胞溶血素为酸性低渗溶液, Baso内的蛋白为酸性蛋白,因此在该
溶液中受到保护,而其他有核细胞则被 溶解成裸核
纵坐标:前向散射光(FSC) 反 映细胞大小
整理版
15
常见血液病的散点图分析
2 光散射法红细胞体积和HGB检测原理
低角度(2°-3°)光散射:测量红细胞体积 高角度(5°-15°)光散射:测定红细胞血红蛋 白浓度 得到MCV、MCH、MCHC测定值,计算出RDW、红 细 胞 血 红 蛋 白 分 布 宽 度 ( red blood cell hemoglobin distribution width,HDW)
中性粒核左 移细胞区LEF SHIF
嗜酸性粒细 胞区EOS
嗜碱性粒细 胞区BAS
正常样本
正常样本
老化样本
中性粒细胞增多
中性粒细胞增多
淋巴细胞增多
淋巴细胞增多
嗜酸性粒细胞增加
嗜酸性粒细胞增加
嗜碱性粒细胞增加
嗜碱性粒细胞增加
血小板增加
血小板增加
核左移,未成熟细胞-LIC
核左移,未成熟细胞-LIC
3.光散射法血小板检测原理
Mie 理 论 ( Mie theory of light scatter for
homogeneous spheres):当球形化的血小板一个
一个通过激光照射区时: 高角度(5° ~15°)光散射:检测细胞折射指数 (reactive index,RI); 低角度(2°~3°)光散射:测量细胞大小。
常见血液病的散点图分析
急诊化验室 李林
一 联合检测血液分析仪原理复习
1 光散射与细胞化学染色法白细胞分类计数
(SYSMEX,迈瑞)
1)过氧化物酶检测通道(DIFF通道):
过氧化物酶活性;
嗜酸性粒细胞阳性最强,嗜中性粒细胞强阳性 单核细胞弱阳性
淋巴细胞、嗜碱粒细胞无过氧化物酶活性。
样本+溶血剂→+过氧化酶(MPO)底物及现色剂 → 光散射 →不同颜色的散点图
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
精品课件
一 联合检测血液分析仪原理复习
1 光散射与细胞化学染色法白细胞分类计数 (SYSMEX,迈瑞)
1)过氧化物酶检测通道(DIFF通道): 过氧化物酶活性; 嗜酸性粒细胞阳性最强,嗜中性粒细胞强阳性 单核细胞弱阳性 淋巴细胞、嗜碱粒细胞无过氧化物酶活性。 样本+溶血剂→+过氧化酶(MPO)底物及现色剂 →
精品课件
2 光散射法红细胞体积和HGB检测原理 低角度(2°-3°)光散射:测量红细胞体积 高角度(5°-15°)光散射:测定红细胞血红蛋
白浓度 得到MCV、MCH、MCHC测定值,计算出RDW、红
细 胞 血 红 蛋 白 分 布 宽 度 ( red blood cell hemoglobin distribution width,HDW)
嗜碱性粒细 胞区BAS
正常样本
精品课件
正常样本
精品课件
老化样本
精品课件
中性粒细胞增多
精品课件
中性粒细胞增多
精品课件
淋巴细胞增多
精品课件
淋巴细胞增多
精品课件
嗜酸性粒细胞增加
精品课件
嗜酸性粒细胞增加
精品课件
嗜碱性粒细胞增加
精品课件
嗜碱性粒细胞增加
精品课件
血小板增加
精品课件
血小板增加
Thank You! 谢谢!
精品课件
精品课件
3.光散射法血小板检测原理 Mie 理 论 ( Mie theory of light scatter for
homogeneous spheres):当球形化的血小板一个 一个通过激光照射区时: 高角度(5° ~15°)光散射:检测细胞折射指数 (reactive index,RI); 低角度(2°~3°)光散射:测量细胞大小。 大血小板与各种碎片如果体积相似,但由于内容物不 同,RI相差较大,故能鉴别。
光散射 →不同颜色的散点图
精品课件
散射图定位:X轴为吸光率(酶反应强度)Y轴为光散 射(细胞大小)显示检测结果。 鞘流技术使细胞单个通过检测区,从而识别和计算 细胞个数。BS5800和SYSMEX在这通道计算白细胞总 数,BS5300有专门的WBC通道,利用阻抗法计算总数
2)嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道(WBC/BASO通道) 溶血剂Strmatolyzer-BA将除嗜碱细胞以外的细胞溶 解,光散射 得到WBC/BASO散点图
精品课件
二 常见血液病的散点图分析
以BS5500为例
精品课件
单核细胞区 MON
异型淋巴细 胞区ALY
淋巴细胞区 LYM
巨大未成熟 细胞区LIC
中性粒+嗜碱 粒细胞区 NEU+BAS
低
角
度
散
射
信
号
(
体 积 大 小
中性粒核左 移细胞区 LEF SHIF
嗜酸性粒细 胞区EOS
精品课件
高角度散射信号(内部复杂程度)
精品课件
急性原始粒细胞白血病-M2
精品课件
急性原始粒细胞白血病-M2
精品课件
急性单核细胞白血病-M5
精品课件
急性单核细胞白血病-M5
精品课件
仔细注意血液分析仪的散点图,有利于 我们对常见血液病的初步判断,但是进一步 确诊还是要看血液室的血涂片和骨髓涂片的 结果,以及结合临床症状的分析。
精品课件
精品课件
维生素B12缺乏症
精品课件
精品课件
寄生虫感染
精品课件
粒细胞缺乏症
精品课件
粒细胞缺乏症
精品课件
慢性粒细胞白血病-CML
精品课件
慢性粒细胞白血病-CML
精品课件
慢性淋巴细胞白血病-CLL
精品课件
慢性淋巴细胞白血病-CLL
精品课件
急性淋巴细胞白血病-ALL
精品课件
急性淋巴细胞白血病-ALL
精品课件
核左移,未成熟细胞-LIC
精品课件
核左移,未成熟细胞-LIC
精品课件
核左移,未成熟(有核红?)
精品课件
核左移,未成熟(有核红?)
精品课件
异常/异性淋巴细胞-ALY
精品课件
异常/异性淋巴细胞-ALY ▪ 人工镜课件
缺铁性贫血-IDA
精品课件
β-地中海贫血