选修三_专题一_基因工程课件

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人教版高中生物选修3课件:专题1 基因工程 (共36张PPT)

人教版高中生物选修3课件:专题1 基因工程 (共36张PPT)
该方法是根据碱基互补配对原则, 把互补的双链DNA解开,把单链的DNA 小片段用同位素、荧光分子或化学发 光剂等进行标记,之后同被检测的DNA 中的同源互补序列杂交,从而检出所 要查明的DNA或基因。
目的基因的检测示意图
检测目的基因是否转录出了mRNA
过程:用上述探针和转基因生物的 mRNA杂交,若出现杂交带,表明目 的基因转录出了mRNA.
为具有新性状的动物
Ca2+
微生 物细

处理 增大 细胞 壁通
原核 细胞 或酵 母菌
透性
用Ca2+处理细胞→感受 态细胞→重组表达载体 DNA分子与感受态细胞 混合→感受态细胞吸收
4.目的 基因的 检测与 鉴定
1.3 应用
一、基因工程的应用、安全性和生物武器 1.基因工程的应用 (1)动物:提高生长速度从而提高产品产量; 改善畜产品品质;生产药物;器官移植供体等 (2)植物:抗虫植物、抗病植物和抗逆植物; 利用转基因改良植物的品质. (3)基因诊断:采用基因检测的方法来判断患 者是否出现了基因异常或携带病原体。 (4)基因治疗:指利用正常基因置换或弥补缺 陷基因的治疗方法.
中心法则
复 制
DNA 转录 RNA 翻译 蛋白质
逆转录
蛋白质工程与基因工程的比较
项目 蛋白质工程
基因工程
预期蛋白质功
能→设计蛋白 目的基因的获取
质结构→推测 →基因表达载体
区 过 氨基酸序列→ 的构建→将目的


推测脱氧核苷 基因导入受体细 酸序列→合成 胞→目的基因的
DNA→表达 检测与鉴定
出蛋白质
D.多次重复.
PCR技术扩增与DNA复制的比较
PCR技术
DNA复制

高中生物人教版选修3课件:专题1 基因工程

高中生物人教版选修3课件:专题1 基因工程
如何利用规律实现更好记忆呢?
-26-
专题整合
超级记忆法-记忆规律
第四个记忆周期是 1天 第五个记忆周期是 2天 第六个记忆周期是 4天 第七个记忆周期是 7天 第八个记忆周期是15天 这五个记忆周期属于长期记忆的范畴。 所以我们可以选择这样的时间进行记忆的巩固,可以记得更扎实。
如何利用规律实现更好记忆呢?
-11-
专题整合
什么是学习力-常见错误学习方式
案例式 学习
顺序式 学习
冲刺式 学习
-12-
专题整合
什么是学习力-高效学习必备习惯
积极 主动
以终 为始
分清 主次
不断 更新
-13-
高效学习模型
专题整合
高效学习模型-学习的完整过程
方向
资料
筛选
认知
-15-
专题整合
高效学习模型-学习的完整过程
消化
固化
-32-
专题整合
超级记忆法-记忆方法
TIP1:NPC代入,把自己想成其中的人物,会让自己的记忆过程更加有趣 (比如你穿越回去,成为了岳飞的母亲,你会在什么背景下怀着怎样的心情在 背上刺下“精忠报国”四个字); TIP2:越夸张越搞笑,越有助于刺激我们的大脑,帮助我们记忆,所以不妨在 编故事时,让自己脑洞大开,尝试夸张怪诞些~
优秀同龄人的陪伴 让你的青春少走弯路 -6-
专题整合
小案例—哪个是你
忙忙叨叨,起早贪黑, 上课认真,笔记认真, 小A 就是成绩不咋地……
好像天天在玩, 上课没事儿还调皮气老师, 笔记有时让人看不懂, 但一考试就挺好…… 小ents
1. 什么是学习力 2. 高效学习模型 3. 超级记忆法 4. 费曼学习法
-20-

人教版高中生物选修3专题一课题113基因工程的应用课件共39张PPT[可修改版ppt]

人教版高中生物选修3专题一课题113基因工程的应用课件共39张PPT[可修改版ppt]

胰岛素从猪、牛等动物的胰 腺中提取,100Kg胰腺只能提取 4-5g的胰岛素,其产量之低和价 格之高可想而知。
将合成的胰岛 素基因导入大肠杆 菌,每2000L培养液 就能产生100g胰岛 素!使其价格降低 了30%-50%!
用转基因的植物生产药物
转基因抗乙肝西红柿(中国),虽然不能治愈 乙肝,但一年只吃几个抗乙肝西红柿,就完全能 代替注射乙肝疫苗。抗乙肝西红柿属于转基因食 品,就是将乙肝疫苗植入西红柿内,经过多代繁 殖,使转入的基因稳定化。
注意事项: 要用同一种限制酶切取目的基因
和运载体,并用DNA连接酶连接。 1、常用的受体细胞: 大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植 物细胞等 2、常用微生物作受体细胞的原因:
微生物增殖快、代谢快、目的产物多
一般检测:标记基因是否表达
1、基因工程与作物育种
抗虫转基因植物
生长快、肉质好的转基因 乳汁中含有人生长激素的
甚至还可以吸收和转化污染物。
“金大米”
转基因草莓
有玫瑰花和柠檬的香味 转基因西红柿
转基因植物的安全性争论
• 支持派认为:如果转基因农业生物技术得 不到社会支持,这一研究将被扼杀,并且 强调,迄今为止并没有发现转基因食品危 害人体健康和环境的确切证据。
转基因生物有利的一面:
⑴改变传统的育种方式缩短育种时间。培育 出高产优质、抗病虫害、抗旱、抗盐碱,抗除 草剂等特性的作物新品种。
2、“基因针线”——DNA连接酶
连 GCATTACGAT接酶TAGCTATAATATCGCGGCTAATGCTATAAATTCGCGCGTAATAT
连接酶的作用:将脱氧核糖和磷酸交 替连接的DNA骨架
连接的部位: 的缺口“缝合”。 生成磷酸二酯键

人教版高二生物选修三专题一1.2《基因工程的基本操作程序》教学课件(共47张PPT)

人教版高二生物选修三专题一1.2《基因工程的基本操作程序》教学课件(共47张PPT)

预习导学
课堂讲义
课堂讲义
专题1 基因工程
4.PCR过程中,需要解旋酶吗?所需要的DNA聚合酶应具有 什么特点?
答案
PCR过程中,DNA双链解开是在高温下完成的,不
需要解旋酶;由于 PCR 过程温度较高,所以需要能耐高温 的DNA聚合酶。 5.什么样的基因适合用DNA合成仪直接人工合成? 答案 基因比较小,核苷酸序列已定。
二、基因表达载体的构建与转化 1.基因表达载体的构建步骤
(1)一般用同一种限制酶切割目的基因和质粒,使其产生相
同的末端。 (2)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处,再加入适量 DNA连接酶,形成一个重组 DNA分子 ( 重组质粒 ) 。构建过 程(如下图)。
预习导学
课堂讲义
课堂讲义
专题1 基因工程
特别提醒
该过程把三种工具(两种工具酶、一种载体)全用
上了,是最核心、最关键的一步,在体外进行。
预习导学 课堂讲义
课堂讲义
2.将目的基因导入受体细胞的方法比较
细胞 类型 方法 说明
专题1 基因工程
特点
植 物 细 胞
目的基因插入到Ti质粒的 农杆 T-DNA上→通过农杆菌→进入 经济、有效,适 菌转 合于双子叶植物 植物细胞→插入到植物细胞中的 化法 和裸子植物 染色体DNA上→目的基因表达 目的基因包裹在微小的金粒或钨 成本较高,是单 基因 粒表面→用基因枪高速射入到受 子叶植物中常用 枪法 体细胞或组织中→目的基因表达 的基因转化方法 含目的基因的溶液→滴加在柱头 花粉 上(或用含目的基因的溶液处理 简便、经济,我 管通 花粉粒)→花粉粒吸入目的基因 国科学家独创 道法 →授粉→目的基因表达
预习导学
课堂讲义

人教版·高中生物·选修3·专题1·基因工程(高三复习课件)

人教版·高中生物·选修3·专题1·基因工程(高三复习课件)

(2)动物细胞 显微注射法 (3)微生物细胞 Ca2+处理法(制备感受态细胞)
农杆菌转化法 原理:植物受损伤—细胞分泌酚类物质—吸引农杆菌—Ti质 粒上的T-DNA可转移到受体细胞中并整合到细胞DNA上
三、基因工程的基本流程 4、目的基因的检测和鉴定
检测目的基因是否插入受体DNA中 DNA分子杂交(Southern杂交) 检测目的基因是否转录 分子杂交(Northern杂交)
识别CCCGGG,并在C与G间切开
平末端
二、基因工程的基本工具 2、DNA连接酶
将DNA片段拼接成新的DNA分子,连接磷酸二酯键 E.coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 只能连接粘性末端 既连接粘性末端又连接平末端
3、运载体 质粒
自我复制、多个酶切位点、标记基因等
λ噬菌体衍生物、动植物病毒等
三、基因工程的基本流程 1、目的基因的获取
A.变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可 利用解旋酶实现 B.复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原 则完成 C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D.PCR与细胞内DNA复制相 比所需要酶的最适温度较高
3.蛋白质工程在实施中最大的难题是( ) A.生产的蛋白质无法应用 B.发展前景太窄 C.对于大多数蛋白质的高级结构不清楚 D.无法人工合成目的基因 4.下列不可能作为基因工程受体细胞的是( ) A.动物的受精卵细胞 B.人的神经细胞 C.大肠杆菌细胞 D.酵母菌细胞 5.将一个目的基因放入PCR扩增仪中,其他条件都具 备的条件下循环30次,合成的目的基因个数为( ) A.30 B.60 C.229 D.230
8.质粒是基因工程常用的载体,它的特点是(
)

人教版高中生物选修三专题1《基因工程》ppt专题复习课件

人教版高中生物选修三专题1《基因工程》ppt专题复习课件

• 解析 (1)①依据图解特点,第四轮循环产物中可以得 到16个DNA分子,其中有16个含引物B的单链、15个 含引物A的单链,以及一个不含引物A的模板链。②从 图解原DNA的引物A、B的比例关系分析,经三次复制 后开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)比 较第一组引物的碱基顺序,可以发现引物Ⅰ与引物Ⅱ 有两对碱基能发生互补配对,形成局部双链结构而失 效;而第二组引物中,引物Ⅰ′折叠后会发生碱基互 补配对而导致失效。(3)在PCR反应体系中,引物首先 与模板DNA单链互补配对形成局部双链DNA片段,然 后在DNA聚合酶的作用下将单个脱氧核苷酸依次连接 到引物链上。(4)分析本小题中图解可知,用EcoR V切 割
• 考情分析 基因工程是高考中的一个常考考点,主要 考查工具酶和载体的功能、基因工程操作的基本步骤 和各个步骤中的一些关键操作、基因工程的应用等。 考查基因工程,既可以单独考查,也可以与遗传、变 异和蛋白质工程等知识结合起来综合考查。考题中有 时会出现基因工程的相关图解,可以是基因工程的整 个操作过程示意图,也可以只是基因工程中某个操作 步骤的示意图。对图解的识别是解答这类试题的关键 之一。
• 三、听英语课要注重实践
• 英语课老师往往讲得不太多,在大部分的时间里,进行的师生之间、学生之间的大量语言实践练习。因此,要上好英语课,就应积极参加语言实践活 动,珍惜课堂上的每一个练习机会。
2019/7/31
最新中小学教学课件
22
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you!
2019/7/31
最新中小学教学课件
23
合成的药物蛋白与天 基因表达
然蛋白质相同
受体细胞
动物的受精卵
工程菌 细菌或酵母菌等生物基因 的结构与人类基因的结构 有较大差异 细菌细胞内没有内质网、 高尔基体等细胞器,产生 的药物蛋白可能没有活性

人教版高中生物选修3课件:专题一基因工程(选修三)

人教版高中生物选修3课件:专题一基因工程(选修三)
质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒
的工具
运载 工具
专题1-2
目的基因的获取
基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定
(一)、目的基因概念: 主要指的是编码蛋白质的结构基因。 也可以是一些具有调控作用的因因 化学方法直接人工合成
1、基因表达载体的组成
目的基因 启动子: 一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的 首端。是RNA聚合酶识别和结合的部位, 有了它才能驱动基因转录mRNA,最终 获得蛋白质。 终止子: 一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的尾端。使 转录在所需要的地方停止。 标记基因等 是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因 的细胞筛选出来,如青霉素基因。
③目的基因是否翻译出蛋白质
检测方法: 抗原—抗体杂交
2、个体生物学水平的鉴定
例2、回答有关基因工程的问题因工程的问题: (1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后, 可能产生粘性末端,也可能产生___ 平 末端。若要在限制酶切割目 的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生 _____ 相同(相同,不同)粘性末端的限制酶。 (2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛 素基因及其启动子等,其中启动子的作用是 提供RNA聚合酶 特异性识别结合位点,驱动基因转录 。在用表达载体转化大肠杆菌时, 2+ Ca 常用 处理大肠杆菌,以利于表达载体进入:为了检测胰岛 素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与 DNA—RNA分子杂交 mRNA杂交,该杂交技术称为 。为了检测胰岛 素基因转录的mRNA是否翻译成 _,常用抗原胰岛素原(蛋白质) 抗体杂交技术。 如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞,先要将目的 基因插入农杆菌Ti质粒的 T—DNA 中,然后用该农杆菌感染植物 细胞,通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的 染色体 上。

人教版选修三专题一《基因工程》课件 (共74张PPT)

人教版选修三专题一《基因工程》课件 (共74张PPT)


1970年工具酶的发现
1965年氨基酸测序和1977年DNA测序技术的发明 1972年DNA体外重组的实现 1973年重组DNA表达实验的成功 1980年第一例转基因动物和1983年第一例转基因 植物问世 1988年PCR技术的发明
技 术 发 明


【应城一中生物】
17
专题一 基因工程
操作水平
基本过程 结果
【应城一中生物】
剪切 → 拼接 → 导入→ 表达
人类需要的新生物类型和产品
7
【应城一中生物】
8
早 期 基 础 理 论
1859年达尔文提出生物进化论
【应城一中生物】
9
早 期 基 础 理 论
1900年孟德尔基因分离定律和自由组合定律的再度提出
【应城一中生物】
10
早 期 基 础 理 论
要切两个切口,产生四个黏性(平)末端。
• 如果把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割,会怎样?
会产生相同的黏性(平)末端
• 如果把具有相同黏性(平)末端的DNA连接起来,又会怎样呢?
得到重组DNA
【应城一中生物】
31
【应城一中生物】
黏性末端
【应城一中生物】
27
SmaI限制酶的作用
SmaI只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开。
在G与C之 间切割
中轴线
【应城一中生物】
28
SmaI限制酶的切割
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA 两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。
平末端
【应城一中生物】
平末端
29
1958年梅塞尔松、斯塔尔证明DNA的半保留复制

人教版选修三 专题1 1.2 基因工程的基本操作程序 课件(74张)

人教版选修三 专题1 1.2 基因工程的基本操作程序 课件(74张)

(1)方法:用 23 ___C_a_2_+___处理细胞,使细胞处于一种能吸收
周围环境中 DNA 分子的生理状态(这种细胞称为 24 感__受__态__细__胞__)。
(2)受体细胞:原核生物(使用最广泛的是大肠杆菌)。 (3)选择原核生物作为受体细胞的原因:繁殖 25 _快___,多为 26
_单__细__胞___, 27 _遗__传__物__质___相对较少等。
栏目 导引
生物 选修3 现代生物科技专题 RJ
专题1 基因工程
四、目的基因的检测与鉴定
方法
是否导入 检测转基因生物的 DNA 上是否插入了目的基
DNA 分子 因。检测方法是采用 28 _D__N_A__分__子__杂__交____技术 分子
是否转录 检测目的基因是否转录出了 mRNA。检测方法 水平
栏目 导引
生物 选修3 现代生物科技专题 RJ
专题1 基因工程
(5)PCR 技术中,DNA 模板链上碱基 G 和 C 的比例越高, DNA 变性解链的温度就越高。( √ )
(6)基因表达载体中含有启动子和密码子。( × ) (7)水稻植株受到损伤时,伤口处细胞会分泌酚类化合物,吸 引农杆菌,引起植株感染。( × ) (8)农杆菌感染植物的机理:Ti 质粒上的 T-DNA 可转移到植 物受伤细胞内,并且与其染色体 DNA 整合在一起。( √ )
b. 20 _花__粉__管__通__道__法___:我国科学家独创的一种方法。
栏目 导引
生物 选修3 现代生物科技专题 RJ
3.将目的基因导入动物细胞
专题1 基因工程
(1)常用方法: 21 _显__微__注__射__法___。 (2)常用的受体细胞: 22 _受__精__卵___。

人教版高中生物选修3专题1第3节基因工程的应用课件共40张PPT[可修改版ppt]

人教版高中生物选修3专题1第3节基因工程的应用课件共40张PPT[可修改版ppt]
1.用于提高动物生长速度
2.用于改善畜产品的品质
如转基因牛分泌的乳汁,乳糖含量降低, 营养成分不变
3.用转基因的动物生产药物
• 什么叫转基因动物?
是指把人或哺乳动物的某种基因导入到 哺乳动物(如鼠、兔、羊和猪)的受精卵里, 目的基因若与受精卵染色体DNA整合,细胞 分裂时,该基因随染色体的倍增而倍增,使 每个细胞中都带有目的基因,使性状得以表 达,并稳定地遗传给后代,从而获得基因产 品。这样一种新的个体,称为转基因动物。
转黄瓜抗青枯病基因的 马铃薯
不会引起过敏的转基因大豆
4.利用转基因改良植物的品质
提高观赏价值
基因工程在农业上的应用:
1)高产、稳产和具优良品质的品种 用基因工程的方法可以改善粮食作物的
蛋白质含量。如“转基因高赖氨酸玉米”植 株。 2)抗逆性品种
将细菌的抗虫、抗病毒、抗除草剂、抗 盐碱、抗干旱、抗高温等抗性基因转移到作 物体内,将从根本上改变作物的特性。如转
转基因动物作器官移植的供体
• 在传统的药品生产中,某些药品如胰岛素、 干扰素直接从生物体的哪些结构中提取?
药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取。
• 传统生产方法的缺点 由于受原料来源的限制,价格十分昂贵。
• 可利用什么方法来解决上述问题? 利用基因工程方法制造“工程菌”,可
高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。
原理:利用DNA分子杂交原理;
• 基因诊断技术在什么方面发展迅速?
在诊断遗传性疾病方面发展迅速。目前 已经可以对几十种遗传病进行产前诊断。
• 举例
1)β—珠蛋白的DNA探针 → 镰刀状细胞贫 血症
2)苯丙氨酸羧化酶基因探针 → 苯丙酮尿症
(2)基因治疗——实验阶段

选修三-专题一-基因工程1PPT课件

选修三-专题一-基因工程1PPT课件
2021
技术发明使基因工程的实施成为可能 1.基因转移载体的发现 2.工具酶的发现 3.DNA合成和测序技术的发明 4.DNA体外重组的实现 5.重组DNA表达实验的成功 6.第一例转基因动物问世 7.PCR技术的发明
2021
基因工程的概念
基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重 组技术。通俗地说,就是按照人们的意 愿,把一种生物的某种基因提取出来, 加以修饰改造,然后放到另一种生物的 细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之
间进行连接
T4 DNA 连接酶
既可“缝合”双链DNA片段互补的黏性
末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末
端,但连接平末端之间的效率比较低
2021
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
相同点: 两者都是形成磷酸二酯键。
不同点: DNA连接酶:是将DNA双链上的两个缺口同
胞染色体外能够自我复制。
2021
大肠杆菌质粒的分子结构示意图
2021
大肠杆菌质粒的分子结构示意图
2021
(4)必需是安全的,不会对受体细 胞有害,也就是能够安全地“借居” 在受体细胞中。
(5)分子大小应适合,以便提取和 在体外进行操作。
实际上自然存在的质粒DNA分子并不 完全具备上述条件,都要进行人工改 造后才能用于基因工程操作。
2、种类:4000种。
3、作用:识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸
序列,并且使每一条链中特定部位的两 个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
4、结果:形成两种末端 粘性末端
平末端
2021
什么叫磷酸二酯键?
2021
5
A

4
1
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为什么细菌中限制酶不剪切本身的DNA? 因为微生物在长期的进化过程中形成了
一套完善的防御机制,对于外源入侵的 DNA可以降解;含有某种限制酶的细 胞,其DNA分子中或者不具备这种限 制酶的识别切割序列,或者通过甲基化 酶将甲基转移到所识别序列的碱基上, 使限制酶不能将其切开。
DNA连接酶
E·coli DNA 连接酶 T4 DNA 连接酶
限制性核酸内切酶
1、来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的一
种酶。能将外来的DNA切断,由于这种 切割作用是在DNA分子内部进行的,故 名限制性核酸内切酶。
2、种类:4000种。
3、作用:识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸
序列,并且使每一条链中特定部位的两 个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
4、结果:形成两种末端 粘性末端
技术发明使基因工程的实施成为可能 1.基因转移载体的发现 2.工具酶的发现 3.DNA合成和测序技术的发明 4.DNA体外重组的实现 5.重组DNA表达实验的成功 6.第一例转基因动物问世 7.PCR技术的发明
基因工程的概念
基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重 组技术。通俗地说,就是按照人们的意 愿,把一种生物的某种基因提取出来, 加以修饰改造,然后放到另一种生物的 细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
选修三_专题一_基因工程课件
目录
专题1 基因工程 专题2 细胞工程 专题3 胚胎工程 专题4 生物技术的安全性和伦理问题 专题5 生态工程
专题1 基因工程
基础理论和技术的发展催生了基因工程
20世纪中叶,基础理论取得了重大突破 1.DNA是遗传物质的证明 2.DNA双螺旋结构和中心法则的确立 3.遗传密码的破译
个核苷酸通过磷酸二酯键连接到正在合 成的DNA单链中,形成一条与模板链互补 的DNA链;
DNA聚合酶:是以一条DNA链为模板,将单个 核苷酸通过磷酸二酯键连接到正在合成的 DNA单链中,形成一条与模板链互补的DNA
基因进入受体细胞的运载体
常用运载体:质粒、 λ噬菌体衍生物、 动植物病毒
质粒 存在:主要存在于细菌的染色体以外。 特性:是很小的环状DNA分子,在细
苏云金芽孢杆菌
普通棉花(无抗虫特性)
提取
与运载体DNA拼接
抗虫基因
棉花细胞(含抗虫基因)
导入
棉花植株(有抗虫特性)
• 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么?
通过观察抗虫棉的培育过程,你认为关键 的步骤是什么?
关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来。 关键步骤二: 抗虫基因与运载体DNA连接。 关键步骤三: 抗虫基因导入受体(棉花)细胞。
关键步骤一的工具:基因的剪刀——限制性内切酶。 关键步骤二的工具:基因的针线——DNA连接酶。 关键步骤三的工具:基因的运输工具——运载体。
1.1 DNA重组技术的基本工具
基本工具: 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” DNA连接酶——“分子缝合针” 基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
平末端
什么叫磷酸二酯键?
5
A

4
1

3
2


T
5

4
1
3
2
什么叫黏性末端?
大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别 GAATTC序列,并在G和A之间切开。
限制酶
什么叫黏性末端?
限制 酶
什么叫黏性末端?
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带 有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补 配对,这样的切口叫黏性末端。
既可“缝合”双链DNA片段互补的黏性
末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末
端,但连接平末端之间的效率比较低
DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?
相同点: 两者都是形成磷酸二酯键。
不同点: DNA连接酶:是将DNA双链上的两个缺口同
时连接起来,不需要模板。 DNA聚合酶:是以一条DNA链为模板,将单
基因工程的概念
基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境生物体外ຫໍສະໝຸດ 操作对象基因操作水平
DNA分子水平
基本过程 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达
实质
基因重组
结果
人类需要的基因产物
转基因抗虫棉花
转入苏云金杆菌的一个抗虫基因, 是中国目前最主要的转基因作物。
• 基因工程培育抗虫棉的简要过程:
什么叫平末端?
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时, 切开的DNA两条单链的切口,是平整的, 这样的切口叫平末端。
切割DNA分子时产生的两种不同末端
限制酶所识别的序列有什么特点?
限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4 个碱基,都可以找到一条中心轴线,中轴线两 侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排 列的。
胞染色体外能够自我复制。
大肠杆菌质粒的分子结构示意图
大肠杆菌质粒的分子结构示意图
作为运载体的条件:
(1)必需有一个或多个限制酶的切割 位点,以便目的基因可以插入到运载体 上去。
(2)必需具备自我复制的能力,或整 合到受体染色体DNA上随染色体DNA 的复制而同步复制。
(3)必需带有标记基因,以便重组后 进行重组DNA分子的辨认和筛选。
(4)必需是安全的,不会对受体细 胞有害,也就是能够安全地“借居” 在受体细胞中。
(5)分子大小应适合,以便提取和 在体外进行操作。
实际上自然存在的质粒DNA分子并不 完全具备上述条件,都要进行人工改 造后才能用于基因工程操作。
课本知识回顾
基因工程又叫做 基因拼接技术 或 DNA重组技术 。通俗地说,就 是按照人们的意愿,把一种生物 的某种 基因 提取出来,加
中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称排列的。
用同一种限制性酶处理不同DNA片段,会 形成同样的黏性末端,可进行重组。
限制酶在原核生物中的作用是什么?
原核生物容易受到自然界外源DNA的入 侵,限制酶是原核生物的一种防御性工 具,当外源DNA侵入时,会利用限制 酶将外源DNA切割掉,使之失效,达 到保证自身的安全的目的。
DNA连接酶
作用部位:磷酸二酯键
DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合” 起来,即把梯子两边扶手的断口连接起来, 这样一个重组的DNA分子就形成了。
DNA连接酶
区别:
E·coli DNA 连接酶
只能将双链DNA片段互补的粘性末端之
间连接起来,不能将双链DNA片段平末端之
间进行连接
T4 DNA 连接酶
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