生物样品储存方法概述-冷冻保存
生物实验中的样本处理和保存技巧
![生物实验中的样本处理和保存技巧](https://img.taocdn.com/s3/m/35ce59110166f5335a8102d276a20029bd646305.png)
生物实验中的样本处理和保存技巧在生物学研究中,样本处理和保存是非常重要的环节。
正确的样本处理和保存技巧可以确保实验结果的准确性和可靠性。
本文将介绍一些常用的样本处理和保存技巧,帮助研究人员在实验中取得更好的结果。
一、样本处理技巧1. 采样时的注意事项在采集样本时,要注意避免污染和损伤。
使用无菌手套和工具,以避免细菌和其他污染物的引入。
此外,样本应该尽快采集并尽量避免长时间的暴露在环境中,以减少样本的降解。
2. 样本预处理在进行实验之前,需要对样本进行预处理。
对于液体样本,可以通过离心来去除固体颗粒和细胞。
对于固体样本,可以使用切割或研磨的方法将其打碎,以便后续的实验操作。
3. 样本保存液的选择为了保持样本的完整性和稳定性,选择适当的保存液是至关重要的。
常用的保存液包括缓冲液、甘油溶液和冷冻保护剂等。
选择保存液时,要根据不同的实验目的和样本类型进行选择。
4. 样本的冷冻和解冻对于需要长期保存的样本,冷冻是常用的方法。
在冷冻之前,应将样本放入冷冻管中,并将其迅速放入液氮或低温冰箱中。
解冻时,应将样本放置在冰上缓慢解冻,以避免样本的损伤。
二、样本保存技巧1. 长期保存的样本对于需要长期保存的样本,如细胞系、DNA和蛋白质等,应选择适当的保存温度和保存容器。
一般来说,低温冰箱或液氮罐是常用的保存设备。
同时,选择耐高温和耐腐蚀的保存容器,如冻存管或冻存盒。
2. 样本标签和记录为了避免样本的混淆和丢失,样本的标签和记录非常重要。
在保存样本时,应在保存容器上标注清楚样本的编号、名称和保存日期等信息。
同时,建立样本记录表格,记录每个样本的详细信息,以便后续的查询和使用。
3. 定期检查和维护保存样本的设备和容器需要定期检查和维护,以确保其正常运行和保存效果。
定期检查温度计和液氮水平计等设备的准确性,并及时更换老化的保存容器,以避免样本的损失。
4. 分享和交流在保存样本的同时,研究人员也应该与同行进行分享和交流。
建立样本库和数据库,将样本信息和实验结果共享给其他研究人员,以促进科学研究的进展和合作。
tngs样本保存方法
![tngs样本保存方法](https://img.taocdn.com/s3/m/1c01df624a35eefdc8d376eeaeaad1f347931146.png)
"TNGS"样本通常指的是用于肿瘤基因突变的下一代测序(Next-Generation Sequencing, NGS)的样本。
这些样本通常是肿瘤组织或细胞,用于检测基因突变、拷贝数变异、基因表达分析等。
正确保存TNGS样本对于保证测序质量和后续分析至关重要。
以下是一些常见的TNGS样本保存方法:
1. 液氮冷冻保存:
- 将样本迅速放入液氮中冷冻,并保持在-196°C的温度下。
这种方法适用于长期保存,因为液氮可以有效地防止DNA降解。
2. 冷冻保存:
- 将样本放入含有适量冷冻保护剂的容器中,然后在-80°C或-20°C的冰箱中冷冻保存。
常用的冷冻保护剂包括10%的二甲基亚砜(DMSO)和90%的胎牛血清。
3. 石蜡包埋:
- 将样本固定在适当的缓冲液中,然后进行石蜡包埋。
这种方法适用于保存组织切片,但可能不适用于DNA提取。
4. 酒精固定:
- 将样本放入70%的乙醇中固定,这种方法适用于保存组织样本,但不适用于DNA提取。
5. 室温保存:
- 对于某些对温度敏感的样本,可以在适当的缓冲液中在4°C的条件下保存,但应尽快处理以避免DNA降解。
在保存TNGS样本时,应考虑以下因素:
- 样本类型:组织、细胞或DNA提取物有不同的保存要求。
- 保存时间:长期保存可能需要更低的温度和不同的保存介质。
- DNA提取:如果样本后续需要DNA提取,应选择不会影响DNA质量的保存方法。
在处理和保存TNGS样本时,应遵循实验室的最佳实践和标准操作程序,以确保样本的质量和安全。
生物冷冻技术实验报告(3篇)
![生物冷冻技术实验报告(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/da24197a2379168884868762caaedd3382c4b530.png)
第1篇一、实验目的1. 了解生物冷冻技术的原理和方法。
2. 掌握生物样本冷冻保存的操作步骤。
3. 评估冷冻保存对生物样本的影响。
二、实验原理生物冷冻技术是一种利用低温环境减缓生物样本内细胞和分子活动的技术,从而实现生物样本长时间保存的技术。
主要方法包括液氮冷冻、干冰冷冻、低温冰箱保存等。
低温环境可以降低生物分子的代谢速率,减缓细胞衰老和死亡,保持生物样本的活力、功能和完整性。
三、实验材料1. 生物样本:细菌、细胞、组织等。
2. 冷冻设备:液氮罐、干冰、低温冰箱等。
3. 试剂:固定液、解冻液、无菌水等。
4. 实验器具:冷冻管、离心管、移液器、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备工作(1)将生物样本置于无菌环境中,避免污染。
(2)将所需试剂和器具准备齐全。
2. 生物样本冷冻保存(1)液氮冷冻:将生物样本置于液氮中,使其快速冷冻至-196℃。
(2)干冰冷冻:将生物样本置于干冰中,使其缓慢冷冻至-78℃。
(3)低温冰箱保存:将生物样本置于低温冰箱中,使其缓慢冷冻至-20℃。
3. 生物样本解冻(1)液氮冷冻样本:将样本从液氮中取出,立即置于37℃水浴中解冻。
(2)干冰冷冻样本:将样本从干冰中取出,置于室温下自然解冻。
(3)低温冰箱保存样本:将样本从低温冰箱中取出,置于室温下自然解冻。
4. 评估冷冻保存对生物样本的影响(1)观察样本外观,记录细胞形态、活力等变化。
(2)进行显微镜观察,记录细胞核、细胞质等结构变化。
(3)进行生化实验,检测细胞内酶活性、蛋白质表达等指标。
五、实验结果与分析1. 外观观察:冷冻保存后的生物样本,细胞形态基本完整,活力较高。
2. 显微镜观察:冷冻保存后的生物样本,细胞核、细胞质等结构基本完好,未出现明显损伤。
3. 生化实验:冷冻保存后的生物样本,酶活性、蛋白质表达等指标基本正常。
六、实验结论1. 生物冷冻技术可以有效保存生物样本的活力、功能和完整性。
2. 液氮冷冻、干冰冷冻、低温冰箱保存等不同冷冻方法对生物样本的影响较小,可根据实际情况选择合适的冷冻保存方法。
生物样本冷冻储存技术
![生物样本冷冻储存技术](https://img.taocdn.com/s3/m/32050f60e009581b6bd9ebc8.png)
生物样本冷冻储存技术1 储存温度生物样本的长期储存通常使用尽可能低的温度来降低样本内的生化反应提高样本内各种成分的稳定性。
生物大分子、细胞、组织和器官的常用储存温度有-800C(超低温冰箱), -1400C(液氮气相或深冷冰箱)以及-1960C(液氮液相),温度越低样本的稳定保存时间越长。
0~-600C是水的结晶温度,容易对细胞和组织的微观结构造成伤害,一般不使用这一温度来保存组织和细胞。
部分经过提纯的生物大分子可以在0~-600C稳定保存一定时间,但在组织样本内生物大分子受到细胞组织内多种因素的影响,稳定性有可能明显降低,所以通常样本库不使用0~-600C作为储存温度。
-800C样本储存-800C低于危害性较大的水的结晶温度范围,也是常用设备超低温冰箱能达到的温度,基于操作简便性、储存量和成本等因素来考量,这一温度也是目前保存样本中生物大分子活性的常用温度。
但对不同的生物大分子活性这一温度下能保持多久仍无定论。
组织中DNA的稳定性可以在-800C下可以保持数年或更长时间。
但对RNA来说,则容易被广泛分布于细胞和各种组织里的RNA酶逐渐降解,在不同的细胞和组织中,RNA稳定储存的时间长短也有较大的区别,但一般不超过5年,在一些敏感实验内,RNA在-800C下不到一年就发生了测得出的降解,所以为长期保存RNA活性,建议使用更低的温度,或者利用小部分样本提取RNA与剩余样本同步储存。
其他样本内的蛋白质和脂类等生物大分子在样本内在-800C下也能保存,但时间长短不一,稳定性逐渐衰减。
如果为保护样本里已知的特定生物大分子,也可加入该分子的稳定剂。
如果样本里要保存的生物大分子未定,建议使用更低的温度储存。
另外目前常见的大型自动化样本存取设备只能和-800C超低温设备配套使用,尚不能够和液氮设备配套使用。
英国的UK Biobank则是把一部分样本的拷贝(~950万)储存在-800C做工作样本,使用自动化设备存;另一部分拷贝(~550万)在另外一个地方储存在液氮气相中做安全备份,样本手动存取。
临床试验生物样本备份方法
![临床试验生物样本备份方法](https://img.taocdn.com/s3/m/b07dcc9c5122aaea998fcc22bcd126fff6055d5c.png)
临床试验生物样本备份方法1. 样本备份是确保临床试验数据的可靠性和可重复性的重要步骤之一。
在临床试验中,常常需要对生物样本进行备份以保留原始样本,以便后续分析或验证。
2. 将生物样本分为不同的小份,每份包装在标有独立编号的容器中。
这样可以确保每个样本都有相应的备份,并可以轻松地找到和识别需要使用的样本。
3. 生物样本备份的最常用方法之一是冷冻保存。
将样本存放在低温条件下,例如-20°C或-80°C的冰箱或冻存库中,可以有效地保护样本的完整性和稳定性。
4. 在进行样本冷冻保存之前,应先选择适当的冻存液。
常用的冻存液包括低温保存缓冲液、甘油溶液等,这些冻存液可以保护样本的结构和功能。
5. 在样本冷冻保存时,可以选择使用冷冻盒或冻存管来存放样本。
冷冻盒能够提供额外的隔热保护,而冻存管则可以方便地进行分装和标记。
6. 临床试验样本备份中的重要一环是及时记录所有备份样本的信息。
包括样本类型、编号、存放位置、冷冻时间等,这些信息对于跟踪和管理样本非常重要。
7. 在实施样本备份过程中,应确保所有使用的器械和容器都是无菌的,以避免样本受到外部污染。
8. 对于液体样本,应确保在备份过程中将其徹底的混合均匀以保证样本的代表性。
9. 对于非液体样本,如组织样本或细胞样本,备份前应考虑相应的处理方法。
可以使用冻切技术将组织样本切片,并将每个切片存储在相应的容器中。
10. 样本备份的频率也需要根据具体情况进行合理的安排。
一般来说,备份频率应足够,以便在需要时能够提供足够的备份样本。
11. 样本备份过程中,应确保样本标识清晰可读,并采取措施避免标识的磨损或褪色。
12. 对于大规模临床试验,可以考虑使用自动化系统来进行样本备份。
这些系统可以提高效率、减少人为错误,并能够及时跟踪和管理备份样本的信息。
13. 样本备份过程中应注意防止样本中的氧气和水分接触以避免样本的氧化和降解。
14. 在生物样本备份中,应注意遵循伦理和法律规定,并确保样本的隐私和安全。
关于样品保存的方法四个字
![关于样品保存的方法四个字](https://img.taocdn.com/s3/m/7d5d6a29dcccda38376baf1ffc4ffe473368fd96.png)
关于样品保存的方法四个字引言在科学研究和实验中,样品的保存是非常重要的一个环节。
样品的保存方法决定了样品的质量和稳定性,直接影响到后续实验结果的准确性和可靠性。
因此,科研工作者需要掌握一些有效的样品保存方法,以确保样品的长期存储和保持其原有特性。
本文将介绍四种关于样品保存的方法。
冷冻保存冷冻保存是一种常见且广泛应用的样品保存方法。
通过将样品置于低温环境中,可以减缓样品中生物化学反应的速率,从而延缓样品的衰老和变化。
一般来说,冷冻保存最常用的温度范围是-20C至-80C。
温度越低,样品保存的时间就越长。
冷冻保存时,将样品放入密封的冷冻管中,并确保完全冷冻后立即将其转移到冷冻设备中。
冷冻保存的样品应标明保存日期和样品的相关信息,以便日后使用时能够追踪。
干燥保存干燥保存是另一种常用的样品保存方法。
通过去除样品中的水分,可以防止微生物的生长和化学反应的发生。
干燥保存常用于有机物样品、植物标本等。
最常见的干燥方法是真空干燥和冷冻干燥。
真空干燥通常通过将样品置于低压环境下,利用气体扩散和挥发来去除水分。
冷冻干燥则是将样品冷冻后,利用低温下水分的升华来达到干燥的目的。
干燥保存时,样品应置于密封的容器中,并可以放置干燥剂来吸收残余水分。
防护保存防护保存是指将样品保存在一定的保护环境中,防止外来因素对样品造成损害。
这种方法主要适用于敏感性样品和易受污染的样品。
防护保存的方法主要有密封保存、惰性气体保护和防护剂保护等。
密封保存是将样品置于密封的容器中,以防空气中的氧气和湿气对样品的氧化和分解。
惰性气体保护是将样品置于惰性气体(如氮气或氩气)中,以防样品与空气中的氧气发生反应。
防护剂保护是将样品涂覆一层防护剂,以保持样品的原有特性。
高温保存高温保存主要适用于一些稳定性较高的样品,如无机物样品和金属样品等。
将样品置于高温环境中,可以加快样品中的化学反应速率,从而加速样品衰老和失去特性。
高温保存时,需要选择合适的温度和时间,并严格控制样品的暴露时间,以避免样品损坏或特性变化。
生物样品采集、冻存应注意的问题
![生物样品采集、冻存应注意的问题](https://img.taocdn.com/s3/m/3c176a1503020740be1e650e52ea551810a6c918.png)
⽣物样品采集、冻存应注意的问题西域商城实验室⼯程师今天和⼤家探讨⼀下⽣物样品采集冻存应注意的问题。
⽣命科学研究中组学技术的发展以及临床医疗领域新⼀代检测技术的进步,促进了对⽣物样品的需求,也促进了⽣物样品的采集、保存等环节的正规化、规模化。
⽣物样品的保存,不外常温和低温两种⽅式。
常温保存能耗少、环保,有时也⾮常⽅便,是⼀种有潜⼒的保存⽅式。
⼀些机构正在积极探索不同的常温保存技术。
上海伯豪⽣物也推出了RNAsafety?这种可⽤于组织的常温采集和保存的试剂。
⽣物样品的低温保存,则是⽬前较常⽤的⽣物样品保存⽅式。
⽣物和医学上的低温,是⼀个⽐较宽的温度范围。
从⼤多数酶的最适反应温度37℃以下到⼏个K(开尔⽂),都可以称为低温(绝对零度为-273.15℃即0K)。
本⽂从样品保存的⾓度,将低于常温(室温,25℃左右)的温度理解为低温。
低温能抑制⽣物体的⽣化活动,这是⾃然界固有的物理化学规律。
根据阿仑尼乌斯(Arrhenius)⽅程,温度越低,化学反应速度越慢,样品的保存时间越长。
因此,为了使⽣物样品在⼀定的时间内保持稳定,⼈们按不同需求将样品保存在4℃,-20℃,-80℃或温度更低的冰箱中,或者保存在液氮中。
本⽂谈谈⽣物样品低温保存尤其是冻存时需要注意的⼀些问题。
1. 长期保存的组织样品要尽快冻存样品贮存的温度对有效保存时间的影响很⼤。
选择合适的贮存⽅式和贮存温度很重要。
但为了保证实验结果的客观性,研究者也要充分注意样品在贮存或固定前的处置时间和⽅式。
样品从开始收获到固定或低温保存前这段时间,仍有⼀些⽣化过程在较快地进⾏。
这些⽣化反应的速度直到样品被固定或者低温保存时才显著降低。
这⼀段时间越短越好。
对于⼿术切除的组织,热缺⾎(warm ischemia)时间越短越好;对于实验动物,处死取样时挣扎时间越短越好。
这有助于防⽌因环境改变⽽导致基因表达⽔平或蛋⽩磷酸化状态产⽣较⼤变化。
⼀些较复杂的⼿术可能进⾏⼏个⼩时甚⾄整天,那么最先被切割但未被切离的那部分组织可能经历较长的热缺⾎时间,从⽽导致较⼤的⽣化变化。
生物实验样品保存方法
![生物实验样品保存方法](https://img.taocdn.com/s3/m/84f0c0ce82d049649b6648d7c1c708a1294a0a7d.png)
生物实验样品保存方法引言在生物实验中,样品的保存是非常重要的环节。
正确的保存方法可以保证样品的稳定性和可靠性,并且能够保留样本中所需的各种生物活性分子。
本文将介绍一些常见生物实验样品的保存方法,以便研究人员能够正确地保存和使用这些样品。
DNA和RNA的保存方法DNA和RNA是生物实验中常用的核酸样品,合适的保存方法可以避免其降解和失活。
通常,DNA和RNA可通过以下方法保存:1. 冷冻保存:将DNA和RNA样本置于-80的低温环境中,避免长时间暴露在室温下。
在这种条件下,DNA和RNA可以保存多年而不会发生明显的降解。
保存前,可以将样本加入酶抑制剂(如RNase Inhibitor)或其他保护剂,以提高保存效果。
2. 真空干燥保存:将DNA和RNA样本在真空条件下干燥,可以有效地防止恶劣环境对核酸的影响。
这种保存方法对于长期保存有限制,但适用于实验室中对必要样本的普通保存。
3. 酒精沉淀保存:将DNA和RNA样本通过酒精沉淀的方式提纯后,可以更加稳定地保存。
这种方法适用于保存较小量的核酸样本,可以避免冷冻保存或真空干燥的冷冻仓库的使用。
蛋白质的保存方法蛋白质是生物实验中重要的功能分子,实验室中常常需要保存和提取蛋白质样品。
以下是一些常见的蛋白质保存方法:1. 冷冻保存:将蛋白质样品置于-20或更低的低温环境中,可以显著减缓蛋白质的降解速度。
保存前,应当将样品冷却至室温,并避免反复的冷冻和解冻过程。
在保存过程中,也可以考虑使用抗蛋白酶剂等保护剂,以减少蛋白质的降解。
2. 冷冻干燥保存:将蛋白质样品通过冷冻干燥的方式进行保存,可以有效地降低蛋白质的分解和细菌的污染风险。
冷冻干燥后的蛋白质样品可以在室温下长时间保存,并且方便携带和使用。
3. 溶液保存:某些蛋白质样品需要在特定溶液中保存,以维持其稳定性和功能性。
例如,一些酶类蛋白质需要在专门配制的缓冲液中保存,以保持其催化活性。
在保存过程中,应注意避免过高或过低的pH值,以及较高的温度。
生物样品的采集、储存和预处理的SOP
![生物样品的采集、储存和预处理的SOP](https://img.taocdn.com/s3/m/167290f9970590c69ec3d5bbfd0a79563c1ed4f2.png)
生物样品的采集、储存和预处理的SOP1. 生物样品的采集:服药前取空白血样,服药后取样点应包括吸收相,分布相,消除相;药浓度峰值前至少有4个点,峰后取6个点或6个以上点,峰时间附近应有足够的取样点。
总取样点不少于11个,取样应持续到3 ~ 5个半衰的1/10 ~1/20。
具体可依据文献报道及预试验结果确定具体采血时期,或Cmax间点。
于服药前(0 h)和各时间点,取前臂静脉血5mL,处理后,离心10 min ( 3000r.p.m),分离血浆或血清样品置试管中。
2. 生物样品的储存:血浆、血清样品,尽快分离(24h内),冷冻保存;短期内分析,可置4℃冰箱内冷藏。
长期分析,于- 20℃冰箱内冷冻保存。
3. 生物样品的预处理:依据药物的理化性质,其酸碱性(pKa)、分子的亲脂性、挥发性、稳定性及可能的生物转化途径,制定相应的预处理方法。
a. 沉淀蛋白法生成不溶性沉淀:酸性试剂(三氯醋酸、高氯酸、钨酸、焦磷酸)重金属盐类(锌盐、铜盐、银盐、汞盐)盐析、脱水:硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等中性盐。
甲醇、乙腈、丙酮等可与水混溶的有机试剂。
各种沉淀试剂使用情况表b. 液-液萃取法水相pH:碱性药物最佳pH应高于其p Ka 2 ~ 3个单位酸性药物最佳pH应低于其p Ka 2 ~ 3个单位常用的有机溶剂:正己烷、异辛烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、1,2-二氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯(极性由依次小至大)。
有机溶剂与水相容积比一般为 1:1或2:1。
选择提取溶剂的原则:对被测物有较大的亲和力;与水不互溶,极性较小;沸点适宜;不影响紫外检测;价廉、无毒、不易燃烧;化学性质稳定。
生物长期保存的方法
![生物长期保存的方法](https://img.taocdn.com/s3/m/2d63c90a326c1eb91a37f111f18583d049640f09.png)
生物长期保存的方法# 生物长期保存的方法## 引言生物的长期保存是一项重要的科学技术,对于保护物种多样性、研究基因组和遗传特性、应对生物灾害等方面都具有重要意义。
随着科学技术的不断发展,人们探索出了多种生物长期保存的方法,本文将对其中的几种方法进行介绍和分析。
## 核心内容### 1. 冷冻冷藏冷冻冷藏是最常见的生物保存方法之一,它通过将生物样本置于低温环境中,减缓细胞活动并保持DNA的稳定性。
在冷冻冷藏的过程中,常用的保存介质包括液氮和低温冷冻器。
液氮是一种极低温的液体,常用于保存动物胚胎、种子和细胞系等。
将生物样本浸泡在液氮中,可以有效地防止生物物质的降解和损伤,保持样本的完整性和生物学活性。
然而,液氮的使用需要特殊的设备和操作技术,存在一定的风险和成本。
低温冷冻器是一种常用的冷冻冷藏设备,可以在-20或更低的温度下保存生物样本。
这主要适用于保存溶液、细胞培养物和微生物等。
与液氮相比,低温冷冻器具有更便捷、更安全的特点,但同时也存在保存时间有限和设备成本较高的问题。
### 2. 冷冻干燥冷冻干燥(Lyophilization)是一种将生物样本在低温下冷冻并脱水的方法。
通过冷冻干燥,水分从生物样本中去除,从而防止细胞损伤和化学反应的发生。
冷冻干燥可以有效地保存细胞、细菌、真菌、酵母和病毒等微生物,同时还可以保存动植物种子、血清和药物等。
冷冻干燥的原理是利用低温下水分的直接转化为气体的特性,即直接从冰态蒸发而不经过液态。
在冷冻干燥的过程中,生物样本首先被快速冷冻,然后在真空条件下进行脱水,最后通过加热将水分从固态蒸发为气体。
这样可以在保持生物样本的完整性和稳定性的同时,去除水分并延长样品的保存时间。
### 3. 冷冻存储冷冻存储是一种将生物样本置于低温环境中进行保存的方法,与冷冻冷藏不同,冷冻存储更加注重长期保存的稳定性和安全性。
常见的冷冻存储方法包括冷冻存储罐和冷冻存储库。
冷冻存储罐是一种专门设计用于存储生物样本的设备,通常采用气冷或液冷的方式来冷却,确保存储物品在恒定的低温环境中。
实验室中的温度控制 冷却保存样品
![实验室中的温度控制 冷却保存样品](https://img.taocdn.com/s3/m/d5eed3987375a417876f8f88.png)
实验室中的温度控制,物体的冷冻保存1. 概述保存实验室样品,标本和试剂在全世界所有研究实验室都有必要。
长时间保存样品的完整性和活性的最有效方法是将它们在低温下冷藏保存。
无论您是在工作台上操作样品,还是实验结束后存放样品,都可以使用到不同的冷却方法。
本短片将演示在实验室常见的冷却试剂和设备的类型,帮助您了解什么种类的样品应该保存在什么温度。
2. 冷却试剂的使用对冷却试剂的选择取决于实验操作过程的性质。
传统的冰块是短时间保存样品的合理选择。
您应当知道冰是冻的水,如您在这个相图中看到的,在正常大气压下它的融化温度是0度。
但您可能不知道它有时被称之为“湿冰”,因为在室温下它会受热而变成液体。
“湿冰”是操作和转移样品以及试剂时的最佳选择。
“湿冰”是纯的水,而“干冰”是固体形式的二氧化碳,它的融化温度是-78.5度。
正常大气压下,干冰并不融化成液体,而是通过一种叫升华的过程直接转变成气体的二氧化碳。
升华是指由固体直接转变成气体的形态改变,它发生在相图中的三相临界点之下。
当您操作生物样本如冷冻的细菌,哺乳细胞或组织时,要使用干冰,这些样品通常都被保存在0度以下温度。
干冰的还一个好处是它在形态改变时不会留下任何残余物,将液体浇在干冰上,使得它成为作冷冻浴池的最佳选择。
液氮是浓缩的氮气,通常用LN2来表示。
在它的相图中您可以看到,正常大气压-196度时,液氮会沸腾,由液体变成气体。
当您需要将生物样品保存在低于大多数实验室冻箱所能达到的温度是,就需要用到液氮。
液氮可以存储在杜瓦瓶,一种真空瓶中,加上一个非密封的盖子,也可存储在一个大的杜瓦罐中,罐上装有排气阀门防止气压在罐内的累积增高。
干冰和液氮虽然无毒害,但它们都是危险物品,您需要经过实验室有经验的人员训练指导后才能操作它们。
由于液氮和干冰的极低温度,如果接触到皮肤都会造成严重的组织损伤。
所以要时刻穿戴防护用具,包括耐低温手套和实验服。
并使用工具来操作样品,避免直接接触到皮肤。
生物样本冷冻储存技术
![生物样本冷冻储存技术](https://img.taocdn.com/s3/m/860b0ce4aeaad1f346933fe7.png)
生物样本冷冻储存技术1 储存温度生物样本的长期储存通常使用尽可能低的温度来降低样本内的生化反应提高样本内各种成分的稳定性。
生物大分子、细胞、组织和器官的常用储存温度有-800C(超低温冰箱), -1400C(液氮气相或深冷冰箱)以及-1960C(液氮液相),温度越低样本的稳定保存时间越长。
0~-600C是水的结晶温度,容易对细胞和组织的微观结构造成伤害,一般不使用这一温度来保存组织和细胞。
部分经过提纯的生物大分子可以在0~-600C稳定保存一定时间,但在组织样本内生物大分子受到细胞组织内多种因素的影响,稳定性有可能明显降低,所以通常样本库不使用0~-600C作为储存温度。
-800C样本储存-800C低于危害性较大的水的结晶温度范围,也是常用设备超低温冰箱能达到的温度,基于操作简便性、储存量和成本等因素来考量,这一温度也是目前保存样本中生物大分子活性的常用温度。
但对不同的生物大分子活性这一温度下能保持多久仍无定论。
组织中DNA的稳定性可以在-800C下可以保持数年或更长时间。
但对RNA来说,则容易被广泛分布于细胞和各种组织里的RNA酶逐渐降解,在不同的细胞和组织中,RNA稳定储存的时间长短也有较大的区别,但一般不超过5年,在一些敏感实验内,RNA在-800C下不到一年就发生了测得出的降解,所以为长期保存RNA活性,建议使用更低的温度,或者利用小部分样本提取RNA与剩余样本同步储存。
其他样本内的蛋白质和脂类等生物大分子在样本内在-800C下也能保存,但时间长短不一,稳定性逐渐衰减。
如果为保护样本里已知的特定生物大分子,也可加入该分子的稳定剂。
如果样本里要保存的生物大分子未定,建议使用更低的温度储存。
另外目前常见的大型自动化样本存取设备只能和-800C超低温设备配套使用,尚不能够和液氮设备配套使用。
英国的UK Biobank则是把一部分样本的拷贝(~950万)储存在-800C做工作样本,使用自动化设备存;另一部分拷贝(~550万)在另外一个地方储存在液氮气相中做安全备份,样本手动存取。
生物样本储存保管和使用管理规定
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生物样本储存保管和使用管理规定为了规范生物样本的储存、保管和使用,保障生物样本的完整性和安全性,提高生物样本的利用率和科学价值,制定生物样本储存、保管和使用管理规定。
以下为生物样本的储存、保管和使用的管理规定。
一、生物样本的储存管理1.生物样本的分类和标识2.储存条件的要求生物样本应存放在符合规定的低温条件下,一般要求存放在-20℃以下或-80℃以下的冷冻库中。
对于特殊要求的样本,如RNA样本,应存放在液氮罐中。
3.储存环境和设施储存生物样本的实验室应具备适当的环境和设施,包括恒温冷藏柜、冷冻冷藏柜、液氮罐等。
实验室应保持干燥、无尘、无霉与细菌等其他有害的环境。
4.储存记录和纪录5.生物样本的复核和差错处理在样本储存过程中,应进行复核,确保样本的准确性和完整性。
一旦发现样本有问题,如漏液、冰冻破裂等,应及时进行处理,包括更换样本容器等。
二、生物样本的保管管理1.安全防护生物样本保管实验室应设置入口检测设备,检测空气中的有害气体和微生物污染。
同时,应设置适当的防护措施,如防火、防爆、防水、防恶劣天气等。
2.样本的访问控制对于生物样本的保管实验室,应进行严格的访问控制,仅允许授权人员进入。
实验室内的生物样本柜、冰箱等设施也应设置访问控制措施,确保样本的安全。
3.定期检查和维护保管设施和环境应定期进行检查和维护,保证设备正常运行和样本的安全保存。
同时,对于容易变质的样本,要定期检测样品状态,确保其完整性和可用性。
4.备份和迁移措施对于珍贵的生物样本,应进行备份,确保样本在灾害等情况下的完整性和安全性。
同时,对于储存设施的老化和损坏,应及时进行迁移和更换设施,保证样本的安全。
三、生物样本的使用管理1.使用前的申请和审批使用生物样本前,需要填写使用申请表,并提供研究项目的背景、目的和相关实验方案。
样本使用的审批应由相关专业人员进行,并记录审批结果。
2.样本的分发和归还在样本使用过程中,应建立样本分发和归还的记录,确保样本的使用情况和归还情况清晰可见。
冷冻储存的概念
![冷冻储存的概念](https://img.taocdn.com/s3/m/c492828f0408763231126edb6f1aff00bed57036.png)
冷冻储存的概念冷冻储存是一种将生物样品(如细胞、组织、血液、种子、胚胎等)在极低温条件下保存的方式,以确保细胞结构和功能的完整性。
冷冻储存技术的发展对科学研究、医学治疗和农业育种等领域产生了巨大的影响。
冷冻储存的概念冷冻储存是一种通过降低温度来延缓生物体内化学反应的过程,从而保护生物样本。
通常来说,冷冻储存是指将样品存放在低于0摄氏度的温度下,以确保其在冷冻状态下的稳定性和保存时间的延长。
目前,常用的冷冻储存温度为-80摄氏度和液氮温度(约-196摄氏度)。
冷冻储存的原理冷冻储存的原理是将样品中的水分转化为冰晶,降低活跃性物质和化学反应的速率,从而减缓生物样品的退化和腐败。
在低温下,细胞和组织的代谢活动几乎停止,因此能够保持其结构和功能的完整性。
同时,冷冻储存可以降低微生物和酶的活性,减少有害反应的发生,防止生物样本受到外界环境的污染。
此外,冷冻储存还可以减缓DNA、RNA和蛋白质等生物大分子的降解,从而保持其完整性和功能。
冷冻储存的应用冷冻储存被广泛应用于各个领域,包括科学研究、药物研发、医学诊断和治疗、农业种子保存和动植物遗传资源保护等。
在科学研究中,冷冻储存为保存生物样品提供了一种可行的方法。
科学家们可以将生物样本冷冻保存,以便将来进行实验或检测。
此外,冷冻储存还可以帮助科学家保存一些稀有的生物样本,如濒危物种的血液样本和新发现的微生物。
在药物研发领域,冷冻储存对于保持药物样品的活性和稳定性非常重要。
药物研发过程中,研究人员通常需要保存大量的化合物和样品库,以供以后的实验和测试。
冷冻储存可以确保这些药物样品在长期保存期间保持其活性,为药物研发和临床试验提供了重要的基础。
在医学诊断和治疗方面,冷冻储存用于保存血液样本、组织样本和器官移植材料等。
冷冻储存可以延长这些生物样本的保存时间,从而为疾病诊断、生物标记物检测和器官移植提供了可靠的支持。
在农业领域,冷冻储存可以被用来保存重要的种子和种苗资源。
生物样品的贮存与管理
![生物样品的贮存与管理](https://img.taocdn.com/s3/m/f783fd15905f804d2b160b4e767f5acfa1c7832e.png)
生物样品的贮存与管理生物样品的贮存与管理是生命科学领域中不可或缺的一环。
生物样品是指从生物体内采集的组织、液体或细胞等生物材料,是进行医学研究和生物技术应用的重要工具。
因此,对生物样品的贮存与管理有严格的规定和标准,以确保其质量和可靠性。
样品贮存的温度选择生物样品的贮存温度是非常重要的,它可以影响生物样品的质量和保存时间。
通常,生物样品的温度可分为常温、4℃、-20℃、-80℃和液氮低温贮存等。
常温贮存适用于对样品处理要求不高的研究,如细胞外液、尿液、唾液等,不适用于DNA等高灵敏度分子的保存。
4℃适用于长时间保存的样品,如蛋白质、DNA、RNA等。
-20℃适用于短时间保存的样品,如培养细胞、DNA、RNA等。
-80℃适用于长时间保存和长期使用的样品,如蛋白质、DNA、RNA和细胞等。
液氮低温贮存适用于需要保存20年以上的样品,如细胞、蛋白质、DNA、RNA等。
在选择贮存温度时,要确保样品的完整性和可靠性。
样品贮存容器的选择生物样品的贮存容器也是影响样品质量和保存时间的重要因素。
通常,贮存容器可分为玻璃试管、塑料试管和冻存管等。
玻璃试管具有良好的耐高温性和酸碱性,适合于烘干和高温灭菌处理的样品保存。
但是,由于易碎和不透明,不适合长期液氮低温保存。
塑料试管可以用于4℃和液氮低温保存,但不适用于高温灭菌处理。
冻存管通常采用聚丙烯材料制成,适用于液氮低温保存和长期保存的样品。
在选择贮存容器时,要权衡其适用范围和贮存期限。
样品贮存标签的标注正确的样品标注可以确保样品的可追溯性和可靠性,是生物样品管理的重要环节。
通常,样品标注应包括以下信息:样品名称、样品来源、样品提取日期、样品状态、保存温度和贮存位置等。
为了避免重复命名和混淆样品标签,还需要命名规则,并在样品贮存记录中进行登记。
在实验操作过程中,要确保样品标签和贮存位置的一一对应。
样品贮存记录的备份生物样品的贮存记录是样品管理的重要环节,可以追溯样品的来源和质量,也可以帮助研究者更好地利用样品资源。
生物学实验中样本保存技巧与注意事项解析
![生物学实验中样本保存技巧与注意事项解析](https://img.taocdn.com/s3/m/3f655f6eac02de80d4d8d15abe23482fb4da023c.png)
生物学实验中样本保存技巧与注意事项解析生物学实验中,样本的保存是非常重要的。
正确的保存方法可以确保样本的完整性和可靠性,同时也能够提供准确的实验结果。
本文将介绍一些生物学实验中样本保存的技巧和注意事项。
1. 样本收集和标记在进行生物学实验之前,首先需要收集样本。
样本的收集可以是从自然环境中采集,也可以是从实验动物或细胞培养中获取。
无论是哪种方式,都需要在收集时保持样本的完整性和纯度。
在收集样本时,应该注意使用无菌的工具和容器,以避免样本被外界污染。
同时,对于不同类型的样本,应该选择适当的保存方式。
例如,对于细胞培养样本,可以选择使用液氮冷冻保存;对于动物组织样本,可以选择使用离心管保存。
在收集样本后,还需要对其进行标记。
标记样本可以帮助实验者识别和追踪样本的来源和处理过程。
标记应该包括样本的名称、采集日期、采集地点等信息。
同时,还可以使用特殊的标记剂,如荧光染料或放射性同位素,来标记样本以便于后续实验的分析和追踪。
2. 样本保存的温度和湿度温度和湿度是样本保存中非常重要的因素。
不同类型的样本对温度和湿度的要求也不同。
一般来说,低温和低湿度的环境对于大多数样本的保存都是有利的。
对于液体样本,如细胞培养液或血清,可以选择冷藏保存。
一般来说,4℃的温度可以保持这些液体样本的稳定性和活性。
对于更长时间的保存,可以选择使用-20℃或更低的温度进行冷冻保存。
对于固体样本,如组织切片或DNA样本,可以选择冷冻保存。
冷冻保存可以使用液氮或干冰。
液氮的温度为-196℃,可以有效地保持样本的完整性和稳定性。
干冰的温度为-78℃,适合短期保存。
除了温度,湿度也是需要考虑的因素。
过高的湿度可能导致样本的腐败和霉变,而过低的湿度可能导致样本的干燥和损坏。
一般来说,相对湿度在40%至60%之间是较为理想的保存条件。
3. 样本保存的容器和包装材料样本的保存容器和包装材料也是需要注意的。
合适的容器和包装材料可以保护样本免受外界环境的污染和损坏。
生物冷冻保藏的研究与应用
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生物冷冻保藏的研究与应用随着现代生命科学和医学技术的不断发展,生物冷冻保藏技术越来越重要,这一技术在医学、生物学、农业和环境科学等领域都有广泛的应用。
本文将介绍生物冷冻保藏的原理、方法和应用前景。
一、生物冷冻保藏的原理和方法生物冷冻保藏是指将生物样品通过低温冷冻和保存的方法,保持其原有的生命过程和功能不受影响的技术。
其原理是将细胞、组织或器官等生物样品放入到低温环境中,从而降低其代谢速率和活性,防止其腐败和死亡,达到长期保存的目的。
生物冷冻保藏主要分为两种方法:一是机械冷冻法,即将样品通过机械冷冻器或液氮进行低温冷冻保存;二是化学冷冻法,即通过添加化学保护剂将样品低温冷冻保存。
机械冷冻法是目前应用较广泛的方法,具有保存效果好、操作简单的优点。
机械冷冻法主要分为慢速冷冻和快速冷冻两种方法。
慢速冷冻是指将样品放置于-80℃的环境下,逐渐降温至-196℃,并将样品保存在液氮中。
快速冷冻是指将样品快速降温到-196℃,以内部形成非结晶性玻璃状态,采用速度较快的冷冻方法。
化学冷冻法则是指通过添加保护剂来保护细胞和组织,在低温环境下依然能保持其活性。
化学冷冻法包括使用蔗糖、甘油、DMSO等保护剂的方法。
这种方法具备样品保存时间短、保护效果稳定等优点。
二、生物冷冻保藏的应用前景生物冷冻保藏技术在医学、生物学、农业和生态等领域都有着广泛的应用前景。
1.医药在医药领域,生物冷冻技术可以用于细胞、组织和器官的冷冻保存,以供临床使用。
通过生物冷冻技术,可以有效地保存骨髓、造血干细胞、胚胎和器官等物质,为输血、医疗、植入和移植等医学实践提供重要的支持。
2. 农业在农业领域,生物冷冻技术可以用于种子、胚胎和花粉等生物材料的保藏,为新品种培育和种的保存提供支持。
通过生物冷冻技术,可以有效地保存植物种子和花粉等生物材料,保证其品质和种质的完整性,推动科技创新。
3. 环境科学在环境科学领域,生物冷冻技术可以用于保护和保存珍稀和濒临灭绝的野生物种。
标本冻存原理
![标本冻存原理](https://img.taocdn.com/s3/m/709663aeb9f67c1cfad6195f312b3169a451ea95.png)
标本冻存原理
标本冻存是一种将生物样品(如细胞、组织、血液、精子等)在低温条件下保存的方法。
它的原理是通过将样品暴露在极低温度下,降低其代谢速率和活性,防止细胞死亡和组织降解,从而延长样品的保存时间。
具体而言,标本冻存的原理包括以下几个方面:
1. 低温对生物体代谢的影响:低温可以减慢生物体的新陈代谢过程,降低细胞和组织的代谢速率,减少底物消耗和产物积累,保持细胞内部的平衡状态。
2. 冷冻过程中的细胞保护作用:冷冻过程中,水分子从细胞内部流出,形成冰晶,使细胞外液和细胞内液的浓度差减小,减少细胞受到的脱水和细胞器结构的破坏。
3. 冷冻过程中的冰晶形成:冷冻过程中,水分子会形成冰晶,这些冰晶的结构会对细胞组织产生机械伤害,从而引发细胞破裂甚至细胞死亡。
冷冻前的处理过程可以使细胞和组织中的水分子形成较小的冰晶,减小机械伤害的程度。
4. 低温维持细胞稳定性:在极低温度下,细胞和组织的活性物质几乎停止运动,各种生化反应几乎不发生,减少了细胞组织的损伤和降解。
同时,低温可以抑制细胞和组织内的微生物生长和繁殖,从而保持样品的纯度。
综上所述,标本冻存通过低温抑制细胞和组织的代谢活性,减
少细胞破坏和降解,保持样品的完整性和活性,从而实现长期保存和利用生物样品的目的。
生物存储技术
![生物存储技术](https://img.taocdn.com/s3/m/6e3b74b86429647d27284b73f242336c1eb93033.png)
生物存储技术
生物存储技术是指将生物样品(如细胞、组织、血清、DNA等)进行保存、冷冻、冷藏或干燥等处理,以便长期保存或方便运输。
生物存储技术对于医学研究、生物科学、药物研发等领域具有重要意义。
常见的生物存储技术包括低温冷冻、气相液态氮冷冻、冷冻干燥和化学固定等方法。
其中,低温冷冻是最常用的生物样品保存方法之一,通常使用液氮或液氮制冷器将样品冷冻到极低温度下保存。
气相液态氮冷冻则是将样品直接浸泡在液态氮中,以更快速更彻底地冷冻样品。
冷冻干燥则是将样品冷冻后通过真空蒸发水分的方式进行干燥,以便长期保存,这种方法适用于保存微生物和细胞等样品。
化学固定则是将样品用化学物质进行处理,以达到固定和保存的目的,这种方法适用于保存组织和细胞等样品。
生物存储技术在医学和科学领域的应用前景广阔,能够推动生物医学和药物研发等领域的发展。
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生物样品储存方法概述-冷冻保存
将需要冷冻的样品冷冻(freezing,放于-20?C或-80?C)得当能有效的保证样品质量!下面给大家安利几种常见样品的冷冻储存方式:
DNA及缓冲液:对于基因组材料来说,收到轻微的机械剪切力不是什么大事情;对于不稳定的缓冲液,如含有DTT的缓冲液,可直接冷冻储存,无需调整。
蛋白:需要添加防冻剂用于蛋白的冷冻储存。
蔗糖或甘油是防冻剂很好的选择,但对于不同的蛋白,蔗糖或甘油所占的百分比须有所不同。
可选择20%的蔗糖或10%的甘油。
限制性内切酶可以储存在50%甘油中以保持稳定性。
由于较低的冷冻温度,这种甘油的浓度可防止溶液完全冻结!
微生物(细菌,酵母和真菌):10-20%甘油效果很好。
更高的百分比(即更接近20%)使平板划线更加容易。
高等真核细胞:常见的的冷冻过程为(仅供参考):
1. 配制含10% DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中;
3. 离心1000rpm,5min;
4. 去除胰蛋白酶及旧的培养液,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
5. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
6. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
7. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。
也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
8.从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但最好为对数生长期细胞。
在冻存前一天最好换一次培养液;
9.将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤;
10.冻存和复苏最好用新配制的培养液。
另外,反复冻融对样品损害很大,因此将样品分装成小规格保存是不错的选择。
为了最大限度减少样品浪费,分装之前需要知道样品的浓度、后续实验每次的用量,以便分装成适当的体积。
小贴士:对于分装成微小的体积,PCR条管是不错的选择。
此外,一些大分子在储存之前快速冷冻(flash-freezing),能更好的保持功能。
如何进行快速冷冻:穿上实验室外套,戴上护目镜、手套,将样品放入含有少量液氮的杜瓦瓶(dewar)中,有泡沫和烟雾产生(此操作需要在通风环境中进行)。
一旦停止产生泡沫,迅速将样品取出,存储在-20?C或-80?C。