乙醇福尔马林固定液
常用固定液的配制
常用固定液的配制常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
福尔马林
一、10%中性缓冲福尔马林
用途:10%中性缓冲福尔马林是一种良好的常规固定剂。
此液是在低渗缓冲离子中pH6.8
固定时间:标本固定1~4小时/mm,大标本应延长固定时间。
步骤:
1.多数外科病理标本都能接受甲醛固定。
2.标本可以无限期的保持在10%福尔马林中或转移到70%乙醇中。
二、4%多聚甲醛固定液:
用途:进行免疫组织化学方法研究时常选用该固定液。
动物灌注固定及后固定(动物器官经该液灌注后,然后取材,再用该液浸泡2-24小时)也常选该固定液固定。
混合后加热至60℃,搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止,冷却后加PBS 至总量1000 ml,调整PH为7.2-7.4。
AFA固定液
北京雷根生物技术有限公司
FAA 固定液
简介:
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene FAA 固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液或AAF 、AAF 固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)组成,兼有脱水作用。
AAF 固定液常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 取新鲜组织入AFA 固定液,置于冰箱内低温固定。
2、 常规石蜡切片因固定不佳导致染色效果不满意时,可在染色前再用AAF 固定液固定,染色效果会有明显提高。
注意事项:
1、 AAF 固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作, 避免吸入。
2、 固定液pH 最好接近用中性,pH 范围6~8。
3、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm ,一般不超过6mm 。
4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
有效期: 12个月有效。
编号 名称 DF0002 DF0002 Storage FAA Fluid 500ml 5L RT 避光 使用说明书 1份。
常用固定液的性质、用途
常用固定液的性质、用途和配置1.单一固定液的性质和用途(1)乙醇(C2H5OH)(ethylalcohol):又名酒精,可沉淀白蛋白、球蛋白、核蛋白,后者易溶于水,所以经酒精固定的标本对细胞核染色不良。
酒精可溶解脂肪、类脂体,所以不能用酒精固定脂肪。
酒精可沉淀肝糖,但仍可溶解于水,因此肝糖经酒精固定后不能在低于70%酒精中保存。
单独固定使用酒精的浓度应为95—100%。
无水酒精渗透力较差,并且能使组织收缩,在与醋酸、氯仿混合使用时,可增强它们的穿透力。
酒精除固定作用外,还具有硬化和脱水的作用,固定后的组织可保存于70%酒精中,所以酒精在制片过程中用途很大。
无水乙醇容易挥发,又容易吸收空气中的水分,所以瓶盖必须塞紧,为了吸去其中水分,最好在无水乙醇瓶内放入少量无水硫酸铜粉末。
酒精是一种还原剂,不能与重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合使用。
(2)甲醛(HCHO)(formeldehyde):是一种气体,溶于水成为甲醛水溶液或称福尔马林,一般使用浓度为10%福尔马林(formalin)液,其配法是取市售的甲醛液10ml 与90ml 蒸馏水混合即可,实际上其含量只有4%甲醛。
这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
甲醛不能沉淀白蛋白及核蛋白,但能与蛋白质化合。
它是一种应用广泛,使用简单的固定液,具有穿透力强、固定均匀、组织收缩小、硬度适当,适用于一般器官组织的固定及保存。
尤其对脂肪、神经组织固定效果较好。
更适于病理组织的制片及大体积标本的保存,一般组织需固定24 小时以上,固定后的组织可移入50%酒精中逐步脱水。
甲醛是一种强还原剂,不能与铬酸、重铬酸钾、锇酸等氧化剂混合,因极易被氧化为甲酸。
在配混合固定液时,如海利氏液等需临用前再加入,24 小时后失效。
甲醛由于长期贮存,特别是低温气候,容易产生多聚甲醛,即溶液中的白色沉淀,在高温下又成为甲醛。
不纯的甲醛易产生甲酸,使溶液变为酸性,影响核的染色。
所以在备用的福尔马林中加入小量的醋酸钙、碳酸镁或大理石作为中和剂。
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求(实用版)目录1.福尔马林固定液的概述2.10% 标本福尔马林固定液的成分要求3.福尔马林固定液在标本制作中的作用4.使用福尔马林固定液的注意事项正文一、福尔马林固定液的概述福尔马林固定液是一种用于生物标本制作的常用溶液,其主要成分是甲醛(Formalin),也称为福尔马林(Formalin solution)。
福尔马林固定液具有很好的杀菌、防腐和固定作用,广泛应用于动植物标本、组织切片和细菌培养基的防腐保存。
二、10% 标本福尔马林固定液的成分要求在制作 10% 的标本福尔马林固定液时,需要按照一定的比例将福尔马林与水混合。
具体来说,需要将 10 毫升的福尔马林加入到 90 毫升的水中,这样便得到了 100 毫升的 10% 福尔马林固定液。
这种浓度的福尔马林固定液适用于大多数生物标本的防腐固定。
三、福尔马林固定液在标本制作中的作用1.杀菌作用:福尔马林固定液具有很好的杀菌作用,可以有效杀灭细菌、真菌等微生物,防止标本腐烂。
2.防腐作用:福尔马林固定液能够与标本中的蛋白质结合,形成一种蛋白质 - 甲醛复合物,这种复合物具有良好的防腐性能,可以防止标本组织腐烂。
3.固定作用:福尔马林固定液能够快速穿透细胞膜,使细胞内的蛋白质凝固,从而固定细胞结构,有利于后续的组织切片和显微镜观察。
四、使用福尔马林固定液的注意事项1.福尔马林具有较强的刺激性和毒性,因此在使用过程中应佩戴好口罩、眼镜和手套,避免直接接触皮肤和眼睛。
2.在配制福尔马林固定液时,应严格按照比例进行,避免浓度过高或过低,影响固定效果。
3.使用福尔马林固定液时,要注意密封保存,避免溶液挥发,导致浓度降低。
同时,要避免阳光直射,防止福尔马林分解。
4.对于不同类型的标本,应选择适当浓度的福尔马林固定液,以保证固定效果。
FAA固定液使用说明
FAA固定液编号名称北京派瑞金LB9429FAA固定液FAA固定液简介:固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
FAA固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液或AAF、AAF固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)组成,兼有脱水作用。
AAF固定液常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。
FAA固定液操作步骤(仅供参考):1、取新鲜组织入AFA固定液,置于冰箱内低温固定。
2、常规石蜡切片因固定不佳导致染色效果不满意时,可在染色前再用AAF固定液固定,染色效果会有明显提高。
FAA固定液注意事项:1、AAF固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2、固定液pH最好接近用中性,pH范围6~8。
3、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
保存条件:RT避光,12个月有效。
FAA固定液相关的固定液:乙醇-甲醛固定液Altmann固定液Maximov固定液甲醛-生理盐水固定液Allen B-15固定液Lillie甲醛中性固定液铬-醋酸固定液乙醇-甲醛固定液,A-F固定液Lichent's固定液多聚甲醛-磷酸缓冲固定液Picric acid-硫酸固定液Kolmer固定液Zirkle-Erliki固定液甲醛-乙酸-乙醇固定液Kleinenberg's(克来宁堡氏)固定液Susa固定液多聚甲醛-氢氧化钠固定液Karnovsky固定液Schaudinn(绍丁)固定液对苯醌固定液Hollande固定液Marchi固定液Zetterqvist固定液Helly固定液Karnovsky改良固定液Zenker固定液Gendre固定液Houseby固定液Zamboni固定液Flemming固定液Heidenhain(海登汉)固定液Verhoeff固定液ECD-G固定液Goldsmith固定液Rossman固定液Champy固定液Gilson固定液Romeis固定液Carnoy固定液Davidson固定液PLP固定液Carnoy-LeBrun固定液Dafano固定液PLPD固定液Champy固定液,Champy’s Fluid Carl固定液,卡尔固定液PFG固定液Helly固定液,Helly SolutionCajal甲醛-溴化铵固定液(FAB)Orth固定液AAF固定液Brasil固定液Nawaschin’s固定液卡诺氏固定液,Carnoy Fluid Bouin固定液Muller固定液Bouin固定液,Bouin氏固定液B-5固定液Mirsky's固定液Zetterqvist固定液Aoyama固定液Methacarn固定液组织细胞固定液。
植物固定液和保存液介绍
固定液和保存液用固定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等,能保存组织内细胞的形态、结构及其组成,尽量使它近于生活状态。
固定液一般有防腐和保存的作用,分为单纯固定液和混合固定液。
单纯固定液中最重要的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、升汞等,前两种固定液是中学生物实验室常用的。
单纯固定液的优点是简便,缺点是有一定的局限性,不易达到理想的固定要求。
混合固定液有几种不同的药液按一定的比例混合而成,使各自的优缺点相互补充,成为较完美的固定液。
这种固定液的制备虽比较麻烦,但是效果比较好。
常用的混合固定液是醋酸-酒精混合液、福尔马林-醋酸-酒精液、包因氏固定液等。
常用的保存液大致跟固定液相同,主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合液。
有时按特殊保存的需要,再保存液中增加某些药品(如原生标本的保存液)。
1、福尔马林福尔马林在固定组织标本时杀菌能力强,所以防腐性强,渗透力大,固定得快。
永福尔马林固定精细的解剖标本时,要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。
固定液常用的浓度是5~10%(根据材料的大小、性质和数量而定)。
保存液常用的浓度是5~10%。
用福尔马林作保存液,效果好且价格低廉。
在配制福尔马林溶液(固定液或保存液)时,应将37~40%的甲醛作为整个溶质来配。
例如配制5%福尔马林是取市售37~40%甲醛溶液5毫升跟95毫升蒸馏水混合。
实际上甲醛含量只有1.9~2%,这样的配法已成为一般实验室常用的惯例。
注意事项:(1)福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸,可适量的加入碳酸钙或碳酸镁等碱性物质进行中和。
(2)福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低,并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛,使浸液变浊,影响观察。
所以,根据一定保存期的情况,可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液,以防标本变坏。
其中如有白色沉淀物,加热后可使它溶解。
(3)市售的福尔马林液常带有酸性,能腐蚀石灰质,因此,最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。
10%标本福尔马林固定液成分要求
10%标本福尔马林固定液成分要求福尔马林固定液是实验室、博物馆、医学院等机构常用的固定剂,主要用于对标本进行保存。
其10%的浓度在实际应用中具有较高的可操作性和实用性。
本文将对10%标本福尔马林固定液的处理要求进行详细阐述,以期为相关人员提供参考。
福尔马林的化学成分为甲醛,它具有强烈的杀菌、防腐作用,能使蛋白质变性,从而达到固定标本的目的。
在使用10%标本福尔马林固定液时,要先了解其作用与重要性。
福尔马林固定液不仅能有效杀死标本内的微生物,防止腐烂,还能保持组织形态和颜色,为后续的科学研究提供良好的观察基础。
10%标本福尔马林固定液的配制方法相对简单。
将福尔马林与水按1:9的比例混合,即可得到10%的固定液。
在配制过程中,还需添加适量的缓冲剂,以调节固定液的酸碱度,提高固定效果。
使用10%标本福尔马林固定液进行标本处理时,要注意以下步骤:1.标本的处理与准备:首先,对标本进行清洗,去除表面的污垢。
对于软组织标本,可用生理盐水清洗;对于硬组织标本,可用蒸馏水清洗。
清洗完成后,对标本进行编号,准备进入固定液处理。
2.固定液的涂抹与浸泡:将准备好的标本放入10%福尔马林固定液中,用刷子蘸取固定液涂抹标本,确保标本各个部位都能充分接触到固定液。
随后,将标本完全浸泡在固定液中,使其充分吸收。
3.固定液作用时间与更换频率:一般情况下,10%福尔马林固定液的作用时间为24-48小时。
在此期间,要密切观察标本的固定情况,如发现固定效果不佳,需及时更换固定液。
在使用10%标本福尔马林固定液时,要注意以下几点:1.安全防护措施:福尔马林具有较强的刺激性气味,长时间接触对人体有害。
因此在操作过程中,要佩戴防护口罩、手套和眼镜,避免直接接触皮肤和眼睛。
2.福尔马林挥发的控制:福尔马林挥发较快,应在通风良好的环境下操作。
操作完毕后,要关闭容器,避免福尔马林挥发对环境造成污染。
3.储存条件的讲究:10%福尔马林固定液应存放在密封容器中,避免与空气中的二氧化碳反应。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1 甲醛(formaldehyde )是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%〜40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formalin )。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10 %福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3 中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2P04?H2O 4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4 13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4 AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
yzbai wrote:(1)10%甲醛:对组织渗透性强,固定均匀。
对组织膨胀约5%,经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪,不能沉淀核蛋白及白蛋白,长期用其固定的组织使组织变为酸性,不利于染色,特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24 小时后,可以使其酸碱中和,并减少结晶。
(2)4%多聚甲醛:对组织穿透性好,组织收缩小,对大多数抗原物质保存较好,特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
固定的时间不宜太长,以24 小时以内为宜,适用于免疫组织化学染色。
几种细胞固定方法选择最佳固定液标准是:(1)最好地保持细胞和组织的形态结构;(2)最大限度地保存抗原的免疫活性。
乙醇福尔马林固定液 (AF固定液)
北京索莱宝科技有限公司
乙醇福尔马林固定液(AF固定液)
货号:G2101
规格:500ml
保存:4℃避光,有效期12个月。
产品简介:
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
乙醇福尔马林固定液主要由乙醇、福尔马林组成,该固定液属于脱水-交联固定剂,在辨认特定抗体的免疫组化反应中能产生极好的结果,也有利于含有多量脂肪的大样本固定。
使用说明(仅供参考):
根据实验具体要求操作。
一般标本固定时间控制1~4h/mm,大多数控制在4~24h,大标本应适当延长固定时间。
注意事项:
1、乙醇福尔马林固定液有一定刺激性和腐蚀性,请在通风环境下小心操作。
2、组织取材的厚度不同,固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
对
组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
4、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
第1页,共1页。
常用的组织固定液
常用的组织固定液1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不超过一个月。
甲醛(40%) 100 ml无水磷酸氢二钠 6.5 g磷酸二氢钠 4.0g蒸馏水900 ml(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多聚甲醛:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
甲醛(40%) 100 ml95%乙醇900 ml(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液:多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠 1.25 g升汞 6.0 g蒸馏水90 ml使用前加入甲醛10 ml(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75 ml甲醛25 ml冰醋酸 5 ml(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60 ml氯仿30 ml冰醋酸10 ml(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效。
升汞 5.0 g重铬酸钾 2.5 g硫酸钠 1.0g蒸馏水(加至) 100 ml。
常用固定液的配制
常用固定液的配制1. 福尔马林-醋酸-酒精固定液(FAA)50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般组织,但不适用于单细胞及丝状藻类,也不适宜作细胞学研究。
幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收缩。
若材料坚硬,可略减冰醋酸,略增福尔马林。
若材料易收缩,可稍增加冰醋酸。
久置时另加入5ml甘油以防蒸发和材料变硬。
此液又可作保存液。
固定时间最多10h。
如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果较好:50%酒精89ml + 冰醋酸6ml + 福尔马林5ml2. 福尔马林-丙酸-酒精固定液(FPA)福尔马林5ml + 丙酸5ml + 70%酒精90ml固定一般的植物组织,通常固定8~24h,可长久保存。
3. 酒精-醋酸-氯仿固定液(卡诺固定液,Carnoy fixative)配方Ⅰ:纯酒精3份+ 乙酸1份配方Ⅱ:纯酒精6份+乙酸1份+ 氯仿3份配方Ⅲ:甲醇6份+乙酸1份+ 氯仿3份适用于植物组织和细胞学材料,为研究细胞分裂和染色体的优良固定液。
固定时间不宜过久。
4. 酒精-福尔马林固定液福尔马林2~6(6~10)ml + 70%酒精100ml固定植物一般组织,尤其适用于萌发的花粉管的固定。
通常固定24h,亦可长久保存。
5. 酒精-福尔马林-甘油固定液95%酒精150ml + 5%福尔马林100ml + 甘油50ml此液也可长期储存材料。
6. 铬酸-醋酸固定液根据固定对象的不同,可分为强、中、弱3种配方:(1)弱液配方:10%铬酸2.5ml + 10%醋酸5ml + 蒸馏水92.5ml(2)中液配方:10%铬酸7ml + 10%醋酸10ml + 蒸馏水83ml(3)强液配方:10%铬酸10ml + 10%醋酸30ml + 蒸馏水60ml弱液配方用在固定较柔软的材料,如藻类、苔藓和蕨类的原叶体等。
固定时间较短,一般为数小时,最长可固定12~24h,但藻类和蕨类的原叶体可缩短到几分钟至1h。
固定液主要成分
固定液主要成分
固定液的种类很多,根据配制成分可分为简单型与混合型。
1. 切片标本以一种化学药品配制的固定液叫做简单固定液。
常用的简单固定液有:酒精(乙醇)、福尔马林(甲醛)和醋酸。
其中,酒精穿透力强,固定时间常在1小时以内,高浓度酒精有使材料收缩的作用。
福尔马林固定液一般不单独作固定,而与其他液体混合使用。
醋酸以与水和酒精配成各种比例的溶液,所用浓度为0.2~5%,也常与其他固定剂配合使用。
醋酸穿透性很强,单独使用,有使原生质膨胀的作用,故常与酒精,甲醛等合用,醋酸为固定染色体的优良固定液,因此固定染色体的固定液中,几乎都含有醋酸。
2. 手术标本固定液成分包括:缓冲剂、醛固定剂。
此外,还有一种特殊类型的固定液叫做卡诺氏液,又名卡诺氏固定液,是1886年由比利时细胞学家让·巴蒂斯特·卡诺伊发明的一种固定液。
它是一种由乙醇和乙酸(也可以加入三氯甲烷,即氯仿)配制而成的非水相固定剂,需现配现用。
卡诺氏液主要适用于一般植物组织和细胞的固定,也可以用于手术切除角化囊肿后的局部治疗。
如需了解更多关于固定液的成分,建议咨询专业化学家或查阅化学书籍。
大体标本常用的固定液
大体标本常用的固定液
固定液是生物组织或细胞学研究中不可或缺的一部分,它可以帮助保存和稳定组织和细胞,使它们能够在后续的样品处理和分析中保持完整。
一般来说,固定液包括多种化学成分,不同的固定液适用于不同的组织和细胞类型。
以下是最常用的固定液:
1. 10% 福尔马林(Formaldehyde)
福尔马林是最常用的固定液之一,它可以作为一种信标分子,标记细胞蛋白。
福尔马林具有良好的渗透性,能够迅速渗透到组织中,提供良好的固定效果。
2. 十二烷基硫酸钠-10%EDTA浸液(SDS-EDTA Buffer)
SDS-EDTA浸液是常用的细胞质微管结构和线粒体固定液。
该固定液是一种离子池化学固定液,能够特异性地固定蛋白质,适用于研究细胞骨架和线粒体。
3. Bouin液
Bouin液是一种精细的组织学固定液,不过使用比较少。
该固定液包括福尔马林、酯化醛和乙酸,可以用于特异性地固定肝脏和其他含脂肪的组织。
4. Carnoy液
Carnoy液是一种比较强的组织学固定液,由95%的乙醇、氯仿和冰醋酸组成。
该固定液可以用于稳定核质和细胞膜,适用于肝脏和小肠等组织。
5. 4%多聚甲醛(Paraformaldehyde)
4%多聚甲醛是一种可以在室温下固定细胞和组织的固定液,可以优先固定蛋白质和核酸。
多聚甲醛很便宜,但其固定效果不及福尔马林。
需要注意的是,不同的固定液会对研究结果产生不同的影响。
因此,选择固定液前需考虑组织或细胞类型、后续的实验目的和预期结果等因素,才能选择最合适的固定液。
同时,固定液使用时需要注意安全,防止吸入和接触固定液。
福尔马林色素清除液
北京雷根生物技术有限公司
福尔马林色素清除液
简介:
福尔马林色素是产生于酸性福尔马林固定组织过程中的棕色或棕黑色的沉积物,多出现于血液丰富的组织、出血的损伤区域以及充满血的大血管,多表现为一种微晶沉积物,具有非单折射性。
传统的从切片去除福尔马林色素的方法有苦味酸、氢氧化钠、氢氧化钾等方法,但以上方法有可能影响后续染色过程。
Leagene 福尔马林色素清除液相较以上方法对组织的损伤更小,色素沉着也较少。
长时间固定富含血液的器官,福尔马林色素沉着会大大增加,这时建议更换固定液。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 切片入乙醇。
2、 入福尔马林色素清除液处理(见注意事项1)。
3、 蒸馏水冲洗干净,进行下游染色。
注意事项:
1、 根据福尔马林色素的量,调整去除时间。
2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
相关:
编号 名称 DZ0155 Storage 福尔马林色素清除液 500ml RT
使用说明书 1份 编号 名称 DC0032 Masson 三色染色液 DF0111 中性福尔马林固定液(10%) PW0082
丽春红S 染色液(1×Ponceau S) TO1013 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛(formal dehyd e)是无色气体,易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发,且有强烈刺激气味,常用得是37%~40%得甲醛溶液,商品名为福尔马林(formal in)。
用作固定的浓度习惯为10%福尔马林(即1份甲醛溶液加9份水配制而成),实际含甲醛4%。
10%福尔马林渗透力强,固定均匀,对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好,是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织,易产生黑色的沉淀,称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体,易溶于水,它除可作为固定剂外,还可作为脱水剂,对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度,乙醇渗透力校弱,它能溶解脂肪,核蛋白被沉淀后,仍能溶于水,因此核的着色不良。
3 中性甲醛液(混合固定液)甲醛(浓)120ml,加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)4g,磷酸氢二纳(Na2HPO4)13g。
此液固定效果比单纯10%福尔马林要好。
4 AF液(混合固定液)95%乙醇90ml,甲醛(浓)10ml。
也有配方是95%乙醇85ml,甲醛(浓)10ml,冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外,兼有脱水作用,因此,固定后可直接入95%乙醇脱水。
以上4种固定液中,以中性甲醛为首选,其次为10%福尔马林,乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:(1)10%甲醛:对组织渗透性强,固定均匀。
对组织膨胀约5%,经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪,不能沉淀核蛋白及白蛋白,长期用其固定的组织使组织变为酸性,不利于染色,特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后,可以使其酸碱中和,并减少结晶。
(2)4%多聚甲醛:对组织穿透性好,组织收缩小,对大多数抗原物质保存较好,特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
常用固定液的配制
钉于染液中,过1min后取出,使染色剂略含铁质,以增加染色性能。
静置12h后过滤于棕色瓶中备用(置于避光处)。
12.苏木精染液苏木精的配方很多,常用的有如下3种:配方Ⅰ:苏木精水溶液0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中,静置24h后可使用。
配方Ⅱ:代氏苏木精(Delarfield’s haematoxylin)甲液:苏木精1g + 无水酒精6ml乙液:硫酸铝铵(铵矾)10g + 蒸馏水100ml丙液:甘油25ml + 甲醇25ml分别配制甲、乙两液,将甲液一滴滴地加入乙液中,充分搅拌后,放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口,置于温暖和光线充足处7~10天,再加入丙液,混匀后静置1~2月,至颜色变为深紫色后,过滤备用,可长期保存。
配方Ⅲ:爱氏苏木精(Ehrlich’s haematoxylin)苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾(钾矾)3~5g。
配制时,先将苏木精溶于酒精中,然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸,最后加入研细的钾矾,边加边搅拌,直到瓶底出现钾矾结晶为止。
混合后溶液颜色呈淡红色,放入广口瓶中,用纱布封口,自然氧化1~2月,至颜色变为深红色时即可过滤备用,可长期保存。
13.席夫试剂(Schiff’s regent)将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水,搅拌使其充分溶解。
冷却至50℃时,过滤于棕色细口瓶中,加入10ml1mol/L盐酸。
冷却至25℃左右,加入1g偏亚硫酸钾或钠(Na2S2O5或K2S2O5),振荡使其溶解,密封瓶口,置于黑暗低温处过夜。
次日检查,若染色液透明无色或呈淡茶色,即可使用。
若染色较深,可加入少量优质活性炭(0.5~2g),振荡1min,置于4℃冰箱中过夜,过滤使用。
此液配好后,应塞紧瓶塞,外包黑纸,贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液将0.25g硫堇粉末,溶于100ml蒸馏水中,即可使用。
使用此液时。
需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片,能产生多色反应。
常用的组织固定液
常用的组织固定液1.单纯固定液(1)4%中性甲醛固定液:最常用的固定液,能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是,中性甲醛是以 pH 7.2~7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的,其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4%甲醛固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处,保存时间不超过一个月。
甲醛(40%) 100 ml无水磷酸氢二钠 6.5 g磷酸二氢钠 4.0g蒸馏水900 ml(2)乙醇固定液:使用时以80%~95%的浓度为宜,具有硬化、固定、脱水等作用,对组织渗透力较弱,因此很少单独使用,但其保存组织中的核酸强于中性甲醛,故常用于有核酸操作的实验或检查,如果用于证明尿酸结晶和保存糖原,可用100%乙醇固定组织。
(3)4%的多聚甲醛:主要用于培养细胞的固定。
2.混合固定液(1)乙醇一甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。
甲醛(40%) 100 ml95%乙醇900 ml(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液:多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠 1.25 g升汞 6.0 g蒸馏水90 ml使用前加入甲醛10 ml(3)Bouin固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀,收缩很少,不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75 ml甲醛25 ml冰醋酸 5 ml(4)Carnoy固定液:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60 ml氯仿30 ml冰醋酸10 ml(5)Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效。
升汞 5.0 g重铬酸钾 2.5 g硫酸钠 1.0g蒸馏水(加至) 100 ml。
FAA固定液使用说明
FAA固定液编号名称北京派瑞金LB9429FAA固定液FAA固定液简介:固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
FAA固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液或AAF、AAF固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)组成,兼有脱水作用。
AAF固定液常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。
FAA固定液操作步骤(仅供参考):1、取新鲜组织入AFA固定液,置于冰箱内低温固定。
2、常规石蜡切片因固定不佳导致染色效果不满意时,可在染色前再用AAF固定液固定,染色效果会有明显提高。
FAA固定液注意事项:1、AAF固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2、固定液pH最好接近用中性,pH范围6~8。
3、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。
4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
保存条件:RT避光,12个月有效。
FAA固定液相关的固定液:乙醇-甲醛固定液Altmann固定液Maximov固定液甲醛-生理盐水固定液Allen B-15固定液Lillie甲醛中性固定液铬-醋酸固定液乙醇-甲醛固定液,A-F固定液Lichent's固定液多聚甲醛-磷酸缓冲固定液Picric acid-硫酸固定液Kolmer固定液Zirkle-Erliki固定液甲醛-乙酸-乙醇固定液Kleinenberg's(克来宁堡氏)固定液Susa固定液多聚甲醛-氢氧化钠固定液Karnovsky固定液Schaudinn(绍丁)固定液对苯醌固定液Hollande固定液Marchi固定液Zetterqvist固定液Helly固定液Karnovsky改良固定液Zenker固定液Gendre固定液Houseby固定液Zamboni固定液Flemming固定液Heidenhain(海登汉)固定液Verhoeff固定液ECD-G固定液Goldsmith固定液Rossman固定液Champy固定液Gilson固定液Romeis固定液Carnoy固定液Davidson固定液PLP固定液Carnoy-LeBrun固定液Dafano固定液PLPD固定液Champy固定液,Champy’s Fluid Carl固定液,卡尔固定液PFG固定液Helly固定液,Helly SolutionCajal甲醛-溴化铵固定液(FAB)Orth固定液AAF固定液Brasil固定液Nawaschin’s固定液卡诺氏固定液,Carnoy Fluid Bouin固定液Muller固定液Bouin固定液,Bouin氏固定液B-5固定液Mirsky's固定液Zetterqvist固定液Aoyama固定液Methacarn固定液组织细胞固定液。
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乙醇福尔马林固定液
简介:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。
固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
Leagene 乙醇福尔马林固定液主要由乙醇、福尔马林组成,该固定液属于脱水-交联固定剂,在辨认特定抗体的免疫组化反应中能产生极好的结果,也有利于含有多量脂肪的大样本固定。
组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作。
一般标本固定时间控制,大标本应适当延长固定时间。
注意事项:
1、 Leagene 乙醇-福尔马林-醋酸固定液有一定刺激性和腐蚀性,请在通风环境下小心操作。
2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同。
常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm ,一般不超过6mm 。
对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期: 12个月有效。
编号 名称 DF0171 Storage 乙醇福尔马林固定液 500ml RT 避光 使用说明书 1份。