齐墩果酸的提取及药理作用研究现状

齐墩果酸的提取及药理作用研究现状摘要：齐墩果酸作为五环三萜类化合物，因其在自然界中分布广泛、易提取、药用价值高等原因，成为医药研究的重要内容之一。

通过查找归纳总结，得到四种提取方法：微波法、超临界CO2流体萃取法、醇提法和超声提取法。

齐墩果酸的主要药理性质：降糖、降脂、保肝、护肾、抗肿瘤、双向免疫调节等作用。

关键词：齐墩果酸、提取、药理作用1 引言自古以来，人类就不间断的与各色各样的疾病作抗争，伴随出现的是医者前仆后继的对药物和疾病的钻研。

前有神农尝百草，后有屠呦呦研发青蒿素。

作为现在耳熟能详的抗生素，其实早在古代时古埃及人、中国人、和印第安人就已经利用过霉菌来治疗感染的伤口了。

只是当时并不了解霉菌的抗菌性与治疗疾病之间的联系，直至1889年由Louis Pasteur的学生Paul Vuillemin首次提出antibiotic（抗生素）这个构想，在医药界抗生素真正引来了高速发展的时代。

随着时间的过去，无数人的经验和智慧总结，21世纪抗生素已经得到了空前的发展。

但是新的问题出现了：在这个时代人们的潜意识里，抗生素和耐药性中间在不知不觉中似乎画上了等号。

这场由抗生素带来的灾难在很长的一段时间内成为人类死亡的重要原因，抗生素的耐药性造成的“无药可用”也成为了当今需要攻克的主要问题之一。

在现在的技术下，要想缓解抗生素耐药性带来的影响，主要的研究方向就放在：研发新的抗生素，扩大抗生素的数量上。

研发全新的同效抗菌药，替代传统抗生素。

天然药物作为人类医药研究历史上一直不懈研究的重要内容，具有自然界分布广泛、成本低、研究经验丰富等优点，自然成为代替抗生素的优先选择。

齐墩果酸是五环三萜类化合物，在自然界多种植物中都发现其存在，资源丰富。

齐墩果酸具有分布广、药理作用广泛、不良作用小、耐药性不易产生等优点。

因此成为最佳的研究对象之一。

齐墩果酸又称四庆素，隶属于天然产物化学成分，通常以游离态或结合成苷的形式广泛存在于太白楤木、女贞子、青叶胆、枇杷叶、雪胆、连翘、蛇百草、夏枯草等植物中。

齐墩果酸最初是由Winterstein’s在Olea europaea L（齐墩果）的叶子中提取而来，因此得名Oleanolic acid[1]。

自研究以来陆陆续续发现齐墩果酸蕴含多种药理作用，现今主要有护肝、抗炎、抗癌、抗肿瘤、降糖、降脂、免疫双向调节等药理作用。

不过由于齐墩果酸特殊的脂溶性，导致齐墩果酸的生物利用度较低，目前在中国主要用于急性和慢性肝炎的治疗，而齐墩果酸的其他药理性质能否或怎样应用在临床上还在研究实验阶段。

另外针对于齐墩果酸的另一个研究重点──齐墩果酸的提取，目前齐墩果酸的主要使用物理方式提取，可以概括为微波法、超临界CO2流体萃取法、醇提法和超声提取法。

2 齐墩果酸的提取齐墩果酸的提取方法主要有:溶剂提取法（主要是醇提取和水提取）、超临界CO2萃取法、微波辅助提取法（现用较少）、超声提取法。

目前国内主要以以下三种工艺提取齐墩果酸，分别是：醇提-酸水解法；醇提-酸碱反复提取法；发酵-酸碱处理法。

2.1 不同植物中齐墩果酸的含量比较自然界中约60科190种植物中被发现含有齐墩果酸，且不同植物中含有的齐墩果酸的含量和存在方式也不尽相同[2]。

那么，选取齐墩果酸高含量的植物进行齐墩果酸的提取是增加齐墩果酸产量的先决条件。

表一：不同植物中齐墩果酸的含量[1,2]序号名称科属含量1 太白楤木茎皮五加科 12.062 太白楤木根皮五加科 10.813 太白楤木叶五加科 6.664 女贞子蔷薇科 8.045 青叶胆龙胆科 1.426 雪胆葫芦科 1.157 连翘木犀科 0.738 枇杷叶木犀科 0.689 蛇百子唇形科 0.49...... ...... ...... ......由上表我们可以明显的看出齐墩果酸在不同植物中的含量有所不同，并且即使是在同一植物的不同部位的其含量也不尽相同，甚至在植物的不同生长阶段植物中齐墩果酸的含量也存在差异。

为了高产量的得到齐墩果酸，除了选择含量高的植物，也要考虑环境资源等方面的问题。

选取齐墩果酸含量高、自然资源丰富、易再生、易栽培的植物。

更重要的是选择合适的提取方法，并通过不断优化提取工艺高产量提取齐墩果酸。

2.2 使用醇提法对女贞子中齐墩果酸的提取醇提法即使用乙醇为萃取剂，利用目标提取物在乙醇中的高溶解度，将其从物料中溶解出来的方法，是比较常用的提取方法。

齐墩果酸不能溶于水，但在乙醇和氯仿中却有相当的溶解性。

齐墩果酸的化学性质也决定了齐墩果酸的提取方法可用醇提法。

赵生俊、张红等[3]人使用醇提法，对女贞子中齐墩果酸的提取进行了研究。

经研究得出：醇提法提取齐墩果酸的主要影响因素是：乙醇浓度>回流提取时间>乙醇倍数。

最佳乙醇浓度为95%，最适回流提取时间为3h，最适乙醇倍数为9倍，实验萃取率达32.09%。

另外上述使用醇提法提取女贞子中齐墩果酸的最佳条件并不适用于所有情况（只适用于实验室提取），工业提取会考虑到经济成本和时间成本等问题选用最能降低成本的提取条件。

例如：王新苹和王玲[4]等人就曾研究过从女贞子中使用工业醇提法提取齐墩果酸的工艺优化路线。

不单对影响齐墩果酸的提取因素：物料粉碎程度、料液比、乙醇的浓度、提取时间、提取次数、温度、PH等进行研究得到最佳提取条件，还进行单因素实验，选择在提取过程中使用大孔吸附树脂进行优化。

结果得到最佳工艺为：在80℃的条件下，对物料超微粒粉碎，使用60%的乙醇，料液比1:11，提取2次，每次为120分钟，使用PH为12时处理粗提取液，再调节处理过的粗提取液的PH为2进行纯化处理。

另外，经单因素实验得到：选取AB-8和D-101树脂最适对齐墩果酸进行纯化。

2.3 使用超临界CO2流体萃取法对雪胆中齐墩果酸的提取超临界CO2流体萃取法顾名思义是以超临界流体CO2为溶剂，利用对雪胆中齐墩果酸在CO2的高溶解力，来达到提取分离的目的。

该提取方法既避免了传统萃取剂毒性残留的问题，又具有高效率、选择提取等优点。

喻世涛、李路军等[5]人采用了正交实验法，对该法从中华雪胆中提取齐墩果酸的工艺条件进行了优化。

通过单因素实验，对比不同的温度、压力、时间、二氧化碳流量等条件下齐墩果酸的萃取率，推出超临界CO2流体萃取法提取中化雪胆中的齐墩果酸的最佳条件为：在萃取压力为40MP，萃取温度55℃，夹带剂选用无水乙醇，用量5%，二氧化碳流量20kg/h的条件下，萃取5h。

）萃取率高达26.96%，略高于超声提取（22.61%）和回流提取（25.22%）。

同时超临界CO2流体萃取法的齐墩果酸产率略大于超声波提取法和回流提取法，有机溶剂使用少，且提取后对原料的结构、性状等几乎没有改变，不同于溶剂提取法那样提取后需丢弃原料，可再进行其他成分的提取，很大限度的节约了自然资源。

具有产率高、成本低、杂质少、操作简单、实验环境安全等优点。

2.4 使用微波法提取枇杷叶中的齐墩果酸的提取微波辅助提取法是一种利用微波加热物料的选择性提取方法。

提取过程中，使用微波加热由非极性萃取剂浸泡着的物料。

在微波场中物料吸收大量的热量，而非极性萃取剂则吸收较少热量，细胞内部因产生热应力而破裂，破裂后的细胞液直接与相对较冷的萃取剂接触，萃取剂和物料之间的温差使得提取过程强化。

樊爱萍、刘卫等[6]人对枇杷叶中的齐墩果酸的提取工艺进行了实验研究，实验比较了热回流法、冷浸法和微波法提取枇杷叶中的齐墩果酸的萃取效果，结果证明：相比其他两种方法，微波法在枇杷叶中提取齐墩果酸上存在明显的优势。

并采用单因素实验法和正交试验得到微波法提取枇杷叶中齐墩果酸的最佳工艺路线：使用95%乙醇为萃取剂，料液比1：20，在630W提取功率下微波70s，提取率达到84.8%，高于热回流法64.1%和冷浸法61.3%。

2.5 使用超声波法从连翘花中齐墩果酸的提取近年来，在天然产物提取研究中，超声波技术提取法受到广泛的关注。

超声波提取法是利用超声波在振动时产生空化效应，来减少植物细胞内的物质的释放、扩散和溶解转移到溶剂中的时间，并且对提取物质的结构和生物活性都没有影响。

有高效、较低萃取剂使用量、高浸出率等优势。

不过目前仍在研究中。

李艳芝、王建安等[7]人通过使用正交试验法，对使用超声提取法提取连翘花中的齐墩果酸的最佳条进行了实验，得到最佳条件为：12倍的85%的乙醇；超声提取3次；每次60分钟，提取率为4.4608%。

以往常使用连翘的果实为药源来提取齐墩果酸，现发现连翘花的提取率高于连翘的果实部位,扩大了连翘中提取齐墩果酸的药源，实现资源合理利用。

3. 齐墩果酸的药理作用目前在中国国内，齐墩果酸主要被应用在肝炎的辅助治疗上，主要是利用了齐墩果酸的抗炎护肝的药理作用，但除此之外，齐墩果酸还有抗肿瘤、降糖、降脂、双向免疫调节等作用，且毒副作用小。

3.1 齐墩果酸在肝炎方面的临床研究齐墩果酸最早发现的药理作用之一就是其独特的护肝作用。

Jeong H G[8]对此进行了研究。

齐墩果酸不仅在治疗急慢性肝炎上有护肝降酶、促进细胞再生的效果，同时对四氯化碳致肝毒性也有明显的效果。

那么齐墩果酸针对肝毒性的作用机制又是怎样的呢？虽然，四氯化碳并不是能治病肝毒性，但是四氯化碳能在细胞色素P450酶代谢成自由基后产生肝毒性，而齐墩果酸的作用机制也就是：通过抑制P450的表达和活化，阻断四氯化碳成功转化成自由基，进而达到降低肝毒性的效果。

3.2 齐墩果酸护肾利尿齐墩果酸对庆大霉素致肾毒性有保护作用[8]。

经Chandragouda R Patil和Ramchandra B Jadhav等[9]人的研究，齐墩果酸能保护大鼠肾脏，使其避免因庆大霉素致使组织学改变的情况，同时因此也提高了肾小球滤过率，从而达到利尿的效果。

张明发、沈雅琴等[10]人也提出过：齐墩果酸对因药物、高血糖、高血压、梗阻、缺血再灌注等导致的肾损伤以及移植肾均有的较好的保护效果。

3.3 齐墩果酸的降糖降脂作用日常生活中经常能听到的三高，即：高血压、高血糖、高血脂。

其中之一的高血糖极易导致糖尿病，可怕的是糖尿病容易引发各种并发症，如心脑血管疾病、严重的感染、神经病变等等，甚至严重的引起致残、致死。

另一个高血脂，更是能够直接引起许多棘手的疾病，常见的如动脉粥样硬化、冠心病、胰腺炎等疾病。

所以对降糖、降脂方面的药物研究一直是人类医学研究的重点问题之一。

幸运的是齐墩果酸被发现有降糖和降脂的药理作用。

齐墩果酸有降血糖的作用，经柳占彪、王鼎等[11]人使用四氧嘧啶注射的小鼠来作为糖尿病小鼠模型，对其进行了模拟研究发现：单一的使用齐墩果酸治疗小鼠的糖尿病出现明显的治疗效果，并且在治疗过程中，小鼠体内的肝糖原和血清胰岛素出现了明显升高的情况，说明齐墩果酸降血糖的作用很可能与肝糖原和血清胰岛素的含量有联系。