慢性心衰动物模型的制备及指标评定共45页文档
慢性心衰动物模型的制备及指标评定
慢性心衰动物模型的制备及指标评定慢性心衰是一种心血管疾病，其主要特征是心脏功能逐渐衰竭。
为了深入研究慢性心衰的发生机制及治疗方法，科学家们广泛应用动物模型进行实验研究。
下面将介绍慢性心衰动物模型的制备方法以及常用的指标评定方法。
一、慢性心衰动物模型的制备方法：1.高盐饮食法：将小鼠或大鼠的日常饮食中的盐分含量提高，例如增加食盐的含量。
高盐饮食会引起血压升高，从而导致心脏负荷增加，进而发生心衰。
2.高胆固醇饮食法：给小鼠或大鼠注射或灌胃高胆固醇的食物，例如高脂食品。
高胆固醇饮食会引起血液中胆固醇水平升高，导致动脉粥样硬化，心脏供血不足，最终发生心衰。
3.慢性心肌梗塞法：在小鼠或大鼠的冠状动脉中注射致命的微球或通过手术结扎冠状动脉，造成心肌梗塞，进而诱发心衰。
4.肾脏疾病法：通过手术切除小鼠或大鼠的一个或两个肾脏，或者给予肾脏毒素如丙酮酸来诱发肾脏疾病，进而导致心衰的发生。
二、慢性心衰动物模型的指标评定方法：1.心脏形态学指标：通过心脏组织切片染色法，观察心脏组织的肥大程度和纤维化情况。
常用的染色方法有hematoxylin-eosin (HE)染色和Masson's trichrome 染色，通过显微镜观察心脏细胞形态、胶原纤维沉积情况等。
2.心脏生理学指标：使用心电图（ECG）记录动物的心电活动，评估心脏的电生理状态。
常用的心电图参数包括心率、QRS波群、QT间期等。
超声心动图是另一种评估心脏功能的重要工具，可以测量心腔内径、心肌收缩力等参数，来评估心脏的收缩和舒张功能。
3.血液学指标：采集动物的血液样本，常见的指标包括血红蛋白浓度、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等。
这些指标可以反映动物的贫血情况、炎症反应以及凝血功能等情况。
4.生物化学指标：测定动物血液中的心肌损伤标志物，如肌钙蛋白、心钙蛋白等。
这些标志物在心肌损伤时释放到血液中，可以反映心肌细胞的损伤程度。
5.心脏基因表达：通过转录组学方法，分析心脏细胞内基因的表达变化。
动物实验心衰实验报告
一、实验背景心力衰竭（Heart Failure，HF）是一种复杂的临床综合征，是由于心脏结构和功能的异常，导致心脏泵血能力下降，无法满足身体组织对氧和营养的需求。
心力衰竭的发病机制复杂，涉及心肌细胞损伤、心肌重构、神经体液调节异常等多个方面。
为了深入研究心力衰竭的发病机制和治疗方法，动物实验在心力衰竭研究中具有不可替代的作用。
本实验旨在通过建立动物心力衰竭模型，观察心力衰竭的发生发展过程，并探讨心力衰竭的治疗方法。
二、实验材料与方法1. 实验动物选取3周龄的雄性C57BL/6小鼠，适应性饲养一周，体重约为20g。
2. 实验药物盐酸阿霉素（Adriamycin，ADM），购自Sigma公司。
3. 实验仪器心脏超声仪、电子天平、注射器、注射针、解剖显微镜等。
4. 实验方法（1）动物分组将实验动物随机分为两组，每组10只：对照组和实验组。
（2）造模方法实验组：采用阿霉素诱导小鼠心力衰竭模型。
按照2mg/kg的剂量，给实验组小鼠连续给药6周，对照组小鼠给予等量的生理盐水。
（3）指标检测1）心脏超声检查：在第6周给药结束后，对所有小鼠进行心脏超声检查，观察心脏结构及功能变化。
2）心肌细胞凋亡检测：采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况。
3）血清心肌酶检测：采用ELISA法检测血清中心肌酶水平。
4）心肌组织病理学观察：取小鼠心脏组织，进行HE染色，观察心肌组织形态学变化。
三、实验结果1. 心脏超声检查与对照组相比，实验组小鼠心脏形态学改变明显，左心室射血分数（LVEF）显著降低，左心室收缩末期内径（LVESD）和左心室舒张末期内径（LVEDD）明显增大。
2. 心肌细胞凋亡检测与对照组相比，实验组小鼠心肌细胞凋亡明显增多。
3. 血清心肌酶检测与对照组相比，实验组小鼠血清中心肌酶水平显著升高。
4. 心肌组织病理学观察与对照组相比，实验组小鼠心肌组织出现明显的心肌细胞肥大、纤维化及炎症细胞浸润等病理改变。
四、讨论本实验通过阿霉素诱导小鼠心力衰竭模型，成功建立了心力衰竭动物模型。
心力衰竭大鼠模型制备和评估
平较 对 照 组 明 显 增 高 ， 且 随 着 ＭＤ Ｓ进 展 而 增 高 。
Ｔ ｒ ｅ ｇ 细 胞分 泌 的 Ｔ Ｇ Ｆ一１ ３和 Ｉ Ｌ一１ ０水 平 显 著 增 高 ， 提示 机体 免 疫耐 受 性增 强 。Ｔ Ｇ Ｆ—ｐ、 Ｉ Ｌ一１ ７、 Ｉ Ｌ一２ １ 和 Ｉ Ｌ一 ２ ２均 能促 进 Ｔ ｈ ｌ ７细 胞 的 分 化 ， 导致 Ｔ ｈ ｌ ７细 胞扩 增 。在 宫 颈 癌 、 卵巢 癌 等 肿 瘤 的研 究 中 已证 实 Ｉ Ｌ一１ ７通 过刺 激 新 生 血管 的形 成 ， 促 进 这 些 肿 瘤 的 生 长 ＇ 加 ］ 。综 上 所述 ， 笔 者推 测 ， ＭＤ Ｓ骨髓 组 织 微 环 境 中扩 增 的 Ｔ ｒ ｅ ｇ细胞 和 Ｔ ｈ ｌ ７细 胞 ， 通 过分 泌 大 量 的 细 胞 因子 ， 一 方 面抑制 免 疫系 统活 性增 加机 体对 肿 瘤 细 胞 的免疫 耐受 性 ， 另一方 面促 进 骨髓组 织新 生 血 管 增生 ， 利于 肿瘤 细胞 增殖 ， 加 快 ＭＤ Ｓ病程 进展 。 总之 ， 笔者 的研 究 表 明 ， ＭＤ Ｓ骨髓 组 织 微 环 境 中 呈现 Ｔ ｒ ｅ ｇ 细 胞和 Ｔ ｈ ｌ ７细胞 同 时扩 增 的现 象 ， 并 且 与 病 程进 展密 切相 关 ， 为 ＭＤ Ｓ的 免疫 治疗 提供 了新 思
ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｅ ｓ Ｔ ｈ ｌ ７ Ｔ ｈ ｅ ｌ ｐ ｅ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ［ Ｊ ］ ． Ｂ ｒ Ｊ Ｈ ａ ｅ ｍ ａ ｔ ｏ ｌ ， ２ ０ １ ０ ， １ ４ ８ （ ６ ） ： ９ ４ ８—
９ ５ ０
卞寿庚． 白血病 ［ Ｍ］ ． 北京 ： 中 国 医 药 科 技 出 版社 ， ２ ０ ０ ３： ３ ５ ９
９
心衰模型制备方法
心衰模型制备方法
心衰是一种严重的心血管疾病，其发病机制复杂，治疗方法多样。
为了深入研究心衰的发病机制以及寻找新的治疗方法，制备合适的动物模型成为了非常重要的工作。
制备心衰模型的方法有多种，其中常用的方法包括手术诱导、药物诱导和基因工程等。
手术诱导模型是最常见的制备方法之一，它通过手术操作，创造心肌损伤或者心血管病变的条件，进而引发心衰的发生。
常用的手术诱导方法包括冠状动脉结扎、心肌梗死模型以及心室肥厚模型等。
这些手术模型能够有效地模拟心衰病变的情况，但操作复杂且对动物造成一定程度的伤害。
药物诱导模型是另一种常用的制备方法。
通过给动物注射特定的药物，如多巴胺拮抗剂、心脏毒性药物等，可以模拟心衰的发生过程。
这种方法相对简单，但药物的选择和剂量的确定需要经过一定的实验验证。
基因工程模型是近年来发展起来的新型制备方法。
通过基因工程技术，可以针对特定的基因进行改造，使其在动物体内表达异常或者缺失，从而模拟心衰的发生。
这种模型更加接近人类心衰的发生机制，但操作相对复杂，对于基因工程技术的要求也较高。
无论是哪种制备方法，制备心衰模型都需要严格的操作和合适的动物
选择。
同时，动物的饲养条件以及模型制备过程中的监测和评估也非常重要。
制备好的心衰模型可以为心衰的发病机制研究以及治疗方法的探索提供有力的工具，为心衰患者的治疗带来希望。
大鼠慢性充血性心力衰竭模型的建立与评价
ｌ 实验材 料和 方法
１ １ 材 料 和 仪 器 ．
计， 成人 心衰 患病 率 为 ０ ９ ； 美 国心脏 病 学会 （ ＨＡ） ．％ 据 Ａ ２０ ０ ５年的统 计报告 ， 美约有 ５ ０万心 衰 患者 ， 全 ０ 心衰 的 年 增 长数 为 ５ ５万 。但近 年 来 ， 着循 证 医学 的发展 及 有 关 随 心 力衰竭 基础研 究 的深 入 ， ｆ ｘ 心力 衰 竭 的发病 机 制 ， 人 ｆ￣ ３ 病 理生理 机制 及 临 床 预 防 和治 疗 有 了更 深 入 的 了解 ， 其
出现 毛 发 光 泽 不 良、 吸 急 促 、 背 及 尾 巴 紫 绀 和 水 肿 、 动 力 下 降 等 临 床 症 状 ； 后 ， 型 组 大 鼠 ＩＳ 、 呼 爪 活 ４周 模 Ｖ ｄ
ＬＰ Ｖ Ｗｄ和 Ｌ Ｅ ｄ均增 加 （ ０ ０ ） 分 别 为 （ ． ４±０ ２ Ｓ ｌ７ Ｖ Ｄ Ｐ＜ ． ５ ， ２３ ． ５ Ｖ ＿ ３±０ １ ） ｍ、 ２ ４ ０ １ Ｓ１ ５ ０ ３ ） ． ４ ｍ （ ． ３± ． ４ Ｖ ． ５± ． １ ｍ 和 （ ． ７± ． ６ Ｖ ５ ５ ０ ２ ） ｍ； 后 ， 型 组 大 鼠 Ｉ Ｓ （ ． ７± ． ３ Ｖ ３ ０ ０ ３ ） ｍ， ０ ０ 、 ｍ ５ ５ ０ ２ Ｓ ． ７± ． ６ ｍ ８周 模 Ｖ ｄ ３ ０ ０ ３ Ｓ ． ７± ． ３ ｍ Ｐ＜ ． ５
肌 重 量 指 数 明 显 高 于假 手 术 组 ； 理 结 果 显 示 ， 型 组 心 肌 细胞 体 积 增 大 直 径 增 宽 ， 胞 排 列 不 整 齐 、 色不 病 模 细 染
均、 间质纤 维化 明显 。结论
慢性心力衰竭动物模型制作进展
慢性心力衰竭动物模型制作进展慢性心力衰竭（chronic heart failure，CHF）是多种心血管疾病的终末状态，虽然当前标准的心衰治疗能改善预后，但仍不能达到完全缓解心衰的症状，需要新的治疗手段来阻止、延缓疾病的发展，逆转衰竭心脏的结构和功能。
而新的治疗手段在临床应用之前必须在心衰动物模型身上进行验证，因此选择合适的心衰动物模型对于心力衰竭疾病发展的认识及新的治疗手段的进展极为关键。
本文对CHF动物模型制作进行综述。
标签：心力衰竭；动物模型；肥厚；慢性充血性心力衰竭动物模型制作方法主要有心肌缺血型、压力负荷型、容量负荷型和心肌病变型等[1～3]，这些模型的建立对于研究心力衰竭发展过程中的血流动力学改变、神经内分泌系统、心肌细胞和亚细胞水平的改变提供了重要资料，解决了临床上有关心力衰竭病理生理和发病机制的相关问题。
本文根据心衰病因对相关心衰动物模型制备做一简述。
1 心脏瓣膜病心力衰竭动物模型1.1 主动脉瓣狭窄（aortic stenosis，AS）主动脉狭窄的常见原因是动脉粥样硬化和主动脉瓣畸形（主动脉二叶瓣）。
主动脉瓣膜僵硬度增加和瓣口面积减少，导致左室射血阻力增加即左室后负荷增加，这种变化需要左室增加压力以推动血流通过减少的主动脉瓣口。
其引起的左室肥厚是典型的向心性肥厚，室壁增厚而左室容积不变或缩小。
在分子水平，心肌细胞因肌小节增加而肥大，另外心肌内纤维母细胞增殖和局部大量激活的生物活性分子导致细胞外基质沉积增加。
具备人类AS关键特征表现的动物模型应具备以下几点：1）缓慢的逐渐进展的左室-主动脉压力梯度。
2）早期表现为左室肥厚，具有心肌细胞横截面积增加、心肌纤维化和正常的射血分数特征。
3）中晚期心肌纤维化和舒张功能障碍使得左室充盈压力增加、左房增大、收缩功能下降并出现渐进性心衰症状。
已有报道使用猫、狗、羊和猪通过在主动脉瓣上行主动脉缩窄的方法来制作AS心衰模型。
制作的动物模型复制了人类AS的关键特征包括左室-主动脉压力梯度的渐进性增加、代偿的左室重塑，心肌细胞肥大的左室肥厚、代表舒张性心衰证据的心肌基质异常等[4]。
心衰进展药理药效研究-动物模型
在初始的心肌损伤以后,有多种内源性的 神经内分泌和细胞因子的激活,包括去甲肾 上腺素、血管紧张素Ⅱ(ＡｎｇⅡ)、醛固 酮,其他如内皮素、肿瘤坏死因子等,在心力 衰竭患者均有循环水平或组织水平的升高。
神经内分泌细胞因子系统的长期、慢性 激活促进心肌重塑,加重心肌损伤和心功能 恶化,又进一步激活神经内分泌细胞因子等, 形成恶性循环。
近年来研究发现,BNP 具有重要的病理生 理学意义,可作为心力衰竭的血浆标志物, 用于心力衰竭的诊断、严重程度的判断、 治疗、预后评估,指导正确、有效地治疗 心力衰竭。
2500
2013 ± 266
2000
BNP 浓度(pg/ml)来自1500 1000791 ± 165
500 186 ± 22
0
轻度
方法简易、安全、方便，用以评定慢性心 衰
分级 重度：〈150m
中度：150~425m
轻度：426~550m
舒张功能不全性心力衰竭的诊 断
（中国心衰协会简化标准） ①临床上存在可导致左室舒张功能障碍的
心血管系统疾病。 ②有呼吸困难等左心衰竭症状。 ③体征和X线检查示肺淤血。 ④左室不大，左室射血分数>50%。
,心力衰竭是一种进行性的病变,一旦起始以 后,即使没有新的心肌损害,临床亦处于稳定 阶段,仍可自身不断发展(selfperpetuationg)。
目前已明确,导致心力衰竭发生发展的基 本机制是心室重塑。
心室重塑是由于一系列复杂的分子和细胞 机制导致心肌结构、功能和表型的变化。 这些变化包括:心肌细胞肥大、凋亡,胚胎 基因和蛋白质的再表达,心肌细胞外基质 量和组成的变化。
心力衰竭的治疗目标不仅仅是改善症状、 提高生活质量,更重要的是针对心肌重塑的 机制,防止和延缓心肌重塑的发展,从而降低 心力衰竭的死亡率和住院率。
《心衰模型动物实验》课件
02
心脏压力超负荷模型
通过在心脏上附加额外重量或注射药物等方式，使心脏承受过度的压力，引发心衰。
对模型动物的心脏进行病理学检查，观察心肌细胞肥大、纤维化等病理改变。
通过超声心动图、磁共振成像等技术测定模型动物的心功能指标，如射血分数、心室扩大等。
观察模型动物的生存率，以评估心衰的严重程度。
检测模型动物血液中的生物标志物，如B型利钠肽（BNP）和肌钙蛋白等，以评估心衰的严重程度。
心衰模型动物实验存在一定的局限性，如动物模型的适用性和可靠性问题、实验结果的泛化问题等。此外，动物实验还涉及到伦理和法律等问题，需要严格遵守相关规定。
针对心衰模型动物实验的优缺点，可以从以下几个方面进行改进和完善。首先，加强动物模型的研发和优化，提高模型的适用性和可靠性；其次，加强实验方法的规范化和标准化，提高实验结果的准确性和可比性；最后，加强动物实验与临床研究的结合，推动心衰防治技术的创新和发展。
优点
缺点
改进方向
05
心衰模型动物实验的应用与展望
Chapter
探索心衰的发病机制
通过心衰模型动物实验，可以深入研究心衰的发病机制，了解心衰的发展过程和影响因素。
评估心衰治疗效果
通过对比不同治疗措施对心衰模型动物的影响，评估各种治疗方法的疗效和优缺点，为临床治疗提供参考。
药物研发与筛选
心衰模型动物实验可用于新药的研发和筛选，通过观察药物对心衰模型动物的治疗效果，评估药物的潜在疗效和安全性。
心衰模型动物实验
目录
心衰模型动物实验概述心衰模型动物的选择与制备心衰模型动物实验的设计与实施心衰模型动物实验的结果与讨论心衰模型动物实验的应用与展望
01
心衰模型动物实验概述
Chapter
SD大鼠阿霉素慢性心力衰竭模型的建立与评价
SD大鼠阿霉素慢性心力衰竭模型的建立与评价吴运香;张野;谢春林;张书杰;解翔;姜凡;陈志武【摘要】Aim To establish and evaluate an adriamycin-induced chronic heart failure model by tail vein injection in Sprague Dawley ( SD ) rats. Methods Adult male SD rats were randomly divided into two groups : the control group ( CON,n = 8 ) and the adriamycin-induced heart failure group ( ADR,n = 20 ).All rats in ADR group received 2 mg · kg-1adriamycin as an intravenous tail vein infusion once a week for 6 weeks at a total dose of 12 mg · kg-1 ; meanwhile in CON group, rats received an equal volume of 0. 9％ sodium chloride intravenously. Transthoracic: echocardiography was performed to observe cardiac function including left ventricular end-diastolic diameter( LVEDD ) and end-systolic diameter ( LVESD ) and calculate left ventricular fractional shortening ( LVFS ) and ejection fraction ( LVEF ) 2 weeks later after the last injection. The pathological c:hange was analyzed by HE and Van Gieson ( VG ) stain. The plasma concentration of brain natriuretic peptide ( BNP ) was determined by euzymelinked immunosorbent assay ( ELISA ). Results Compared with CON group, LVEDD and LVESD were increased in ADR group, and LVFS and LVEF were significantly decreased ( P ＜ 0. 01 ). The pathological changes by HE stain in ADR group were part of myocardial fiber fracture and myocardial periacardial inflammatory infiltration. Collagen volume fraction ( CVF ) and perivascular circumferential collagen area ( PVCA )by VG stain were significantly higher( P ＜ 0. 01 ) than CON group. And the level of plasmaBNP was significantly higher than that in CON group. Conclusions Adriamycin at a multiple intravenous dose of 2. 0 mg · kg-1 can be used to establish a reliable model of non-ischemia chronic heart failure in SD rats and lead to a decline in ventricular function and pathological changes.%目的通过尾静脉注射阿霉素建立SD大鼠慢性心力衰竭模型,并对其进行评价.方法成年♂SD大鼠随机分为两组:正常对照组(CON组,n=8)和阿霉素心力衰竭组(ADR 组,n=20).ADR组尾静脉注射阿霉素2 mg·kg-1,每周1次,计6周,累积剂量达12 mg·kg-1;CON组静脉注射等容积0.9%的氯化钠溶液,周期同前.末次注射2周后超声心动图测定心功能包括左心室舒张末内径(LVEDD)和收缩末内径(LVESD)并计算左室短轴缩短率(LVFS)及射血分数(LVEF);病理学检测包括HE及VG染色观察心肌组织形态学改变;ELISA法测定血浆BNP浓度.结果与CON组相比,ADR组大鼠LVEDD和LVESD增加,LVFS和LVEF明显下降(P<0.01);HE染色可见部分心肌纤维断裂,心肌间质炎细胞浸润;VG染色心肌间质胶原容积分数(CVF)及心肌血管周围胶原面积(PVCA)明显增加(P<0.01),心肌纤维化明显;血浆BNP水平升高(P<0.01).结论静脉多次注射阿霉素能够导致SD大鼠心功能降低和心肌组织形态学改变,成功建立可靠的非缺血性慢性心力衰竭模型.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2011(027)008【总页数】4页(P1170-1173)【关键词】动物模型;大鼠;阿霉素;心力衰竭;超声心动图;脑利钠肽【作者】吴运香;张野;谢春林;张书杰;解翔;姜凡;陈志武【作者单位】安徽医科大学第二附属医院麻醉科,安徽,合肥,230601;安徽医科大学第二附属医院麻醉科,安徽,合肥,230601;安徽医科大学第二附属医院麻醉科,安徽,合肥,230601;安徽医科大学第二附属医院超声诊断科,安徽,合肥,230601;安徽医科大学第二附属医院超声诊断科,安徽,合肥,230601;安徽医科大学第二附属医院超声诊断科,安徽,合肥,230601;安徽医科大学药理学教研室,安徽,合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R-332;R322.11;R363-332;R540.45;R541.61;R979.1慢性心力衰竭是各种心血管疾病发展的终末阶段，近年来呈上升趋势，严重威胁人类的健康。
动物慢性心衰模型评价及诊断现况
…
动 物心 衰 诊断 指标 最 早是 １ ９ ８ ２年 Ｂ ｉ ｓ ｈ ｏ ｐ １ 等…】
（ 最 早 是在 ＜ ＜ Ｃ ｏ ｎ ｇ ｅ ｓ ｔ ｉ ｖ ｅ ｈ ｅ ａ ｒ ｔ ｆ ａ ｉ ｌ ｕ ｒ ｅ ） ） 提 到） 提 出 。心
动物晚期心 衰症状非常严重 ， 包括严重呼吸 困难 、 腹水严重 、 难 以
…
密 切相 关［ ４ ＿ ｍ Ｊ 。心衰模 型可模拟 心衰病理生理 发 展 过程 ， 从 而为心衰 发生 、 发展 、 治 疗 及 预 后 的 研
究 提 供 良好 平 台 。
对正常 生活产生木利影 响。典型临床表现包括活动耐量下降 、 咳 嗽、 气促 、 轻 度呼吸窘迫 、 轻度腹水 。休息状态通常不表现出循环
述 了动物 心 衰 分级 （ 见表 １ ） 。但 是 该分 级存 在 一 定 不足： ① 标准 的制 定 很 大程 度 上 借 鉴 人体 的心 衰 诊
Ⅲａ 可行 需住 院治疗（ 心源性休 克、 危及 生命的 肺水肿及 大量胸
腔积液存在 ）
断标准， 缺 乏循 证 医学 证 据 。② 心 衰 的 指标 不 够 详
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ６ ７ ２ － ５ ３ ０ １ ． ２ ０ １ ７ ． １ ０ ． ０ Ｏ ４ 中图分类号 Ｒ ５ ４ １ ． ６ 文献 标识码 Ａ 文章 编号 １ ６ ７ ２ — ５ ３ ０ １ （ ２ ０ １ ７） １ ０ — ０ ８ ７ ７ — ０ ５
动物无临床心衰症状且不影响动物 生活 ， 但可检测到动物 出现心
表 １ 国 际动 物 心 衰 评 价 表
率为 ｌ ％～ ２ ％，年 龄 ＞ ７ ０岁 的 人 群 中 ，升 高 至 １ ０ ％ 以上 【 ｌ ， ｚ 】 。 国 内最 新 的 流 行 病 学 研 究 发 现 ， 中 国 ３ ５ — ７ ４岁 的 人 群 中 有 ４ ０ ０万 慢 性 心 衰 患 者 ，
心力衰竭小鼠模型的建立方法
心力衰竭小鼠模型的建立方法哎呀，咱今儿就来说说心力衰竭小鼠模型的建立方法。
你想想啊，这小鼠就像是个小实验台，咱得在它身上捣鼓出心力衰竭的状态来，这可不是件容易事儿，但咱得试试不是？先得选好小鼠呀，这就跟挑选手下一样，得挑个健康活泼的，不然一开始就病恹恹的，那后面还咋搞。
然后呢，得给它来点刺激，就像生活中突然来了个大挑战。
比如说，可以通过手术的办法，给它的心脏来点小“折腾”，让它的心脏工作起来不那么顺畅。
这就好比一辆汽车，本来跑得好好的，咱给它的发动机动点手脚，让它没那么有力气跑了。
或者呢，用些药物去影响它的心脏功能，就像给它的心脏喝了杯“迷魂汤”一样，让它晕乎起来。
还有哦，得时刻关注着这些小鼠的状态。
它们就像咱的宝贝疙瘩，咱得知道它们啥时候不舒服了，啥时候心力衰竭的症状出来了。
这就需要咱细心观察，就像妈妈观察孩子有没有生病一样。
要是不仔细，那可就白忙活啦。
咱建立这个模型可不是为了好玩，是为了研究心力衰竭这个大难题呀。
就好像我们要去攻打一个坚固的城堡，这个小鼠模型就是我们的先锋队，得先探出个究竟来。
通过研究这些小鼠，我们能知道心力衰竭是怎么发生的，怎么发展的，然后才能找到更好的办法去对付它。
你说这是不是很重要？这就像我们在黑暗中摸索，这个小鼠模型就是那点亮光，能给我们指引方向呢。
而且，建立这个模型也不是一次就能成功的，可能得试很多次，就像我们学走路，得摔很多跤才能走稳一样。
咱可不能怕失败，要勇往直前。
这些小鼠也是为了科学在做贡献呀，它们可是大功臣呢！咱得好好对待它们，让它们的付出有价值。
总之呢，心力衰竭小鼠模型的建立方法虽然复杂，但咱有决心，有耐心，肯定能做好。
让我们一起为了攻克心力衰竭这个难题而努力吧！这是多么有意义的事情呀，难道不是吗？。
慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩大鼠模型的建立与评价
慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩大鼠模型的建立与评价张美沙1,2,宿玮洁1,2,王勇3,喇孝瑾1,2,程顺昇1,2,李小龙1,2,常宏1,2摘要目的:探讨慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩模型建立方法,通过观察骨骼肌组织形态学和涉及萎缩相关的指标,探讨慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩涉及的分子靶点㊂方法:通过结扎大鼠左侧冠状动脉前降支的方法来建立大鼠慢性心力衰竭模型㊂术后3d 进行心电图检测㊂术后饲养12周,检测大鼠心脏射血分数(EF)和血清N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)浓度,观察心脏大体结构和苏木精-伊红(HE)染色后组织形态,确定心力衰竭模型是否复制成功㊂同时测量大鼠抓力㊁腓肠肌重量,观察腓肠肌的大体结构和HE染色后组织形态,确定大鼠慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩模型成功建立㊂应用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测腓肠肌组织中肌球蛋白重链(MyHC)㊁肌萎缩Fbox-1蛋白(Atrogin-1)㊁肌肉环指蛋白-1(MuRF-1)㊁叉头转录因子1(FOXO1)蛋白表达㊂结果:与假手术组相比,模型组心电图出现病理性Q波,心脏EF明显下降(P<0.01),血清NT-proBNP浓度明显升高(P<0.01),心脏体积变大而且水肿,左心室前壁明显凹陷,HE染色观察到心肌组织的排列很不规则;大鼠腓肠肌组织疏松,颜色偏暗淡,抓力和腓肠肌重量下降(P<0.01),肌纤维横截面积明显缩小(P<0.01)㊂Western Blot检测显示,与假手术组比较,模型组大鼠萎缩相关蛋白Atrogin-1㊁MuRF-1和FOXO1表达明显升高(P<0.05),而MyHC蛋白表达下降(P<0.05)㊂结论:FOXO1-Atrogin-1/MuRF-1通路在慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩中发挥重要作用,该模型的建立为临床防治此类疾病提供了实验基础㊂关键词慢性心力衰竭;骨骼肌萎缩;N末端脑钠肽前体;心脏射血分数;实验研究d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2023.05.010Establishment and Evaluation of Rat Model of Chronic Heart Failure Combined with Skeletal Muscle AtrophyZHANG Meisha,SU Weijie,WANG Yong,LA Xiaojin,CHENG Shunsheng,LI Xiaolong,CHANG HongTraditional Chinese Medicine College,North China University of Science and Technology,Tangshan063210,Hebei,China;Hebei Key Laboratory of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine for Prevention and Treatment of Diabetes and Its Complications, Tangshan063210,Hebei,ChinaCorresponding Author CHANG Hong,E-mail:******************Abstract Objective:To explore the establishment method of rat model of chronic heart failure combined with skeletal muscle atrophy, and to investigate the molecular targets by observing the histomorphology of skeletal muscle and indicators related to skeletal muscle atrophy.Methods:The anterior descending of left coronary artery was ligated to establish the rat model of chronic heart failure. Electrocardiogram was performed3days after surgery.After12weeks of feeding,in order to determine whether the heart failure model of rat was successfully replicated,the cardiac ejection fraction(EF)and serum NT-proBNP concentration were detected,and the structure and histological morphology of heart were observed after hematoxylin-eosin(HE)staining.Meanwhile,the grip strength and gastrocnemius muscle weight were measured,gastrocnemius muscle structure and histological morphology after HE staining were observed to determine whether the model of chronic heart failure combined with skeletal muscle atrophy in rat was successful establishment.Western Blot was used to detect the protein expressions of myosin heavy chain(MyHC),Atrogin-1,muscle ring finger protein-1(MuRF1),and forkhead transcription factors of O class1(FOXO1).Results:Compared with sham operation group,data in model group showed as follows.Pathological Q waves were observed in electrocardiogram,cardiac ejection fraction was significantly decreased(P<0.01),NT-proBNP concentration was increased(P<0.01).The rat heart was enlarged,accompanied with edema,and the anterior wall of the left ventricle was significantly sunken.HE staining data showed that myocardial tissues were irregular arrangement. Gastrocnemius tissue looked dull and felt loose.The grip strength,the weight of gastrocnemius,and the cross-sectional area of muscle fiber were significantly decreased(P<0.01).Western Blot indicated that atrophy related protein expressions of Atrogin-1,MurF-1,and FOXO1were significantly elevated,while MyHC expression was decreased(P<0.05).Conclusions:FOXO1-Atrogin-1/MuRF-1pathway plays an important role in chronic heart failure combined with skeletal muscle atrophy.The establishment of this model provides an experimental basis for clinical prevention and treatment of chronic heart failure combined with skeletal muscle atrophy. Keywords chronic heart failure;skeletal muscle atrophy;N-terminal pro-brain natriuretic peptide;ejection fraction;experiment research慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是多种基金项目国家自然科学基金项目(No.81803936);河北省教育厅科学技术研究项目(No.QN2019004)作者单位 1.华北理工大学中医学院(河北唐山063210);2.河北省中西医结合防治糖尿病及其并发症重点实验室(河北唐山063210);3.北京中医药大学中医学院通讯作者常宏,E-mail:******************引用信息张美沙,宿玮洁,王勇,等.慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩大鼠模型的建立与评价[J].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(5): 816-820.心血管疾病发生发展的最终归属[1],慢性心力衰竭的患病率随着我国人口老龄化问题的加剧而呈现逐年增加趋势[2]㊂慢性心力衰竭病人最常见的症状之一是运动耐量的降低,表现为活动后出现疲劳㊁乏力和呼吸困难等,而这一系列症状的出现不仅是病人心脏射血分数降低的原因,还与病人的骨骼肌出现萎缩密切相关[3-4]㊂研究发现,大部分慢性心力衰竭病人在早期就有外周骨骼肌组织的减少[5],其疲乏㊁气短的症状也会随着骨骼肌出现萎缩而逐渐加重㊂骨骼肌出现萎缩不仅导致慢性心力衰竭病人日常生活受到限制,还明显增加了其发病率和死亡率,导致病人的病情进展和不良预后[6-8]㊂本研究构建慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩模型,通过观察骨骼肌组织形态学和涉及萎缩相关的指标,探讨慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩涉及的分子靶点,为临床对该疾病的防治提供思路和实验基础㊂1材料与方法1.1材料1.1.1实验动物选取6周龄的雄性无特定病原体(specefic pathogen free,SPF)级SD大鼠16只,体质量(200ʃ10)g,购自北京华阜康生物科技股份有限公司,饲养于华北理工大学实验动物中心的SPF级动物房㊂动物房实验条件为室温(23ʃ2)ħ,湿度(50ʃ5)%,光暗周期为12h交替1次,大鼠可以自由获得饲料和水㊂本实验研究中涉及的操作符合‘实验动物管理条例“,并通过华北理工大学伦理委员会审查批准(批号:LX201851)㊂1.1.2主要试剂与仪器N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)试剂盒(Andy gene,货号:AD202104);苏木精染色液(Baso,货号:c210402);伊红染色液(Baso,货号: c201102);聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶制备试剂盒(ZOMANBIO,货号:ZD304A-2);5ˑ上样缓冲液(Report,货号:RP-WA0301);三色预染Marker (BIOTIDES,货号:WB1902);聚偏二氟乙烯(PVDF)膜(Roche,货号:43487300);10ˑSDS-PAGE电泳缓冲液500mL(普利莱,B1005);10ˑ蛋白电泳电转移缓冲液500mL(SOLARBIO,货号:D1060);20ˑTBST500 mL(SOLARBIO,货号:T1082);增强型化学发光试剂(ECL)(Report,货号:RP-WA0601);Anti-Myosin heavy chain antibody[JF097-7](华安生物,货号: ET1702-88);Anti-FOXO1A antibody[SU33-01](华安生物,货号:ET1608-25);Anti-GAPDH Antibody [SA30-01](华安生物,货号:ET1601-4);Anti-MuRF-1 antibody(ABclonal,货号:A3101);Anti-Atrogin-1 antibody(华安生物,货号:JE41-27);二抗(兔抗大鼠,北京普利莱,货号:C1309)㊂组织脱水机㊁组织切片机(LEICA,TP1020㊁RM2245);显微镜(OLYMPUS,BX53);凝胶成像仪(美国,BIO-RAD伯乐);电泳槽(君意,JY-ZY5);电泳仪(君意,JY600C)㊂1.2方法1.2.1模型制备正常雄性SPF级SD大鼠16只,动物房内适应性饲养1周,随机分为模型组(8只)和假手术组(8只)㊂参考之前大鼠心力衰竭模型的制备[9],采用左侧冠状动脉前降支结扎术造模㊂模型组大鼠以1%戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉后行内镜下气管插管,并连接小动物呼吸机㊂大鼠固定后剃毛㊁消毒,打开左胸第3肋㊁第4肋间,在距离左心耳1.0~1.5 mm处结扎前降支㊂假手术组大鼠麻醉后开胸,缝合针带线穿过与模型组相同位置的浅层,不做结扎,余操作同模型组㊂结扎完成后在心脏表面滴1滴利多卡因,逐层缝合胸壁,然后腹腔注射利多卡因和呋塞米各0.1mL,术后连续注射青霉素(8ˑ105U/d)3d㊂在第3天检测心电图(12导联心电图,走纸速度25mm/s), 12个导联中以出现6~8个Q波作为早期心力衰竭造模成功的筛选标准[10]㊂在心力衰竭模型成功的基础上,继续喂养12周㊂12周后通过小动物超声检测心脏射血分数(ejection fraction,EF),大鼠拉力测定仪测定大鼠抓力㊂以4%多聚甲醛固定心脏梗死区边缘的心肌组织,用于苏木精-伊红(HE)染色㊂分离并获得大鼠左下肢的腓肠肌,称重后切为两半,一半以4%多聚甲醛固定,另一半快速冻存于液氮中㊂1.2.2大鼠心脏EF和NT-proBNP的检测术后12周,采用小动物超声测定大鼠心脏EF㊂从大鼠腹主动脉抽取血液,经过离心,获得血清,严格遵照酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒说明书检测NT-proBNP水平㊂1.2.3心肌㊁腓肠肌病理切片的制备取出已固定的心肌和腓肠肌组织,流水冲洗过夜,常规石蜡包埋,心脏组织5μm切片,腓肠肌组织4μm切片㊂HE染色:在二甲苯和不同梯度的乙醇中进行切片脱蜡,以苏木精染色,5min后用自来水稍冲洗;1%的盐酸水溶液分化10s;自来水返蓝15min;置伊红染色液3min; 95%乙醇(Ⅰ)脱水5min,吸干液体;95%乙醇(Ⅱ)脱水5min,吸干液体;无水乙醇(Ⅰ)5min,吸干液体;无水乙醇(Ⅱ)10min后吸干液体;二甲苯(Ⅰ)中透明2 min;二甲苯(Ⅱ)中透明5min,用中性树胶进行封片,显微镜下观察并采集病理图片㊂1.2.4蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定大鼠腓肠肌中萎缩相关蛋白的表达用600μL组织裂解液(Report,中国)裂解100mg腓肠肌,12000r/min离心15min后吸取上清㊂通过二喹啉甲酸(BCA)蛋白浓度测定试剂盒测定样品的总蛋白浓度,加入5ˑ蛋白上样缓冲液混合后,在100ħ水浴中进行蛋白变性5 min㊂配制凝胶,进行电泳,将蛋白电转至PVDF膜后,封闭液封闭1h,TBST洗膜1次,依次孵育稀释后的一抗肌球蛋白重链(MyHC)(兔抗大鼠,1ʒ1000)㊁Atrogin-1(兔抗大鼠,1ʒ1000)㊁肌肉环指蛋白-1 (muscle ring-finger protein-1,MuRF-1)(兔抗大鼠,1ʒ1000)㊁叉头转录因子1(FOXO1)(兔抗大鼠,1ʒ1000)㊁甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)(兔抗大鼠,1ʒ1000), 4ħ冰箱孵育过夜㊂TBST洗膜3次,分别加入二抗(羊抗兔,1ʒ5000),室温下孵育1h后TBST洗膜3次,均匀加入发光液,放在BIO-RAD凝胶成像仪里曝光条带,后期使用ImageJ软件计算条带灰度值㊂1.3统计学处理采用SPSS17.0软件分进行统计分析㊂符合正态分布的定量资料以均数ʃ标准差(xʃs)表示,两组间比较采用独立样本t检验㊂以P< 0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1心力衰竭模型的建立术后3d进行心电图检测,结果显示:假手术组大鼠心电图大致正常;模型组大鼠心电图在V2~V6和(或)Ⅰ㊁aVL导联上出现明显的病理性Q波,可作为心力衰竭模型成模的早期筛选标准[10]㊂见图1㊂手术后12周,模型组大鼠的心脏EF值降低至50%以下,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01),血清NT-proBNP浓度增加,是假手术组的两倍多(P<0.01),详见表1㊂取材发现,与假手术组比较,模型组大鼠的心脏明显增大㊁水肿,左心室前壁凹陷明显,详见图2㊂HE染色结果:假手术组大鼠的心肌组织比较紧密,模型组大鼠的心肌组织相对疏松,细胞间隙增宽,详见图2㊂图1两组大鼠心电图表现表1两组大鼠心脏EF㊁NT-proBNP水平比较(xʃs)组别只数EF(%)NT-proBNP(pg/mL)假手术组874.82ʃ0.0643.8272ʃ3.8033模型组842.37ʃ0.0599.0967ʃ3.9287 t值9.807-28.589P<0.001<0.001图2两组大鼠心脏大体形态和HE染色图2.2大鼠骨骼肌萎缩情况术后12周,假手术组大鼠的下肢粗壮有力,肌肉相对坚实;模型组大鼠的下肢偏瘦弱,肌肉相对松弛,同时抓力测定仪显示其抓力明显下降(P<0.01)㊂取材后肉眼可见,假手术组腓肠肌丰厚饱满,颜色鲜红,模型组腓肠肌疏松,颜色有些暗淡,且其重量较假手术组明显降低(P<0.01)㊂HE 染色观察发现,与假手术组比较,模型组大鼠腓肠肌肌纤维的肌间隔明显增宽,肌纤维横截面积明显缩小,呈现不规则多边,提示慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩发生(P<0.01)㊂详见表2及图3㊂表2各组大鼠抓力㊁腓肠肌重量㊁腓肠肌肌纤维横截面积比较(xʃs)组别只数抓力(g)腓肠肌重量(g)肌纤维横截面积(μm2)假手术组81933.2ʃ19.80 1.098ʃ0.0231111.09ʃ174.63模型组81698.0ʃ30.930.903ʃ0.056660.55ʃ108.50 t值18.1027.828 6.198P<0.001<0.001<0.001图3两组大鼠腓肠肌大体形态和HE染色图2.3两组大鼠腓肠肌组织中MyHC㊁Atrogin-1㊁MuRF-1和FOXO1蛋白表达情况与假手术组比较,模型组骨架蛋白MyHC表达较假手术组明显降低,进一步提示腓肠肌出现萎缩㊂检测萎缩关键调控指标,发现模型组大鼠Atrogin-1㊁MuRF-1和FOXO1的蛋白表达明显升高(P<0.05)㊂详见表3及图4㊁图5㊂表3两组腓肠肌中MyHC㊁FOXO1㊁Atrogin-1㊁MuRF-1蛋白表达比较(xʃs)组别只数MyHC蛋白FOXO1蛋白Atrogin-1蛋白MuRF-1蛋白假手术组30.3086ʃ0.05780.1621ʃ0.09780.4244ʃ0.03700.2352ʃ0.1325模型组30.1647ʃ0.03240.3534ʃ0.06340.6204ʃ0.03590.4776ʃ0.0494 t值 3.765-2.843-6.583-2.970 P0.0200.0470.0300.041图4两组大鼠腓肠肌中MyHC㊁FOXO1蛋白表达电泳图图5各组大鼠腓肠肌中Atrogin-1㊁MuRF-1蛋白表达电泳图3讨论据统计,目前全球心力衰竭病人数大约为2600万例,加重了社会医疗和经济的负担[11]㊂我国2020年发布的‘中国心血管健康与疾病报告“提示,因心力衰竭住院病人的病死率为4.1%[12]㊂由此可见,心力衰竭的防治非常重要㊂近几年,研究者越来越重视骨骼肌在慢性心力衰竭病变进展中的作用[8]㊂慢性心力衰竭病人骨骼肌的病变表现为肌肉质量的减少与功能的降低㊂从组织病理学的角度看,主要表现为Ⅰ型纤维比率下降,Ⅱ型纤维比率相对增加,脂肪组织沉积,肌肉卫星细胞数量减少以及功能下降[13]㊂慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩的发病机制尚处于研究中,多种因素参与其中,如血管紧张素㊁促炎症生长因子㊁肌肉生长抑制素㊁睾酮㊁血供受损等[13-14]㊂这些因素造成氧化应激㊁炎症反应㊁细胞凋亡等的出现,引发骨骼肌蛋白质合成与分解失衡,最终引起骨骼肌萎缩[15]㊂本实验研究中,首先通过大鼠左侧冠状动脉前降支结扎术建立慢性心力衰竭模型,动物继续饲养12周,出现抓力降低,腓肠肌重量减轻,肌纤维横截面积减小,骨架蛋白MyHC表达下降,提示大鼠慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩模型成功建立㊂此模型的建立可为研究慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩的发病机制以及药物防治提供实验基础㊂骨骼肌蛋白降解的方式包括溶酶体途径㊁泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin-proteasome system,UPS)和Ca2+依赖性途径[16]㊂其中,泛素-蛋白酶体途径在蛋白降解中发挥重要作用[17]㊂该途径主要由泛素㊁泛素相关酶和蛋白酶体3部分组成,涉及MuRF-1和肌肉萎缩相关的F-box蛋白(muscle atrophy F-box, MAFbx/Atrogin-1)两个关键酶[18]㊂这两个关键酶的表达升高,能促进蛋白降解,参与多种疾病伴发的骨骼肌萎缩过程[18]㊂进一步研究发现,MuRF-1通过降解粗肌丝中含有肌球蛋白结构域的其他蛋白质,诱导肌肉萎缩[19]㊂Atrogin-1通过下调蛋白质的起始因子eIF3-f,抑制蛋白质的合成,从而造成肌肉萎缩[20]㊂在不同因素诱导的肌肉萎缩模型中,均可见MuRF-1和Atrogin-1的表达升高,而抑制MuRF-1和Atrogin-1的表达,则可减少肌肉的降解[21-22]㊂由此可见,在骨骼肌萎缩调控过程中的两个关键酶MuRF-1和Atrogin-1可作为临床上治疗慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩的干预靶点㊂本实验研究发现,模型组大鼠腓肠肌组织中MuRF-1和Atrogin-1的蛋白表达明显高于假手术组,提示MuRF-1和Atrogin-1通过促进蛋白质降解导致骨骼肌萎缩的发生㊂转录因子叉头转录因子(FOXO)是具有翼状螺旋结构的一类蛋白,研究发现FOXO1能与MuRF-1和Atrogin-1转录启动子区域结合,从而调节两者的表达[23]㊂研究发现,特异性敲除小鼠骨骼肌中FOXO1基因,可以抑制肌萎缩的发生[24]㊂同时,如果骨骼肌出现萎缩,不仅FOXO1的表达会升高, Atrogin-1和MuRF-1的表达也会上调,肌肉萎缩加重[25-26]㊂本实验研究获得与上述研究相似结果,萎缩的腓肠肌中FOXO1表达增加,提示在慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩的过程中转录因子FOXO1表达升高,通过上调蛋白降解中的两个关键酶MuRF-1和Atrogin-1的表达,共同参与骨骼肌萎缩的发生发展过程㊂综上所述,在慢性心力衰竭合并骨骼肌萎缩的过程中,FOXO1表达升高,同时调控肌肉中蛋白降解相关的基因MuRF-1和Atrogin-1,共同促进骨骼肌萎缩的发生㊂对于FOXO1㊁MuRF-1和Atrogin-1的调控,可能成为临床上防治心力衰竭合并骨骼肌萎缩的治疗靶点㊂参考文献:[1]国家卫生计生委合理用药专家委员会,中国药师协会.心力衰竭合理用药指南(第2版)[J].中国医学前沿杂志(电子版),2019,11(7):1-78.[2]胡盛寿,高润霖,刘力生,等.‘中国心血管病报告2018“概要[J].中国循环杂志,2019,34(3):209-220.[3]ANKER S 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慢性缺血性舒张性心力衰竭动物模型的建立
慢性缺血性舒张性心力衰竭动物模型的建立王亮;朱兵;何昆仑【摘要】目的通过反复冠状动脉微球栓塞,模拟缺血性心脏病所诱导的舒张性心力衰竭(Diastolic Heart Failure,DHF),建立动物模型.方法采用股动脉穿刺方法,对125条比格犬冠状动脉进行反复微球栓塞,直到出现DHF症状,比较栓塞前和最后1次栓塞后血流动力学、超声心动图、血清脑钠肽水平以及组织形态学的差异.结果(1)125条比格犬经反复冠脉微球栓塞,最后成功建立心力衰竭(心衰)模型86条,其中收缩性心衰犬48条、DHF犬38条.(2)DHF犬与术前比较,左室射血分数由术前的58.88%±12.38% 降至54.56%±10.47%(P>0.05),而左室舒张末压则由8.79±3.24 mmHg升至15.27±6.04 mmHg(P<0.01);等容舒张期松弛时间常数(τ)由36.99±2.91 ms升至57.80±9.79 ms(P<0.01);二尖瓣血流舒张早期峰速度(E)/心肌舒张早期峰速(Em)由10.76±2.40升高至13.47±4.84(P<0.01).(3)脑钠肽浓度对数水平由1.86±0.18 pg/ml升高至2.37±0.07 pg/ml(P<0.01).(4)光镜下可见DHF犬心肌出现细胞肥大、坏死和间质纤维化.结论应用反复经皮冠状动脉微球栓塞的方法,可以成功建立稳定的DHF动物模型.【期刊名称】《中华保健医学杂志》【年(卷),期】2010(012)001【总页数】5页(P19-22,封3)【关键词】动物模型;舒张性心力衰竭;心导管;脑钠肽【作者】王亮;朱兵;何昆仑【作者单位】100853,北京,解放军总医院南楼心血管二科;100853,北京,解放军总医院南楼心血管二科;100853,北京,解放军总医院南楼心血管二科【正文语种】中文【中图分类】R541.6舒张性心力衰竭（Diastolic Heart Failure，DHF）为具有充血性心力衰竭的临床症状和体征、正常的收缩功能（射血分数＞50%）和异常的舒张功能为主要特征的一种临床综合征。
大鼠阿霉素慢性心衰模型的制备与心衰指标的判定
大鼠阿霉素慢性心衰模型的制备与心衰指标的判定李梅秀;田国忠;欧叶涛;宋汉君;赵勇;王鹏【期刊名称】《解剖学研究》【年(卷),期】2005(27)3【摘要】目的探讨大鼠阿霉素(adrinmycin,ADR)慢性心衰(chronicheartfailure,CHF)模型的制备与心衰指标的判定。
方法采用ADR给大鼠隔日腹腔注射制作慢性心衰模型,并通过行为体征观察、初体重和终体重、心重及心体比、心功能测定、心、肝和肺病理学光镜以及心肌病理学电镜观察进行心衰指标的判定。
结果模型组大鼠萎靡不振、活动、进食减少、呼吸加快、体温下降、体重明显减轻,且左室内压、压力升高最大速率(±dp/dtmax)、心率明显降低,心脏病理学改变明显,基本符合Bishop关于慢性心衰CHF动物模型制作的标准,说明用ADR方法复制CHF模型是成功的。
更贴近临床心肌病性CHF的病理生理过程。
结论用阿霉素制作CHF模型技术方法容易控制,心衰指标符合标准。
【总页数】3页(P176-178)【关键词】慢性心衰;动物模型;阿霉素;指标;心衰模型;大鼠;制备;动物模型制作;心肌病理学;failure【作者】李梅秀;田国忠;欧叶涛;宋汉君;赵勇;王鹏【作者单位】佳木斯大学医学院局部解剖学教研室【正文语种】中文【中图分类】R541.6;R979.1【相关文献】1.心衰1号方、心衰2号方对慢性心衰模型大鼠的干预作用 [J], 周文斌;王大伟;陈力;尹克春;严夏2.阿霉素诱导大鼠慢性心衰模型的制备 [J], 徐建虎;张琦;杨子庆;罗炽琼;李雷兵;任小彤;李林鲜;徐路;肖桦3.心衰康煎液对阿霉素心衰模型大鼠心肌的影响 [J], 季增荣;金春亭;王淑强;王陶冶4.阿霉素及表阿霉素致大鼠慢性心衰的对比研究 [J], 高媛;李梅秀;田国忠5.阿霉素性慢性心衰大鼠模型不同方案的比较 [J], 叶婷;张梦;张宇;陈晶因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
动物实验模型的制作
/experiment/List_2029.sht ml动物模型设计的原则及注意事项一、设计原则生物医学科研专业设计中常要考虑如何建立动物模型的问题，因为很多阐明疾病及疗效机制的实验不可能或不应该在病人身上进行。
常要依赖于复制动物模型，但一定要进行周密设计，设计时要遵循下列一些原则。
（一）相似性在动物身上复制人类疾病模型。
目的在于从中找出可以推广（外推）应用于病人的有关规律。
外推法（Extrapolation）要冒风险，因为动物与人到底不是一种生物。
例如在动物身上无效的药物不等于临床无效，反之也然。
因此，设计动物疾病模型的一个重要原则是，所复制的模型应尽可能近似于人类疾病的情况。
能够找到与人类疾病相同的动物自发性疾病当然最好。
例如日本人找到的大白鼠原发性高血压就是研究人类原发性高血压的理想模型，老母猪自发性冠状动脉粥样硬化是研究人类冠心病的理想模型；自发性狗类风湿性关节炎与人类幼年型类风湿性关节炎十分相似，也是一种理想模型，等等。
与人类完全相同的动物自发性疾病模型毕竟不可多得，往往需要人工加以复制。
为了尽量做到与人类疾病相似，首先要注意动物的选择。
例如，小鸡最适宜做高脂血症的模型，因它它的血浆甘油三酯、胆固醇以及游离脂肪酸水平与人十分相似，低密度和极低密度脂蛋白的脂质构成也与人相似。
其次，为了尽可能做到模型与人类相似，还要在实践中对方法不断加以改进。
例如结扎兔阑尾血管，固然可能使阑尾坏死穿孔并导致腹膜炎，但这与人类急性梗阻性阑尾炎合并穿孔和腹膜不一样，如果给兔结扎阑尾基部而保留原来的血液供应，由此而引起的阑尾穿孔及腹膜炎就与人的情况相似，因而是一种比较理想的方法。
如果动物型与临床情况不相似，在动物身上有效的治疗方案就不一定能用于临床，反之也然。
例如，动物内毒性性休克（Endotoxin Shock，单纯给动物静脉输入细菌及其毒素所致的休克）与临床感染性（脓毒性）休克（Septic Shock）就不完全一样，因此对动物内毒素性休克有效的疗法长期以来不能被临床医生所采用。
慢性缺血性舒张期心力衰竭动物模型的建立及药物干预的研究的开题报告
慢性缺血性舒张期心力衰竭动物模型的建立及药物干预的研究的开题报告一、研究背景及意义心力衰竭（heart failure, HF）作为一种慢性心血管疾病，是由于心脏无法有效地将血液泵出身体而导致的疾病。
随着人们生活方式和生活环境的变化，心力衰竭的发病率也不断上升。
据统计，全球约有2600万人患有心力衰竭，每年的死亡人数超过360万。
在我国，心力衰竭是严重影响人民健康的疾病之一。
因此，研究HF的病理生理机制及开发有效的治疗方法具有重要的临床意义和社会价值。
缺血性心力衰竭是HF的主要形式之一，其发生与心肌缺血、缺氧有关。
在临床上，很多药物用来治疗HF，如ACEI、ARB、β受体阻滞剂等。
然而，这些治疗方法并不能完全控制HF的进展，因此寻找新型的治疗方法成为研究的重点。
动物模型在疾病的研究中具有很重要的意义。
建立慢性缺血性舒张期心力衰竭动物模型，可以更好地模拟人类HF的发生过程，从而更好地解析其病理生理基础及毒理药理机理。
此外，动物模型可以用于筛选新型的治疗方法，为HF的临床治疗提供参考。
二、研究目的和内容本研究的目的是建立慢性缺血性舒张期HF动物模型，并进行药物干预研究。
具体内容如下：1. 研究方法优化：制定完善的实验方案，优化动物模型的建立方法；2. 建立动物模型：通过左冠动脉结扎和洛伐他汀（lovastatin）注射，建立缺血性心力衰竭模型，并验证模型的建立是否成功；3. 药物干预研究：选择一种潜在的治疗药物（如抗氧化剂、β2受体激动剂等），对模型动物进行治疗，并评估治疗的效果；4. 结果分析：对实验结果进行统计学分析，评估药物干预治疗的效果。
三、研究意义1. 建立慢性缺血性舒张期HF动物模型，可以更好地研究HF的病理生理机制；2. 通过药物干预研究，可以寻找新型的治疗方法，为HF的临床治疗提供参考；3. 本研究对于深入了解HF的发病机制，并促进该领域的进一步研究具有重要的意义。