第二章 药物的鉴别试验
药物分析 第二章 药物的鉴别试验
药物分析教研室
1
主要内容
第一节 药物鉴别试验的定义及目的
第二节 药物试验的项目 第三节 鉴别方法 第四节 鉴别试验的条件及方法验证
2
第一节 药物鉴别试验的定义及目的
▪ 定义：根据药物的分子结构、理化性质，采用 物理、化学或生物学方法来判断药物的真伪。
▪ 目的：不是对未知物进行定性分析，而是证实 贮藏在有标签容器中的药物是否为其所收载的 药物。
HO—CH—COOH
水浴中
HO—C—COONH4
2Ag+
+2NH3+2H2O
HO—C—COONH4
18
（三）芳香第一胺类
稀盐酸
供 试
+ 0.1mol/L亚硝酸钠
品
碱性-萘酚试液
N2+Cl-.
橙黄色到猩红色 沉淀
+NaNO2+2HCl
+NaCl+2H2O
N2+Cl-.
+
+NaOH
+NaCl+2H2O
31
（三）荧光反应鉴别法 ①药物本身在可见光下发射荧光
如：硫酸奎宁溶液显蓝色荧光 ②药物及适当试剂反应后发射荧光
如：氯普噻吨+HNO3后，紫外下显绿
碱性 VB1 K3Fe(CN)6 硫色素（蓝色荧光）
32
（四）气体生成反应鉴别法 ①大多数伯胺（铵）类药物、酰尿类以及某些酰
胺类药物，可经强碱处理后加热产生氨气。 红色石蕊试纸变蓝 硝酸亚汞试液湿润的试纸显黑色
对照品法：将供试品与对照品在同样的条件下绘制 红外图谱，彼此对比是否一致的方法。可消除不 同仪器和操作条件造成的误差。USP多采用对照 品法。
药物分析第二章药物的鉴别试验
5、芳香第一胺类
供试品 + 稀盐酸 + 亚硝酸钠 + 碱性β 萘酚试液 ----橙黄色到猩红色沉淀
6、托烷生物碱类 供试品+ 发烟硝酸（在水浴上蒸干）---------黄色殘渣（冷却）
乙醇（2D）+氢氧化钾（1粒）
------------------------------------------深紫色 （三）专属鉴别试验 在一般鉴别试验的基础上，证实是某一种药物（详见各论）。
E:制备氧化铝方法代号
原点至色谱斑点中心的距离 (2)比移值Rf == -----------------------------------------原点至展开剂前沿的距离 供试品的Rf值与标准品的Rf值比较,由此确定供试品的成份.
例:硫酸阿米卡星的薄层色谱法鉴别试验(P35) (1)布板:硅胶H (2)配溶液(供试品)
折光率(20℃):指光线在空气中进行的速度与供试品中 进行速度的比值 n t
D
t 比旋度:一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含 [ ]D 有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度
例：称取葡萄糖10.00g，加水溶解并稀释至100.0mL， 于20℃用2dm测定管，测得溶液的旋光度为+10.5°， 求其比旋度？ 解：溶液厚度：2dm: +10.5 ° 1dm: +5.25 ° 浓度：10g/100ml=0.1g/ml 比旋光度： +5.25 °×10=+52.5°
4、核磁共振（NMR） H核或C核的化学位移
(三)X射线粉末衍射法 布拉格方程
（四）色谱鉴别法 1、薄层色谱 将吸收剂或支持剂均匀铺在玻璃板上（或聚酯薄膜塑料或 铝箔上），把要分离分析的样品点在薄层色谱板上，用溶剂展 开，在日光或紫外光下观察所获得的斑点，从而达到分离、 分析、鉴定目的。 例: 药物中特殊杂质的检查 (醋酸可的松中其他甾体的检查) (1)布板 (2)点样 (3)显色
第二章鉴别试验
比旋度
[α]tD是手性药物特性及其纯度的主要指标 在一定波长（ 在一定波长（589.3nm）与温度（20℃）下，偏 ）与温度（ ℃ 振光透过长1dm，含旋光性物质1g/1mL的溶液时 ，含旋光性物质 振光透过长 的溶液时 测得的旋光度α，称为比旋度。 测得的旋光度 ，称为比旋度。 注意：溶剂， 注意：溶剂，pH，浓度等对比旋度的影响 ，
第二章
鉴别试验
Contents
概述 鉴别试验项目 鉴别方法 鉴别试验条件
概述
药物的鉴别试验（ 药物的鉴别试验（identification test） ） 目的——判断药物的真伪，是药品质量检验的 判断药物的真伪， 目的 判断药物的真伪 首项任务
药典收载的鉴别试验——均为用来证实贮 均为用来证实贮 药典收载的鉴别试验 藏的药物是否为其所标示的药物 这些方法有一定的专属性， 这些方法有一定的专属性，但不能赖以鉴 别未知物 对于原料药， 对于原料药，还应结合性状项下的外观和 物理常数进行综合判断
本章ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ习要求
掌握： 掌握：
比旋度、 比旋度、吸收系数等重要的物理常数的定义 典型化学法、 典型化学法、光谱法和色谱法鉴别药物的原理和 应用
熟悉： 熟悉：
鉴别试验条件对结果的影响 鉴别试验专属性要求
课外泛读
阅读中国药典二部附录Ⅲ一般鉴别试验，附录Ⅳ 阅读中国药典二部附录Ⅲ一般鉴别试验，附录Ⅳ 分光光度法
一些新的鉴别方法
近红外光谱法（ 近红外光谱法（12800～4000cm-1） ～ 核磁共振法（ 核磁共振法（NMR） ） 亚硝酸戊酯的NMR法鉴别（USP法） 法鉴别（ 亚硝酸戊酯的 法鉴别 法 亚硝酸戊酯（ 甲基-1-丁醇 亚硝酸戊酯（Amyl Nitrite）是3-甲基 丁醇 ） 甲基 甲基-1-丁醇亚硝酸酯的混合物 和2-甲基 丁醇亚硝酸酯的混合物 甲基 X射线粉末衍射法 射线粉末衍射法 例如：氨苄西林四种固体的粉末X-射线衍射 例如：氨苄西林四种固体的粉末 射线衍射 图谱 P33
第二章药物的鉴别试验答案
.判断药物地纯度.判断已知药物地真伪.判断药物地均一性
.判断药物地有效性.确证未知药物资料个人收集整理，勿做商业用途
.比旋度是指（）.
.在一定条件下，偏振光透过长，且含1g旋光物质地溶液时地旋光度资料个人收集整理，勿做商业用途
.在一定条件下，偏振光透过长1cm，且含1g旋光物质地溶液时地旋光度
一、选择题
．测定盐酸土霉素地比旋度时，若称取供试品0.5050g，置量瓶中.加盐酸液(→)稀释至刻度，用长地样品管测定，要求比旋度为° °,则测得地旋光度地范围应为
．一．一
. —－．—－．—－
.按中国药典(年版)精密量取某溶液时，宜选用
.50m量简.50m移液管滴定管.50m量瓶量筒
.某药物地摩尔吸收系数(ε)很大，则表示
.在一定条件下，偏振光透过长，且含旋光物质地溶液时地旋光度
.在一定条件下，偏振光透过长1mm，且含旋光物质地溶液时地旋光度
.在一定条件下，偏振光透过长，且含旋光物质地溶液时地旋光度
.熔点是（）.
.液体药物地物理性质.不加供试品地情况下，按样品测定方法，同法操作
.用对照品代替样品同法操作.用作药物地鉴别，也可反映药物地纯度
. °°°. °. °资料个人收集整理，勿做商业用途
.用分析天平称得某物0.1204g，加水溶解并转移至容量瓶中，加水稀释至刻度，该溶液每含溶质为（）.
.0.00482g×-3g×-3g资料个人收集整理，勿做商业用途
.红外光谱法主要用于药物地（）.
.鉴别、检查、含量测定.杂质检查和含量测定.晶型鉴别
二、配伍题
[—]
修约后要求小数点后保留．
．1.2351 A
．1.2050 C
．
第二章 药物的鉴别试验 PPT课件
2019/9/5
药物分析
化学与制药工程学院
常用的方法有： （1）标准品对照法； （2）规定吸收波长法； （3）规定吸收波长和相应的吸收度法； （4）规定吸收波长和吸收系数法； （5）规定吸收波长和吸收度比值法。
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2、红外光谱鉴别法（IR） a、与标准谱图对照法； b、与参比标准品对照法。
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（三）专属鉴别试验（specific identification test）：是证实某一种药物的依据，它是根据每 一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学 特性的不同，选用某些特有的灵敏定性反应来鉴 别药物的真伪。
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显微鉴别法主要用于中药及其制剂的鉴别，通常采用显 微镜对药材的（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片， 以及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特 征进行鉴别的一种方法。
（五）生物学法
利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质的 一种方法，主要用于抗生素、生化药物以及中药的鉴别， 分为生物效应鉴别法和基因鉴别法两类。
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2、湿法：系指供试品和试剂在适当的溶剂中，于 一定条件下进行反应，发生易于观测的化学变化， 如颜色、沉淀、气体、荧光等。
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（二）光谱鉴别法： 1、紫外光谱鉴别法（UV或Vis 紫外或可见）
a、利用最大吸收波长（λmax1、λmax2、λmax3） b、利用在一定浓度C供下的最大吸收波长及它的 吸收度A； c、利用在C供下两个波长的吸收度的比值A2/A2， 更严格。
药物分析第二章药物的鉴别试验
=？
• 吸收系数：在给定的波长、溶剂和温
度等条件下，吸光物质在单位浓度、
单位液层厚度时的吸收度称为吸收系
数。中国药典收载是
E 1% 1cm
。
这两种物理常数可用以区别药品、检 查纯度或测定制剂的含量。
度和物理常数等。
外观
溶解度
物理常数
性 状 （Description）
外观：指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。
如二巯基丁二钠的描述为“本品为白色至微黄色的 粉末；有类似蒜的特臭”。
溶解度：一定程度上反映了药品的纯度。药品在不同溶
剂中的溶解性能用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、 极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述。
光度法，在290nm波长处测定吸收度，
吸收系数（为
133-141）
General identification test
一般鉴别试验 无机物
依 据： 某一类药物组成中的阴离子和阳离子的特殊反
应或典型的有机官能团反应。 有机物
中国药典附录收载一般鉴别试验：
无机金属盐类、无机酸盐、有机酸盐、 丙二酰 脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化 物类等
例子
• 甾体激素类药物含有环戊烷并多氢菲 母核，主要差别在A环和D环的取代 基不同，可利用这些结构特征确证。
吸收系数
吸光物质在单位浓度、单位液层 厚度时的吸收度
摩尔吸收系数 溶液浓度 1mol / L
ε
液层厚度 1cm
百分吸收系数 溶液浓度 1%g / ml
液层厚度 1cm
• A=ECL
药物分析02章药物的鉴别试验
药物分析02章药物的鉴别试验药物的鉴别试验是指通过对药物的外观、理化性质、药效和药物成分等方面的检测，从而确定药物的真伪、鉴别其品质和评价其质量。
药物的鉴别试验是药物质量控制和药物品质评价的重要环节，对于保障药物的有效性和安全性具有重要意义。
一、外观鉴别试验药物的外观鉴别是最基本也是最直观的鉴别方法之一、药物的外观特征包括颜色、外观形状、气味等。
在鉴别药物的过程中，需要对照药物的外观标准，比较药物的差异。
二、理化性质鉴别试验理化性质鉴别试验包括熔点、燃烧性质、溶解性、吸湿性等。
这些理化性质的测定可以通过一系列的实验方法来完成。
比如，可以通过热量仪器测定药物的熔点，通过烧毛试验判断药物的燃烧性质，通过溶解度试验测定药物的溶解性，通过称量药物的含水量比较药物的吸湿性。
三、药效鉴别试验药效鉴别试验是一种通过药物作用方式来鉴别药物真伪和品质的方法。
在进行药效鉴别试验时，需要参照药物的治疗作用机制，通过对照药物的药效标准，进行动物试验或临床试验，比较药物的疗效。
四、药物成分鉴别试验药物成分鉴别试验是一种通过检测药物中的化学成分来鉴别药物真伪和品质的方法。
常用的药物成分鉴别试验方法包括色谱分析、质谱分析、核磁共振谱分析等。
通过这些方法，可以快速准确地分析药物中的化学成分，并与标准药物进行比较。
药物鉴别试验是一项复杂的工作，需要进行详细的实验操作和仪器设备的运用。
在进行试验过程中，需要注意实验条件的控制和结果的准确性。
同时，还需要对比药物的标准要求，结合实际情况，综合判断药物的真伪和品质。
药物的鉴别试验对于保障药物的有效性和安全性具有重要意义。
通过鉴别试验，可以及时发现药物的问题，对于深入研究和改善药物制剂具有指导意义。
同时，也可以帮助医护人员正确选择药物，确保患者的治疗效果和用药安全。
总之，药物的鉴别试验是药物质量控制和品质评价的重要环节。
通过外观鉴别试验、理化性质鉴别试验、药效鉴别试验和药物成分鉴别试验等方法，可以对药物进行全面的鉴别评价，从而保障药物的有效性和安全性。
2药物的鉴别
是药物的一种物理性质，在一定程度上反映了药物的纯度
③物理常数 是评价药物质量的主要指标之一 相对密度、馏程、熔点、比旋度、吸收系数 、折光率、 黏度、酸值、碘值、皂化值、羟值
第一法：测定易碎的固体药品
熔点
第二法：测定不易碎的固体药品（脂肪酸、石蜡等） 第三法：测定凡士林或其他类似的物质
比旋度：指在一定波长下，偏振光透过1dm且每1ml中含有
（四）试验时间
有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。
（五）干扰成分的存在
药物制剂的鉴别，其它成分则会干扰检查结果的现象观察。
返 回
五、鉴别试验的灵敏度
（一）反应灵敏度和空白试验
反应灵敏度（sensitivity) 是指在一定的条件下，能在尽可能稀的溶液中观察出尽可能少 量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度。 最低检出量（minimum detectable quantity) 是指某一反应，在一定的条件下，能观察出的供试品的最小量。 最低检出浓度（minimum detectable concentration) 空白试验：是指在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不 加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验 。 目的：为了校正由于容器，溶剂和试剂不纯带来的影响。
析，因为这些鉴别试验虽有一定的专属性，但不具备进行未知无确
证的条件，故不能鉴别未知物。
③是个别分析而不是系统试验：药物检验项目比较少， 一般在4-5个项目以内。 ④鉴别试验条件要准确：按照药典规定的条件进行。
⑤化学鉴别试验要有明确的现象：要求有沉淀的生成或 溶解﹑颜色的改变﹑特殊气体的生成及荧光的出现等明 显现象。
返 回
四、鉴别试验条件
（一）溶液的浓度
（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中λmax, A, E1%1cm)
第二章 药物鉴别实验
硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离 并附在试管内壁形成银镜。
例：酒石酸美托洛尔
【鉴别】 (1) …… (2)取本品约0.3g，置洁净的 试管中，加水10ml溶解，加硝酸银试液过量， 即生成白色沉淀，滴加氨试液恰使沉淀溶解后 ，将试管置水浴中加热，银即游离并附在管的 内壁成银镜。
(1)
(2)
(3)
(4)
例：硫酸阿米卡星
【鉴别】 (1) 取本品与阿米卡星标准品适量，分别 加水制成每1ml中含10mg的溶液，照薄层色谱法（附 录ⅤB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于 同一硅胶Ｈ薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨溶液-水 (1:4:2:1) 为展开剂，展开后，晾干，显色，供试品溶 液与标准品溶液所显主斑点的颜色与位置应相同。
2、红外光谱鉴别法
用于组分单一、结构明确的原料药，特别适 合不易区别的同类药物，专属性强，应用广泛。
Ch.P和BP均采用标准图谱对照法 USP采用对照品法
例1：布洛芬 【鉴别】 (1) UV. (2) 本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集
85图）一致。
三、色谱鉴别法
利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特 征色谱行为（比移值或保留时间）进行的鉴别试验。
2、溶解度 一定程度上反映了药品的纯度。
溶解度
极易溶解 易溶 溶解 略溶 微溶 极微溶解 几乎不溶或不溶
溶剂体积 (1g/ml)
<1 1～10 10～30 30～100 100～1000 1000～10000
>10000
3、物理常数
评价药物质量的重要指标之一，用于药品鉴别， 反映其纯杂程度。 药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔 点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化 值、羟值、碘值、吸收系数。
药物分析课件 第二章 药物的鉴别试验
四、生物学法
生物学法是利用微生物或实验动物进行 鉴别的方法.
第四节 鉴别试验条件
1、溶液的浓度 例：对离子反应颜色：
如被测离子的浓度太低,与试剂作用产生的颜 色太浅,不易鉴别 — 可以浓缩
如供试品的浓度太高,与试剂作用产生的颜 色过深,也不易鉴别 — 可以稀释
<5>吸收系数
在给定的波长、溶剂和温度等条件下,吸光物质 在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸 收系数. 是吸光物质的重要物理常数 有两种表示方式:摩尔吸收系数和百分吸收 系数
<6>pH值的测定
温度℃ 苯二甲酸盐
5
4.00
15
4.00
20
4.00
25
4.01
磷酸盐 6.95 6.9 6.88 6.86
无机金属盐－－〔2〕其它鉴别试验
★ 钠盐：
中性溶液
供试品 + 醋酸氧铀锌试液
黄色沉淀
★ 钾盐 供试品 + 0.1%四苯硼钠溶液与醋酸
白色沉淀
炽灼,以除去可能含有的铵盐
★钙盐 供试品 + 草酸铵试液
白色沉淀
甲基红指示液2滴,用氨试液中和, 再滴加盐酸至呈酸性分离,pH≈4
不溶于醋酸 溶于盐酸
三、专属鉴别试验
二、光谱鉴别法
1、紫外光谱鉴别法 <1> 测 定 最 大 吸 收 波 长 , 或 同 时 测 定 最 小 吸 收 波 长
〔λmax=？λmin=？〕 <2>规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸收
度〔在C和λmax处,A应为某一值〕 <3>规定吸收波长和吸收系数法;〔在某λ处,E或ε应
第二章药物的鉴别试验
它根据每一种药物化学结构的 差异及其引起的物理化学性质不同, 选用某些灵敏的定性反应,来鉴别药 物真伪.
二、鉴别试验的项目
第二章
H
O
N
O
C 2H 5 C 2H 5
O
巴比妥
O
CH2 CH CH2 C3H7
NH
H N
ONa N O
O C 2H 5
H
N
O
NH
O
苯巴比妥
司可巴比妥钠
二、鉴别试验的项目
O
乙酯的香味.
N
CH3
三、鉴别方法
第二章
(3)荧光反应鉴别法
()
一 ① 药物本身在可见光下发射荧光
化 学
② 药物溶液+硫酸
性
（全熔）的温度范围叫做熔程或熔距，
状 其熔程一般不超过0.5~1℃。当含有杂质
时，熔点会有显著的变化，会使其熔点
下降，熔程延长。因此，可以通过测定
熔点来鉴定有机物，并根据熔程的长短
来判断有机物的纯度。
二、鉴别试验的项目
第二章
熔点的测定方法 b型管(Thiele管)
1 性 状
二、鉴别试验的项目
第二章
表示方式：摩尔吸收系数和百
分吸收系数。
二、鉴别试验的项目
第二章
1 百分吸收系数：在一定波长下，
溶液浓度为1%（W/V），厚度为
性 状
1cm时的吸收度，用
E 1% 1 cm
表示，
是第二章
2、一般鉴别试验
（general identification test）
二、鉴别试验的项目
第二章
药物的性状反映了药物特有的物理性质。
第二章 药物的鉴别试验
2. 有机酸盐 (1) 水杨酸 红色配位化合物 水杨酸 + FeCl3 例：水杨酸镁
【鉴别】 (1) 取含量测定项下的溶液，照分光光度法（ 附录Ⅳ A）测定。在296 nm的波长处有最大吸收。 (2) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集 60图）一致。
(3) 本品的水溶液显镁盐与水杨酸盐的鉴别反应（附 录Ⅲ）。
紫色配位化合物
(2) 酒石酸盐 供试品溶液（中性）+ 氨制硝酸银
水浴中
银镜
例：酒石酸美托洛尔（降血压）
【鉴别】 (1) 取本品，加乙醇制成每1ml 中含20μg 的 溶液，照分光光度法（附 录Ⅳ A）测定，在224nm 的 波长处有最大吸收。 (2) 取本品约0.3g，臵洁净的试 管中，加水10ml溶解，加硝酸银试液过量，即生成 白 色沉淀，滴加氨试液恰使沉淀溶解后，将试管臵水浴 中加热，银即游离并附在管的内 壁成银镜。
4.托烷生物碱类
此类生物碱中具有莨菪酸结构，有Vitali反应,显紫色。
例：氢溴酸山莨菪碱
【鉴别】 (1) 本品显托烷生物碱类的鉴别反应（附录Ⅲ）
(2) 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集287 图 ）一致。 (3) 本品的水溶液显溴化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。
5.无机金属盐（Na, K, Ca)
（general identification test）
是指依据药物的化学结构或理化特性，通过化学反 应来鉴别药物的真伪。ChP附录中有：丙二酰脲类、托
烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟类、无机金属类
（Na, K, Li, Ca, Ba, Fe.,Al, Zn,Cu, Ag,Hg等）、有机酸
盐类（水杨酸盐）、无机酸盐类。
南医大药物分析第02章 药物的鉴别实验
（七）药物鉴别方法的新动向
1.仪器方法的数量大大增加，尤其是IR和HPLC；
2.制剂广泛采用IR法鉴别；
二、鉴别试验与原理
（一）有机氟化物
取供试品约7mg，照氧瓶燃烧法（附录VII
C）进
行有机破坏,用水20ml与0.01mol/L氢氧化钠溶液
6.5ml为吸收液，待燃烧完全后，充分振摇；取吸收液
2ml，加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋
物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；
其它沉淀反应。
常有气体生成的药物
大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺
类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气
化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发
生硫化氢气体
含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气 含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可
红色,加稀无机酸，红色即退去。
3.苯甲酸盐
取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液，即生成赭
色沉淀；加稀盐酸，变为白色沉淀；
取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，不炭
化，但析出苯甲酸，在试管内壁凝结成白色升华物。
4.枸橼酸盐
加稀硫酸数滴,
加热至沸，加高锰酸钾试液数滴振
摇，紫色即消失；溶液分成两份，1份中加硫酸汞试 液1滴,另1份中逐滴加入溴试液，均生成白色沉淀；
5.酒石酸盐
取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制
硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银即游离并附在
管的内壁成银镜。
取供试品溶液，加醋酸成酸性后，加硫酸亚铁试
液1滴和过氧化氢试液1滴，待溶液退色后，用氢氧
化钠试液碱化，溶液即显紫色。
（三）芳香第一胺类
取供试品约50mg，加稀盐酸1ml,必要时缓缓煮沸
第二章 药物鉴别试验
第二章药物的鉴别试验基本要求l掌握：1.一般与专属鉴别试验的概念和区别2.常见一般鉴别试验的原理与方法l熟悉：1.鉴别试验的项目2.UV、IR及色谱等鉴别方法l了解：鉴别试验的条件一、概述药物的鉴别试验（identification test）Ø判断药物的真伪，质量检验的首项任务Ø证实容器中的药物是否为其标签所标示Ø虽有一定专属性，但不足以确证其结构二、项目包括相对密度、馏程、熔点、比旋度、吸收系数、取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每的溶液，依法测定°的溶液，依法测定°且每在给定波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、一般鉴别试验（general identification test）n依据某一类药物的化学结构或理化性质特征，通过化学反应鉴别药物的真伪n仅供确认单一化学药物Ø无机药物：阴、阳离子的特殊反应Ø有机药物：典型的官能团反应n Ch.P附录Ⅲ：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类、有机氟化物、无机金属盐类、有机酸盐类、无机酸盐类硝酸亚铈蓝紫色3. 托烷生物碱类Ø具有莨菪酸结构，可发生Vitali反应固体KOH 水解产物 发烟硝酸 三硝基 KOH 醌型产物 莨菪酸 衍生物 (乙醇)N CH3pHOH,H2SO4,H2O取供试品约 10mg ，加发 烟硝酸 5滴，置水浴上蒸 干，得黄色残渣，放 冷，加乙醇 2~3滴，加固O O 2硫酸阿托品 (atropine sulfate)体氢氧化钾一小粒，即 显深紫色。
4. 有机酸盐u水杨酸盐COOH OH+ FeCl3中性弱酸性红色配位化合物 紫色配位化合物u酒石酸盐COOH COOHHO CH HO CH+Ag(NH3)2OHDAg （银镜反应）5. 无机金属盐Ø焰色反应（Na显鲜黄色；K显紫色；Ca显砖红色）6. 铵盐NH4++ NaOHDNH3 （氨臭）使硝酸亚汞试液 湿润的滤纸变黑使湿润的 红色石蕊 试纸变蓝7. 无机酸根Ø氯化物n nØ硫酸盐BaCl2 n PbAc2nØ硝酸盐FeSO4+H2SO4 n Cu+H2SO4nAgNO3 MnO2+H2SO4专属鉴别试验 （specific identification test）n根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学 特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，鉴别药物 的真伪n在一般鉴别试验的基础上，利用各种药物的化学结构差 异，区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物 单体n例如巴比妥类药物：苯巴比妥（含苯环）、司可巴比妥 （含双键）、硫喷妥钠（含硫原子）苯巴比妥 苯巴比妥 【鉴别】 【鉴别】 (1) (1)本品显丙二酰脲类的鉴别反应（附录Ⅲ）。
药物的鉴别实验
01
仪器分析应用数量增加，尤其是红外光谱法、气相色谱法和高效液相色谱法。
01
02
制剂广泛采用IR法鉴别。与原料药相比，制剂需先分离再压片绘制图谱。
（四）药物鉴别方法新动向
无机药物：药物中的阴离子和阳离子的特殊反应；
有机药物：典型的官能团反应。
因此，一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。通常一般鉴别试验不适用于数种化学药物的混合物鉴别或在有干扰物质存在时鉴别。
3
2
1
4
（二）一般鉴别试验
专属鉴别试验 药物的专属鉴别试验（specific identification test)是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。
最低检出量（又称检出限量） （minimum detectable quantity)
最低检出浓度（又称界限浓度） （minimum detectable concentration)
最低检出量（以m表示），就是应用某一反应，在一定的条件下，能够观测出试验结果的供试品的最小量，其单位通常用微克（μg）表示。
如巴比妥类药物含有丙二酰脲母核，主要的区别在于5，5一位取代基和2一位取代基的不同：苯巴比妥含有苯环，司可巴比妥含有双键，硫喷妥钠含有硫原子，可根据这些取代基的性质，采用各自的专属反应进行鉴别。又如甾体激素类药物含有环戊烷并多氢菲母核，主要的结构差别在A环和D环的取代基不同，可利用这些结构特征进行鉴别确证。
反应迅速、现象明显。 包括测定生成物的熔点，在适当条件下产生颜色、荧光，发生沉淀反应或产生气体。
第二章 药物的鉴别试验
（2）沉淀生成反应鉴别法：
—— 系指供试液中加入适当的试剂溶液，在一定的 条件下进行反应，生成不同颜色的沉淀，有的具有 特殊的沉淀形状。
常用的这类反应有： １）与重金属离子的沉淀反应
在一定条件下，药物和重金属离子反应，生成 不同形式的沉淀。
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2）与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应 多为生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其
等性质。
例如：药典对依托红霉素的外观描述为“本品为 白色结晶性粉末；无臭，无味或几乎无味”。
对二巯基丁二钠的描述为“本品为微黄色 的粉末，有类似蒜的特味”。
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2. 溶解度 —— 它是药物的一种物理性质，在一定程度上反
映了药品的纯度。药典一般采用“极易溶解、易 溶、溶解、溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不 溶”等来描述药品在不同溶剂中的溶解情况。 例如：磺胺嘧啶在“乙醇或丙酮中微溶，在水中几 乎不溶，在NaOH溶液中易溶，在稀盐酸中溶解”。
COO-
O- Fe Fe + 12 HCl
2
3
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特点：本反应极为灵敏，只需取稀溶液进行试 验，如取用量大，产生颜色过深时，可加水稀 释后观察。
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（2）酒石酸盐
(i) 鉴别方法: 取供试品的中性溶液，置洁净的试 管中，加氨硝酸银试液数滴，置于水浴中加热， 银即游离并附在试管内壁成银镜。
化成液体的温度、熔融同时分解的温度或在熔化时
自初熔到全熔的一段温度。它为多数固体有机药物
的重要物理常数。
药典收载 测定方法
第一法 第二法
为测定易粉碎固体药品的 熔点的方法。
第三法
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（2） 比旋度
第二章药物的鉴别试验
与对照图谱比对。
注意事项 ：
1）压片法影响因素较多，注意制备条件对图谱形状及各谱带相
表对该药物化学结构的确证。
第二节、鉴别试验的项目
一、性状（description）
包括外观、溶解度、物理常数等。
二、一般鉴别试验（General identification test)
三、专属鉴别试验（Specific identification test
一、性状
（一） 外观：聚集状态、晶型、嗅味
构部分的各个药物单体。
第三节 鉴别方法
化学鉴别法 鉴 别 方 法
呈色反应鉴别法 沉淀生成反应鉴别法 荧光反应鉴别法 气体生成反应鉴别法
测定生成物的熔点
紫外、红外、近红外、
光谱鉴别法
原子吸收、质谱、核磁、X-射线 薄层色谱鉴别法
色谱鉴法
HPLC、GC鉴别法 纸色谱鉴别法
显微鉴别、生物学法、指纹图谱
（1）薄层扫描法(TLC)：对照品比较法
（2）高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法
供试品和对照品色谱峰保留时间一致。
四、显微鉴别法
适用于中药及其制剂的鉴别，通常采用显微镜对药 材的（饮片）切片、粉末、解离组织或表面制片， 以及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含 物等特征进行鉴别的一种方法。 选择有代表性的供试品
偶然做一两次的分析或分散性样品的分析则不太适
用。因为建立近红外光谱方法之前必须投入一定的
药物的鉴别试验
精品课件
红外光谱图
精品课件
COONa
OH
酚
N-H O-H
N-H Ph:C=C
芳胺
NH2
精品课件
课堂活动
➢ 右图是丙二醇、二乙二醇 的红外吸收光谱图
➢ 考一考你：两者的红外吸 收光谱主要有哪些区别？
➢ 想一想：假如你是一名药 品质检员，从中吸取哪些 教训？
2.下列不属于物理常数的是（ ）
A.折光率
B.旋光度
C.比旋度
D.相对密度
E.黏度
精品课件
目标检测
一、单项选择题（A型题）
3.《中国药典》2010年版规定液体的相对密度是指（ ）
A.15℃时，某液体的密度与水的密度之比 B.18℃时，某液体的密度与水的密度之比 C.20℃时，某液体的密度与水的密度之比 D.22℃时，某液体的密度与水的密度之比 E.30℃时，某液体的密度与水的密度之比
有机酸盐（水杨酸盐）
水杨酸 + FeCl3
红色配位化合物 紫色配位化合物
水杨酸盐+稀盐酸→水杨酸（白色沉淀，溶于 醋酸铵）
托烷类生物碱：发生Vitali反应
水解
3HNO3
莨菪酸
三硝基衍生物
KOH (C2H5OH)
KOH
深紫色
氯化物
（1）硝酸银试液反应：取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性 后，加硝酸银试液，即产生白色凝乳状沉淀；分离，沉淀加 氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。如供试品 为生物碱，或其他有机碱的盐酸盐，必须先加氨试液使成碱 性，将析出的沉淀滤过除去，取滤液进行实验。 （2）二氧化锰-硫酸反应：少量供试品置试管中，加等量二 氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即产生氯气，能使 用水湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色
药物鉴别实验
射荧光；
药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光； 药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物
经其它反应后，发射荧光。
常有气体生成的药物
大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺
类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气
化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发
生硫化氢气体
含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气 含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可
产生乙酸乙酯的香味。
（三）光谱鉴别法
1．紫外光谱鉴别法
核对λmax和λmin； 规定一定浓度的供试液在λmax处的吸收度； 规定吸收波长和吸收系数法； 规定吸收波长和吸收度比值法； 经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。
标准图谱对照法： 2.红外光谱 鉴别法
中国药典（2005年版)
BP (2005年版)
对照品法： USP (29)。
（一种专属性很强、 应用较广）
（四）色谱鉴别法
1.薄层色谱鉴别法 采用对照品（或标准品）比较 法，要求二者的Rf值一致 ； 2.高效液相色谱鉴别法 要求供试品和对照品色 谱峰的保留时间应一致含量测定方法为内标法 ； 3.气相色谱鉴别法 4.纸色谱鉴别法 逐渐被薄层色谱法所取代
氨基
氧化还原显色反应及其它颜色反应
常见的呈色反应有：
与重金属离子的沉淀反应---如巴比妥类药物
与铜盐、钴盐、银盐生成沉淀的反应；
与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应-多为生
物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；
其它沉淀反应。
常见的荧光发射形式有以下类型
药物本身可在可见光下发射荧光； 药物溶液加硫酸使呈酸性后，在可见光下发
2.硫酸盐
1) 取供试品溶液，加氯化钡试液，即生成
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第二章药物的鉴别试验
（一）最佳选择题
1．在药品质量标准中，药品的外观、臭、昧等内容归属的项目是
A．性状B．-般鉴别C．专属鉴别
D．检查E．含量测定
2．取供试品少量，置试管中，加等量的二氧化锰，混匀，加硫酸湿润，缓缓加热，即产生氯气，能使用水湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。
下列物质可用上述试验鉴别的是A．托烷生物碱类B．酒石酸盐C．氯化物
D．硫酸盐E．有机氟化物
3．中国药典中所用的何首乌的鉴别方法是
A．高效液相色谱法B．质谱法C．红外光谱法
D．显微鉴别法E．X射线粉末衍射法
（二）配伍选择题
[4—5]
A．取供试品的稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。
B．取供试品约lOmg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黄色的残渣，放冷，加乙醇2 -3滴湿润，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色。
C．取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰显鲜黄色。
D．取供试品：加过量氢氧化钠试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇用水湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。
E．取供试品溶液，滴加氯化钡试液，即生成白色沉淀；分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。
以下各类药物的鉴别试验是
4．水杨酸盐类
5．托烷生物碱类
[6—8]
A．吸收光谱较为简单，曲线形状变化不大，用作鉴别的专属性远不如红外光谱。
B．供试品制备时研磨程度的差异或吸水程度不同等原因，均会影响光谱的形状。
C．测定被测物质在750~ 2500nm(12 800~ 4000cm'1)光谱区的特征光谱并利用适宜的化学计量学方法提取相关信息对被测物质进行定性、定量分析。
D．利用原子蒸气可似吸收由该元素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线特征及供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进行定性、定量分析。
E．用准分子离子峰确认化合物，进行二级谱扫描，推断结构化合物断裂机制，确定碎片离子的合理性。
上述说法中，用来描述下列光谱鉴别法的是
6．紫外光谱鉴别法
7．红外光谱鉴别法
8．质谱鉴别法
[9—10]
A．三氯化铁呈色反应B．重氮化一偶合反应C．Vitali反应
D．四氮唑反应E．茚三酮反应
下列各类药物的呈色反应鉴别法是
9．水杨酸类
10.肾上腺皮质激素类
（三）多项选择题
11.芳香第一胺类药物鉴别试验使用的试剂有
A．稀盐酸B．稀醋酸C．亚硝酸钠
D．B一萘酚E．硝酸银
12.下列关于质谱鉴别法的说法中，正确的有
A．将被测物质离子化后，在高真空状态下按离子的质荷比( m/z)大小分高。
B．使用高分辨率质谱可得到离子的精确质量数，然后计算出该化合物的分子式。
C．分子离子的各种化学键发生断裂后形成碎片离子，由此可推断其裂解方式，得到相应的结构信息。
D．鉴定化合物结构的重要参数有化学位移6、峰面积、偶合常数、弛豫时间。
E．利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度可以进行定性、定
量分析。
13.用于鉴别硝酸盐的试剂有
A．硫酸B．醋酸铅C．硫酸亚铁D．铜丝E．高锰酸钾
（四）是非判断题
14.旋光度是药物的物理常数( )
15.绘制药物盐酸盐红外光谱时，若样品与溴化钾之间发生离子交换反应时，也可采用溴化
钾作为制片基质( )
16.无机金属盐焰色反应中钠离子显紫色；钾离子显鲜黄色；钙离子显砖红色( )
（五）简答题
17.简述药物分析中常用的鉴别方法。
18.简述影响鉴别试验的条件。
19.简述红外光谱鉴别法试样制备方法。