金葡菌检验技术ppt课件
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第三节 金黄色葡萄球菌检验ppt课件
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，
临床表现多种多样，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、 伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
葡萄球菌皮肤感染
致病性
葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病，可引发 不同程度的急性胃肠炎症状，恶心、呕吐最为突出而且普遍， 腹痛、腹泻次之。
生物学特性—菌体形态及培养特征
革兰氏阳性球菌，直径为 0.8-1.0 微米，镜检时呈 单个、成对、四联或不规则的簇群，如葡萄。
大多数菌株产生类胡罗卜素，使细胞团呈现出深橙色到 浅黄色，色素的产生取决于生长的条件。
生物学特性—菌体形态及培养特征 大多数菌株最适温度30-37℃，最适pH为7.0-7.5； 兼性厌氧菌，在好氧条件下生长最好； 可在15%氯化钠和40%胆汁中生长。 一般用含10%氯化钠的大豆肉汤增菌或7.5%氯化钠肉汤增菌。
结果报告
检测步骤—增菌
利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性（可耐受15%的氯化钠）， 用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌。
检测步骤—分离 血平板：金黄色葡萄球菌可以产生溶血素，因此在血平板上 产生明显的溶血环。 血平板上其典型菌落呈金黄色，有时也为白色，大而突起， 圆形，不透明，表面光滑，有溶血圈。
检测步骤—分离 BP平板： 胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和 痕量矿物元素。 丙酮酸钠是一种生长促进剂。 亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒 性，并使菌落产生黑色。 卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环。 甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作 用。
金黄色葡萄球菌检验
金黄色葡萄球菌 (Staphyloccocus aureus Rosenbach) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属 （Staphylococcus），可引起多种严重感染。有“嗜肉 菌"的别称。
金黄色葡萄球菌检测方法ppt课件
葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌的检测方法
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1
葡萄球菌属（Staphylococcus）
引起毒素型食物中毒 分为：金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌 腐生性葡萄球菌
对于加工过的食品或食品加工 设备而言，此菌或其肠毒素的 存在通常作为卫生条件差的一 种指标。
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金黄色葡萄球菌的扫描 电镜照片
2
2.2 葡萄球菌属（Staphylococcus）
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25
3 培养 在通常情况下，涂布后，将平板静置10 min，如样液不易 吸收，可将平板放在培养箱36 ℃±1 ℃培养1 h；等样品匀液吸收后翻转平皿，倒置于培养箱， 36 ℃±1 ℃培养，45 h～48 h。
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26
4 典型菌落计数和确认 1）金黄色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直径为2 mm～3 mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混 浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油 至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但 无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离 的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并 干燥。
生物学特性 1、形态与染色特性
G+，无芽孢、无鞭毛、无荚膜、不运动 2、培养特性： ① ② ③ ④ ⑤ 3、生化特性：MR阳性，V－P弱阳性，靛基质阴性…… 4、抵抗力
具有较强的抵抗力，80 ℃ 30min 5、抗原结构
蛋白抗原——表面抗原，无特异性。 多糖抗原——半抗原，有型特异性
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3
食品中金黄色葡萄球菌的检验
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4 典型菌落计数和确认 2）如果： d） 某一稀释度平板的菌落数大于200 CFU 且有典型菌落， 且下一稀释度平板上有典型菌落，但其平板上的菌落数不 在20 CFU～200 CFU 之间，应计数该稀释度平板上的典型 菌落；以上按公式（1）计算。 e） 2 个连续稀释度的平板菌落数均在20 CFU～200 CFU 之间，按公式（2）计算。 3 ) 从典型菌落中任选5 个菌落（小于5 个全选），分别 做血浆凝固酶试验。
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1
葡萄球菌属（Staphylococcus）
引起毒素型食物中毒 分为：金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌 腐生性葡萄球菌
对于加工过的食品或食品加工 设备而言，此菌或其肠毒素的 存在通常作为卫生条件差的一 种指标。
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金黄色葡萄球菌的扫描 电镜照片
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2.2 葡萄球菌属（Staphylococcus）
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3 培养 在通常情况下，涂布后，将平板静置10 min，如样液不易 吸收，可将平板放在培养箱36 ℃±1 ℃培养1 h；等样品匀液吸收后翻转平皿，倒置于培养箱， 36 ℃±1 ℃培养，45 h～48 h。
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4 典型菌落计数和确认 1）金黄色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直径为2 mm～3 mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混 浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落有似奶油 至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但 无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离 的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并 干燥。
生物学特性 1、形态与染色特性
G+，无芽孢、无鞭毛、无荚膜、不运动 2、培养特性： ① ② ③ ④ ⑤ 3、生化特性：MR阳性，V－P弱阳性，靛基质阴性…… 4、抵抗力
具有较强的抵抗力，80 ℃ 30min 5、抗原结构
蛋白抗原——表面抗原，无特异性。 多糖抗原——半抗原，有型特异性
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食品中金黄色葡萄球菌的检验
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4 典型菌落计数和确认 2）如果： d） 某一稀释度平板的菌落数大于200 CFU 且有典型菌落， 且下一稀释度平板上有典型菌落，但其平板上的菌落数不 在20 CFU～200 CFU 之间，应计数该稀释度平板上的典型 菌落；以上按公式（1）计算。 e） 2 个连续稀释度的平板菌落数均在20 CFU～200 CFU 之间，按公式（2）计算。 3 ) 从典型菌落中任选5 个菌落（小于5 个全选），分别 做血浆凝固酶试验。
金黄色葡萄球菌检测方法ppt课件
如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固
体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。
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有无致病性的重 要指标
2）血浆凝固酶试验： 同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培 养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明书操作，进 行血浆凝固酶试验。 结果如可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落到5 mL BHI，36 ℃±1 ℃培养18 h～48 h，重复试验。
一、金黄色葡萄球菌的生物学特性 1、形态与染色：(staphylococcus aureus)
G+，无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显微镜下 排列成葡萄串状。
萄球菌的显微照片 色葡萄球菌的染色照片 色葡萄球菌的扫描电镜照片
附：
金黄色葡 金黄
金黄
金黄色葡萄球菌的透射电镜照片
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4
2、培养特性：
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长 良好，加少量葡萄糖或血液生长更旺盛需氧或兼性厌氧，最 适生长温度37℃，最适生长pH 7.4。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在7.5～15%NaCl肉 汤中生长。
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金黄色葡萄球菌 在甘露醇盐平板上的菌落
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2.2 葡萄球菌属（Staphylococcus）
生物学特性 1、形态与染色特性
G+，无芽孢、无鞭毛、无荚膜、不运动 2、培养特性： ① ② ③ ④ ⑤ 3、生化特性：MR阳性，V－P弱阳性，靛基质阴性…… 4、抵抗力
具有较强的抵抗力，80 ℃ 30min 5、抗原结构
蛋白抗原——表面抗原，无特异性。 多糖抗原——半抗原，有型特异性
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第六章金黄色葡萄球菌的检验PPT资料
3、生化特性：
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸 不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝 酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺 类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏 感。
金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素 和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ，能损伤血小板， 破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液 或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞 的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶 能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋 白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
比如：法国梅里埃公司生产的RPF培养基、API检测系统等。 当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； 5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内，36℃±1℃培养24 h，转种血平板和Baird-Parker平板， 36℃±1℃培养24 h，挑取血 平板上金黄色（有时为白色）菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。 金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色，有时也为白色，大而突出、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。 Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7. 5～15%NaCl肉汤中生长。 中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；
金黄色葡萄球菌检验PPT
总结词
食品中金黄色葡萄球菌的检测是常见的检验案例，旨在确保食品安全和预防食物中毒事 件。
详细描述
食品中金黄色葡萄球菌的检测通常采用增菌、分离培养、生化鉴定和血清学试验等步骤。 通过对食品样品进行选择性增菌，提高目标菌的浓度，然后进行分离培养，获得单菌落。
对分离到的菌落进行生化鉴定和血清学试验，以确定是否为金黄色葡萄球菌。
03
金黄色葡萄球菌检验流程
样本采集
采集部位
采集疑似感染的金黄色葡萄球菌 的样本，如皮肤、伤口、血液等。
采集方法
使用无菌棉签或注射器采集样本， 避免交叉污染。
采集量
采集足够量的样本，以满足实验需 求。
样本处理
增菌培养
将采集的样本接种在选择性培养基上， 进行增菌培养，以促进金黄色葡萄球 菌的生长。
仪器自动化检测法
总结词
仪器自动化检测法利用自动化仪器对样品进行快速、高效的检测，提高检测通量 和准确性。
详细描述
仪器自动化检测法包括全自动微生物鉴定仪、全自动免疫分析仪等。这些仪器能 够快速处理大量样品，提供准确的结果。同时，仪器自动化也减少了人为误差和 操作时间，提高了检测效率。但仪器成本较高，需要定期维护和校准。
特性
金黄色葡萄球菌具有高度的耐盐 性和耐高低温性，可在不同环境 下生存和繁殖，对多种抗生素具 有一定的耐药性。
常见感染途径
01
02
03
食品污染
金黄色葡萄球菌常常污染 食品，如肉类、乳制品、 蛋类等，通过摄入被污染 的食物导致感染。
皮肤接触
金黄色葡萄球菌也可通过 破损的皮肤或黏膜侵入人 体，引起皮肤感染和伤口 感染。
分离纯化
革兰染色
对分离纯化的菌落进行革兰染色，初 步判断是否为金黄色葡萄球菌。
食品中金黄色葡萄球菌的检测是常见的检验案例，旨在确保食品安全和预防食物中毒事 件。
详细描述
食品中金黄色葡萄球菌的检测通常采用增菌、分离培养、生化鉴定和血清学试验等步骤。 通过对食品样品进行选择性增菌，提高目标菌的浓度，然后进行分离培养，获得单菌落。
对分离到的菌落进行生化鉴定和血清学试验，以确定是否为金黄色葡萄球菌。
03
金黄色葡萄球菌检验流程
样本采集
采集部位
采集疑似感染的金黄色葡萄球菌 的样本，如皮肤、伤口、血液等。
采集方法
使用无菌棉签或注射器采集样本， 避免交叉污染。
采集量
采集足够量的样本，以满足实验需 求。
样本处理
增菌培养
将采集的样本接种在选择性培养基上， 进行增菌培养，以促进金黄色葡萄球 菌的生长。
仪器自动化检测法
总结词
仪器自动化检测法利用自动化仪器对样品进行快速、高效的检测，提高检测通量 和准确性。
详细描述
仪器自动化检测法包括全自动微生物鉴定仪、全自动免疫分析仪等。这些仪器能 够快速处理大量样品，提供准确的结果。同时，仪器自动化也减少了人为误差和 操作时间，提高了检测效率。但仪器成本较高，需要定期维护和校准。
特性
金黄色葡萄球菌具有高度的耐盐 性和耐高低温性，可在不同环境 下生存和繁殖，对多种抗生素具 有一定的耐药性。
常见感染途径
01
02
03
食品污染
金黄色葡萄球菌常常污染 食品，如肉类、乳制品、 蛋类等，通过摄入被污染 的食物导致感染。
皮肤接触
金黄色葡萄球菌也可通过 破损的皮肤或黏膜侵入人 体，引起皮肤感染和伤口 感染。
分离纯化
革兰染色
对分离纯化的菌落进行革兰染色，初 步判断是否为金黄色葡萄球菌。
金葡菌检验技术37页PPT
16、业余生活要有意义，不要越轨。——华盛顿 17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。——罗素·贝克 18、最大的挑战和突破在于用人，而用人最大的突破在于信任人。——马云 19、自己活着，就是为了使别人过得更美好。——雷锋 20、要掌握书，莫被书掌握；要为生而读，莫为读而生。——布尔沃
END
金葡菌检验技术
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6、黄金时代是在我们的前面，而不在 我们的 后面。
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7、心急吃不了热汤圆。
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8、你可以很有个性，但某些时候请收 敛。
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9、只为成功找方法，不为失败找借口 (蹩脚克服恐惧，便几乎 能克服 任何恐 惧。因 为，请 记住， 除了在 脑海中 ，恐惧 无处藏 身。-- 戴尔． 卡耐基 。
金葡菌检验技术ppt课件
食品卫生微生物学检验食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验金黄色葡萄球菌检验金黄色葡萄球菌的生物学特性金黄色葡萄球菌的抗原构造及分型简介金黄色葡萄球菌的致病性金黄色葡萄球菌的流行病学金黄色葡萄球菌的检验方法金黄色葡萄球菌肠毒素的检测金黄色葡萄球菌的快速检测方法金黄色葡萄球菌污染的控制一金黄色葡萄球菌的生物学特性1形态与染色
食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
1
金黄色葡萄球菌的生物学特性 金黄色葡萄球菌的抗原构造及分型简介 金黄色葡萄球菌的致病性 金黄色葡萄球菌的流行病学 金黄色葡萄球菌的检验方法 金黄色葡萄球菌肠毒素的检测 金黄色葡萄球菌的快速检测方法 金黄色葡萄球菌污染的控制
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一、金黄色葡萄球菌的生物学特性
1、形态与染色：(staphylococcus aureus) 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显
微镜下排列成葡萄串状。
革兰氏染色阳性。
附： 金黄色葡萄球菌的显微照片 金黄色葡萄球菌的染色照片 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片
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金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可 引起局部化脓 感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等， 甚至败血症、脓毒症等全身感染。 金黄色葡萄球菌的致病力 强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分甲、乙、丙、丁、戊五种，能损伤 血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液 或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞 的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶 能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋 白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
1
金黄色葡萄球菌的生物学特性 金黄色葡萄球菌的抗原构造及分型简介 金黄色葡萄球菌的致病性 金黄色葡萄球菌的流行病学 金黄色葡萄球菌的检验方法 金黄色葡萄球菌肠毒素的检测 金黄色葡萄球菌的快速检测方法 金黄色葡萄球菌污染的控制
2
一、金黄色葡萄球菌的生物学特性
1、形态与染色：(staphylococcus aureus) 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显
微镜下排列成葡萄串状。
革兰氏染色阳性。
附： 金黄色葡萄球菌的显微照片 金黄色葡萄球菌的染色照片 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片
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金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可 引起局部化脓 感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等， 甚至败血症、脓毒症等全身感染。 金黄色葡萄球菌的致病力 强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分甲、乙、丙、丁、戊五种，能损伤 血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液 或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞 的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶 能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋 白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
金黄色葡萄球菌检验方法ppt课件
健康的小白鼠5522方法方法待检样品待检样品25g225ml25g225ml灭菌生理盐水灭菌生理盐水直接计数法直接计数法增菌培养方法增菌培养方法bairdbairdparkerparker琼脂平板琼脂平板75nacl75nacl肉汤培养基肉汤培养基血平板血平板血平板血平板涂片染色镜涂片染色镜溶血观察溶血观察动物接种试验动物接种试验血浆凝固试验血浆凝固试验报告报告6611样品的采集样品的采集称取25g25g火腿肠切碎搅匀用灭菌研钵研磨置于火腿肠切碎搅匀用灭菌研钵研磨置于250ml250ml锥形瓶中加入锥形瓶中加入225ml225ml灭菌生理盐水制成灭菌生理盐水制成11
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6
3、涂片、染色与镜检
将纯培养的未知菌涂片，革兰氏染色，显微镜观察。 4、生化实验
①触酶试验 在载玻片上滴1滴3%的过氧化氢，调取纯化的细菌放在过氧 化氢中观察变化。30s内产生大量气泡者为阳性，不产生气 泡者为阴性。
②血浆凝固酶试验 吸取1：4新鲜兔血浆0.5ml，放入小试管中，再加入培养24h 的2①中的肉汤培养液0.5ml，摇荡均匀，放入（37±1℃）恒 温箱中培养，每0.5h观察一次，观察6h，检查是否出现凝固。 将试管倾斜或倒置时，呈现凝块状，可判定为阳性，同时以 已知阳性葡糖球菌和阴性肉汤作为对照。
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1
简介
金黄色葡萄球菌，也称“金葡菌”，细胞壁含90%的肽聚糖 和10%的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密， 染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，相反，阴 性菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫 色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。金黄色葡萄球 菌与青霉素的发现有很大的渊源。当年弗莱明就是在他的金 黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了，于是发现 了青霉素。而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代 表的革兰氏阳性菌作用明显。这也是由肽聚糖层的厚度和结 构造成的。
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3、涂片、染色与镜检
将纯培养的未知菌涂片，革兰氏染色，显微镜观察。 4、生化实验
①触酶试验 在载玻片上滴1滴3%的过氧化氢，调取纯化的细菌放在过氧 化氢中观察变化。30s内产生大量气泡者为阳性，不产生气 泡者为阴性。
②血浆凝固酶试验 吸取1：4新鲜兔血浆0.5ml，放入小试管中，再加入培养24h 的2①中的肉汤培养液0.5ml，摇荡均匀，放入（37±1℃）恒 温箱中培养，每0.5h观察一次，观察6h，检查是否出现凝固。 将试管倾斜或倒置时，呈现凝块状，可判定为阳性，同时以 已知阳性葡糖球菌和阴性肉汤作为对照。
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简介
金黄色葡萄球菌，也称“金葡菌”，细胞壁含90%的肽聚糖 和10%的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密， 染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，相反，阴 性菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫 色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。金黄色葡萄球 菌与青霉素的发现有很大的渊源。当年弗莱明就是在他的金 黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了，于是发现 了青霉素。而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代 表的革兰氏阳性菌作用明显。这也是由肽聚糖层的厚度和结 构造成的。
金黄色葡萄球菌的检测方法的ppt课件
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免疫学方法包括下面两个部分 （1）抗原抗体技术
（2）免疫学方法技术
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（1）抗原抗体技术分析：
抗原抗体技术是免疫技术中的核心部 分，对于金黄色葡萄球菌检测全菌免 疫筛选抗体是很困难的事情，现在目 前市场有的大多都是对金黄色葡萄球 菌毒素类进行免疫得到的抗体
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（2）免疫学方法技术分析：
上述免疫学技术应用最多的是酶联免疫技术和胶体金侧向层 析技术。
酶联免疫技术广泛应用于实验室检测，由于一次可以检测多 个样本，此技术多用于体外诊断，目前也广泛用于食品安全。
（酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISA法）
-15-源自16三 分子生物学方法
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和 侵袭性酶
金黄色葡萄球菌的检测方法
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简介
一·生物学特性 （1）典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径 0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄 色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革 兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高， 在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧， 最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板 上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。
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（2）血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有 高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、 麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反 应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐， 液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药 物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
1212金黄色葡萄球菌特异的抗原能激发机体产生相应的特异性抗金黄色葡萄球菌特异的抗原能激发机体产生相应的特异性抗在免疫检测中可利用单克隆抗体检测金黄色葡萄球菌的特在免疫检测中可利用单克隆抗体检测金黄色葡萄球菌的特异抗原异抗原也可利用金黄色葡萄球菌抗原检测体内产生的特异抗体两也可利用金黄色葡萄球菌抗原检测体内产生的特异抗体两种方法均能判断机体的感染状况
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血平板上金黄色葡萄球菌 菌落形态
金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血 平板上呈金黄色，有时也为白色，大而 突出、圆形、不透明、表面光滑，周围 有溶血圈。
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金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可 引起局部化脓 感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等， 甚至败血症、脓毒症等全身感染。 金黄色葡萄球菌的致病力 强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分甲、乙、丙、丁、戊五种，能损伤 血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液 或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞 的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶 能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋 白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
1、形态与染色：(staphylococcus aureus) 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显
微镜下排列成葡萄串状。
革兰氏染色阳性。
附： 金黄色葡萄球菌的显微照片 金黄色葡萄球菌的染色照片 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片
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金黄色葡萄球菌的流行病学特点
季节分布，多见于春夏季；中毒食品 种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此 外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起 的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%， 所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
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金黄色葡萄球菌的流行病学
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下 途径污染食品：
存放温度，在37℃内，温度越高，产毒 时间越短；
存放地点，通风不良氧分压低易形成肠 毒素；
食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同 时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。
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金黄色葡萄球菌的检验
1、样品制备 按无菌操作取检样25 g（mL），加入
225 mL灭菌生理盐水，固体样品研磨或置 均质器中制成1:10样品混悬液。
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金黄色葡萄球菌的流行病学
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在， 空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可 找到。作为人和动物的常见病原菌，其主要 存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上， 50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球 菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。
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金黄色葡萄球菌的流行病学
近年来，美国疾病控制中心报告，由 金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅 次于大肠杆菌。
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＊＊＊当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较 多的食品，如牛奶和乳制品、肉、蛋等，在温度条 件适宜时，经过8～10小时即可产生相当数量的肠毒 素，肠毒素可耐受100℃煮沸30分钟而不被破坏。人 摄食该菌污染的食物2～3小时后可引起中毒症状， 它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。
此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶 酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
食品加工人员、炊事员或销售人员带 菌，造成食品污染；食品在加工前本身带 菌，或在加工过程中受到了污染，产生了 肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不 严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳 腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位 的污染。
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*金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生 问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起 的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%， 加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此 类中毒事件也非常多。肠毒素形成条件：
供计数检验时，可按十进位递增稀释法 将样品匀液再进行适当稀释。
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金黄色葡萄球菌的检验
2、增菌及分离培养 吸取5 mL混悬液，接种于7.5%氯化钠
肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内， 36℃±1℃培养24 h，转种血平板和BairdParker平板， 36℃±1℃培养24 h，挑取血 平板上金黄色（有时为白色）菌落进行革 兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在7.5～ 15%N可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸 不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝 酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺 类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏 感。
食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
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金黄色葡萄球菌的生物学特性 金黄色葡萄球菌的抗原构造及分型简介 金黄色葡萄球菌的致病性 金黄色葡萄球菌的流行病学 金黄色葡萄球菌的检验方法 金黄色葡萄球菌肠毒素的检测 金黄色葡萄球菌的快速检测方法 金黄色葡萄球菌污染的控制
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一、金黄色葡萄球菌的生物学特性
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金黄色葡萄球菌的透射电镜照片 Tem x12000 digitized Staphylococcus aureus
7
2、培养特性：
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养 基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度 37℃，最适生长pH 7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，边缘整 齐、表面光滑、湿润，直径一般为1～2 mm。血 平板菌落周围形成透明的溶血环。
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金黄色葡萄球菌的抗原构造和分型
对分型进行简单的了解。 １、血清学分型：
金黄色葡萄球菌水解，获得两种抗原成分：蛋白抗原和 多糖抗原。
蛋白抗原主要为葡萄球菌A蛋白（SPA)，是一种表面抗 原，90%以上金黄色葡萄球菌有此抗原，无特异性。
多糖抗原为半抗原，有型特异性。 ２、噬菌体分型。 ３、根据肠毒素分型。 ４、根据血浆凝固酶分型。
3
金黄色葡萄球菌的显微照片
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm 左右，显微镜下排列成葡萄串状。
4
金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。
革兰氏染色阳性。
5
金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7.9 micron
血平板上金黄色葡萄球菌 菌落形态
金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血 平板上呈金黄色，有时也为白色，大而 突出、圆形、不透明、表面光滑，周围 有溶血圈。
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金黄色葡萄球菌的致病性
金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可 引起局部化脓 感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等， 甚至败血症、脓毒症等全身感染。 金黄色葡萄球菌的致病力 强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分甲、乙、丙、丁、戊五种，能损伤 血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞； c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液 或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞 的吞噬作用。 葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶 能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌； e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋 白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F六种血清型。
1、形态与染色：(staphylococcus aureus) 金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显
微镜下排列成葡萄串状。
革兰氏染色阳性。
附： 金黄色葡萄球菌的显微照片 金黄色葡萄球菌的染色照片 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片
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金黄色葡萄球菌的流行病学特点
季节分布，多见于春夏季；中毒食品 种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此 外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起 的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%， 所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
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金黄色葡萄球菌的流行病学
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下 途径污染食品：
存放温度，在37℃内，温度越高，产毒 时间越短；
存放地点，通风不良氧分压低易形成肠 毒素；
食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同 时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。
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金黄色葡萄球菌的检验
1、样品制备 按无菌操作取检样25 g（mL），加入
225 mL灭菌生理盐水，固体样品研磨或置 均质器中制成1:10样品混悬液。
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金黄色葡萄球菌的流行病学
金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在， 空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可 找到。作为人和动物的常见病原菌，其主要 存在于人和动物的鼻腔、咽喉、头发上， 50%以上健康人的皮肤上都有金黄色葡萄球 菌存在。因而，食品受其污染的机会很多。
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金黄色葡萄球菌的流行病学
近年来，美国疾病控制中心报告，由 金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅 次于大肠杆菌。
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＊＊＊当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较 多的食品，如牛奶和乳制品、肉、蛋等，在温度条 件适宜时，经过8～10小时即可产生相当数量的肠毒 素，肠毒素可耐受100℃煮沸30分钟而不被破坏。人 摄食该菌污染的食物2～3小时后可引起中毒症状， 它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。
此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶 酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
食品加工人员、炊事员或销售人员带 菌，造成食品污染；食品在加工前本身带 菌，或在加工过程中受到了污染，产生了 肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不 严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳 腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位 的污染。
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*金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生 问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起 的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%， 加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此 类中毒事件也非常多。肠毒素形成条件：
供计数检验时，可按十进位递增稀释法 将样品匀液再进行适当稀释。
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金黄色葡萄球菌的检验
2、增菌及分离培养 吸取5 mL混悬液，接种于7.5%氯化钠
肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内， 36℃±1℃培养24 h，转种血平板和BairdParker平板， 36℃±1℃培养24 h，挑取血 平板上金黄色（有时为白色）菌落进行革 兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在7.5～ 15%N可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸 不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝 酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺 类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏 感。
食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验
1
金黄色葡萄球菌的生物学特性 金黄色葡萄球菌的抗原构造及分型简介 金黄色葡萄球菌的致病性 金黄色葡萄球菌的流行病学 金黄色葡萄球菌的检验方法 金黄色葡萄球菌肠毒素的检测 金黄色葡萄球菌的快速检测方法 金黄色葡萄球菌污染的控制
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一、金黄色葡萄球菌的生物学特性
6
金黄色葡萄球菌的透射电镜照片 Tem x12000 digitized Staphylococcus aureus
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2、培养特性：
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养 基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度 37℃，最适生长pH 7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，边缘整 齐、表面光滑、湿润，直径一般为1～2 mm。血 平板菌落周围形成透明的溶血环。
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金黄色葡萄球菌的抗原构造和分型
对分型进行简单的了解。 １、血清学分型：
金黄色葡萄球菌水解，获得两种抗原成分：蛋白抗原和 多糖抗原。
蛋白抗原主要为葡萄球菌A蛋白（SPA)，是一种表面抗 原，90%以上金黄色葡萄球菌有此抗原，无特异性。
多糖抗原为半抗原，有型特异性。 ２、噬菌体分型。 ３、根据肠毒素分型。 ４、根据血浆凝固酶分型。
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金黄色葡萄球菌的显微照片
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm 左右，显微镜下排列成葡萄串状。
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金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。
革兰氏染色阳性。
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金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 Staphylococcus aureus Enhanced sem w: 7.9 micron