仪器分析方法在中药含量测定中应用概况

仪器分析方法在中药含量测定中应用概况

李小红,龚小红,马靖,季宁平

（成都中医药大学药学院2008级中药学基地班）摘要：随着现代仪器分析技术的发展，越来越多的新技术、新方法已应用到中药的含量测定中，本文简要概述了光谱法、色谱法、色谱-

质谱联用等仪器分析方法在中药含量测定方面的应用。

关键词：光谱法；色谱法；质谱法；中药；含量测定

Abstract:With the development of modern instrumental analysis techniques,more and more new technologies and methods are applied to the content determination of Chinese medicines.The article provides a brief overview on spectroscopy,chromatography,chromatography-mass and other methods in the application of determination.

Key word

word::Spectroscopy;Chromatography;Chromatography-mass;

Chinese medicine;Content determination

为提高中药的国际竞争力，使中药成为我国新的经济增长点之一，我国提出了“中药现代化科技产业行动计划”。要实现中药现代化，就必须结合现代的科学理论和先进的科学技术、方法和手段来研究中药。中药有效成分的含量影响中药的内在质量和临床疗效，是中药质量控制的关键。仪器分析方法因其准确、高效的特点,己成为药检工作者洞察药品内在质量的眼睛。本文就常用的仪器分析方法在中药含量测定中的应用概况作一综述。

1光谱分析法

各种结构的物质都具有自己的特征光谱，光谱分析法即是利用特征光谱研究物质结构或测定化学成分的方法。光谱分析法已成为中药含量测定的重要手段和工具，主要有以下几种。

1.1紫外分光光度法（UV）

紫外分光光度法具有灵敏度高、设备简单、操作方便等特点，根据中药中特定成分在一定波长处的吸光度与浓度呈线性关系可计算该成分的含量。2010年版《中国药典（一部）》有37种中药用本法进行含量测定，其中包括20种药材、16种中成药、1种提取物。马梅芳等[1]采用紫外分光光度法对南葶苈子药材中的总黄酮进行含量测定，结果表明总黄酮在3～30μg·mL-1线性关系良好，该方法

具有很好的重现性和稳定性。

1.2红外光谱法（IR）

红外光谱法的光谱专属性强、特征明显、信息量大，尤其在计算机的辅助下，使谱带的辨认与检索变得准确且迅速。由于仪器性能的提高与完善，特别是傅里叶红外（FT-IR）技术的出现，使IR定量分析成为可能。叶晓镭等[2]对药典中5种淫羊藿的质量进行考察，采用傅立叶变换红外光谱法，通过干燥淫羊藿粉末与KBr混合压片测定红外光谱，比较选定波数处的峰面积；结果得到5种淫羊藿中淫羊藿苷的含量与选定波数处的峰面积大小有关，得到可以用FT-IR快速简便地考察淫羊藿的质量的结论。

1.3近红外光谱法（NIR）

近红外光谱与传统化学分析方法相比，近红外光谱分析有极其优越的特点：操作简单、分析速度快；不破坏样品，可实现完整样品的检测，甚至可以透过包装材料进行测定；样品不需预处理，不消耗化学试剂，不污染环境；一次测试可以测定多种成分和指标；具有很高的精确度，结果准确度逼近标准方法[3,4]。近红外模式识别技术已经在中药含量测定方面得到了广泛的应用，解决了很多传统含量测定方法无法解决的问题，并且得到了较好的结果。虞科等[5]建立近红外光谱法对复方丹参滴丸中多种酚酸类成分进行含量测定方法，结果令人满意；该法操作简便、快速无损、准确可靠，可推广应用于中药复方制剂有效成分快速检测。黄倩倩等[6]建立近红外漫反射光谱技术快速测定中药黄芩中主要活性成分黄芩苷和总黄酮含量的方法，结果表明该方法快速简便,适合于黄芩中主要活性成分的快速分析。

1.4原子吸收光谱法（AAS）

原子吸收光谱法是基于被测物质基态原子在蒸气状态下对特征电磁辐射吸收而进行的定性定量分析方法,具有检出限低、灵敏度高、选择性好、准确度高、分析速度快、应用范围广等特点。随着原子吸收光谱技术的不断改进与提高，其为目前测定中药重金属及有害元素、微量元素最常用的方法。谭晓虹等[7]用火焰原子吸收光谱法测定中药生地和熟地中微量元素的含量，结果表明中药生地和熟地中含有Zn,Cu,Fe等微量元素，同时发现该测定方法简便，精密度及重现性均较好。郭俊明等[8]采用原子吸收光谱法测定了云南野生裂褶菌中7种金属元素的含量；张莅峡等[9]以氢化物原子吸收光谱法测定了承蛭中的有毒元素砷和汞。

1.5荧光分光光度法(FS)

荧光分光光度法具有灵敏度高、选择性好、方法快捷、试样量少等特点，广泛应用于中药及其制剂中胺类、甾体类、维生素、蛋白质、氨基酸和酶等的分析。对于中药及其制剂中微量、痕量物质的分析也常采用荧光法，该法尤其适用于生

物体液中的药物及其代谢产物的分析。杨连梅[10]等建立荧光分析法测定黄芪药材中黄芪甲苷的含量，该方法灵敏度高,选择性好,结果无干扰,可广泛应用于黄芪药材的含量测定。施群等[11]采用荧光分光光度法测定盐酸小檗碱片中小檗碱的含量。

1.6核磁共振谱(NMR)

核磁共振技术是一种用来探测和研究物质及其性质的近代实验技术，其定量分析法操作简便，样品用量少，定性鉴定和定量分析同步完成，其他物质和杂质干扰少，无需分离过程，分析速度和精密度可以接近HPLC法。中药有效成分含量偏低且存在多种相似物质对分析产生干扰，NMR在药物质量控制、鉴别药物伪劣、分析产物产地等方面，发挥重要作用。如Li[12]等使用固相萃取与NMR相结合的方法测定了来源于42个不同产地的党参中3种季铵生物碱的含量，结果显示不同产地的党参药材质量差异很大。随着中药生产领域的发展，核磁共振作为质量控制的手段已得到重视，并逐渐地应用于实践，其无疑会给中药研究带来巨大的推动作用。

2色谱法

目前，在中药含量分析中主要使用薄层色谱法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）。随着科技不断进步，仪器的不断完善和创新，许多新的色谱方法与技术也逐步应用于中药分析中，如超高效液相色谱（UPLC）、高效毛细管电泳（HPCE）等。

2.1薄层色谱法（TLC）

薄层色谱法是较早应用于中药分析的一种色谱法，具有分析速度快、分离能力强、灵敏度高、显色方便，试样与处理简单、上样量大、仪器简单操作方便等特点。通过与对照品斑点的形状大小以及位置可以进行定性鉴别，随着薄层扫描的出现，使薄层色谱在定量分析的应用更有说服力。郭迎霞等[13]以双波长反射式线性扫描的方式，对对照品色谱图与供试品进行扫描用于测定棉团铁线莲中齐墩果酸的含量；结果表明齐墩果酸在1.007～5.035μg范围内点样量与斑点峰面积积分值呈良好的线性关系，所用方法精密度与重复性都良好。祁海宏等[14]采用薄层色谱扫描法测定治带片中苦参碱含量，结果苦参碱点样量在1-5μg范围内与峰面积线性关系良好，平均加样回收率为99.11%。

2.2高效液相色谱法（HPLC）

高效液相色谱具有分离效率高、选择性好、分析速度快、检测灵敏度高、色谱柱可反复使用、操作自动化及应用广泛的特点。目前，高效液相色谱法广泛应用于中药材和中成药的质量分析，是中药含量测定的首选方法。《中国药典》2005