昆明医科大学-法医毒物分析(期末资料)
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改良Stas-Otto法：当分析目标不够明确，或怀疑有多种毒物存在时，可采用改良Stas-Otto法进行分离萃取。
Stas-Otto法原理：
检材匀浆，稀酸酸化，95%乙醇
小心蒸至浓稠状，加无水乙醇研散浸提，滤取醇液，
蒸发至糖浆状
水浴上蒸干，加水溶解，保持酸性，过滤
乙醚分次萃取，分层后，合并醚液
1mol/L NaOH水溶液反提6mol/L NaOH碱化乙醚萃取
不易溶于水Fra Baidu bibliotek
吗啡
各类毒物常用分离方法
液液萃取法（liquid-liquid extraction,LLE）：利用待测物在互不相容的两种溶剂中溶解度不同差异，使待测物从一种溶剂转移到另一种溶剂之中。萃取原则：少量多次。萃取溶剂的选择：根据相似相溶的原理，选用对被萃取物溶解度大的有机溶剂作为萃取溶剂，可提高分配比。分配比：当溶质在互不相溶的两种溶剂中溶解分配达到平衡时，两相中该溶质的的浓度比成为分配比。
毒物的分类：①合成药毒物；②天然药毒物；③毒品；④杀虫剂；⑤除草剂；⑥杀鼠剂；⑦气体毒物；⑧挥发性毒物；⑨金属毒物；⑩水溶性无机毒物。
水溶性无机毒物检材采取及处理方法：①水浸法；②透析法。
毒物分析方法类别：①形态学方法；②动物试验方法；③免疫分析法；④理化分析法；⑤仪器分析法。
回收率（recovery）：是指对检材进行处理后，所得到样品中待测物含量与分离净化前检材中原有待测物实际含量之比。
检验结果的判断及合理使用：如果检验的结果是阳性，说明检材中含有被检测的毒物，且其含量高于方法检测限。如果检验的结果是阴性，说明检材中不含被检测的毒物，或其中毒物浓度低于所用方法的检测限。阳性结果应该考虑：①受检者是否在治疗用药期间，②其工作或生活环境是否可能接触到毒物，③有些物质是否会因腐败产生，④由于检材处置不当，被污染产生的假阳性。阴性结果应注意：①因检材保存或处置不当，毒物已经分解变化；②毒物的中毒剂量小、性质又不稳定或者代谢排泄很快，无法跟踪检测。
毒物（toxicant）：是指进入机体后，通过物理或化学作用，造成人体组织、器官的形态学损害或功能障碍的外源性化学物[1]。
毒性作用的产生条件和影响因素：①毒物的成分；②起作用的剂量；③作用途径与方式；④受作用的生物体；⑤个体情况。
毒品：指鸦片、海洛因、甲基苯丙胺（冰毒）、吗啡、大麻、可卡因以及国家规定管制的其他能够使人形成瘾癖的麻醉药品或精神药品。
乙醚萃取有机溶剂萃取
液固提取法（liquid-solid extraction)：利用待测毒物与杂质在柱中固定相和洗脱液之间吸附或分配作用或不同组分分子大小等方面的差异进行分离。又被称为固相萃取技术（solid phase extraction，SPE）。该方法是利用待检毒物与杂质在柱中固定相和洗脱液之间吸附或分配作用或不同组分分子大小等方面的差异进行分离。根据固定相填料的种类不同可分为：1.正相固相萃取;2.反相固相萃取;3.离子交换固相萃取。①正相固相萃取：正相萃取是采用极性固定相和中等极性至非极性的洗脱剂，适用于极性毒物的分离。②反相固相萃取：在该系统中，固定相的极性小于洗脱液的极性，即采用非极性的固定相和中等极性或极性洗脱液。③离子交换固相萃取：适用于分离带有电荷的毒物，根据填料及用途不同又分为阳离子交换柱和阴离子交换柱。
检材处理的必要性：1，去除内源性杂质2，减少对检测的干扰3，降低仪器损耗。
检材处理基本原理：是利用检材中待检毒物与检材中含有的其他共存物在性质上的差异而采取不同的方法来进行分离、纯化。
检材处理的大致步骤：分离，净化，富集，定容。
检材处理的方法：（一）预处理（pretreatment）：是检材处理的第一步，主要是指对检验材料进行检材制备，调整酸碱性，去除蛋白及进行结合物的解离等。A.检材制备；B.调整酸碱性；C.去除蛋白质，有以下几种常用方法：①有机溶剂沉淀法、②盐析法、③等电点沉淀法、④酶解法，D.结合物的解离，常用的方法有“酸碱水解法”和“酶水解法”。（二）非挥发性毒物的检材处理方法：按照非挥发性毒物的酸碱性，大致可将其分成以下四类：
检测限（LOD）：指检材或检样中待测物能被检出的最少量或最低浓度。
可靠性验证的实施方法：①模拟实验；②空白对照试验；③已知对照试验；④随行标准参比法。
内标选择原则：①理化性质稳定，在整个检测过程中不会发生分解变质，也不会与被测物发生化学作用。②既不是检材中可能存在的，也不是与案件有关的毒物及其代谢产物。③与被检测物有相似的理化性质，能与之共同通过整个过程，并与被测物有相类似或成某种比例的蚀耗。④与被检测物有可区分的理化性质，在检测中不会产生相互干扰。⑤有相适应的检测限，测定范围、精密度和可靠的回收率。
中毒（poisoning）：是指生物体受到一定量的毒物作用而引起功能性和器质性改变后出现的疾病状态或死亡。因中毒导致的死亡称为中毒死（death by poisoning）。
毒物分析（toxicological analysis）：是应用化学、药学、医学等学科的现代科学理论、技术和方法，对危害人类健康生存的化学物质进行分析研究的一门应用科学。属于分析化学的一门分支学科，大多数情况下为微量分析或痕迹分析。法医毒物分析（forensic toxicological analysis）：属于突发性毒物分析，主要是涉及或怀疑涉及由毒物引起的伤害或死亡事（案）件中的有关物质进行分析鉴定。相比于毒物分析：1，突发性2，法律性。
酸碱性原则：
毒物分类
酸性条件
碱性条件
毒物举例
酸性毒物
易溶于有机溶剂
不易溶于水
易溶于水
不易溶于有机溶剂
巴比妥类
斑蟊素
碱性毒物
易溶于水
不易溶于有机溶剂
易溶于有机溶剂
不易溶于水
吩噻嗪类
苯二氮卓类，生物碱
中性毒物
不易溶于水，易溶于有机溶剂
格鲁米特
强心苷
两性毒物
成盐状态下:易溶于水
不易溶于有机溶剂
在一定的ph范围内：易溶于有机溶剂
保留时间：是组分从进样开始到柱后该组分出现峰值浓度时所需的时间。
检测器：
热导检测器氢火焰离子化检测器
浓度型质量型检测器氮磷检测器
电子捕获检测器火焰光度检测器
气相色谱法衍生化的方法：酰化、烷基化、硅烷化、缩合、酰化。
高效液相色谱法检测器：紫外检测器、荧光检测器、示差拆光检测器、电化学检测器等。
生物碱的定义及分离提取原则：①选择适当酸碱浓度和溶剂；②水溶液的酸碱性不能太高，防止水解；③使用吸附力较弱的吸附剂，易于洗脱；④尽可能将碱性物质与生物碱分离，减少干扰。
体外检材（specimen in vitro）：是指那些未经过体内吸收、分布、代谢等过程的检材。其中的药毒物在形态、气味、酸碱性、溶解度和化合状态等方面尚全部或部分地保留其原有性状。
体内检材（body specimen）：也成为生物材料或生物检材（biological material），它主要是指取自生物活体或尸体的检验材料，包括尿、血、唾液和其他体液，也包括各种内脏、毛发、肌肉、皮肤、骨骼等组织，还包括取自已埋尸体的组织或腐泥等。
Stas-Otto法原理：
检材匀浆，稀酸酸化，95%乙醇
小心蒸至浓稠状，加无水乙醇研散浸提，滤取醇液，
蒸发至糖浆状
水浴上蒸干，加水溶解，保持酸性，过滤
乙醚分次萃取，分层后，合并醚液
1mol/L NaOH水溶液反提6mol/L NaOH碱化乙醚萃取
不易溶于水Fra Baidu bibliotek
吗啡
各类毒物常用分离方法
液液萃取法（liquid-liquid extraction,LLE）：利用待测物在互不相容的两种溶剂中溶解度不同差异，使待测物从一种溶剂转移到另一种溶剂之中。萃取原则：少量多次。萃取溶剂的选择：根据相似相溶的原理，选用对被萃取物溶解度大的有机溶剂作为萃取溶剂，可提高分配比。分配比：当溶质在互不相溶的两种溶剂中溶解分配达到平衡时，两相中该溶质的的浓度比成为分配比。
毒物的分类：①合成药毒物；②天然药毒物；③毒品；④杀虫剂；⑤除草剂；⑥杀鼠剂；⑦气体毒物；⑧挥发性毒物；⑨金属毒物；⑩水溶性无机毒物。
水溶性无机毒物检材采取及处理方法：①水浸法；②透析法。
毒物分析方法类别：①形态学方法；②动物试验方法；③免疫分析法；④理化分析法；⑤仪器分析法。
回收率（recovery）：是指对检材进行处理后，所得到样品中待测物含量与分离净化前检材中原有待测物实际含量之比。
检验结果的判断及合理使用：如果检验的结果是阳性，说明检材中含有被检测的毒物，且其含量高于方法检测限。如果检验的结果是阴性，说明检材中不含被检测的毒物，或其中毒物浓度低于所用方法的检测限。阳性结果应该考虑：①受检者是否在治疗用药期间，②其工作或生活环境是否可能接触到毒物，③有些物质是否会因腐败产生，④由于检材处置不当，被污染产生的假阳性。阴性结果应注意：①因检材保存或处置不当，毒物已经分解变化；②毒物的中毒剂量小、性质又不稳定或者代谢排泄很快，无法跟踪检测。
毒物（toxicant）：是指进入机体后，通过物理或化学作用，造成人体组织、器官的形态学损害或功能障碍的外源性化学物[1]。
毒性作用的产生条件和影响因素：①毒物的成分；②起作用的剂量；③作用途径与方式；④受作用的生物体；⑤个体情况。
毒品：指鸦片、海洛因、甲基苯丙胺（冰毒）、吗啡、大麻、可卡因以及国家规定管制的其他能够使人形成瘾癖的麻醉药品或精神药品。
乙醚萃取有机溶剂萃取
液固提取法（liquid-solid extraction)：利用待测毒物与杂质在柱中固定相和洗脱液之间吸附或分配作用或不同组分分子大小等方面的差异进行分离。又被称为固相萃取技术（solid phase extraction，SPE）。该方法是利用待检毒物与杂质在柱中固定相和洗脱液之间吸附或分配作用或不同组分分子大小等方面的差异进行分离。根据固定相填料的种类不同可分为：1.正相固相萃取;2.反相固相萃取;3.离子交换固相萃取。①正相固相萃取：正相萃取是采用极性固定相和中等极性至非极性的洗脱剂，适用于极性毒物的分离。②反相固相萃取：在该系统中，固定相的极性小于洗脱液的极性，即采用非极性的固定相和中等极性或极性洗脱液。③离子交换固相萃取：适用于分离带有电荷的毒物，根据填料及用途不同又分为阳离子交换柱和阴离子交换柱。
检材处理的必要性：1，去除内源性杂质2，减少对检测的干扰3，降低仪器损耗。
检材处理基本原理：是利用检材中待检毒物与检材中含有的其他共存物在性质上的差异而采取不同的方法来进行分离、纯化。
检材处理的大致步骤：分离，净化，富集，定容。
检材处理的方法：（一）预处理（pretreatment）：是检材处理的第一步，主要是指对检验材料进行检材制备，调整酸碱性，去除蛋白及进行结合物的解离等。A.检材制备；B.调整酸碱性；C.去除蛋白质，有以下几种常用方法：①有机溶剂沉淀法、②盐析法、③等电点沉淀法、④酶解法，D.结合物的解离，常用的方法有“酸碱水解法”和“酶水解法”。（二）非挥发性毒物的检材处理方法：按照非挥发性毒物的酸碱性，大致可将其分成以下四类：
检测限（LOD）：指检材或检样中待测物能被检出的最少量或最低浓度。
可靠性验证的实施方法：①模拟实验；②空白对照试验；③已知对照试验；④随行标准参比法。
内标选择原则：①理化性质稳定，在整个检测过程中不会发生分解变质，也不会与被测物发生化学作用。②既不是检材中可能存在的，也不是与案件有关的毒物及其代谢产物。③与被检测物有相似的理化性质，能与之共同通过整个过程，并与被测物有相类似或成某种比例的蚀耗。④与被检测物有可区分的理化性质，在检测中不会产生相互干扰。⑤有相适应的检测限，测定范围、精密度和可靠的回收率。
中毒（poisoning）：是指生物体受到一定量的毒物作用而引起功能性和器质性改变后出现的疾病状态或死亡。因中毒导致的死亡称为中毒死（death by poisoning）。
毒物分析（toxicological analysis）：是应用化学、药学、医学等学科的现代科学理论、技术和方法，对危害人类健康生存的化学物质进行分析研究的一门应用科学。属于分析化学的一门分支学科，大多数情况下为微量分析或痕迹分析。法医毒物分析（forensic toxicological analysis）：属于突发性毒物分析，主要是涉及或怀疑涉及由毒物引起的伤害或死亡事（案）件中的有关物质进行分析鉴定。相比于毒物分析：1，突发性2，法律性。
酸碱性原则：
毒物分类
酸性条件
碱性条件
毒物举例
酸性毒物
易溶于有机溶剂
不易溶于水
易溶于水
不易溶于有机溶剂
巴比妥类
斑蟊素
碱性毒物
易溶于水
不易溶于有机溶剂
易溶于有机溶剂
不易溶于水
吩噻嗪类
苯二氮卓类，生物碱
中性毒物
不易溶于水，易溶于有机溶剂
格鲁米特
强心苷
两性毒物
成盐状态下:易溶于水
不易溶于有机溶剂
在一定的ph范围内：易溶于有机溶剂
保留时间：是组分从进样开始到柱后该组分出现峰值浓度时所需的时间。
检测器：
热导检测器氢火焰离子化检测器
浓度型质量型检测器氮磷检测器
电子捕获检测器火焰光度检测器
气相色谱法衍生化的方法：酰化、烷基化、硅烷化、缩合、酰化。
高效液相色谱法检测器：紫外检测器、荧光检测器、示差拆光检测器、电化学检测器等。
生物碱的定义及分离提取原则：①选择适当酸碱浓度和溶剂；②水溶液的酸碱性不能太高，防止水解；③使用吸附力较弱的吸附剂，易于洗脱；④尽可能将碱性物质与生物碱分离，减少干扰。
体外检材（specimen in vitro）：是指那些未经过体内吸收、分布、代谢等过程的检材。其中的药毒物在形态、气味、酸碱性、溶解度和化合状态等方面尚全部或部分地保留其原有性状。
体内检材（body specimen）：也成为生物材料或生物检材（biological material），它主要是指取自生物活体或尸体的检验材料，包括尿、血、唾液和其他体液，也包括各种内脏、毛发、肌肉、皮肤、骨骼等组织，还包括取自已埋尸体的组织或腐泥等。