农药生物活性测定实验指导(精)

农药生物活性测定

实验指导

游红编

实验一供试目标昆虫的饲养

——棉铃虫的饲养

一、实验目的：

1、明确标准目标昆虫饲养在生物测定中的意义；

2、了解常见目标昆虫的饲养条件及方法；

3、学习棉铃虫的饲养方法。

二、实验原理：

杀虫剂生物测定必须使用大量、群体整齐、健康程度一致，龄期一致的标准目标昆虫，才能保证对杀虫剂毒力的反应准确。因此，进行杀虫剂生物测定必须采用人工饲养标准目标昆虫，以保证供试昆虫的充分供应，这是农药毒力试验工作中的最基本的组成部分。

饲养目标昆虫的种类，除采用农作物害虫外，仓库害虫、卫生害虫及其他繁殖力强，便于饲养的昆虫也可采用，通过饲养条件的控制，促使供试目标昆虫尽量达到生理状况一致，以减少试验中的误差。

棉铃虫（Helicoverpa armigera H.）属鳞翅目夜蛾科。食性杂，可长年饲养。但因幼虫在三龄期以后有相互残杀习性，故必须单头饲养。对该虫可采用天然植物饲料，如棉蕾铃、青豌豆、新鲜玉米和辣椒等。若连续大量饲养，须用人工饲养。

三、主要仪器及试材：

1、试虫：棉铃虫；

2、饲养用具：养虫室，培养皿（15cm），培养皿（5cm）,养虫缸，纱布等。

3、饲料：

（1）、饲料组成：

熟大豆粉（g）20.0 玉米粉（g）30.0

大麦粉（g）30.0 抗坏血酸（g） 1.0

干酵母（g）8.0 琼脂（g） 3.5

苯甲酸钠（g）0.8 棉油(ml) 0.5

36％醋酸(ml) 6.0 10％甲醛(ml) 1.0

水(ml) 200

(2)、配制方法：

取总水量30％的水，加入玉米粉等成分搅拌；另取70％的水，以溶解琼脂，冷却至70℃时与上述成分混合搅拌；饲料均匀倒入培养皿（15cm）内，厚度1.0——1.5cm，冷却后备用。

四、实验方法与步骤：

1、饲养条件：

养虫室温度保持26——28℃，相对湿度60%——70%，12小时光照。

2、饲养方法：

（1）、在培养皿（16cm）放入约0.3——0.5mm厚的饲料若干块，将附有卵块的纱布放入皿内，用黑布将皿口封住，布上压玻璃板，缸下部对着光源，孵化的幼虫可很快到饲料上取食。（2）、待幼虫长到2龄后，移入装有人工饲料的培养皿（5cm）内，每皿一头，幼虫在内取

食，直至老熟。

（3）、幼虫进入预蛹期，即转移到装有无菌细土的养虫缸内，必须保持湿润，以利入土化蛹和蛹的存活。

（4）、成虫羽化后，雌雄配对，放入养虫缸内，缸内放一个内有10%蜂蜜液的培养皿，皿内放脱脂棉，以便蛾子从润湿的棉上吸取蜂蜜。养虫缸上蒙上纱布，并用橡皮筋扎好。蛾子在缸内交尾产卵，每日将产于纱布上的卵连同纱布取下，并换新纱布和蜂蜜。

五、实验注意事项：

1、注意饲养室及饲养用具的清洁、消毒。

2、注意饲养环境的控制，棉铃虫的幼虫在3龄后具有自相残杀习性，应单独饲养。

3、在棉铃虫饲养过程中，应注意及时更换新鲜的饲料，以防饲料变干。配制好的饲料必须

在低温下储存。

六、实验结果处理：

1、每日观察记录棉铃虫的取食、生长情况，并认真填写观察记录。

2、观察棉铃虫的蜕皮生长情况，记录各龄期的生长时间长短及试虫的平均体重。

七、思考题：

1、标准目标昆虫的饲养在生物测定工作中有何意义？

2、在棉铃虫的饲养过程中应该注意那些问题？并对其饲养条件和方法提出改进意见。

实验二杀虫剂初步毒力测定

一、实验目的：

1、通过本试验学习掌握杀虫剂室内毒力初筛试验的操作技术。

2、观察昆虫中毒征象特征——兴奋、击倒、抽搐、麻痹、昏迷、死亡等。

3、明确标准目标昆虫代表性的实用意义。

二、实验原理：

为了初步确定某些化学物质是否对某些害虫具有毒杀能力，应首先进行一次淘汰试验，或叫初筛试验，又称初步综合杀虫毒力试验。这种试验不涉及毒杀方式和毒杀能力的大小，因此，不严格限制用药量和均匀度，一般采用较高的浓度，尽量发挥综合毒效（包括胃毒、触杀、薰蒸等作用）。

一般农药初筛毒力测定方法，根据试虫对象不同，多采用浸渍法、喷雾法、喷粉法、饲料混药法等。每处理需试虫15-30头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时要注意各处理用药等量均匀一致，设置温度一般在20-28℃，相对湿度60-80%，通气良好。一般液剂在0.1-1%，粉剂1-10%。

三、主要仪器及试材：

1、试虫：小菜蛾（3龄）。

2、供试药剂：药剂A、药剂B。

3、试验器材：养虫室、potter喷雾塔、量筒、镊子、吸管、烧杯、培养皿、毛笔等。

四、实验方法与步骤

1、药剂配制：将A、B药剂配成0.1%的溶液备用。

2、试虫移取：

取小菜蛾3龄幼虫集中混匀后，用毛笔刷入培养皿，每处理10头，重复一次。

3、喷布质量检定

用9cm的白色园纸片来检查喷雾雾滴的大小和喷布是否均匀一致，如不符合要求，可调节喷头及位置，使喷布质量达到基本要求。

4、处理方法：

采用喷雾法，选用potter喷雾塔，喷布药液前，用清水及欲喷洒的药液大量喷布。换药前需将受药盘及雾化室底部用布充分擦净，然后大量喷布试验的药液。

在接有小菜蛾的培养皿中加入一定新鲜菜叶后，用移液管吸取3ml药液进行喷布，约10秒后，待药液全部沉降，取出培养皿，做好标记，空白对照只喷洒清水。待药剂干后，将试虫连同饲料置于恢复室内培养24小时后检查结果。

五、实验注意事项：

1、目标试虫的选择：应选用具有一定的代表性及经济价值，耐药性较强、生长健壮、自然

死亡率底，虫龄虫体大小一致，最好采用人工饲养的试虫。

2、环境条件的选择：温度在20-28℃，相对湿度在60%-80%，通气良好。

3、处理设计：每处理需试虫15-30头，可以不设重复，每次试验均要设空白对照，施药时

要注意各处理用药等量均匀一致。