基因工程试题

一、名词解释1、基因组DNA文库：将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后，与载体DNA重组，再全部转化宿主细胞，得到含全部基因组DNA的种群，称为基因组DNA文库。

2、DNA的复性：将变性DNA经退火（低于变性温度约25～30℃的条件下保温一段时间）处理，使其重新形成双螺旋结构的过程，称为DNA的复性。

3、克隆化：获取同一拷贝的过程，即无性繁殖。

4、Tm：加热DNA溶液，使其对260nm紫外光的吸收度突然增加，达到其最大值一半时的温度，就是DNA的变性温度（融解温度，Tm）。

5、选择标记基因：是指该基因的表达产物对选择剂产生抗性，致使转化细胞不受选择剂影响，能正常生长、发育、分化，从而把转化体选择出来的一类基因。

6、基因和基因组 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。

一个生物体的全部DNA序列称为基因组（genome）7、分子杂交不同来源的单链核酸（DNA或RNA），只要它们具有大致相同的碱基序列，经过退火处理，就能重新形成杂种双螺旋，这一现象称为分子杂交。

8、生物技术：也称生物工程，是人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理，按照预先的设计，改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到某种目的的一门新兴的、综合性的学科。

9、载体：把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具称为载体。

10、cDNA文库：即由mRNA经过反转录成cDNA,然后来构建文库，构建的文库不包含内含子。

11、转化:外源DNA导入宿主细胞的过程称之为转化。

12、黏性末端：指DNA分子在限制性内切酶的作用下形成的具有互补碱基的单链延伸末端结构，它们能够通过互补碱基间的配对而重新连接起来。

13、重叠基因：一个基因序列中，含有另一基因的部分或全部序列。

14、基因组文库：把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中，这个群体即为这种生物的基因组文库。

15、同尾酶识别位点不同，但切割后产生相同末端的酶，称为同尾酶。

16、酶切位点DNA在限制性内切核酸酶的作用下，使多聚核苷酸链上磷酸二酯键断开的位置被称为酶切位点。

二、填空1、基因工程技术是生物技术的核心技术。

2、在质粒载体图谱上，写出下列符号表示的含义：Amp氨苄青霉素抗性基因, LacZβ-半乳糖甘酶基因, ori转录复制起始点 ,MCS多克隆位点。

3、PCR包括三个步骤_变性，退火，延伸。

4、核酸具有酸性，粘度大，能吸收紫外光，最大吸收峰为260nm。

吸光度A260/A280 比值在1.7～2.0之间时，DNA纯度高；比值小于1.7时，表明DNA的纯度不高，可能有蛋白或酚污染。

5、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，其含量越高，则Tm越高。

6、基因工程的实施包括四个必要条件：工具酶、基因、载体和受体细胞。

7、DNA双螺旋结构是DNA二级结构的一种重要形式，它是Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的一种结构模型。

8、常用的逆转录酶有AMV和M-MLV。

9、引起DNA变性的因素主要有：高温、强酸强碱、有机溶剂等。

10、在非最适的反应条件下，有些限制性内切酶的识别特异性会降低，识别的序列和切割会发生改变，这就是所谓的星活性。

11、限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端：平末端、黏性末端。

12、目的基因与噬菌体DNA进行重组时，可采用插入重组方式，也可采用置换重组方式。

13、写出下列符号的含义：Bt苏云金芽孢杆菌，ICP（苏云金芽孢杆菌）杀虫晶体蛋白14、常用的报告基因有β-半乳糖苷酶基因LacZ、氯霉素乙酰转移酶基因CAT、荧光素酶基因GUS、β-葡萄糖醛酸酶基因GFP、绿色荧光蛋白基因。

15、生物技术是人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科学原理，利用生物体或其体系制造人类所需要的产品的一门综合性的学科。

16、柯斯质粒是一类人工构建的质粒-噬菌体杂合载体，它的复制子来自质粒，cos位点序列来自λ噬菌体。

17、基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA 文库中则不含内含子。

18、生物技术主要是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。

19、生物技术具有的基本特征为高效益、高智力、高投入、高竞争、高势能、高风险。

20、生物技术可分为传统生物技术和现代生物技术。

21、现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。

22、现代生物技术以现代生物学研究成果为基础，以基因工程为核心的新兴学科。

23、通过基因工程技术对生物进行基因转移，使生物体获得优良品性，称为转基因技术，通过转基因技术获得的生物体称为转基因生物。

24、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。

25、酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。

26、基因工程以DNA为基本材料。

27、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。

28、分离目的基因常采用PCR技术从基因组DNA中扩增含目的具有的DNA片断，或者用分子杂交等方法从构建的cDNA文库或基因组文库中获得含目的基因的克隆子。

29、克隆载体有质粒载体和病毒（噬菌体）载体等，供不同实验要求选择使用。

30、在DNA连接酶的作用下，含目的基因的DNA片断与克隆载体连接成为重组DNA分子。

31、重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的Ti质粒载体转化法、电穿孔法、微弹轰击法、花粉管通道法。

导入动物细胞常用的方法有病毒颗粒介导的病毒载体转导法、磷酸钙转染法、显微注射法等。

32、筛选克隆子常采用克隆子携带的克隆载体携带的选择标记基因、供体DNA携带的报告基因等方法。

33、现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。

34、克隆载体有质粒载体和病毒（噬菌体）载体等，供不同实验要求选择使用。

35、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。

三、判断1、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。

（×）2、B型双螺旋DNA的稳定因素为氢键和碱基堆砌力。

（√）3、cDNA文库不包含内含子。

（√）4、Western杂交是DNA—RNA之间的杂交。

（×）5、DNA双酶切时，要先低盐缓冲液，后高盐缓冲液。

（√）6、如果需要得到真核生物基因的完整序列，必须用基因组文库方能达到。

（√）7、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。

（×）8、克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。

（√）9、假基因不能合成功能蛋白质，是相应的正常基因突变引起的。

（√）10、Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。

（√）11、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，碱基数相同的情况下，其含量越高，则Tm越高。

（√）12、农杆菌介导法和基因枪法是植物转化的主要方法（√）13、（√）有一些来源不同的限制性内切酶识别的是同样的核苷酸序列，这类酶称为同裂酶。

14、检测外源基因的导入时，PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。

（×）15、转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。

（×）16、转基因生物直接食用的，称为“转基因食品”，而作为加工原料生产的食品，则不能被称为“转基因食品”。

（×）17、质粒DNA进行电泳时，其三种构型中，开环DNA跑的最快，共价闭环形DNA跑得最慢。

（×）18、在生物技术的五大工程中，生化工程是核心技术，它能带动其他技术的发展。

（×）19、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DNA。

（×）20、DNA的复制是全保留不连续复制。

（×）21、基因是一个功能单位，但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位。

（√）22、Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。

（×）23、生物技术是一门新兴的学科。

（×）24、生物技术是现实生产力，也是具有巨大经济效益的潜在生产力，它将是21世纪高技术革命的核心内容。

（√）25、生物技术是由多学科综合而成的一门新学科。

（√）26、自1996年11月我国正式公布实施《农业生物基因工程安全管理实施办法》以来，我国已批准6种转基因植物商品化。

（√）27、1977年，美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物——人生长激素释放抑制剂激素。

（√）28、生物技术是一门新兴学科，它包括当代生物技术和现代生物技术两部分.（√）29、生物技术主要包括五项技术（工程）。

（√）30、现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。

（√）31、本世纪初，遗传学的建立及其应用，产生了遗传育种学，并于60年代取得了辉煌的成就，被誉为“第一次绿色革命”。

（√）32、人类基因组计划英文简称为 HGP.（√）33、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体（×）34、进入细菌的外来DNA之所以被降解，是因为细菌只修饰自身DNA，不修饰外来DNA（×）35、只有粘粒端才可以被连接起来（×）36、用自身作引物合成的cDNA链，往往cDNA并不完整（×）37、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。

（√）38、任何细胞都可用作受体细胞。

（×）39、克隆子就是重组子。

（×）40、原核生物细胞是最理想的受体细胞。

（√）41、目的基因来源于各种生物，其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。

（√）42、E.coli DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。

（√）四．简答1、基因工程操作过程的主要步骤有哪些？①分离或合成基因；②通过体外重组将基因插入载体；③将重组DNA导入细胞；④扩增克隆的基因；⑤筛选重组体克隆；⑥对克隆的基因进行鉴定或测序；⑦控制外源基因的表达；⑧得到基因产物或转基因动物、转基因植物2、一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么？（1）具有转录复制起始点。

（2）具有抗菌素抗性基因。

（3）具有若干限制酶切单一识别位点。

（4）具有较小的分子量和较高的拷贝数。

3、PCR反应系统应包括哪几部分？PCR反应系统应包括：①耐热DNA聚合酶（Taq酶）：②模板DNA：即待分析的目的DNA，③两种引物：需要两种引物，分别位于两条互补模板DNA链的3`-端。

④四种脱氧核糖核苷酸⑤缓冲溶液；⑥Mg2+；⑦超纯水或双蒸水；4、载体DNA与外源基因片段的连接方法主要有哪几种?①粘性末端DNA分子间的连接（包括一种限制性内切酶酶切位点的连接和不同限制性内切酶酶切位点的连接）；②平末端DNA分子间的连接；③同聚物加尾法连接；④人工接头连接法连接。