全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒应用方法人乳酸脱氢酶(LDH)ELISAKit
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人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒应用方法人乳酸脱氢酶(LDH)ELISAKit人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒:(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本试验采用双抗体夹心ABCELISA法。
用抗人LDH单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的LDH与单抗结合,加入生物素化的抗人LDH,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最终加停止液硫酸,在450nm处测OD值,LDH浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中LDH浓度。
试剂盒构成(28℃保管)酶标板(CoatedWells) 96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate) 12ml 10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml 20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):80U/瓶 2瓶底物工作液(TMBSolution) 12ml第一抗体工作液(BiotinylatedAntibody) 12ml 停止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,28℃保管48小时;更长时间须冷冻(20℃或70℃)保管,躲避反复冻融。
2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成80000U/L的溶液。
设标准管8管,第一管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。
在第一管中加入80000U/L的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。
如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。
第八管为空白对照。
3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液 9ml蒸馏水)。
4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
乳酸(LA)含量检测试剂盒说明书 微量法
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乳酸(LA)含量检测试剂盒说明书微量法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC2235规格:100T/48S产品内容:提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体8mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体34μL×1支,4℃保存。
临用前按试剂二(V):蒸馏水(V)=10μL:450μL的比例配制试剂二溶液,现用现配。
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。
临用前加入4mL蒸馏水充分溶解,可分装后-20℃保存,避免反复冻融,-20℃保存一周。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。
临用前加4mL蒸馏水充分溶解,4℃保存一周。
试剂五:粉剂×1瓶,-20℃避光保存。
临用前每瓶加入3mL蒸馏水混匀,可分装后-20℃保存,避免反复冻融,-20℃保存一周。
试剂六:液体2mL×1瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1支,4℃保存。
临用前加入1.04mL蒸馏水配成100μmol/mL的标准溶液。
显色液的配制:临用前根据用量按照试剂三(V):试剂四(V)=1:1的比例充分混匀,现配现用。
产品说明:乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。
乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH还原MTT生成紫色物质,在570nm处有特征吸收峰。
2自备实验用品及仪器:天平、研钵/匀浆器、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅、乙醇和蒸馏水。
操作步骤:一、样本处理:1.组织:按照质量(g):提取液一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液一)加入提取液一,冰浴匀浆后于4℃,12000g离心10min,取0.8mL上清液,再加入0.15mL提取液二,4℃12000g 离心10min后取上清待测。
乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案
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乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒一站式解决方案乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LD 或LDH ,EC1.1.1.27 )是一类NAD依赖性激酶,有LDHA、LDHB、LDHC三种亚基,可构成6种四聚体同工酶。
动物乳酸脱氢酶是由4个亚单位组成的四聚体,常见的A、B 两种亚基构成的5种LDH同工酶(LDH1-5),C亚基则仅组成一种LDH同工酶即LDH-C4。
乳酸脱氢酶为含锌离子的金属蛋白,分子量为135-140kD,是糖无氧酵解及糖异生的重要酶系之一,可催化丙酸与L-乳酸之间的还原与氧化反应,也可催化相关的α-酮酸。
LDH广泛存在于人体组织中,以肾脏含量最高,其次是心肌和骨肌。
红细胞内LDH约为正常血清的100倍。
一、乳酸脱氢酶分类1.根据结合辅酶的不同,微生物体一般包含两种乳酸脱氢酶,NAD-依赖型乳酸脱氢酶(NAD-dependent lactate dehydrogenases,nLDHs)和NAD-非依赖型乳酸脱氢酶(NAD-independent lactate dehydrogenases,iLDHs)两大类。
2.按其催化底物的构型不同,NAD-依赖型乳酸脱氢酶可以分为NAD依赖型-L-乳酸脱氢酶(L-NAD-依赖型乳酸脱氢酶)和NAD依赖型-D-乳酸脱氢酶(D-NAD-依赖型乳酸脱氢酶)两大类,分别催化丙酮酸合成L-乳酸和D-乳酸。
3.根据天然电子受体的不同,可以将NAD-非依赖型乳酸脱氢酶分为三类。
第一类为膜蛋白,利用膜醌类作为外部的电子受体;第二类直接利用O2作为电子受体,根据氧化终产物的不同,又将其细分为乳酸氧化酶(Lactate oxidase,LOX)和乳酸单氧酶(Lactate monooxygenases,LMO),其中前者产生丙酮酸和H2O2,而后者产生乙酸、CO2和H2O;第三类是硫胺b2(flavocytochrome b2),存在于真菌中,它天然的电子受体为细胞色素c。
乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书
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货号:MS1001 规格:100管/48样乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)试剂盒说明书微量法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义:LDH(EC 1.1.1.27)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是糖酵解途径的末端酶,催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应,伴随着NAD+/NADH之间互变。
测定原理:LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸进一步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色,颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
自备实验用品及仪器:可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:提取液:60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入1.3 mL蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;试剂三:液体5 mL×1瓶,4℃避光保存;试剂四:液体20mL×1瓶,4℃保存;样品测定的准备:1、细菌、细胞或组织样品的制备:细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~5000:1的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P比色法)
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加入物(ml) 待测样品(血清、血浆、体液等) LDH 检测工作液
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乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)
简介:
乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH 或 LD)属于氧化还原酶,能够催化氢氧原 子或电子从一中底物转移到另一种底物上乳酸脱氢酶是糖酵解和糖异生的一个极其重要的 酶,含有锌离子,广泛分布于人和动物组织、植物和微生物中,能可逆的催化乳酸(L)和丙 酮酸(P)之间的氧化还原反应。乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒(LD-P 比色法)是利用乳酸脱氢 酶催化上述逆反应,即丙酮酸+NADH+H+→乳酸+NAD+。在上述反应过程中,丙酮酸还 原成乳酸,同时 NADH 氧化成 NAD+,引起 340nm 处吸光度的下降。该 LD-P 法的优点 是:1、操作比二硝基苯肼比色法简单;2、重复性好;3、准确性比二硝基苯肼法好;4、
2、 处理后的样品应及时检测,否则 LD4 和 LD5 易失效。 3、 血清或肝素抗凝血浆检测效果较好,草酸类、EDTA 抗凝剂对 LDH 活性有抑制作用。
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4、 避免使用溶血样本。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服幵戴一次性手套操作。
自动分析仪计算公式:LDH(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(296/10)=ΔA/min×4758.8 注意:如果待测样品加入 LDH 保护工作液,其结果应除以 0.9。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求lepu
![乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求lepu](https://img.taocdn.com/s3/m/dfb5a27bb14e852459fb5713.png)
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)适用范围:用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶的活性。
分说明1.1 规格试剂1:3×60 mL,试剂2:1×45 mL;试剂1:1×60 mL,试剂2:1×20 mL;试剂1:1×60 mL,试剂2:1×12 mL;试剂1:2×60 mL,试剂2:2×15 mL;试剂1:1×40 mL,试剂2:1×10 mL;试剂1:1×4L,试剂2:1×1L;试剂1:1×16L,试剂2:1×4L。
1.2主要组成成分试剂1主要组分:试剂2主要组分:2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1:无色或淡黄色透明溶液;试剂2:无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损,标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.50。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.002。
2.4 分析灵敏度测试300U/L的被测物时,吸光度变化率(ΔA/min)应不低于0.0085。
2.5 准确度用参考物质(GBW09177)对试剂(盒)进行测试,相对偏差应不超过±10%。
2.6 重复性用血清样品或质控样品重复测试所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于5%。
2.7 线性2.7.1 在[25,750]U/L区间内,线性相关系数r应不小于0.990;2.7.2 [25,100)U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;[101,750]U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.8 批间差试剂(盒)批间相对极差应不大于10%。
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui
![乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求derui](https://img.taocdn.com/s3/m/c01cee5fcc17552706220838.png)
乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒
(乳酸底物法)
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度≤0.50。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以生理盐水为空白时,在温度37℃、波长340nm、光径1.0 cm 条件下,吸光度变化率≤0.002。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试浓度为100U/L被测物时,吸光度变化率≥0.004。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在25 ~750U/L区间(范围)内,其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒重复性CV 值应≤5%。
2.5.2试剂盒批间相对极差(R)应≤10.0%。
2.6准确度
相对偏差(Bias%)应在参考物质靶值±10%以内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书
![乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/bd3aab7d27284b73f2425011.png)
乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒说明书(乳酸→丙酮酸连续监测法)【产品名称】中文名称:乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(乳酸→丙酮酸连续监测法)英文名称:LACTATE DEHYDROGENASE REAGENT KIT(L→P method)【包装规格】50ml/盒(R-1:40ml×1,R-2:10ml×1),240ml/盒(R-1:64ml×3,R-2:48ml×1),250ml/盒(R-1:40ml×5,R-2:10ml×5),375ml/盒(R-1:100ml×3,R-2:75ml×1),2500ml/盒(R-1:500ml×4,R-2:500ml×1)。
【预期用途】本试剂盒用以测定人血清乳酸脱氢酶(LDH)的活力。
【检验原理】乳酸脱氢酶在催化乳酸生成丙酮酸的同时将NAD+还原成NADH。
通过测定NADH在340nm处吸光度增加的速度可求得乳酸脱氢酶的活力。
LDHL-乳酸+ NAD+─────→丙酮酸+ NADH + H+【主要组成成份】试剂成份含量R-1 L-乳酸锂76mmol/LR-2 NAD ≥31mmol/l *不同批号试剂盒中的各组份,经检验符合产品性能指标的,可以互换。
【储存条件及有效期】本试剂盒在2-8℃下避光保存可稳定一年;试剂R-1、R-2开启后在2-8℃避光保存可稳定一个月。
【适用仪器】本试剂适用于日立7020型、日立7060型、日立7080型、日立7150型、日立7170型、日立7180型、日立7600(D)型、日立7600(P)型自动分析仪以及奥林巴斯AU600、AU2700、东芝-雅培、BECKMAN CX系列、BECKMAN LX-20型等自动分析仪。
本试剂在日立7020自动分析仪上已通过第三方验证,并备有以上各种自动分析仪的参数可供参考。
【样本要求】空腹血清,保存于室温可稳定3小时,保存于0℃以下可稳定1周。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求haifeng
![乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求haifeng](https://img.taocdn.com/s3/m/241aa2e4c850ad02df80416c.png)
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)
适用范围:本产品适用于体外定量测定人血清中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1 外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰,外包装完整无破损;
2.1.2试剂1为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物;
2.1.3试剂2为无色澄清液体,目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量
净含量不低于标示值。
2.3 试剂空白
2.3.1空白吸光度
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度应小于0.5。
2.3.2空白吸光度变化率
在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下,空白吸光度变化率不大于0.002/min。
2.4 线性范围
(25,1000)U/L范围内,相关系数≥0.990;
(25,100]U/L范围内,线性绝对偏差应不超过±10U/L;
(100,1000)U/L范围内,线性相对偏差应不超过±10%。
2.5 分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下,换算为测定浓度为300U/L的样本, 吸光度变化率△A/min应不小于0.015。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤5.0%。
2.6.2 批间差
相对极差R≤10.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090593,测定结果应不超过标示值的±10%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃~8℃储存,可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测,检测结果应满足2.4和2.7的规定。
乳酸试剂盒说明书
![乳酸试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/fcc9d4b3b8d528ea81c758f5f61fb7360b4c2be8.png)
乳酸试剂盒说明书乳酸试剂盒是一种常见的实验室试剂,用于测定液体或样品中乳酸的浓度。
以下是乳酸试剂盒的详细说明书,以帮助用户正确使用和理解这种试剂盒的原理和操作步骤。
1. 产品简介:乳酸试剂盒是一种用于测定乳酸浓度的化学试剂盒。
它基于乳酸与酶的催化作用,通过测量乳酸与辅酶之间的光学吸收来确定样品中乳酸的浓度。
2. 试剂成分:乳酸试剂盒包含以下主要试剂成分:- 乳酸酶:催化乳酸与辅酶之间的反应。
- 辅酶:与乳酸酶反应并产生光学吸收的物质。
- 缓冲液:维持反应体系的pH值稳定。
- 稳定剂:保持试剂盒的稳定性。
3. 原理:乳酸试剂盒的原理是基于乳酸酶的催化作用。
乳酸与乳酸酶反应生成丙酮酸和辅酶,辅酶的产生会引起光学吸收的变化。
通过测量辅酶光学吸收的变化,可以确定样品中乳酸的浓度。
4. 操作步骤:以下是使用乳酸试剂盒进行乳酸浓度测定的基本步骤:- 步骤1:准备样品。
将待测液体或样品按照试剂盒说明稀释至合适的浓度范围。
- 步骤2:加入试剂。
向样品中加入适量的乳酸试剂盒试剂,充分混合。
- 步骤3:反应。
将混合液置于适当的温度下静置一段时间,使乳酸与试剂发生反应。
- 步骤4:测量光学吸收。
使用光度计或分光光度计,在适当的波长下测量混合液的光学吸收值。
- 步骤5:计算浓度。
根据乳酸试剂盒的标定曲线,将测得的光学吸收值转换为乳酸的浓度。
5. 注意事项:- 在进行实验前,确保试剂盒的使用期限未过期。
- 按照说明书的要求正确稀释样品,以避免超出试剂的测量范围。
- 在实验过程中,保持试剂和样品的温度稳定。
- 根据实验需要,调整光度计的波长以获得最佳测量结果。
- 根据试剂盒的要求,进行适当的质量控制实验以确保测量结果的准确性。
以上是乳酸试剂盒的详细说明书,通过正确理解和操作,用户可以准确测定样品中乳酸的浓度,从而在实验和研究中得到可靠的结果。
LAC乳酸测定试剂盒(乳酸氧化酶法)产品书说明书
![LAC乳酸测定试剂盒(乳酸氧化酶法)产品书说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/1b46588569eae009591bec08.png)
乳酸测定试剂盒(乳酸氧化酶法)说明书【产品名称】通用名称:乳酸测定试剂盒(乳酸氧化酶法)英文名称:lactic acid Assay Kit(LAC)【包装规格】R1:1⨯40ml、R2:1⨯10ml;R1:2⨯40ml、R2:2⨯10ml;R1:2⨯60ml、R2:2⨯15ml;校准品(选配):1⨯2ml(1个水平)。
【预期用途】用于体外定量测定人血浆中乳酸的含量。
临床上主要用于代谢性酸中毒的辅助诊断。
【检验原理】乳酸在乳酸氧化酶(lactate oxidase)的催化下,生成丙酮酸和过氧化氢,过氧化氢、4—氨基安替比林、4—氯酚反应生成紫红色化合物,在546nm处有最大吸收峰,其吸光强度与样本中乳酸含量成正比。
乳酸氧化酶乳酸+O2—————〉丙酮酸+H2O2过氧化物酶H2O2+4—氯酚+4—氨基安替比林—————〉紫色产物+2H2O【主要组成成分】由试剂R1、R2和校准品组成。
试剂R1:4-氯酚2.1mmol/L、过氧化物酶2KU/L;试剂R2:4—氨基安替比林3.5mmol/L 、乳酸酶3KU/L;校准品:含乳酸水溶液。
校准品可溯源至Randox 参考品CAL2351,注:浓度见每批瓶标示。
不同批号试剂盒中各组分不可互换。
【储存条件及有效期】试剂和校准品在2℃~8℃无腐蚀性气体中避光储存,若无污染,可稳定至失效期,有效期365天。
试剂和校准品开瓶后2℃~8℃可稳定30天。
备注:生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。
【适用仪器】日立7180、奥林巴斯AU680、贝克曼LX-20/DXC800、迈瑞BS-380、朕江T900全自动生化分析仪。
【样本要求】1、新鲜空腹血浆。
血液从静脉处收集,存于冰浴,血浆在30分钟内离心,并在1h内上机测定,延迟离心会使乳酸值升高。
离心后2℃~8℃可保存3小时。
2、为保证样本各组分稳定,新鲜采集的血浆需用抗凝剂EDTA氟化钠处理。
【检验方法】(1)双试剂无需配制,直接使用。
LDH文档,乳酸脱氢酶测定试剂盒(LDH)检测标准操作规程
![LDH文档,乳酸脱氢酶测定试剂盒(LDH)检测标准操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/6e0d03cab0717fd5370cdc5b.png)
1、方法依据:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(IFCC法)测定方法2、适用范围:适用于人血清或血浆乳酸脱氢酶(LDH)的测定。
3、试剂仪器:3.1 试剂:深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃~8℃有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存,在2℃~8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
3.3 仪器:迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪.4、操作程序4.1方法原理LDH 催化乳酸氧化为丙酮酸,同时将NAD+还原为NADH,NADH 的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。
LDH乳酸+ NAD+ + H2O 丙酮酸+ NADH + H+4.2样本要求新鲜血清、肝素抗凝或EDTA抗凝血浆样本,采集后及时测定,应避免溶血和污染。
4.3上机操作4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”。
4.3.2 校准:4.3.2.1 标准液的准备:校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品,按说明书要求稀释后分装,-20℃冷冻保存,用前提前15分钟从冰箱中取出,复溶到室温后上机检测。
4.3.2.2 校准程序:首次使用校准。
当有以下情况时需重新校准:1)换试剂批号或出现质控漂移时;2)当仪器做完保养后;3)仪器进行零件更换时。
每次试验前用准备好的校准品进行校准,校准通过后进行检测。
4.3.2.3 质控:在标本开始之前做质控,质控通过后方能进行标本的检测。
4.3.3 测试基本参数4.4参考范围115~220 U/L (注:各实验室应有自己的参考范围。
)4.5 方法评价线性范围:4~1000U/L内。
当样本测定值超过上限时,应将样本用生理盐水稀释,重新测定,结果乘以稀释倍数。
精密度:批内变异系数:≤ 3.0%;批间变异系数:≤5.0%。
分析灵敏度:本试剂盒的检测低限不高于4 U/L。
C0016 乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒说明书
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乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒产品简介:碧云天的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit),也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit),是一种基于diaphorase催化的INT显色反应,通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。
本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测,更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。
同时,基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测,本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里,其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。
通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性,就可以实现对细胞毒性的定量分析。
LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标,并被广泛用于细胞毒性检测。
LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr 标记细胞,随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。
本试剂盒的基本原理是,在乳酸脱氢酶的作用下,NAD+被还原生成NADH,NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan),在490nm波长下产生吸收峰,从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。
吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。
该酶联反应原理的示意图如下:可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。
一个试剂盒可进行100次检测。
保存条件:-20℃保存,一年有效。
C0016-3需注意避免反复冻融。
C0016-4需避光保存。
试剂盒解冻后可以短期4℃存放,2-3天内有效。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒
![乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒](https://img.taocdn.com/s3/m/5a7c68f20740be1e640e9a68.png)
Focusonyourresearch Serviceforlifescience乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒货号:E-BC-K046-M方仪器:酶标仪(440-460nm)规格:96T(40sFocusonyourresearchServiceforlifescience基本信息用途本试剂盒合用于检测血清、血浆、胸水、组织、细胞等样本中LDH活力。
检测范围及敏捷度检测范围:6-1000U/L敏捷度:6U/L背景介绍乳酸脱氢酶(EC,LDH)是一种氧化复原酶,它催化丙酮酸和乳酸的互相转变,同时将NADH氧化成NAD+[1]。
LDH是一种四聚体分子,由两个亚基构成,分别为H亚基和M亚基[2]。
在组织损害或红细胞溶血后,细胞将LDH开释到血液中。
细胞外的LDH活性用于检测细胞损害或细胞死亡[3]。
检测原理以辅酶I为递氢体,LDH催化乳酸产生丙酮酸,丙酮酸与 2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,后者在碱性溶液中呈棕红色,颜色的深浅与丙酮酸的浓度呈正比,经过测定OD值,可计算LDH的活力。
本试剂盒测组织和细胞样本时,需测定总蛋白浓度,介绍使用 BCA法(货号:E-BC-K318-M)。
乳酸脱氢酶(LDH)比色法测试盒供给试剂和物件编号名称规格(size)保留方式(96T)(Storage)试剂一基质液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent1)(SubstrateBuffer)试剂二辅酶I粉剂×1支2-8℃保留6个月(Reagent2)(CoenzymeI)试剂三显色剂5mL×1瓶2-8℃避光保留6(Reagent3)(ChromogenicAgent)个月试剂四碱溶液5mL×1瓶2-8℃保留6个月(Reagent4)(AlkaliReagent)试剂五2μmol/mL丙酮酸标准品1mL×1支2-8℃保留6个月(Reagent5)(2μmol/mLPyruvicAcidStandard)96孔酶标板1板96孔覆膜2张样本地点标志表1张注:试剂严格按上表中的保留条件保留,不一样试剂盒中的试剂不可以混用。
乳酸脱氢酶测定方法操作规程
![乳酸脱氢酶测定方法操作规程](https://img.taocdn.com/s3/m/c4c9cf54fd4ffe4733687e21af45b307e871f9bf.png)
乳酸脱氢酶(LDH)测定方法操作规程【产品名称】通用名称:乳酸脱氢酶(LDH)测定试剂盒(IFCC 法)使用说明书【预期用途】该试剂盒采用IFCC法,用于体外定量测定人血清或血浆中乳酸脱氢酶的活力。
【检验原理】LDH催化乳酸氧化为丙酮酸,同时将NAD+还原为NADH。
NADH的生成速率与标本中乳酸脱氢酶的活性成正比。
乳酸+ 2O LDH丙酮酸+NADH+H+【主要组成成份】R1:Good’s缓冲液50 mmol/LL-乳酸 5.0 mmol/LR2:NAD+7.0 mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2~8℃保存有效期为18个月。
试剂开瓶后应避光保存,在2℃~8℃可稳定30天。
试剂不可冰冻。
【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。
若需自动生化分析仪应用参数,请随时和公司联系。
建议用户在不同仪器上使用本产品时,根据实验室情况进行验证。
【样本要求】新鲜血清或血浆,采集后及时测定,应避免溶血和污染。
【检验方法】试剂准备R1:即用液体试剂R2:即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向上升反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。
校准校准品类型S1:生理盐水S2:迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求(包括但不限于以下情况)更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时,建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。
质控品测定值应该在规定的范围内。
若超出规定范围,有必要采取相应的措施或联系生产厂家。
【参考范围】男性:135~225U/L 女性:135~214U/L(注:各实验室应有自己的参考范围。
乳酸脱氢酶LDH总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说
![乳酸脱氢酶LDH总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说](https://img.taocdn.com/s3/m/dc6aa9c514791711cd79174e.png)
乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途乳酸脱氢酶(LDH)总活性终点比色法定量检测试剂是一种旨在通过乳酸脱氢酶反应系统中反应完成后还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后峰值的降低,即采用终点比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种细胞和组织裂解萃取样品(动物、人体、植物、昆虫等)乳酸脱氢酶(LDH)的总活性检测。
产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景乳酸脱氢酶是一种氧化还原酶,催化丙酮酸和乳酸的互相转化反应。
乳酸脱氢酶由4个亚单位构成,有两种类型:肌肉型和心肌型。
根据其亚单位成分,分为5种同功酶。
乳酸脱氢酶的活性检测用来评价细胞或组织的损害状况。
基于丙酮酸(pyruvate)底物在乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase;LDH)的催化下,转化成乳酸(lactate),同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reduced nicotinamide adenine dinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide;NAD),完全反应后,在分光光度仪下产生吸收峰值的变化(340nm 波长)由此定量测定乳酸脱氢酶的活性。
乳酸脱氢酶反应系统为:lactate dehydrogenasepyruvate + NADH →lactate + NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)产品内容缓冲液(Reagent A)5毫升反应液(Reagent B)500微升底色液(Reagent C)500微升阴性液(Reagent D)500微升产品说明书1份保存方式保存反应液(Reagent B)和底色液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,底色液(Reagent C)避免光照,有效保证12月用户自备比色皿或酶标板:用于比色的容器分光光度仪或酶标仪:用于比色分析实验步骤一、测定准备1.准备好待测样品(例如细胞裂解样品等),置于冰槽里2.设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,并置零3.缓冲液(Reagent A)室温下均衡温度二、背景对照测定1.移取195微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿2.加入5微升阴性液(Reagent D)3.加入25微升反应液(Reagent B)4.在25℃温度下孵育3分钟5.加入25微升底色液(Reagent C)6.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)7.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照0分钟读数8.在25℃温度下孵育5分钟9.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照5分钟读数10.背景空对照实际读数:0分钟读数-5分钟读数三、样品测定1.移取195微升缓冲液(Reagent A)到新的比色皿2.加入5微升待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈,且pH为)3.加入25微升反应液(Reagent B)4.在25℃温度下孵育3分钟5.加入25微升底色液(Reagent C)6.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)7.即刻放进分光光度仪检测,此为样品0分钟读数8.在25℃温度下孵育5分钟9.即刻放进分光光度仪检测,此为样品5分钟读数10.样品实际读数:0分钟读数-5分钟读数四、计算样品活性[(样品读数-背景读数)X样品稀释倍数X 1(体系容量;毫升)]÷[(样品容量;毫升)X (毫摩尔吸光系数)X 5(反应时间;分钟)]=单位/毫升÷(样品蛋白浓度)毫克/毫升=单位/毫克单位=微摩尔丙酮酸/分钟五、酶标板测定1.在96孔酶标板上做好相应标记:背景对照和样品2.分别移取195微升缓冲液(Reagent A)到相应孔中3.分别加入5微升阴性液(Reagent D)或待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈,且pH为)4.分别加入25微升反应液(Reagent B)5.在25℃温度下孵育3分钟6.分别加入25微升底色液(Reagent C)7.轻轻摇动酶标板8.即刻放进酶标仪检测,此为0分钟读数9.在25℃温度下孵育5分钟10.即刻放进酶标仪检测,此为5分钟读数11.实际读数:0分钟读数-5分钟读数12.活性计算[(样品读数-背景读数)X样品稀释倍数X (体系容量;毫升)]÷[(样品容量;毫升)X (毫摩尔吸光系数)X (厘米)X 5(反应时间;分钟)]=单位/毫升÷(样品蛋白浓度)毫克/毫升=单位/毫克单位=微摩尔丙酮酸/分钟注意事项1.本产品为20次操作,包括背景对照2.操作时,须戴手套3.系统操作过程中,背景测定只需1次4.样品须澄清,至关重要5.比色测定后,比色皿须清洗彻底6.背景空对照0分钟读数通常至为理想状态7.背景空对照的正常读数差值(0分钟-5分钟)通常为至(正负即可)8.样品0分钟读数通常和背景空对照0分钟读数一致9.样本测定5分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性10.建议待测样本蛋白浓度为20微克/5微升;如果样本酶活性过低或过高,则可以增加或降低样本量(本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒)11.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度12.乳酸脱氢酶单位活性定义为:在25℃,pH 条件下,每分钟内能够转化1微摩尔丙酮酸至乳酸所需的酶量作为一个活性单位13.本公司提供系列乳酸脱氢酶检测试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定检测敏感。
全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)
![全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)](https://img.taocdn.com/s3/m/3fa922f281c758f5f61f6791.png)
全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶微板法)简介:乳酸(Lactic acid ,LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物,是一种含有羟基的羧酸,分子式是C 3H 6O 3,参与生物化学很多反应过程。
乳酸检测有化学氧化法、酶催化法、电化学法、酶电极感应器法。
全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在NAD 存在条件下,乳酸脱氢酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸,同时生成NADH 。
在碱性条件下显色剂与丙酮酸生成复合物,并使平衡偏向乳酸氧化为丙酮酸的方向,驱动反应完成,生成的NADH 与乳酸为等量摩尔。
通过酶标仪测定340nm 处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出全血或血浆中LD 水平。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:操作步骤(仅供参考):1、 配制蛋白沉淀工作液:取1瓶蛋白沉淀剂,直接加入蒸馏水至100ml ,充分混匀,即为蛋白沉淀工作液。
4℃避光保存1周有效。
该试剂有一定腐蚀性,请小心操作。
2、 配制空白对照液:取配制好的蛋白沉淀工作液蒸馏水,混匀,即为空白对照液。
4℃避光保存1周有效。
3、 制备无蛋白上清液:抽血前,取试管或离心管编号,分别称重(W t )并记录,加入6ml蛋白沉淀工作液,再次分别称重(W m )并记录,冰浴或4℃保存备用。
4、 全血LD 加样操作:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。
如果样品中的LD 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
样品的检测最好能设置平行孔。
编号 名称TC0737 100T Storage试剂(A): 乳酸标准(1mmol/L) 0.5ml 4℃ 避光 试剂(B): 蛋白沉淀剂 6瓶 RT 避光 试剂(C): LD Assay buffer 25ml -20℃ 避光 试剂(D): LD 显色液 D1: LD 显色液A 0.4ml -20℃ 避光 D2: LD 显色液B2ml-20℃ 避光使用说明书1份加入物(μl)空白孔 标准孔 测定孔 空白对照液10——乳酸标准(1mmol/L) —10 —无蛋白上清液——10LD Assay buffer 200 200 200充分混匀LD显色液23 23 235、全血LD检测:室温放置,用酶标仪检测,以空白孔调零,标准孔、测定孔的340nm吸光度(A标准、A测定),一般应数小时内检测完毕。
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求上泰生物
![乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)产品技术要求上泰生物](https://img.taocdn.com/s3/m/ea6b948addccda38366baf36.png)
乳酸脱氢酶测定试剂盒(乳酸底物法)
性能指标
1.性能指标
1.1外观
外观应符合以下要求:
试剂1(R1)应为无色澄清液体,无沉淀及絮状悬浮物,外包装完整无破损;
试剂2(R2)应为无色澄清液体,无沉淀及絮状悬浮物,外包装完整无破损。
1.2装量
液体试剂装量要求不低于标示量。
1.3试剂空白
1.3.1试剂空白吸光度
在37℃、340 nm 波长、1 cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.50;
1.3.2试剂空白吸光度变化率
在37℃、340 nm 波长、1 cm光径条件下,用生理盐水作为样品加入试剂测试时,试剂空白吸光度变化率(△A/min)应不大于0.002。
1.4分析灵敏度
测定已知活性为200 U/L的样本时吸光度变化率(△A/min)应不小于0.005。
1.5线性范围
测试血清样本,试剂线性在25 U/L~750 U/L(37℃)区间内:
a)线性相关系数(r)应不小于0.990;
b)25 U/L~100 U/L区间内,线性绝对偏差应不超过±10 U/L;101 U/L~750 U/L区间内,线性相对偏差应不超过±10%。
1.6精密度
1.6.1重复性
用血清样品重复测试所得结果的重复性(变异系数,CV)应不大于5%。
1.6.2批间差
试剂(盒)批间相对极差应不大于10%。
1.7准确度
相对偏差应不超过±10%。
1.8分析特异性
当抗坏血酸≤50 mg/dL、胆红素≤40 mg/dL、脂肪乳剂≤1%时,对试剂检测结果的偏差影响在±10%以内。
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全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
简介:
乳酸(Lactic acid,LD)又称 2-羟基丙酸是一种化合物,是一种含有羟基的羧酸,分子 式是 C3H6O3,参不生物化学很多反应过程。乳酸检测有化学氧化法、酶催化法、电化学法、 酶电极感应器法。
使用说书
1份
操作步骤(仅供参考):
1、 配制蛋白沉淀工作液:取 1 瓶蛋白沉淀剂,直接加入蒸馏水至 100ml,充分混匀,即 为蛋白沉淀工作液。
2、 配制空白对照液。4℃避光保存 1W 有效。 3、 制备无蛋白上清液:抽血前,取试管或离心管编号,分别称重(Wt)幵记录,加入 6ml
蛋白沉淀工作液,再次分别称重(Wm)幵记录,冰浴或 4℃保存备用。在空腹和休息状 态下抽血,丌用止血带,丌可用力握拳,如果使用止血带,应在穿刺后除去止血带至少 等待 2min 后再抽血。最好用肝素化的注射器抽血,抽取血液后立即注入预先称量的含 有蛋白沉淀工作液(预冷至 4℃)的试管或离心管中,每管 1ml。颠倒混匀 3 次,丌可产 生气泡。待试管或离心管的温度不室温一致时,再称重(Wb)幵记录。 4、 全血 LD 检测:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,幵 注意避免产生气泡。如果样品中的 LD 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进 行测定。样品的检测最好能设置平行孔。
计算结果: 血清、血浆乳酸(mmol/L)=(A 测定/A 对照)×1.0×D
也可根据 NADH 毫摩尔吸光度计算:血清、血浆乳酸(mmol/L)=A 测定×(2.33/6.22) × (D/0.1)
参考区间:
全血乳酸 血浆乳酸 脑脊液乳酸 成年人尿液乳酸排出量
0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl) 0.54~1.82mmol/L(5.4~16mg/dl)
0.5~1.7mmol/L(5~15mg/dl) 5.5~22mmol/d
注意事项:
1、 本法适用于自动分析仪,分别监测测定管和标准管的吸光度升高速率,计算乳酸的浓 度。
2、 如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。 3、 抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检,尽快分离出血浆等。 4、 草酸抗凝剂对 LDH 有一定的抑制作用。 5、 为了您的安全和健康,请穿实验服幵戴一次性手套操作。
全血乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在 NAD 存在条件下,乳酸脱氢 酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸,同时生成 NADH。通过分光光度比色法测定 340nm 处吸光 度,据此通过比色分析就可以计算出全血或血浆中 LD 水平。该试剂盒仅用于科研领域,丌 宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
名称
北京雷根生物技术有限公司
加入物 空白对照液/μl 乳酸标准(1mmol/L)/μl 无蛋白上清液/μl LD Assay buffer/μl
LD 显色液/μl
空白孔 10 — — 200
充分混匀 23
标准孔 — 10 — 200
23
测定孔 — — 10 200
23
5、 室温放置 15min,用酶标仪检测,以空白孔调零,读取空白孔、标准孔、测定孔的 340nm 吸光度(即 A 空白、A 标准、A 测定),一般应数小时内检测完毕。
编号
TC073 9 50T
Storage
试剂(A): 乳酸标准(1mmol/L)
1.5ml
4℃ 避光
试剂(B): 蛋白沉淀剂
3瓶
RT 避光
试剂(C): LD Assay buffer
25ml
-20℃ 避光
试剂(D): D1: LD 显色液 A LD 显色液
0.2ml -20℃ 避光
临用前,按 D1:D2=3:200 的比例混合,即为 LD 显色液,即配即用。