铜绿假单胞菌的分类鉴定 ppt课件
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铜绿假单胞菌PPT优秀课件
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1994 1995 1996 1998 1999 2000 2001
总菌株 554 1048 1348 1542 1291 1678 1949
铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 克雷伯菌属 不动杆菌属 肠杆菌属 嗜麦芽窄食单胞菌 变形杆菌属 沙雷菌属 其它假单胞菌属 枸橼酸杆菌属
19
青霉素结合蛋白( Penicillin2B inding2p roteins, PB2Ps)是位于细菌细胞内膜上的一些膜蛋白,是β内酰胺 类抗生素的专一性作用靶点,最初因为能与青霉素共价结 合而得名。PBPs是参与细菌细胞壁肽聚糖生物合成的酶, 包括转肽酶、羧肽酶和内肽酶。它的正常存在是细菌保持 正常形态及功能的必需条件。β内酰胺类抗生素正是通过 与PBPs结合抑制细菌细胞壁的生物合成引起细菌细胞死 亡从而发挥杀菌作用[ 22 ] 。当细胞膜上的PBPs数量减 少,或者PBPs的结构改变或产生一种新的PBPs,使其与β内 酰胺类抗生素的亲和力明显降低,就会产生耐药。这种机 制与β内酰胺酶能发生协同效应,引起细菌对β内酰胺类抗 生素的耐药。
铜绿假单胞菌对外界环境抵抗力较强，在潮湿处能长期生 存，对紫外线不敏感，湿热55℃ 1小时才被杀灭。
4
G- 致病菌标本来源分布
1994～2001年共监测10,279株菌
各种脓液3% 胆汁4%
血液5%
其他12%
伤口6%
泌尿道12%
呼吸道58%
5
7年间最常见的革兰氏阴性菌（株数）
铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 克雷伯菌属 不动杆菌属 肠杆菌属 嗜麦芽窄食单胞 菌 变形杆菌属 沙雷菌属 其它假单胞菌属 枸橼酸杆菌属
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1994 1995 1996 1998 1999 2000 2001
总菌株 554 1048 1348 1542 1291 1678 1949
铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 克雷伯菌属 不动杆菌属 肠杆菌属 嗜麦芽窄食单胞菌 变形杆菌属 沙雷菌属 其它假单胞菌属 枸橼酸杆菌属
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青霉素结合蛋白( Penicillin2B inding2p roteins, PB2Ps)是位于细菌细胞内膜上的一些膜蛋白,是β内酰胺 类抗生素的专一性作用靶点,最初因为能与青霉素共价结 合而得名。PBPs是参与细菌细胞壁肽聚糖生物合成的酶, 包括转肽酶、羧肽酶和内肽酶。它的正常存在是细菌保持 正常形态及功能的必需条件。β内酰胺类抗生素正是通过 与PBPs结合抑制细菌细胞壁的生物合成引起细菌细胞死 亡从而发挥杀菌作用[ 22 ] 。当细胞膜上的PBPs数量减 少,或者PBPs的结构改变或产生一种新的PBPs,使其与β内 酰胺类抗生素的亲和力明显降低,就会产生耐药。这种机 制与β内酰胺酶能发生协同效应,引起细菌对β内酰胺类抗 生素的耐药。
铜绿假单胞菌对外界环境抵抗力较强，在潮湿处能长期生 存，对紫外线不敏感，湿热55℃ 1小时才被杀灭。
4
G- 致病菌标本来源分布
1994～2001年共监测10,279株菌
各种脓液3% 胆汁4%
血液5%
其他12%
伤口6%
泌尿道12%
呼吸道58%
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7年间最常见的革兰氏阴性菌（株数）
铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 克雷伯菌属 不动杆菌属 肠杆菌属 嗜麦芽窄食单胞 菌 变形杆菌属 沙雷菌属 其它假单胞菌属 枸橼酸杆菌属
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铜绿假单胞菌ppt课件
微生物检验
采集标本：各种临床标本 医疗器械 环境用品 检验方法：直接镜检 分离培养(血平、MAC平板) 鉴定 分型：血清学分型、质粒指纹图谱分型、 脉冲场凝胶电泳分型等
脓液 痰 尿液等
血液 环境用品 分离培养 直接涂片染色
肉汤增菌
血平板
37 ℃18-24h
可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味）
假单胞菌属Pseudomonas
种类：
铜绿假单胞菌(P.aeruginosa) 荧光假单胞菌(P.fluorescence ) 恶臭假单胞菌(P.putica ) 斯氏假单胞菌(P.stutizeri) 曼多辛假单胞菌(P.mendocina) 产碱假单胞菌(P.alcaligenes) 假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)
初步鉴定
最后鉴定
菌落 色素
革兰阴性杆菌 氧化酶(+)
非发酵菌鉴定系统鉴定
血清分型
检验程序
分离培养
普平：
18-24h圆形 大小不一 边缘不整 扁平 湿润 常呈融合态 琼脂被染成绿或黄绿 血平： 扁平 湿润 有金属光泽 琼脂被染成蓝 绿或灰绿 有溶血环 MAC平：微小无光泽半透明 48h后菌落呈棕色
粘附素：菌毛的神经氨酸酶分解上皮细胞表面的 神经氨酸促进细菌侵入 荚膜：多糖类物质抗吞噬细胞的吞噬作用；使细 菌锚泊在细胞表面，与呼吸道感染有关 内毒素、外毒素 绿脓菌素：绿色色素，由铜绿假单胞菌的RpoS基 因编码产生的代谢产物，具有氧化还原活性的化 合物，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基 团，引起组织损伤。在致病中起重要作用 弹性蛋白酶：降解弹性蛋白，引起肺实质损伤和 出血；降解补体和白细胞蛋白酶抑制物；可与相 应抗体形成复合物，沉积于感染组织中 磷脂酶C
《铜绿假单胞菌》课件
形态特征和生化试验进行鉴定。
3
抗生素敏感性测试
使用不同的抗生素对菌株进行敏感性 测试，以确定其对抗生素的耐药性。
菌种特点
形态特征 生长环境 耐药性
革兰氏阴性杆菌 一般生长于潮湿的环境，如水体和土壤 对多种抗生素具有耐药性
病原性机制
侵入性
铜绿假单胞菌通过附着于宿主 细胞表面并分泌外毒素，侵入 宿主细胞并引起感染。
影像学检查
如X光、CT扫描和核磁共振 等，用于评估感染的程度和 影响范围。
防控措施
1 个人卫生
保持良好的个人卫生习惯，如勤洗手、使用洗手液和消毒剂等。
2 环境清洁
保持环境的清洁和卫生，定期清洁和消毒接触过的表面。
3 隔离措施
对已感染的个体进行隔离，以避免感染的传细菌，具
生物膜形成
免疫反应
铜绿假单胞菌能够形成生物膜， 提供菌株的保护，增加抗药性， 并促进感染的持续。
感染引发宿主的免疫反应，导 致炎症反应和其他相关症状。
临床诊断
病情评估
对病患进行全面体格检查和 病情评估，包括症状、体征 和病史等。
实验室检查
进行标本分析、培养和鉴定， 以确定是否存在铜绿假单胞 菌感染。
展望
2
有多种病原性机制和耐药性。了解其 特点和防控措施对于预防感染非常重
未来的研究可以着重于开发新的抗菌
要。
药物、研究病原性机制并加强预防措
施。
《铜绿假单胞菌》PPT课 件
欢迎来到《铜绿假单胞菌》PPT课件！在本课件中，我们将介绍这种微生物 的特点、病原性机制以及临床诊断和防控措施。让我们一起深入了解这个有 趣的话题吧！
课程介绍
什么是铜绿假单胞菌？
铜绿假单胞菌是一种常见 的革兰氏阴性细菌，常见 于土壤和水体中。它具有 耐药性和适应性强的特点。
铜绿假单胞菌诊治共识幻灯片
─ 金黄色葡萄球菌 ─ 凝固酶阴性葡萄球菌 ─ 肺炎链球菌 ─ 溶血性链球菌
大多数临床检出的主要致病菌同时也是人体体表定植的正常菌群，因此，临 床报告的细菌检出率可能包含了人体定植的细菌！
1.翁心华等.现代感染病学.上海医科大学出版社.1998年第一版：23-29 2.汪复等. 中国感染与化疗杂志. 2010;10(5):325-334.
1.0 1.2 30.9 26.1 7.9 5.2
9.3 9.4 34.8 24.7 15.8 15.9
29.1 25.0 19.5 19.0 19.8 21.7
60.4 61.4 60.7 64.6 39.1 63.9
胡付品, 朱德妹，汪复等. 2011年中国CHINET细菌耐药性监测. 中国感染与化疗杂志.2012;12(5):321-329
铜绿假单胞菌对碳青霉素类耐药率不断增加
• 2011年CHINET细菌耐药性检测结果显示，铜绿假单胞菌对碳青霉 烯类的耐药率已经高于青霉素类和头孢菌素类抗生素，其机制尚需要 进一步探讨，但应引起临床的高度重视。
大肠埃希菌 肺炎克雷伯 铜绿假单胞 鲍曼不动杆
菌
菌
菌
亚胺培南 美洛培南 头孢他啶 头孢比肟 头孢哌酮/舒巴坦 哌拉西林/他唑巴坦
正常菌群在宿主细胞上定居 、生长和繁殖的现象称为定 植
汪复等.实用抗感染治疗学.人民卫生出版社.2005年第一版:7-8
内源性感染
当机体免疫功能低下时，原 来正常寄居或致病力很低的 微生物可能侵入人体其他部 位造成内源性感染
这些微生物称为条件病原微 生物，若是细菌或真菌则称 为条件致病菌
体表定植的正常微生物群与临床检出的主要致病菌
铜绿假单胞菌感染在呼吸系统感染中更为突出国外数据 ：
大多数临床检出的主要致病菌同时也是人体体表定植的正常菌群，因此，临 床报告的细菌检出率可能包含了人体定植的细菌！
1.翁心华等.现代感染病学.上海医科大学出版社.1998年第一版：23-29 2.汪复等. 中国感染与化疗杂志. 2010;10(5):325-334.
1.0 1.2 30.9 26.1 7.9 5.2
9.3 9.4 34.8 24.7 15.8 15.9
29.1 25.0 19.5 19.0 19.8 21.7
60.4 61.4 60.7 64.6 39.1 63.9
胡付品, 朱德妹，汪复等. 2011年中国CHINET细菌耐药性监测. 中国感染与化疗杂志.2012;12(5):321-329
铜绿假单胞菌对碳青霉素类耐药率不断增加
• 2011年CHINET细菌耐药性检测结果显示，铜绿假单胞菌对碳青霉 烯类的耐药率已经高于青霉素类和头孢菌素类抗生素，其机制尚需要 进一步探讨，但应引起临床的高度重视。
大肠埃希菌 肺炎克雷伯 铜绿假单胞 鲍曼不动杆
菌
菌
菌
亚胺培南 美洛培南 头孢他啶 头孢比肟 头孢哌酮/舒巴坦 哌拉西林/他唑巴坦
正常菌群在宿主细胞上定居 、生长和繁殖的现象称为定 植
汪复等.实用抗感染治疗学.人民卫生出版社.2005年第一版:7-8
内源性感染
当机体免疫功能低下时，原 来正常寄居或致病力很低的 微生物可能侵入人体其他部 位造成内源性感染
这些微生物称为条件病原微 生物，若是细菌或真菌则称 为条件致病菌
体表定植的正常微生物群与临床检出的主要致病菌
铜绿假单胞菌感染在呼吸系统感染中更为突出国外数据 ：
多重耐药铜绿假单胞菌ppt课件
3
+ 铜绿假单胞菌 (pseudomonasaeruginosa, PA) 属于条件致病菌 ,广泛分布于自然界中 ,少 量定植于人体消化道、 呼吸道及会阴等部 位。当人体正常防御体系受损时可导致 PA 感染 ,临床多见于长期应用激素、 机械通 气、 免疫缺陷或使用多种广谱抗菌药物等 情况 ,因而 PA成为医院内感染的重要病原 菌之一。
8
+ 本菌所致感染的临床表现取决于受累部位。在住院病人中， 若口咽部有绿脓杆菌和其他革兰氏阴性杆菌共同繁殖，则 气管插管、气管切开或间歇性正压呼吸可引起肺部感染。 囊性纤维病的后期铜绿假单胞菌性支气管炎常见，分离得 到的菌株有粘液状菌落的形态学特征。烧伤伴有恶性肿瘤 的病人常见在其血液中分离出该菌株，临床表现为革兰氏 阴性败血症，有时出现坏疽性深部脓疱，其特征为直径约 1cm的紫黑色病变，中央区溃疡，四周为红斑。这种病变 最常见于腋下和肛门生殖器部位。
13
+ 染色镜检 为革兰阴性杆菌，菌体
大小（1.5～5.0)um×宽 (0.5～1)um，细长且长短 不一，有时呈球杆状或线 状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭
毛，无芽胞，无荚膜。
14
+ 分离培养
本菌生长对营养要求不高。对有正常菌群存在的临 床标本或采自环境中的标本应接种选择性培养基如 麦康凯琼脂培养基（MAC）；对无正常菌群存在的 临床标本如血液、脑脊液、穿刺液等可接种普通全 营养型培养基（如TSA、PCA、营养琼脂}或血琼脂 培养基、铜绿假单胞菌培养基。普通琼脂培养基上 生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落，该菌所产 生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得 培养基呈亮绿色；在血琼脂平板上生长时可以见到 在菌落的周围有溶血环，菌落呈金属光泽；在铜绿 假单胞菌培养基上呈蓝绿色或者红褐色菌落，365nm紫外灯下显荧光。 如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长，在液体表面形成菌落，而在培养基底部细菌 的生长不良。
+ 铜绿假单胞菌 (pseudomonasaeruginosa, PA) 属于条件致病菌 ,广泛分布于自然界中 ,少 量定植于人体消化道、 呼吸道及会阴等部 位。当人体正常防御体系受损时可导致 PA 感染 ,临床多见于长期应用激素、 机械通 气、 免疫缺陷或使用多种广谱抗菌药物等 情况 ,因而 PA成为医院内感染的重要病原 菌之一。
8
+ 本菌所致感染的临床表现取决于受累部位。在住院病人中， 若口咽部有绿脓杆菌和其他革兰氏阴性杆菌共同繁殖，则 气管插管、气管切开或间歇性正压呼吸可引起肺部感染。 囊性纤维病的后期铜绿假单胞菌性支气管炎常见，分离得 到的菌株有粘液状菌落的形态学特征。烧伤伴有恶性肿瘤 的病人常见在其血液中分离出该菌株，临床表现为革兰氏 阴性败血症，有时出现坏疽性深部脓疱，其特征为直径约 1cm的紫黑色病变，中央区溃疡，四周为红斑。这种病变 最常见于腋下和肛门生殖器部位。
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+ 染色镜检 为革兰阴性杆菌，菌体
大小（1.5～5.0)um×宽 (0.5～1)um，细长且长短 不一，有时呈球杆状或线 状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭
毛，无芽胞，无荚膜。
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+ 分离培养
本菌生长对营养要求不高。对有正常菌群存在的临 床标本或采自环境中的标本应接种选择性培养基如 麦康凯琼脂培养基（MAC）；对无正常菌群存在的 临床标本如血液、脑脊液、穿刺液等可接种普通全 营养型培养基（如TSA、PCA、营养琼脂}或血琼脂 培养基、铜绿假单胞菌培养基。普通琼脂培养基上 生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落，该菌所产 生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得 培养基呈亮绿色；在血琼脂平板上生长时可以见到 在菌落的周围有溶血环，菌落呈金属光泽；在铜绿 假单胞菌培养基上呈蓝绿色或者红褐色菌落，365nm紫外灯下显荧光。 如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长，在液体表面形成菌落，而在培养基底部细菌 的生长不良。
铜绿假单胞菌感染的科普知识PPT
如何预防铜绿假单胞菌感染?
如何预防铜绿假单胞菌感染? 个人卫生
保持良好的个人卫生习惯，如勤洗手、使用消毒 剂等。
尤其是在接触公共设施后，更需注意卫生。
如何预防铜绿假单胞菌感染? 医疗环境
医院及医疗机构需加强环境消毒，确保医疗器械 的清洁。
使用一次性器械可减少传播风险。
如何预防铜绿假单胞菌感染? 避免接触
及时的支持性治疗能帮助患者恢复健康。
铜绿假单胞菌感染的治疗 定期监测
感染患者需定期进行身体检查和实验室监测 。
监测病情变化，有助于及时调整治疗方案。
铜绿假单胞菌感染的前景
铜绿假单胞菌感染的前景
研究进展
目前针对铜绿假单胞菌的研究正在进行，力求找 到新的治疗方法。
科学家们在寻找新的抗生素和疫苗方面取得了一 定进展。
感染症状包括发热、咳嗽、呼吸急促及皮肤 感染等。
症状可能因感染部位不同而异。
铜绿假单胞菌感染的症状 严重症状
在重症病例中，可能出现败血症、肺炎等严 重并发症。
重症患者需尽快就医，避免病情加重。
铜绿假单胞菌感染的症状 高危人群
免疫系统较弱的人群，如老年人、糖尿病患 者及癌症患者，感染风险更高。
这些人群需要特别关注预防感染。
什么是铜绿假单胞菌? 特性
铜绿假单胞菌具有抗药性强、繁殖迅速等特点。
其抗药性使得治疗变得复杂，常见于医院感染。
什么是铜绿假单胞菌? 传播途径
铜绿假单胞菌主要通过直接接触、空气传播以及 水源传播。
在医院环境中，通常通过医疗器械或接触感染传 播。
铜绿假单胞菌感染的症状
铜绿假单胞菌感染的症状 常见症状
铜绿假单胞菌感染科普知识
演讲人：
目录
1. 什么是铜绿假单胞菌? 2. 铜绿假单胞菌感染的症状 3. 如何预防铜绿假单胞菌感染? 4. 铜绿假单胞菌感染的治疗 5. 铜绿假单胞菌感染的前景
铜绿假单胞菌分类鉴定PPT课件
02
特性：具有产生水溶性色素的能 力，使培养基呈现特有的铜绿色 ，同时具有氧化酶阳性、触酶阳 性等生化特征。
生物学分类
01
界
细菌界
02
科
假单胞菌科
03
属
假单胞菌属
04
种
铜绿假单胞菌
生态分布与环境适应
分布
广泛分布于自然界，如土壤、水 、空气等，也常见于人体皮肤、 肠道等部位。
环境适应
具有较好的适应性，可在多种环 境条件下生存，如低温、高温、 酸碱度变化等。
自动化细菌鉴定系统
利用自动化仪器对细菌进行快速鉴定，通过检测细菌的生理 生化反应，结合数据库比对，确定细菌的种属。
免疫学方法
利用特异性抗体对细菌进行抗原检测，通过免疫反应的阳性 或阴性结果判断细菌种类。
分子鉴定技术
16S rRNA基因测序
通过对细菌16S rRNA基因进行测序，与数据库中的序列进行比对，确定细菌的种属和种内亚型。
分子生物学分类
总结词
基于铜绿假单胞菌的基因组序列进行分类。
详细描述
通过分析细菌的基因组序列，可以揭示不同铜绿假单胞菌之间的遗传差异，从而 进行分类。
血清学分型
总结词
利用特异性抗体检测铜绿假单胞菌表 面抗原进行分类。
详细描述
通过检测细菌表面抗原与特异性抗体 结合的反应，可以确定不同血清型铜 绿假单胞菌之间的差异，从而进行分 类。
感染治疗与预防
感染治疗
铜绿假单胞菌感染的治疗主要依赖于抗生素，常用的抗生素包括青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类等。针对不 同感染部位和病情严重程度，选择合适的抗生素进行治疗。
预防措施
预防铜绿假单胞菌感染的措施包括加强环境卫生、提高免疫力、避免接触感染源等。对于易感人群和高危人群， 应定期进行健康检查和监测，及时发现并治疗感染。
特性：具有产生水溶性色素的能 力，使培养基呈现特有的铜绿色 ，同时具有氧化酶阳性、触酶阳 性等生化特征。
生物学分类
01
界
细菌界
02
科
假单胞菌科
03
属
假单胞菌属
04
种
铜绿假单胞菌
生态分布与环境适应
分布
广泛分布于自然界，如土壤、水 、空气等，也常见于人体皮肤、 肠道等部位。
环境适应
具有较好的适应性，可在多种环 境条件下生存，如低温、高温、 酸碱度变化等。
自动化细菌鉴定系统
利用自动化仪器对细菌进行快速鉴定，通过检测细菌的生理 生化反应，结合数据库比对，确定细菌的种属。
免疫学方法
利用特异性抗体对细菌进行抗原检测，通过免疫反应的阳性 或阴性结果判断细菌种类。
分子鉴定技术
16S rRNA基因测序
通过对细菌16S rRNA基因进行测序，与数据库中的序列进行比对，确定细菌的种属和种内亚型。
分子生物学分类
总结词
基于铜绿假单胞菌的基因组序列进行分类。
详细描述
通过分析细菌的基因组序列，可以揭示不同铜绿假单胞菌之间的遗传差异，从而 进行分类。
血清学分型
总结词
利用特异性抗体检测铜绿假单胞菌表 面抗原进行分类。
详细描述
通过检测细菌表面抗原与特异性抗体 结合的反应，可以确定不同血清型铜 绿假单胞菌之间的差异，从而进行分 类。
感染治疗与预防
感染治疗
铜绿假单胞菌感染的治疗主要依赖于抗生素，常用的抗生素包括青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类等。针对不 同感染部位和病情严重程度，选择合适的抗生素进行治疗。
预防措施
预防铜绿假单胞菌感染的措施包括加强环境卫生、提高免疫力、避免接触感染源等。对于易感人群和高危人群， 应定期进行健康检查和监测，及时发现并治疗感染。
铜绿假单胞菌的分类鉴定
最终鉴定
吲哚试验：选取可疑菌落的纯培养物接种于蛋白胨 水，培养8h-24h后，加Kovacs（靛基质）试剂约3mm 高，如若在液层界面发生红色，即为阳性反应。 42℃生长试验：选取纯被检物，接种于普通琼脂斜 面培养基上，于42℃培养4h，铜绿假单胞菌能生长为 阳性反应。
血清学鉴定
血清群鉴定：取洁净玻片，滴加多价O血清于玻片， 再接种此菌的纯培养物少许混匀，2min观察凝集现象， 鉴定。 血清学分型：按血清分型试剂盒操作说明进行操作： 将待检测菌在LB琼脂培养基中过夜培养，取少许与 30μL阳性血清混合，一分钟观察结果。 判定标准：有凝集块出现，且生理盐水空白对照组 不凝集者为阳性。
粗糙型（麦康凯平板）
菌落中央凸起 边缘扁平 表面粗糙
生物学特性
大肠型（麦康凯平板）
菌落圆形凸起 似大肠埃希菌菌落
细小，无光泽 半透明菌落
侏儒型（麦康凯平板）
生化特性
氧化酶：+ 葡萄糖的氧化（O/F）：O 枸橼酸盐利用：+ 精氨酸双水解：+ 明胶液化：+ 硝酸盐还原：+ 乙酰胺酶：+ 吲哚试验：-
初步鉴定
选出可疑菌落
金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味等
初步鉴定
➢染色镜检：取可疑菌落，进行革兰氏染色、镜检。 ➢氧化酶试验：挑取可疑菌落于滤纸片上，滴加一 滴新配制的5%二甲基对苯二胺试剂，15-30min内， 出现红色至紫红色，为阳性；若不变色，为阴性。
初步鉴定
➢绿脓菌素试验：选取可疑菌落2-3个，置于绿脓菌 素测定用培养基，于37℃培养24h，加入氯仿、色素 后，再加入盐酸 ，上层稀盐酸液内出现红色为阳性， 表示菌落中含有绿脓菌素。
铜绿假单胞菌的分类鉴定
《铜绿假单胞菌》课件
国际合作与未来展望
加强国际合作，共同应对铜绿 假单胞菌抗药性问题，分享最
佳实践和成功经验。
加大对新型抗菌药物的研究 和开发力度，寻找更有效的
治疗手段。
提高公众对抗生素合理使用的 认识，减少抗生素滥用，从源
头上遏制抗药性的产生。
THANKS
感谢观看
感染途径
铜绿假单胞菌主要通过破损的皮 肤、黏膜或接触污染的水或空气 传播。
症状
感染铜绿假单胞菌后，可引起皮 肤、呼吸道、泌尿道等部位的感 染，出现红肿、疼痛、发热等症 状。
疾病预防与控制
提高免疫力
保持健康的生活方式，加强锻炼，提 高自身免疫力，降低感染风险。
勤洗手
经常用肥皂和流动水洗手，或使用含 有至少60%酒精的手部消毒液。
避免接触污染水源和空气
避免接触可能被铜绿假单胞菌污染的 水源和空气，特别是医疗场所和游泳 池等公共场所。
合理使用抗菌药物
在医生的指导下合理使用抗菌药物， 避免滥用抗菌药物导致耐药性的产生 。
05
铜绿假单胞菌的检测与鉴 定
检测方法
培养法
将样本接种在选择性培 养基上，观察菌落形态 、颜色等特征，进行初
铜绿假单胞菌对碳源的利用较为广泛，可以利用多种糖类、醇类和有机 酸作为碳源。
生长条件
铜绿假单胞菌适宜在温暖、湿润的环境 中生长，最佳生长温度为30-37℃，适
宜pH值为6.0-7.5。
铜绿假单胞菌对干燥、氧气、紫外线等 环境因素较为敏感，因此在自然环境中
存活时间较短。
铜绿假单胞菌在营养丰富、有适宜生长 条件的环境下迅速繁殖，可在水、土壤 、空气、动物和人体皮肤等处广泛分布
04
铜绿假单胞菌的致病性
致病因子
铜绿假单胞菌性角膜炎讲课PPT课件
THANK YOU
汇报人：
汇报时间：20XX/XX/XX
YOUR LOGO
并发症：角膜溃疡、穿孔等严重并发症，影响视力
铜绿假单胞菌性角膜炎的治疗方法
药物治疗
抗生素治疗：选择敏感抗生素滴 眼液或眼膏，如妥布霉素等，以 抑制病原菌的生长繁殖。
辅助治疗：使用人工泪液、润滑 剂等，以减轻眼部干燥、疼痛等 症状。
抗炎治疗：使用非甾体消炎药或 糖皮质激素滴眼液，以缓解眼部 炎症和疼痛。
单击此处汇报人员：XX医院-XX
铜绿假单胞菌性角膜炎概述
定义和分类
铜绿假单胞菌 性角膜炎是一 种由铜绿假单 胞菌感染引起
的眼部疾病
分类：根据病 情轻重，可分 为单纯型、角 膜实质炎型和
角膜溃疡型
症状：眼部疼 痛、畏光、流 泪、视力下降
等
诊断依据：临 床表现、实验 室检查和角膜
刮片培养
病因和发病机制
铜绿假单胞菌性角膜炎讲课 PPT课件
汇报人：
汇报时间：20XX/XX/XX
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目录
CONTENTS
1 汇报人员 2 铜绿假单胞菌性角膜炎概述 3 铜绿假单胞菌性角膜炎的治疗方法 4 铜绿假单胞菌性角膜炎的预防措施 5 铜绿假单胞菌性角膜炎的案例分析 6 铜绿假单胞菌性角膜炎的护理和康复
保持眼部湿润，防止干涩 导致眼部抵抗力下降
佩戴隐形眼镜时要注意卫 生和正确使用方法
避免接触感染源
避免与铜绿假单 胞菌感染者接触
避免在公共场所 使用同一副眼镜
保持眼部清洁， 勤洗手
避免接触污染水 源
增强免疫力
保持充足的睡眠， 避免熬夜
均衡饮食，摄入 足够的营养物质
适量运动，增强 身体抵抗力
假单胞菌属ppt课件
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2019
20
被检验的肉含有荧光假单胞菌
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2019
21
2．临床意义
荧光假单胞菌（P.fluorescens）存在于土壤和水等环境中，常与
食物（鸡蛋、血、牛乳等）腐败有关，可作为咽部的正常菌群存 在，是人类少见的条件致病菌，偶从泌尿道感染病人尿中分离出。 由于具有嗜冷性，可在冰箱储存血液中繁殖，若输入含有此菌的 血库血液，可导致病人不可逆性的休克而死亡。
3. 运用血清学实验，噬菌体分型做医院内感染的追踪调查
铜绿假单胞菌的菌落分型
典型型 大肠菌样型 粘液型 侏儒型 粗糙型
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2019
9
菌落光滑凸起 成粘液状
粘液型（麦康凯平板）
-
2019
10
粘液型（血平板）
细小，无光泽 半透明菌落
侏儒型（麦康凯平板）
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2019
11
菌落呈灰绿色 大小不一 扁平湿润 边缘不规 则呈伞状伸展 表面常可 见金属光泽
假单胞菌在环境的生物修复方面进行了广泛的研究, 大体可分为有机 物污染和重金属污染的生物修复两大类。
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2019
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由恶臭假单胞菌及荧光假单胞菌等革 兰氏阴性短杆菌引起。患病初期可见 鱼的体表有点状白色黏液物附着并逐 渐蔓延扩大，严重时鳞片基部充血、 竖起，鳞片脱落，体表及鳍基部充血， 肝、肾充血，靠边缓游不吃食，不久 即死亡。
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血平板检验
2019
32
斯氏假单胞菌
1．细菌特性 革兰阴性杆菌，一端单鞭毛，运动活泼；最适生长 温度35℃，4℃不生长，大部分菌株在42℃生长，氧化 葡萄糖产酸，在6.5%高盐培养基中可生长；营养要求 不高，普通平板可生长，新分离菌株在培养基上可形 成特征性干燥、皱缩样菌落，黏附于琼脂表面难以移 动，可产生黄色色素，无荧光。
绿脓杆菌ppt课件
为防止细菌溅散污染环境，接种环灭菌前，须先将接种环 靠近火焰或放内焰中烤干，然后再在外焰中烧红灭菌，杀 死残留的细菌。 2．干燥：放空气中自然干燥。如欲加速，也可把涂片置于 火焰上部的热气层中烘烤，但切勿将涂膜烤焦。
3．固定：用染色夹子夹住涂片，在火焰的最热部分连续通 过三次，以固定之。此时杀死大部分细菌，并使标本固定 于玻片上，以免在染色或水洗过程中被冲掉。
(2)分区划线法。此法适用于含菌多的检测标本，如 粪便，喀痰、细菌固体培养物等。
①划线前的操作同平行划线法。先在平板的一端将标 本涂开并在平板的1/5～1/4面积上划密集的平行线， 接种环火焰灭菌。
②将平板转约70°角，待接种环冷却后，使接种环 通过已划线的1区5～7次，以后即不与1区接触作 连续密集划线，约占平板面积的1/4，接种环再通 过火焰灭菌。
3.硝酸盐蛋白胨水培养基300ml 加热溶解 调pH 分装有小倒管的试管 高压 直立制成高层
4.普通琼脂斜面培养基300ml 加热溶解 调pH 分装试管 高压 制成斜面
注意事项
1. 培养基溶解时，加有琼脂的培养基易沸，应注意 看守。
2. 注意调节培养基的pH。 3. 称牛肉膏用玻片，称甘油用小烧杯。 4. 加热后应补足液量。 5. 注意做好标记。
4．染色： ①初染:将结晶紫染液加于涂膜上，1min。 ②媒染:水洗后加芦戈氏碘液处理，1min。 ③脱色：水洗后用95％乙醇脱色，并摇动玻片，直至流 下的液体无色为止，约需0.5min。 ④复染：水洗后加石炭酸复红稀释液染色，1min。 ⑤水洗，用滤纸吸干，待标本充分干燥后进行镜检。
5．镜检： 干燥后，用油镜观察。判断两种菌体染色反应性。菌体 被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌（G+），被染成红色的 为革兰氏阴性菌（G-）。以分散开的细菌的革兰氏染色 反应为准，过于密集的细菌，常常呈假阳性。
3．固定：用染色夹子夹住涂片，在火焰的最热部分连续通 过三次，以固定之。此时杀死大部分细菌，并使标本固定 于玻片上，以免在染色或水洗过程中被冲掉。
(2)分区划线法。此法适用于含菌多的检测标本，如 粪便，喀痰、细菌固体培养物等。
①划线前的操作同平行划线法。先在平板的一端将标 本涂开并在平板的1/5～1/4面积上划密集的平行线， 接种环火焰灭菌。
②将平板转约70°角，待接种环冷却后，使接种环 通过已划线的1区5～7次，以后即不与1区接触作 连续密集划线，约占平板面积的1/4，接种环再通 过火焰灭菌。
3.硝酸盐蛋白胨水培养基300ml 加热溶解 调pH 分装有小倒管的试管 高压 直立制成高层
4.普通琼脂斜面培养基300ml 加热溶解 调pH 分装试管 高压 制成斜面
注意事项
1. 培养基溶解时，加有琼脂的培养基易沸，应注意 看守。
2. 注意调节培养基的pH。 3. 称牛肉膏用玻片，称甘油用小烧杯。 4. 加热后应补足液量。 5. 注意做好标记。
4．染色： ①初染:将结晶紫染液加于涂膜上，1min。 ②媒染:水洗后加芦戈氏碘液处理，1min。 ③脱色：水洗后用95％乙醇脱色，并摇动玻片，直至流 下的液体无色为止，约需0.5min。 ④复染：水洗后加石炭酸复红稀释液染色，1min。 ⑤水洗，用滤纸吸干，待标本充分干燥后进行镜检。
5．镜检： 干燥后，用油镜观察。判断两种菌体染色反应性。菌体 被染成蓝紫色的是革兰氏阳性菌（G+），被染成红色的 为革兰氏阴性菌（G-）。以分散开的细菌的革兰氏染色 反应为准，过于密集的细菌，常常呈假阳性。
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➢典型型 ➢粘液型 ➢侏儒型 ➢粗糙型 ➢大肠菌样型
生物学特性
典型型（麦康凯平板）
菌落呈灰绿色，大小 不一,扁平湿润，边缘 不规则呈伞状伸展， 表面常可见金属光泽。
生物学特性
典型型（普通平板）
产绿脓素 琼脂染成黄绿色
生物学特性
菌落光滑凸起 成粘液状
粘液型（麦康凯平板） 粘液型（血平板）
生物学特性
粗糙型（麦康凯平板）
菌落中央凸起 边缘扁平 表面粗糙
生物学特性
大肠型（麦康凯平板）
菌落圆形凸起 似大肠埃希菌菌落
细小，无光泽 半透明菌落
侏儒型（麦康凯平板）
生化特性
氧化酶：+ 葡萄糖的氧化（O/F）：O 枸橼酸盐利用：+ 精氨酸双水解：+ 明胶液化：+ 硝酸盐还原：+ 乙酰胺酶：+ 吲哚试验：-
药敏试验
扩散法（K-B法）
➢选用抗菌药物，对分离的细菌进行敏感性试验： ➢药敏片：庆大霉素、环丙沙星、头孢噻肟、链霉素、 恩诺沙星、诺氟沙星、头孢哌酮、青霉素； ➢根据抑菌圈的大小判断病原菌对药物的敏感程度。
最终鉴定
明胶液化试验：选取可疑菌落的纯培养物，穿刺 接种于明胶培养基内，37℃培养24h，取出后放入 冰箱10-30min，如若溶解，即试验呈阳性；如凝固 不溶，试验呈阴性。 硝酸盐还原试验：选取可疑菌落的纯培养物，接 种于硝酸盐培养基，置于37℃培养24h，如若培养 基中的小倒管内有气体，试验呈阳性。
微生物学检验
检验程序
脓液 痰 尿液等
分离培养
直接涂片、革兰染色、镜检
（血平板、麦康凯）
35℃ 18-24h
可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味）
初步鉴定
革兰阴性 杆菌，氧 化酶阳性
菌落特征 气味 绿脓素
最终鉴定
色素 鉴定
生化 反应
42℃ 生长
分型 （血清学
噬菌体）
药敏试验
报告
试验材料
生物学特性
形态：革兰氏阴性杆菌， 菌体长短不一 ；单端单鞭 毛；动力阳性；无芽胞。 特性：专性需氧；生长 温度范围是25℃~42℃， 最适生长温度35℃，4℃不 生长。
生物学特性
抗原性: O抗原
H抗原 粘液抗原 R抗原 菌毛抗原
产生荧光素和水溶性的绿脓素，培养物呈蓝 绿色。
生物学特性
在血平板上形成大而扁平、湿润、有金属 光泽、蓝绿色、透明溶血环菌落，有生姜 味； 在普通平板、血平板、麦康凯平板上可形 成5种不同形态的菌落
铜绿假单胞菌的分离及鉴定
组员：张冲
铜绿假单胞菌
实验目的
了解铜绿假单胞菌的微生物学特性 掌握微生物实验技术基本原理及操作 熟悉铜绿假单胞菌的分离鉴定程序及
方法
概述
铜绿假单胞菌惯称绿脓杆菌，为革兰 氏阴性杆菌，属假单胞菌属。它在自然界 分布甚广，空气、水、土壤中均有存在， 在潮湿处可长期生存，对外环境的抵抗力 比其他菌强，抗干燥的能力也强。
最终鉴定
吲哚试验：选取可疑菌落的纯培养物接种于蛋白胨 水，培养8h-24h后，加Kovacs（靛基质）试剂约3mm 高，如若在液层界面发生红色，即为阳性反应。 42℃生长试验：选取纯被检物，接种于普通琼脂斜 面培养基上，于42℃培养4h，铜绿假单胞菌能生长为 阳性反应。 Nhomakorabea 血清学鉴定
血清群鉴定：取洁净玻片，滴加多价O血清于玻片， 再接种此菌的纯培养物少许混匀，2min观察凝集现象， 鉴定。 血清学分型：按血清分型试剂盒操作说明进行操作： 将待检测菌在LB琼脂培养基中过夜培养，取少许与 30μL阳性血清混合，一分钟观察结果。 判定标准：有凝集块出现，且生理盐水空白对照组 不凝集者为阳性。
病料：痰液标本 试剂：氧化酶纸片，明胶、革兰染色液、药敏 纸片、无菌生理盐水及生化管配套试剂等 培养基：普通平板、血平板、麦康凯平板、半
固体培养基、非发酵菌微量生化管等 其它 ：显微镜、培养箱、小试管、载玻片、
接种针、接种环、酒精灯、火柴、平皿等
分离培养
标本采集：脓液、浓痰（无菌拭子） 痰液标本的前处理 加入等量的PH 7.6 的1% 胰酶溶液，放置35℃、 90 min使痰液均质化。 直接涂片，革兰氏染色，镜检 分别接种普通平板、血平板和麦康凯平板，培 养18—24h ，进一步进行鉴定。
初步鉴定
选出可疑菌落
金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味等
初步鉴定
➢染色镜检：取可疑菌落，进行革兰氏染色、镜检。 ➢氧化酶试验：挑取可疑菌落于滤纸片上，滴加一 滴新配制的5%二甲基对苯二胺试剂，15-30min内， 出现红色至紫红色，为阳性；若不变色，为阴性。
初步鉴定
➢绿脓菌素试验：选取可疑菌落2-3个，置于绿脓菌 素测定用培养基，于37℃培养24h，加入氯仿、色素 后，再加入盐酸 ，上层稀盐酸液内出现红色为阳性， 表示菌落中含有绿脓菌素。
生物学特性
典型型（麦康凯平板）
菌落呈灰绿色，大小 不一,扁平湿润，边缘 不规则呈伞状伸展， 表面常可见金属光泽。
生物学特性
典型型（普通平板）
产绿脓素 琼脂染成黄绿色
生物学特性
菌落光滑凸起 成粘液状
粘液型（麦康凯平板） 粘液型（血平板）
生物学特性
粗糙型（麦康凯平板）
菌落中央凸起 边缘扁平 表面粗糙
生物学特性
大肠型（麦康凯平板）
菌落圆形凸起 似大肠埃希菌菌落
细小，无光泽 半透明菌落
侏儒型（麦康凯平板）
生化特性
氧化酶：+ 葡萄糖的氧化（O/F）：O 枸橼酸盐利用：+ 精氨酸双水解：+ 明胶液化：+ 硝酸盐还原：+ 乙酰胺酶：+ 吲哚试验：-
药敏试验
扩散法（K-B法）
➢选用抗菌药物，对分离的细菌进行敏感性试验： ➢药敏片：庆大霉素、环丙沙星、头孢噻肟、链霉素、 恩诺沙星、诺氟沙星、头孢哌酮、青霉素； ➢根据抑菌圈的大小判断病原菌对药物的敏感程度。
最终鉴定
明胶液化试验：选取可疑菌落的纯培养物，穿刺 接种于明胶培养基内，37℃培养24h，取出后放入 冰箱10-30min，如若溶解，即试验呈阳性；如凝固 不溶，试验呈阴性。 硝酸盐还原试验：选取可疑菌落的纯培养物，接 种于硝酸盐培养基，置于37℃培养24h，如若培养 基中的小倒管内有气体，试验呈阳性。
微生物学检验
检验程序
脓液 痰 尿液等
分离培养
直接涂片、革兰染色、镜检
（血平板、麦康凯）
35℃ 18-24h
可疑菌落（金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味）
初步鉴定
革兰阴性 杆菌，氧 化酶阳性
菌落特征 气味 绿脓素
最终鉴定
色素 鉴定
生化 反应
42℃ 生长
分型 （血清学
噬菌体）
药敏试验
报告
试验材料
生物学特性
形态：革兰氏阴性杆菌， 菌体长短不一 ；单端单鞭 毛；动力阳性；无芽胞。 特性：专性需氧；生长 温度范围是25℃~42℃， 最适生长温度35℃，4℃不 生长。
生物学特性
抗原性: O抗原
H抗原 粘液抗原 R抗原 菌毛抗原
产生荧光素和水溶性的绿脓素，培养物呈蓝 绿色。
生物学特性
在血平板上形成大而扁平、湿润、有金属 光泽、蓝绿色、透明溶血环菌落，有生姜 味； 在普通平板、血平板、麦康凯平板上可形 成5种不同形态的菌落
铜绿假单胞菌的分离及鉴定
组员：张冲
铜绿假单胞菌
实验目的
了解铜绿假单胞菌的微生物学特性 掌握微生物实验技术基本原理及操作 熟悉铜绿假单胞菌的分离鉴定程序及
方法
概述
铜绿假单胞菌惯称绿脓杆菌，为革兰 氏阴性杆菌，属假单胞菌属。它在自然界 分布甚广，空气、水、土壤中均有存在， 在潮湿处可长期生存，对外环境的抵抗力 比其他菌强，抗干燥的能力也强。
最终鉴定
吲哚试验：选取可疑菌落的纯培养物接种于蛋白胨 水，培养8h-24h后，加Kovacs（靛基质）试剂约3mm 高，如若在液层界面发生红色，即为阳性反应。 42℃生长试验：选取纯被检物，接种于普通琼脂斜 面培养基上，于42℃培养4h，铜绿假单胞菌能生长为 阳性反应。 Nhomakorabea 血清学鉴定
血清群鉴定：取洁净玻片，滴加多价O血清于玻片， 再接种此菌的纯培养物少许混匀，2min观察凝集现象， 鉴定。 血清学分型：按血清分型试剂盒操作说明进行操作： 将待检测菌在LB琼脂培养基中过夜培养，取少许与 30μL阳性血清混合，一分钟观察结果。 判定标准：有凝集块出现，且生理盐水空白对照组 不凝集者为阳性。
病料：痰液标本 试剂：氧化酶纸片，明胶、革兰染色液、药敏 纸片、无菌生理盐水及生化管配套试剂等 培养基：普通平板、血平板、麦康凯平板、半
固体培养基、非发酵菌微量生化管等 其它 ：显微镜、培养箱、小试管、载玻片、
接种针、接种环、酒精灯、火柴、平皿等
分离培养
标本采集：脓液、浓痰（无菌拭子） 痰液标本的前处理 加入等量的PH 7.6 的1% 胰酶溶液，放置35℃、 90 min使痰液均质化。 直接涂片，革兰氏染色，镜检 分别接种普通平板、血平板和麦康凯平板，培 养18—24h ，进一步进行鉴定。
初步鉴定
选出可疑菌落
金属光泽、β-溶血、产绿色素、特殊气味等
初步鉴定
➢染色镜检：取可疑菌落，进行革兰氏染色、镜检。 ➢氧化酶试验：挑取可疑菌落于滤纸片上，滴加一 滴新配制的5%二甲基对苯二胺试剂，15-30min内， 出现红色至紫红色，为阳性；若不变色，为阴性。
初步鉴定
➢绿脓菌素试验：选取可疑菌落2-3个，置于绿脓菌 素测定用培养基，于37℃培养24h，加入氯仿、色素 后，再加入盐酸 ，上层稀盐酸液内出现红色为阳性， 表示菌落中含有绿脓菌素。