(参考课件)呼吸道标本采集

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呼吸道标本采集和结果解读

披膜病毒科小RNA病毒科腺病毒科冠状病毒科疱疹病毒科细小病毒科呼肠孤病毒科
病毒种流感病毒呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、副流感病毒、人类偏肺病毒
风疹病毒鼻病毒、柯萨奇病毒和埃可病毒的部分型别腺病毒人类冠状病毒、SARS冠状病毒单纯疱疹病毒、带状疱疹、EB和CMV 人类博卡病毒呼肠孤病毒（1，2，3，4型）
真菌涂片或其他真支气管抽吸物菌染色方法
无菌杯或管，室温，2h
真菌培养
支气管肺泡灌洗液；
PSB
半乳甘露聚糖血清
（GM）
支气管肺泡灌洗液
1-3 β-D 葡聚糖
（G）
促凝管，室温，立即送检无菌杯或管，室温，2h
20
老年CAP患者的病原学诊断方法
老年CAP患者的病原学诊断
血培养
染色法
芽窄食单胞菌、金黄色葡萄球革兰染色
痰；支气管抽吸物；无菌杯或管，室温，2h
菌和MRSA、流感嗜血杆菌定量或半定量需氧支气管肺泡灌洗液；
和厌氧细菌培养 PSB；肺组织
肺炎链球菌混合厌氧菌（吸入）
曲霉菌属
同上
革兰染色培养
尿液
PSB标本肺组织
无菌容器，室温，2h
无菌管；无菌容器放组织；室温，2h
咽拭子的采集方法
用拭子同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（3-5次）
9
上呼吸道感染标本的采集
咽拭子的采集
正确拿咽拭子的方法
错误拿咽拭子的方法
上呼吸道感染标本的采集
鼻拭子标本的采集
请患者头部保持不动，将拭子轻轻转动缓缓插入患者鼻腔，不要用力，当遇到阻力后即到达后鼻咽，停留数秒吸取分泌物，轻轻旋转取出拭子

呼吸道抗原六项标本采集方法

呼吸道抗原六项标本采集方法呼吸道抗原六项标本采集是临床诊断呼吸道感染性疾病的重要环节。

本文将详细介绍呼吸道抗原六项标本的采集方法，以确保检测结果的准确性和有效性。

一、概述呼吸道抗原六项检测主要包括流感病毒、副流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒和冠状病毒的检测。

正确的标本采集方法对提高检测灵敏度和特异性至关重要。

二、采集前的准备1.了解患者的病情、病史和用药情况，以便选择合适的采集时间和方法。

2.准备一次性无菌采集器材，如鼻咽拭子、咽拭子、无菌生理盐水等。

3.操作人员需穿戴防护用品，如口罩、手套、防护服等，确保采集过程的安全。

三、采集方法1.鼻咽拭子采集（1）指导患者头部向后仰，尽量使鼻咽部暴露。

（2）将鼻咽拭子插入患者鼻孔，沿鼻咽壁轻轻旋转，采集鼻咽分泌物。

（3）将拭子放入含有无菌生理盐水的试管中，密封保存。

2.咽拭子采集（1）指导患者张口，发“啊”声，充分暴露咽部。

（2）将咽拭子轻轻插入患者咽部，旋转采集咽拭子。

（3）将拭子放入含有无菌生理盐水的试管中，密封保存。

3.呼吸道分泌物采集（1）对于不能配合的患者，如儿童或意识不清的患者，可采用无菌吸痰管采集呼吸道分泌物。

（2）将吸痰管插入患者气管，轻轻吸取分泌物。

（3）将分泌物放入含有无菌生理盐水的试管中，密封保存。

四、注意事项1.采集过程中，确保无菌操作，避免交叉污染。

2.标本采集后，尽快送检，避免长时间放置影响检测结果。

3.咽拭子和鼻咽拭子采集时，避免用力过猛，以免损伤黏膜。

4.呼吸道分泌物采集时，注意观察患者的反应，避免引发呼吸困难。

五、总结呼吸道抗原六项标本采集是临床诊断呼吸道感染性疾病的关键环节。

掌握正确的采集方法，确保标本质量，有助于提高检测灵敏度和特异性，为临床诊断和治疗提供有力支持。

呼吸道标本的采集与送检要求

呼吸道标本的采集与送检要求1.采集标本的选择：常用的呼吸道标本有咽拭子、喉拭子、鼻拭子、支气管肺泡灌洗液、痰液等。

对于喷嚏液或唾液等非特异性标本的采集，不推荐用于病原体的检测。

2.采集时间：最佳的标本采集时间是在症状出现后24小时内采集，对于特定病原体如流感病毒等，应在症状出现48小时内采集。

3.采集方法：采用无菌的采集器具，如棉签、拭子等。

采集咽拭子时，应当将拭子的头部置于扁桃体和咽后壁的分泌物位置，不应担心引起患者咳嗽反射。

鼻拭子的采集方法是将拭子插入鼻腔内，盘旋擦拭鼻腔黏膜。

4.采集指导：采集者应经过专业培训并熟悉标本采集的技术要领。

采集过程中需要保持呼吸道的湿润，确保采集到的标本质量。

5.标本保存与运输：采集得到的标本应立即置于透明的标本袋中，封口完好。

若运输时间不长，可将标本放入4℃冰箱保存，不得冷冻。

如果运输时间较长，应采用冷冻方式运输（-20℃）。

运输过程中应尽量避免震动或损坏。

6.标本的处理：采集得到标本后，应尽快送往实验室进行处理。

痰液在送往实验室前应保持在4℃存放。

对于支气管肺泡灌洗液等标本，需要在接收实验室前制备样本。

7.实验室检测：送往实验室后，应当及时进行病原体的检测。

常用的检测方法包括细菌培养、病毒核酸检测（如PCR）、真菌培养等。

根据病情需要，还可以进行药敏试验、抗体检测等。

8.结果解读与报告：实验室所得结果需要专业人员进行解读，并及时生成报告。

报告应如实反映标本的检测结果，并提供相应的临床意义和建议。

在进行呼吸道标本的采集与送检时，需要确保采集者具备必要的知识与技能，并严格按照采集与送检要求进行操作，以保证最终的结果准确可靠，为诊治提供有力的支持。

呼吸道标本的采集、储存和运送规范

㊃ＣＯＶＩＤ-１９特稿标准／指南㊃ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３-５５０１．２０２０．０１．００５呼吸道标本的采集㊁储存和运送规范杨童玲１，３夏爱梅１，３胡晓静１余艮珍２史欢２顾莺１张晓波１王传清１张崇凡１黄国英１作者单位１复旦大学附属儿科医院上海，２０１１０２；２华中科技大学同济医学院附属同济医院武汉，４３００３０；３共同第一作者通讯作者张崇凡，Ｅ-ｍａｉｌ：ｘｔ２１１３１１＠ａｌｉｙｕｎ．ｃｏｍ；黄国英，Ｅ-ｍａｉｌ：ｇｙｈｕａｎｇ＠ｓｈｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ流感病毒检测最常见的是采集呼吸道标本，可采用拭子㊁刷子㊁吸出物和灌洗液获取呼吸道标本，可以采集鼻咽㊁口咽㊁鼻孔等㊂曾使用培养法或直接法荧光抗体法进行检测［１，２］，现以逆转录多聚酶链反应（ＲＴ-ＰＣＲ）方法，可以通过样本中少量的病毒核酸扩增而提高检测率［３］㊂急性严重呼吸综合征冠状病毒２（ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２）感染流行期间，ＲＴ-ＰＣＲ是ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染确诊的首选方法［４，５］㊂检测准确性最高的标本是下呼吸道标本，但属于有创性操作㊂由于核酸扩增检测可以检测更低浓度的病毒，并且不需要细胞的存在，因此喉部拭子或唾液样本可能是进行分析的合适样本［６］，但其检出率低于８３％［７］㊂相对无创而准确率高的是鼻咽抽吸物标本，能提供高浓度的感染细胞㊂对于儿童，采集一个口咽拭子和一个鼻部拭子的准确性相当于鼻咽拭子的准确性［８］，是检测准确性与无创性采集的理想搭配㊂但临床上为了避免假阴性，通常会同时采集一个口咽拭子和一个鼻咽拭子㊂口咽拭子的采集相对比较简单，鼻咽拭子的采集需要经过培训，而且鼻咽拭子的采集过程可能会引发患者打喷嚏或者咳嗽而导致气溶胶的产生，存在交叉感染的风险［９］㊂本文基于新型冠状病毒肺炎（ＣＯＶＩＤ-１９）作为乙类传染病甲类管理办法，介绍呼吸道标本的采集㊁贮存和运送［１０，１１］㊂１采集对象ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染的ＣＯＶＩＤ-１９疑似病例㊁疑似聚集性病例，其他需要进行ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染诊断或鉴别诊断病例，确诊的ＣＯＶＩＤ-１９是否康复的鉴别病例，或其他需要进一步ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染筛查检测的环境或生物材料㊂２采集者从事ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２检测标本采集的技术人员应经过生物安全培训且为合格者和具备相应的实验技能㊂按照‘儿童新型冠状病毒感染／肺炎疑似和确诊病例快速筛查和临床实践指南“［１２］的要求使用三级防护，最好使用全面型电动送风呼吸器面罩进行有效防护㊂３采集标本ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２初步诊断测试，中国疾病预防控制中心（ＣＤＣ）建议收集和检测咳嗽患儿的上呼吸道（鼻咽和口咽拭子）和下呼吸道（痰，如果可能）的样本㊂按照国家卫健委ＣＯＶＩＤ-１９诊疗方案（试行第六版）的要求，尽可能留取痰液标本，气管插管患者采集下呼吸道分泌物标本㊂４采集标本时机临床怀疑ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染应立即向当地卫生部门报告，当地公共卫生工作人员将确定患者是否符合ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染调查对象的标准㊂临床标本应在临床或公共卫生实验室采集，用于常规呼吸道病原体检测㊂临床实验室不应从ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染者采集的样本中分离病毒㊂一旦确定了符合ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染对象，应尽快采集样本㊂５采样管及其保存液上㊁下呼吸道标本采集后均置于含３ｍＬ病毒保存液的采样管中，推荐以Ｅａｇｌｅ'ｓ基础培养液为基础的保存液㊂保存液中也应添加胎牛血清或牛血清白蛋白等稳定病毒的蛋白质外壳的添加液㊂除此之外，还应添加青霉素㊁链霉素㊁庆大霉素及多黏菌素Ｂ等抑制细菌生长，保存液提供的样本基本是活病毒，可以最大程度保持样本的原始性，后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测，还可用于病毒的培养和分离㊂６采样拭子应选用合成纤维或人造纤维，不推荐海绵或棉花拭子，棉花的纤维对蛋白质吸附较强，导致病毒不易洗脱到保存液中，也不推荐尼龙类的纤维，其吸水性不佳，导致采样量不足，影响检出效率㊂７样本的储存和拒收原则上样本应立即送检㊂以下是各种储存必需的条件：①采集后，应贴上相应的标签，样本可在４ħ以下保存㊃９１㊃中国循证儿科杂志２０２０年２月第１５卷第１期７２ｈ，②如果预计提取检验会延迟，则将样本储存在－７０ħ或更低的温度，③提取的核酸应储存于－７０ħ或更低的温度㊂拒收的样本包括：①没有保存在２８ħ或－７０ħ或以下的样本；②样本标签或资料不完整；③样本类型不合适；④样本量不足㊂８样本的运送①运送人员防护要求：需对运送人员进行专业培训，做好二级防护，目前中国的标本运送由ＣＤＣ的专业人员来取，工作人员通道进入，污染通道离开㊂②样本需要双层密封袋密封，每袋装１份标本，将样本储存在４ħ，并使用密封的标本转运箱（内附有冰袋）立即运送㊂在每个样本容器上贴上患者的具体信息㊁样本的具体信息㊂为每个提交的样本填写卫生行政部门要求的表格㊂③如果样本在－７０ħ下冷冻，运输时则将其放在密封的标本转运箱（内附有干冰）连夜运送，如无－７０ħ保存条件，则于－２０ħ冰箱暂存㊂９加强沟通临床和实验室工作人员之间的及时沟通很重要，这样才能在处理可能ＳＡＲＳ-ＣｏＶ-２感染病例的标本时将感染的风险降到最低㊂１０上呼吸道标本采集１０．１口咽拭子 ①视野要求：口咽拭子取样时，应该在良好的照明条件下，使用一次性压舌板来确保咽喉部有足够的视野，压舌板将舌压到一边，避开舌头，拭子擦拭扁桃体（图１Ａ㊁Ｂ）㊂②口咽拭子材质的要求：只能使用带塑料柄的合成纤维棉签，不能使用海藻酸钙拭子或带木柄的拭子，因为它们可能含有灭活某些病毒和抑制ＰＣＲ检测的物质㊂③患儿体位和口腔防护要求：患儿取坐位或卧位，采集者坐在患儿对面，以能够看清患儿口咽部扁桃体为准，采集的时候要让患儿头部上抬３０度，采集时患儿应该用口罩罩住鼻部，减少喷嚏或咳嗽飞沫飞溅（图１Ｃ）㊂④取材要求：将口咽拭子深入口咽部，在原位最好保持１０ｓ以吸收分泌物，用拭子棉签同时擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，轻度用力拭抹咽后壁部位，应避免触及舌部㊂将口咽拭子棉签头浸入采样管中，尾部弃去，旋紧管盖㊂１０．２鼻咽拭子采集（图１Ｄ㊁Ｅ） ①鼻咽拭子材质要求同口咽拭子㊂②准备含３ｍＬ病毒保存液的采样管备用㊂③患儿体位和口腔防护要求：患儿头部后仰７０度，采集时患儿应该用口罩罩住下颌，减少咳嗽飞沫飞溅，取材人站在患儿侧方，防止飞沫飞溅㊂④鼻咽拭子棒长度要求：可以用鼻咽拭子棒测量一下，量出耳根到鼻孔的距离，并用手指做标记㊂⑤体验要求：将采样拭子以垂直鼻子（面部）方向插入鼻腔，与上颚平行，拭子伸入距离最少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半，如果能够达到先前估计的深度最好，可有阻挡感㊂⑥取材要求：深入鼻咽部，使拭子在鼻内停留１５３０ｓ，轻轻旋转３５次，以吸收分泌物，然后抽出拭子㊂⑦取材后要求：将鼻咽拭子棉签头浸入采样管中，尾部弃去，旋紧管盖㊂图１上呼吸道标本采集注Ａ：扁桃体；Ｂ：鼻咽１１下呼吸道标本１１．１支气管灌洗液将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管，见患儿有咳嗽反射后再稍微深入１ｃｍ后，注入５ｍＬ温生理盐水，开放负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的黏液于病毒采样管中㊂１１．２肺泡灌洗该方法适合危重患儿，患儿往往因为呼吸衰竭或肺不张需要行气管插管或纤维支气管镜灌洗，便于获取肺泡灌洗液标本，需要在支气管镜室局麻下行电子支气管镜术㊂支气管镜由左鼻孔进入气管㊁支气管后，镜端固定于右／左肺中叶开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌温生理盐水，每次８ｍＬ灌洗２３次，灌洗后吸出［１３］，收集至采样管中㊂１１．３鼻咽和气管抽吸婴幼儿多需要采用该途径采集标本，使用痰液收集器连接负压吸引器，痰液收集器前端的吸痰管深入到患儿气道内，见患儿有咳嗽反射后再稍微深入１ｃｍ后开放负压，吸出２３ｍＬ呼吸道分泌物至采样管中㊂参考文献[１]ＬｏｅｎｓＫ,ＶａｎＨｅｉｒｓｔｒａｅｔｅｎＬ,Ｍａｌｈｏｔｒａ-ＫｕｍａｒＳ,ｅｔａｌ．Ｏｐｔｉｍａｌｓａｍｐｌｉｎｇｓｉｔｅｓａｎｄｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｐａｔｈｏｇｅｎｓｐｏｓｓｉｂｌｙｃａｕｓｉｎｇｃｏｍｍｕｎｉｔｙ-ａｃｑｕｉｒｅｄｌｏｗｅｒｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｔｒａｃｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ．ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ,４７(１):２１-３１[２]ＲｏｂｉｎｓｏｎＪＬ,ＬｅｅＢＥ,ＫｏｔｈａｐａｌｌｉＳ,ｅｔａｌ．Ｕｓｅｏｆｔｈｒｏａｔｓｗａｂ㊃０２㊃ＣｈｉｎＪＥｖｉｄＢａｓｅｄＰｅｄｉａｔｒＦｅｂｕｒａｒｙ２０２０，Ｖｏｌ１５，Ｎｏ１ｏｒｓａｌｉｖａｓｐｅｃｉｍｅｎｓｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｖｉｒｕｓｅｓｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎ．ＣｌｉｎＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,４６(７):ｅ６１-６４[３]ＣｅｎｔｅｒｓｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ(ＣＤＣ)．ＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｒａｐｉｄｉｎｆｌｕｅｎｚａｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｔｅｓｔｓｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｎｏｖｅｌｉｎｆｌｕｅｎｚａＡ(Ｈ１Ｎ１)Ｖｉｒｕｓ-ＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓ,２００９．ＭＭＷＲＭｏｒｂＭｏｒｔａｌＷｋｌｙＲｅｐ,５８(３０):８２６-８２９[４]国家卫生健康委．关于印发新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)的通知(２０２０-０２-１８)．ｈｔｔｐ:／／ｗｗｗ．ｎｈｃ．ｇｏｖ．ｃｎ／,２０２０．０２．１８[５]ＣｏｒｍａｎＶＭ,ＬａｎｄｔＯ,ＫａｉｓｅｒＭ,ｅｔａｌ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆ２０１９ｎｏｖｅｌｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ(２０１９-ｎＣｏＶ)ｂｙｒｅａｌ-ｔｉｍｅＲＴ-ＰＣＲ．ＥｕｒｏＳｕｒｖｅｉｌｌ,２０２０,２５(３)．ｄｏｉ:１０．２８０７／１５６０－７９１７[６]ＷａｎｇＷＫ,ＣｈｅｎＳＹ,ＬｉｕＩＪ,ｅｔａｌ．ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＳＡＲＳ-ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｉｎｔｈｒｏａｔｗａｓｈａｎｄｓａｌｉｖａｉｎｅａｒｌｙｄｉａｇｎｏｓｉｓ．ＥｍｅｒｇＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,２００４,１０(７):１２１３-１２１９[７]ＲｏｂｉｎｓｏｎＪＬ,ＬｅｅＢＥ,ＫｏｔｈａｐａｌｌｉＳ,ｅｔａｌ．Ｕｓｅｏｆｔｈｒｏａｔｓｗａｂｏｒｓａｌｉｖａｓｐｅｃｉｍｅｎｓｆｏｒ１８１ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｖｉｒｕｓｅｓｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎ．ＣｌｉｎＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,４６(７):ｅ６１-６４[８]ＳｐｅｎｃｅｒＳ,ＴｈｏｍｐｓｏｎＭＧ,ＦｌａｎｎｅｒｙＢ,ｅｔａｌ．ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆＲｅｓｐｉｒａｔｏｒｙＳｐｅｃｉｍｅｎＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎＭｅｔｈｏｄｓｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＩｎｆｌｕｅｎｚａＶｉｒｕｓＩｎｆｅｃｔｉｏｎｂｙＲＴ-ＰＣＲ:ＡＬｉｔｅｒａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗ．ＪＣｌｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌ,５７(９),ｐｉｉ:ｅ０００２７－１９[９]ＴｅｌｌｉｅｒＲ．ＲｅｖｉｅｗｏｆａｅｒｏｓｏｌｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｏｆｉｎｆｌｕｅｎｚａＡｖｉｒｕｓ．ＥｍｅｒｇＩｎｆｅｃｔＤｉｓ,２００６,１２(１１):１６５７-１６６２[１０]国家卫生健康委．新型冠状病毒感染的肺炎实验室检测技术指南(第三版)．２０２０．０１．２８[１１]ＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｆｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓＣＯＶＩＤ-１９ＲｅｑｕｅｓｔｓｆｏｒＤｉａｇｎｏｓｔｉｃＰａｎｅｌｓａｎｄＶｉｒｕｓ．ｈｔｔｐｓ:／／ｗｗｗ．ｃｄｃ．ｇｏｖ／ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ／２０１９-ｎｃｏｖ／ｌａｂ／ｔｏｏｌ-ｖｉｒｕｓ-ｒｅｑｕｅｓｔｓ．ｈｔｍｌ[１２]复旦大学附属儿科医院．儿童新型冠状病毒感染／肺炎疑似和确诊病例快速筛查和临床实践指南．中国循证儿科杂志,１５(１):１-４[１３]黄宝兴,邓继岿,王红梅．１６９３例难治性肺炎患儿支气管肺泡灌洗液病原体培养分析．中国感染控制杂志,１４(６):３７９-３８２．（收稿日期：２０２０-０１-３１修回日期：２０２０-０２-１１）（本文编辑：张萍）㊃１２㊃中国循证儿科杂志２０２０年２月第１５卷第１期。

呼吸道标本的采集与送检要求

2. 延迟送检或待处理标本应置于4℃冰箱保存（疑为肺链和流感嗜血杆菌等苛养菌不在此列），以免杂菌生长，但保存的标本应在24h 内处理。
3. 对可疑烈性呼吸道传染病（SARS、肺炭疽、肺鼠疫等）的患者标本，在采集、运送或保存过程中必须注意生物安全保护。
二、临床微生物标本转运要求 1. 密闭运送原则。 2. 及时运送原则。 3. 生物安全原则，运送箱三层包装。
键（更加重要）。 4. 改善患者全身情况。
标本采集送检频次
一、怀疑普通细菌性肺炎： 1. 每天一次，连续2-3天。如果每天均报告同一种菌，
且++或+++，则有临床意义，但实际情况每天大多报告不同菌。
2. 不建议24h内多次采集。
3. 关于是否一定要采集晨起第一口痰的质疑？——因第一口痰会受胃肠道和口咽部细菌的影响，并存在过早采集无法保证及时送检等问题。所以实际临床操作中只要方便采集，正规口腔处理，及时送检，并非必须晨起第一口痰。
一份培养结果与多个环节相关，最关键的因素就是标本的正确采集与运送!!!
感染的病原体是什么？
是不是很难确诊哪个是真正的致
病菌？ Why？
微生物检测背景及流程
一、常规项目检验时间：标本接收（1-2min）——标本接种、涂片（5min）——细菌培养（18-48h）——细菌鉴定、药敏试验（18-24h或48小时）——结果报告（5min）
2. 经人工气道吸引分泌物：是目前临床较为常用的微生物标本。但由于这些宿主的气管纤毛黏液防御机制受到损害，有学者提出此法的标本应该先做细胞学筛选。
五、培养阳性细菌都需要抗菌药物治疗吗？ 1. 不是，培养阳性≠感染，可能为污染（血培养），可

呼吸道标本采集

试剂要求：应使用无菌、无热原、无杂质、无刺激性的试剂，确保采集到的呼吸道标本质量可靠。
采集容器：应选择密封性好、防漏、不易变形、易于灭菌的采集容器，以便于保存和运输呼吸道标本。
采集工具：应使用一次性或经过严格消毒的采集工具，避免交叉感染和污染。
采集环境及安全要求
采集环境：选择清洁、安静、通风良好的环境，避免交叉
相关法律法规及规定
涉及的法律法规：涉及《医疗废物管理条例》、《传染病防治法》等相关法律法规
采集人员的资质要求：必须具备相应的医学知识和技能，并经过相关培训和考核
采集过程中的伦理要求：尊重患者的知情权和自主权，保护患者隐私，确保患者安全
涉及的法律责任：违反相关法律法规及规定可能面临行政处罚或刑事责任
咽拭子标本采集
采集方法：使用医用棉签擦
拭咽部
采集部位：咽后壁、扁桃体
隐窝等处
采集目的：检测呼吸道病毒、细菌等病原体
注意事项：采集前应告知患者注意事项，采集时应避免损伤咽部粘膜
支气管肺泡灌洗液标本采集
采集方法：通过纤维支气管镜，将灌洗液注入肺泡内，然后回收采集目的：用于诊断肺部感染、肺泡蛋白沉积症等疾病优点：可以直接观察到肺泡内的病变情况，提高诊断的准确性注意事项：采集前需要评估患者的病情和肺功能状态，避免出现不良反应
呼吸道标本采集
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呼吸道标本采集的种类呼吸道标本采集的质量控制
呼吸道标本采集的步骤
呼吸道标本采集的临床意义
呼吸道标本采集的伦理和法律问题
01
添加章节标题
02
呼吸道标本采集的步骤

标准操作规程(SOP)——呼吸道标本采集

标准操作规程（ＳＯＰ）——一、目的本SOP是为了保证呼吸道标本采集的操作的规范性以及确保采集标本的质量而制定。

二、范围适用于中国国家流感中心的所有技术人员进行呼吸道标本的采集。

三、程序（一）生物安全要求采集疑似人高致病性禽流感病例和不明原因肺炎病人呼吸道标本时，采集人员需以BSL-3级防护；一般流感样病例，呼吸道标本的采集以BSL-2级防护。

具体参见“生物安全个人防护SOP”。

（二）材料1．无菌拭子：聚丙烯纤维头的拭子2．15-mL离心管3．常用的采样液配制：常用的上呼吸道采样液有：pH7.4～7.6的Hank's或MEM液400mL。

加入庆大霉素(50 mg/mL)0.8mL，多粘菌素B(250μg/mL)3.2mL。

加入抗菌素以后重新调节pH值为7.4，配制好以后，分装每个采样管2～3mL，-20℃冻存。

4．压舌板（三）实验步骤1．采集呼吸道标本呼吸道标本：包括鼻拭子、咽拭子、鼻咽抽提物、鼻洗液、咽漱液。

最佳采集时间为发病后的前3天，不超过7天。

（1）鼻拭子：采集者左手扶住患者的下颌部，右手持无菌拭子轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。

以另一拭子擦拭另侧鼻孔。

将拭子头浸入采样液中，在采样液中挤压拭子头部数次，用力折断拭子的尾部，将拭子的尾部弃去。

（2）咽拭子：左手用压舌板压住患者的舌头。

右手持无菌拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁，将拭子头浸入采样液中，在采样液中挤压拭子头部数次，用力折断拭子的尾部，将拭子的尾部弃去。

亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中。

（3）漱口液：用10mL生理盐水漱喉。

漱时让患者头部微后仰，发“噢”声，让生理盐水在咽部转动。

然后，用平皿或烧杯收集洗液。

（4）鼻洗液：让患者取坐姿，头微后仰，用移液管将5 mL生理盐水注入一侧鼻孔，嘱患者同时发K音以关闭咽腔。

然后让患者低头使生理盐水流出，用平皿或烧杯收集洗液。

重复此过程洗两侧鼻孔。

（5）鼻咽抽取物：常用于采集气管和支气管分泌物。

感染性标本的采样、储存、运输的具体操作方法

感染性标本的采样、储存、运输的具体操作方法所有的采样工作都必须根据疾病的特点，在严格做好防护的基础上进行。

常见传染病需采集的标本见表1（一）呼吸道标本的采集（如不明原因肺炎）1．采样器材拭子、压舌板、塑料瓶、采样杯或器皿、15ml 的离心管、移液管、注射器、10ml真空取血管、冰壶、采样运输管、有生物安全标志或标有“感染性物质”的外包装容器（见图1）；其他：酒精灯、剪刀、纸漏斗、酒精、碘酒、吸耳球、塑料袋、记号笔、标签、登记表等。

2．采集方法（1）鼻拭子（上呼吸道）：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。

以同一拭子拭两侧鼻孔。

将棉签浸入4-5 ml采样液的管中，尾部弃去。

然后，塞紧或盖好管盖。

（2）咽拭子（上呼吸道）：用棉签用力擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁（见图2），同样将棉签头浸入4-5 ml采样液的管中，尾部弃去，塞紧或盖好管盖。

注：亦可将鼻、咽拭子收集于同一采样管中，以便提高分离率，减少工作量。

（3）鼻洗液（上呼吸道）：患者取坐姿，头稍后仰，用移液管将5ml生理盐水注入一侧鼻孔，嘱患者同时发K音以关闭鼻腔。

然后让患者低头使生理盐水流出，用平皿或烧杯收集洗液。

重复此过程洗两侧鼻孔。

（4）鼻咽抽取物或抽取气管和支气管分泌物（下呼吸道）：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取气管和支气管分泌物。

先将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出。

收集抽取的粘液，并用采样液涮洗收集器3次。

近来国内有用小孩导尿管接在50 ml注射器上来替代收集器。

（5）漱口液：用10 ml采样液漱口。

漱时让患者头部微后仰，发噢声，让洗液在咽部转动。

然后，用平皿或烧杯收集漱液。

注：取漱口液时，需预先了解患者是否对抗菌素有过敏史，如有，含漱液中不应含抗菌素。

（6）肺活检材料：肺活检组织在无菌条件下，用灭菌过的乳钵磨碎，用生理盐水配成20%悬液，2000rpm离心10min，取上清加入上述提到的抗菌素。

呼吸道标本采集和结果解读

测结果。
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检测方法的局限性：不同检测方法可能存在不同的敏感性和特异性，影响结果的准确性。
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标本采集的局限性：呼吸道标本采集过程中可能存在污染、取样不足等问题，影响结果的可靠性。
添加项标题
检测试剂的局限性：不同品牌、不同批次的检测试剂可能存在差异，导致结果不一致。
添加项标题
呼吸道标本采集和检测的时间较长，需要等待实验室结果才能做出诊断，可能会延误患者的治疗
时间。
汇报人：XX
解读人员的局限性：不同专业背景和经验水平的解读人员可能对结果有不同的理解和判断，影响结果的解读和解释。
呼吸道标本采集和检测不适用于所有情况，如病情较轻、无呼吸道症状的患者可能无法采集到有
意义的标本。
呼吸道标本采集和检测的准确性受到多种因素的影响，如采集方法、标本保存和
运输等。
呼吸道标本采集和检测的敏感性较低，可能会漏检某些病原体，导致误诊或漏诊。
呼吸道标本采集难度大，易受污染
采集过程中易发生交叉感染
呼吸道标本采集对患者的创伤较大
呼吸道标本检测的准确性受多种因素影响，如病毒变异、检测试剂的灵敏度等。
呼吸道标本采集的难度较大，容易受到污染或交叉感染。
呼吸道标本检测的特异性有时不够理想，容易出现假阳性或
假阴性的结果。
呼吸道标本检测的时间较长，需要等待较长时间才能获得检
检测原理：利用聚合酶链式反应（PCR）技术扩增呼吸道标本中的病毒核酸片段，从而检测病毒的存在。
采样方法：通常采用鼻咽拭子或痰液作为呼吸道标本，通过专用的采样拭子采集后送检。
检测步骤：包括样本采集、保存、运输、核酸提取和扩增等步骤，通过荧光定量PCR仪进行检测。

呼吸道标本采集

（4）标本运送：
咽拭子标本的运送宜采用带保湿功能的运送培养基，避免由于送检时间过长而干燥。如未采用运送培养基，应于 0.5h 内送检。即使采用运送培养基，室温保存也不应超过24h。
02 痰液标本
痰培养仅用于下呼吸道感染，主要是肺部感染的诊断。
（1）临床采样指征：
咳嗽、脓性痰，伴有发热，影像学检查出现新的或扩大的浸润影；气道开放患者，出现脓痰或血性痰；考虑下呼吸道感染患者采集痰液标本，同时送血培养标本。
（3）标签及申请单：
申请单除应包括患者基本信息外，患者的临床诊断、症状、是否使用了抗菌药物、检测目的，标识是普通培养、抗酸杆菌还是真菌培养。一定要注明标本种类为肺泡灌洗液，以及采集时间。无菌管上的标签要求有唯一标识号或条码，注明标本采集时间、检测目的。
（4）标本运输：
标本采集后需尽快送到实验室，不要冷藏标本。
质量不合格标本：显微镜下细胞学检查发现标本受口咽部菌群污染。合格痰标本鳞状上皮细胞＜10个/低倍视野，白细胞＞25个/低倍视野，或白细胞与鳞状上皮细胞的数量比值＞2.5。
无标签或标签贴错。
标识信息不明，未提供采集时间及送检目的等。
超过2h送达实验室，且未正确保存的标本。
运送容器有渗漏。
同一天同一项目重复送检的痰标本。
（2）采集要求：
痰标本的采集时机十分关键，应严格遵循以下原则采集标本：
争取首剂抗菌药物治疗使用前及更换抗菌药物前采集。标本采集后保证2h内送达实验室并得到接种。只要有可能得到合格的痰标本，应马上采集、送检。宜在医护人员直视下留取合格痰标本。送检痰标本后三天内不主张再次送检。
（3）标本采集：

呼吸道疾病的采样方法(经典)

呼吸道传染病的样品采集
成都市疾病预防控制中心张晓春 09.9.10
一、呼吸道传染病
• 通常是指病原体通过空气、飞沫等进入易感者的呼吸道，而传播的疾病。
• 流行病学最显著的特点是突然暴发、迅速蔓延、波及面广、危害性大以及人群普遍易感。
一、呼吸道传染病
• 病原体主要分为细菌类的和病毒类 • 细菌类：脑膜炎奈瑟菌、Hib、结核杆菌、
咽拭子标本
血清标本
血液标本
采集血液的基本器材一次性注射器；采血管；止血带；无菌
拭子；试管架；酒精/碘酒标本标签；油性笔；样本登记表；签字笔；可
封口塑料袋；带有冰袋的冷藏箱
3.标本采集的要求
• 及时性 • 合理性 • 信息完整性 • 标本量足够 • 密闭性 • 避免污染
4、标本种类
⑶咽嗽液
◆时间：最好发病3天内，晨起后 ◆方法：让患者先咳嗽数声，然后用10ml
不含抗菌素的采样液漱口，漱口时让患者头部后仰，发出“噢、噢、噢”声，让采样液在咽喉部转动3～5秒，缓缓吐回有旋转盖的无菌塑料离心管中。＠注意避免污染环境！
（4）、抽取物（临床医生）
鼻咽抽取物----发病早期气管抽取物----发病各期
呼吸系统类样品
1.上呼吸道标本：咽拭子咽漱液痰液鼻咽吸组织活检标本
4、标本种类
死亡后尸检样本心肝脾肺肾、淋巴结，其余组织根据需要
血清标本---双相急性期(7天内)；恢复期（2周~3周后）环境标本：
5. 采集方法
⑴咽拭子：
五、呼吸道传染病的基本采样方法
• 采样前的准备 • 标本采集对象 • 标本采集要求 • 标本种类 • 采集方法 • 防护措施 • 常见问题

呼吸道标本采集流程

自行咳痰采集法取患者晨痰
留置于无菌容器
用冷开水漱口
深呼吸后用力咳出
呼吸道深部痰液
立即送检立即送检吸取痰液采集法气管镜采集法咽拭子采集法 24h 痰标本采集法标本量不少于1ml
清水漱口取出无菌拭子用压舌板轻压舌部蘸取少量生理盐水迅速擦拭患者口腔两侧腭弓及咽、扁桃体分泌物迅速把咽拭子插入无菌试管内塞紧立即送检叩击患者背部患者取适当卧位将集痰器与吸引器连接抽吸痰液2～5ml 于集痰器内记录痰标本总
量外观和性状广口集痰瓶内加少量清水患者晨起进食前漱口后第一口痰开始留取，至次日晨起进食漱口后最后一口痰结束全部痰液留入集痰瓶内立即送检采集标本气管镜引导下置于无菌容器。

《标本采集教学》课件

《标本采集教学》ppt课件
目录
• 标本采集概述 • 人体标本采集 • 动物标本采集 • 植物标本采集 • 微生物标本采集
01
标本采集概述
标本采集的定义与目的
定义
标本采集是指通过特定方法从人体或动物体内获取组织、器官、体液等样本的过程。
目的
用于医学、生物学、病理学等领域的研究、诊断和治疗，以促进医学科学的发展和人类健康水平的提高。
采集动物组织标本时，应选择适当的组织部位，如肝、肾、心等器官，并使用适当的手术器械进行切割、分离。
动物骨骼标本采集
动物骨骼标本采集主要用于比较解剖学和古生物学研究，通过观察和研究骨骼结构来了解动物的形态特征、演化历程等方面。
采集动物骨骼标本时，应选择完整的骨骼或具有代表性的骨骼部位，如四肢骨、脊柱等。采集时应小心操作，避免损坏骨骼结构。
种子采集技巧
选择健康、成熟的种子，避免采集未成熟或受损的种子。采集时要小心地将种子从果壳或母株上取下，并保持种子的完整性。
种子处理方法
将采集的种子用吸水纸轻轻压干，然后放入干燥箱中干燥。干燥后用标签标注采集信息，如植物名称、采集日期等。
植物其他标本采集
其他部位采集技巧
除了叶片、花朵和种子外，植物的其他部位如茎、根、皮等也可以作为标本采集的对象。采集时要选择健康、完整的部位，并保持其完整性。
标本采集的种类与要求
种类
血液、尿液、粪便、组织、骨髓等。
要求
采集的标本应具有代表性、准确性、及时性，同时要遵循伦理和法律规定，保护受试者的权益和安全。
标本采集的注意事项
01
02
03
04
遵循无菌操作原则
确保采集过程中不受外界微生物的污染，防止感染。

呼吸道标本的细菌培养PPT课件

• 涂片革兰氏染色，观察痰标本是否合格。
• 血琼脂：哥伦比亚琼脂或胰大豆胨琼脂、
5％绵羊血、或加适量抑制剂如庆大霉素有利于肺炎链球菌生长。
• 巧克力琼脂：哥伦比亚琼脂+5％马血或兔
血+3mg/100mL去甲万古霉素或杆菌肽，有利于嗜血杆菌的分离培养。
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11
(五)痰标本致病菌的选择和报告
萄球菌、副流感嗜血杆菌等无充分理由，不应作为致病菌报告。
• 除呼吸道正常菌群外多于3种或以上细菌时，要考
虑痰标本的口腔污染。
• 卡它莫拉菌识别：
* 可在血琼脂或巧克力上生长 * 灰略黄、干燥但可在盐水中乳化，可用接种环推动整个菌落。
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（六）肺炎链球菌培养技术
前言
• 肺炎链球菌(Streptococcus pneumoconia，
• 只有能够满足所有四个条件，才能确定该种细菌
室相应疾病的病原。
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3
提纲
• （一）呼吸道标本的采集。
痰标本是反映下呼吸道感染最直接的标志物，痰标本采集过程污染机会多，痰标本采集方便、无痛苦。
• （二）合格的痰标本。 • （三）呼吸道（痰）标本细菌培养存在的问题。 • （四）呼吸道（痰）标本接种处理。 • （五）呼吸道（痰）标本细菌报告。 • （六）肺炎链球菌的分离培养技术。 • （七）流感嗜血杆菌的分离培养技术。
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8
（三）痰标本细菌培养存在的问题。
• 培养基不合格：
肺炎链球菌、化脓性链球菌可以在绵羊血平板上生长，绵羊血不含X因子，所以流感嗜血杆菌、奈瑟菌在绵羊血巧克力平板上生长差或不生长，要加入一种含X因子的添加剂才能生长良好，而马血、兔血同时含有V和X因子，所以采用马血或兔血制的巧克力平板，流感嗜血杆菌、奈瑟菌生长良好。

呼吸道标本采集

呼吸道标本采集
【一】评估和观察要点
1.评估患者年龄、病情、治疗、排痰情况及配合程度。

2.评估患者口腔黏膜有无异常。

3.观察痰液的颜色、性质、量、分层、气味、黏稠度和有无肉眼可见的异常物质等。

【二】操作要点
1.自行咳痰采集法晨痰为佳，用冷开水漱口，深吸气后用力咳出呼吸道深部痰液，标本量不少于1ml，痰量少或无痰患者可采用10%盐水加至45度左右雾化吸入后，将痰液咳出。

2.难于自然咳痰、不合作或人工辅助呼吸患者的痰液采集法患者取适当卧位，先叩击患者背部，然后将集痰器与吸引器连接，抽吸痰液2~5ml于集痰器内。

3.气管镜采集法协助医生在气管镜引导下，直接采集标本。

4.咽拭子采集法患者用清水漱口，取出无菌拭子蘸取少量无菌生理盐水；用压舌板轻压舌部，迅速擦拭患者口腔两侧腭弓及咽、扁桃体的分泌物，避免咽拭子触及其他部位；迅速把咽拭子插入无菌试管内塞紧。

5.24h痰标本采集法在广口集痰瓶内加少量清水。

患者起床后进食前漱口后第一口痰开始留取，至次日晨进食前漱口后最后一口痰结束，全部痰液留入集瓶内，记录痰标本总量、外观和性状。

【三】指导要点
1.告知患者正确留取标本对检验结果的重要性
2.告知患者痰标本留取的方法及注意事项
3.告知患者避免将唾液、漱口水鼻涕等混入痰中。

【四】注意事项
1.除24h痰标本外，痰液收集时间宜选择在清晨。

2.查痰培养及肿瘤细胞的标本应立即送检。

3.避免在进食后2h内留取咽拭子标本，以防呕吐，棉签不要触及其他部位以免影响检验
结果。