岛津LC-20AT-型高效液相色谱仪(仪器编号：)检定规程
岛津LC-20AT操作规程
岛津LC-20AT型高效液相色谱系统标准操作规程一、目的规范岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
二、范围本规程适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的使用和维护。
三、职责质检室仪器分析员负责岛津LC-20AT型高效液相色谱系统的日常使用和维护。
四、操作规程1、流动相的处理1.1 过滤溶剂溶剂在使用定要用0.45μm的过滤器过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片本实验室有水溶性和脂溶性两过滤膜供选择（反光面朝上），缓冲盐先用水膜过滤，和有机相混合后再用有机滤膜过滤，滤前先滤少量纯化水清洗滤器。
1.2 保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
1.3保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：流动相再脱气；采用有效的脱气方法或两种方法配合使用；改系统内混合系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装沉子沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞引起管道和泵腔空化，压力不稳。
过滤器应先用水超声，再用甲醇超声处理。
这种情况下，流动相需要重新过滤。
1.4.3 流动相和储液器被污染由于污染，噪音越来越大，检测器基线上升。
污染物可能被泵以稳定的浓度打入系统，而再以稳定的浓度流出来，所以在色谱图中不出余的峰。
用梯度洗脱时弱流动相可以使污染物聚在柱顶，流动相强度增加后污染物可能被洗脱出来一大的伪峰。
岛津LC-20AT高效液相色谱仪操作规程
1 目的：为了规范LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养，确保测量结果的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 接通电源，开启泵、柱温箱、检测器等辅助设备。
4.1.2 开启计算机，双击打开LC solution窗口，单击分析，进入工作站。
4.1.3 计算机与仪器连接后，把配制好的流动相放入贮液瓶中，然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开冲洗阀，再按Purge键进行排空，检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，即再按Purge键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。
4.1.4 最大和最小保护压力设定4.1.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。
如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。
在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。
4.1.4.2最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：a) 当流路中发生了漏液；b) 当储液瓶中的流动相流完时，空气将通过流路被抽进来。
如果压力下降至最小压力限制值以下时间超过1分钟，送液也将自动停止，同时发出报警声并显示出错信息。
4.1.5泵启动和停止：按Pump键，泵就开始启动，泵运行指示灯亮。
泵运行后，须注意观察显示面板上工作压力的显示值，确保压力上升并逐渐达到一个稳定值，一般压力波动的上下幅度不应大于0.5MPa。
需要停泵就只要再按Pump键，泵一停，运行指示灯就熄灭。
4.2 方法的建立与调用4.2.1 新建方法点击文件菜单下“新建方法文件”，建立一个空白方法仪器参数视图中的高级选项中设置，数据采集：设置分析时间→LC程序时间：按需要设置时间程序→泵：设置泵的流速，流动相通道、压力上限→检测器：设置氘灯开启、池温度、检测波长→柱温箱：设置柱温。
高效液相色谱仪操作规程-岛津
1技术参数LC-20AT低压梯度泵梯度方式：低压混合混合溶剂数：4液混合浓度准确度：1%以下SIL-20AC自动进样器：进样量：0.1 L~100^L进样量准确度：1%以下进样量精密度：RSD: 0.3%以下（10mL进样时指定条件下）2适用范围适用于药物的分离、定性、定量分析3操作步骤3.1仪器组成：由DGU-20A5脱气机、LC-20AT低压梯度泵、SIL-20AC自动进样器、CTO-20A 柱温箱、SPD-20A 紫外-可见检测器、RF-20A荧光检测器、CBM-20A系统控制器、LC Solution 工作站等组成。
3.2开机①在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相，标样及样品。
流动相抽滤后超声脱气15分钟，标样和样品0.45um膜过滤。
②接通电源，依次开启A泵、B泵、柱温箱、自动进样器、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。
③泵排空操作：打开LC-20AT泵排空阀（逆时针90度以上），按Purge键，泵开始排空运行。
检查流动相入口Teflon管路没有气泡后，再按Purge键停止排空。
自动进样器排气操作：按Purge键，自动进样器开始排气，系统默认排气时间为25min, 且自动进样器排气过程中可同时进行其他操作。
（除进样外）压力调零：按LC-20ATvp泵Func键选择CONTRO项，按FUN（键直至屏幕显示***ml ZEROADJ项，按Enter键，再按CE键，即完成调零。
然后关紧排空阀（顺时针旋紧）。
④再双击Operation € Analysis 1~4进入实时分析窗口：（根据不同的检测器选择）在开机画面中，User ID选中Admin,不需输入Password,点击OK（可听到峰鸣一声）衣在下面操作中A€ B表示在A菜单下选择B,以此类推。
选中□表示在□中打V号。
3.3参数设置①在左侧助手栏给出了引导顺序操作的图标，自上而下顺序执行即可：（可以跳过执行）•System configuration 系统配置（第一次安装或更换检测器时配置，通常跳过不操作）•System Check编辑仪器检查参数：并且RUN运行检查。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程岛津LC-20AT型液相色谱仪操作规程1．目的规范岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养，保证测量数据的准确可靠。
2．范围适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养操作。
3．职责岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作人员执行本规程；质量部管理人员监督实施。
4．规程4.1 系统组成：LC-20AT型高压双泵、SIL-20A自动进样阀、SPD-20AT紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。
4.2 准备4.2.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
4.2.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。
4.2.3 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。
4.2.4 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
4.3 开机4.3.1 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵4.3.2 待泵和检测器自检结束后，打开打开色谱工作站，点击按钮“1”，输入用户名:ADMIN。
4.3.3 当SPD-20A发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，LC窗口打开。
4.4 参数设定4.4.1 设置新的分析参数时，请从通过键盘在LC窗口的“Instrument Parameters View”中输入参数（即A、B泵的流速，波长，柱温；柱在线时流速一般不超过1ml/min）4.4.2 选择File >Save Method File As ，输入方法名称后保存。
4.4.3 点击“Download”键，将保存好的方法下载4.5 更换流动相并排气泡4.5.1 将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；4.5.2 逆时针转动A/B泵的排液阀360°4.5.3 按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，1min再次按A/B 泵的[purge]键4.5.4 顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀4.5.5 如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽4.6 平衡系统4.6.1 更换流动相并排气泡后，在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数4.6.2 等度洗脱方式4.6.2.1 点击“Instrument on/off ”按钮，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。
岛津LC-20AT高效液相色谱仪使用,维护操作规程
间，以免仪器内部件受潮。
4.4.8 为保证检验数据的可靠，每年应由计量部门负责校验
一次。
5. 术语:
无
6. 相关文件和记录 6.1 依据《岛津LC-20AT高效液相色谱仪使用说明书》 6.2 记录 7. 附录 7.1 变更表
文件编号
生效日期
变更理由（以及可能的技术变 更）
高效液相色谱仪标准操作规
文件名称
程
文件编号
编制人
审核人
批准人
编制日期
审核日期
批准日期
颁发部门 质量部
生效日期Biblioteka 发送部门 质量部1. 目的 建立岛津LC-20AT高效液相色谱仪的使用，维护操作规程，保证实验 人员正确操作。
2. 范围 适用于岛津LC-20AT高效液相色谱仪的操作。
3. 职责 QC使用人员对本标准的实施负责，QC主任对本标准的实施监督。
键，出现登录窗口，单击确认，进入工作画面，此时 可听到“滴”的2声，表明系统与工作站已经连接。 4.2.2 打开“文件”项下“新建方法文件”，然后从仪器参数试 图中设置指定的参数，设定完成后，从“文件”项下选
择“另存方法文件为”保存在指定的文件夹内，单击“下 载”。参数设置完成后点击
键，输入文件编号、文件名称、方法名称点击确认进 入准备进样状态。 4.2.3 进样阀手柄在“INJECT”位置时插入注射器，然后将进 样阀手柄置“LOAD”位置，推入供试品，再将进样阀 手柄转到“INJECT”位置，分析的同时工作站自动采集 数据。 4.2.4 待分析结束后点击
4. 程序 4.1 仪器组成及电源： 4.1.1 仪器组成：本仪器由1台LC-20AT泵、SPD-20A紫外检 测器、DGU-20A脱气机和CTO-10ASVP柱温箱组成。 4.1.2 电源：各部件均为220伏稳压电源。 4.2 操作： 4.2.1 依次打开泵、检测器、柱温箱电源开关。双击桌面上 快捷图标，点击【Operation】单击
岛津LC-20A操作规程(简化)
岛津LC—20AT型高效液相色谱仪操作规程一、流动相及样品的准备1、流动相的选择，有机溶剂必须是色谱级，水必须是超纯水或二次蒸馏水。
2、流动相用0.45μm孔径的滤膜过滤（水和有机相所用的滤膜不同，有机相用F膜，水相用水膜），超声脱气后置于储液瓶中。
3、根据待检测样品的需要更换合适的色谱柱。
4、样品溶液亦必须用0.45μm的微孔滤膜过滤后才能进样。
二、开关机顺序1、开机顺序：先打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器电源，再打开系统控制器的电源，点击电脑中的Lc-solution工作站联机，连上后能听到两次“嘀”的声音。
2、关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭Lc-solution工作站→系统控制器→泵、自动进样器、柱温箱、检测器。
3、待设备自检结束后，打开仪器对输液泵及自动进样器进行必要的Purge操作，排出相应流路中的气泡，使新鲜溶剂在流路中得以置换；检查输液泵在动作前的压力显示值，必要时对此压力值进行调零。
三、LC-solution 操作界面的进入及系统的开启1、双击桌面上Lc-solution图标，选择屏幕左侧“操作”项并单击，在弹出的窗口中双击操作仪器所对应的图标，弹出窗口后输入用户名ID及密码，按“确定”进入仪器实时分析界面。
2、点击助手栏中的“仪器参数”进入仪器参数设置界面，设置采样时间，流动相流速及配比，检测波长，柱温等。
在完成后点击“下载”将分析参数传输至主机。
3、分析方法的保存：选择文件→另存方法文件为→选择保存路径→取名保存文件。
该方法即作为当前运行的方法。
4、打开仪器上的排空阀（逆时针方向旋转180°），点击仪器面板上“purge”按钮开始清洗5个流路3分钟。
5、系统的启动：点击“仪器开/关”键开启系统（此时泵开始工作）四、进样准备及单次进样分析1、将样品瓶放入自动进样器中2、观察基线及柱压，待基线平直（-5~30mv），压力稳定（0.5Mpa）时方可进样。
3、点击助手栏中“单次分析”键，出现采样对话框。
岛津 LC-20AT标准操作规程
岛津LC-20AT标准操作规程题目岛津 LC-20AT标准操作规程第 1 页共 2 页编码SOP-03版次1起草/修订人日期20171218 起草/修订部门治疗药物监测室审核人日期颁发部门药学部批准人日期执行日期分发部门药学部办公室、临床药学变更历史版本号 1 目的：建立岛津 LC-20AT高效液相色谱标准操作规程操作规程,确保检测精确可靠。
范围：治疗药物监测项目责任：治疗药物监测检测员。
内容：1.仪器安装：1.1岛津 LC-20AT高效液相色谱仪为精密仪器，厂家安排工程师安装调试。
2.仪器使用：2.1开机：确保仪器连接电源，依次按下泵、柱温箱、自动进样器、检测器电源键。
检查管路有无气泡，流动相是否足够。
2.2 旋转泵排液阀按钮90-180°，按purge泵运行。
大约2min后完成，关闭排液阀。
2.3 打开电脑，打开Labsolution软件，当听到“滴”的声音表示，仪器与电脑连接成功。
2.4 在Labsolution软件界面下，打开方法文件，若检测样本流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗管路10-20min，然后用流动相冲洗管路40min以平衡色谱柱，如检测样本流动相为有机溶剂，可直接使用流动相平衡。
2.5 平衡色谱柱期间，可处理待测样本。
样品处理完成后，放入自动进样器，若待测样本较少，可在样品管内加内衬管。
2.7 Labsolution软件界面下，设置基线参数，按下基线检查按钮，约15min后基线归零。
编辑批处理文件，仪器按照程序自动进样检测。
2.8 数据处理：待测样本检测完成后，加载相应处理方法，记录数据，并打印报告。
3.仪器维护与保养：3.1 样品检测完成后，若其流动相为盐溶液，需先用5%甲醇水溶液冲洗10-20min，后用甲醇冲洗10-20min，如其流动相为有机溶剂，可直接用甲醇冲洗20-30min。
3.2 若当天待测样品品种较多，需使用不同的流动相和色谱柱，宜对每根色谱柱进行相应的冲洗。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。
无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。
脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。
有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。
将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。
一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。
注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。
色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。
二、开机1、打开Labsolution。
点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。
双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。
标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。
要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。
荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。
设置完成后点击“下载”。
流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。
以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程一．系统配置系统组成：本系统由DGU-20A3 脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A 紫外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。
二．准备工作1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。
2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。
3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。
严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。
4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三．开机、参数设定及平衡系统1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。
2．排气泡或更换流动相的操作方法1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2）逆时针转动A/B泵的排液阀180o；3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中设流速为5 ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设定为规定值。
3．参数设定1）波长设定：一般设为254nm。
2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程
标准操作规程第 1 页共 4 页1 仪器组成和开机1.1 仪器组成本系统由LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、DGU-20A5真空脱气机、CTO-10ASvp柱温箱、SIL-20AC自动进样器、LCsolution色谱工作站（1.21SP1版本）和打印机组成。
1.2 开机将电源插头分别插入插座，打开泵、真空脱气机、紫外检测器、柱温箱和自动进样器的电源开关；打开计算机，鼠标双击桌面上的【LCsolution】图标打开一个窗口。
如需进行在线操作，点击图标，输入用户名和密码，点击【OK】即进入工作站的在线操作页面；如要进行离线分析方法的建立和修改则点击下方的图标；点击【Postrun】图标则进入数据分析和处理界面。
进入在线操作页面后，可看到如下几部分组成：--最上方为命令栏，依次为File、Edit、View、Method等；--命令栏下方为常用命令的快捷操作图标，分别用于样品序列分析、单个样品分析、管路排空、仪器开关等；--左侧为辅助栏，显示几个分析作业流程的操作图标，如系统设置，数据采集，序列表，离线分析等；--中部为数据信号显示栏；--下部为仪器工作参数栏：包括泵、检测器、柱温等；1.3 开机清洗打开泵的排液阀，点击上方快捷命令按钮【Auto Purge】，可对仪器管路进行冲洗。
清洗的管路和清洗时间可在仪器工作参数设置界面中的【Auto Purge】窗口进行选择和设置，可对A、B、C、D四个流动相管路和自动进样器进行清洗。
2 分析方法的建立、保存和调用2.1 分析方法的建立在仪器运行参数设置界面，点击【Normal】出现主要运行参数，点击【Advanced】出现全部运行参数。
2.1.1 采样时间设置在【Data Acquisition】窗口中，左侧【LC Stop Time】框中输入样品运行时间；右侧【Acquisition Time】打勾同时输入检测起始时间和检测结束时间。
2.1.2 输液泵参数设置在【Pump】窗口中，选择【Low pressure gradient】模式，输入总流速和流动相比例。
岛津LC-20A高效液相色谱仪操作规程
岛津高效液相色谱仪LC-20A操作规程一、目的：为了安全、规、正确使用岛津LC-20A型高效液相色谱仪，特制订本操作规程。
二、围：仅适用于岛津LC-20A型高效液相色谱仪。
三、环境要求：温度4 ～35℃，相对湿度为40～80% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。
四、L C-20A高效液相色谱仪工作原理：高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相),由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱流出, 通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到工作软件,数据以图谱形式表现出来。
4.1高效液相色谱仪外观图：图1：高效液相色谱仪外观图开机顺序：A泵→B泵→柱温箱→自动进样器→检测器→系统控制器后→电脑显示器→主机（注：仪器各单元的开关均在左下角）4.2高效液相色谱仪的基本流路：五、样品准备：5.1开机之前，准备好所用的流动相和样品，检查储液器的吸滤头是否在液面以下。
流动相和样品必须通过0.45um过滤器过滤。
5.2 流动相：必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相，并通过0.45um过滤器过滤。
过滤后的流动相必须经过充分脱气，以除去其中溶解的气体O2等，如不脱气易产生气泡、基线噪声增加、灵敏度下降，甚至无法分析。
5.3 查看仪器使用记录，了解仪器当前状况。
图2：真空过滤器图3：超声波清洗器5.4 样品前处理：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理。
图4 样品前处理六、操作规流程：工作软件操作流程概述：6.1 启动：双击LCsolution，“LCsolution Launcher”启动：图5：联机系统“分析”图6：登录界面此时仪器发出“嘀嘀”两声，表明系统与仪器连接成功6.2 设置系统配置：单击，选择自动配置，检查系统与仪器的实际配置是否相符。
(完整word版)LC-20AT高效液相色谱仪验证方案
LC-20AT高效液相色谱仪验证方案目录1. 参与验证的相关部门及其职责 (1)1.1验证小组成员及职责 (1)1.2验证方案起草 (1)1.3验证方案批准 (1)2. 验证目的 (2)3. 验证依据判断标准： (2)3.1验证依据 (2)3.2验证评判标准 (2)4.验证内容 (2)4.1安装环境的确认 (2)4.2运行确认 (3)4.3性能确认 (4)4.4 柱温箱温度设定值误差ΔTS和控温稳定性TC的检定 (6)4.5 紫外检测器 (7)4.6整机性能 (8)5.验证结果及分析评价 (9)6.再验证要求 (9)6.1再验证周期 (9)6.2 再验证内容 (10)本公司所用的LC-20AT高效液相色谱仪是由工作站软件（N2000）、二元泵(LC-20AT)、手动进样器（20微升定量环）、控制器(CBM-20A)、柱温箱(IN-150)、紫外检测器（SPD-20A T）以及相关管路等组成。
主要用于本公司在药物含量检测。
1. 参与验证的相关部门及其职责1.1验证小组成员及职责1.2验证方案起草1.3验证方案批准2. 验证目的确认LC-20AT高效液相色谱仪的运行环境、性能等各项指标符合器所设计的性能指标。
确保使用该仪器的所检测数据真实可靠，为日常检验提供准确的检测结果。
3. 验证依据判断标准：3.1验证依据3.1.1《药品GMP指南》2010年版3.1.2《LC-20AT型高效液相色谱仪标准操作规程》3.1.3《LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明》3.1.4《中国药典》2010年版二部附录3.2验证评判标准3.2.1安装环境确认判断标准确认安装符合《LC-20AT型高效液相色谱仪安装使用说明》说明书要求。
3.2.2运行确认判断标准安装确认认可后，在不使用试样的条件下，确认该仪器运行正常。
3.2.3性能确认判断标准使用样品检测符合《中国药典》2010年版二部附录要求和LC-20AT型高效液相色谱仪性能指标。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的图文操作手册一、岛津LC-20AT型高效液相色谱仪：岛津LC-20AT型高效液相色谱仪二、功能和用途：1、功能：本仪器采用高压梯度通过高压输液泵分别独立精确控制流量、调整溶剂浓度比例，实现高效率、高精度混合；即配备了可提供全波长三维信息的二极管阵列检测器，全新的光路设计与有效的梯形狭缝池设计保证了高分辨率和高灵敏度；也配备了灵敏度更高、选择性更好的荧光检测器；还配备了具有高灵敏度、检测范围更广的蒸发光检测器。
2、用途：本仪器可以高效地分离分析高沸点、热不稳定的有机及生化试样；二极管阵列检测器对大部分有机化合物有响应；荧光检测器可以检测产生荧光的物质，对如多环芳烃、维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；蒸发光散射检测器对碳氢化合物、表面活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和挥发性低于流动相的任何样品、不含发色团的化合物有响应。
三、操作步骤：1、色谱柱的安装本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。
样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。
2、开机a、首先打开UPS，然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液传输单元（泵）、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器SIL-20A，CTO-20A柱温箱电源打开。
（HPLC组件的电源开关大都在仪器的右下角）b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge键进行自动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。
c、双击Lc solution图标。
输入用户名Admin，点击OK。
单击系统配置的图标，出现系统配置的对话框。
单击自动配置，仪器自动将能找到的仪器配置，也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪器。
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT液相色谱仪操作规程一、开机前准备1、流动相按照标准要求配制流动相，需使用色谱纯试剂，有机相和纯水不用过滤，可直接超声脱气后使用。
无机盐溶液流动相必须使用溶剂过滤器过滤，根据溶液不同选择不同的滤膜（有机相/水相），过滤后超声脱气使用。
脱气时需盖上瓶盖，但不拧紧。
有机相流动相脱气必须在通风橱或高温室操作。
将配制好的流动相接入液相色谱仪的流路。
一般纯有机相接入A泵，纯水接入D泵，无机盐溶液接入B 泵。
注意观察洗液瓶是否还有洗针水，洗针水为1：1甲醇水。
2、色谱柱按标准要求选择色谱柱，一般为C18柱，苯并芘有专用柱，糖类分析用氨基柱。
色谱柱安装：色谱柱上有箭头，按流路方向安装，根据所要使用的检测器在色谱柱的出口端接上不同接头。
二、开机1、打开Labsolution。
点击自动进样器上Purge键，使自动进样器进入自动清洗状态，25分钟自动停止。
双击选择适用的检测器，SPDA为二极管阵列检测器，RF为荧光检测器，ELSD为蒸发光散射检测器。
标准要求使用紫外检测器或者二极管阵列检测器的均选择二极管阵列检测器，此检测器为最常用检测器，一般项目均使用此检测器。
要求使用示差折光检测器或者蒸发光散射检测器的均选用蒸发光散射检测器，本实验室应用主要为葡萄糖、蔗糖、果糖、麦芽糖、乳糖、三氯蔗糖，使用该检测器需打开气体，气体为氮气或空气，需使用99.999%纯度以上。
荧光检测器本实验室主要用于黄曲霉毒素B族和G族、苯并芘的检测。
2、新建方法文件文件→新建方法文件将等度洗脱修改为低压梯度，最高柱压由10MPa改为20MPa，设置柱流速为1ml/min，根据标准要求选择光源，检测波长小于350nm打开D2灯，350nm以上打开W灯。
设置完成后点击“下载”。
流路排气根据选择的流路进行排气，所需要使用的每个流路均需排气。
以选择A、B流路为例，逆时针旋转打开排气阀，将B、C、D泵流量设为0，点击“下载”，然后在泵上点击Purge键，显示屏上显示“Purge line”，进入A泵排气阶段。
岛津LC-20AT高效液相色谱仪操作规程
1 目的：为了规范LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养，确保测量结果的准确性，特制定此规程。
2 范围：本规程适用于LC-20AT高效液相色谱仪的使用、维护和保养。
3 责任者：化验员4 程序：4.1 开机4.1.1 接通电源，开启泵、柱温箱、检测器等辅助设备。
4.1.2 开启计算机，双击打开LC solution窗口，单击分析，进入工作站。
4.1.3 计算机与仪器连接后，把配制好的流动相放入贮液瓶中，然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开冲洗阀，再按Purge键进行排空，检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，即再按Purge键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。
4.1.4 最大和最小保护压力设定4.1.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。
如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。
在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。
4.1.4.2最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：a) 当流路中发生了漏液；b) 当储液瓶中的流动相流完时，空气将通过流路被抽进来。
如果压力下降至最小压力限制值以下时间超过1分钟，送液也将自动停止，同时发出报警声并显示出错信息。
4.1.5泵启动和停止：按Pump键，泵就开始启动，泵运行指示灯亮。
泵运行后，须注意观察显示面板上工作压力的显示值，确保压力上升并逐渐达到一个稳定值，一般压力波动的上下幅度不应大于0.5MPa。
需要停泵就只要再按Pump键，泵一停，运行指示灯就熄灭。
4.2 方法的建立与调用4.2.1 新建方法点击文件菜单下“新建方法文件”，建立一个空白方法仪器参数视图中的高级选项中设置，数据采集：设置分析时间→LC程序时间：按需要设置时间程序→泵：设置泵的流速，流动相通道、压力上限→检测器：设置氘灯开启、池温度、检测波长→柱温箱：设置柱温。
_岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程
南京丰融化学技术有限公司Nanjing Frochem Tech Co.,Ltd.岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程1 目的：规范岛津LC-20AT型高效液相色谱仪的使用维护保养，保证测量数据的准确可靠。
2 范围：适用于岛津LC-20AT型高效液相色谱仪使用维护保养操作。
3 职责：岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作人员执行本规程；质量部管理人员监督实施。
4 内容：4.1 使用：4.1.1 仪器组成:LC-20AT型高压双泵; SPD-20AT紫外检测器;CTO-10AS柱温箱;进样器;混合器;色谱数据处理系统(LC solution软件);计算机;打印机。
4.1.2 电源:将电源插头分别插入插座后,接通外电源及稳压器电源,,依次打开泵,检测器,柱温箱，色谱数据处理系统,计算机的电源开关。
4.1.3 更换流动相:配制好的流动相经超声脱气后,将过滤头插入液体底部。
若使用的流动相为缓冲盐溶液，应先用低浓度的甲醇-水混合液(常用5:95)冲洗20-30分钟，再更换为含盐流动相。
4.1.4 LC-20AT泵的操作:4.1.4.1 打开泵的电源后,显示屏显示：4.1.4.2 排气泡：将泵上部中间的黑色旋钮逆旋转90~180度，按【Purge】,进入流动相被吸入过滤器至泵的排气冲洗操作, ,自动脱气完毕后(液体停止从废液管流出时),关闭排液阀即可。
4.1.4.3 。
4.1.5 SPD-20A型紫外检测器参数设定: 待检测器自检完毕且正常后,可进行参数的设定。
显示屏显示:。
4.1.6 色谱数据处理系统设定:4.1.6.1 在计算机上打开“LC solution”界面。
4.1.6.2 点击“通道1”“通道2”图标,选定通道。
输入实验信息，4.1.6.3 编辑方法：①采样控制：输入采样结束时间、文件前缀、文件保存方式、保存路径以及选择采样结束后自动积分或自动打印报告；②积分：选择积分参数、积分方法，并且根据实验所需对分析参数进行修改；③谱图显示：输入时间、电压显示范围，并选择色谱图注释内容；④报告内容编辑：根据实验所需对谱图尺寸、实验信息、报告内容及谱图显示等进行修改；4.1.6.4 点击【数据采集】：①点击【查看基线】；②点击【零点校正】。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程一．系统配置系统组成：本系统由DGU-20A3 脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A紫外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。
二．准备工作1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。
2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。
3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。
严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。
4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三．开机、参数设定及平衡系统1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。
2．排气泡或更换流动相的操作方法1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2）逆时针转动A/B泵的排液阀180o；3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中设流速为5 ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设定为规定值。
3．参数设定1）波长设定：一般设为254nm。
2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。
岛津LC-20AT操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程1. 开机前准备①储液瓶中装有足够的已经充分脱气的流动相，并且吸滤器已经放入储液瓶中。
②排液管的另一端已经放入废液瓶中.2. 开机①更换流动相,把排液阀旋钮反时针方向旋180℃,打开排液阀，打开泵电源开关ON, 按purge键，泵开始运行，冲洗1分钟以后，自动停止，或按pump键或 purge键停止冲洗操作。
②设定流速，方法：func+ 流速+Enter+pump 。
观察屏幕显示压力，用流动相冲洗流路，直到色谱柱平衡。
③开检测器电源开关ON, 设定波长，方法：func+ 波长+Enter+CE④打开电脑，点击色谱工作站中文版，进入高效液相色谱工作站，设定相关参数。
3. 进样及数据采集①待色谱柱平衡后，可进样。
用微量注射器吸取待检测的溶液，反复润洗多次后，吸取需要体积溶液。
注意排除气泡。
②进样方法：在手动进样器处于“Inject”位置下，插针，再使处于"Load" 位置，推针进样，流动相将样品带入色谱柱，同时按下同步记录钮，稍后拔针。
③待一个样品数据采集完毕，按下记录钮，使停止记录，自动计算并给出结果，存储，用溶剂或甲醇冲洗进样阀。
继续反复操作，分析第二个样品，……。
④数据处理及打印报告。
退出工作站。
4. 关机①数据采集完毕后即可关闭检测器。
②待流路充分冲洗后，按pump键，pump指示灯灭，关泵电源。
③如果使用缓冲溶液作流动相，应先后使用足够的水和甲醇分别冲洗进样阀、泵头、色谱柱流路。
④使用完毕，必须在《仪器使用记录本》上填写有关内容，责任老师检查仪器完好性后方可离去。
岛津LC-20AT操作规程及其注意事项
岛津LC-20AT操作规程及其注意事项岛津LC-20AT型HPLC操作规程在线操作一、系统组成工作站，D、W检测器，二元泵（A泵、B泵），色谱柱，流动相。
二、准备1、准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。
2、根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向）和定量环。
3、配制样品和标准溶液，用合适的0.45μm滤膜过滤。
（注意腐蚀性与有机系的的溶剂）4、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三、开机接通电源，依次开启不间断电源、泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站。
四、参数设定1、波长设定：点击视图，选择[显示设臵]设臵波长。
2、流速设定：简单设臵下设臵。
五、更换流动相并排气泡1、将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2、逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀；3、按泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的高流速冲洗，3min（可设定）后自动停止，一般视管路无气泡即可。
4、将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5、如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6、如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。
六、平衡系统1查看基线：1.1打开“在线色谱工作站”软件，1.2输入实验信息并设定各项方法参数后，1.3按下“调零”按钮。
七、进样1、进样前按软件中[零点校正]按钮校正基线零点。
2、单击[单次运行]，填好名称，选择测定方法，保存途径，点击确定，弹出开始对话框。
2、用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量即可以进样了，开始对话框自动开始。
3、含量测定的对照溶液和样品供试溶液每份至少进样2次。
八、谱图的判断及结果计算系统适用性实验：三个重要指标①分离度（加强）：一般应≥1.5。
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岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪（仪器编号：）检定规程
一．概述
本组所有的LC-20AT型高效液相色谱仪（仪器编号：）为日本岛津公司生产的产品，由DGU-20A3脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i 手动进样器、色谱柱（3个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A紫外-可见检测器、SEDEX 80 LT-ELSD蒸发光散射检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等。
工作原理为高压输液泵将规定的液流动相泵入色谱柱，手动进样器注入供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在色谱柱内被分离，并依次进入紫外检测器和蒸发光散射检测器进行检测。
二．检定目的
为了确保LC-20AT型液相色谱仪（仪器编号：）检测数据安全可靠，也为了确认该仪器的各项指标能达到仪器所设计的性能指标，对该仪器进行检定。
三．检定依据及判断标准
本检定规程参照国家技术监督局JJG705-2014“液相色谱仪检定规程”制订。
四．检定要求
4.1环境条件
4.1.1检定室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，排风良好。
4.1.2仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械震动和电磁干扰源，仪器接地良好。
4.1.3电源电压为(220±22)V，频率为（50±0.5）HZ。
4.2检定设备
4.2.1秒表：分度值不大于0.1s。
4.2.3分析天平: 最大称量不小于100g，最小分度值不大于1mg。
4.2.4 注射器:10µL一支。
以上计量器具需经计量检定合格。
4.2.5 10ml注射器一支。
4.2.6 游标卡尺：15cm/0.02mm。
4.2.7容量瓶：5ml，20个。
4.3标准物质：咖啡因标准溶液0.005mg/ml、0.010mg/ml、0.015mg/ml、
0.020mg/ml、0.025mg/ml。
4.4.其他要求
4.4.1检定用试剂：HPLC级的甲醇、纯水、乙腈，分析纯的丙酮和异丙醇等。
4.4.2其他玻璃器皿等
五．检定项目及技术指标
先将准备好的5ml容量瓶在电子天平上精密称定（W1），以水为流动相，设定泵A流量为0.5ml/min，泵B流量为0ml/min，待流速稳定后，用秒表计时10min，将流出的流动相用容量瓶接收，计时结束后将容量瓶进行第二次称重（W2），（W2-W1）即为接收到的水重量，折算出体积即为（W2-W1）/ρ，流量即为流出体积/时间。
同法测定泵B，设置流量5.0ml/min，计时为1min，每个流量测定6次，计算6次流量及流量的SD%与RSD%值，并计算流量输出误差及稳定性。
S S流量输出误差= 流量平均值-设定值
×100% 流量设定值
S R流量稳定性= 流量最大值-最小值
×100% 流量平均值
5.2 UV 紫外检测器波长的检定
紫外波长标准检测溶液：咖啡因标准溶液。
打开检测器和工作站，开机预热稳定后，以水流过流通池时作一空白扫描，然后，以手动方式将咖啡因标样注入流通池，扫描190nm ～400nm 范围内的紫外吸收图谱。
记录咖啡因最大吸收和最小吸收处的波长，其205nm 处的最大吸收波长与205nm 比较，其273nm 处的最大吸收波长与
273nm 比较， 最小
5.3基线噪音和基线漂移的检定
选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min ，波长254nm ，开机预热，待稳定后记录基线65min ，测得3min 至23min 内基线波动幅度作为基线噪音，用检测器自身的物理量（mAU ）作单位表示，基线漂移用1小时内基线偏离原点的值（mAU /h ）作单位表示。
5.4性能检定 5.4.1 重现性检定
使用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min ，检测波长273nm ，进样量10µl ，待柱子充分平衡且检测器基线稳定，噪音和基线符合规定要求后，
取咖啡因标准溶液，连续进样6次，计算6针峰高与峰面积的重现性，即RSD%值。
5.4.2 线性检定
使用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长273nm，进样量10µl，待柱子充分平衡且检测器基线稳定，噪音和基线符合规定要求后，进咖啡因溶液0.005mg/ml、0.010mg/ml、0.015mg/ml、0.020mg/ml、0.025mg/ml，每个样品进样1次，求各浓度样品的响应因子，计算响应因子的RSD%值及所做回归曲线的相关系数。
八. 偏差记录
九．检定周期
正常情况下检定周期为一年。