骨髓细胞形态学检验-精品医学课件

标本采集
1.骨髓取材部位
骨髓标本常采用穿刺法吸取，以髂骨首选，也可 选胸骨或棘突等，2岁以下小儿主张用胫骨粗隆穿刺。 穿刺部位不同，细胞的数量和组成有一定差异，病变 呈局灶性分布的疾病差异更明显，故必要时应多部位 取材，以全面了解骨髓的造血情况。
2.骨髓穿刺方法
（1）穿刺部位的选择 骨髓腔中红髓丰富；穿刺部位表
3.骨髓质量保证
（1）无菌穿刺，预防感染。 （2）初诊者于治疗前做骨髓穿刺利于明确 诊断。 （3）动作应缓慢，避免稀释。 （4）多部位穿刺，提高阳性率。
4.干抽
干抽（dry tap）是指非技术原因多次、多部位 穿刺抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于：
１.原发性和继发性骨髓纤维化症。 ２.骨髓极度增生，细胞过于紧密结实，如白血病 、真性红细胞增多症等。 ３.骨髓增生减低，如再生障碍性贫血。 ４.肿瘤骨髓浸润，包括恶性淋巴瘤、多发性骨髓 瘤、骨髓转移癌。
观察血片
组织化学染色
填写骨髓图文结果报告单 （骨髓细胞特征 血片细胞特征 组化特征 ）
骨髓片存档保存
正常骨髓象条件 正常骨髓象特征
一、正常骨髓象应具备四个条件 1.有核细胞增生活跃。 2.各系、各阶段细胞占有核细胞的比例大致在
正常参考范围内。 3.各系、各阶段细胞形态无明显异常。 4.无特殊病理细胞及血液寄生虫。
表现，可提出检查意见；
可疑性诊断
排除性诊断 形态学描述
骨髓有部分变化或有少量异常细胞,可 能为某种疾病的早期、前期或不典型病 例。提出进一步检查或动态观察； 临床怀疑某种疾病，但骨髓象不支持； 提不出诊断意见，可简要描述骨髓象特 征，临床诊断多属于此种。
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200915410
张三
2009-12-31 14：00
4.每位患者的骨髓标本应用小纸袋装好，妥善保存，以 供复查、总结、研究及教学使用，标本存档至少5年。
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低倍镜观察（取材 涂片 有核细胞增生 巨核细胞 病理细胞）
油镜观察 骨髓有核细胞分类计数200－500个
细胞系形态学观察
粒系
红系
单核系 淋巴系 浆系 其他细胞
计算结果（各细胞系百分比 粒红比值）
二、正常成人骨髓象的特征 1.骨髓增生活跃，粒红比值为2～4:1。 2.粒细胞系 在骨髓全部有核细胞中占最大比
例，约1/2左右（40%～60%），原粒＜2%，早粒＜ 5%，以下各阶段细胞依次增多，但分叶核少于杆 状核。嗜酸性粒细胞一般小于＜5%，嗜碱性粒细 胞＜1％。各阶段细胞形态无异常。
3.红细胞系 幼红细胞占全部有核细胞的1/5左 右（20%～25%），原红＜1%，早红＜3%，中红、晚 红约各占10%。幼稚和成熟红细胞形态无异常。
9.制备的骨髓涂片宜全部送检，供染色选择、血 细胞化学染色或会诊用，送骨髓涂片的同时最好送 血涂片。
骨髓涂片检查 血涂片检查 骨髓细胞学检查报告单的填写 标本保存与资料存档
低倍镜观察（取材 涂片 有核细胞增生 巨核细胞 病理细胞）
油镜观察 骨髓有核细胞分类计数200－500个
细胞系形态学观察
粒系
常、黄疸、紫癜、血沉明显加快。 4.血液病定期复查及化疗后的疗效观察。 5.其它如寄生虫病、某些传染病。
禁忌症(contraindication)
1.严重出血的血友病。 2.有出血倾向或凝血时间明显延长者不宜做， 如为了明确诊断也可做，但穿刺后压迫时间延长。 3.晚期妊娠妇女慎重做骨穿。
标本采集 骨髓涂片、染色
1）粒细胞系统： 粒细胞的增生情况，各阶段细胞所占的比例，各
期粒细胞的大小形态、核形、有无双核粒细胞、核浆 发育不平衡现象、成熟粒细胞有无分叶过多或过少。
细胞核染色质结构；核仁大小、数量；胞质量的 多少，颜色深浅；颗粒的多少，有无中毒性颗粒及空 泡变化。
2)红细胞系统： 各期幼红细胞的增生情况，各阶段幼红细胞所占
浅、易定位；避开重要器官。
（2）穿刺步骤及注意事项
（3）骨髓取材的判断 a.满意的指标:瞬间酸痛感；吸取量少于0.2mL；骨髓 小粒、油滴；骨髓特有的细胞；杆状/分叶比例 b.取材失败（骨髓稀释）
部分稀释：骨髓小粒、油滴少或不见，骨髓特有细 胞少，有核细胞少，成熟细胞比例增加。
完全稀释：无骨髓成分，与血片一样。
（4）以中性晚幼粒、杆状核粒细胞增多为主：慢性粒 细胞白血病、粒细胞型类白血病反应、药物中毒、严 重烧伤、急性失血、大手术后等。
（5）嗜酸性粒细胞增多：变态反应性疾病、寄生虫感 染、嗜酸性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、恶性 淋巴瘤、高嗜酸性粒细胞综合征等。 （6）嗜碱性粒细胞增多：慢性粒细胞白血病、嗜碱性 粒细胞白血病、放射线照射反应等。 2.粒细胞减少 见于粒细胞缺乏症、再生障碍性 贫血、急性造血停滞等。
3）巨核细胞系统： 全片巨核细胞的数量，各阶段细胞的比例，有无
成熟障碍现象，有无病理性改变，如微小巨核细胞 、小巨核细胞、单圆核巨核细胞、多核巨核细胞。
同时观察血小板的数量、大小形态，是成簇还是 散在，有无巨大血小板，畸形血小板。
4）其他细胞系： 如单核细胞、淋巴细胞、浆细胞系统及其他细
胞：该类细胞占有核细胞的比例，细胞形态有无异 常，有无原、幼阶段的细胞。如疾病与这类细胞无 相关性，可作简要描述，如有相关性要作为重点进 行描述。
7.无其他异常细胞及寄生虫。
骨髓有核细胞增生程度 粒红比值改变 粒细胞数量改变 红细胞数量改变 淋巴细胞数量改变 单核细胞系统的细胞数量改变 巨核细胞系统的细胞数量改变 其他血细胞数量改变
骨髓有核细胞增生程度
增生极度活跃 增生明显活跃 增生活跃 增生减低 增生极度减低
急、慢性白血病，淋巴瘤白血病 常见贫血,慢淋,类白 正常 ,传单症,MM AA,PNH,低增生性白血病 急AA，白血病化疗
4.巨核细胞系 通常在一张1.5cm×3cm骨髓涂 片上，可见巨核细胞7～35个，以颗粒型和产血小板 型巨核细胞为主。血小板散在或成簇，无异常和巨 大血小板。
5.淋巴细胞系 占1/5左右（20% ～ 25%），小儿偏 高，可达40%，主要是成熟淋巴细胞。
6.单核细胞及其他细胞 单核细胞一般不超过5% ，浆细胞不超过2%，通常都是成熟阶段。其他细胞如 组织细胞、组织嗜碱细胞、巨噬细胞等可少量存在。
5~20/HP 1:50
1~5/HP 1:200
骨髓增生度分级（高倍镜）
二.油镜观察
1.骨髓细胞分类前先浏览一下各类细胞的形态特点， 再进行细胞分类。
白血病细胞形态学不容易识别时,可先染组织化 学协助诊断,然后再进行细胞分类。如有的标本形态 学不典型时，先分类，再结合临床综合分析，描述 骨髓形态学特点。
骨髓涂片及染色方法，与血涂片基本相同， 但含有骨髓小粒和脂肪，有核细胞数量多，较血液 浓稠，推片时角度要略小，速度要慢，涂片过厚会 影响细胞形态观察。
骨髓涂片和染色的注意事项：
1.载玻片要洁净。 2.推玻片与载玻片之间成30°角为宜，角度越 小，推片速度越慢，骨髓涂片越薄。 3.抽取骨髓液后应立即制备骨髓涂片。选择含 骨髓小粒多的标本作涂片效果更佳。
的比例，幼红细胞的大小形态，有无巨幼红细胞、 核形异常（双核、多核、畸形核、核碎裂、核固缩 、核浆发育不平衡）。
细胞核染色质结构，有无核仁及数量。 胞质量、颜色、有无包涵物（豪-焦氏小体、嗜碱 性点彩）。
成熟红细胞的大小形态，有无异常红细胞 ，如球形、椭圆形、镰刀形、靶形、盔形、三角形 、棘形、泪滴样、大红细胞、多色性红细胞、嗜碱 性点彩红细胞、卡波环等。
4.涂片一般不用抗凝剂。 5.体积较大的特殊细胞多在片尾和边缘。 6.涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干不能用 火烤。 7.骨髓中有核细胞较多，涂片固定和染色时间较血 涂片稍长，以保证幼稚细胞着色均匀，结构清晰。 染色时间的长短与气温、染料的性质有关。
8.若染色太浅，可于涂片干燥后重染；染色过深 或有沉淀物，可滴加甲醇数滴，稍停后冲洗。
红系
单核系 淋巴系 浆系 其他细胞
计算结果（各细胞系百分比 粒红比值）
观察血片
组织化学染色
填写骨髓图文结果报告单 （骨髓细胞特征 血片细胞特征 组化特征 ）
骨髓片存档保存
骨髓涂片检查
一.低倍镜观察 1.判断骨髓涂片的质量：观察涂片厚薄,小粒,油滴,染
色等,选择满意部位进行有核细胞分类计数. 2.判断骨髓增生程度：五级分类法 3.巨核细胞计数：7-35个(1.5x3.0cm) 4.全片观察有无体积较大或成团出现的异常细胞
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儿科 123654 12
王五
李四
标本保存与资料存档
1.骨髓标本首先要登记编号，并在每张涂片上用铅笔写 上患者的姓名、性别、年龄等基本信息；
2.填写细胞形态学报告单应一式两份，其中一份发给患 者，另一份存档；
3.观察后的标本务必用二甲苯或醇－醚混合液将镜油擦 拭干净，否则会使涂片染色退却；
2.计算粒红比，正常为2-4:1 3.计算各阶段巨核细胞百分比或各阶段巨核细胞个 数。
血涂片检查
1.分类 至少100个白细胞，同时注意观察各种细胞 （包括红细胞和血小板）的形态； 2.计算 计算各类细胞的比例； 3.描述 一般需要描述涂片中有核细胞总数情况， 以何种细胞为主，形态如何。红细胞、血小板的数 量、形态及分布，有无寄生虫及其他异常细胞等。
粒红比值改变
1.粒红比值增加：见于粒系增多或红系减少的 疾病，如粒细胞白 血病、类白血病反应、纯 红再障等。
2.粒红比值正常：见于粒红细胞比例正常，或两系细胞同时增加 或减少的疾病，如正常人骨髓、多发性骨髓瘤、再生障碍性贫 血、传染性单核细胞增多症、特发性血小板减少性紫癜等。
3.粒红比值降低：见于粒系减少或红系增多的疾病，如粒细胞减 少症、粒细胞缺乏症，缺铁性贫血、巨幼细胞贫血、铁粒幼细 胞贫血、溶血性贫血、红血病、真性红细胞增多症、急性失血 性贫血等。