实验室常用灭菌法详细版.ppt
实验室消毒灭菌ppt课件
（二）湿热灭菌 原理：使微生物的蛋白质及核酸变形导致其死亡。
高压蒸汽灭菌器
脉动真空灭菌器
实验室消毒灭菌
卡式灭菌器
8
•（二）湿热灭菌
仪器设备
灭菌过程
应用
不适用灭菌物品
高压蒸汽 灭菌器
准备-加压升温—灭 菌—排气—干燥—
结束
适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、 玻璃容器及注射器、敷料等耐高温、高压及 不怕潮湿的物品。是目前应用最广泛、灭菌
最佳杀菌波长在265-266nm。用于空气消毒与物品表面的消毒。微生物实验室、无菌 室（紫外线灯），手术室、产房、婴儿室、早产儿室、供应室无菌区、烧伤病房、
重症监护病房、一般病房等（空气消毒机）。
红外线灭菌 红外线灭菌器
应用于接种环、接种针等小型物品的高温灭菌消毒。
微波灭菌
微波杀菌机
常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。
物品的灭菌。
灭菌。
卡式灭菌 器
置换—预热—升 温—灭菌—排汽-干
燥—结束
牙科器械（手机、镊子、牙科钻头等）、眼 科器械、妇科器械（腹腔镜、宫腔镜）、口
腔科等手术医疗器械的灭菌
不适用于纺织品、液体或 生物医疗废弃物的灭菌。
实验室消毒灭菌
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辐射灭菌法
相关设备
应用
紫外线灭菌
紫外线灯，循环风 紫外线空气消毒机
机
液室、生化室、实验室等，以及生物制药、食品生产、公共场所，会议室等。
过氧化氢等离子体 灭菌器
主要应用于临床的医疗材质和几何形状都符合要求的器材。
实验室消毒灭菌
10
空气消毒机
红
外
线
灭
菌
实验室常用灭菌法
精品课件
常用生物指示剂
• 湿热灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子数为5×105～
5×106个/片 )
• 干热灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为5×105～
5×106个/片 )
• 160～170℃× 120min、 170～180℃×
60min、250 ℃× 45min以上
• 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
效均一
• 效果：
繁殖型细菌100℃ /1h可杀灭 耐热细菌: 120℃ 长时间不死亡,140 ℃杀菌率剧增
精品课件
火焰灭菌
置于火焰上直接灼烧 简便、可靠
精品课件
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛：容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
精品课件
湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116
× 40min 或其他可以× 保证灭菌效果的程序 条件。
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
主要技术参数
应用特点
干热灭菌
药典规定 180℃，1h 或 160-170℃， 穿透力弱，温度不易均匀，温度高，不
2-4h
适于大部分药品
湿热 灭菌
热压 灭菌 流通 蒸汽
98kPa(1kg/cm2),15-20min 100℃，30-60min
穿透力强，效果可靠，适用广 不能杀灭细菌芽胞
低温 60-80℃，1h + 室温 24h，重复操作 适于必须加热灭菌而又不耐高温者；时
实验室的灭菌方法
实验室的灭菌方法在实验室中，灭菌是非常重要的一个步骤，可以有效地消除实验过程中可能存在的各类微生物，确保实验结果的准确性和可靠性。
常用的灭菌方法包括物理灭菌和化学灭菌两种。
一、物理灭菌方法：1. 高温灭菌（烘箱法）：将待灭菌的器具（如培养皿、试管等）放入预热至适当温度的烘箱中，通过高温作用杀灭其中的微生物。
常用的温度为160-180摄氏度，时间约为1-2小时。
此方法适用于不耐热的固体物品。
2. 压力蒸汽灭菌（高压灭菌法）：将待灭菌的物品放入装有适量清水的高压灭菌锅中，加热至适当的温度（121-134摄氏度），经过一定时间的高压和高温作用，实现微生物的灭活。
常规操作时间为15-30分钟。
这种方法适用于实验器械、培养基、培养瓶等耐热器具。
3. 过滤法：通过微生物滤膜过滤器将待检测的液体或气体经过过滤，将其中的微生物截留下来，达到灭菌的效果。
该方法适用于不耐高温或无法承受高压的液体、气体样品。
4. 紫外线灭菌法：将待灭菌的物品放置在紫外线照射区域，经过一定时间的紫外线照射，使微生物的核酸发生损伤，从而达到杀灭微生物的目的。
该方法适用于表面较为平坦的培养皿、试管等小型器具。
5. 干热灭菌法：将待灭菌的物品置于常温下的烘箱中，在较高的温度（170-180摄氏度）下进行一定时间的干热处理。
该方法适用于不耐水或无法耐受湿热的物品。
二、化学灭菌方法：1. 乙醛灭菌法：将待灭菌的物品放入密闭的容器中，加入一定浓度的乙醛液并封闭容器，在一定时间内使乙醛蒸气作用于物品表面，达到杀菌的目的。
该方法易于操作，适用于对物品表面较干净的物品。
2. 酒精灭菌法：将待灭菌的物品浸泡在一定浓度的乙醇或异丙醇溶液中一段时间，使其达到杀菌的效果。
该方法适用于小型的器具或实验室台面的表面。
值得注意的是，不同的灭菌方法适用于不同类型的物品，我们在选择灭菌方法时要根据物品的性质、尺寸和特点来进行判断。
同时，灭菌操作过程要遵循一定的操作规范，确保操作的安全性和有效性。
常用消毒与灭菌方法演示文稿
压力
下排气式
敷料
121℃ 30min 102.9kPa
器械
121℃ 20min 102.9kPa
预真空式 器械、敷料
2020/12/12
132～ 134℃
4min 205.8kPa
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小型蒸汽灭菌器
YY 0646-2008（EN13060:2004,NEQ）
• 定义：自动控制型小型蒸汽灭菌器-电 加热产生蒸汽或外接蒸汽的，其灭菌 室容积不超过60L，不能装载一个灭 菌单元（30mm*300mm*600mm）的 灭菌器
15
wDry134 多孔/空腔器械和包裹 134
35
P134
多孔/空腔器械和包裹/ 134
46
推荐灭菌时间的齿类器
械
NoDry121 裸露精密器械
121
35
NoDry121 多孔/空腔器械和包裹和 121
55
精密器械
Slo2w02102/112/12 精密器械裸露器械
121
37
缓慢排气
.... 42 55
煮沸消毒(不是灭菌) 流通蒸汽 巴斯德消毒法 低温蒸汽(73度)消毒法
2020/12/12
6
常用的消毒灭菌方法
• 低温灭菌：环氧乙烷气体灭菌 过氧化氢低温等离子体灭菌 低温甲醛蒸汽灭菌
• 化学消毒剂浸泡灭菌或消毒
2020/12/12
7
压力蒸汽灭菌
• 分类 • 适用范围 • 灭菌程序与应用参数 • 操作使用要点
2020/12/12
13
预排气压力蒸汽灭菌
• 灭菌程序：一般包括3次以上的预真空和充 气等脉动排气、灭菌、后排气和干燥等过 程
• 灭菌参数：温度132℃～134℃， 压力205.8KPa， 灭菌时间4min。
实验室的灭菌方法
实验室的灭菌方法
实验室常用的灭菌方法主要有以下几种：
1. 热灭菌：使用高温蒸汽或高温烘箱进行灭菌，可有效消除常见的细菌、病毒和真菌。
热灭菌常用于灭菌培养皿、培养基、试剂和玻璃器皿等。
2. 化学灭菌：使用化学消毒剂进行灭菌，常见的消毒剂包括酒精、漂白粉、过氧化氢等。
化学灭菌适用于一些敏感材料，如塑料器皿、塑料管道、橡胶塞和一次性注射器等。
3. 紫外线灭菌：利用紫外线的辐射杀死细菌和病毒，常用于空气和表面的灭菌。
然而紫外线灭菌对于有障碍物遮挡或遮蔽的区域效果有限，且需要较长时间的照射。
4. 过滤灭菌：通过微孔滤膜将细菌和病毒过滤掉。
常用的滤膜材料有聚酯、聚碳酸酯、聚醚砜等。
过滤灭菌适用于渗透性好的溶液、生物液和气体。
5. 辐射灭菌：使用离子化辐射、γ射线或X射线进行灭菌。
辐射灭菌适用于灭菌一次性物品、一次性注射器和药品等。
需要根据实验需要和具体材料的特性选择合适的灭菌方法。
同时在进行灭菌操作时，要遵守操作规范和消毒程序，确保灭菌效果和安全性。
实验室里的灭菌法全在这里
03
环氧乙烷灭菌：
04
枯草芽孢杆菌孢子 （ ATC C 9 3 7 2 等 ， 活孢子数为 5×105～5×106 个/片)
05
气态过氧化氢灭菌： 嗜热脂肪芽孢杆菌孢 子（ATCC7953等， 活孢子数为1×106～ 5×106个/片)
06
过滤除菌法：缺陷 假单胞菌 （ ATC C 1 9 1 4 6 等 ）
01
不同种类物品及培养物的消毒灭菌方法
不同种类物品及培养物的消毒灭菌方法
无菌操作室灭菌
培养材料进行培养、观察或更换培养液时，必须从各方面防止任何污染物
进入培养液或容器，所以无菌操作室的灭菌是至关重要的。由于无菌操作 室的污染来源主要是空气中的细菌和真菌孢子，因此长期停用后的无菌操 作室应进行熏蒸灭菌，熏蒸是用高锰酸钾+甲醛[(2mL甲醛+1g高锰酸 钾)/m3]进行无菌室的灭菌。经常使用的无菌操作室，在每次使用前都应进 行地面卫生清洁，并用紫外线灯照射30min，进行空气灭菌。对超净工作 台，每次操作前用紫外灯照射30min，然后用70%～75%酒精擦拭。
感谢聆听
关键参数应在验证确定的范围内：温度、 压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐 照剂量等 灭菌程序定期验证，时效不超过半年。 灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。
04
灭菌保证
灭菌保证
01
灭菌效果与灭菌前产品污染程度及 污染菌特性有关，把握微生物污染
水平及污染菌耐受性，注意各个环
节降低污染程度。
03
适用生物指示剂、化学指示剂等监
1、消毒灭菌方法
演讲人
2021-01-08
1、消毒灭菌方法
目前，常用的消毒灭菌方法多采 用物理方法(如，干热灭菌法、湿 热灭菌法、过滤除菌法、射线杀 菌法等)和化学方法(消毒剂、抗 生素)两大类。
实验室常用灭菌方法
实验室常用灭菌方法标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]实验室常用灭菌方法1.高压蒸汽灭菌为湿热灭菌方法的一种。
是微生物培养中最重要的灭菌方法。
这种灭菌方法是基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。
(PV=nRT)高压蒸汽是最有效的灭菌法，能迅速地达到完全彻底灭菌。
一般在15磅/英寸2压力下（121.6℃），15～30分钟，所有微生物包括芽孢在内都可杀死。
它适用于对一般培养基和玻璃器皿的灭菌。
进行高压蒸汽灭菌的容器是高压蒸汽灭菌锅。
高压蒸汽灭菌锅是一个能耐压又可以密闭的金属锅，有立式与卧式两种。
可以用电热、煤气、蒸汽等。
锅上装有压力表，有的还装有温度计，能及时了解锅内压力及温度。
锅上还设有排气口，其作用是在密闭之前，利用蒸汽将锅内的冷空气排净，另外还装有安全活门，如果压力超过一定限度，活门即可自动打开，放出过多的蒸汽。
2.干热灭菌微生物培养中常用的干热灭菌是指热空气灭菌。
一般在电烘箱中进行。
干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。
这是因为蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固。
一般须在160℃左右保持恒温3～4小时，方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。
3.间歇灭菌各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死。
而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。
间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌的方法是用100℃、30分钟杀死培养基内杂菌的营养体，然后将这种含有芽孢和孢子的培养基在温箱内或室温下放置24小时，使芽孢和孢子萌发成为营养体。
这时再以100℃处理半小时，再放置24小时。
如此连续灭菌3次，即可达到完全灭菌的目的。
间歇灭菌通常在流动蒸汽的灭菌锅中进行，也可用普通铝锅代替。
这种灭菌方法多用于明胶、牛乳等物质的灭菌，这类物质在100℃以上的温度下处理较长时间，会被破坏，而用间歇灭菌法就既起到了杀菌作用，又使被处理的物质免遭破坏。
灭菌技术入门知识PPT课件
适于消毒及不耐高热的物பைடு நூலகம்的灭 菌，但不能保证杀灭芽孢
用于注射器等的灭菌，必要 时加入抑菌剂
低温间歇灭菌法
适于不耐热、热敏 物料的灭菌
3
干热灭菌法
❖ 干热灭菌法:是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌 的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。 —原理：高热使蛋白质凝固变性；水分缺失使微生物原浆电解 质浓缩死亡。 —火焰灭菌法是指用火焰直接烧灼的灭菌方法。该方法灭菌迅 速、可靠、简便，适合于耐火焰材料（如金属、玻璃及瓷器等） 物品与用具的灭菌 —干热空气灭菌法是指用高温干热空气灭菌的方法。该法适用 于耐高温的玻璃和金属制品的灭菌，不适合橡胶、塑料及的灭 菌。 —在干热状态下，由于热穿透力较差，微生物的耐热性较强， 必须长时间受高温的作用才能达到灭菌的目的。因此。干热空 气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌法高。为了保证灭菌效果， 一般规定：135-140℃灭菌3-5h；160-170 ℃灭菌2-4h；180200 ℃灭菌0.5-1h。
—蒸气性质 —灭菌器物的性质和灭菌时间 —温度，压力
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❖ 必须用饱和蒸气
保证灭菌效率 应注意的事项
❖ 必须排尽灭菌柜内的空气
❖ 全部器物的温度达到所要求的温度时开始计时
❖ 灭菌结束后必须先停止加热
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煮沸灭菌法◆流动蒸汽灭菌法◆低温间歇灭菌法
❖ 煮沸灭菌法是指将待灭菌物置于沸水中灭菌的 方法。煮沸时间通常为30-60分钟。。
①对肥皂 碘 高锰酸钾等阴离子表面活性剂 有拮抗作用 ②有吸附作用，会降低药效， 所以溶液内不可投入纱布、棉花等物品。
③对铝制品有破坏作用，故不能用铝制品 盛装
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小知识
❖ 最早使用的消毒药液—漂白粉（Ca(ClO)2 ） ❖ 芽孢—有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，
实验室消毒灭菌PPT课件
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5
三、常用消毒与灭菌ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ法
常用消毒灭菌方法
物理法
化学法
热力消毒法
辐射消毒法 过滤除菌法
湿 热 法
煮高 沸压 法蒸
汽
干 热 法
火干 焰烤 法法
紫 日电电 外 光子离 线 曝灭辐 灯 晒菌射 照 法灯法 射法 法
•区别:
比较项 消毒 灭菌
作用强度 较为温和
强烈
消灭微生物数量 部分微生物 全部微生物
芽孢和孢子能否被消灭 不能 能
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3
二、消毒和灭菌的重要性
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食品、制药 医疗机构 动植物研究 分子生物
4
二、消毒和灭菌的重要性
•消毒和灭菌是保护人员和环境不被病原微生物感染和污染的重要环节。 （1）含有病原微生物的废物必须经过消毒或灭菌才能作为普通废物处理； （2）对操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过消毒达到对病原微生物的
效果做好的物品。
不适合畏高热、畏湿的医 疗器械；不能用于油类、 粉类、石蜡类的灭菌。
脉动真空 灭菌器
准备—脉动-升温灭菌-排气—干燥—
结束
适用于口腔科、眼科、手术室、供应室等医 疗卫生部门，对所有包装的或无包装的实心 器械，A类空腔器械（牙科手机，内窥镜）， 植入性器械，敷料织物，橡胶导管等物品的
不适用液体、膏类物品、 粉类物品、畏高热、畏湿
物品的灭菌。
灭菌。
卡式灭菌 器
置换—预热—升 温—灭菌—排汽-干
燥—结束
牙科器械（手机、镊子、牙科钻头等）、眼 科器械、妇科器械（腹腔镜、宫腔镜）、口
常用物品的消毒灭菌方法ppt课件
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46
术后器械处理
先处置锐利器械，再处理其它器械，处置时 戴好手套；
不要用手直接处置，应借助于其它器械； 重复使用的刀、剪、针分类后应妥善放置在
规定容器内，防止刺伤别人；
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术后器械处理
★ 一次性利器使用后直接投入密闭的利器盒 内，千万不可放入垃圾袋内，更不能与生 活垃圾混放，这是引起护工利器伤的最主 要原因。
• 清洁：定期清洗 • 频率：每1－3个月清洗一次
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水龙头、水池
• 清洁：清水擦拭，保持清洁。 • 消毒：必要时含氯消毒液500mg/L擦拭。 • 注：每天擦拭；有污染时及时消毒处理
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清洁用具（抹布、拖布）
• 清洁：流动水清洗 • 消毒：1.抹布使用后浸泡于250mg/L的
★ 所有使用过的注射器、输液器等金属利器 部分均须放入坚固的利器盒内收集，满至 三分二便更换。
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诊疗操作注意事项
充足的光线 相互协作
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49
拔除静脉输液穿刺针时应注意：
持针右手尽量握穿刺针尾部，也就是针 与玻璃丝接头处近一点，如果太远，在拔 出针尖时， 针尖就会随玻璃丝原来的韧性 卷曲，突然转变方向而刺伤手。
1.开启后无菌物品保存时间不超过24小时 2.最好小包装一次性使用 3.感染性疾病患者使用的布类应集中摆放，
单独清洗消毒。
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电刀、电镜等 消毒与灭菌
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12
皮肤黏膜
• 手术部位 • 清洁：术前沐浴，清洁皮肤 • 消毒：有效碘含量5000mg/L碘伏原液
常见的消毒和灭菌方法ppt课件
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种类主要方法区别联系灼烧灭菌法干热灭菌法高压蒸汽灭菌法巴氏消毒法煮沸消毒法紫外线消毒法化学药物消毒法酒精灯火焰灼烧干热灭菌160170加热12h121维持1530min7080处理1530min100沸水浴56min30w紫外灯照射30min用体积分数为7075的乙醇碘酒涂抹来苏水喷洒等微生物接种工具如接种环接种针或其他金属用具等接种过程中试管口或三角瓶口等玻璃器皿如滴管培养皿等金属用具等凡不适合用其他方法灭菌而又能耐高温的物品培养基及多种器材物品牛奶啤酒果酒和酱油等不宜进行高温灭菌的液体日常食品罐装食品接种室空气用于皮肤伤口动植物组织表面消毒空气手术器械塑料或玻璃器皿等强烈的理化因素杀死生物体内外包括芽孢在内的所有微生物温和的物理化学方法杀死表面微生物营养体或抑制营养体繁都借助理化性质营造微生物难以生存的不良环境其作用实质都是通过使蛋白质变性来抑制微生物生命活动或杀死微生物此课件下载可自行编辑修改供参考
常见的消毒和灭菌方法
内 容
种类
主要方法
区别
灼烧灭菌法
灭 菌 干热灭菌法
酒精灯火焰 灼烧
干热灭菌 160～170℃加
热1～2h
微生物接种工具如接种环、接种 针或其他金属用具等，接种过程 中试管口或三角瓶口等
强烈的理化 因素，杀死
玻璃器皿（如滴管、培养皿等）、 生物体内外 金属用具等凡不适合用其他方法 包括芽孢在
灭菌而又能耐高温的物品
内的所有微
高压蒸汽灭菌法
121℃维持 15～30min
培养基及多种器材、物品
生物
巴氏消毒法 煮沸消毒法
70～80℃处理 15～30min
100℃沸水浴 5～6min
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灭菌容器操作注意
• 使用前认真检查设备的完好性
• 灭菌时须先将灭菌器中冷空气排出，以保
证最佳灭菌效果
• 灭菌时间应从待灭菌物品到达预定温度时
算起
• 灭菌完毕后停止加热，待压力表降至0，放
汽、开启灭菌器，物品温度降至80℃ 以下 时才能将灭菌器门全部开启
最新.
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影响湿热灭菌的因素
• 辐射灭菌：短小芽孢杆菌孢子（ATCC27142等，活孢子数为5×107～
5×108个/片 )
• 气体灭菌：
环氧乙烷灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为 5×105～5×106菌孢子（ATCC7953等，活孢子 数为1×106～5×106个/片 )
不挥发，不易燃
无色醚样臭味气体，沸点 10.8 扩散穿透能力强，属广谱杀菌
环氧乙烷
℃，沸点以下为无色透明液 剂；用于对热敏感的药物等的
体，比重 0.882，溶于水。 灭菌；时间长，费用贵。
苯酚（石炭酸）
3～5%
地面、墙壁喷撒
甲酚皂溶液（来苏尔）
5～100%
• 效果可靠、操作简便 • 应用广泛：容器、培养基、无菌衣、胶塞等 • 包括
– 热压灭菌 – 流通蒸汽灭菌 – 煮沸灭菌 – 低温间歇灭菌
最新.
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湿热灭菌条件
• 121℃× 15min、 121℃× 30min 、116 ×
40min 或其他可以保证灭菌效果的程序条 件。
×
• 过度杀灭法 • 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
• 微生物种类和数量
• 灭菌物品特性
• 蒸汽的性质
饱和蒸汽 热含量高 潜热大 穿透力强
湿饱和蒸汽
低
过热蒸汽
穿透力差
• 灭菌时间等
最新.
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干热灭菌法
• 利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原
的方法。
• 适用范围：耐高温但不宜使热灭菌法灭菌
的物品，如玻璃物品、金属物品、纤维制 品、固体试药、液体石蜡等。
由电子加速器产生
穿透力弱，灭菌效果差
• 不升高温度
• 设备费用高
• 辐射能引起一些药物pH值、含量、活性等改变，
某些制品不宜选用
最新.
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气体灭菌法
• 用化学消毒剂形成的气体杀灭微生物的方
法，常用环氧乙烷、气态过氧化氢、甲醛、 臭氧等。
• 适用于医疗器械、塑料制品等，能吸附环
氧乙烷的物品不宜采用。
低温 60-80℃，1h + 室温 24h，重复操作 适于必须加热灭菌而又不耐高温者；时
间歇
3 次以上
间长，效果不理想；须加抑菌剂
最新.
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化学灭菌法
40%甲醛溶液（福尔马林） 20ml/m3 加热蒸发,6～12h
粘膜强烈刺激
乳酸
1ml/m3 加热蒸发 0.5～1h
无毒
丙二醇
1ml/m3 加热蒸发
• 控制参数：温度、相对湿度、灭菌压力、
灭菌时间等
最新.
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过滤除菌法
• 利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理除
去气体或液体中的微生物。
• 用于热不稳定的药品或原料除菌
• 滤膜材料确定
• 滤膜孔径要求
繁殖型微生物1um，芽孢约0.5um或以下
0.45um可滤去大多数细菌，0.15um可滤 去热原
最新.
最新.
4
灭菌保证
• 灭菌效果与灭菌前产品污染程度及污染菌
特性有关，把握微生物污染水平及污染菌
耐受性，注意各个环节降低污染程度。
• 灭菌冷却阶段防止已灭菌物品再次污染。
• 适用生物指示剂、化学指示剂等监控灭菌
结果
最新.
5
生物指示剂
• 基本要求：
菌种的耐受性应大于需灭菌产品中所有 可能污染菌的耐受性。
最新.
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辐射灭菌法
• 将灭菌物品置于适宜放射源辐射的射线或
适意的电子加速其发生的电子束中进行电 离辐射而达到杀灭微生物的方法。
• 常用60Co-γ射线
• 用于医疗器械、容器、生产辅助用品、不
受辐射破坏的原料药及成品等。
• 参数：辐射剂量
最新.
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辐射灭菌特点
• γ射线
60Co
穿透力强
• β射线
最新.
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干热灭菌条件和效果
• 160～170℃× 120min、 170～180℃×
60min、250 ℃× 45min以上
• 灭菌过程有适当的装载方式，保证灭菌有
效均一
• 效果：
繁殖型细菌100℃ /1h可杀灭
耐热细菌: 120℃ 长时间不死亡,140 ℃ 杀菌率剧增
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火焰灭菌
置于火焰上直接灼烧 简便、可靠
菌种应无致病性。
菌株应稳定，存活期长，易于保存。
易于培养。若使用休眠孢子，孢子含量 在90%以上。
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常用生物指示剂
• 湿热灭菌：嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（ATCC7953等，活孢子数为
5×105～5×106个/片 )
• 干热灭菌：枯草芽孢杆菌孢子（ATCC9372等，活孢子数为5×105～
5×106个/片 )
过滤除菌法：缺陷假单胞菌（ ATCC19146等）
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灭菌方法
• 方法：湿热灭菌法、干热灭菌法、辐射灭
菌法、气体灭菌法、过滤除菌法。
• 根据灭菌物品特性选择一种或几种方法组
合灭菌。只要产品允许，尽可能选用最终 灭菌法。
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湿热灭菌法
• 在高温高压条件下利用沸水、蒸气变性微生物菌
体中的蛋白质、核酸而达到灭菌效果的方法。
灭菌法
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1
灭菌法定义
• 用适当的物理或化学手段将物品中活的微
生物杀灭或除去的方法。适用于制剂、原 料、辅料、医疗器械等的灭菌。
• 灭菌是指将物品中污染的微生物残存概率
下降至一定水平，以无菌保证水平 SAL(Sterility Assurance Level)表示。
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2
灭菌程序验证内容
• 撰写验证方案及制定评估标准。 • 确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确，
并能处于正常运行。
• 确认关键设备控制仪表在规定的参数范围
内能正常运行。
• 采用被灭菌物品或模拟物品进行重复实验
确认灭菌效果符合规定。
• 完善文件记录，撰写验证报告。
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3
灭菌程序运行监控
• 关键参数应在验证确定的范围内：温度、
压力、时间、湿度、灭菌气体浓度、辐照 剂量等
• 灭菌程序定期验证，时效不超过半年。 • 灭菌设备或程序发生变更重新进行验证。
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物理灭菌法
方法
主要技术参数
应用特点
干热灭菌
药典规定 180℃，1h 或 160-170℃， 穿透力弱，温度不易均匀，温度高，不
2-4h
适于大部分药品
湿热 灭菌
热压 灭菌 流通 蒸汽
98kPa(1kg/cm2),15-20min 100℃，30-60min
穿透力强，效果可靠，适用广 不能杀灭细菌芽胞