试验二总糖和还原糖的测定

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3. 分别在每个试管中加入2mL 2%碘化钾溶液和2mL 2 mol/L H2SO4,以洗涤管中的残留物,并转入相应的 三角瓶中,最后再用1mL蒸馏水洗涤试管2次(均使 用移液管);
4. 用0.005 mol/L NaS2O3滴定至碘颜色接近消失时加入 淀粉指示剂5滴,继续滴定至蓝色消失为止(??)。
反应方程式:
2NaOH + CuSO4=Cu(OH)2↓+ Na2SO4
COOK
COOK
Cu(OH)2 + H―C―OH = H―C―O H―C―OH H―C―O
Cu + 2 H2O
COONa
COONa
酒石酸钾钠 可溶性的氧化铜络合物(蓝色)
COOK
CHO
2
H― C ―O Cu +(CHOH)4+ 2 H2O = 2
五、计算:
0.5(mg/ml)
X=
V空 -V标
×(V空-V待测)
X = ( x1 + x2 ) / 2
六、注意事项!!!
1. 各试管的处理应一致,测定溶液应同时放入沸 水中,再同时从沸水浴中取出。
2. 在用碘化钾和硫酸洗涤试管时要洗净,否则会 影响滴定结果的准确性(未洗净会使结果?)。
3. 滴定终点时溶液呈现二价铜离子的浅蓝色,切 勿将它与近终点的碘蓝色混淆(如何区别?)。
4. 用相应的移液管量取溶液,勿用量筒。
七、 思考题
1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定?两 种滴定方法各有何优点?
2、提前终止滴定会出现哪种误差? 3、分析X1与X2存在差异的原因?若差异较大说明什么?
2-ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
S4O6 + 2
因此,用硫代硫酸钠滴定剩余的碘,在有已知浓度
的标准还原糖浓度时,可以间接地计算出未知样品的还
原糖的含量。
碱性铜试剂:硫酸铜 + 草酸钾 Fehling试剂:硫酸铜 + 酒石酸钾钠 Benedict试剂:硫酸铜 + 柠檬酸钠
上述试剂同属于碱性铜试剂作用原理 相同!
三、试剂与器材
1. 样品:标准葡萄糖溶液、待测糖溶液 2. 试剂:(1)碱性铜试剂;
(2)0.005 mol/L硫代硫酸钠溶液; (3)2%碘化钾溶液; (4)0.5 mg/mL标准葡萄糖溶液; (5)1%淀粉指示剂。 3. 器材:滴定管、恒温水浴锅
四、操作步骤
1. 取6只试管,按照下表的次序加入试剂。另取6 个小三角烧瓶,按相应的试管顺序编号。
还原糖测定中的滴定方法有多种,本实验采用硫代硫酸 钠间接滴定法。
H 葡萄糖分子(链式)
半缩醛羟 基
葡萄糖分子(环式)
硫代硫酸钠间接滴定法原理:在碱性溶液中, 二价铜离子被还原糖还原成一价的砖红色氧化亚 铜(Cu2O)沉淀,氧化亚铜在酸性环境中与定量的 过量碘起反应(氧化)成二价铜(蓝色),再用 标准硫代硫酸钠滴定剩余的碘,即可算出还原糖 的含量。
一、目的:
理解还原糖的基本特征,掌握碱性铜试剂法测定还原糖的 原理和操作方法
二、要求(OTO):
理解定量实验的关键要素,训练“观察→思考→操作”科 学思维!贯穿始终!
三、原理
单糖以及含有游离醛基或酮基的寡糖,具有还原性,属
于还原糖类;多糖和蔗糖等属于非还原性糖。利用多糖能被 酸水解为单糖的性质,可通过测定水解后的单糖含量对总糖 进行测定。
H―C ―O
COONa
CH2OH
葡萄糖
COOK
COOH
H― C ―OH +( CHOH)4 + Cu2O↓ H―C―OH
CH2OH COONa
酒石酸甲钠 葡萄糖酸
+ IO3¯ + 5 I¯ + 6 H
3 I2 + 3 H2O
Cu2O + I2 + H +
2+
Cu + I -+ H2 O
2-
I2(剩余的) + 2(Na+ +S2O3) I-
试剂 H2O 标准葡萄糖 待测溶液 铜试剂 沸
管号
(mL) (mL) (mL) (mL) 水
空白 1 2
4


22
4

标准 1 1
1
4

溶液管 2 1
1
待测 1
溶液管 2
4

2
4
15 分
2
4

(注:用移液管量取溶液,禁用量筒!)
2. 各试管冷却后,摇动试管,使试管底部的红色沉淀分 散后倾入相应的三角瓶中;
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