红米原花青素的测定方法
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红米原花青素的提取及测定方法
1、标准曲线的配置
标准溶液的配制,用甲醇配制原花青素母液2mg/mL
标准液配制:
母液:2ml 3ml 4ml 5ml 6ml 7ml 8ml
甲醇:8ml 7ml 6ml 5ml 4ml 3ml 2ml
2、试剂
试剂a:10g/L香草醛甲醇溶液,10g香草醛溶于1L甲醇溶液
试剂b:245ml浓硫酸(18.4mol/L)溶于500ml甲醇溶液,并用甲醇定容直1L。
3、提取方法
将红米磨粉后称0.5g,放入15ml试管中,加入8ml的80%甲醇溶液,至于黑暗的地方,每隔2h左右振荡一次,一直浸泡提取8小时。
4、测定方法
吸取1ml提取液或标准液,加入10ml离心管中,然后依次加入2.5ml试剂a和2.5ml试剂b,混匀后35℃下水浴20min,水浴结束后
8000rm离心10min,用移液器取上清液测定其在500nm下的吸光值。
5、参考文献:
1、Sun B, Ricardo-da-Silva JM, Spranger I Critical Factors of Vanillin Assay for Catechins and Proanthocyanidins. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1998, 46: 4267-4274
2、Gunaratne A, Wu K, Li D, et al. Antioxidant activity and nutritional quality of traditional red-grained rice varieties containing proanthocyanidins. Food Chemistry, 2013, 138: 1153-1161