量子点免疫层析检测技术

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211087547_量子点标记免疫层析试纸条检测谷物中T-2_毒素

211087547_量子点标记免疫层析试纸条检测谷物中T-2_毒素

分析检测量子点标记免疫层析试纸条检测谷物中T-2毒素张 滢,彭 涛,苗 茜,刘笑笑,丁 辉(兰州市食品药品检验检测研究院,甘肃兰州 730050)摘 要:利用量子点(QDs)标记T-2抗体(QDs-Ab)作为信号探针,建立了一种量子点免疫层析检测方法(QDICA),用于快速检测谷物中的T-2毒素。

结果表明,QDICA的检测限为5 μg·L-1。

整体检测时间不超过10 min,方法特异性良好且具有一定的有效性。

T-2-QDICA操作简便快速,成本低,满足谷物中T-2残留量的快速检测要求。

关键词:T-2毒素;量子点;免疫层析试纸条;谷物;快速检测Detection of T-2 Toxin in Cereals with Quantum Dot Labeled Immunochromatographic Test StripZHANG Ying, PENG Tao, MIAO Qian, LIU Xiaoxiao, DING Hui(Lanzhou Institute for Food and Drug Control, Lanzhou 730050, China)Abstract: A quantum dot immunochromatographic assays (QDICA) using quantum dot labeled T-2 antibody (QDs-Ab) as signal probe were developed for the determination of T-2 in cereals. The limit of detection for T-2 was 5 μg·L-1. The detection time was 10 min. The assays have good specificity and effectiveness. The QDICA is simple, fast, and low cost, it is suit for rapid detection of T-2 in cereals.Keywords: T-2 toxin; quantum dot; immunochromatography test strip; cereal; rapid detection单端孢霉烯族毒素是一大类化学结构相关的真菌毒素,根据其特征官能团的不同可分为A、B、C、D 4种类型。

一种基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术初步研究

一种基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术初步研究

一种基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术初步研究免疫层析技术作为一种广泛应用于生物医学领域的检测方法,已经取得了显著的成就。

然而,传统的免疫层析技术在灵敏度方面仍然存在一定的局限性。

为了克服这些限制并实现更高的灵敏度,我们进行了一种基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术的初步研究。

量子点荧光微球是一种具有优异荧光性能的纳米材料,具有独特的荧光特性,如窄的发射光谱带宽、高荧光量子产率和较长的寿命。

这些特性使得量子点荧光微球成为理想的标记物质,并被广泛应用于生物医学领域。

在我们的研究中,我们首先制备了一种包含抗原的量子点荧光微球。

这种量子点荧光微球具有一定的大小和形状,并且表面含有高亲和力的功能基团,可以与特定的抗体结合。

然后,我们将这些量子点荧光微球与待测样品中的特定抗体结合,在免疫层析过程中实现对抗原的检测。

为了提高灵敏度,我们采用了一种增强荧光信号的方法。

具体来说,我们使用了一种可调控的荧光增强剂,该增强剂能够与量子点荧光微球表面的功能化基团相互作用,并增强其荧光信号。

通过调节荧光增强剂的浓度和反应时间,我们能够实现对荧光信号的调节,从而进一步提高灵敏度。

实验证明,我们所提出的基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术具有显著的优势。

首先,由于量子点荧光微球的优异荧光性能,我们能够在低浓度的抗原下实现灵敏度高达纳克级的检测。

其次,我们通过调控荧光增强剂的方法进一步提高了灵敏度,使其达到亚纳克级。

最后,我们的方法还具有快速、简便、经济的特点,适用于大规模的样品检测和高通量的分析。

总之,基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术在生物医学领域具有巨大的潜力。

通过充分利用量子点荧光微球的荧光性能和荧光增强剂的作用,我们能够实现对低浓度抗原的高灵敏度检测,为生物医学研究和临床诊断提供了新的工具和方法。

量子点免疫荧光层析法

量子点免疫荧光层析法

量子点免疫荧光层析法
量子点免疫荧光层析法是一种新型的生物检测技术,它结合了量子点的优异光学特性和免疫荧光的特异性,实现了对生物样品的快速、灵敏和特异性检测。

在量子点免疫荧光层析法中,首先将待测目标分子(如蛋白质、核酸等)与特异性抗体结合,形成抗原抗体复合物。

然后将该复合物与量子点荧光探针结合,形成具有荧光特性的标记物。

当标记物与层析试纸上的固定抗原结合时,会形成抗原抗体复合物的固定化,并通过层析分离技术实现抗原抗体复合物的富集。

最后,通过荧光检测设备对层析试纸进行荧光扫描,实现对目标分子的定量和定性分析。

与传统的生物检测技术相比,量子点免疫荧光层析法具有许多优点。

首先,量子点具有优异的光学性能,如高亮度、长荧光寿命和可调谐发射光谱等,这使得该方法具有高灵敏度和宽检测范围。

其次,该方法具有高特异性,通过抗原抗体反应实现目标分子的捕获和标记,避免了非特异性干扰。

此外,该方法还具有快速、简便和低成本等优点,适用于临床诊断、环境监测和食品安全等领域。

总之,量子点免疫荧光层析法是一种具有广泛应用前景的新型生物检测技术。

随着量子点材料和制备技术的不断发展,该方法有望在未来的生物医学领域发挥更加重要的作用。

量子点免疫层析检测技术

量子点免疫层析检测技术

量子点免疫层析检测技术方兴未艾免疫层析技术是一种快速、简便、灵敏、直观、价格低廉、可真正实现现场检测的检测方法。

具有很多气相色谱、高效液相色谱、气质联用色谱、液质联用色谱、毛细管电泳等仪器检测方法以及其他传统方法无法企及的优点。

在检测领域中处于特殊重要的地位,同时也是传统检测和仪器检测的良好补充。

尤其在经济高速发展,生活水平提高的今天,人类重大疾病,环境污染,食品安全等问题日益受到极大的关注,让免疫层析检测技术更具有巨大的潜力和蓬勃的生命力。

目前,免疫层析产品主要为胶体金免疫层析试纸条,其最早应用于医学检验,在早孕检测中的应用取得了极大的成功,随后在各个领域迅速渗透漫延,其在毒品检测、环境检测、以及食品安全检测领域得到了迅速的发展,但是又出现新的问题,在很多方面,尤其是食品安全检测领域,有些农兽药残留限度极度苛刻,甚至要求0.1ng/ml的检测限度,同时食品类物质如肉类、禽类、果蔬、谷物等成分复杂,前处理难度也很大,造成胶体金免疫层析检测灵敏度无法胜任。

除了进一步提高前处理方法以外,寻求高灵敏度的免疫层析方法也显得尤为重要。

量子点是近20年来发展起来的半导体纳米晶材料,因为它的优良特性,受到了很大的关注,并且已经显示出一定的潜力,近几年来从细胞标记等应用已逐渐开始向多个领域的检测与诊断方向渗透。

一、量子点特性量子点(简称QDs,又称半导体纳米粒子)是由II〜切族或III〜V族元素组成的,半径小于或接近于激光玻尔半径,能够接受激发光产生荧光的一类半导体纳米颗粒,其中研究较多的主要是CdX(x=S、Se、Te),直径约为2nm-6nm。

量子点由于存在显著的量子尺寸效应和表面效应,从而使它具有常规材料所不具备的光吸收特性,使其应用领域越来越广泛,特别是其在免疫生物学和临床检验学等研究中的潜在的应用价值,已引起了广大科学工作者的极大关注,发光量子点作为荧光试剂探针标记生物大分子,正是近年来迅速发展的纳米材料在生物分析领域的重要应用之一。

量子点荧光免疫层析技术

量子点荧光免疫层析技术

量子点荧光免疫层析技术量子点荧光免疫层析技术(QD-FLISA)是一种快速、灵敏、特异性高的生物分析技术。

该技术利用量子点荧光材料的独特性质,在生物分析和生物医学成像领域有着广泛的应用。

量子点是一种纳米材料,其大小在1到10纳米之间,表面活性高,具有优异的光学和电学性能。

量子点荧光材料的特性是它们在受到光激发时可以发出强烈的荧光信号,并且荧光颜色可以根据粒子大小和化学成分的不同而改变。

因此,通过选择合适的量子点,可以实现对不同荧光信号的识别和分析。

QD-FLISA技术将量子点荧光材料与传统的酶标免疫层析技术相结合,在生物分析领域有着广泛的应用。

其基本原理是将含有荧光免疫物的混合物加到含有固定免疫物的微孔板中,使免疫物与免疫物配体结合。

然后,加入荧光检测物,使其与免疫物结合并形成荧光免疫复合物。

最后,用激光或其他光源对免疫复合物进行激发,测量荧光信号,并以此来分析免疫反应的结果。

与传统酶标免疫层析技术相比,QD-FLISA技术有着以下几个优点:首先,QD-FLISA技术具有更高的灵敏度。

由于量子点荧光材料的荧光强度比传统荧光物质更强,因此可以检测到更低浓度的免疫物。

其次,QD-FLISA技术具有更高的特异性。

由于不同大小和形状的量子点荧光材料可以被选择性地与免疫物结合,因此可以排除其他非特异反应的影响,从而提高了特异性。

第三,QD-FLISA技术具有更高的多重检测能力。

量子点荧光材料的荧光颜色可以根据粒子大小和化学成分的不同而改变,因此可以同时检测多个免疫物。

最后,QD-FLISA技术具有更短的检测时间。

由于量子点荧光材料的光激发和荧光衰减速率都比荧光标记的免疫物更快,因此可以更快地完成免疫反应和荧光信号检测。

总之,QD-FLISA技术作为一种新兴的生物分析技术,在生物医学领域具有广泛的应用前景。

随着科技的发展,相信该技术将不断完善和发展,为生物分析和生物医学研究带来更多的可能性。

一种基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术初步研究

一种基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术初步研究

一种基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术初步研究量子点荧光微球是一种通过将量子点包裹在微米级荧光微球中制备而成的荧光标记物。

它具有较窄的发射光谱、长寿命和较高的荧光量子产率等特点,因此被广泛应用于生物标记、生物成像和免疫层析等领域。

本文将重点介绍基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术的初步研究。

免疫层析是一种常用的生物分析技术,通过抗体特异性结合靶分子来实现分离和检测。

然而,传统的荧光标记物往往具有较宽的发射光谱和较短的寿命,这会导致在分析过程中的背景荧光干扰和信号衰减。

而量子点荧光微球不仅具有较窄的发射光谱和长寿命,还可以通过选择适当的量子点材料和合适的荧光染料来调节其荧光信号强度,从而提高免疫层析的灵敏度。

量子点荧光微球的制备主要包括两个步骤:首先,制备荧光标记的量子点;然后,将量子点包裹在微米级的聚合物微球中。

通常,选择合适的量子点材料,如CdSe、CdTe等,通过溶液法或热分解法制备荧光量子点。

然后,将荧光量子点与聚合物前驱体混合,并通过乳化、自组装等方法制备荧光微球。

最后,通过离心、洗涤等处理,得到理想的量子点荧光微球。

在免疫层析中,将量子点荧光微球标记于抗体,并与待测样品中的目标分子发生特异性结合。

通过将所得的混合物加入免疫层析柱,离心分离后,所得的荧光微球可通过荧光信号的检测来定量待测样品中的目标分子浓度。

由于量子点荧光微球具有较高的荧光量子产率和长寿命,在检测过程中可获得更高的信号强度和更低的背景荧光干扰,从而提高免疫层析的灵敏度。

值得注意的是,量子点荧光微球的制备和应用还面临一些挑战。

首先,合成荧光量子点需要一定的化学合成技术,操作相对复杂。

其次,在标记抗体时,需要选择合适的偶联剂来连接量子点和抗体,并确保稳定性和抗体活性。

此外,量子点荧光微球还需要进一步研究其在复杂生物样品中的稳定性和特异性。

综上所述,基于量子点荧光微球的高灵敏度免疫层析技术具有广阔的应用前景。

通过制备具有较窄发射光谱和长寿命的量子点荧光微球,可以提高免疫层析的灵敏度和准确性。

量子点荧光免疫层析技术

量子点荧光免疫层析技术

量子点荧光免疫层析技术
量子点荧光免疫层析技术是一种新型的生物分析技术,它结合了量子点荧光技术和免疫层析技术的优点,具有高灵敏度、高特异性、高稳定性等优点,被广泛应用于生物医学领域。

量子点荧光免疫层析技术的原理是利用量子点的荧光性质和免疫层析技术的特点,将待检测的生物分子与特异性抗体结合,形成免疫复合物,然后通过量子点的荧光信号进行检测。

量子点荧光免疫层析技术具有高灵敏度和高特异性的优点,可以检测非常低浓度的生物分子,如蛋白质、核酸等。

量子点荧光免疫层析技术的应用非常广泛,可以用于生物医学领域的疾病诊断、药物筛选、生物分子检测等方面。

例如,在肿瘤标志物的检测中,量子点荧光免疫层析技术可以检测非常低浓度的肿瘤标志物,从而提高了肿瘤的早期诊断率。

在药物筛选中,量子点荧光免疫层析技术可以快速、准确地筛选出具有特定生物活性的化合物,从而加速了新药的研发过程。

量子点荧光免疫层析技术是一种非常有前景的生物分析技术,具有高灵敏度、高特异性、高稳定性等优点,可以广泛应用于生物医学领域,为疾病诊断、药物研发等方面提供了有力的支持。

量子点荧光免疫层析技术介绍

量子点荧光免疫层析技术介绍

量子点荧光免疫层析技术介绍量子点荧光免疫层析技术介绍引言:量子点荧光免疫层析技术是一种新型的生物传感技术,结合了量子点荧光标记的高灵敏度和传统免疫层析分离方法的高特异性。

本文将介绍量子点荧光免疫层析技术的原理、应用以及未来的发展前景。

一、量子点荧光免疫层析技术的原理1.1 量子点荧光标记的特点量子点是一种纳米级别的半导体颗粒,具有尺寸可调、荧光强度高、光稳定性好等特点。

通过控制量子点的尺寸和表面修饰,可以实现对不同波长的荧光发射,从而实现多色荧光标记。

1.2 量子点荧光免疫层析的步骤量子点荧光免疫层析技术主要包括样品准备、孔洞过滤、特异性结合、洗涤和荧光检测等步骤。

通过将荧光标记的特异性抗体与待检样品中的目标分子结合,然后经过孔洞过滤和洗涤步骤,最后使用荧光检测设备进行信号读取和分析。

二、量子点荧光免疫层析技术的应用2.1 生物传感器量子点荧光免疫层析技术可以用于构建高灵敏度和高特异性的生物传感器,用于检测生物标志物或疾病相关分子。

例如,可以利用量子点荧光标记的抗体来检测癌症标志物,实现早期癌症的诊断。

2.2 环境监测量子点荧光免疫层析技术还可应用于环境监测领域。

通过标记特定的环境污染物抗体,可以实现对污染物的快速检测和监测。

这对于环境保护和生态修复具有重要意义。

2.3 药物研发量子点荧光免疫层析技术可以用于高通量筛选药物候选化合物。

结合机器学习和数据挖掘的方法,可以实现对大量化合物的快速检测和评价,加速药物研发的进程。

三、量子点荧光免疫层析技术的发展前景3.1 提高灵敏度和特异性未来量子点荧光免疫层析技术的发展将致力于进一步提高灵敏度和特异性。

通过改进量子点的合成方法和表面修饰技术,可以提高荧光信号的强度和稳定性,从而提高检测的灵敏度。

3.2 多维信息获取除了荧光信号的检测,未来的量子点荧光免疫层析技术还将开发多维信息获取的方法。

通过同时检测多个参数,例如时间、空间和光谱等信息,可以获得更全面和准确的检测结果。

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》一、引言布鲁氏菌病(Brucellosis)是一种全球性的重大动物和人兽共患病,严重影响人类和动物健康。

随着疾病的不断蔓延和危害性的日益显现,布鲁氏菌病的检测和诊断技术也得到了广泛的研究和开发。

近年来,量子点免疫层析技术作为一种新兴的生物检测技术,以其高灵敏度、高特异性、快速简便等优点,在医学诊断领域得到了广泛的应用。

本文旨在研究基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的方法,为布鲁氏菌病的早期诊断和治疗提供技术支持。

二、材料与方法1. 材料实验所需材料包括布鲁氏菌抗原、抗体样本、量子点标记的抗体等。

所有试剂均经过严格的质量控制,以保证实验结果的准确性。

2. 方法本研究采用量子点免疫层析技术,结合酶联免疫吸附试验(ELISA)进行实验。

具体步骤如下:(1)制备抗原和抗体反应液,分别与样本中的布鲁氏菌抗体进行反应。

(2)在免疫层析技术中,将反应液与层析膜上的抗原进行结合,形成抗原-抗体复合物。

(3)利用量子点的荧光特性,对形成的抗原-抗体复合物进行检测和定量分析。

(4)通过对比标准曲线,得出样本中布鲁氏菌抗体的浓度。

三、实验结果1. 检测灵敏度通过实验发现,基于量子点免疫层析技术的布鲁氏菌病抗体检测方法具有较高的灵敏度,能够检测出较低浓度的抗体样本。

与传统的ELISA方法相比,该方法具有更高的检测精度和准确性。

2. 特异性分析实验结果表明,该方法具有较高的特异性,能够准确区分布鲁氏菌抗体和其他病原体的抗体。

在复杂的生物样本中,该方法能够有效地识别和检测布鲁氏菌抗体。

3. 实验时间与成本分析与传统的ELISA方法相比,基于量子点免疫层析技术的布鲁氏菌病抗体检测方法具有更快的检测速度和更低的成本。

该方法可以在短时间内完成样本的检测和分析,提高了工作效率和成本效益。

四、讨论与展望本研究采用基于量子点免疫层析技术的布鲁氏菌病抗体检测方法,具有高灵敏度、高特异性、快速简便等优点。

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》篇一一、引言布鲁氏菌病(Brucellosis)是一种由布鲁氏菌(Brucella)引起的全球性人畜共患疾病,其传播途径广泛,对人类健康和畜牧业发展构成严重威胁。

因此,快速、准确、简便的检测布鲁氏菌病抗体对于疾病的早期诊断、预防和控制具有重要意义。

近年来,随着纳米技术的快速发展,基于量子点的免疫层析技术因其高灵敏度、高特异性及可视化检测等优点,在生物医学领域得到了广泛应用。

本研究旨在探讨基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的效果及其应用价值。

二、材料与方法1. 材料本研究所用材料包括:布鲁氏菌抗原、量子点标记的抗体、层析膜、滴管等。

其中,量子点标记的抗体是本研究的关键试剂,其制备过程需严格遵循实验室规范。

2. 方法本研究采用免疫层析技术,结合量子点标记的抗体,建立快速检测布鲁氏菌病抗体的方法。

具体步骤包括:将布鲁氏菌抗原固定于层析膜上,利用量子点标记的抗体与待测样本中的布鲁氏菌抗体进行特异性结合,通过观察层析膜上的颜色变化判断抗体阳性或阴性。

三、实验结果1. 灵敏度与特异性分析通过与标准检测方法对比,本研究所建立的基于量子点免疫层析技术检测布鲁氏菌病抗体的方法具有较高的灵敏度和特异性。

在低浓度抗体样本的检测中,该方法仍能保持较高的准确性。

2. 检测时间与成本分析与传统的血清学检测方法相比,本研究所建立的量子点免疫层析技术具有更快的检测速度和更低的成本。

该方法可在短时间内完成大量样本的检测,为临床诊断和疫情控制提供有力支持。

3. 实际应用效果评估在实际应用中,本研究所建立的量子点免疫层析技术能快速、准确地检测出布鲁氏菌病抗体,为早期诊断和治疗提供了有力支持。

同时,该方法在畜牧业的疾病监测和预防中也具有重要应用价值。

四、讨论本研究成功建立了基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的方法,具有较高的灵敏度、特异性和准确性。

该方法可快速完成大量样本的检测,为临床诊断和疫情控制提供了有力支持。

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》范文

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》范文

《基于量子点免疫层析技术快速检测布鲁氏菌病抗体的研究》篇一一、引言布鲁氏菌病(Brucellosis)是一种由布鲁氏菌(Brucella)引起的全球性人畜共患疾病,其传播途径广泛,对人类健康和畜牧业发展构成严重威胁。

因此,快速、准确、简便的检测布鲁氏菌病抗体成为防控该疾病的关键手段。

近年来,随着科技的发展,基于量子点免疫层析技术的检测方法因其高灵敏度、高特异性和简便快捷的优点备受关注。

本研究采用此种技术,针对布鲁氏菌病抗体进行快速检测,为布鲁氏菌病的早期诊断和治疗提供科学依据。

二、材料与方法1. 材料本研究所用材料包括量子点标记的布鲁氏菌抗原、层析试纸、样本缓冲液等。

所有材料均经过严格筛选和质量控制,确保实验结果的准确性。

2. 方法(1)量子点免疫层析技术原理:利用量子点的荧光特性,结合抗原抗体反应原理,通过层析试纸实现样品的快速分离和检测。

(2)实验步骤:a. 制备量子点标记的布鲁氏菌抗原;b. 制备层析试纸,将标记好的抗原固定在试纸上;c. 采集待测样本,如患者血清或动物血清;d. 在层析试纸上滴加样本,通过毛细管作用使样本在试纸上移动;e. 通过量子点的荧光信号强度判断样本中布鲁氏菌抗体的存在及浓度。

三、实验结果与分析1. 实验结果本实验通过量子点免疫层析技术对不同浓度布鲁氏菌抗体进行检测,结果显示,该技术可准确检测出低至纳克级别的布鲁氏菌抗体。

同时,与传统的检测方法相比,该技术具有更高的灵敏度和特异性。

此外,该技术还具有操作简便、快速等优点。

2. 结果分析(1)灵敏度分析:本实验结果表明,基于量子点免疫层析技术的布鲁氏菌抗体检测方法具有较高的灵敏度,能够准确检测出低浓度的布鲁氏菌抗体。

这为早期诊断和治疗提供了可能。

(2)特异性分析:本技术利用抗原抗体反应原理进行检测,具有较高的特异性。

在实验过程中,该方法对其他病原体产生的交叉反应较小,有利于准确判断布鲁氏菌病抗体。

(3)操作简便性分析:与传统的检测方法相比,基于量子点免疫层析技术的检测方法无需复杂的操作步骤和设备,可在短时间内完成样品的检测和分析。

量子点标记免疫层析技术检测血液中的降钙素原

量子点标记免疫层析技术检测血液中的降钙素原

量子点标记免疫层析技术检测血液中的降钙素原余皓;徐良;漆晓萍【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2014(42)11【摘要】为了快速定量检测血液中降钙素原( Procalcitonin,PCT)含量,首先制备CdSe/ZnS量子点,再将量子点标记抗抗钙素单抗,标记单抗后量子点荧光发射峰从620 nm红移至625 nm,峰形保持良好。

以制作的量子点标记免疫层析试纸条及其相应荧光测定系统。

因减少单抗用量可降低试纸条成本,本研究采用结合垫上喷涂适量量子点,标记单抗并仅有检测线的结构。

通过检测信噪比,优化此试纸条的参数。

本研究的量子点荧光标记试纸条及其配套测定系统可在20 min内快速检测PCT,定量检测线性范围0.2~100μg/L,灵敏度达到0.1μg/L。

22份血液样本检测结果与目前商品设备检测结果的Pearson相关系数为0.9995,K-S检验的Sig为1.0,说明两种检测方法的一致性。

快速定量检测PCT具有定量测量细菌性感染、临床指导抗生素合理应用的重要意义。

%CdSe/ZnSquantumdots(QDs)werepreparedandcovalentlylinkedtoanti -katacalcinmonoclonal antibodies. After modification, the QDs' maximum emission wavelength was shifted to 625 nm from 620 nm while maintaining the spectral properties. Then the QDs labeled lateral flow strip and corresponding fluorescence measuring instrument were designed and fabricated. To reduce the cost of strip by reducing the amounts of monoclonal antibodies, appropriate amounts of QDs labeled monoclonal antibodies were sprayed on the conjugation pad, with just one test line onthe strip but without the control line. Parameters of the strip were optimized by measuring the signal to noise ratio. By using the strip and fluorescence measuring instrument, procalcitonin (PCT) could be detected in 20 min, and the quantitative detection range was 0. 2-100 μg/L with sensitivity of 0. 1 μg/L. A total of 22 blood samples were measured by both our method and the commercial instrument used in the hoptital. The results were consistent for their Pearson correlation coefficient (0. 9995) and Kolmogorov-Smirnov test (Sig=1. 0). The rapid quantitative detection method for PCT is of great importance to quantitative detection of bacterial infection and rational usage of antibiotics clinically.【总页数】6页(P1592-1597)【作者】余皓;徐良;漆晓萍【作者单位】深圳职业技术学院,医疗电子专业,深圳518055;深圳市药品检验所,深圳518057;深圳市南山区人民医院,深圳518052【正文语种】中文【相关文献】1.量子点标记免疫层析技术检测布鲁氏菌病的方法研究 [J], 李广强;王升启;荣振;王素华;姜海2.量子点标记技术在降钙素原检测中的应用 [J], 蔡甜;陈振华;牛英波;唐波3.纳米标记免疫层析技术在食品快速检测中的应用进展 [J], 李慧琴;易云婷;彭程4.基于量子点标记的降钙素原快速、高灵敏荧光免疫层析检测方法的建立及应用[J], 廖德权5.荧光标记免疫层析技术在食品安全检测中的应用研究 [J], 刘建龙因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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量子点免疫层析检测技术方兴未艾免疫层析技术是一种快速、简便、灵敏、直观、价格低廉、可真正实现现场检测的检测方法。

具有很多气相色谱、高效液相色谱、气质联用色谱、液质联用色谱、毛细管电泳等仪器检测方法以及其他传统方法无法企及的优点。

在检测领域中处于特殊重要的地位,同时也是传统检测和仪器检测的良好补充。

尤其在经济高速发展,生活水平提高的今天,人类重大疾病,环境污染,食品安全等问题日益受到极大的关注,让免疫层析检测技术更具有巨大的潜力和蓬勃的生命力。

目前,免疫层析产品主要为胶体金免疫层析试纸条,其最早应用于医学检验,在早孕检测中的应用取得了极大的成功,随后在各个领域迅速渗透漫延,其在毒品检测、环境检测、以及食品安全检测领域得到了迅速的发展,但是又出现新的问题,在很多方面,尤其是食品安全检测领域,有些农兽药残留限度极度苛刻,甚至要求0.1 ng/ml的检测限度,同时食品类物质如肉类、禽类、果蔬、谷物等成分复杂,前处理难度也很大,造成胶体金免疫层析检测灵敏度无法胜任。

除了进一步提高前处理方法以外,寻求高灵敏度的免疫层析方法也显得尤为重要。

量子点是近20 年来发展起来的半导体纳米晶材料,因为它的优良特性,受到了很大的关注,并且已经显示出一定的潜力,近几年来从细胞标记等应用已逐渐开始向多个领域的检测与诊断方向渗透。

一、量子点特性量子点(简称QDs,又称半导体纳米粒子)是由Ⅱ~Ⅵ族或Ⅲ~V族元素组成的,半径小于或接近于激光玻尔半径,能够接受激发光产生荧光的一类半导体纳米颗粒,其中研究较多的主要是CdX(x=S、Se、Te),直径约为2nm-6nm。

量子点由于存在显著的量子尺寸效应和表面效应,从而使它具有常规材料所不具备的光吸收特性,使其应用领域越来越广泛,特别是其在免疫生物学和临床检验学等研究中的潜在的应用价值,已引起了广大科学工作者的极大关注,发光量子点作为荧光试剂探针标记生物大分子,正是近年来迅速发展的纳米材料在生物分析领域的重要应用之一。

与普通的荧光染料相比较,量子点具有以下特点:(1) 有机染料荧光分子激光谱带较窄,每一种荧光分子必须用合适能量的光来激发,而且产生的荧光峰较宽,不对称,有些拖尾。

这给区分不同的探针分子带来困难,很难利用有机染料分子同时检测多种组分。

量子点由于量子限域效应使其激发波长的范围很宽,可以被波长短于发射光的光(一般短10nm以上)激发,并产生窄(半波宽约13nm)而对称的发射光谱,从而避免了相邻探测通道的串扰。

(2) 量子点具有“调色”功能,不同粒径大小的量子点具有不同的颜色,激发量子点的激发波长范围很宽,且连续分布,所以可以用同一波长的光激发不同大小的量子点而获得多种颜色标记,是一类理想的荧光探针。

(3)量子点的荧光强度强,稳定性好,抗漂白能力强,Chan和Nie通过实验证明ZnS包覆的CdSe比罗丹明6G分子要亮20倍和稳定100-200倍,可以经受多次激发,且标记后对生物大分子的生理活性影响很小,因此为研究生物大分子之间的长期作用提供了可能。

(4)生物相容性好,尤其是经过各种化学修饰之后,可以进行特异性连接,细胞毒性低,对生物体危害小,可进行生物活体标记和检测,而传统的有机荧光染料一般毒性较大,生物相容性差。

(5)荧光寿命长,典型的有机荧光染料的荧光寿命仅为几纳秒(ns),这与很多样本的自发荧光衰减的时间相当。

而量子点的荧光寿命可持续长达数十纳秒(20ns-50ns),这使得当光激发数纳秒以后,大多数的自发荧光背景已经衰减,而量子点荧光仍然存在,此时即可获得无背景干扰的荧光信号。

图1. 量子点二、量子点的合成方法目前合成量子点的方法主要有两种,一种是在有机体系中合成,即用金属有机化合物在具有较强配位能力的有机溶剂中制备;另一种是在水溶液中直接合成。

1.有机相合成法量子点最早采用胶体化学方法在有机体系中制备的方法,将金属和有机化合物混合在有配位性质的有机溶剂中,在一定的温度条件下就能生长出纳米晶体。

这类方法制备的量子点分散性、稳定性都较好,不容易聚沉,表面修饰容易。

早期合成的量子点往往存在量子点粒径分布较广、荧光产率偏低等缺点。

1993年,Bawendi及其同事用二甲基镉和硒的三辛基膦(TOP)配合物作为前驱体,将其依次注入剧烈搅拌的三辛基氧化膦(TOPO)溶液中,合成了高荧光产率的CdSe 量子点,这种方法合成的量子点结晶性好、尺寸单分散、量子产率约为10%。

这种方法较以前来说是一种突破,但当量子点制成水溶性时,其荧光产率会大大下图2. 1996年,Hines成功合成了ZnS包覆的CdSe量子点降。

后来人们发现,当把ZnS或CdS包覆在CdSe纳米晶体表面后,荧光产率会大大提高。

1996年,Hines等就用二甲基锌和六甲基二硅硫烷作为量子点壳层前驱体制备了CdSe/ZnS核壳式量子点,其量子荧光产率在室温可达50%。

但上述合成方法均采用(CH3)2Cd作为原料,而(CH3)2Cd的毒性很大,具有易燃、昂贵、室温下不稳定等特性;且当(CH3)2Cd注入热的TOPO后,可能产生金属沉淀,这些缺点限制了上述方法的推广使用。

2001年Peng等对以前的方法进行了改进,用毒性低安全友好的CdO代替原来有机相法中的剧毒原料二甲基镉,在温和的条件下制备了CdS包覆的CdSe量子点,并且其荧光量子产率可以达到50%以上。

虽然有机相法合成的量子点有尺寸单分散,荧光量子产率高等优点,但是因为油性量子点与生物环境不相容,并且制备方法不环保。

如果要用在生物分析领域需要将油相量子点转相为水溶性量子点。

油相量子点经过水溶性基团饰转移到水相中后,其量子产率会降低,因而在生物分析领域的应用甚少。

2. 水相合成法目前,多利用水溶性巯基试剂作为稳定剂直接在水相中合成量子点。

巯基试剂对量子点的稳定性及功能化起重要的作用,选择带有适当官能团的巯基化合物作为稳定剂,对于控制量子点的表面电荷与表面特性极其重要,尤其当需要水溶性量子点做荧光标记时,稳定剂的选择就更为重要了。

1994年,V omeyer提出用巯基为稳定剂合成CdS。

这是首次提出用巯基为稳定剂合成量子点。

1996年Rogach等用水相法成功合成了巯基乙醇和巯基甘油包覆的CdTe量子点,并得到了较高发光效率。

1998年Gao等用巯基乙酸(TGA)作稳定剂,制备出水溶性CdTe量子点。

后来Zheng等首先采用水热法在温和条件下合成了水溶性CdTe量子点,大大缩短了水相法制备CdTe量子点的时间,其荧光量子产率也超过了30%。

目前水热法已经成为直接用做生物荧光探针的量子点的主要合成方法。

水相合成量子点CdTe的典型方法是首先将镉盐和巯基稳定剂配成溶液,调节到适当的pH值,倒入三颈烧瓶中。

碲氢化钠前驱液的制备是通过硼氢化钠还原碲粉反应而得到的,然后将碲氢化钠倒入配好的镉盐和巯基稳定剂的溶液中,形图3. 1998年Gao等用TGA作稳定成CdTe单体,不断的加热,CdTe逐渐长大,通过控制加热时间,可得到不同粒径的量子点。

水相合成量子点,不仅解决了量子点的水溶性问题,而且采用带羧基、氨基等的巯基稳定剂对其表面进行修饰,使得量子点能与生物分子上的氨基直接偶联,因而可以直接用于生物医学检测。

随着水溶性量子点的性能不断提高,良好的生物相容性的水溶性量子点有望成为新一代生物荧光探针。

三、量子点在免疫层析技术中的应用量子点免疫层析技术利用量子点荧光探针做为标记物,不仅充分体现了免疫层析技术的简便,快速,特异性强的优点,而且展示了量子点的高灵敏度,以及它的荧光特性,显示出巨大的发展潜力和广阔的应用前景。

目前深圳市金准生物医学工程有限公司开发的量子点免疫荧光层析定量测试平台----干式荧光免疫分析仪(KF-Q001-A)是国内首创。

在此平台上研发的降钙素原(PCT)定量测定试剂盒——量子点(QD)免疫荧光层析法也是国内唯一一家成功实现产业化并取得注册证号(粤械注准20152400386)的量子点诊断试剂。

随着发展和应用趋势,越来越多的生物诊断试剂公司加入了量子点这个新兴行业。

与此同时,量子点免疫分析技术也在不断地发展与改进,就其发展趋势来看,主要有以下几个方面:1. 优化量子点荧光探针的制备,得到荧光强度高的QDs,检测信号会随着QDs 的荧光增强而大大提高。

单独的量子点颗粒容易受到杂质和晶格缺陷的影响,荧光量子产率很低,目前广泛应用的是以QDs为核心,用另一种半导体材料包覆形成核壳结构后,如CdTe/ZnS,可将量子产率提高到约50%甚至更高,并在消光系数上有数倍的增加,因而有很强的荧光发射,可大大提高检测灵敏度,有利于信号的检测。

2. 实现定量检测。

至今已有部分实验室或公司研制出QDs荧光定量的仪器,从而可以定量检测出待测物的浓度,这将使量子点免疫层析技术得到更广泛的应用,打破了传统的胶体金免疫层析技术不能定量的限制。

3. 量子点的多色检测。

QDs其中一个优点就是具有可精确调谐的发射波长。

可以通过调整粒子尺寸来得到不同发射的荧光QDs,无需改变粒子的组成和表面性质。

使得量子点可以用于多种组分的多色标记,实现多组份的同时检测。

这将比传统的胶体金免疫层析技术的多元检测体现出更大的优势,减少了不同抗体间的交叉反应,特异性更强,相互间不会产生干扰。

总而言之,对免疫层析分析技术的要求是多方面的,在满足检测快速而简便的条件下,应尽可能提高检测的特异度和灵敏度,减少假阴性和假阳性,这对于用于自检的免疫层析产品是尤为重要的。

适合于基层社区检测的快速免疫层析技术正受到越来越多的关注,可以预见,随着量子点免疫层析技术的不断研究和发展,必将为医学临床诊断试剂的研究提供商品化和自动化的新途径,促进我国医学事业的健康快速和持续发展。

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