ADA 酶比色法

腺苷脱氨酶（ADA ）测定试剂盒

（酶比色法） 使用说明书

【产品用途】

本试剂用于测定血清、胸腹水、脑脊液中的腺苷脱氨酶活性。

【临床意义】

肝脏疾病时，本酶活性往往升高，有助于黄疸的鉴别诊断。在阻塞性黄疸时，此酶活性升高很少，而在肝实质性损伤时，此酶和转氨酶往往同时升高，特别在慢性活动性肝炎和肝硬变时，转氨酶阳性率较低，增高幅度也不明显，而ADA 活性的阳性率可达90%左右，增高程度也较明显。同时ADA 检测对白血病、伤寒、出血热也有辅助诊断作用。

测定胸腹水及脑脊液标本中的ADA 活性，有鉴别诊断价值。结核性胸腹水中ADA 活力显著高于癌症及炎症胸腹水中ADA 活力，对早期诊断结核性胸、腹膜炎有较高的敏感性和一定的特异性。此外，脑脊液ADA 检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎ADA 活性升高，病毒性脑膜炎不升高。

【适用范围】

液体双试剂，即开即用，自动化分析仪用。

【产品规格】

R 1 50ml ×2 R 2 50ml ×1

【试剂成份】

R 1

Tris-HCl pH8.0 50mM

4-AA 2mM PNP 0.1kU/mL

XOD 0.2kU/mL POD 0.6kU/mL 稳定剂 R 2 Tris-HCl ph4.0 50mM 腺苷 10mM

EHSPT 2mM

【检测原理】

腺苷在腺苷脱氨酶作用下脱氨基形成次黄苷，次黄苷在PNP 作用下生成次黄嘌呤，次黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶（XOD ）作用下转化为尿酸和过氧化氢（H 2O 2），H 2O 2与EHSPT 和4-氨基安替比林（4-AA ）反应生成醌色物，显色强度与ADA 活性成正比。

腺苷−−

−→−ADA

次黄苷 + NH 3 次黄苷 + Pi −−→−PNP

次黄嘌呤 + 核酸-1-磷酸 次黄嘌呤 + 2H 2O + 2O 2−−−→−XOD 尿酸+ 2H 2O 2

2H 2O 2 + 4-AA + EHSPT −−→−POD

醌亚氨染料+ H 20

【样本采集】

新鲜非溶血血清或血浆，ADA 在4℃时可稳定1周。 【测定方法】

1.试剂1、2在使用前恢复到37℃。

2.180μl R 1与5μl 血清（浆）样品混合，在37℃孵育3min-5min 。

3.加入90μl R 2孵育3min ，在540nm 或546nm 处测2分钟，计算每分钟平均光度变化△A/min 。

【参考范围】

血 清：4~24U/L 胸腹水：0~35 U/L 脑脊液：0~6 U/L

各实验室应建立自己的参考范围;

【产品性能】

1.试剂空白吸光度：A 340nm(1cm) ≥0.800

2.本试剂线性范围：0-150 U/L

3.精密度：批内CV ≤5% 批间相对极差CV ≤8%

4.准确度：相对偏差≤±10%

【试剂保存】

R 1、R 2为液体试剂，直接使用。2-8℃避光稳定1年。

【注意事项】

1.本方法特异测定ADA ，其它核苷与本方法不发生反应。

2.血清胆红素达20mg/dL ，血红蛋白100mg/dL ，甘油750mg/dL ，抗坏血酸4mg/dL 对实验无干扰。

【单位意义】

在37℃条件下，每分钟用于产生1 umol 次黄苷的量定义为一个单位的ADA 。

【生产许可证】

【注册标准号】

【注册证号】