靶向性基因治疗的基本策略

有待解决的关键问题
更多更好的基因治疗靶点 提高治疗的靶向性和特异性，增强安全 性 保证外源基因再体内稳定高效表达 高效治疗载体的开发
基因治疗的工作流程
靶基因的选择 靶细胞 治疗策略选择 载体选择（启动子） 导入方法
靶向基因治疗
概念：在治疗中，将治疗作用与效应限制在特 定的器官、组织、细胞、基因中，不影响其它 正常器官、组织、细胞、基因。
基因表达靶向性（基因嵌合）
组织特异性增强子 特异性启动子
组织特异性启动子（CD、VLCI、AFP、CEA） 微环境特异性启动子（Egr-1-ray、Grp78-O-、 MDRI-CHE） 不足：表达低、特异性降低
组织特异性调控元件（增强子）
基因表达产物的特异性
基因表达产物的生物学特性决定其仅作 用于特定的组织，这种现象较少
基因治疗的发展现状
1968年，迈克尔·布莱泽 首次在医学界提出了基 因疗法的概念 French Aderson 90年第 一例基因治疗成功 准备期（-90）——狂热 期（90-95）——理性期 单基因遗传性疾病—— 多基因常见病 不完美，离安全高效尚 有距离
法国基因治疗诱发癌症事 件，引发关于基因治疗安 全性的的担忧
细胞周期选择性载体
逆转录病毒载体-脑瘤
基因转移载体的修饰
抗原、抗体/受体、配体修饰
天然（逆-env,adv-纤维蛋白） 合成小肽
包膜蛋白的修饰
HIV/env—MuLV
入核特异性修饰
核定位信号肽
不足
干扰载体的空间结构 改变电荷特性，易激活补体系统 体积太大，不易透过生理屏障 内吞后易被内含体酶解 无法入核 受体特异性不强
靶向性基因治疗的基本策略
汪国忠
基因治疗的概念和基本策略
概念：利用不同的方法将外源基因导入体细胞 内并稳定表达，达到治疗或预防疾病的目的。
著名遗传学家谈家桢教授：“21世纪的医疗革命将 取决于基因治疗研究的成功”。
基因治疗的基本策略
修复性 替代性 调节性 Over expression knock down/out
鸡白血病病毒的apoptin 促进肿瘤凋亡而对 正常组织无影响（细胞定位核/胞浆） 抗C- erbB2 SCFV可抑制卵巢癌细胞内CerbB2 定位于细胞膜，从而抑制癌细胞分裂 增殖，对正常组织无明显影响
展望
增强基因治疗靶向性是决定其是否最终 造福人类的关键问题，也是难度最大的 问题。尽管做了很多尝试，有很多令人 振奋的结果，也有很多问题常待解决。
基因导入途径的选择 基因转移载体的选择 基因转移载体的修饰
基因导入途径
种类
回体法 体内法：局部注射、动脉途径、静脉途径、基因枪
基本过程
从血循环中逸出进入组织---入胞---从溶酶体逃脱--从胞质进入核内---随机整合、同源重组、附加体
生理屏障：
血液循环（血脑屏障）、细胞膜、内吞体、细胞核
UTMD系统
特异治疗靶点 特异转移 特异表达（时相性） 特异整合（基因打靶）
重要性：避免副作用，保证安全性。
特异治疗靶点的选择
定点修复Βιβλιοθήκη Baiduhimerplasty/chimerplast（单 基因突变遗传病杜兴氏肌营养不良、克-纳氏综合 征一型；SNPs疾病，10-5~ 10-8，2~3） 特异性基因靶点的选择
基因转移的靶向性
超声靶向破裂载基因微泡技术 （Ultrasound-targeted gene-loaded Microbubbles Destruction)
能增强基因转染与表达 具有器官靶向性
基因转移载体的选择
天然组织亲嗜性载体
HSV-N、FIV-M、杆状病毒-肝 细胞载体：永生化小胶质细胞-脑 亲缺血区厌氧菌载体-实体瘤