分子生物学与基因工程复习资料
分子生物学复习资料
分子生物学复习资料分子生物学是研究生命体内分子结构和功能的一门学科,其研究范围包括基因表达和调控、蛋白质结构和功能、DNA重复和修复、细胞信号传递等多个方面。
以下是分子生物学复习资料,帮助大家复习此学科。
DNA1. DNA是双螺旋结构,由磷酸、核糖和四种碱基(腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶)组成。
2. DNA的复制包括三个步骤:解旋、合成和连接。
3. DNA合成是通过DNA聚合酶进行的,这些酶在模板链上添加互补碱基。
4. DNA可以通过DNA甲基化调节基因表达。
5. DNA可以被DNA锁蛋白等转录因子识别和结合。
RNA1. RNA是由核糖、磷酸和四种碱基 (腺嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶和鸟嘌呤)组成。
2. RNA主要分为三种类型:mRNA (信使RNA)、rRNA (核糖体RNA)和tRNA (转运RNA)。
3. 基因表达分为两个步骤:转录和翻译。
4. 转录过程分为三个步骤:启动、延伸和终止。
5. tRNA担任将氨基酸与相应的密码子匹配的角色。
蛋白质1. 蛋白质是由氨基酸组成的长链。
2. 氨基酸有20种类型,它们是由不同的侧链区分的。
3. 蛋白质折叠形态对其功能至关重要。
4. 蛋白质可以通过转录调节子的活性来控制基因表达。
5. 蛋白质可以通过磷酸化、甲基化和泛素化等方式进行修饰,从而调节其功能。
细胞信号传递1. 细胞信号传递是细胞中信号分子相互作用的过程。
2. 细胞信号分为内部信号和外部信号。
3. 细胞膜可以通过受体蛋白与外部信号相互作用。
4. 内部信号分子可以通过传递信号的级联反应来控制基因表达等生物过程。
5. 蛋白激酶和蛋白磷酸酶是关键的信号传递分子。
总结以上是分子生物学的复习资料,包括DNA、RNA、蛋白质和细胞信号传递等方面的知识点。
学习分子生物学需要积累大量的概念和实验技术,以便理解分子间相互作用和影响它们在细胞和生物中的功能。
希望此资料对大家的复习有所帮助。
分子生物学和基因工程复习题
分子生物学和基因工程复习题一、名词解释1.分子生物学2。
基因工程3、dna的变性与复性4、细胞学说5、遗传密码的简并性6.DNA半保留复制,半不连续复制7,SD序列8、开放阅读框(orf)9、多顺反子10、蓝白斑筛选11、中心法则12、限制修饰系统13、断裂基因14、单链结合蛋白15、核酶16、密码子家族17、ta克隆18、pcr19、snp20、操纵子学说21、dna重组技术22、减色效应-增色效应23、可变剪接24、反转录25、同尾酶26、加帽反应27、蓝白斑筛选28、表观基因组学29、dna的溶解温度30、dna的大c值31、重叠基因32、引物酶33、逆转录34、限制性内切酶35、载体的选择标记36、dna甲基化37.端粒38、端粒酶39、先导链40、启动子41、反式作用因子42、同义密码子43、多克隆位点(MCS)44、基因组计划45、C值悖论46、顺式作用元件47、胸腺嘧啶二聚体48、宿主限制性修饰49、拓扑异构酶50、DNA溶解51、拓扑异构体52、间隔基因53、,假基因54同源蛋白55,翻译56,多重PCR 57,抗终止58,SD序列59,空tRNA 60,cDNA ace61,分子杂交62,cDNA文库63,载体64,RT-PCR 65,反义RNA 66,扩展tRNA67、起始trna68、探针69、反式剪接70、增强子71、动物基因工程72、基因组73、限制性内切酶74、单顺反子75,密码子76,转录77,RNA干扰78、中心法则79、回环模型80、tatabox81、前导链82、目的基因83、rflp84.种族二、判断1.DNA聚合酶I在大肠杆菌DNA生物合成中主要起聚合作用。
()2、dna半保留复制时,后随链的总体延伸方向与先导链的延伸方向相反。
()3、原核生物dna的合成是单点起始,真核生物为多点起始。
()4.当单亲DNA(3'→ 以5′为模板,子代链的合成方向为5′→ 3',另一个亲本DNA链用作模板5’→3’为模板时,子代链合成方向3’→5’。
基因工程复习资料(已修改)
基因工程复习资料(已修改)基因工程复习资料一、基因工程:概念:基因工程是指采用类似于工程设计的方法,根据人们事先设计的蓝图,人为地在体外将外源目的基因插入质粒、病毒或其他载体中,构成遗传物质的新组合即重组载体DNA分子,并将这种含有目的基因的重组载体分子转移到原先没有这类目的基因的受体细胞中去扩增和表达,从而使受体或受体细胞获得新的遗传特性,或形成新的基因产物。
基本流程:(1)目的基因的分离、获取与制备(2)目的基因与载体连接构建成为重组载体分子(3)重组DNA分子导入到受体细胞(4)外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选(5)外源目的基因的表达二、基因工程的发展简史1、基因工程诞生的背景:(1)发现了生物的遗传物质DNA而不是蛋白质。
(2)明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制。
(3)遗传密码子的破译。
2、技术上的三大发明:(1)利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶体外切割和连接DNA 片段。
(2)质粒改造成载体以携带DNA片段克隆。
(3)逆转录酶的使用打开真核生物基因工程的一条道路。
3、基因工程的诞生标志(P4)三、工具酶1、限制性核酸内切酶常见的类型:BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、HindⅡ、PstⅠ、SalⅠ、SamⅠ。
2、DNA连接酶常用的类型:大肠杆菌连接酶和T4噬菌体DNA连接酶。
3、DNA聚合酶类4、碱性磷酸酶5、末端脱氧核苷酸转移酶6、其他工具酶四、限制性核酸内切酶依来源分类1、同位酶:即识别相同的序列但切割位点不一样。
2、同尾酶:即识别位点不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。
3、同裂酶:即识别位点和切割位点均相同的酶。
五、影响限制性核酸内切酶酶切的反应条件1、温度:大部分限制性核酸内切酶最适反应温度为37°C,但也有例外,如SamⅠ的反应温度为25°C.降低最适反应温度,会导致只产生切口,而不是切断双链DNA。
2、盐离子浓度:不同的限制性核酸内切酶对盐离子强度有不同的要求,一般按离子浓度不同分为低(0mmol/L)、中(50mmol/L)、高盐(100mmol/L)三类。
分子生物学与基因工程
分子生物学与基因工程引言:分子生物学与基因工程是现代生物学领域中最为重要和前沿的研究方向之一。
分子生物学研究了生物体内分子的结构、功能和相互作用,而基因工程则利用分子生物学的原理和技术,对生物体内的基因进行操作和改造,以实现对生物体的控制和改良。
本教案将分为三个小节,分别探讨分子生物学的基础知识、基因工程的原理和应用以及分子生物学与基因工程在生物医学领域的应用。
第一小节:分子生物学的基础知识(700字左右)1. 分子生物学的起源和发展- DNA的发现和双螺旋结构的揭示- 中心法则的提出和基因的概念- 分子生物学的研究方法和技术的发展2. DNA的结构和功能- DNA的化学组成和结构特点- DNA的复制、转录和翻译过程- DNA的遗传信息传递和遗传变异3. RNA的结构和功能- mRNA、tRNA和rRNA的功能和作用- RNA的修饰和调控- RNA在基因表达中的重要性第二小节:基因工程的原理和应用(700字左右)1. 基因工程的基本原理- DNA的重组和修饰技术- 基因的克隆和表达- 基因组编辑和定点突变2. 基因工程在农业领域的应用- 转基因作物的培育和应用- 抗虫、抗病和耐逆性的改良- 农作物品质和产量的提高3. 基因工程在医学领域的应用- 基因治疗和基因药物的研发- 基因诊断和个性化医疗- 基因工程在疾病治疗中的前景第三小节:分子生物学与基因工程在生物医学领域的应用(700字左右)1. 基因组学和蛋白质组学的发展- 基因组学和蛋白质组学的研究方法和技术- 基因组学和蛋白质组学在疾病研究中的应用2. 疾病基因的发现和研究- 遗传性疾病的基因定位和克隆- 疾病相关基因的功能解析和调控机制研究- 基因工程在疾病治疗中的应用前景3. 基因工程在干细胞和再生医学中的应用- 干细胞的特性和应用前景- 基因工程在干细胞治疗和组织工程中的应用- 基因工程在器官移植和再生医学中的前景结语:分子生物学与基因工程作为现代生物学的重要分支,不仅推动了生物学的发展,也为人类社会的进步和生活质量的提高做出了巨大贡献。
基因工程复习资料
第一章一.名词解释1、基因工程:按工程学原理,将外源基因切割,及载体结合,导入受体细胞,使其稳定表达的过程。
2、目的基因:开发人们特殊需要的基因产物或及优良性状相关的基因。
3、工具酶:体外进行合成、切割、连接、修饰等过程需要的酶。
4、药物:在受体细胞内表达产物有药理作用或通过定位整合直接抑制致病基因的。
二.基因工程理论依据(1)基因具有相同的物质基础(2)基因可以切割(3)基因可以转移(4)基因及多肽有对应关系(5)基因的密码是通用的(6)基因可以通过复制遗传给下一代三.基因工程研究内容(1)克隆载体的研究(2)受体的研究(3)工具酶的研究(4)目的基因的研究(5)新技术的研究第二章一.名词解释1、变性:在较高温下,双链间氢键断开,形成单链的过程。
2、复性:变性的,降温时恢复为双链的过程。
3、解链温度:让达到50%变性的温度。
4、复制子:从复制起点开始复制出一个分子或片段的核苷酸序列。
5、启动子:不转录,是聚合酶的识别结合位点。
6、转录区:能转录相应,包括编码区和终止子。
7、操纵子:原核生物中两个以上基共用一个启动子。
8、内含子:真核生物转录区中的非编码间隔序列。
9、限制性核酸内切酶:使一个磷酸二酯键断开的脱氧核糖核酸酶。
10、稀切酶:有较长的识别序列和富含或的识别序列的限制性核酸内切酶。
11、同裂酶:不同的酶有相同的识别序列。
12、同尾酶:切割不同识别序列产生相同末端的不同酶。
13、黏性末端:两条链断开位置是交错的,叫黏性末端。
14、平末端:两条链断开位置是平齐的,叫平末端。
15、位点偏爱:某些限制酶对同一介质中的有些位点表现出偏爱性切割,即对不同位置的同一个识别序列表现出不同的切割效率的现象称作位点偏爱。
16、酶活单位:限制酶最适条件下60分钟切割1所需的酶活性。
17、容积活性:1酶活单位所具有的酶活性。
18、限制酶的活性:一些特定条件下,可以切断及原来识别序列不同的碱基序列,这个现象叫活性。
基因工程复习资料(含答案)
基因工程复习资料(含答案)基因工程复习题一、名词解释:(10~20%)基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶的Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交:将细胞或组织的核酸固定保持在原来的位置上,然后用探针与之杂交的一种核酸分子杂交技术,该方法可较好地反映目的基因在细胞或组织中的分布和表达变化。
粘性末端:双链DNA被限制性内切酶切割后,形成的两条链错开几个碱基,而不是平齐的末端。
Northern印迹杂交:将RNA进行变性电泳后,再转移到固相支持物上与探针杂交的一种核酸分子杂交技术,可用于检测目的基因的转录水平。
转位:一个或一组基因片段从基因组的一个位置转移到另一个位置的现象。
基因工程:在体外,用酶学方法将各种来源的DNA与载体DNA 连接成为重组DNA,继而通过转化和筛选得到含有目的基因的宿主细胞,最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子的过程称为基因工程,又称基因克隆、DNA克隆和重组DNA等。
目的基因:基因工程中,那些被感兴趣的、被选作研究对象的基因就叫作目的基因。
连接器:人工合成的一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段,连接到目的基因的两端,便于基因重组中的切割和连接。
转化:受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变的过程。
停滞效应:PCR中后期,随着目的DNA扩展产物逐渐积累,酶的催化反应趋于饱和,DNA 扩增产物的增加减慢,进入相对稳定状态,即为停滞效应,又称平台期。
逆转录PCR:以mRNA为原始模板进行的PCR反应。
PCR: 即聚合酶链式反应。
在模板,引物,4种dNTP和耐热DNA 聚合酶存在的条件下,特异性地扩增位于两段已知序列之间的DNA区段地酶促合成反应。
α-互补(α-complementation):指在M13噬菌体DNA或PUC 质粒序列中,插入了lac启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸的核苷酸序列(又称α-肽),该序列不能产生有活性的β-半乳糖苷酶。
基因工程复习资料
基因工程复习资料第一章核酸的制备1.主要步骤:分、切、接、转、筛、表2.基因工程的概念:基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因按预先设计的蓝图,在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞,以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。
第二章基因工程工具酶1.生物催化剂:核酶、抗体酶、模拟酶。
2.限制性内切核酸酶:定义:限制性内切核酸酶是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列(识别序列),并在识别序列上使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
命名:限制性内切核酸酶一般是以第一次提取到这类酶的生物的属名的第一个字母和种名的第一、第二个字母命名的,有的在后面还加菌株(型)代号中的一个字母。
如果从同一种生物中先后提取到多种限制性内切核酸酶,则依次用罗马数字Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示。
并且名称的前三个字母须用斜体,第一个字母用大写。
3.DNA连接酶:定义:DNA连接酶也称DNA黏合酶,在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色,那就是连接DNA链3‘-OH末端和,另一DNA链的5’-P末端,使二者生成磷酸二酯键,从而把两段相邻的DNA链连成完整的链的一种酶。
种类:大肠杆菌DNA连接酶、T4DNA连接酶、TscDNA连接酶、真核生物细胞发现的连接酶,如酶Ⅰ、酶Ⅱ、酶Ⅲ等多种类型。
4.DNA片段的连接方法:①具互补黏性末端DNA片段之间的连接:可用E?coli DNA连接酶,也可用T4 DNA连接酶。
②具平末端DNA片段之间的连接:只能用T4 DNA连接酶,并且必须增加酶的用量。
③DNA片段末端修饰后进行连接:DNA片段末端同聚物加尾后进行连接,可按互补粘性末端片段之间的连接方法进行连接;粘性末端修饰成平末端后进行连接;DNA片段5′端脱磷酸化后进行连接;DNA片段加连杆或衔接头后连接。
5.DNA聚合酶:①定义:DNA聚合酶是指以DNA单链为模板,以4种脱氧核苷酸为底物,催化合成一条与模板链序列互补的DNA新链的酶。
(完整版)分子生物学与基因工程复习资料
(完整版)分子生物学与基因工程复习资料分子生物学与基因工程绪论1、分子生物学与基因工程的含义从狭义上讲,分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。
基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中,并使之无性繁殖和行使正常功能,从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
2、分子生物学与基因工程的发展简史,特别是里程碑事件,要求掌握其必要的理由上个世纪50年代,Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型;60年代,法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型;70年代,Berg首先发现了DNA连接酶,并构建了世界上第一个重组DNA分子;80年代,Mullis发明了聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术;90年代,开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序,分子生物学进入“基因组时代”3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用。
核酸概述1、核酸的化学组成2、核酸的种类与特点:DNA和RNA的区别(1)DNA含的糖分子是脱氧核糖,RNA含的是核糖;(2)DNA含有的碱基是腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T),RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同,只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶(U)所代替;(3)DNA通常是双链,而RNA主要为单链;(4)DNA的分子链一般较长,而RNA分子链较短。
3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据;间接:(1)一种生物不同组织的细胞,不论年龄大小,功能如何,它的DNA含量是恒定的,而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。
多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的,但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。
(2)DNA在代谢上较稳定。
(3)DNA是所有生物的染色体所共有的,而某些生物的染色体上则没有蛋白质。
(4)DNA通常只存在于细胞核染色体上,但某些能自体复制的细胞器,如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。
分子生物学复习提纲
分子生物学复习提纲分子生物学复习提纲一、重组DNA技术1、基本概念1)DNA克隆:获得DNA相同副本或拷贝的过程。
2)基因工程:实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程,又称重组工艺学。
3)限制性核酸内切酶:是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。
4)DNA载体:携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。
5)DNA体外重组:在DNA连接酶的催化作用下,将外源DNA分子(目的基因)与载体DNA分子连接成一个重组分子的过程。
6)粘性末端:在双链DNA分子的末端,有一条链的3’或5’端比另一条链的3’或5’端要长,这样的双链DNA分子的末端称为粘性末端。
7)基因组DNA文库:存在于转化细胞内由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。
2、重组DNA技术的基本过程1)分2)切3)接4)转5)筛6)表达3、重组DNA技术中常用工具酶有哪些?各有什么特点和作用。
限制性核酸内切酶:识别特异序列,切割DNA。
DNA连接酶:催化DNA中相邻的5´磷酸基和3´羟基末端之间形成磷酸二酯键,使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。
DNA聚合酶:以DNA为模板合成双链DNA分子。
4、作为基因工程载体所需具备的基本条件:1)能自主复制2)有多个单一酶切位点,称为多克隆位点(MCS),利于外源DNA分子插入3)具有两个以上的选择性遗传标记,便于重组体的筛选和鉴定4)分子量小,以容纳较大的外源DNA5)拷贝数高6)具有较高的遗传稳定性人工染色体载体包含的调控元件7、人工接头有什么特点?有什么用途?人工接头特点:有限制性核酸内切酶的酶切位点人工接头用途:在平末端上形成粘性末端8、宿主细胞应具备的条件1)处于感受态2)对载体无严格限制3)限制酶和重组酶缺陷4)不对外源DNA进行修饰5)能表达重组体所提供表型特征9、原核表达体系有什么特点?其优点:简单、迅速、经济、适合大规模生产。
基因工程复习资料
基因工程复习资料基因工程复习资料基因工程是一门涉及生物学、生物化学、遗传学和分子生物学等多个学科的综合性科学,它通过对生物体基因的操作和改造,实现对生物体性状的调控和改良。
本文将从基本概念、技术原理、应用领域和伦理道德等方面进行探讨。
一、基本概念基因工程是指通过对生物体基因进行操作和改造,实现对生物体性状的调控和改良的科学技术。
基因工程的核心是对基因的操作,包括基因的克隆、重组、突变等。
通过这些操作,可以使生物体获得新的性状,或者改良原有性状,从而实现对生物体的精准控制。
二、技术原理基因工程的技术原理主要包括基因克隆、基因重组和基因转导等。
基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中分离出来,并进行复制。
基因重组是指将不同来源的基因进行组合,形成新的基因组合。
基因转导则是将重组的基因导入到目标生物体中,使其表达出新的性状。
三、应用领域基因工程在农业、医学和环境保护等领域都有广泛的应用。
在农业方面,基因工程可以通过转基因技术改良农作物,使其具有抗虫、抗病、耐旱等性状,提高农作物的产量和品质。
在医学方面,基因工程可以用于疾病的基因诊断、基因治疗和基因药物的研发。
在环境保护方面,基因工程可以用于生物修复,通过改造微生物的基因,使其能够降解有害物质,清除环境污染。
四、伦理道德基因工程的发展给人类带来了巨大的福祉,但也引发了一系列的伦理道德问题。
例如,转基因食品是否安全?基因编辑技术是否会导致基因歧视?这些问题都需要我们认真思考和探讨。
在推动基因工程的发展过程中,必须注重伦理道德的约束,确保科学的发展与社会的福祉相协调。
总结起来,基因工程是一门综合性科学,通过对生物体基因的操作和改造,实现对生物体性状的调控和改良。
它在农业、医学和环境保护等领域都有广泛的应用。
然而,基因工程的发展也引发了一系列的伦理道德问题,我们需要在科学发展的同时,注重伦理道德的约束,确保基因工程的应用符合社会的利益和道德准则。
基因工程复习资料
基因⼯程复习资料⼀、绪论1、简述基因⼯程的概念。
答:基因⼯程是指按照⼈们的设计,⽤⽣物技术直接操作⽣物的基因组。
通过分离和拷贝⽬的基因或⼈⼯合成外源基因,在体外将外源基因插⼊到载体分⼦中,成为重组DNA,再导⼊宿主细胞内,进⾏扩增和表达。
此过程所涉及的⽅法学称为重组DNA技术,也称分⼦克隆或基因操作。
2、列举基因⼯程中常⽤的⼀些技术。
答:(1)基因敲⼊:以ES细胞培养技术和同源重组为基础,通过转基因将外源基因整合到特定的靶位点,利⽤靶位点全套的表达调控元件以实现特异性的异位表达。
(2)基因敲除:将⼀个特地设计的DNA⽚段导⼊⽣物体中,通过同源重组使靶基因被置换出⽽失活的实验技术。
(3)基因敲落:是⽤反义技术,RNAi等降低或抑制靶基因的表达活性。
(4)基因打靶:是⽤同源重组来瞄准希望改变的特定内源基因。
(5)基因组编辑:⽤基因组编辑核酸酶,如锌指核酸酶(ZFN)、归巢核酸内切酶、转录激活⼦样效应物(TALE)和成簇间隔短回⽂重复(CRISPR)进⾏剪切。
⼆、基因⼯程的分⼦遗传学基础(⼀)名词解释1、基因表达:指DNA分⼦经转录产⽣互补的RNA分⼦。
2、半保留复制:亲代DNA双链分离后的两条单链均可作为新链合成的模板,复制完成后的⼦代DNA分⼦的核苷酸序列均与亲代DNA分⼦相同,但⼦代DNA分⼦的双链⼀条来⾃亲代,另⼀条为新合成的链,故称为半保留复制。
3、半不连续复制:是指DNA复制时,前导链上DNA的合成是连续的,后随链上是不连续的,故称为半不连续复制。
半不连续模型是DNA复制的基本过程。
4、DNA的变性:指核酸双螺旋碱基对的氢键断裂,双链变成单链,从⽽使核酸的天然构象和性质发⽣改变。
变性DNA常发⽣⼀些理化及⽣物学性质的改变:溶液粘度降低、溶液旋光性发⽣改变、增⾊效应。
5、DNA的复性:指变性DNA在适当条件下,两条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,是变性的⼀种逆转过程。
热变性DNA⼀般经缓慢冷却后即可复性,此过程称之为“退⽕”。
分子生物学与基因工程复习提纲
分子生物学与基因工程复习提纲第一章绪论1、分子生物学简史理论上的三大发现生物的遗传物质是DNADNA双螺旋模型遗传信息的传递方式技术上的三大发现基因操作的工具酶的发现载体的应用逆转录酶的发现2、证明遗传物质是DNA的三大经典实验肺炎双球菌转化实验噬菌体感染实验病毒重建实验3、1953年,Watson/Crick 提出了DNA双螺旋结构模型。
4、遗传信息的传递方式的发现1961 年Monod 和Jacob 提出了操纵子学说;1964 年Nirenberg 等提出了“三联体密码说”;Crick 提出了遗传信息流向和表达的中心法则。
5、限制性核酸内切酶的定义、特点以及在基因工程中的意义;DNA连接酶6、克隆载体和表达载体第二章染色体与DNA1、核酸、核苷酸、核苷、碱基、嘌呤、嘧啶、DNA、RNA、磷酸二酯键2、染色体、核小体、组蛋白、非组蛋白3、基因组大小与C值矛盾、重复序列4、真核基因组结构的特点;与原核基因组的差异5、DNA双螺旋结构的要点、氢键、碱基堆集力、A、B、Z型结构6、超螺旋结构、正/负超螺旋7、DNA复制、半保留复制、半不连续复制、冈崎片段、拓扑异构酶、Klenow片段8、真核生物DNA复制的特点9、转座、转座子、转座子的分类和共同特点、转座的遗传效应第三章RNA合成1、转录、转录泡、有义链、反义链、RNA聚合酶2、启动子、终止子、增强子、依赖ρ因子的终止、不依赖ρ因子的终止3、原核生物转录的过程4、真核生物mRNA转录后的加工5、真核生物成熟mRNA的结构特点第四章蛋白质的合成1、遗传密码、密码子、反密码子、密码子偏好性、简并性2、起始密码子:AUG 终止密码子:UAA、UAG、UGA3、错义突变、无义突变、同义突变、移码突变4、tRNA的结构:两个关键部位3ˊ端CCA:接受氨基酸,形成氨酰-tRNA;与mRNA的结合部位—反密码子。
5、SD序列、反SD序列6、蛋白质合成过程(翻译的过程)7、蛋白质转运的机制、信号肽第五章基因表达调控1、基因组、管家基因、组成性表达、可诱导基因(奢侈基因)、诱导、阻遏2、操纵子、顺势作用元件、反式作用因子3、原核生物基因调控模型乳糖操纵子调控的机制:阻遏蛋白负调控以及CAP正调控色氨酸操纵子调控的机制:反馈抑制和衰减子调控4、RNA干扰、小干扰RNA(siRNA)、微小RNA (miRNA)第六章基因工程的酶学基础1、限制性内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和反转录酶、DNA修饰酶、外切核酸酶、单链内切核酸酶、RNA酶2、回文序列、II型限制性内切酶、粘性末端、同工酶、同尾酶、同裂酶3、TaqDNA聚合酶的特点以及在PCR中的应用第七章基因工程载体1、载体、克隆载体、表达载体2、质粒、噬菌体、柯斯质粒、酵母人工染色体、细菌人工染色体3、标记基因(报告基因)、插入失活、α-互补、蓝白斑筛选4、质粒作为基因工程载体的优点5、碱变性抽提法提取质粒的原理6、穿梭载体第八章基因操作的主要技术原理1、提取核酸的一般程序2、碱变性法提取质粒DNA的步骤3、核酸浓度与纯度测定的方法:紫外吸收4、核酸电泳:琼脂糖电泳、脉冲场凝胶电泳第九章目的基因的获取1、PCR的原理和步骤2、基因组文库、cDNA文库、鸟枪法、DNA化学合成第十章基因工程的操作过程1、表达载体的结构特征2、将目的基因导入受体:植物:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法动物:显微注射法微生物:化学转化法、电转化法3、重组子筛选:双抗生素法、蓝白斑筛选4、重组子鉴定:核酸分子杂交法裂解细菌电泳鉴定分子大小限制性内切酶法PCR法基因产物检测法序列分析5、Northern杂交、Southern杂交、Western Blot、Elisa(酶联免疫吸附)第十一章基因工程的应用1、植物基因工程2、动物基因工程3、基因工程药物4、基因治疗5、基因工程与环保第十二章基因工程及其产品安全性管理1、基因工程产品对人类健康的影响2、基因工程产品对生态系统的影响3、基因工程生态安全性评价的指标复习题:简答题:1、分子生物学历史上,具有重要意义的理论上和技术上的三大发现分别是什么?2、什么叫转座子?列举转座子的类型及其共同特点。
分子生物学与基因工程主要知识点
分子生物学与基因工程复习重点第一讲绪论1、分子生物学与基因工程的含义从狭义上讲,分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。
基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中,并使之无性繁殖和行使正常功能,从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
2、分子生物学与基因工程的发展简史,特别是里程碑事件,要求掌握其必要的理由上个世纪50年代,Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型;60年代,法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型;70年代,Berg首先发现了DNA连接酶,并构建了世界上第一个重组DNA分子;80年代,Mullis发明了聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术;90年代,开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序,分子生物学进入“基因组时代”;目前,分子生物学进入了“后基因组时代”或“蛋白质组时代”。
3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用:从专业基础课角度阐述对专业课程的支撑作用第二讲核酸概述1、核酸的化学组成(图画说明)2、核酸的种类与特点:DNA和RNA的区别(1)DNA含的糖分子是脱氧核糖,RNA含的是核糖;(2)DNA含有的碱基是腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T),RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同,只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶(U)所代替;(3)DNA通常是双链,而RNA主要为单链;(4)DNA的分子链一般较长,而RNA分子链较短。
3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据;间接:(1)一种生物不同组织的细胞,不论年龄大小,功能如何,它的DNA含量是恒定的,而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。
多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的,但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。
(2)DNA在代谢上较稳定。
基因工程与分子生物学
基因工程与分子生物学重点1.限制性核酸内切酶:凡是识别切割双链的DNA分子内特定核苷酸序列的酶称为限制性核酸内切酶,简称为限制性酶。
2.限制性核酸内切酶的一般性质:37℃,pH为7.2~7.6,用Tris—HCl,Gly—NaOH两种缓冲液,Mg2+Buffer,5mM,盐浓度,巯基试剂:β-ME,DTT,BSA(牛血清白蛋白,稳定酶的作用);决定生产的特定的DNA片段的大小,识别顺序具有180°的旋转对称,识别顺序一般是4~6个碱基,也有6个以上的,但是没有4个以下的,产生三种不同的切口:形成平头末端(SmalⅠ):连接困难,效率较低;形成5’粘性末端(EcoRⅠ):相对而言,5’突出尾,3’凹末端;形成3’粘性末端(PstⅠ)相对而言,3’突出尾,5’凹末端。
3.星活性:在非标准条件下(低盐和高pH,高甘油浓度>5%),限制酶识别顺序与切割顺序发生改变的现象。
4.大肠杆菌DNA聚合酶I大片段(Klenow片段):将Pol1切下一个小片段失去5’到3’外切酶活性。
补平限制酶切割DNA产生3’凹槽(5’到3’合成),用[32p]dNTP补平3’凹端,对DNA片段进行末端标记,对带3’突出端的DNA进行末端标记(利用置换活性),在cDNA 克隆中,用对和陈那个cDNA的第二条链,在体外诱变中用于从单链模版合成双链DNA,应用Sanger双脱氧末端终止法进行DNA测序,消化限制酶产生的3’突出端,应用于PCR 技术。
5.基因工程的工具酶:T7噬菌体DNA聚合酶,修饰的T7噬菌体DNA聚合酶,TaqDNA 聚合酶(没有校正功能),大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ,大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大片段,T4噬菌体DNA聚合酶。
6.末端转移酶:将相同的核苷酸依次连接到3’末端,然后两条DNA通过同源多聚尾巴连接在一起,在表达前将ploy(G)切除,否则影响蛋白质的生物活性。
7.T4噬菌体多核苷酸激酶:使DNA的5’端磷酸化,也可以使DNA的5’端去磷酸化。
分子生物学与基因工程 补考复习题
一、单项选择题1、证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是:肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和 T2 噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是: (C)(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA,作为疾病的致病剂(b)DNA突变导致毒性丧失(c)生物体吸收的外源DNA(而并非蛋白质)改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的,因此它一定是一种非常保守的分子2、1953年Watson和Crick提出:(A)(a)多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋(b)DNA的复制是半保留的,常常形成亲本—子代双螺旋杂合链(c)三个连续的核苷酸代表一个遗传密码(d)遗传物质通常是DNA 而非RNA3、下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述(B)(a)σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物(b)全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物(c)三个全酶在转录起始点形成的复合物(d)σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物4、与pCAGCT互补的DNA序列是:(A)A.pAGCTGB.pGTCGAC.pGUCGAD.pAGCUGE.pTCGAC5、色氨酸操纵子的调控需要:(C)A.增强子B.转录子C.衰减子D.顺反子E.调节子6、下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码:(A)A.甲硫氨酸B.S-腺苷蛋氨酸C.苯丙氨酸D.丙氨酸E.以上都不是,而是TAG7、真核生物基因组中没有:A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.高度重复序列8、DNA的半保留复制需要(E)A.核心酶和单链DNA结合蛋白B.模板 DNA和四种 NTPC.引物和RNA聚合酶D.DNA引物和连接酶E.冈崎片段和终止因子9、在乳糖操纵子中,阻遏蛋白结合的是:(A)A.操纵基因B.调节基因C.启动基因D.结构基因E.终止基因10、氨基酸活化酶:A.能识别一组同功tRNAB.催化磷酸二酯键的形成C.催化氨基酸结合到 tRNAD.催化氨基酸的氨基与tRNA结合E.催化氨基酸的羧基与GTP反应11. 细菌培养物中某种质粒的存在通常用来确定。
分子生物学基因工程生物化学复习题
1、蛋白质分子(多肽链)的方向性(即:N末端和C末端)是如何确定的?答:由肽键决定即通过氨基酸NH2和氨基酸COOH的脱水缩合,形成了N末端在左,C末端在右2、什么是多肽链的肽平面?什么是二面角?答:肽平面:肽键具有一定程度的双键性质,参与肽键的六个原子C、H、O、N、C1、C2不能自由转动,位于同一平面。
二面角:一个碳原子相连的两个肽平面,由于N1—C1和C1—C2(羧基碳)两个键为单键。
肽平面可以分别围绕这两个键旋转,从而构成不同的构象。
3、维持蛋白质分子的三级结构有哪几种力?次级键包括哪几种?答:二硫键、(氢键疏水性相互作用力、离子键、范德法力。
)第二小题4、如何将蛋白质变性?如何复性?答:加热、加乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等;去除上述因素,若变性程度较轻即可复性。
5、伴侣分子有哪两种类型?其功能如何?答:分子伴侣和伴侣蛋白;辅助新生肽链折叠的,催化对形成功能所必需的共价键盘变化6、人热休克蛋白在新生蛋白质折叠过程的作用是什么?答:辅助新生肽链正确折叠7、膜蛋白分为哪两种类型?它们各通过何种化学键与膜相结合?答;外周膜蛋白和内在膜蛋白。
1)共价键2)疏水性相互作用力8、疯牛病得病因是什么?蛋白质构象发生改变而凝集使其由可溶性变成不可溶性。
9、蛋白质翻译后需要进行哪些形式的加工才能具有活性?肽键N末端甲硫氨酸残基的切除,蛋白质前体的酶切修饰以及氨基残基侧链基团的化学修饰。
10、胃和胰腺分泌的消化蛋白酶的酶原如何加工才能具有活性?酶切加工11、什么是蛋白质的可逆磷酸化?蛋白质的磷酸化和去磷酸化分别由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化完成。
12、什么是蛋白质的靶向输送?靶向输送的蛋白质的N端通常有何序列?定向动送送执行功能的目的地的过程;信号肽13、何谓‘信号肽’?其结构特点是什么?信号肽:分泌蛋白新生肽段N端的一段能被细胞转动系统识别的特征性的序列。
特点:该序列约为16~30个氨基酸残基分为N端碱性区、疏水核心区及加工区三个区段,紧接其后的是被信号肽酶裂解的点。
现代分子生物学考试复习资料
现代分子生物学考试复习资料一、绪论1分子生物学:在分子水平上研究生命现象的科学。
通过研究生物大分子(核酸、蛋白质)的结构、功能和生物合成等方面来阐明各种生命现象的本质。
2、1953年Watson 和Crick提出DNA双螺旋模型3、分子生物学研究内容:DNA重组技术(基因工程)、基因表达的调控、生物大分子的结构和功能研究、基因组、功能基因组与生物信息学研究二、染色体与DNA核小体:由H2A、H2B、H3和H4四种组蛋白各两个分子组成八聚体和大约200 bp的DNA 区段组成。
组蛋白:分为5种类型(H1,H2A,H2B,H3,H4),其特性如下:1、进化上的极端保守性;2、无组织特异性;3、肽链上氨基酸分布的不对称性;4、组蛋白的修饰作用包括甲基化、乙基化和磷酸化;5、富含赖氨酸的组蛋白H5C值(C value)一种生物单倍体基因组所含DNA的总量。
C值反常现象也称为C值谬误。
指C值往往与种系的进化复杂性不一致的现象,即基因组大小与遗传复杂性之间没有必然的联系,某些较低等的生物C值却很大,如一些两栖动物的C 值甚至比哺乳动物还大。
基因:编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位,是染色体或基因组的一段DNA序列真核生物基因组的结构特点:1 真核基因组庞大一般都远大于原核生物基因组,2真核基因有断裂基因,即有内含子,3转录产物是单顺反子,4非编码区域多于编码区域.,占90%以上5有大量顺式作用元件。
包括启动子、增强子、沉默子等6有大量重复序列7有大量的DNA多态性8具有端粒结构原核生物基因组的特点:1基因组很小DNA含量少,2有重叠基因,转录产物是多顺反子,3结构简练,大部分都是编码区域,4DNA一般不与蛋白质结合5存在转录单元,转录形成多顺反子mRNA单顺反子:只编码一个蛋白质的mRNA;多顺反子mRNA:两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA),由DNA链上的邻位顺反子所界定;顺式作用元件:存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。
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分子生物学与基因工程绪论1、分子生物学与基因工程的含义从狭义上讲,分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。
基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中,并使之无性繁殖和行使正常功能,从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
2、分子生物学与基因工程的发展简史,特别是里程碑事件,要求掌握其必要的理由上个世纪50年代,Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型;60年代,法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型;70年代,Berg首先发现了DNA连接酶,并构建了世界上第一个重组DNA分子;80年代,Mullis发明了聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术;90年代,开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序,分子生物学进入“基因组时代”3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用。
核酸概述1、核酸的化学组成2、核酸的种类与特点:DNA和RNA的区别(1)DNA含的糖分子是脱氧核糖,RNA含的是核糖;(2)DNA含有的碱基是腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T),RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同,只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶(U)所代替;(3)DNA通常是双链,而RNA主要为单链;(4)DNA的分子链一般较长,而RNA分子链较短。
3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据;间接:(1)一种生物不同组织的细胞,不论年龄大小,功能如何,它的DNA含量是恒定的,而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。
多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的,但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。
(2)DNA在代谢上较稳定。
(3)DNA是所有生物的染色体所共有的,而某些生物的染色体上则没有蛋白质。
(4)DNA通常只存在于细胞核染色体上,但某些能自体复制的细胞器,如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。
(5)在各类生物中能引起DNA结构改变的化学物质都可引起基因突变。
直接:肺炎链球菌试验、噬菌体侵染实验4、DNA的变性与复性:两者的含义与特点及应用变性:它是指当双螺旋DNA加热至生理温度以上(接近100ºC)时,它就失去生理活性。
这时DNA双股链间的氢键断裂,最后双股链完全分开并成为无规则线团的过程。
简而言之,就是DNA从双链变成单链的过程。
增色效应:它是指在DNA的变性过程中,它在260 nm的吸收值先是缓慢上升,到达某一温度后即骤然上升的效应。
复性:它是指热变性的DNA如缓慢冷却,已分开的互补链又可能重新缔合成双螺旋的过程。
复性的速度与DNA的浓度有关,因为两互补序列间的配对决定于它们碰撞频率。
DNA复性的应用-分子杂交:由DNA复性研究发展成的一种实验技术是分子杂交技术。
杂交可发生在DNA和DNA或DNA与RNA间。
5、Tm的含义与影响因素Tm的含义:是指吸收值增加的中点。
影响因素:1)DNA序列中G + C的含量或比例含量越高,Tm值也越大(决定性因素);2)溶液的离子强度3)核酸分子的长度有关:核酸分子越长,Tm值越大4)某些化学物质5)溶液pH值6、DNA的一级结构的含义与特点,包括化学本质7、DNA双螺旋模型的发现过程、基本内容与生物学意义(1)两条多核苷酸链以右手螺旋的形式彼此以一定的空间距离,平行地环绕于同一轴上;(2)两条多核苷酸链走向为反向平行,即一条链磷酸二酯键为5’-3’方向,而另一条为3’一5’方向,二者刚好相反;(3)每条长链的内侧是扁平的盘状碱基,碱基一方面与脱氧核糖相联系,另一方面通过氢键与它互补的碱基相联系。
互补碱基对A与T之间形成两对氢键,而C与G之间形成三对氢键。
上下碱基对之间的距离为0.34nm;(4)每个螺旋为3.4nm长,刚好含有10个碱基对,其直径约为2nm;(5)在双螺旋分子的表面大沟和小沟交替出现。
3、DNA精细结构的含义与重要参数(1)依赖于序列的B-DNA构象变化;(2)连续AT序列的构象;(3)含错配碱基对的B-DNA;(4)DNA的局部构象与DNA结合蛋白4、DNA超螺旋结构的形成与鉴定超螺旋DNA可采取两种拓扑学上相当的形式。
一种相当于双螺旋绕圆柱体旋转;另一种相当于双螺旋相互盘绕。
超螺旋的这两种形式可以相互转变。
天然的DNA都呈负超螺旋,但在体外可得正超螺旋5、DNA不寻常结构有哪些,有何作用?交替的嘧啶、嘌呤重复序列倾向形成Z-DNA反向重复序列倾向形成十字形结构构成镜像重复的同型嘧啶-同型嘌呤序列可能形成三链结构:在形成三链DNA过程中游离出来的多聚嘌呤链则保持单链状态。
故三链DNA对S1核酸酶的作用敏感。
由于三链DNA含有镜像重复,故可形成两种异构体:一是多聚嘌呤链的5’部分成单链;另一是3’部分成单链。
富含G的序列可能形成四链结构:端粒DNA的序列具有一定的取向特征。
在每一染色体末端,富含G的一股链由5’向3’-末端延伸,并突出于互补的富含C一股链12~16核苷酸。
染色体的末端与特定的蛋白质形成复合物。
染色体与基因组的结构1、真核生物染色体的结构,包括基本单元的化学组成染色体是由染色质构成的,染色质是由DNA、RNA和蛋白质形成的复合体。
染色体是动态的物体,其外观随细胞周期的不同阶段发生明显的改变。
仅当细胞分裂时,每个染色体才呈现出凝聚型。
(1)组蛋白:组蛋白在翻译后是受到修饰的,其中包括特异精、组、赖、丝和苏氨酸残基的甲基化、乙酰基化和磷酸化(2)核小体(3)30 nm 纤丝(4)辐射的环2、真核生物基因组的C值与特点在真核生物中,每种生物的单倍体基因组的DNA总量是恒定的,称之为C值。
3、基因组中DNA的大小、形状与序列组织:包括卫星DNA和微卫星DNA的含义DNA一般为长而无分支的双股线性分子,但有些为环型,也有少数为单股环型。
不同的DNA大小相差悬殊。
例如,SV40含5.1 kb,而南美肺鱼的基因组含102 000 000 kb。
虽然一般而言,复杂的有机体需要更多的DNA,但不存在严格的对应关系。
真核生物DNA碱基组成上的异质性主要由于存在着以下3类DNA序列:①高度重复序列;②中度重复序列;③单一序列。
4、真核生物的基因组特点(与原核生物比较)真核生物基因组与原核生物的相比,主要有以下几方面的差异(特点):(1)分布部位(2)基因特性(3)遗传信息的传递过程(4)自身的复制过程蛋白质的结构与功能1、蛋白质的含义蛋白质一词最早来自希腊语“proteios”,其含义为“第一重要的”。
现代科学研究表明,蛋白质是由20种左右的 -氨基酸通过肽键相互连接而成的一类具有特定的空间构象和生物学功能的高分子有机化合物。
1、二十种氨基酸的英文简称,要求掌握一个字母的含义1、蛋白质一级结构的含义它是指蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序,也是蛋白质最基本的结构。
它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的。
各种氨基酸按遗传密码的顺序,通过肽键连接起来,成为多肽链,故肽键是蛋白质结构中的主键。
2、蛋白质二级结构的类型,包括阿尔法结构与DNA双螺旋的异同点α-螺旋、β-折迭、β-转角、无规则卷曲(填空题)(1)多个肽键平面通过α-碳原子旋转,相互之间紧密盘曲成稳固的右手螺旋;(2)主链呈螺旋上升,每3.6个氨基酸残基上升一圈,相当于0.54nm,这与X衍射图符合;(3)相邻两圈螺旋之间借肽键中C=O和硫氢基形成许多链内氢健,即每一个氨基酸残基中的NH和前面相隔三个残基的C=O之间形成氢键,这是稳定α-螺旋的主要键;(4)肽链中氨基酸侧链R分布在螺旋外侧,其形状、大小及电荷影响α-螺旋的形成。
酸性或碱性氨基酸集中的区域,由于同电荷相斥,不利于α-螺旋形成;较大的R(如苯丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸)集中的区域,也妨碍α-螺旋形成;脯氨酸因其α-碳原子位于五元环上,不易扭转,加之它是亚氨基酸,不易形成氢键,故不易形成上述α-螺旋;甘氨酸的R 基为H,空间占位很小,也会影响该处螺旋的稳定。
1、蛋白质结构与功能的关系(1)蛋白质一级结构与功能的关系:蛋白质一级结构是空间结构的基础,特定的空间构象主要是由蛋白质分子中肽链和侧链R基团形成的次级键来维持,在生物体内,蛋白质的多肽链一旦被合成后,即可根据一级结构的特点自然折叠和盘曲,形成一定的空间构象。
(2)蛋白质空间构象与功能活性的关系:蛋白质多种多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关,蛋白质的空间构象是其功能活性的基础,构象发生变化,其功能活性也随之改变。
蛋白质变性时,由于其空间构象被破坏,故引起功能活性丧失,变性蛋白质在复性后,构象复原,活性即能恢复。
血红蛋白是红细胞中所含有的一种结合蛋白质,它的蛋白质部分称为珠蛋白,非蛋白质部分(辅基)称为血红素(x)DNA复制1、一些基本概念:复制子、复制单元、复制起始点、半保留复制、半不连续复制、前导链、随后链、冈崎片段。
DNA在复制时首先两条链之间的氢键断裂使两条链分开,然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链,这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种复制方式为半保留复制。
连续合成的链比不连续合成的链超前一步,称为前导链。
2、不连续合成的链要滞后一步,称为后随链。
前导链连续复制和后随链的不连续复制,称为DNA的半不连续复制。
随从链的前进方向是与复制叉的打开方向相反的。
随从链只能先以片段的形式合成,这些片段就叫做冈崎片段。
复制是从DNA分子上的特定部位开始的,这一部位叫做复制起始点。
生物体的单个复制单位称为复制子。
1、要求掌握DNA定点双向复制4、单链结合蛋白的作用它与解开的单链DNA结合,使其稳定不会再度螺旋化并且避免核酸内切酶对单链DNA的水解,保证了单链DNA做为模板时的伸展状态,SSBP可以重复利用。
5、DNA复制的酶学基础及原核生物复制的一般过程,包括DNA复制前导链和随后链的起始、延长和终止6、真核生物DNA复制的特点(1)与原核生物不同,真核生物DNA复制有许多起始点(2)在真核生物DNA复制叉处,需要两种不同的酶。
(3)由于真核生物染色体是线性DNA,它的两端叫做端区,端区是由重复的寡核苷酸序列构成的。
(4)真核生物具有多重复制原点,原核生物只有一个。
RNA生物合成及其加工1、一些基本概念:不对称转录、编码链(信息链)、模板链、启动子、转录因子在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板,这条链叫做模板链,又叫反义链。
DNA双链中另一条不做为模板的链叫做编码链,又叫有意义链。
编码链的的序列与转录本RNA的序列相同,只是在编码链上的T在转录本RNA为U,由于RNA的转录合成是以DNA的一条链为模板而进行的,所以这种转录方式又叫做不对称转录。