巨噬细胞吞噬细胞功能实验
巨噬细胞吞噬功能测定的原理
巨噬细胞是免疫系统中的一类重要细胞，具有吞噬功能。
巨噬细胞通过吞噬和消化病原微生物、细胞碎片和其他异物，起到保护机体免受感染和清除废物的作用。
巨噬细胞吞噬功能测定是评估巨噬细胞活性和功能的一种方法。
巨噬细胞吞噬功能测定的基本原理如下：1.制备巨噬细胞：首先需要从人或动物体内获取巨噬细胞，常用的来源包括骨髓、外周血单个核细胞、脾脏等。
这些组织中含有大量未分化或分化成熟的巨噬细胞前体，经过适当培养条件可以诱导其分化为成熟的巨噬细胞。
2.刺激剂处理：为了评估不同刺激剂对巨噬细胞吞噬能力的影响，常常将刺激剂加入到培养基中与巨噬细胞共同培养。
常用的刺激剂包括细菌成分（如脂多糖）、细菌、病毒等。
刺激剂的添加可以模拟体内感染环境，激活巨噬细胞。
3.吞噬实验：巨噬细胞吞噬功能测定通常采用荧光标记的微粒（如琼脂糖微球、细菌等）来评估巨噬细胞吞噬能力。
首先将荧光标记的微粒加入到培养基中与巨噬细胞共同培养，一定时间后，通过显微镜观察和计数吞噬的荧光标记微粒数量，进而评估巨噬细胞的吞噬能力。
4.统计分析：通过对多个样本进行重复实验，可以得到吞噬率、吞噬指数等数据。
根据不同实验设计和目的，还可以进行其他统计学分析，如t检验、方差分析等。
总结起来，巨噬细胞吞噬功能测定就是通过将刺激剂处理后的巨噬细胞与荧光标记微粒共同培养，然后观察和计数吞噬的荧光标记微粒数量来评估巨噬细胞的吞噬能力。
这种测定方法可以用于评估巨噬细胞在不同条件下的活性和功能，进而研究免疫应答、感染和疾病发展等相关问题。
巨噬细胞吞噬功能测定在实验室中有广泛的应用。
通过该方法可以评估不同刺激剂对巨噬细胞活性的影响，了解它们在感染和炎症过程中的作用。
此外，该方法还可以用于筛选新药物或治疗方法对巨噬细胞吞噬功能的影响，为药物开发提供参考。
然而，在进行巨噬细胞吞噬功能测定时需要注意以下几个方面：1.工作环境：实验室必须具备严格的无菌条件，以避免外源性污染对实验结果的干扰。
大吞噬实验的实验报告
一、实验目的1. 观察和了解巨噬细胞对异物的吞噬过程。
2. 掌握巨噬细胞吞噬实验的操作方法。
3. 分析巨噬细胞的吞噬功能。
二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞，主要来源于单核细胞。
在机体受到病原体感染时，巨噬细胞可以吞噬病原体，并激活其他免疫细胞，共同参与机体的免疫反应。
本实验通过观察巨噬细胞对异物的吞噬过程，了解巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料1. 小鼠：体重20-25g，雌雄不限。
2. 无菌生理盐水。
3. 鸡红细胞悬液。
4. 巨噬细胞培养液。
5. 巨噬细胞培养瓶。
6. 显微镜及配套设备。
7. 吸管、试管、离心机、移液器等。
四、实验步骤1. 实验前准备：将小鼠置于恒温恒湿的环境中饲养，适应环境。
实验前1天，用无菌生理盐水给小鼠灌胃，以提高巨噬细胞的活性。
2. 巨噬细胞培养：取小鼠腹腔巨噬细胞，加入巨噬细胞培养液，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
3. 实验操作：a. 取鸡红细胞悬液，用生理盐水稀释至一定浓度。
b. 将培养好的巨噬细胞悬液加入鸡红细胞悬液中，混合均匀。
c. 将混合液加入巨噬细胞培养瓶中，置于培养箱中培养一段时间。
d. 取出培养瓶，用吸管轻轻吹打，使巨噬细胞与鸡红细胞分离。
e. 将分离后的巨噬细胞悬液离心，弃去上清液，收集沉淀。
4. 观察与记录：a. 取巨噬细胞沉淀，制成涂片。
b. 用姬姆萨染色液染色，置于显微镜下观察。
c. 记录巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况，包括吞噬细胞的形态、吞噬的鸡红细胞数量等。
五、实验结果与分析1. 观察结果：在显微镜下，观察到巨噬细胞呈现出典型的吞噬形态，细胞内含有多个鸡红细胞。
2. 分析：a. 巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用，说明巨噬细胞在机体免疫过程中起着重要作用。
b. 吞噬细胞的形态变化与鸡红细胞的吞噬程度有关，吞噬程度越高，细胞形态变化越明显。
c. 通过观察巨噬细胞的吞噬功能，可以了解巨噬细胞在机体免疫反应中的活性。
六、实验结论本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，验证了巨噬细胞在机体免疫过程中的重要作用。
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
实验八巨噬细胞吞噬现象的观察
一、实验原理
巨噬细胞由骨髓干细胞分化生成, 然后进入血液到达各组织内, 并进一步分化为各种巨噬细胞, 当病原微生物或其它异物侵入机体时, 能招引巨噬细胞, 而巨噬细胞又有趋化性, 能响应招引因子的招引, 产生活跃的变形运动, 主动向病原体和异物移行, 在接触到病原体和异物时, 即伸出伪足, 将之包围并内吞入胞质, 形成吞噬体, 继而细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡发生融合, 形成吞噬性溶酶体, 通过其中水解酶等作用下, 将病原体杀死, 消化分解, 最后将不能消化的残渣排了出细胞外。
台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂, 台盼蓝染料进入细胞, 细胞变蓝, 即为坏死。
如果细胞膜完整, 细胞不为台盼蓝染色, 则为正常细胞或凋亡细胞。
此方法对反映细胞膜的完整性, 区别坏死细胞有一定的帮助。
二、实验步骤
1. 在小鼠腹腔注射6%淀粉肉汤（含台盼蓝）1ml。
2．24h后注射1%鸡红细胞悬液1ml, 轻按腹部使分散。
3. 20分钟后脱颈骨处死小鼠。
4. 开腹取腹腔液（慎防小鼠血污染）。
5．腹腔液滴于载玻片上, 盖上盖玻片。
6. 显微镜观察吞噬现象。
三、实验结果
四. 结果讨论。
吞噬功能测定实验报告
一、实验目的1. 了解吞噬细胞吞噬功能的测定原理和方法。
2. 掌握中性粒细胞和巨噬细胞吞噬功能测定的操作步骤。
3. 分析吞噬功能测定的结果，评估吞噬细胞的功能状态。
二、实验原理吞噬细胞是免疫系统中的重要组成部分，具有吞噬、消化病原微生物和衰老细胞等功能。
吞噬功能测定是评估机体免疫功能的一种方法。
本实验通过测定中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬功能，了解其吞噬能力，从而评估机体免疫功能。
三、实验材料1. 实验动物：小白鼠（6-8周龄，体重20-25g）。
2. 试剂：中性粒细胞和巨噬细胞分离试剂、鸡红细胞悬液、瑞氏染液、生理盐水、0.1%吐温-80、磷酸缓冲盐溶液（PBS）等。
3. 仪器：显微镜、离心机、移液器、培养皿、载玻片、试管等。
四、实验方法1. 中性粒细胞和巨噬细胞分离将小白鼠处死，无菌操作取腹腔液，加入中性粒细胞和巨噬细胞分离试剂，充分混匀后室温放置5分钟。
低速离心（1000r/min，5分钟）分离中性粒细胞和巨噬细胞。
2. 吞噬功能测定（1）中性粒细胞吞噬功能测定取分离的中性粒细胞，加入鸡红细胞悬液，37℃孵育30分钟。
低速离心（1000r/min，5分钟）弃上清，加入瑞氏染液，染色5分钟。
洗涤、干燥、封片，显微镜下观察中性粒细胞吞噬鸡红细胞的情况。
（2）巨噬细胞吞噬功能测定取分离的巨噬细胞，加入鸡红细胞悬液，37℃孵育30分钟。
低速离心（1000r/min，5分钟）弃上清，加入瑞氏染液，染色5分钟。
洗涤、干燥、封片，显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况。
3. 结果分析计算吞噬百分率和吞噬指数。
吞噬百分率=吞噬有鸡红细胞的细胞数/细胞总数×100%；吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的细胞数。
五、实验结果1. 中性粒细胞吞噬功能吞噬百分率：60.5%；吞噬指数：1.2。
2. 巨噬细胞吞噬功能吞噬百分率：70.2%；吞噬指数：1.8。
六、讨论本次实验成功测定了中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬功能。
巨噬细胞的实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本生物学特性；2. 掌握巨噬细胞吞噬功能实验的操作方法；3. 分析巨噬细胞吞噬功能的影响因素。
二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中的一种重要细胞，具有吞噬、清除病原体、分泌细胞因子等生物学功能。
本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，评估巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：小鼠；2. 实验试剂：鸡红细胞、生理盐水、冷亚甲蓝染色液、培养皿、显微镜、移液器等。
四、实验方法1. 实验动物处理：取健康小鼠，腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导腹腔巨噬细胞产生。
2. 巨噬细胞收获：实验前3小时，将小鼠处死，无菌操作下取出腹腔液，加入等体积生理盐水，混匀后离心（1000r/min，10min），弃上清，用生理盐水洗涤2次，沉淀即为巨噬细胞。
3. 巨噬细胞吞噬实验：将收获的巨噬细胞加入培养皿中，加入适量鸡红细胞，37℃培养1小时。
4. 巨噬细胞染色：将培养好的巨噬细胞加入冷亚甲蓝染色液，染色5分钟。
5. 巨噬细胞观察：用显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况，计算吞噬百分率和吞噬指数。
五、实验结果与分析1. 实验结果：显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，部分鸡红细胞被吞噬细胞包裹。
2. 实验分析：（1）吞噬百分率：吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%；（2）吞噬指数：吞噬的鸡红细胞总数/吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数。
六、实验结论本实验成功观察到了巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，说明巨噬细胞具有吞噬功能。
吞噬百分率和吞噬指数可以作为评估巨噬细胞吞噬功能的重要指标。
七、实验讨论1. 巨噬细胞在免疫系统中具有重要作用，吞噬功能是其重要生物学特性之一。
2. 本实验采用腹腔巨噬细胞，操作简便，结果可靠。
3. 影响巨噬细胞吞噬功能的主要因素包括：巨噬细胞的来源、成熟度、环境因素等。
4. 本实验为后续研究巨噬细胞吞噬功能的影响因素提供了基础。
八、实验总结本实验通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，成功评估了巨噬细胞的吞噬功能。
吞噬现象观察实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
吞噬活性检测实验报告
一、实验背景吞噬活性是机体免疫系统中的重要功能之一，主要由巨噬细胞等免疫细胞执行。
吞噬活性检测对于研究免疫细胞的生物学特性、疾病诊断及药物研发具有重要意义。
本实验旨在通过体外实验方法，检测巨噬细胞的吞噬活性，并分析影响吞噬活性的因素。
二、实验材料与仪器1. 材料：（1）小鼠巨噬细胞：购自某生物技术公司；（2）金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）：购自某微生物菌种保藏中心；（3）生理盐水、PBS缓冲液、DMEM培养基等；（4）台盼蓝染液、二甲基亚砜（DMSO）等；（5）激光共聚焦显微镜、倒置显微镜、流式细胞仪等。
2. 仪器：（1）CO2培养箱；（2）低温高速离心机；（3）超净工作台；（4）电子天平；（5）移液器、吸管等。
三、实验方法1. 巨噬细胞的制备与培养（1）将小鼠巨噬细胞接种于培养瓶中，置于CO2培养箱中培养；（2）待细胞生长至80%融合时，用PBS缓冲液洗涤细胞，加入新鲜DMEM培养基，调整细胞浓度为1×10^6个/mL；（3）将细胞悬液均匀接种于24孔板中，每孔200μL，置于CO2培养箱中培养。
2. 吞噬实验（1）将金黄色葡萄球菌接种于培养瓶中，培养至对数生长期；（2）收集菌液，用生理盐水洗涤3次，调整菌浓度为1×10^8个/mL；（3）将巨噬细胞与金黄色葡萄球菌混合，比例分别为1:1、1:5、1:10，置于CO2培养箱中培养1小时；（4）收集混合细胞，用PBS缓冲液洗涤3次，加入台盼蓝染液，室温下染色5分钟；（5）用流式细胞仪检测细胞内台盼蓝的阳性率，计算吞噬活性。
3. 影响吞噬活性的因素分析（1）观察不同温度（37℃、42℃、45℃）对吞噬活性的影响；（2）观察不同pH值（pH 6.5、7.0、7.5）对吞噬活性的影响；（3）观察不同细胞浓度对吞噬活性的影响。
四、实验结果1. 吞噬活性检测结果在不同比例的巨噬细胞与金黄色葡萄球菌混合培养后，细胞内台盼蓝的阳性率随着细胞比例的增加而增加，说明吞噬活性随着细胞比例的增加而增强。
巨噬细胞的吞噬作用
巨噬细胞的吞噬作用——巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞实验前言：病原微生物一旦突破体表防御屏障侵入体内，首先接触的是遍布全身的大、小吞噬细胞，他们分布于血液和组织中，并可以在某些趋化因子的作用下被吸引至微生物侵入部位。
吞噬细胞依据其形态大小分为两大类：一类是血液中的单核细胞及从血液游走到血管外并固定于各组织中的巨噬细胞，称为大吞噬细胞；另一类是血液中的嗜中性粒细胞称为小吞噬细胞。
它们是机体非特异性免疫的重要因素。
今我设计的实验是检测巨噬细胞的吞噬功能，淀粉可以在实验动物腹腔内引起非感染性炎症渗出，在腹腔局部聚集较多巨噬细胞；将鸡红细胞注入实验动物腹腔内，可检测腹腔内的巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬功能。
【实验目的】熟悉巨噬细胞吞噬功能的体外测定功能。
【实验原理】当鸡红细胞注入小鼠腹腔内，巨噬细胞可借助细胞表面的免疫识别受体或直接吞噬鸡红细胞而将其消化，通过显微镜观察该吞噬现象，可了解巨噬细胞的吞噬功能。
【实验材料及试剂配制】（1）体重25g左右的小鼠。
（2）5ml、1ml无菌注射器，6号、9号针头，10ml离心管，清洁载玻片，烧杯，解剖剪，眼科镊，湿盒，解剖板，图钉，37℃水浴箱。
（3）4%淀粉肉汤：称面粉3克、可溶性淀粉5克、加营养肉汤至100ml，混匀，先微火加热，不断搅拌使成糊状，再高压灭菌。
临用时，与无菌营养肉汤等量混合。
（4）D-Hank’s液：NaCl 8.0g、KCl 0.4g、Na2HPO4•H2O 0.12g、KH2PO4 0.06g、葡萄糖 1.0g、1%酚红 2.0ml。
将上述成分溶于1000ml双蒸水，分装于500毫升盐水瓶，8磅15min灭菌，4℃冰箱保存，临用时用3.5%NaHCO3调pH至7.2~7.4. （5）生理盐水（6）2%鸡红细胞：无菌操作抽取鸡翅静脉血，抗凝，置于离心管中，用无菌生理盐水洗3次，最后一次离心2000r/min, 10min，按积压将鸡血细胞用Hank’s液配成2%浓度。
巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告
巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告实验目的：观察巨噬细胞的吞噬作用，了解巨噬细胞在防御机体内外侵犯的微生物和异物时的作用机制。
实验原理：巨噬细胞是一种能够吞噬和消化体内外各种微生物及其他异物的免疫细胞，其作用主要通过两种方式实现：异物与巨噬细胞表面的膜蛋白结合，通过膜囊泡（吞噬体）形成吞噬泡；吞噬泡与溶酶体融合，形成溶酶体-吞噬体复合物，完成异物的吞噬和溶解。
实验步骤：1.实验前准备1.1. 预先培养巨噬细胞至对数生长期，并调整细胞浓度为1×10^6 cells/mL；1.2.准备巨噬细胞富集培养液、悬浮液和含有正常培养液的对照组，分别标记为A、B和C组；1.3.准备大肠杆菌溶菌液；1.4.准备各组的显微镜载玻片。
2.差速计数法确定吞噬指数2.1.取3只显微镜载玻片，分别滴加A、B和C组巨噬细胞液，每个组各滴2滴；2.2.于25℃恒温槽中孵育15分钟；2.3.分别在显微镜下用10倍镜进行巨噬细胞数目计数；2.4.计算巨噬细胞吞噬指数，公式如下：吞噬指数=A-B/C-B。
3.吞噬试验3.1.在显微镜盖片上涂抹一层巨噬细胞富集液；3.2.将滴管中的巨噬细胞悬浮液加入巨噬细胞富集液之上，形成巨噬细胞层；3.3.在巨噬细胞层上滴加大肠杆菌溶菌液，并进行密封；3.4.将盖片置于37℃恒温槽中孵育30分钟；3.5.取出巨噬细胞盖片，用0.01%新洁尔灭溶液洗涤；3.6.加入吉姆萨酮染色试剂，显色15分钟后以洁净水洗净；3.7.在显微镜下观察巨噬细胞内的大肠杆菌数量。
4.数据处理4.1.统计吞噬细胞内大肠杆菌数量；4.2.分析吞噬指数和巨噬细胞内大肠杆菌数量的关系。
实验结果：根据差速计数法得出的巨噬细胞吞噬指数为0.67、在吞噬试验中观察到，巨噬细胞内存在许多吉姆萨酮染色的大肠杆菌。
实验讨论：巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中重要的第一道防线，可以吞噬和杀灭多种病原菌和异物。
实验结果表明，巨噬细胞吞噬指数为0.67，说明巨噬细胞具有较强的吞噬能力。
巨噬细胞吞噬功能检测
巨噬细胞吞噬功能测定【实验原理】巨噬细胞对颗粒性异物具有很强的吞噬功能。
当鸡红细胞被注入小鼠腹腔时，会被腹腔中的巨噬细胞吞噬。
取小鼠腹腔液涂片、染色，在显微镜下可见到鸡红细胞被吞噬的现象。
计算吞噬百分率和吞噬指数，可判断吞噬细胞的吞噬功能。
【试剂和器材】1. 动物体重20-25g的健康小鼠。
2. 1%鸡红细胞（CRBC）悬液自鸡液静脉或心脏采血，放Alsever液中保存（鸡血与Alsever 液1：5混合），置4℃可有效保存1个月，临用前用生理盐水将CRBC洗3次，按红细胞压积配成1%CRBC悬液。
3. 6%可溶性淀粉肉汤培养基肉汤培养基100ml加入可溶性淀粉6g，混匀，置100℃水浴煮沸消毒。
4. 其他试剂瑞氏（Wright）染液、生理盐水等。
5. 器材无菌注射器及针头、剪刀、镊子、解剖盘、载玻片、显微镜等。
【步骤和方法】1.试验前3天，于小鼠腹腔注射6%可溶性淀粉肉汤培养基1ml。
2.于试验当天，小鼠腹腔注入1%CRBC悬液0.5ml，并轻轻揉腹。
3.30min后小鼠颈椎脱臼处死，取腹腔液涂片，自然干燥后瑞氏染色，用油镜观察。
【结果判定】镜下可见吞噬细胞核呈蓝色，被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形，其胞浆呈红色而核被染成蓝色。
呈油镜下随机观察100个巨噬细胞，计数吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数和吞噬的鸡红细胞总数。
吞噬百分率= (吞噬CRBC的巨噬细胞数/100)*100%吞噬指数= 吞噬细胞吞噬的CRBC总数/100【注意事项】1.涂片的薄厚要适当，否则影响计数。
2.小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。
3.如小鼠腹腔液过少，可注入适量生理盐水。
4.剪开小鼠腹腔时应避免出血，否则将影响试验结果。
5.被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化，时间过短未被吞噬，必须掌握好吞噬作用时间。
阿氏液配方：葡萄糖 2.05克柠檬酸钠0.8克柠檬酸0.055克氯化钠0.42克加蒸馏水至100毫升，加热溶解后将pH值调到6.1，经过69千帕，15分钟的高压灭菌，放置在4℃的环境内，保存备用。
实验四巨噬细胞吞噬现象的观察
• 1．小鼠腹腔注射1％旳鸡红细胞悬液1ml，轻揉 腹部使鸡细胞分散。
• 2 ． 15～20分钟后，用颈椎脱臼法处死小鼠。 • 3 ．将小鼠置于解剖盘中，剪开腹腔，把内脏推
向一侧，用吸管吸收腹腔液，滴在载玻片上，加 盖玻片。显微镜下观察。
五、作业
• 绘制小鼠巨噬细胞吞噬鸡血红细胞旳过程 图。
三、试验用具
• 1．器材 • 显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、
注射器、吸管、吸水纸 • 2．试剂 • 生理盐水、Alsever溶液、4％台盼蓝染液 • 3．材料 • 小白鼠、1%鸡血红细胞。
四、试验ห้องสมุดไป่ตู้节
• 试验前一天取小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤液(含 台盼蓝)1毫升（连续注射三天效果很好）。
试验四 巨噬细胞吞噬现象旳观察
一、试验目旳
• 1. 观察巨噬细胞旳吞噬活动。 • 2. 掌握小鼠腹腔注射给药和脱颈椎处死措
施。
二、试验原理
• 高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细 胞和嗜中性粒细胞)，专司吞噬作用，为非 持异免疫功能旳主要构成部分。
• 小鼠腹腔腹腔注射 淀粉肉汤液，可诱导巨 噬细胞。
实验六小鼠巨噬细胞吞噬现象的观察
吞噬速率测定
通过定量分析，计算出巨噬细胞的吞 噬速率，结果表明吞噬速率与细胞活 性呈正相关。
结果分析
吞噬机制探讨
根据实验结果，分析巨噬细胞吞 噬作用的机制，包括细胞膜的运 动、细胞骨架的调节以及与吞噬
相关的酶类作用等。
吞噬与免疫关系
探讨巨噬细胞吞噬作用与免疫系统 的关系，分析其在机体防御和炎症 反应中的作用。
利用荧光物质标记细胞或 外来物质，以便在显微镜 下观察和追踪。
细胞培养技术
在体外培养巨噬细胞，以 便观察其吞噬行为。
显微观察技术
通过显微镜观察巨噬细胞 吞噬现象，记录并分析实 验结果。
03
实验步骤
准备实验材料和试剂
实验材料
小鼠巨噬细胞、细菌悬液
试剂
生理盐水、培养基、染色剂
器材
显微镜、培养皿、移液管、离心机
1. 用染色剂对细胞进 行染色。
步骤三：染色与观察
实验操作流程
01 2. 在显微镜下观察并记录吞噬现象，如吞 噬数量、吞噬程度等。
02
步骤四：数据记录与处理
03
1. 详细记录实验数据，包括吞噬数量、吞 噬程度等。
04
2. 对实验数据进行统计分析，得出结论。
数据记录和处理
01
使用表格或电子表格记录每组实验数据。
学习并掌握相关实验技术和方法
通过本实验，学生将学习并掌握相关的实验技术和方法，如细胞培养、显微镜观 察、染色等技术。这些技术是生物学和医学领域中常用的基本技能，对于学生未 来的学习和工作具有重要意义。
通过实践操作，学生可以加深对相关理论知识的理解，提高实验操作能力和科学 探究能力。此外，本实验还可以为学生提供实践经验，为后续的课程和科研工作 打下基础。
巨噬细胞吞噬实验报告
巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞是一类重要的免疫细胞，它们在机体内起着清除病原体和细胞垃圾的重要作用。
巨噬细胞通过吞噬和消化来清除这些有害物质，从而维护机体的健康。
本次实验旨在探究巨噬细胞的吞噬能力，并观察不同条件下巨噬细胞的吞噬效果。
实验材料和方法：1. 巨噬细胞：从小鼠腹腔摘取巨噬细胞，经过离心、洗涤后制备成细胞悬液。
2. 有害物质：使用荧光染料标记的细菌和细胞碎片作为巨噬细胞吞噬的目标。
3. 细胞培养基：提供适宜的营养和环境条件供巨噬细胞生长。
4. 显微镜：观察和记录巨噬细胞的吞噬情况。
实验步骤：1. 将巨噬细胞悬液均匀分配到培养皿中，加入适量的细胞培养基，使巨噬细胞处于良好的生长状态。
2. 在巨噬细胞培养基中加入荧光染料标记的细菌和细胞碎片，使其与巨噬细胞悬液充分接触。
3. 将培养皿置于恒温培养箱中，以37摄氏度、5%二氧化碳的条件下培养巨噬细胞。
4. 在培养的不同时间点，取出培养皿进行显微镜观察，并记录巨噬细胞吞噬的数量和程度。
5. 对实验结果进行统计和分析，得出结论。
实验结果：在观察巨噬细胞吞噬的过程中，我们发现了一些有趣的现象。
首先，在实验开始的早期，巨噬细胞对细菌和细胞碎片的吞噬速度较快，数量也相对较多。
然而，随着时间的推移，巨噬细胞的吞噬速度逐渐减慢，吞噬的数量也逐渐减少。
这表明巨噬细胞在一段时间内能够高效地吞噬有害物质，但随着吞噬的进行，巨噬细胞的饱和度逐渐增加，导致吞噬速度下降。
此外，我们还发现了巨噬细胞对不同类型有害物质的吞噬能力存在差异。
在实验中，我们使用了荧光染料标记的细菌和细胞碎片作为巨噬细胞的吞噬目标。
观察结果显示，巨噬细胞对细菌的吞噬效果较好，吞噬数量较多，而对细胞碎片的吞噬效果相对较差。
这可能是因为细菌具有较小的体积和较强的运动能力，更容易被巨噬细胞捕获和吞噬。
而细胞碎片可能较大且较为静态，巨噬细胞需要更多的时间和能量来吞噬。
结论：通过本次实验，我们对巨噬细胞的吞噬能力有了更深入的了解。
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一．实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。
2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
二．实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。
连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。
2.台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。
活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。
巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。
是一种溶酶体染色的方法。
3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三．实验材料及设备1.实验材料：a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备：a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四．实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。
b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。
c)一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。
按摩小鼠腹部。
d)20-30分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（0.9%NaCl）按摩小鼠腹部。
e)3分钟后，引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉层），用无针头的注射器吸取腹腔液。
g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观察。
2.观察在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。
注意避免玻片液体干涸。
五．实验结果小鼠红细胞巨噬细胞鸡红细胞已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞图1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（100X物镜不染色）左上角示未知种类细胞100x物镜放大倍数，光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。
巨噬细胞吞噬实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本特性及其在免疫反应中的作用。
2. 观察和分析巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。
3. 掌握显微镜下观察细胞吞噬作用的实验技术。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中重要的细胞类型，具有强大的吞噬能力。
当巨噬细胞遇到抗原时，会通过吞噬作用将其捕获、消化并清除。
本实验以鸡红细胞作为抗原，观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，从而了解巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：健康小鼠（体重20-25g）2. 实验器材：解剖显微镜、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、剪刀、镊子、吸管等3. 实验试剂：生理盐水、鸡红细胞悬液、冷亚甲蓝染色液、无菌淀粉液四、实验步骤1. 小鼠腹腔巨噬细胞诱导：实验前3小时，将小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导腹腔巨噬细胞渗出。
2. 鸡红细胞悬液制备：将鸡红细胞用生理盐水洗涤三次，制成红细胞悬液，浓度为1×10^9/L。
3. 腹腔巨噬细胞收集：将小鼠处死，打开腹腔，用生理盐水冲洗腹腔，收集腹腔液。
4. 巨噬细胞染色：取腹腔液1ml，加入1ml冷亚甲蓝染色液，混匀，染色5分钟。
5. 制片观察：取载玻片，滴加1滴腹腔液，盖上盖玻片，用解剖显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的形态学变化。
五、实验结果1. 在显微镜下观察到，巨噬细胞呈圆形或椭圆形，细胞质丰富，细胞核较大，呈蓝色。
2. 鸡红细胞呈圆形，直径约为7-8μm，呈红色。
3. 观察到部分巨噬细胞周围有红细胞聚集，说明巨噬细胞已经吞噬了鸡红细胞。
4. 部分巨噬细胞内部可见吞噬的红细胞，且红细胞被巨噬细胞质包围，说明巨噬细胞已经将鸡红细胞包裹在内。
六、实验分析1. 本实验观察到巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，说明巨噬细胞具有吞噬能力。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞通过质膜内陷形成吞噬泡，将鸡红细胞包裹在内，然后将其消化。
3. 吞噬作用是机体免疫系统的重要组成部分，有助于清除体内的病原体和衰老细胞。
巨噬细胞吞噬功能试验
巨噬细胞吞噬功能试验
取前臂斑蛰发泡后的皮泡液。
巨噬细胞能吞噬和杀灭胞内寄生虫、细菌、自身衰老和死亡的细胞以及肿瘤细胞，参与机体的免疫防御、免疫自稳、免疫监视功能。
【正常参考值】
巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率 61.39～64.15 %
吞噬指数 1.009～1.107
【异常结果分析】
当手术切除肿瘤，或放疗、化疗后病情好转，吞噬率及吞噬指数可回升，因此可作为肿瘤疗效判断的参考指标。
恶性肿瘤病人（如食管癌、胃癌、肠癌、乳腺癌、宫颈癌等）病人的吞噬百分率常在45％以下，吞噬指数也下降。
巨噬细胞吞噬功能检测共18页
第一步
腹腔注射: 2ml 2% 鸡红细胞 作用30min 标记小鼠
第二步
材料
镊子及眼科剪刀 注射器 PBS 缓冲液 15ml, 50-ml 离心管 离心机 涂片机
方法
6-ml注射器吸取3.0 ml PBS ，注射进小 鼠腹膜腔 按摩小鼠腹部3-5 min. 颈椎脱位法处死小鼠，酒精消毒 腹白线剪口，暴露腹膜壁
吸管进入腹膜腔 吸取腹膜液约8ml 收集的腹膜液重置于50ml离心管中离心
制作腹腔巨噬细胞涂片
一滴细胞悬液置于载玻片，1500 rpm离心 5min后风干。 甲醛固定，干燥后吉姆萨染色
镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞
61、奢侈是舒适的，否则就不是奢侈 。—— CocoChanel 62、少而好学，如日出之阳；壮而好学 ，如日 中之光 ；志而 好学， 如炳烛 之光。 ——刘 向 63、三军可夺帅也，匹夫不可夺志也。 ——孔 丘 64、人生就是学校。在那里，与其说好 的教师 是幸福 ，不如 说好的 教师是 不幸。 ——海 贝尔 65、接受挑战，就可以享受胜利的喜悦 。—— 杰纳勒 尔·乔治 ·S·巴 顿
谢谢！
巨噬细胞吞噬功能检测
时间反复无常，鼓着翅膀飞逝
实验四 巨噬细胞吞噬功能检测
形态学特征
来源
来自于骨髓 腹腔中有固有的巨噬细胞和炎性巨噬细 胞 炎性巨噬细胞可以通过抗原刺激诱导
巨噬细胞功能
固有免疫：非特异性吞噬 获得性免疫：细胞免疫－抗原提呈
试剂与器材
腹腔免疫小鼠 1. 注射器 2. 1% 淀粉溶液 3. PBS 缓冲液 4. 8周昆明鼠
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实验一巨噬细胞吞噬细胞功能实验
原理：巨噬细胞具有活跃的吞噬功能，能清除体内抗原物质及变性的细胞，在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。
巨噬细胞受抗原刺激后活化，可使其吞噬功能明显增强。
此次实验我们用体内法来介绍巨噬细胞的吞噬功能。
体内法：在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后，再给小鼠腹腔注射鸡红细胞，30min后处死小鼠，取出腹腔液，以冷美兰染色，显微镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数，及观察巨噬细胞内被杀死而染为紫色的鸡红细胞的形态、数目，以判断巨噬细胞的杀伤能力，由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。
方法：（1）试验前3天，小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。
（2）实验时，每只小鼠腹腔注射鸡红细胞1ml，轻柔腹部，使鸡红细胞在腹腔中分布均匀，利于吞噬。
（3）30min后，将小鼠拉颈处死，固定，打开腹腔暴露肠管，用滴管取出腹腔液，均匀涂布于载玻片上，然后再滴一小滴0.06%冷美兰溶液，盖上盖玻片
（4）高倍镜下进行观察，计数。
实验结果：100个巨噬细胞中已吞噬了鸡红细胞的
巨噬细胞的数目
吞噬百分率 = ———————————————————×100%
100个巨噬细胞
100个已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞中
鸡红细胞的数目
吞噬指数 = ———————————————————×100%
100个已经吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞
结果分析：正常值
吞噬百分率：62.77±1.38
吞噬指数：1.058±0.049
我们的实验结果偏低，原因可能是腹腔注射时没有完全注射到腹腔内，部分残留在腹腔壁上。
实验二沉淀反应（双向琼脂扩散实验）
原理：双向琼脂扩散试验是定性实验。
将可溶性抗原与相应抗体与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内，两者均可扩散，在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。
如果不是相应的抗原与抗体，就不出现沉淀线。
本试验常用于分析抗原抗体的纯度及相互关系。
方法：（1）将熔化的1%琼脂加在玻片上，3ml/板。
（2）待琼脂凝固后，在板上打孔。
（3）中央孔加抗体，上下孔加抗原1，左右孔加抗原2，每孔10μl。
（4）将琼脂板置于湿盒内，37℃ 24h后观察结果。
结果：在中央孔与周围孔之间，如出现沉淀线，则为阳性反应，提示有相应抗体与抗原反应。
结果分析：（1）琼脂铺板应一次铺成，均匀平滑。
（2）打孔时要垂直打孔，防止孔壁破裂。
（3）加样时避免样品量过多溢出，影响沉淀线的生成。