红细胞计数检验PPT课件

价贵；环境 健康人群普查； 要求较高 大批量标本筛检
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质量保证（显微镜法）
显微镜法红细胞计数误差来源有三个
技术误差 仪器误差 分布误差
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技术误差
31 2 3 4
采血部位不当 稀释倍数不当
充液不当 血液凝固
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参考值
RBC存在年龄 与性别的差异
成年男性：（4.09～5.74）×1012/L 成年女性：（3.68～5.13）×1012/L 新生儿：（5.2～6.4）×1012/L 婴儿： （4.0～4.3）×1012/L 儿童： （4.0～4.5）×1012/L
显微镜计数法 血液分析仪法
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检测原理
显微镜计数法（重点）
RBC未排除 白细胞数量影响
用等渗液稀释血液后，滴入 血细胞计数板，计数一定范 围内的红细胞，经换算得每 升血液中的红细胞数。
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操作
10ul末梢血或EDTA抗凝静脉血
加入2ml等渗液中，混匀
混悬液充入改良牛鲍计数板
高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个 中方格内的红细胞总数A。
女性 87～112 g/L
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临床意义（同红细胞计数）
判断贫血程度优于红细胞计数 临床应用注意事项
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方法学评价
SDS-Hb测定法（ HiCN替代方法）
优点：操作简单 ，试剂无毒，结果准确， 重复性好 。
缺点：SDS质量差异大；消光系数未定， 不能直接计算Hb浓度；不能测定SHb ；
SDS破坏白细胞。
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方法学评价
AHD575测定法
优点：试剂简易无毒、呈色稳定、准 确性与精密性较高。
缺点：575nm波长比色，血液分析仪 上应用受限，不能转化HbF。
换算？
RBC/L=（A/5)×25×10×106×200
=(A/100)×1012 .
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Neubauer计数盘
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血液分析仪法
采用电阻抗法或激光检测法
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方法学评价
方法
显微镜 计数法
血液分 析仪法
优点
传统方法，设 备简单，廉价
操作便捷， 易于标准化， 精密度高
缺点
适用范围
费时费力， 参考方法；分析 精密度低 仪异常结果复核
存在形式 还原血红蛋白（Fe2+ ） 氧合血红蛋白 碳氧血红蛋白 硫化血红蛋白 高铁血红蛋白（Fe3+ ）
所占比例 正常成人>99%
1%
Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。
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检测原理
血液的物理特性：比重法，折射仪法 Hb的分子组成：全血铁法 Hb与O2可逆性结合：血气分析法 Hb衍生物光谱特点：HiCN，SDS-Hb等
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HiCN法检测原理
红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种 血红蛋白（SHb除外）氧化为高铁血红蛋白 （Hi），后者与试剂中的 CN - 结合生成棕红 色的氰化高铁血红蛋白（HiCN）。在 540nm处测定HiCN的吸光度，直接换算Hb 浓度或在标准曲线上查得Hb浓度。
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操作
20ul血液加入5ml转化液中，充分溶 血转化后，以转化液调零，测定标本 （HiCN）在540nm的吸光度A。
血管和刻度吸管，保证试剂质量。 技术操作：控制技术误差。 废弃物：妥善处理废液。
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参考值
Hb存在年龄 与性别的差异
成年男性：131～172 g/L 成年女性：113 ～151 g/L 新生儿：180～190 g/L 婴儿： 110～120 g/L 儿童： 120～140 g/L 老年（＞70岁）：男性 94～122 g/L
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方法学评价
HiN3测定法
优点：准确度、精密度较高。 缺点：试剂有毒、HbCO 转化慢。
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方法学评价
CATB测定法
优点：溶血强，不破坏白细胞，适用于 血液分析仪。 缺点：精密度、准确度低。
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质量保证（比色法）
标本：引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。 器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采
计算
直接计算（符合WHO标准的分光光度计） Hb＝ A×64458÷44000×251＝A×367.7
以 HiCN参考液绘制标准曲线，利用吸光度 A在标准曲线上查出Hb浓度
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方法学评价
HiCN测定法（参考方法）
优点：操作简单 ，反应速度快，产物 稳定，便于质控。
缺点：试剂有毒、高WBC造成试剂 混浊 、HbCO 转化慢、不能测SHb。
细胞内在缺陷（遗传性缺陷）
膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。
细胞外在异常（获得性因素）
免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。 非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及
脾亢等。
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血液丢失：急、慢性失血性贫血
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外伤引发的出血
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血红蛋白（hemoglobin，Hb ）
第二章/第一节红细胞检查
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正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡 ，血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。
血液中红细胞数量可 通过红细胞计数获得
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红细胞计数（red blood cell count, RBC）
测定单位体积血液中红细胞的数量 诊断贫血及红细胞增多的指标之一 红细胞计数的方法
在有核红及网织红内合成 是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白 Hb在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，
中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状 合成速度受促红细胞生成素（EPO）与雄激
素调节
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血红蛋白组成
珠蛋白
Hb （四聚体）
血红素
2条α链 2条非α链 原卟啉 铁原子
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血液中血红蛋白的存在形式
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病理性减少（贫血）
贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比 容低于参考值下限。 病因学分类
3 血管丢失
32 破坏过多
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31 生成减少 21
红细胞生成减少
骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍 性贫血。 造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、 缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。
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红细胞破坏过多
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临床意义
生理性 变化
RBC＞参考值上限，RBC增多 RBC＜参考值下限，即贫血
病理性 变化Βιβλιοθήκη .15生理性增多
生理性缺氧引起
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6个月-2岁婴儿
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病理性增多
相对性增多：见于呕吐、高热等引起暂时性
血液浓缩。通过补液，血容量恢复正常，红细胞 增多即消失。
绝对性增多：
①继发性增多，由EPO代偿性或非代偿性增高引起。 ②原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。