紫外可见分光光度法含量测定
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定无机和有机物质的浓度。
在本实验中，我们将利用紫外可见分光光度法测定苯酚的含量。
下面是实验步骤。
实验原理苯酚在紫外和可见光区都有吸收峰，根据它的吸收峰特征可以测定其含量。
在本实验中，我们将利用苯酚在240 nm处的吸收峰进行测定。
实验仪器、试剂以及玻璃仪器仪器：紫外可见分光光度计试剂：苯酚、甲醇玻璃仪器：比色皿、移液管、醇灯、玻璃棒、烧杯等。
实验步骤步骤1：制备苯酚样品溶液将1 g的苯酚粉末称到50 mL的烧杯中，加入约30 mL甲醇并混合均匀，然后用甲醇稀释到50 mL。
最后用玻璃棒搅拌至完全溶解。
步骤2：制备苯酚标准曲线将制备好的苯酚样品溶液定容到50 mL，在紫外可见分光光度计中，设置检测波长为240 nm，然后将苯酚标准溶液分别放入比色皿中，取0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL苯酚标准溶液，然后用甲醇稀释成10 mL。
最后，利用紫外可见分光光度计测量各个标准溶液的吸光度。
步骤3：测定未知样品将待测样品取5 mL，加甲醇稀释成50 mL，然后放到紫外可见分光光度计中测量样品的吸光度。
根据标准曲线可以计算出样品中苯酚的含量。
注意事项1.制备苯酚样品溶液的时候，要充分混合均匀，防止苯酚沉淀。
2.操作过程中，不可碰触紫外光管等易损部件。
3.实验前，应进行紫外可见分光光度计的预热操作，以保证测试准确性。
实验结果及分析根据实验测定的吸光度可以绘制出苯酚标准曲线，通过计算未知样品的吸光度，即可求出其苯酚含量。
对测量的结果进行分析，可以了解到此方法的准确性和可行性。
总结本实验介绍了紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤。
通过本实验的学习，不仅能够掌握该分析方法的原理、仪器和操作要点，还能够提高实验技巧，从而为今后的实验研究奠定基础。
紫外可见分光光度法测定维生素B12含量
紫外可见分光光度法测定维生素B12含量作者:作者：靳月琴郭丽敏宋建荣杨金香刘海林陈文斌作者单位：长治医学院化学综合实验室(046000)【摘要】目的：探讨维生素B12片剂中维生素B12的含量测定方法。
方法：紫外可见分光光度法。
样品以标准曲线法为测定含量依据，在361 nm的波长处测定吸光度。
结果：维生素B12在5 μg/mL～100 μg/mL浓度范围线性关系良好。
回归方程Y=0.0193X+0.048,r=0.9937。
结论：测定的5个不同批号样品其含量均在标示范围之内,该方法简便、准确、灵敏度高。
【关键词】紫外可见分光光度法；维生素B12片剂；含量测定The Content Measurement of V-B12 by UV-VisJin Yueqin,Guo Limin，Shong Jianrong,et al.Department of Chemistry Complex Laboratory of Changzhi Medical CollegeAbstract Objective：The measurement method of V-B12 content in tablet is established.Methods：UV-Vis The absorption is measured at 361 nm according to calibration carve method.Results：The linear range is in 5 μg/mL～100 μg/mL and the regression equation is Y=0.0193X+0.048,r=0.9937.Conclusion：The measurement is done in 5 kind of lot number and the result indicate that the V-B12 content in tablet corresponds with standard range. This method is simple, accurate and high sensitivity.Key words UV-Vis；V-B12 tablet；Content measurement维生素B12是含钴的有机药物，为深红色结晶，又称为红色维生素B12或氰钴胺，是唯一含有主要矿物质的维生素。
紫外分光光度法阿司匹林的含量测定
紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。
操作简单、准确度高、重现性好。
波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。
紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。
最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。
朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。
即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
A= lg1/T = εcl (Lambert-Beer定律)紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。
必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。
②单色器。
它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。
③试样容器，又称吸收池。
供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。
容器的光程一般为0.5～10厘米。
④检测器，又称光电转换器。
常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。
近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。
⑤显示装置。
这部分装置发展较快。
较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
仪器类型有：单波长单光束直读式分光光度计，单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。
实验报告-紫外-可见分光光度法测铁的含量-
一、实验目的：
了解朗伯-比尔定律的应用，掌握邻二氮菲法测定铁的原理；了解分光光度计的构造；掌握分光光度计的正确使用方法；学会吸收曲线的绘制和样品的测定原理。
二、实验原理
邻菲啰啉是测定微量铁的较好试剂。
在pH＝2～9 的条件下，邻菲啰啉与Fe2+生成稳定的橙红色配合物，其反应式如下：
Fe3+能与领二氮菲生成淡蓝色配合物（不稳定），故显色前加入还原剂：盐酸羟胺使其还原为Fe2+。
三、仪器及试剂
紫外可见分光光度计、铁标准溶液：含铁0.01mg/mL、0.1%邻菲罗啉水溶液、10%盐酸羟胺水溶液、1mol/lNaAc缓冲溶液（pH4.6）。
四、实验步骤
1．吸收曲线的绘制和测量波长的选择
吸取0.0mL和6.0mL 铁标准溶液分别注入两个50 mL容量瓶中，依次加入5mlNaAc溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在440~560nm之间，每隔0.5nm测吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度A 为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。
2、标准曲线的绘制
分别吸取铁的标准溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml于6只50ml容量瓶中，依次分别加入5ml醋酸－醋酸钠缓冲溶液，2.5ml盐酸羟胺溶液，5ml邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，在其最大吸收波长下，用1cm比色皿，以试剂溶液为空白，测定各溶液的吸光度，以铁含量(mg/50ml)为横坐标，溶液相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
五、实验记录及数据处理
（1）绘制曲线图。
（2）。
紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例.
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
A 1 V D
含量%
E 1% 1cm
100
100 %
m
0.582 1 250 100
715 100
5 100% 99.05%
0.0411
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度 ，摇匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度， 摇匀。照紫外-可见分光光度法，在271nm波长处测定吸光度为 0.420。另取甲氧苄啶对照品适量0.05134g，置25ml量瓶中，用 稀醋酸稀释至刻度，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀 释至刻度，摇匀。在271nm波长处测定吸光度为0.416，计算甲 氧苄啶标示量百分含量。
Байду номын сангаас
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
标示量%
cR
Ax AR
D
每支容量
100%
S
0.05134 0.420 25 100 2 25100 0.416 1 1 100% 103.7%
0.1
药物分析/药物的含量测定
紫外可见分光光度 法测定药物含量的 计算实例
制作人：谭韬
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
精密称取对乙酰氨基酚0.04110g，置250ml量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液50ml，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml， 置100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇 匀。依照分光光度法，在257nm波长处测得吸收度为0.582。 按C8H9NO2的百分吸收系数为715计算对乙酰氨基酚的百分含 量
紫外可见分光光度法在黄酮类 含量测定中的应用
论文科目：中药制剂分析题目：紫外可见分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用班级：2012级药物制剂组员：何奇、张三军、段靓琳、杨雪超、赵甜甜可见-紫外分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用概况摘要：本文概述了国内外紫外可见分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的应用现状。
对黄酮类化合物含量测定中常用的紫外可见分光光度法进行归类，并分析总结其优缺点。
对紫外可见分光光度法在黄酮类化合物含量测定中的发展前景进行了展望。
关键词:紫外-可见分光光度法黄酮类化合物含量测定自然界中,黄酮类化合物是广泛存在于天然植物中的一大类化合物,多具有颜色,在植物体内多为次生代谢产物,除部分以游离形式存在外,大部分与糖结合以苷的形式存在。
药理和临床试验表明:芦丁、葛根素等黄酮类化合物有益于心脑血管疾病的预防和治疗,大豆异黄酮、金雀异黄素等化合物均有抗菌作用,另外在抗炎、抗病毒、止咳平喘、祛痰等方雌性激素样作用,黄芩素和黄芩苷等有一定程度的面均有相应的黄酮类化合物存在[1]。
由于黄酮类化合物具有多种多样的生理活性,因此,针对该类化合物定量分析的研究报道很多,如高效毛细管电泳法、高效液相色谱法、薄层扫描法、极谱法等[2]。
但测定黄酮类化合物含量使用最多的方法仍为紫外-可见分光光度法。
1 直接扫描测定尽管黄酮类化合物种类繁多,但其基本母核为2-苯基色原酮,都具有C6-C3-C6的结构,因此,多数黄酮类化合物存在两个特征吸收,即在300~400nm区间由B环桂皮酰基系统电子跃迁引起的带Ñ和在240~285nm之间由A环苯甲酰基系统电子跃迁引起的带Ò。
约有6%的文献采用供试品溶液与对照品溶液通过紫外光谱扫描在以上区间获得共有吸收作为检测波长进行含量测定。
韦英杰等[3]采用化橘红中成份柚皮苷为对照品,经扫描,供试品溶液和对照品溶液在283nm处均有最大吸收,因此,确定283nm为化橘红总黄酮含量测定的检测波长。
2 与A13+形成络合物后测定在黄酮类化合物定量分析方法的研究中,约有88%的文献报道采用黄酮类化合物母核中某些位置的羟基与Al3+发生络合反应形成络合物后进行测定。
紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点
紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点一、本文概述紫外可见分光光度法是一种基于物质对紫外和可见光的吸收特性进行定量分析的方法。
在生物化学和药物分析中，这种方法被广泛应用于测定各类化合物的含量，其中包括黄酮类化合物。
黄酮类化合物，也称为黄酮或黄碱素，是一类具有广泛生物活性的天然产物，它们广泛存在于植物中，并具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，对黄酮类化合物进行准确、快速的定量分析具有重要意义。
本文旨在探讨紫外可见分光光度法在测定总黄酮含量中的应用，并对其方法学进行考察。
我们将详细介绍紫外可见分光光度法的基本原理、实验操作步骤，以及影响测定结果的各种因素。
我们还将讨论该方法的优点和局限性，以及在实际应用中可能遇到的问题和解决方案。
通过对这些内容的全面探讨，我们希望能够为相关领域的研究人员和技术人员提供有益的参考和指导，推动紫外可见分光光度法在黄酮类化合物分析中的应用和发展。
二、紫外可见分光光度法的基本原理紫外可见分光光度法（UV-Vis spectrophotometry）是一种基于物质对紫外和可见光区域内特定波长光的吸收特性进行定量分析的方法。
该方法基于朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即溶液对光的吸收与溶液的浓度成正比，与光通过溶液的路径长度也成正比。
在紫外可见分光光度法中，当一束单色光通过被测溶液时，部分光能会被溶液中的吸光物质吸收，导致光强减弱。
吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）和光程长度（l）之间的关系可以表示为 A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数，它表示单位浓度、单位光程长度下的吸光度。
对于总黄酮含量的测定，黄酮类化合物在紫外可见光区域内有特定的吸收峰，通过测量这些吸收峰处的吸光度，并结合标准品的工作曲线，可以实现对总黄酮含量的定量分析。
紫外可见分光光度法还具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在黄酮类化合物含量测定中得到了广泛应用。
需要注意的是，紫外可见分光光度法只能测定那些具有吸光特性的物质，且受到溶液的颜色、浊度以及其它共存物质的影响。
紫外可见分光光度计测定食品中苯甲酸钠的含量
紫外可见分光光度计测定⾷品中苯甲酸钠的含量紫外可见分光光度计法测定⾷品中苯甲酸钠的含量⼀、实验⽬的1.进⼀步了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，学习UV2550的操作。
2.掌握紫外分光光度法测定苯甲酸钠的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
⼆、实验原理为了防⽌⾷品在储存、运输过程中发⽣腐蚀、变质，常在⾷品中添加少量防腐剂。
防腐剂使⽤的品种和⽤量在⾷品卫⽣标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是⾷品卫⽣标准允许使⽤的主要防腐剂之⼀，其使⽤量⼀般在0.1%左右。
苯甲酸具有芳⾹结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最⼤吸收，测得其吸光度即可⽤标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。
三、仪器和试剂1.紫外可见分光光度计UV2550（⽇本岛津），1.0cm⽯英⽐⾊⽫，50ml容量瓶。
2.NaOH溶液（0.1mol/L）3.苯甲酸钠标准溶液的配制(1)苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过⼲燥的苯甲酸钠1.000g（105℃⼲燥处理2h）于1000mL容量瓶中，⽤适量的蒸馏⽔溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存⼀段时间。
(2)苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液10.00mL于100mL容量瓶中，加⼊蒸馏⽔稀释定容。
(3)系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加⼊0.1mol/LNaOH溶液1.00mL后，⽤蒸馏⽔稀释定容。
得到浓度分别为2.0 mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L和10.0mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。
4.市售饮料的配制准确移取市售饮料0.5ml于50mL容量瓶中，⽤超声脱⽓5min驱赶⼆氧化碳后，加⼊0.1mol/LNaOH溶液1.00mL，⽤蒸馏⽔稀释定容。
紫外可见分光光度法测定维生素B12含量
紫外可见分光光度法测定维生素B12含量作者:作者：靳月琴郭丽敏宋建荣杨金香刘海林陈文斌作者单位：长治医学院化学综合实验室(046000)【摘要】目的：探讨维生素B12片剂中维生素B12的含量测定方法。
方法：紫外可见分光光度法。
样品以标准曲线法为测定含量依据，在361 nm的波长处测定吸光度。
结果：维生素B12在5 μg/mL～100 μg/mL浓度范围线性关系良好。
回归方程Y=0.0193X+0.048,r=0.9937。
结论：测定的5个不同批号样品其含量均在标示范围之内,该方法简便、准确、灵敏度高。
【关键词】紫外可见分光光度法；维生素B12片剂；含量测定The Content Measurement of V-B12 by UV-VisJin Yueqin,Guo Limin，Shong Jianrong,et al.Department of Chemistry Complex Laboratory of Changzhi Medical CollegeAbstract Objective：The measurement method of V-B12 content in tablet is established.Methods：UV-Vis The absorption is measured at 361 nm according to calibration carve method.Results：The linear range is in 5 μg/mL～100 μg/mL and the regression equation is Y=0.0193X+0.048,r=0.9937.Conclusion：The measurement is done in 5 kind of lot number and the result indicate that the V-B12 content in tablet corresponds with standard range. This method is simple, accurate and high sensitivity.Key words UV-Vis；V-B12 tablet；Content measurement维生素B12是含钴的有机药物，为深红色结晶，又称为红色维生素B12或氰钴胺，是唯一含有主要矿物质的维生素。
紫外-可见分光光度法
紫外 -可见分光光度法1简述紫外 -可见分光光度法是在 190-800nm波长范围内测定物质的吸光度，用于鉴识、杂质检查和含量测定的方法。
定量剖析往常选择物质的最大汲取波优点测出吸光度，而后用比较品或汲取系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定；对已知物质定性可用汲取峰波长或吸光度比值作为鉴识方法；若该物质自己在紫外光区无汲取，而其杂质在紫外光区有相当强度的汲取，或杂质的汲取峰处该物质无汲取，则可用本法作杂质检查。
物质对紫外辐射的汲取是因为分子中原子的外层电子跃迁所产生，所以，紫外汲取主要决定于分子的电子构造，故紫外光谱又称电子光谱。
有机化合物分子构造中如含有共轭系统、芬芳环等发色基团，均可在紫外区（200~400nm）或可见光区（ 400~850nm）产生汲取。
往常使用的紫外- 可见分光光度计的工作波长范围为190~900nm。
紫外汲取光谱为物质对紫外区辐射的能量汲取图。
朗伯-比尔（ Lambert-Beer）定律为光的汲取定律，它是紫外 -可见分光光度法定量剖析的依照，其数学表达式为:1A=log =ECLT式中 A 为吸光度 ;T为透光率 ;E为汲取系数 ;C为溶液浓度 ;L为光路长度。
如溶液的浓度（ C）为1%（g/ml ），光路长度（ L ）为 lcm，相应的吸光度即为汲取系数以 E1cm1%表示。
如溶液的浓度（ C）为摩尔浓度（ mol/L ），光路长度为 lcm 时，则相应有汲取系数为摩尔汲取系数，以ε表示。
2仪器紫外 -可见分光光度计主要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据办理系统等部分构成。
为了知足紫外 -可见光区全波长范围的测定，仪器备有二种光源，即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。
单色器往常由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件，聚焦透镜或反射镜等构成。
色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200~40Onm波长光的色散能力很强，对 600nm以上波长的光色散能力较差，棱镜色散所得的光谱为非匀排光谱。
紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例
紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例药物A的含量可以通过紫外可见分光光度法来测定。
下面是一种计算实例，以帮助理解该方法的操作流程以及计算原理。
假设我们有一批药物A的试样，需要测定其中药物A的含量。
我们首先需要准备一定浓度的标准品溶液，用于构建工作曲线。
标准品溶液的浓度可以根据药物A的理论含量来确定。
操作步骤如下：1. 首先，我们准备标准品溶液。
假设药物A的理论含量为100mg/mL，我们可以准备一系列含量递增的标准品溶液，如10mg/mL，20mg/mL，30mg/mL等等。
可以根据需求自行决定浓度的范围和递增量。
2.准备工作曲线。
我们将取一定量的每个标准品溶液，利用紫外可见分光光度计进行测定，测定吸光度值。
通常选择药物A在紫外可见光谱范围内的最大吸收波长（波峰）进行测定。
得到一系列标准品溶液浓度与吸光度值的对应关系。
通过得到的数据，我们可以得到一个工作曲线，在浓度与吸光度之间建立线性关系。
3.测定药物A的样品。
我们将取一定量的待测样品溶液，利用紫外可见分光光度计进行测定，测定样品的吸光度值。
4.根据工作曲线，将样品的吸光度值代入，同时参考工作曲线上对应吸光度值的浓度，可求得样品的浓度。
通过浓度和待测样品溶液的体积，可以计算出药物A的含量。
标准品溶液浓度：10mg/mL，20mg/mL，30mg/mL，40mg/mL，50mg/mL对应的吸光度值：0.5，1.0，1.5，2.0，2.5待测样品溶液吸光度值：1.8根据工作曲线，将待测样品溶液吸光度值代入，找到对应的浓度。
从工作曲线可以看出，吸光度值1.8对应的浓度在30mg/mL和40mg/mL之间，我们可以利用线性插值法来估算浓度。
(1.8-1.5)/(2.0-1.5)=(C-30)/(40-30)C=((1.8-1.5)/(2.0-1.5))*(40-30)+30C = 36mg/mL假设我们测量的样品溶液体积为10mL，根据浓度和体积计算，可得到样品中药物A的含量为 36mg/mL * 10mL = 360mg通过以上计算，我们得到样品中药物A的含量为360mg。
简述紫外-可见分光光度法用于含量测定时的几种常用方法的适用类型和注意事项
简述紫外-可见分光光度法用于含量测定时的几种常用方法的适用类型和注意事项紫外-可见分光光度法是一种利用物质在紫外-可见波长范围内吸收和散射辐射能量的方法，可用于测试溶液中某种成分的浓度。
在实际应用中，常用的几种方法包括外标法、内标法和标准曲线法，下面将进行简述。
1. 外标法外标法是指将溶液中待测物质与已知浓度的标准溶液相比较，在一定的光程、波长和温度条件下，测量两者的吸光度，从而计算出待测物质的浓度。
该方法适用于分子量相同或接近、化学性质相似的物质。
但需要注意的是，在操作时应比较精确地控制外界因素的影响，以保证测量的准确性。
2. 内标法内标法是指在测量待测物质的浓度时，与待测物质化学性质相近的另一种物质被加入到溶液中，用作内部标准。
通过内部标准与待测物质的吸光度比较，可以消除试剂浓度、仪器灵敏度以及样品处理等外界因素的影响，提高测量结果的准确性。
内标法适用于测量含有许多杂质和干扰物的溶液中待测物质的浓度，例如血清和尿样等。
注意在进行内标法时应掌握内标物的正确选择方法和使用要求。
3. 标准曲线法标准曲线法是将系列的标准溶液分别测量吸光度，建立一个吸光度与浓度的标准曲线。
根据待测物质体系的吸收性质，选择适当的波长和光程，在标准曲线上找到待测物质吸光度对应的浓度，即可计算待测物质的浓度。
标准曲线法适用于测量许多复杂的和无法用外标或内标法测量的样品。
但需要注意的是，标准曲线法建立的标准曲线应具备一定的线性范围和稳定性。
总之，考虑到各种方法的优缺点以及适用范围，选取合适的测量方法非常重要。
在进行实验操作时，应根据不同的目的和方法进行操作，掌握实验操作技能，遵循操作规程，加强实验数据的校正和质量控制，以保证结果的准确和可靠性。
参考内容：1. 谢幸子.化学分析实验教程[M]. 北京: 高等教育出版社版,2006.2. 刘新军, 朱小林. 某些物质的紫外分光光度法测定[J]. 化学教育, 2010(6): 51-54.3. 熊文祥, 栾慧, 高超. 内标法在紫外分光光度法测定药物样品中的应用[J]. 四川化工, 2012(1): 64-67.。
紫外可见分光光度法(鉴别、检查、含量测定)
紫外-可见分光光度法紫外分光光度：紫外光区特定波长内的吸收度，被测物质或杂质的定性和定量紫外-可见分光光度计的工作波长：190-900nm近紫外区（氘灯）200-400nm 可见光区（碘钨灯）400-850nm定量分析:①最大吸收波长处测出吸收度②对照品或百分吸收系数算出被测物或杂质的含量双光束光栅型紫外-可见分光光度计波长准确度误差±0.5nm一、样品测定：⑴吸收系数测定:①按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试液②在规定的波长测定其吸收度③计算吸收系数，应符合规定范围⑵鉴别与检查：按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定测定供试品在有关波长处的最大或最小吸收，或最大吸收峰值或最大或最小吸收的比值，应符合规定⑶含量测定：①对照品比较法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法分别配制对照品和供试品溶液注：对照品中所测成分的量应在供试品中所测成分标示量的(100±100)%以内㈡用同一溶剂，在规定的波长处测定供试品和对照品的吸收度②吸收系数法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试品溶液㈡在规定波长（±1nm）处测定其吸收度㈢按食品药品监督管理局标准的该药品在规定的条件下给出的吸收系数计算含量具体过程对照品比较法①调节波长测吸光度（吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内）②A样品的吸光度:A对照品的吸光度= C样品:C对照品(C为浓度，mg/ml)C样品=A样品的吸光度×C对照品/A对照品的吸光度C样品×A对照品的吸光度= A样品的吸光度×C对照品P﹪（所含物质占标示量的百分比）= C供试品-稀释后的对照品×A对照品的吸光度/ A 样品的吸光度×C对照品×供试品的标示含量例1奥硝唑含量（紫外分光光度计）：⑴对照品①取0.0113g奥硝唑溶于100ml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③再用蒸馏水稀释至50 ml在319nm处测得对照品A（吸光度）=0.465⑵供试品①取5ml供试品于100lml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③用蒸馏水稀释至25ml319nm处供试品A1=0.413 供试品A2=0.417⑶①P﹪（所含物质占标示量的百分比）=0.413供试品的吸光度ⅹ(0.0113g/100ml)对照品浓度ⅹ(5/50) / 0.465对照品的吸光度ⅹ(5ml/100ml) ⅹ(1/25ml)ⅹ0.5g﹪ml标示含量供试品浓度ⅹ 100﹪=100.36﹪注：0.5﹪（供试品的标示含量）表示100ml 0.5g②P﹪= P1﹪+ P2﹪ /2。
紫外分光光度法测定蛋白质含量
紫外分光光度法测定乳品中的蛋白质一．实验目的1．学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。
2．掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。
3．掌握紫外-可见分光光度计的使用方法。
二．实验原理紫外-可见吸收光谱法又称紫外-可见分光光度法,它是研究分子吸收190nm～750nm波长范围内的吸收光谱，是以溶液中物质分子对光的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。
紫外-可见吸收光谱的产生是由于分子的外层价电子跃迁的结果，其吸收光谱为分子光谱，是带光谱。
定性分析:利用紫外-可见吸收光谱法进行定性分析一般采用光谱比较法。
即将未知纯化合物的吸收光谱特征，如吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状与已知纯化合物的吸收光谱进行比较。
定量分析:紫外-可见吸收光谱法进行定量分析的依据是朗伯-比尔定律：A=lgI/I=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比，即物质在一定波长处的吸光度与它的浓度成线形关系。
因此，通过测定溶液对一定波长入射光的吸光度，就可求出溶液中物质浓度和含量。
由于最大吸收波长λmax处的摩尔吸收系数最大，通常都是测量λmax的吸光度，以获得最大灵敏度。
光度分析时，分别将空白溶液和待测溶液装入厚度为b的两个吸收池中，让一束一定波长的平行单色光非别照射空白和待测溶液，以通过空白溶液的透光强度为I0，通过待测溶液的透光强度为I，根据上式，由仪器直接给出I与I之比的对数值即吸光度。
紫外-可见分光光度计:紫外-可见吸收光谱法所采用的仪器称为分光光度计，它的主要部件有五个部分组成，即由光源发出的复合光经过单色器分光后即可获得任一所需波长的平行单色光,该单色光通过样品池静样品溶液吸收后，通过光照到光电管或光电倍增管等检测器上产生光电流，产生的光电流由信号显示器直接读出吸光度A。
可见光区采用钨灯光源、玻璃吸收池;紫外光区采用氘灯光源、石英吸收池。
本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量。
简述紫外可见分光光度法用于含量测定时的几种常用方法的适用类型和注意事项
简述紫外可见分光光度法用于含量测定时的几种常用方法
的适用类型和注意事项
紫外-可见分光光度法是一种常用的分析方法，用于测定物质的含量。
以下是几种常用的方法及其适用类型和注意事项：
1. 标准曲线法：适用于单一物质的测定。
需要制备一系列不同浓度的标准溶液，测定它们的吸光度，并绘制标准曲线。
通过测定待测样品的吸光度，可以根据标准曲线计算出其浓度。
注意事项包括：标准曲线的制备应该严格按照实验要求进行，避免误差；待测样品的吸光度应该在标准曲线的线性范围内。
2. 内标法：适用于复杂样品的测定。
在样品中加入已知浓度的内标物质，测定其吸光度，并根据内标物质的吸光度和浓度计算出待测样品中的物质含量。
注意事项包括：内标物质应该与待测物质具有相似的光学性质，避免干扰；内标物质的加入量应该适当，过多会影响测定结果，过少则会降低精度。
3. 差减法：适用于样品中存在多种物质的测定。
先测定样品的吸光度，然后加入一种化学试剂，使其中一种物质发生反应，再测定反应后的吸光度。
通过两次测定的差值计算出待测物质的含量。
注意事项包括：化学试剂的选择应该与待测物质有关，避免干扰；反应条件应该控制好，避免影响测定结果。
总之，使用紫外-可见分光光度法进行含量测定时，需要根据样品的特点选择合适的方法，并注意实验操作的精确性和准确性，以获得可靠的结果。
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【含量测定】照紫外-可见分光光度法(附录V A)测定。
1.仪器与测定条件：室温：____℃相对湿度：____%
分析天平编号：；水浴锅编号：；
紫外可见分光光度计编号：；
2.对照品溶液的制备：
取西贝母碱对照品适量，精密称定，加三氯甲烷制成每1ml含_______mg的溶液，即得。
3. 供试品溶液的制备：
取本品粉末(过三号筛)约______g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液3ml，浸润1小时。
加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液40ml，置80℃水浴加热回流2小时，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用适量三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液洗涤药渣2～3次，洗液并入同一量瓶中，加三氯甲烷-甲醇(4：1)混合溶液至刻度，摇匀,即得。
4.标准曲线的制备：
精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml，置25ml具塞试管中，分别补加三氯甲烷至10.0ml，精密加水5ml、再精密加0.05％溴甲酚绿缓冲液(取溴甲酚绿0.05g，用0.2mol／L氢氧化钠溶液6ml使溶解，加磷酸二氢钾1g，加水使溶解并稀释至100ml，即得)2ml，密塞，剧烈振摇，转移至分液漏斗中，放置30分钟。
取三氯甲烷液，用干燥滤纸滤过，取续滤液，以相应的试剂为空白。
5.测定法：
照紫外-可见分光光度法(附录ⅤA），在nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含西贝母碱的重量，计算，即得。
6.结果与计算
6.1 标准曲线制备：
计算公式： W S C f ⨯=
对对对
C 对=
6.2 样品测定：
计算公式：()
%100Q 110W f C X 6
⨯-⨯⨯⨯=
样样
样 X 1= X 2=
7.本品按干燥品计算，含总生物碱以西贝母碱(C 27H 43NO 3)计，不得少于0.050％。
结果: 规定
检验人： 检验日期： 复核人： 复核日期:。