生化方法学及仪器应用
生理生化分析
生理生化分析生理生化分析是一种广泛应用于医学、生物学、化学和其他相关学科领域的技术，用于研究和理解生物体的生物化学反应、代谢过程和功能。
通过对生物体内生化物质的成分、结构、功能及其相互作用进行分析，可以揭示生物体的生理状态、疾病诊断和治疗方案。
一、生理生化分析的意义生理生化分析是揭示生物体内各种物质和分子相互作用的重要手段。
通过分析生物体内的蛋白质、核酸、糖类等生化物质的含量、结构和功能，可以了解其代谢过程、反应机制以及生物体在不同生理状态下的差异。
这对于深入研究生物体的基本生命过程、发掘新的治疗方法具有重要的意义。
二、生理生化分析的方法生理生化分析涉及到多种实验方法和仪器设备，常用的方法包括：1. 分光光度法：通过物质对特定波长的光的吸收、发射或散射来确定其浓度或结构。
例如，紫外-可见吸收光谱法可以用于测定蛋白质、核酸和药物的浓度。
2. 气相色谱法：通过气相色谱仪对物质进行分离、检测和定量分析。
该方法对于分析有机化合物、药物代谢产物等具有很高的灵敏度和分辨率。
3. 液相色谱法：通过液相色谱仪对物质进行分离和分析。
可以通过改变柱材料、溶剂组成和流速等条件，实现对多种生化物质的分离和定量分析。
4. 质谱分析法：通过质谱仪对物质的质量-电荷比进行检测和分析。
质谱分析可以用于确定物质的分子结构、元素组成，以及定量分析等。
5. 核磁共振法：通过核磁共振仪对物质的核自旋和能级进行检测和分析。
核磁共振技术在蛋白质、核酸结构研究和药物设计中具有重要应用。
三、生理生化分析在医学领域的应用生理生化分析在医学领域具有广泛的应用，常见的应用包括：1. 临床诊断：通过检测血液、尿液等生物样本中的生化物质的含量和状态，可以辅助医生进行疾病的诊断和治疗。
例如，血糖检测可用于糖尿病的诊断和治疗监测。
2. 肿瘤标志物检测：通过检测血液或其他生物样本中的特定蛋白质、核酸等生化物质，可以辅助肿瘤的早期筛查和诊断。
常见的肿瘤标志物包括癌胚抗原（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）等。
生化检验操作规程
生化检验操作规程一. 血脂血糖1.胆固醇(1）方法学：胆固醇氧化酶法(2）实验仪器：上海科华卓越330全自动生化分析仪(3) 试剂成分：R1-胆固醇酯酶,抗坏血酸氧化酶，过氧化物酶，ESPAS，R2-胆固醇氧化酶，4-氨基安替比林(4)操作流程：开机->进入主程序->开始->杯空白测定->正常->将待测管放入样品盘检测孔中（如1孔）->进入样品界面->在界面左侧输入相应起始样品号（如1号）以及相应起始杯号（如1杯）->在右侧检测项目界面中选择“胆固醇”->点击下方申请测试->开始测试->加样针吸取样品管内血清3μL于比色盘的1号比色杯中->试剂针吸取胆固醇 R1试剂250μL于1号比色杯中->搅拌器搅拌混匀->37℃恒温5分钟->试剂针再吸取胆固醇 R2试剂125μL于1号比色杯中->搅拌器再次搅拌混匀->37℃恒温5分钟后比色测定->结果数据传至主程序开始菜单内的报告列表界面->检测完毕->在报告列表输入检验报告单相关信息->点击右下方打印报告->签字审核后发单。
(5）注意事项：①保证比色盘与试剂盘的洁净，定期检查。
每日检查试剂剩余量，及时补足。
②注意主程序界面内的试剂盘的温度变化，一旦持续增高，则考虑冷冻剂问题，予以更换。
③保证样品的良好待检状态，样本为血清，肝素或EDTA抗凝血浆，若当时不能检测则可2℃～8℃冷藏保存。
过度溶血的宜重新取血，若无法重新取血的应在检验报告单上注明，脂血的样本也应在检验报告单上标注，并且稀释后再行检测，黄疸的应先做空白对照，再行检测并将结果减去空白对照后再行出单。
④每日跟随样品进行质控检测绘出质控图，观察质控值是否在2SD以内，3SD为失控限，以便据此观察机器与试剂的状态是否在控。
⑤注意试剂的效期问题，定期检查试剂是否变质，保证试剂在有效期内使用。
生理生化技术在医学研究中的应用
生理生化技术在医学研究中的应用随着科技的不断发展，生理生化技术在医学研究中的应用越来越广泛。
生理生化学是生命科学研究的重要组成部分，它主要研究人体生命系统中分子、细胞、组织和器官等方面的生物学现象。
这些技术经过不断的创新和优化，已经成为医学研究的基础和关键性手段，对各种疾病的诊断和治疗起到了至关重要的作用。
一、生理生化技术生理生化技术利用先进的仪器和设备对人体内部和外部的生命现象进行分析和检测，这些现象包括物质的代谢、细胞的功能、信号传递和基因表达等。
其中最常用的技术包括：蛋白质组学、基因组学、代谢组学、蛋白质质谱分析、高通量测序等。
蛋白质组学是研究蛋白质分子、它们的功能、相互作用和代谢途径的科学。
通过分离、鉴定蛋白质，可以更好地研究生物体的内部机理和成分，从而为疾病的诊断和治疗提供重要的信息。
基因组学则主要研究基因的表达和编码方式，以及这些基因在人体内的生物学功能。
代谢组学是研究代谢物在人体内分布、转化和代谢的科学，它可以更加深入地了解代谢物在人体内所起的作用和影响。
同时，代谢组学也是一种综合分析方法，它能够揭示细胞和器官在代谢方面的差异和相互关系。
高通量测序在当前的医学研究中起到了重要的作用。
它可以通过测定DNA序列的方法，快速地分析大量的生物样本，包括病原菌、人体细胞、微生物和疾病样本等。
这样就可以更快速、准确地发现病因和诊断疾病。
二、生理生化技术在医学研究中的应用非常广泛，用于从研究分子水平到整个人体系统水平的各个方面。
下面我们将介绍它们在关键领域中的应用情况。
1. 疾病预防和诊断生理生化技术可以用于疾病的预防和诊断。
通过测量人体内特定的生理生化指标，我们能够更好地了解人体的健康状况和发现潜在的疾病。
常用于这种目的的生理生化技术包括血液生化指标、尿液及其他分泌物分析以及基因测序等。
通过这些技术的运用，我们能够快速检测出相应的疾病，并进行及时治疗。
2. 疾病治疗生理生化技术在疾病治疗方面也起到了至关重要的作用。
医学检验仪器学知识点总结
医学检验仪器学知识点总结一、医学检验仪器学简介医学检验仪器学是临床医学中的一个重要分支，它主要研究的是不同类型的医学检验仪器，包括其原理、操作方法、使用范围、维护等方面的知识。
医学检验仪器学的发展与医学检验技术的进步密切相关，它为临床诊断提供了可靠的实验依据，有助于提高临床医生的工作效率和诊断准确性。
二、医学检验仪器的分类医学检验仪器可以根据其功能和应用领域进行分类。
主要有生化分析仪器、免疫分析仪器、血液分析仪器、细胞分析仪器、微生物分析仪器等多种类型。
1. 生化分析仪器生化分析仪器是用于检测体液中生化指标的仪器，广泛应用于临床诊断、疾病监测等领域。
它可以测定血清、尿液、脑脊液等体液中的生化指标，包括葡萄糖、肌酐、尿素氮、血脂、肝功能指标、电解质等。
2. 免疫分析仪器免疫分析仪器是用于检测人体内免疫反应的仪器，主要包括化学发光免疫分析仪、酶联免疫分析仪、流式细胞仪等。
它可以检测体液中的抗体、抗原、免疫球蛋白等指标，用于诊断感染性疾病、自身免疫疾病等。
3. 血液分析仪器血液分析仪器是用于检测血液成分的仪器，包括血细胞分析仪、凝血分析仪等。
它可以测定血红蛋白、白细胞计数、血小板计数、凝血功能等指标，用于诊断贫血、白血病、凝血功能障碍等疾病。
4. 细胞分析仪器细胞分析仪器是用于检测体液中细胞数量、形态、功能等指标的仪器，包括流式细胞仪、细胞计数仪等。
它可用于检测血液、体液、脑脊液中的细胞数量、分类、形态等信息，用于诊断肿瘤、感染、免疫性疾病等。
5. 微生物分析仪器微生物分析仪器是用于检测体液、组织、环境中微生物的仪器，主要包括培养仪、鉴定仪、敏感度测试仪等。
它可以检测致病微生物的类型、数量、药敏情况，用于感染性疾病的诊断和治疗。
三、医学检验仪器的原理不同类型的医学检验仪器具有不同的工作原理，但大部分仪器的基本原理是利用光学、电化学、生物化学等技术测定样本中的生化指标。
以下是几种常见医学检验仪器的原理介绍：1. 生化分析仪器的原理生化分析仪器采用光学、电化学、酶学等技术对体液中的生化指标进行定量测定。
生化分析技术与分析方法
生化分析技术与分析方法生化分析技术是指应用生化学、分子生物学等原理和技术，对生物体内分子、细胞及其组织和器官进行分析的一种技术。
生化分析技术的目的是研究生物体内分子、细胞及其组织和器官的结构、功能、代谢和调节等生理和病理过程。
生化分析技术有许多种类，其中主要包括光谱分析技术、色谱分析技术、质谱分析技术、电泳分析技术、生物传感器技术和免疫学技术等。
下面简要介绍几种常见的生化分析技术和方法。
光谱分析技术光谱分析技术是指利用物质的吸收、发射、散射等光学特性，对物质的结构、组成、性质等进行分析的一种方法。
光谱分析技术主要包括紫外光谱、红外光谱、拉曼光谱和核磁共振光谱等。
其中，紫外光谱是一种常用的方法，可以用于检测DNA、RNA等生物大分子的含量和质量。
红外光谱则可以用于检测细胞膜、酶、蛋白质等生物分子的结构和组成。
拉曼光谱则可以用于分析药物、生物大分子的结构和组成等。
核磁共振光谱则可以用于观察细胞内各种分子的运动和分子间的相互作用等。
色谱分析技术色谱分析技术是指按照不同物质在某种载体或柱子上的分配、吸附或沉淀等特性，将混合物分离为单一物质的一种方法。
色谱分析技术包括气相色谱、液相色谱和超高效液相色谱等。
其中，液相色谱是一种应用最广泛的方法，可以检测并分离大部分生物分子。
液相色谱又可分为高效液相色谱（HPLC）、离子交换色谱（IEC）、凝胶过滤色谱（GF）等。
HPLC是一种灵敏度高、分离效果好的分析方法，可用于检测DNA、RNA、蛋白质、酶等生物大分子。
IEC则可用于分离不同电荷的生物分子，GF则可用于分离不同大小的生物分子。
质谱分析技术质谱分析技术是指利用物质在电磁场中的离子化和分子裂解等特性，对物质的质量、结构、分子量、元素组成等进行分析的一种方法。
质谱分析技术包括质谱法、时间飞行质谱（TOF-MS）、离子陷阱质谱（IT-MS）等。
其中，质谱法是一种常用的方法，可用于检测试剂、药物、天然产物等生物分子的结构和组成。
生化项目检测原理
生化项目检测原理
生化项目检测原理是通过分析和测量生物体内特定分子或化学反应产物的变化来判断生物体内某种物质的存在或水平。
下面将介绍几种常见的生化项目检测原理。
1. 光度法：利用物质对特定波长的光吸收或透射的特性来测量物质的浓度。
通常会使用比色皿、分光光度计等仪器进行测量。
2. 电化学法：利用物质在电势差作用下的氧化还原反应特性来测量物质的浓度。
常见的电化学方法包括电解法、电极反应法、电化学免疫法等。
3. 发光法：利用物质在特定条件下发生化学反应产生光的特性来测量物质的浓度。
常见的发光方法有化学发光、酶标仪法等。
4. 色谱法：通过样品在固定相和流动相间相互作用的特性来进行物质分离和测定。
常见的色谱方法有气相色谱法、液相色谱法等。
5. 免疫学原理：利用抗原和抗体之间的特异性结合反应来检测物质的存在或水平。
常见的免疫学方法有酶联免疫吸附测定法、放射免疫测定法、荧光免疫测定法等。
以上是几种常见的生化项目检测原理，通过不同的检测方法可以实现对不同物质的快速、准确测量，从而为临床诊断提供有力支持。
生化分析及其在医学中应用
生化分析及其在医学中应用生化分析是一种重要的分析化学技术，用于研究生物分子和化学反应。
它包括分析生物体中的化学物质，如蛋白质、碳水化合物和核酸等，以及患者的生理状态和药物治疗的效果等。
生化分析在现代医学中发挥着重要的作用，包括疾病诊断、治疗和监测。
一、生化分析的基本原理1. 核酸分析核酸是生物体内的一类大分子，包括DNA和RNA。
核酸分析是研究DNA和RNA的结构、功能和变异等的技术。
常用的核酸分析方法包括PCR、南方杂交和序列分析等。
PCR技术是一种快速扩增DNA的方法。
它主要包括三步：变性、退火和扩增。
通过PCR技术可以扩增出少量DNA片段，从而检测DNA序列变异、基因突变和遗传病等。
南方杂交是一种检测DNA序列的方法，主要用于检测DNA重复序列和突变等。
南方杂交需要将DNA固定在载体上，进行杂交反应后再用放射性示踪试剂检测DNA序列。
序列分析是一种分析DNA序列的方法，可以测定DNA序列的基本信息、修饰和变异等。
序列分析所需的DNA样品可以来自血液、组织和体液等。
2. 蛋白质分析蛋白质是生物体内的一种重要分子，具有多种生物学功能。
蛋白质分析是研究蛋白质结构、功能和变异等的技术。
常用的蛋白质分析方法包括SDS-PAGE、Western blot和质谱分析等。
SDS-PAGE是一种蛋白质分离技术，可以将蛋白质按分子量大小分为不同的带。
该技术需将蛋白质样品加入聚丙烯酰胺凝胶中，然后进行电泳分离。
SDS-PAGE可以用于确定蛋白质分子量和纯度。
Western blot是一种检测蛋白质的方法，即蛋白质印迹法。
它需要将蛋白质样品与抗体结合，然后用酶标记的二抗检测蛋白质。
Western blot可以用于检测蛋白质表达水平和定量。
质谱分析是一种分析蛋白质的方法，可以测定蛋白质的分子量、结构和修饰等。
常用的质谱分析方法包括MALDI-TOF和ESI-MS 等。
二、生化分析在医学中的应用生化分析在医学中有着广泛的应用，从疾病诊断到药物治疗和监测等方面都涉及到了生化分析技术。
检验科生化学常见检测与分析方法
检验科生化学常见检测与分析方法生化学是一门研究生物体内化学变化及相互关系的科学。
在检验科中，生化学是一项重要的技术领域，用于检测和分析样本中的化学成分和反应。
本文将介绍一些生化学常见的检测与分析方法。
一、色谱法色谱法是一种常见的分离和检测技术，广泛应用于生化学领域。
其中，气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）是两种常见的色谱方法。
1. 气相色谱法气相色谱法是将气体或者挥发性液体样品通过色谱柱进行分离和检测的方法。
该方法适用于分离和检测样品中的挥发性有机化合物和气体。
它的原理是通过样品在高温下蒸发，然后被带动进入色谱柱中。
在色谱柱中，不同物质由于相互作用力的差异而分离，最终通过检测器检测。
气相色谱法常用于环境监测、食品安全等领域。
2. 液相色谱法液相色谱法是将溶解在溶剂中的样品通过色谱柱进行分离和检测的方法。
该方法适用于分离和检测样品中的非挥发性有机化合物和离子。
它的原理是将样品溶解在流动相中，通过色谱柱的分离作用，不同物质在色谱柱中的停留时间不同，从而实现分离和检测。
液相色谱法常用于药物分析、食品成分分析等领域。
二、光谱法光谱法是一种通过物质对光的吸收、散射或者发射来进行分析的方法。
常见的光谱方法包括紫外可见光谱法（UV-Vis）、红外光谱法（IR）和质谱法（MS）。
1. 紫外可见光谱法紫外可见光谱法是一种用于测定物质在紫外和可见光波段吸收特性的方法。
该方法适用于分析样品中的有机物、无机物和生物分子等。
紫外可见光谱法的原理是通过物质对紫外或者可见光的吸收来得到样品的吸收光谱，进而推断出样品中的成分和浓度。
紫外可见光谱法在药物分析、环境监测等领域得到广泛应用。
2. 红外光谱法红外光谱法是一种用于测定物质在红外光波段吸收特性的方法。
该方法适用于分析样品中的有机物和无机物等。
红外光谱法的原理是通过物质对红外光的吸收来得到样品的红外光谱，进而推断出样品中的分子结构和化学键的类型。
红外光谱法在药物研发、聚合物材料分析等领域具有重要应用价值。
生化分析仪方法学
了解生化分析仪基本参数的原理，有利于仪器、试剂的正确使用，有助于正确分析和处理测定数据。
但是，配套系统的原装分析参数不宜 更改；采用非仪器配套的试剂及校准品体系时，参数修改要慎重，对于不同仪器、不同类型的反应分析程序，所显示的人机对话分析参数 信息有所不同。
一、反应监测时间对于终点法来说，读取反应达到平衡时的吸光度计算样品中待测物的浓度。
对于连续监测法来说，要注意观察反应进程曲线，从而确定反 应的预孵育期，延迟时间、连续监测的时段。
对于一级或伪一级反应来说，连续监测的时间是一级反应的动态期的吸光度；对于基于零级 反应的酶催化活性浓度速率法测定，连续监测的是零级线性反应期的吸光度。
对于连续监测法来说，动态反应期的时间越长，越适用于临 床应用，对于以酶为工具的代谢物酶促动力测定法，要增加动态反应期，即延长反应达到平衡的时间，可在反应体系中加入竞争性抑制剂 ，这样还可以提高测定的线性范围，对于酶催化活性浓度连续监测法来说，一定要注意线性反应时间，有的酶，例如，以硫代丁酰胆碱为 底物的血清假性胆碱酯酶速率测定法，线性反应时间只有90秒。
对于连续监测法来说，在监测期至少应读4个点(3个△A)。
多数全自动生化分析仪可以在整个测定反应周期连续监测(如HITACHI 7170常规测定周期10分钟、监测34点，OLYMPUS AU 600固定周期8分15秒、监测27点)，但反应监测时间是指该时间内的测定读数要用于结果计算。
它的设置与加样点、加试剂点( 包括R1、R2……)、监测时间(读数点)、读数间隔时间及试剂样品比例等有关，要结合方法学，兼顾权衡。
1．反应时间(Reaction Time) 指仪器的一个分析周期中，试剂和样品混合最末一点测定读数时间。
它对终点法尤其重要，是终点法的瓶颈。
有的仪器多个反应时间可选 L如Hl¡ªTACHI 7170)，须预先选定。
多数仪器10分钟左右，这对试剂提出了较高要求。
化学分析仪器应用
化学分析仪器应用化学分析仪器是现代化学分析的重要工具，它能够快速、准确地检测和分析样品中的化学成分，为科学研究和实验室工作提供了有力支持。
本文将介绍化学分析仪器的种类和广泛应用。
一、色谱仪色谱仪是一种常用的化学分析仪器，可用于分离和分析复杂的混合物。
它通过样品在固定相和流动相之间的分配系数差异，实现各种化合物的分离。
色谱仪包括气相色谱仪（GC）和液相色谱仪（LC）两种主要类型。
气相色谱仪主要用于挥发性化合物的分析，如有机物、无机气体和环境污染物等。
液相色谱仪则适用于非挥发性物质的分析，如生物大分子和药物成分等。
色谱仪广泛应用于环境监测、食品安全、医药研发等领域。
二、质谱仪质谱仪是一种通过测量离子的质量和相对丰度来确定样品的化学成分的仪器。
它主要由离子源、质量分析器和检测器等组成。
质谱仪可以实现对化合物的定性和定量分析，并且能够检测到非常低浓度的物质。
质谱仪在药物分析、环境污染物检测、生物阿兹海默症、基因组学研究和食品安全等领域有着广泛的应用。
它具有高分辨率、高灵敏度和高选择性等优点，成为当代分析化学的重要工具之一。
三、光谱仪光谱仪是分析样品光学特性的仪器，常用的光谱仪包括紫外可见光谱仪、红外光谱仪和核磁共振谱仪等。
这些仪器通过测量样品对特定波长或频率的辐射的吸收、发射或散射来分析样品的成分和结构。
紫外可见光谱仪广泛应用于物质定性和定量分析，如药物质量控制、环境监测和食品安全等领域。
红外光谱仪常用于有机物的结构分析和材料表征。
核磁共振谱仪主要用于化合物的结构表征和质子和碳核的定量分析。
四、电化学分析仪器电化学分析仪器主要用于测量样品的电化学行为，其中常用的仪器有电化学电位计和电化学工作站。
电化学电位计用于测量电极电位的仪器，常用于腐蚀分析、电池研究和表面活性剂性质研究等。
电化学工作站则用于进行电化学实验，如循环伏安法和安培法等。
电化学分析仪器在腐蚀控制、能源储存和环境监测等领域有着广泛的应用。
它具有快速、准确和灵敏度高的特点，对于分析金属腐蚀、电解池反应和电化学能源等方面具有重要意义。
自动生化分析仪基本参数及应用
参数调整举例
• 有些时候由于参数设置的原因，造成一 些项目的结果不对或异常，可以通过反 应曲线来初步判断。
反应时间的影响
• 例1：某酶类试剂
反应时间的影响
• 例2：Glu
关于参数修改
• 配套系统的原装分析参数不宜更改； 采用非仪器配套的试剂及校准品体 系时，参数修改要慎重。
精品课件！
精品课件！
波长的选择
• 先主后次。 • 被测物：主次差异大。 • 干扰物：主次差异小。 • 双波长选择常见：血红蛋白340nm和380nm波 长吸光度相同，以NADH作为测定底物或产物 的试验常采用340／380nm；有的也采用340／ 405nm。ALP和GGT常使用405/476nm， Trinder反应多选取520／600nm或 550/660nm．免疫比浊常选用340／700nm等。
目 的
• 了解生化分析仪基本参数的原理
• 为正确使用仪器、试剂提供指导 • 有助于正确分析和处理测定数据
主要内容
• 分析方法简介 • 分析参数设置
分析方法简介
• 终点法（平衡法）：TP、Glu等 • 动力学法（连续监测法）：ALT、CK等 • 固定时间法（两点速率法）：CREA(苦 味酸法)、UREA
20～350 50～350 20～270
某些参数的特殊意义
• 样本/试剂量比
方法学方面：仪器设备和试剂厂家有差异，因此对于 试剂厂家给定的样本试剂比并不一定能保证临床分析 的可靠； 对试剂进行可报告范围评估时，某些项目的高值样本 难于获取； 受生化分析加样系统的限制（主要是一些离心式生化 分析仪）； 受生化分析仪光电探测器的制约。
迈瑞部分生化试剂的空白吸光度要求
项目名称 ALT AST HBDH 反应原理 NADH→NAD+ NADH→NAD+ NADH→NAD+ 试剂空白吸光度要求 >1.0A >1.0A >1.0A
分析仪生化原理
分析仪生化原理分析仪是一种用于分析样品中生物化合物的仪器，通常使用化学和生物学的方法来测定样品的化学组成。
它在医学、环境科学、食品安全等领域具有重要的应用价值。
在本文中，我们将对分析仪的生化原理进行详细分析。
一、生化原理的概述分析仪的生化原理涉及到化学反应、生物学检测、数据分析等多个方面。
通过对样品中的化学成分进行分解、测量和分析，分析仪可以准确地确定样品中各种生物化合物的含量和特征。
下面将详细介绍几种常见的生化原理：1. 光谱分析光谱分析是分析仪中最常用的生化原理之一。
它利用样品对特定波长的光的吸收或发射进行测量，从而获得样品中某种化合物的含量信息。
常见的光谱分析方法包括紫外-可见吸收光谱、红外光谱和核磁共振光谱等。
2. 酶学原理酶学原理是利用酶对生物化学反应进行催化和检测的方法。
通过测量样品中酶的活性和底物的转化速率，可以间接地确定样品中某种化合物的含量。
常见的酶学原理包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）、聚合酶链式反应（PCR）和质谱法等。
3. 电化学原理电化学原理利用电流的测量和控制来分析样品中的化学物质。
通过测量样品中电子转移过程的特性，包括电压、电流和电阻等，可以确定样品中某种化合物的浓度和电化学性质。
常见的电化学原理包括电化学检测法、电化学发光法和电化学传感器等。
二、实验步骤与应用1. 样品制备在进行生化分析之前，首先需要对样品进行适当的处理和制备。
这包括样品的采集、预处理、稀释等步骤。
样品的制备对于后续的分析结果至关重要，因此需要严格按照实验要求进行操作。
2. 试剂添加与反应根据所需分析的化合物种类和方法，将适当的试剂添加到已经制备好的样品中。
试剂的添加会引发特定的化学反应或生物学检测，从而产生特定的信号。
这些信号可以被仪器检测和记录下来。
3. 数据测量和分析分析仪会自动测量样品中的反应信号，并进行数据处理和分析。
这些分析包括曲线拟合、标定曲线、数据校正等步骤。
通过详细的数据分析，可以准确地确定样品中各种生物化合物的浓度和特征。
生化分析仪常用分析方法共有三大类,分别为终点法、固定时间法和动力学法
生化分析仪常用分析方法共有三大类，分别为终点法、固定时间法和动力学法。
终点法：指经过一段时间的反应，反应达到平衡，由于反应的平衡常数很大，可认为全部底物(被测物)转变成产物，反应液的吸光度不再变化，只与被测物的浓度有关。
这类方法通常称为“终点”法，更确切地说应称“平衡”法。
单试剂单波长终点法：t1时刻加入试剂（体积为V），t2刻加入样本（体积为S），然后搅拌并反应，之后开始测量反应液的吸光度，在t3时刻反应达到终点，t3－t2为测定时间。
反应度R＝At3－At2-1×V/(V＋S)，或R＝At3－ARBLK。
其中：Ati为i时刻的吸光度，ARBLK为试剂空白吸光度。
单试剂双波长终点法：基本上同“单试剂单波长终点法”，只是对于每一个测定周期，其实际吸光度等于Aλ1－Aλ2。
双试剂单波长终点法：t1时刻加入第一试剂(体积为V1)，t2时刻加入样本(体积为S)之后立即搅拌，t3时刻加入第二试剂(体积为V2)并立即搅拌，t4时刻反应达到终点。
t3-t2为孵育时间,t4-t3为测定时间。
在项目参数中，如果反应起始时间设为0，则反应度R=A时刻吸光度-双试剂空白吸光度。
如果反应起始时间小于0，则反应度R=At4 -双试剂空白吸光度-t3到t2间设定点的吸光度×（V1＋S）/(V1＋S＋V2)。
双试剂双波长终点法：基本上同“双试剂单波长终点法”，只是对于每一个测定周期，其实际吸光度等于Aλ1－Aλ2。
固定时间法：又称为一级动力学法、二点动力学法等，指在一定的反应时间内，反应速度与底物浓度的一次方成正比，即v=k[S]。
由于底物在不断的消耗，因此整个反应速度在不断的减小，表现为吸光度的变化越来越小。
这类反应达到平衡的时间很长，理论上可以在任意时间段进行监测，但由于血清成份复杂，反应刚启动时反应较复杂，杂反应较多，必需经过一段延迟时间才能进入稳定反应期。
t1时刻加入试剂(体积为V)，之后测量试剂空白的吸光度，t2时刻加入样本(体积为S)，t3时刻反应稳定，t4时刻停止对反应进行监测；t2－t3为延迟时间，t3－t4为测定时间。
生化检测方法在临床医学中的应用
生化检测方法在临床医学中的应用随着医学科技的不断提高，越来越多的生化检测方法被应用于临床医学中。
生化检测方法通过检测生物体体内的化学物质水平，揭示身体的生理状况和病理变化，成为医生进行诊断和治疗的重要手段之一。
本文将介绍生化检测方法在临床医学中的应用以及其发展趋势。
1. 生化检测方法简介生化检测方法是一种通过检测生物体体液中化学成分的含量、质量、速率以及活性等指标，来研究生物体的结构、功能、代谢和分泌等生理和病理状态的方法。
生化检测方法通常包括血液学、尿液学、肝功能检测、肾功能检测、心髒病诊断、肿瘤标志物检测等多个方面。
具有快速、准确、无创、定量和操作简便等优点。
2. 生化检测方法在临床医学中得到了广泛应用。
以下是几个主要的应用方面：2.1 诊断疾病生化检测方法可以帮助医生诊断许多疾病，如糖尿病、肺炎、药物过量等等。
例如，检测血糖和糖化血红蛋白可以帮助诊断糖尿病，检测肝脏酶标志物可以帮助诊断肝炎，检测肿瘤标志物可以帮助诊断肿瘤等。
2.2 监测治疗效果生化检测方法也可以用于治疗过程的监测和效果评估。
例如，在化疗治疗肿瘤时，医生可以通过检测肿瘤标志物的水平来判断治疗效果，及时调整治疗方案。
此外，在血糖调节治疗中，可以通过监测血糖和糖化血红蛋白等指标定期检查病情的变化，并调整治疗。
2.3 预测疾病风险生化检测方法不仅可以帮助诊断疾病，还可以用来预测疾病的风险。
例如，血脂水平的检测可以帮助预测心血管疾病的风险，癌症标志物的检测可以帮助预测肿瘤的风险等。
这种“早期预警”的功能可以帮助人们及时发现并防范疾病。
3. 生化检测方法的新发展近年来，随着科技的不断进步，生化检测方法也不断更新换代。
以下是几个生化检测方法的新发展方向：3.1 个体化检测个体化检测是一种基于基因检测的生化检测方法，可以针对个体的基因组信息，定制个性化的预防或治疗方案，有望推动精准医疗的普及。
例如，根据个体的基因组信息，可以预测糖尿病发病的风险和患病类型，并设计个性化的预防和治疗方案，具有更好的针对性和疗效。
物化生报考的实验室仪器与设备使用与维护
物化生报考的实验室仪器与设备使用与维护物化生专业涉及到大量的实验室工作，而实验室工作则离不开各种仪器和设备的使用与维护。
正确的使用和维护实验室仪器设备不仅能够保证实验的准确性和可靠性，还能延长仪器设备的使用寿命。
本文将介绍物化生实验室常用的仪器设备，并对其使用和维护进行详细说明。
一、常用的实验室仪器设备1. 分析仪器分析仪器是物化生实验室中最常用的仪器之一，常见的分析仪器有光谱仪、质谱仪、电子显微镜等。
光谱仪用于分析样品的各种光谱特性，质谱仪则用于分析样品的化学组成和结构信息，电子显微镜则可以观察到样品的微观形态结构。
2. 实验室设备实验室设备包括实验台、实验室槽、加热器等。
实验台是实验室的基本设备，用于放置试剂和仪器设备；实验室槽则用于进行实验中的溶液混合和反应；加热器则用于对样品进行加热处理。
3. 生物实验设备生物实验设备主要用于进行生物学相关的实验，包括培养箱、离心机、PCR仪等。
培养箱用于提供适宜的生长环境给细胞或微生物，离心机用于分离悬浮物和沉淀物，PCR仪则用于进行基因扩增实验。
二、实验室仪器设备的使用注意事项1. 仪器设备操作前的准备工作在使用任何一台仪器设备之前，必须先进行相关的准备工作。
首先，需要检查仪器设备的运行状态，确保其正常工作。
其次，需要检查仪器设备的配件和耗材是否齐全。
最后，要根据仪器设备的使用手册或相关操作指南来进行操作。
2. 实验操作时的注意事项在进行实验操作时，必须要按照仪器设备的操作流程来进行，严禁随意操作。
同时，要注意仪器设备的工作环境和温度，以免对仪器设备造成损坏。
在实验操作过程中，还应遵循实验室的安全规范，做好个人防护工作。
3. 实验后的仪器设备维护实验结束后，要对仪器设备进行及时的清洁和维护。
首先，需要将仪器设备清洁干净，彻底清除实验样品和试剂的残留物。
其次，要检查仪器设备的各个部件是否完好，并做好相应的维护工作。
如果发现仪器设备有损坏或异常情况，要及时通知维修人员进行处理。
生物化学实验中的仪器与设备
生物化学实验中的仪器与设备生物化学实验中，仪器与设备的使用起着至关重要的作用。
通过科学而精确的操作，能够获得可靠的实验结果，进而推动生物化学研究的发展。
本文将介绍几种常见的生物化学实验仪器与设备，并探讨它们在实验中的应用。
一、分光光度计分光光度计是生物化学实验中常见的仪器之一。
它通过测量溶液对特定波长光的吸收或透过来确定溶液的浓度。
分光光度计的工作原理是通过将可见光或紫外光通过溶液中，利用光的吸收作用来计算溶液的浓度。
在DNA测定、蛋白质浓度测定等实验中，分光光度计被广泛应用。
二、离心机离心机是一种常见的生物化学实验仪器，它通过离心力将样品内的细胞、碎片或其他颗粒物质沉淀到管底，从而分离出上清液和沉淀物。
离心机在细胞培养、离心沉降、蛋白质提取等实验中发挥着重要的作用。
三、电泳仪电泳仪是生物化学实验中不可或缺的仪器之一。
它通过电场作用将带电的生物分子（例如DNA、蛋白质）在凝胶中移动，从而实现对这些分子的分离和分析。
电泳仪广泛应用于DNA分析、蛋白质分析等实验中。
四、pH计pH计是一种用于测量溶液酸碱性的仪器。
生物化学实验中，酸碱性的精确控制对于诸多实验至关重要。
pH计通过测量溶液中氢离子的浓度来确定溶液的酸碱性。
在酶活性研究、酸碱反应等实验中，pH计的使用是不可或缺的。
五、实时荧光定量PCR仪实时荧光定量PCR仪是分子生物学和遗传学研究中重要的仪器之一。
它通过荧光信号的检测来监测DNA的扩增过程，从而定量分析初始DNA的含量。
实时荧光定量PCR仪在基因表达分析、病原体检测等领域有着广泛的应用。
六、冷冻离心机冷冻离心机是一种用于生物样品冷冻离心的仪器。
在生物化学实验中，冷冻离心机被广泛用于富集样品中的蛋白质、RNA或DNA等。
冷冻离心机通过低温离心过程中控制冷却系统，可以防止样品中的目标分子被降解。
七、质谱仪质谱仪是一种用于分析复杂混合物成分的仪器。
它通过将分子样品分解成带电离子，并通过测量带电离子的质量和相对丰度来确定样品中各种成分的含量和结构。
生化及分子生物学研究方法
生化及分子生物学研究方法生化及分子生物学是现代生物学研究的两个重要方向。
在研究这些领域的过程中，需要运用各种研究方法和技术。
本文将从生化和分子生物学两方面介绍一些常用的研究方法和技术。
生化研究方法：1. 蛋白质电泳：蛋白质电泳是生化学中常用的方法之一。
它通过将样本中的蛋白质分离出来，然后对其进行定量和鉴定。
电泳技术具有高分辨率、高灵敏度和可重复性好等优点。
2. 免疫组化：免疫组化是通过将特定蛋白质与抗体反应，来检测组织或细胞中特定蛋白的存在和分布情况。
这种方法广泛应用于感染、肿瘤和免疫疾病等领域。
3. 质谱分析：质谱分析是指将化合物分子分子分离出来，并测量其分子量和分子结构的方法。
生化学中常用的质谱分析技术有质子转移反应质谱和激光共振解离质谱等。
4. 核磁共振：核磁共振是生化学中常用的分析方法。
它通过观察核磁共振信号，来分析分子的结构和分子间相互作用的情况。
分子生物学研究方法：1. PCR技术：PCR技术是分子生物学中最为常用的技术之一。
它通过逆转录和扩增DNA，从而快速、准确地检测DNA的存在和数量。
2. 基因克隆：基因克隆是将感兴趣的DNA片段插入到载体DNA上，然后转化到宿主细胞中进行扩增和表达的方法。
这种方法广泛应用于基因工程、基因治疗和基因敲除等领域。
3. 单细胞测序：单细胞测序是目前研究细胞异质性和个体差异的最新技术之一。
通过将单个细胞DNA和RNA提取出来，进行序列分析，可以分析出单个细胞的基因表达和遗传变异情况。
4. 蛋白质互作分析：蛋白质互作分析是通过酵母双杂交、蛋白质共沉淀等方法，来研究蛋白质间的相互作用网络和信号传递路线。
这种方法对于研究细胞内的信号调控和疾病机制有着重要的应用价值。
总结：生化及分子生物学研究方法是现代生物学研究不可或缺的一部分。
通过合理地运用这些技术和方法，可以揭示出生物体内复杂的生物化学过程和生命现象。
随着技术的日益进步，将有更多新的方法和技术被引入到生物学研究领域，助力我们更好地探索生命奥秘。
生化分析仪分析方法之终点法固定时间法和动力学法
生化分析仪分析方法之终点法固定时间法和动力学法生化分析仪是一种用于分析生物体中化学物质的仪器。
它能通过测量样品中的化学反应终点，提供关于样品中特定化学物质浓度的定量信息。
在生化分析仪的分析方法中，终点法和动力学法是两种常用的方法。
终点法是一种通过观察反应终点来测定特定化学物质浓度的方法。
在终点法中，反应混合物中的特定化学物质与试剂发生化学反应，产生一种明显的变化。
这种变化可以是颜色的改变，沉淀的形成或者气体的产生。
通过使用生化分析仪，可以测量这种变化的强度或者数量，并根据反应物的摩尔比例计算出特定化学物质的浓度。
终点法的优点是简单易行，适用于大批量样品的分析。
其缺点是需要在反应结束时进行分析，因此只能提供关于反应终点处特定化学物质浓度的信息。
对于反应速度较慢的化学物质，可能需要更长的时间才能获得准确的浓度值。
动力学法是一种通过观察化学反应速度来测定特定化学物质浓度的方法。
在动力学法中，生化分析仪通过连续监测反应的速度变化，以研究特定化学物质在反应中的消耗情况。
通过测量反应速度与特定化学物质浓度之间的关系，可以计算特定化学物质的浓度。
动力学法的优点是能够提供关于化学反应过程中特定化学物质浓度的连续信息。
其缺点是需要对反应速度进行复杂的分析和计算。
此外，在样品中存在多种反应同时进行的情况下，动力学法可能会受到干扰，因为不同反应的速度可能会相互影响。
综上所述，终点法和动力学法是生化分析仪中常用的分析方法。
终点法适用于分析反应速度较快的化学物质，提供关于特定化学物质浓度的定量信息。
动力学法适用于分析反应速度较慢的化学物质，能够提供关于特定化学物质浓度的连续信息。
在选择合适的方法时，需要根据分析的目的和样品的特性进行综合考虑。
生化分析仪是一种重要的实验室仪器，用于测量和分析生物体中的化学物质。
它可以应用于各种领域，如医学、生物化学、食品科学等。
终点法是生化分析仪中常用的一种方法，它通过观察反应终点来确定特定化学物质的浓度。
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生化方法学及仪器应用生化检测方法及仪器应用两点法：测定酶反应开始后某一时间内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量以求取酶反应初速度的方法。
终点法：通过测定酶反应开始到反应达到平衡时产物或底物浓度总变化量，以求出酶活力的方法，亦称平衡法。
速率法：是指连续测定(每15秒~1分钟监测一次)酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间的变化来求出酶反应的初速度的方法，即连续监测法。
一、常用生化检测项目分析方法举例1．终点法检测常用的有总胆红素（氧化法或重氮法）、结合胆红素（氧化法或重氮法）、血清总蛋白（双缩脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、总胆汁酸（酶法）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、总胆固醇（胆固醇氧化酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白胆固醇（直接测定法）、钙（偶氮砷Ⅲ法）、磷（紫外法）、镁（二甲苯胺蓝法）等。
以上项目中，除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外，其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法，包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用。
2．固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。
（两点法）3．连续监测法（速率法）对于酶活性测定一般应选用连点法、两点法、连续监测法等，根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。
3．反应温度一般有30℃、37℃可供选择，通常固定为37℃。
4．主波长主波长（primary wavelength）是指定一个与被测物质反应产物的光吸收有关的波长。
5．次波长次波长（secondary wavelength）是在使用双波长时，要指定一个与主波长、干扰物质光吸收有关的波长。
6．反应方向反应方向（response direction）有正向反应和负向反应两种，吸光度增加为正向反应，吸光度下降为负向反应。
7．样品量样品量（sampling volum）一般是2μl～35μl，以0.1μl步进，个别分析仪最少能达到1.6μl。
可设置常量、减量和增量。
8．第一试剂量第一试剂量（first regengt volum）一般是20～300μl，以1μl步进。
9．第二试剂量第二试剂量（second regengt volum）一般也是20～300μl，以1μl步进。
10．总反应容量总反应容量（total reacting volum）在不同的分析仪有一个不同的规定范围，一般是180～350μl，个别仪器能减少至120μl。
总反应容量太少无法进行吸光度测定。
11．孵育时间孵育时间（incubate time）在终点法是样品与试剂混匀开始至反应终点为止的时间，在两点法是第一个吸光度选择点开始至第二个吸光度选择点为止的时间。
12．延迟时间延迟时间（delay time）在连续监测法中样品与反应试剂（第二试剂）混匀开始至连续监测期第一个吸光度选择点之间的时间。
13．连续监测时间连续监测时间（continuous monitoring time）在延迟时间之后即开始，一般为60～120s，不少于4个吸光度检测点（3个吸光度变化值）。
14．校准液个数及浓度校准曲线线性好并通过坐标零点的，可采用一个校准液（calibrator）；线性好但不通过坐标零点，应使用两个校准液；对于校准曲线呈非线性者，必须使用两个以上校准液。
每一个校准液都要有一个合适的浓度。
15．校准K值或理论K值通过校准得到的K值为校准K 值（calibrate coefficient）或由计算得出的K值为理论K值。
16．线性范围即方法的线性范围（linearity range），超过此范围应增加样品量或减少样品量重测。
与试剂/样品比值有关。
17．小数点位数检测结果的小数点位数（decimal point digit）。
（二）备选分析参数这类分析参数与检测结果的准确性有关，一般来说不设置这类分析参数，分析仪也能检测出结果，但若样品中待测物浓度太高等，检测结果可能不准确。
1．样品预稀释设置样品量、稀释剂量和稀释后样品量三个数值，便可在分析前自动对样品进行高倍稀释。
2．底物耗尽值底物耗尽值（substrate exhaust limit）在负反应的酶活性测定中，可设置此参数，以规定一个吸光度下降限。
若低于此限时底物已太少，不足以维持零级反应而导致检测结果不准确。
3．前区检查免疫比浊法中应用，以判断是否有抗原过剩。
将终点法最后两个吸光度值的差别（ΔA）设置一个限值，如果后一点的吸光度比前一点低，表示已有抗原过剩，应稀释样品后重测。
4．试剂空白吸光度范围超过此设定范围表示试剂已变质，应更换合格试剂。
5．试剂空白速率连续监测法中使用，是试剂本身在监测过程中没有化学反应时的变化速率。
6．方法学补偿系数用于校准不同分析方法间测定结果的一致性，有斜率和截距两个参数。
7．参考值范围对超过此范围的测定结果，仪器会打印出提示。
（三）某些参数的特殊意义1．最小样品量最小样品量是指分析仪进样针能在规定的误差范围内吸取的最小样品量。
一般分析仪的最小样品量是2μl，目前也有小至1.6μl的。
在样品含高浓度代谢产物或高活性酶浓度的情况下往往需采用分析仪的最小样品量作为减量参数，从而使分析仪检测范围（与线性范围不同）的上限得以扩大。
2．最大试剂量方法灵敏度很高而线性上限低的检测项目，如血清白蛋白的溴甲酚氯法测定，以往手工法操作时样品量10μl，试剂量4ml，这样试剂量/样品量比例（R/S）为200，线性上限则为60g/L。
此法移植到分析仪上后，R/S却很难达到200，致使线性上限变低。
因此对这类检测项目最大试剂量非常重要。
3．弹性速率在酶活性测定中，当酶活性太高，在连续监测期中已不呈线性反应时，有些仪器具有弹性速率（flexrate）功能，能自动选择反应曲线上连续监测期中仍呈线性的吸光度数据计算结果，使酶活性测定的线性范围得以扩大。
如AST可从1000U/L扩展至4000U/L，从而减少稀释及重测次数、降低成本。
4．试剂空白速率当样品中存在胆红素时，胆红素对碱性苦味酸速率法或两点法测定肌酐有负干扰。
因为胆红素在肌酐检测的波长505nm有较高光吸收，而且胆红素在碱性环境中可被氧化转变，因而在肌酐反应过程中胆红素的光吸收呈下降趋势。
若在加入第一试剂后一段时间内设置试剂空白速率，因为此段中苦味酸尚未与肌酐反应，而胆红素在第一试剂的碱性环境中已同样被氧化转变，因而以第二试剂加入后的速率变化，减去试剂空白速率变化，便可消除胆红素的负干扰，见图7-8。
二、单波长和双波长方式（一）概念采用一个波长检测物质的光吸收强度的方式称为单波长(mono-wavelength)方式。
当反应液中含有一种组分，或在混合反应液中待测组分的吸收峰与其它共存物质的吸收波长无重叠时，可以选用。
在吸光度检测中，使用一个主波长和一个次波长的称双波长方式。
当反应液中存在干扰物的较大吸收、从而影响测定结果的准确性时，采用双波长方式更好。
（二）双波长的作用双波长(di-wavelength)测定优点是①消除噪音干扰;②减少杂散光影响;③减少样品本身光吸收的干扰。
从光源，到比色杯、单色器、检测器的整个光路系统中，均存在着随时间发生变化的不稳定的检测信号，即噪音，而双波长检测是同时进行的，两种波长检测产生的噪音基本上相同，因而能消除噪音干扰。
当样品中存在非化学反应的干扰物如甘油三酯、血红蛋白、胆红素等时，会产生非特异性的光吸收，而干扰测定结果的准确性。
采用双波长方式测定可以部分消除这类干扰，提高检测的准确性。
（三）次波长的确定方法当被测物的主波长确定之后，再选择次波长。
如根据甘油三酯等干扰物吸收光谱特征，选择次波长，使干扰物在主、次波长处有尽可能相同的光吸收值，而被测物在主、次波长处的光吸收值应有较大的差异。
一般来说，次波长应大于主波长100nm。
以主波长与次波长吸光度差来计算结果。
（四）双波长的具体应用对于某些反应速度快且无法设置为两点终点法的分析项目，尤其是单试剂分析中，可以利用双波长的方式来部分消除样品本身的光吸收干扰。
目前用单试剂法测定的项目应用双波长的为血清总蛋白（双缩脲法）主波长500nm，次波长576nm；血清白蛋白（溴甲酚氯法）主、次波长分别为600和700nm；钙（偶氮砷Ⅲ法）主、次波长分别为 660、770nm；磷（紫外比色法）主、次波长为340、405nm，镁（二甲苯胺蓝法）主、次波长为505和 600nm。
三、单试剂和双试剂方式反应过程中只加一次试剂称单试剂方式，加两次试剂便为双试剂方式。
目前的生化分析仪大多可用双试剂方式分析，其优点是：①可提高试剂的稳定性，多数双试剂混合成单一工作试剂时，其稳定时间缩短；②能设置两点终点法，来消除来自样品本身的光吸收干扰；③在某些项目检测时能消除非特异性化学反应的干扰。
如血清ALT测定，血清中的内源性丙酮酸及其它酮酸也可与试剂中的指示酶（乳酸脱氢酶）起反应，使结果偏高。
若先加入缺乏α-酮戊二酸的第一试剂，使其它酮酸与指示酶反应之后再加入含有α-酮戊二酸的第二试剂，启动真正的ALT酶促反应生成丙酮酸，而丙酮酸与乳酸脱氢酶的反应消耗的NAD＋能真正反映ALT的活性，从而消除以上副反应的影响。
四、测定过程的自动监测各种自动生化分析仪或多或少都具有对测定过程进行各种监测的功能，以便在没有人"监督"化学反应的情况下提高检测的准确性。
高档分析仪的监测功能更强。
1．试剂空白监测每种试剂都有一定的空白吸光度范围，试剂空白吸光度的改变往往提示着该试剂的变质：如利用Trinder反应为原理的检测试剂会因酚被氧化为醌而变为红色；碱性磷酸酶、γ－谷氨酰转移酶、淀粉酶等检测试剂会因基质分解出硝基酚或硝基苯胺而变黄；有些试剂久置后变浑浊。
这些情况均可使空白吸光度升高。
丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等负反应检测项目，其试剂在放置过程中空白吸光度会因NADH自行氧化为NAD+而下降等。
试剂空白的测定方法有两种：①每瓶试剂在使用前通过对试剂空白校准来确定试剂空白吸光度，这种方式适用于先取样品后加试剂的分析仪。
②每个样品测定前均检测试剂空白吸光度，适用于先加试剂后取样品的分析仪。
2．试剂空白变化速率监测一些酶试剂在反应温度下不稳定，其空白吸光度可随着时间逐渐发生变化，这种变化的主要原因与工具酶或辅酶的纯度有关，且因试剂的组成和生产厂家的不同而不同。
这种变化会影响测定结果的准确性，一般使结果偏高。
如果设置此项监测，分析仪在结果计算时会自动减去试剂空白变化速率。
在以监测NAD（P）H减少为指示反应的酶活性测定中，空白速率可监测并消除由NADH自身氧化所造成的吸光度下降；在色素原为底物的酶活性测定中，空白速率可监测并消除底物自身分解造成的吸光度升高。
有关空白速率监测在胆红素对碱性苦味酸速率法测定肌酐负干扰消除中的作用，已如前述。