卵磷脂的提取和纯化

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卵磷脂的提取实验报告

卵磷脂的提取实验报告

一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。

2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。

3. 学会使用各种实验仪器,如离心机、紫外分光光度计等。

4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。

二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂,由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。

卵磷脂具有多种生物学功能,如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。

本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂,通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤,得到高纯度的卵磷脂。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。

2. 实验试剂:无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。

四、实验步骤1. 卵磷脂的提取(1)称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄,加入30mL温热的95%乙醇,边加边搅拌均匀。

(2)将混合液冷却至室温,用漏斗过滤,收集滤液。

(3)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂粗制品。

2. 卵磷脂的纯化(1)将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚,溶解后过滤。

(2)将滤液置于蒸发皿中,水浴加热蒸干,得到卵磷脂纯制品。

3. 卵磷脂的鉴定(1)三甲胺的检验:取少量卵磷脂,加入2~5mL氢氧化钠溶液,水浴加热15min,观察红色石蕊试纸是否变蓝,并嗅其气味。

(2)不饱和性检验:取少量卵磷脂,加入3%溴的四氯化碳溶液,振摇观察是否褪色。

(3)磷酸的检验:取少量卵磷脂,加入5~10滴95%乙醇溶液和5~10滴钼酸铵试剂,水浴加热5~10min,观察是否产生蓝色沉淀。

(4)甘油的检验:取少量卵磷脂,加入0.2g硫酸氢钾,小火加热,观察是否有水蒸气放出,嗅其气味。

五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验,成功从蛋黄中提取出卵磷脂,得到白色蜡状物质。

2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀,得到高纯度的卵磷脂。

3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验,验证了提取的卵磷脂纯度较高。

卵磷脂的提取和鉴定实验报告

卵磷脂的提取和鉴定实验报告

卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于动植物细胞膜中,对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。

本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂,了解其提取方法和鉴定技术,为进一步研究和应用提供参考。

1. 提取卵磷脂的方法。

首先,我们需要准备卵黄,将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂,使卵磷脂从卵黄中溶解出来。

然后,通过离心将上清液和沉淀分离,将上清液转移到锥形瓶中,加入等体积的0.9%氯化钠溶液,摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。

最后,将沉淀离心,得到卵磷脂。

2. 卵磷脂的鉴定。

为了鉴定卵磷脂的纯度和结构,我们可以利用薄层色谱和质谱技术。

首先,将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中,然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品,放入薄层色谱仪中进行分离。

通过比色试剂或者紫外灯照射,我们可以观察到卵磷脂的斑点,并计算Rf值来确定其纯度。

另外,质谱技术也是一种常用的鉴定方法,通过质谱仪的分析,我们可以得到卵磷脂分子的质谱图,进而确定其分子结构和质量。

3. 实验结果与讨论。

经过提取和鉴定,我们成功得到了卵磷脂,并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。

通过比色试剂和紫外灯照射,我们观察到了卵磷脂的斑点,并计算出了其Rf值,证明了其纯度。

同时,质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰,进一步确认了其结构和质量。

在实验过程中,我们也发现了一些问题,比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰,导致提取得到的卵磷脂不够纯净。

因此,在今后的实验中,我们需要进一步优化提取方法,提高卵磷脂的纯度。

4. 结论。

通过本次实验,我们成功提取和鉴定了卵磷脂,了解了其提取方法和鉴定技术。

同时,我们也发现了一些问题,为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。

希望通过我们的努力,能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。

实验3卵磷脂的提取和鉴定

实验3卵磷脂的提取和鉴定
的准确性。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
从组织或细胞中提取卵磷脂。
在提取过程中,卵磷脂会从组织 或细胞中释放出来,并溶解在有
机溶剂中。
通过离心和过滤等操作,去除杂 质和其他磷脂成分,得到纯度较
高的卵磷脂。
卵磷脂的鉴定方法
薄层色谱法
将提取的卵磷脂点样在薄层板上,用 适宜的展开剂展开,然后通过显色反 应(如喷洒硫酸氢钠、高锰酸钾等) 进行鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和作用
生理功能
卵磷脂是生物膜的主要成分,具有保 护细胞膜、促进脂质代谢、降低血脂 等作用,对维持人体正常生理功能至 关重要。
作用
卵磷脂在人体内具有重要的生理作用 ,如促进大脑发育、提高记忆力和智 力水平、抗疲劳等,同时还有抗氧化 、抗衰老的作用。
探究不同提取条件对卵磷脂提取效果的影响
步骤6
通过显微镜观察卵磷脂的形态和结构,并使用色谱柱进 行进一步分析。
04 实验结果与分析
卵磷脂提取效果的测定
01
02
03
卵磷脂含量
通过测定提取液中卵磷脂 的含量,可以评估卵磷脂 的提取效果。
提取率
提取率是卵磷脂实际提取 量与理论提取量的比值, 反映了提取效率。
纯度
通过色谱分析等方法测定 卵磷脂中的杂质含量,以 评估卵磷脂的纯度。
结果分析与讨论
提取效率分析
实验结果显示,使用离心分离技术能 够有效地去除杂质,提高卵磷脂的纯 度。但提取效率较低,可能是由于有 机溶剂用量较大或提取时间较长所致。
鉴定方法比较
红外光谱和质谱分析均能准确鉴定卵 磷脂的主要成分,但质谱分析具有更 高的灵敏度和特异性,能够更准确地 鉴定卵磷脂中的微量成分。

提取卵磷脂实验报告

提取卵磷脂实验报告

一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。

2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。

3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜中。

它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。

卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。

本实验采用乙醇作为溶剂,通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂,并对其进行鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。

2. 实验仪器:离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。

四、实验步骤1. 取鸡蛋,去壳取蛋黄,用玻璃棒搅拌成糊状。

2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇,搅拌均匀。

3. 将混合液倒入烧杯中,用玻璃棒搅拌,使卵磷脂充分溶解。

4. 将烧杯置于冰箱中,低温处理2小时,使卵磷脂沉淀。

5. 取出烧杯,用漏斗和滤纸过滤沉淀物,得到卵磷脂粗提液。

6. 将粗提液倒入离心管中,离心分离,取下层卵磷脂沉淀。

7. 将沉淀物用乙醚洗涤,去除杂质,得到纯净的卵磷脂。

8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中,晾干至恒重。

五、实验结果与分析1. 提取结果:通过实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,得到白色蜡状物质。

2. 鉴定结果:a. 硫酸铜试验:取少量卵磷脂,加入硫酸铜溶液,振荡,若出现蓝色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有磷酸基团。

b. 氯化钠试验:取少量卵磷脂,加入氯化钠溶液,振荡,若出现白色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有胆碱。

六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂,能够有效提取蛋黄中的卵磷脂,提取率较高。

2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀,提高提取纯度。

3. 通过硫酸铜和氯化钠试验,对提取的卵磷脂进行了鉴定,验证了其纯度。

七、实验结论通过本实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,并对其进行了鉴定。

实验结果表明,本实验方法可行,提取的卵磷脂纯度较高,为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。

八、实验注意事项1. 实验过程中,注意操作规范,避免交叉污染。

卵磷脂的提取

卵磷脂的提取

卵磷脂的提取卵磷脂的提取一、实验原理卵磷脂为两性分子,既具有脂溶性,又具有亲水性,其等电点为6.7。

纯净的卵磷脂为淡黄色,液态,有清淡柔和的风味和香味。

卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂中,也能溶于水中成为胶体状态,但不溶于丙酮,且不同的磷脂在有机溶剂中的溶解度不同,故可用这些有机溶剂来提取分离卵磷脂。

卵磷脂的提取方法有有机溶剂法;无机盐复合沉淀法;乙酸乙酯纯化法;超临界Co2萃取法;色谱法和酶法等。

有机溶剂法:根据蛋黄中各组分在溶剂中的溶解度不同而进行分离的,该方法提取卵磷脂具有分离效率高,生产周期短,易实现自动化等优点,但所得卵磷脂纯度不高。

本实验采取有机溶剂法对卵磷脂进行粗提取,再进一步纯化。

二、试验材料的依据三、操作步骤1、原蛋液处理原料蛋去壳,蛋内容物搅拌、过滤,取培养皿称量原蛋液2g于50~55℃的真空干燥器中烘干,磨成粉末。

2、原料粉浸泡用乙醇和甲醇1:1的混合液浸泡,混合液的用量为原料粉的2倍,浸泡时醇液以高出粉面30~35cm为原则:先将混合醇液倒入烧杯中,然后边搅拌边加入原料粉,持续搅拌到醇浸液为金黄色,用倾泻法(即将沉淀上澄清液沿玻棒小心倾入漏斗,尽可能使沉淀留在杯中。

少量是为防止洗涤后溶液太多,多次是为是清洗的更干净)吸取金黄色醇浸液,沉淀物倒入细纱布中,压出余下的浸泡液,移至前浸液中。

3、蒸馏浓缩甲醇的沸点为66.78℃,乙醇的沸点为78.4℃,故将醇浸液加热至78~80℃时醇变成气体,由分馏柱进入冷凝管;再变成液体而积存于接受瓶中。

当蒸馏出2/3的醇液时,便可升高蒸馏温度达80~85℃,继续蒸馏至烧瓶中残液已呈浊厚油状物,而冷凝管中已不再滴下回收醇液时,即可停止蒸馏,准备进行沉淀净化。

沉淀净化是用丙酮进行。

方法是将平底(或圆底)大烧杯中残余的油状物倒出,加入油状物2倍量的丙酮,以便净化沉淀。

加丙酮时应用玻璃棒搅拌,静置,待其沉淀分层。

将上层浑浊的丙酮洗液倾出,加入同量的丙酮搅拌洗净,放入已干燥、称重且标记了的离心管中,4000r/min离心10min,这样重复两三次。

卵磷脂的提取实验报告

卵磷脂的提取实验报告

卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言:卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物,存在于生物体细胞膜中,具有重要的生理功能。

本实验旨在通过提取卵磷脂,了解其提取方法和应用。

实验材料与方法:材料:鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器:搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤:1. 取适量鸡蛋,将蛋黄与蛋清分离。

2. 将蛋黄放入搅拌器中,加入适量乙醇,搅拌均匀。

3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心,离心后分为两层,上层为乙醇层,下层为沉淀层。

4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

5. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。

6. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。

7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

8. 加入适量水,摇匀后放置静置。

9. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。

10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

11. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。

12. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。

13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

14. 加入适量水,摇匀后放置静置。

15. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。

结果与讨论:经过多次提取,我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。

实验过程中,通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用,能够有效地分离出卵磷脂。

乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂,而氯化钠则用于调节溶液的渗透压,帮助分离。

氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂,能够与卵磷脂形成复合物,从而实现分离。

卵磷脂作为一种重要的生物大分子,具有多种生理功能。

首先,卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一,能够维持细胞膜的完整性和稳定性。

其次,卵磷脂还参与细胞信号传导,调节细胞功能。

此外,卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能,常被用作食品添加剂和药物载体。

在实际应用中,卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。

例如,可以根据不同来源的卵磷脂进行提取,以获得特定的卵磷脂种类。

卵磷脂的提取和纯化-学长

卵磷脂的提取和纯化-学长

卵磷脂的提取和纯化浙江工业大学药学院罗杨春宋建林杰摘要:本实验探索以油菜花油脚为原料,制备高纯度卵磷脂的最佳条件,选择树脂类型、反应温度、反应时间、萃取剂等因素进行单因素实验。

实验结果表明:关键词:卵磷脂提取纯化离子交换树脂正文:1. 前言卵磷脂是一类具有重要生理活性和表面活性的生命物质,在生物细胞膜的功能和代谢方面具有十分重要的调节作用。

药用卵磷脂是磷脂类产品中最具高附加值的产品形态。

它不仅要求纯度高,而且要求乳化能力强,并达到静脉注射用的相关要求,其提取工艺和技术比较复杂、难度较大。

其中分离脑磷脂与卵磷脂方面为提高卵磷脂产品纯度较为关键的步骤。

国内外学者利用溶剂萃取法、超临界流体分离法、高效液相色谱法和柱层析法等方法分离纯化磷脂酰胆碱的分离效果一般不理想并且适应面窄;柱层析法是目前主要的研究方法,多数采用Al2O3为分离介质,但分离过程中PC和PE分离的选择性仍不理想,分离后PC中溶血磷脂(LPC)的分离不彻底,使该方法在制备注射级卵磷脂时受到极大限制。

利用大孔型离子交换树脂对PC,PE,LPC吸附能力的不同,可进行分离。

离子交换树脂法具有吸附容量大、选择性好、易于解吸、机械强度高、再生处理简单、吸附速度快等特点,从而达到高效的分离效果。

2.材料和方法2.1 药品与试剂自备粗卵磷脂(PC含量约为47%)丙酮(分析级)、无水乙醇(分析级)、超纯水 ZnCl2、CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl22.2 实验步骤2.2.1离子交换:用0.1mol/L NaOH 10mL碱洗、0.1mol/L Hcl 10mL酸洗各种树脂(D113、116、001x7、001x10、201x4)最后再水洗。

取一定量的CuSO4·5H2O、CaCl2、MgCl2、Zn(Ac)2配成浓度为0.05mol/L的溶液。

活化后的树脂各取1g至50ml具塞锥形瓶中,分别加入0.03mol/L的各溶液,恒温水浴震荡24 小时,水浴温度为36℃。

鸡蛋中卵磷脂提取鉴定

鸡蛋中卵磷脂提取鉴定

卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效:保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性:无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围:护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景:随着消费者对健康和环保的关注度提高, 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
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汇报人:
目录
鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性:卵磷脂在油脂中 的溶解度较高,因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化:提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质,需要进行纯化 处理,常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
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卵磷脂的提取方法:通常采用有机 溶剂萃取法,将鸡蛋中的油脂溶解 后,再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同,将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性:卵磷脂难溶于水,易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性:卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值:卵磷脂具有皂化特性
酸碱度:卵磷脂在酸性条件下 稳定,在碱性条件下易水解
红外光谱:卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法:鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法:鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取:使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离:通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理:去除蛋壳,收集蛋 黄
鉴定:通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定:通过光谱、色谱等技 术,对卵磷脂进行鉴定
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卵磷脂制备实验报告

卵磷脂制备实验报告

一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法。

2. 学习卵磷脂的纯化与鉴定技术。

3. 了解卵磷脂在生物医学领域的应用。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜中。

它由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成,具有降低血液胆固醇、增强免疫力、保护心血管等多种生物学功能。

本实验采用乙醇提取法从大豆中提取卵磷脂,通过离心、洗涤、干燥等步骤进行纯化,最后通过薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)对提取的卵磷脂进行鉴定。

三、实验材料与仪器材料:1. 大豆粉2. 乙醇3. 氯仿4. 无水硫酸钠5. 氢氧化钠6. 醋酸7. 磷酸氢二钠8. 氯化钠9. 磷酸二氢钠10. 氨水11. 水合氯醛12. 薄层色谱板13. 液相色谱仪仪器:1. 磁力搅拌器2. 离心机3. 烘箱4. 热水浴锅5. 薄层色谱仪6. 液相色谱仪四、实验步骤1. 提取:1. 将大豆粉与乙醇按质量比1:10混合,搅拌溶解。

2. 将混合液在磁力搅拌器上搅拌30分钟。

3. 将混合液过滤,收集滤液。

2. 纯化:1. 将滤液加入无水硫酸钠,静置过夜。

2. 取上清液,加入氢氧化钠溶液,调节pH值为8.5。

3. 将混合液在离心机中以3000r/min离心10分钟。

4. 取上层清液,加入氯仿,振荡混合。

5. 静置分层,取氯仿层,加入醋酸溶液,调节pH值为7.0。

6. 将混合液在离心机中以3000r/min离心10分钟。

7. 取上层清液,加入无水硫酸钠,静置过夜。

8. 取上清液,在烘箱中干燥,得到卵磷脂。

3. 鉴定:1. TLC鉴定:1. 将卵磷脂样品点于薄层色谱板上。

2. 将薄层色谱板置于氯仿-醋酸溶液中,上行展开。

3. 取出薄层色谱板,晾干,喷以磷钼酸试剂。

4. 观察并记录斑点位置。

2. HPLC鉴定:1. 将卵磷脂样品溶解于氯仿中,制备成适当浓度的溶液。

2. 将溶液注入液相色谱仪,进行分离。

3. 记录色谱图,分析卵磷脂的含量。

五、实验结果与分析1. TLC鉴定:实验结果表明,卵磷脂在氯仿-醋酸溶液中展开后,在薄层色谱板上呈现出明显的斑点,与标准品位置一致。

实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定

实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定

实验五:蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定一、实验目的⏹掌握从鲜鸡蛋中提取卵磷脂的方法与原理。

⏹卵磷脂鉴定的方法与原理。

⏹加深了解磷脂类物质的结构和性质。

二、实验内容磷脂是一类含有磷酸的脂类,机体中主要含有两大类磷脂,由甘油构成的磷脂称为甘油磷脂(phosphoglyceride);由神经鞘氨醇构成的磷脂,称为鞘磷脂(sphingolipid)。

其结构具有由磷酸相连的取代基团(含氨碱或醇类)构成的亲水头(hydrophilic head)和由脂肪酸链构成的疏水尾(hydrophobic tail)。

在生物膜中磷脂的亲水头位于膜表面,而疏水尾位于膜内侧。

磷脂是重要的两亲物质,它们是生物膜的重要组分、乳化剂和表面活性剂。

磷脂依照氨基醇的不同可分:(1)磷脂酰胆碱(卵磷脂)(PC),分布:植物主要有大豆等,动物主要有脑、精液、肾上腺、红细胞,蛋卵黄(8-10%)。

其主要作用是控制肝脂代谢,防止脂肪肝的形成;(2)、磷脂酰乙醇胺(脑磷脂)(PE),参与血液凝结;(3)、磷脂酰丝氨酸(PS);(4)、磷脂酰肌醇(PI);(5)、磷脂酰甘油(PG);(6)、二磷脂酰甘油(心磷脂)。

蛋黄磷脂属动物胚胎磷脂,含有大量的胆固醇和甘油三酯及许多人体不可缺少的营养物质和微量元素。

卵磷脂是生命的基础物质,人类生命自始至终都离不开它的滋养和保护。

卵磷脂存在于每个细胞之中,更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。

卵磷脂也被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。

蛋黄卵磷脂可将胆固醇乳化为极细的颗粒,这种微细的乳化胆固醇颗粒可透过血管壁被组织利用,而不会使血浆中的胆固醇增加。

三、实验原理、方法和手段原理一:卵磷脂是生物体组织细胞的重要成分,主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心、卵等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)。

卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开;卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶,利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定

鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定

整理课件
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8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤
• 正常人体内含有许多毒素,特别是在肠道内,当这些毒素含量 过高时,便会随着血液循环沉积在皮肤上,从而形成色斑或青 春痘。卵磷脂正好是一种天然的解毒剂,它能分解体内过多的 毒素,并经肝脏和肾脏的处理排出体外,当体内的毒素降低到 一定的浓度时,脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还 具有一定的亲水性,并有增加血红素的功能,如果每天服用一 定量的卵磷脂,就能为皮肤提供充分的水分和氧气,使皮肤变 得光滑柔润。
整理课件
14
10、良好的心理调和剂
• 社会竞争日趋激烈,人们长期处在紧张的环境和种种压力下, 常患有焦虑、急躁、易怒、失眠、耳鸣等症,即植物神经紊 乱,通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷脂,可使大脑神经 及时得到营养补充,保持健康的工作状态,利于消除疲劳, 激化脑细胞,改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等 症。
整理课件
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9、预防老年痴呆症的发生
• 人随着年龄增长,记忆力会减退,其原因与乙酰胆碱含量 不足有一定关系。脑部的神经传导物质(乙酰胆碱)减少 是引起老年痴呆的主要原因,乙酰胆碱是神经系统信息传 递时必需的化合物。而且“胆碱”是卵磷脂的基本成分, 卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体内的 乙酰结合为“乙酰胆碱”,从而成为大脑提供充分的信息 传导物质,大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱,并很 快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退 的进程,预防或推迟老年痴呆的发生。
整理课件
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以蛋黄为原料的制备工艺
(一)卵磷脂粗品的提取 取约10 g (两吸管)蛋黄于50 mL小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30 mL
滤纸过滤
将滤液置于蒸发皿内,水浴 锅中蒸干,所得干物即为卵 磷脂粗品。

卵磷脂的提取和鉴定实验报告

卵磷脂的提取和鉴定实验报告

卵磷脂的提取和鉴定实验报告实验报告卵磷脂的提取和鉴定实验目的:了解卵磷脂的提取方法,并通过实验鉴定卵磷脂的纯度。

实验原理:卵磷脂是一种磷脂类物质,具有重要的生物学功能。

卵磷脂的提取可以采用乙醇-醋酸法。

具体步骤如下:1. 取鸡蛋黄1个,加入乙醇5ml,充分混匀。

2. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。

3. 将混合液过滤,得到固体物质。

4. 将固体物质溶解在氯仿中,得到卵磷脂样品。

通过卵磷脂的紫外吸收光谱,可以鉴定卵磷脂的纯度。

卵磷脂的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。

卵磷脂的纯度越高,吸收峰越尖锐,吸收强度越大。

实验仪器和试剂:乙醇、醋酸、氯仿、紫外分光光度计。

实验步骤:1. 取鸡蛋黄1个,放置室温下1小时。

2. 用清水清洗后风干。

3. 取鸡蛋黄5g,磨碎成细末。

4. 将鸡蛋黄末加入乙醇5ml,充分混匀。

5. 加入醋酸10ml,再次充分混匀。

6. 将混合液倒入漏斗中,过滤掉固体物质。

7. 将固体物质溶解在氯仿中,摇匀,得到卵磷脂样品。

8. 在紫外分光光度计上测试卵磷脂的吸光度。

实验结果:卵磷脂样品的吸收峰位于短波长紫外区,主要吸收波长为206nm和223nm。

经过检测,本次实验制备的卵磷脂纯度较高,吸收峰尖锐,吸收强度较大。

实验结论:本次实验熟悉了卵磷脂的提取方法,并通过紫外吸收光谱鉴定卵磷脂的纯度。

实验结果表明,利用乙醇-醋酸法可以有效地提取卵磷脂,并制备出具有较高纯度的卵磷脂样品。

卵黄卵磷脂提取纯化及纯度鉴定实验设计

卵黄卵磷脂提取纯化及纯度鉴定实验设计

评价。实验中综合了萃取技术 、 分离技术、 柱层析技术 、 薄层层析技术、 紫外分光光度法等 内 容 。 目的在 于通过本 实验使 学生 掌握生 物活性 分子 分离 提 取 的策 略及 一般 方 法 , 对 使 用 的 并 技 术路 线或提 取工艺 进行合 理性 的评 价 。
1 实验原理
25 / i。根 据 色谱工 作站 的 曲线 和 定 性 检 测 结果 , 定 目标试 管 , 集 洗 脱 液 , 缩 、 .mL mn 确 收 浓 干 燥 , 到纯化 卵磷 脂 引。 得
2 3 薄 层层 析法 鉴定 .
将 硅胶 G与 02 % 的羧 甲基 纤 维 素 钠水 溶 液按 13比例 调 成 糊 状 , .5 : 然后 涂 布 于 9m × c 2e 的玻 璃板 上 , 度 0 2r, 0m 厚 .e 自然 阴干 。使用 前置 于 10C烘箱 中活化 1 h a 2 ̄ ~2 。用 微 量取样 器 取 1u 品液 , 0 L样 点样 , 自然 干燥 后 置 于 层 析 缸 中 , 开 剂 为氯 仿 . 待 展 甲醇 . (0 2 :) 。 水 8 :5 3 ] 待展 开剂 距顶部 2m 时 , 析完成 , 出硅胶 板 , c 层 取 吹干 , 用碘水 喷洒 显色 。结果 见 图 1 。图 1 表 明卵磷脂 粗 品经 硅胶 G柱层 析后 得 以纯化 , 且纯 化效果 明显 。
按 一般方 法 , 如对 4个 因 素 3个水 平 的各 种组 合都 要考虑 , 需做 3 8 次试 验 , 共 = 1 而用 正 交表安 排 只需做 9次试 验 。实验安 排详 见表 2 。
表 2 根据 正 交表 设计 的 实 验 安 排表
序 号 提 取 温 度/ ℃ 提 取 时 间/ n mi 醇醚 比 料 液 比 试 验 结果 ( 磷 脂 重/ ) 卵 g

生物化学实验

生物化学实验

(3)磷酸 取一支试管,加入2mL水解液, 然后加入5滴硝酸银和1mL钼酸 铵溶液后,在沸水浴中加热, 观察有无黄色磷钼酸铵沉淀
实验现象及结果分析
取新鲜橘子皮2g制作样液 标准液滴定:2,6-二氯酚靛1.8ml,滴定终点 样液滴定:第一次1.4ml,第二次1.6ml
1. 用铅笔将层析色谱轮廓和 中心点描出来; 2. 测量原点至色谱中心和至 溶剂前沿的距离,计算各种已 知氨基酸和未知氨基酸的Rf值。 3. 分析混合样品中未知氨基 酸的组分。
探究温度对淀粉酶活性的影响 放置于0度、室温、沸 水中的试管,分别呈 淡紫色、无色、深紫 色。
探究ph对淀粉酶活性的影响
pH 5.0、 5.8 、6.8 、8.0
1. 盐析:取一支试管加入3ml蛋白质氯化钠溶液和3m1饱和硫酸铵溶液,混匀,静置 约10 min,球蛋白则沉淀析出,倒出少量混浊沉淀,加少量水。观察现象,加水前后 如图1,2所示
图1
图2
2. 重金属离子沉淀蛋白质:取1支试管,加入蛋白质溶液2ml,再加3%硝酸银溶液12滴,振荡管,有沉淀产生。放置片刻,倾去上清液,沉淀中加入少量的水,观察现 象,加水前后如图3,4所示
卵磷脂的提取与纯化: 黄色油状物加入3~5 mL氯仿搅
拌使其完全溶解,然后搅拌下慢 慢加入10 mL丙酮,搅动使卵磷脂 尽量析出,抽滤,得固体物质卵 磷脂
三甲胺试验:
取制得的卵磷脂一部分放
入试管中加入10%氢氧化钠 2ml,在100℃水浴上加热 闻到鱼腥味
钼酸铵试验: 取干净试管一支,加入
10滴上述滤液,加入10滴 95%乙醇,摇匀,再加入10 滴钼酸铵试剂,观察现象; 最后将试管放入热水浴中 加热5~10min,有刺激性 气味产生。
图3

大豆卵磷脂的分离纯化研究进展

大豆卵磷脂的分离纯化研究进展
磷脂的有机溶剂萃取法是根据混合磷脂中各 组分在溶剂中溶解性的差异分离。早期主要是利 用低级醇 ( C1 ~ C4 ) 进行分离。 PC 在低级醇中 溶解度较大, 而 PE 和 P I在低级醇中 溶解度小, 利用溶解性的差异, 可以得到富含 PC或 PE 的产 品。以浓缩大豆磷脂为原料, 用乙醇萃取富集卵 磷脂馏 分, 经分离去 毒、真空 浓缩、丙 酮脱油、 吸附脱色、过滤、浓缩, 得到大豆卵磷脂; 用全 溶剂法从大豆油脚为原料, 用全溶剂法精制出符 合药用 ( 口服和注射 ) 规格的大豆卵磷脂, 卵磷 脂含量达 78 66% ; 以脱油磷脂为原料, 进行溶 剂分提富集 PC, 在较低的分提温度, 较低的乙醇 浓度有利于提高 PC 的含量 [ 4 ~ 6 ] 。用全溶剂法通 过长期大量的生产实验, 实验中得到的产品质量 经检验全部达到国际药典要求。同时, 总结出一 些直接影响到 PC 的产率和质量工艺要点与工艺 参数; 用混合溶剂和丙酮对粗大豆磷脂进行了提 取, 得到了卵磷脂, 获得了较佳的工艺参数 [ 7, 8] 。
1 概述
磷脂最早由 U auque lin于 1821 年从人脑中发 现, 又由 Gob ley 于 1844 年从 蛋 黄中 分离 出来。 1925年 L even将卵磷脂 (磷脂酰胆碱 ) 从其他磷 脂中分离出来。迄今认为最为丰富的大豆磷脂是 19 30年 发现 的。
磷脂普遍存在于动植物细胞的原生质和生物 膜中, 对生物膜的生理活性和肌体的正常代谢有 重要的调节功能。
Ch ina Food Add itives
2005 No 5
脑磷 脂 ( 磷 脂酰 乙醇 胺, phosphatidyl etha nolam ines, 简称 PE ) ; 肌醇磷脂 ( 磷脂酰肌醇, phosphatidy l inosito ls , 简 称 P I) ; 丝 氨 酸 磷 脂 ( 磷脂酰丝氨酸, phosphatiay l serines, 简称 PS) 。 此外还 有磷 脂酰 甘油、二磷脂 酰甘 油、缩 醛 磷 脂、溶血磷脂等。

实验三卵磷脂的提取和鉴定

实验三卵磷脂的提取和鉴定
实验三卵磷脂的提取和鉴定
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与展望
01 实验目的
掌握卵磷脂的提取和鉴定方法
卵磷脂的提取
利用有机溶剂从动植物组织中提 取卵磷脂,可以采用低温、高压 、超声波等辅助手段提高提取效 率。
卵磷脂的鉴定
通过观察卵磷脂的外观、溶解性 、颜色反应等特征,结合薄层色 谱法、气相色谱法等方法对卵磷 脂进行定性鉴定。
了解卵磷脂的生理功能和用途
生理功能
卵磷脂是细胞膜的重要成分,具有保 护细胞、维持细胞正常功能的作用; 同时,卵磷脂还具有降低血脂、预防 心血管疾病等功效。
用途
卵磷脂在食品、药品、化妆品等领域 广泛应用,可作为添加剂、药物成分 或保湿剂等。
探究不同提取条件对卵磷脂提取率的影响
提取条件
研究不同有机溶剂、温度、时间、料 液比等因素对卵磷脂提取率的影响, 通过单因素和正交试验等方法优化提 取工艺。
结果分析
通过对比不同提取条件下卵磷脂的提 取率,分析提取条件对卵磷脂提取效 果的影响,为实际生产提供理论依据。
02 实验原理
卵磷脂的化学组成和性质
卵磷脂是磷脂类的一种,由甘 油、脂肪酸、磷酸和胆碱组成。
卵磷脂具有亲水性和亲油性, 是细胞膜的重要成分,对维持 细胞结构和功能具有重要作用。
卵磷脂在自然界中广泛存在于 动植物组织中,尤其是脑、肝、 卵黄等组织中含量较高。
实验结果的分析与讨论
总结词
实际应用取方法和鉴定手段具有实 际应用价值,能够为卵磷脂的生产和开发提 供技术支持。同时,本实验结果可为相关领 域的研究提供参考和借鉴。
05 结论与展望
实验结论
卵磷脂提取成功

卵磷脂的提纯的实验报告

卵磷脂的提纯的实验报告

一、实验目的1. 掌握卵磷脂的提取方法;2. 学习卵磷脂的提纯技术;3. 了解卵磷脂在生物体内的作用和应用。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜、脑、神经组织等部位。

其化学结构为甘油、胆碱、磷酸和脂肪酸组成的磷脂类物质。

卵磷脂具有多种生物活性,如延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等。

本实验采用乙醇提取卵磷脂,利用乙醚进行提纯。

实验过程中,通过离心分离、沉淀、洗涤等步骤,使卵磷脂与其他杂质分离,提高卵磷脂的纯度。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:蛋黄、95%乙醇、乙醚、蒸馏水、氯化钠、无水硫酸钠、石油醚、硫酸铜、硫酸钠、盐酸等。

2. 实验仪器:离心机、恒温水浴锅、磁力搅拌器、锥形瓶、漏斗、烧杯、试管、滴定管、移液管等。

四、实验步骤1. 提取卵磷脂(1)取一定量的蛋黄,加入适量的95%乙醇,充分搅拌,使蛋黄溶解;(2)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的氯化钠,充分搅拌,使蛋白质沉淀;(3)将溶液静置一段时间,待蛋白质沉淀后,取上层清液;(4)将上层清液转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(5)将洗涤后的沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(6)将溶液过滤,收集滤液。

2. 卵磷脂的提纯(1)将收集到的滤液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(2)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(3)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的石油醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(4)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(5)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(6)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(7)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(8)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(9)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(10)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(11)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(12)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(13)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(14)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(15)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(16)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(17)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(18)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(19)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(20)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(21)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(22)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(23)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(24)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(25)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(26)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(27)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(28)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(29)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(30)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(31)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(32)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(33)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(34)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(35)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(36)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(37)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(38)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(39)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(40)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(41)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(42)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(43)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(44)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(45)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(46)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(47)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(48)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(49)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(50)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(51)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(52)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(53)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(54)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(55)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(56)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(57)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(58)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(59)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(60)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(61)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(62)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(63)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(64)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(65)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(66)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(67)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(68)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(69)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(70)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(71)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(72)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(73)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(74)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(75)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(76)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(77)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(78)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(79)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(80)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(81)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(82)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(83)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(84)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(85)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(86)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(87)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(88)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(89)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(90)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(91)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(92)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(93)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(94)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(95)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(96)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(97)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(98)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(99)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(100)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(101)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(102)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(103)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(104)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(105)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(106)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(107)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(108)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(109)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(110)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(111)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(112)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(113)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(114)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(115)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(116)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(117)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(118)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(119)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(120)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(121)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(122)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(123)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(124)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(125)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(126)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(127)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(128)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(129)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(130)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(131)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(132)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(133)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(134)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(135)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(136)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(137)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(138)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(139)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(140)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(141)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(142)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(143)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(144)将洗涤后的沉淀转移到烧杯中,加入适量的盐酸,充分搅拌,使卵磷脂溶解;(145)将溶液转移到锥形瓶中,加入适量的无水硫酸钠,充分搅拌,使水分被吸收;(146)将溶液静置一段时间,待水分被吸收后,取上层清液;(147)将上层清液转移到烧杯中,加入适量的乙醚,充分搅拌,使卵磷脂沉淀;(148)将沉淀转移到锥形瓶中,加入适量的硫酸铜和硫酸钠,充分搅拌,使卵磷脂进一步沉淀;(149)将沉淀转移到漏斗中,用蒸馏水洗涤沉淀,直至洗涤液无色;(150)。

实验九_卵磷脂的提取和鉴定

实验九_卵磷脂的提取和鉴定

3 1∶6
5
2 4∶1
2 25℃
3 30
1 1∶4
6
2 4∶1
3 60℃
1 10
2 1∶5
7
3 3∶1
1 4℃
3 30
2 1∶5
8
3 3∶1
2 25℃
1 10
3 1∶6
9
3 3∶1
I (I水平试验结果总合) II (II水平试验结果总合) III(III水平试验结果总合) I/3 II/3 III/3 级差
精选ppt课件
4
正交法实验设计
物质提取、纯化受到多种因素的影响,如抽提物
的种类及其配比、抽提条件(温度、时间等)都能影 响提取的结果。这种多因素的试验可以通过正交法, 即用一特制的表格—正交表来安排试验,计算和分析 试验结果。这样就能通过少量试验取得较好的效果。
本实验运用正交法抽提物的种类及其配比、时间温 度和料液比这4个因素对卵磷脂提取和纯化的影响, 并求得在什么样的条件下可以达到最佳的试验效果。
3 60℃
2 20
1 1∶4
精选ppt课件
试验结果
将本试 验的4个 因素依 次放在 L9表的 第1,2, 3,4列, 再将各 列的水 平数用 该列因 素相应 的水平 写出来, 就得到 上表的 试验安
排。 8
(二)薄层层析
薄层层析(TLC)是一种微量而快速的层析方法。 其层析是在吸附剂(固相支持物)均匀涂布的的薄 层上进行的,故称薄层层析。而待分析的样品,是 点加到薄层板的一端,然后将该端浸入适宜的展层 剂中,在密闭的层析缸中展层。
实验九 卵磷脂的提取、纯化和鉴定
2008年12月
精选ppt课件
1
一、实验目的

卵磷脂工业提取的一般工艺流程

卵磷脂工业提取的一般工艺流程

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实验三卵磷脂的提取和鉴定

实验三卵磷脂的提取和鉴定
实验三 卵磷脂的提取和鉴定
实验目的 了解磷脂类物质的结构和性质 学习卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。
实验原理
磷脂是生物体组织细胞的重要成分,在脑、 神经组织、肾上腺和红细胞中含量较高,在 蛋黄中含量特别丰富(10%左右)。卵磷脂能溶 于乙醇而脑磷脂、离。卵磷 脂溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将 其与醇溶性的中性脂肪分离开,达到纯化卵 磷脂的目的。
将上述加热过的溶液过滤。滤液性状:
2.磷酸的检验 取干净试管一支,加入10滴上述滤液,加入10滴 95%乙醇,摇匀,再加入10滴钼酸铵试剂,观察现 象;最后将试管放入热水浴中加热5~10min,观察 有何变化。
CO2-CH2
- CO2-CH O
+
CH2O-P-O-CH2CH2-N(CH3)3
O
H-OH
磷脂分子中同时具有疏水基和亲水基。正是由于 这种特点,使得磷脂类化合物在细胞中起着重要 的生理作用。
卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、 胆碱和磷酸盐,可分别进行化学鉴定。胆碱在 碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气 味的三甲胺;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作 用,生成黄色的磷钼酸沉淀。通过对分解产物 的检验可以对提取的卵磷脂粗品进行鉴定。
现象:
滤纸过滤
滤液性状:
将滤液置于蒸发皿内,水浴锅中 蒸干,所得干物即为卵磷脂粗品。
粗提物性状:
(二)卵磷脂的溶解性观察 药勺刮取取粗提物少许,置干燥试管底部,
加入1mL 乙醚,用玻棒搅动
现象?
加入2mL丙酮
现象?
(三)卵磷脂的水解与鉴定
1.三甲胺的检验 取干燥试管一支,加入少量提取物和3mL 10% NaOH溶液,水浴加热15min,在管口放一片蒸馏水 润湿过的红色石蕊试纸,观察颜色有无变化,并嗅其 气味,记录。
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剂中,在密闭的层析缸中展层。
由于各种物质的结构和性质的不同,其在吸附 剂表面的吸附能力各异。吸附力大的易被吸附剂吸
附,而较难被展层剂所解吸。吸附力小的则不易被
吸附剂吸附,而易被展层剂携带至较远的距离。这
样,各种物质在吸附剂和展层剂之间反复多次的被
吸附与解吸附,就表现出不同的迁移率而得以分离, 并可以通过与显色剂的显色反应而得到鉴定与区分。
7、显色:用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶
液,热风吹干至色斑显现。
五、实验结果
1、卵磷脂收率 卵磷脂收率 = 卵磷脂粗品重量 / 蛋黄重量×100% 2、计算各组分的Rf 值 3、判断卵磷脂粗提物的组分 四种磷脂标准品的Rf值分别为:溶血卵磷脂0.18;神 经鞘磷脂0.33;卵磷脂0.65;磷脂酰乙醇胺0.96


HO
二、实验原理
(一)卵磷脂的提取和纯化
磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿,部分溶于乙醇,极难溶于丙酮; 卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂,但不溶于 丙酮; 丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。
因此,本实验用乙醇、乙醚为溶剂,丙酮为沉淀剂,干燥后
获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为 白色蜡状物 ,与空气接 触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈 黄褐色 。卵磷脂中的胆碱,
将本试 验的4个 因素依 次放在 L9表的 第1,2, 3,4列, 再将各 列的水 平数用 该列因 素相应 的水平 写出来, 就得到 上表的 试验安 排。
(二)薄层层析
薄层层析(TLC)是一种微量而快速的层析方法。 其层析是在吸附剂(固相支持物)均匀涂布的的薄 层上进行的,故称薄层层析。而待分析的样品,是 点加到薄层板的一端,然后将该端浸入适宜的展层
表1
抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平
水平
1 2
影响因素 [乙醇]∶ [乙醚] 5∶1 4∶1 温度 4℃ 25℃ 时间(min) 10 20 料液比 1∶4 1∶5
3
3∶1
60℃
30
1∶6
表3
L9

按一般方法,如对4个因素3个水平的各种搭配都要考虑,共 需做3*3*3*3=81次试验,而用正交表只需做9次试验,即选用L9 表(L是正交表的代号,下标数字表示试验次数)。
卵磷脂的提取、纯化和鉴定
一、实验目的
1、学习和掌握卵磷脂的提取和鉴定方法; 2、掌握薄层层析的原理、方法和应用。

是细胞膜磷脂双分子层的重要成分。
卵磷脂又称磷脂酰胆碱,是甘油磷脂的一种。在动植物
体内均有分布,在动物的脑、精液、心、肝、肾上腺和 卵细胞中含量较多,蛋黄中含量可达8-10%。
其结构式:
在碱性溶液中可分解为三甲胺,而具有特异的鱼腥味,可用
于鉴定。
正交法实验设计
物质提取、纯化受到多种因素的影响,如抽提物 的种类及其配比、抽提条件(温度、时间等)都能影 响提取的结果。这种多因素的试验可以通过正交法, 即用一特制的表格—正交表来安排试验,计算和分析 试验结果。这样就能通过少量试验取得较好的效果。 本实验运用正交法抽提物的种类及其配比、时间 温度和料液比这4个因素对卵磷脂提取和纯化的影响, 并求得在什么样的条件下可以达到最佳的试验效果。
(2)0. 2%羧甲基纤维素钠溶液;
(3)展层剂 :氯仿∶甲醇∶水(65∶25∶4) ;
(4)显色剂:1% 碘液。
四、实验步骤
(一)卵磷脂的提取
1、卵磷脂的粗提 蛋黄 10g 放入洁净的带塞三角瓶中,加入 95% 乙醇 40ml ,搅拌 15min 后,静置 15min ;然后加入 10ml 的乙 醚,搅拌15 min后,静置15min;过滤;滤渣进行二次提 取,加入乙醇与乙醚 (体积比为 3: 1)的混合液 30ml,搅拌、 静置一定时间;第二次过滤,合并二次滤液,加热浓缩至少 量,加入一定量丙酮除杂,卵磷脂即沉淀出来,即得到卵磷 脂粗品。
三、实验材料、仪器和试剂
(一)卵磷脂的提取和纯化
1、实验材料:鸡蛋黄
2、仪器:恒温水浴锅 蒸发皿 漏斗 磁力搅拌器 天平
3、试剂: 95%乙醇
乙醚
丙酮
(二)卵磷脂的薄层层析
1、实验材料:提取的卵磷脂
2、仪 器: 电热鼓风干燥箱、 层析玻璃板、 层析 缸、吹风机、小型喷雾器 。
3、试 剂:
(1)硅胶-G;
2.卵磷脂的纯化
取一定量的卵磷脂粗品,用无水乙醇溶解,得到约10% 的乙醇粗提液,加入相当于卵磷脂质量的10% 的ZnCl2水溶 液,室温搅拌0.5h;分离沉淀物,加入适量冰丙酮(4℃) 洗涤,搅拌1h,再用丙酮反复研洗,直到丙酮洗液为近无 色止,得到白色腊状的精卵磷脂;干燥;称重。
(二)卵磷脂的薄层层析
试验号
影响因素 [乙醇]∶ [乙醚] 1 5∶ 1 1 5∶ 1 1 5∶ 1 温度 1 4℃ 2 25℃ 3 60℃ 时间(min) 1 10 2 20 3 30 料液比 1 1∶ 4 2 1∶ 5 3 1∶ 6
试验结果
表 4 试 验 安 排
1 2 3
4
5 6 7 8 9
2 4∶ 1
2 4∶ 1 2 4∶ 1 3 3∶ 1 3 3∶ 1 3 3∶ 1
1、调浆:称取硅胶-G 4.5g →烧杯→ 12ml 0. 2%羧甲 基纤维素钠溶液→用玻璃棒调匀搅拌为浆状液。 2、涂布:取洁净、干燥玻璃板一块→下衬一张白纸→ 在桌面上放平→用烧杯将浆状物均匀倒在玻璃板上, 从一端开始,保持均匀一致,涂布面积1 ~4/5 。 3、干燥:在室温下凉干2分钟→60℃干燥箱烘30分钟。 4、活化:将干燥箱升温至120 ℃ ,活化30分钟后,关 闭电源,当玻璃板面温度降至不烫手时取出。
5、点样:样点距玻璃板一端下缘1cm ,相互间隔
1~1.2 cm ;每位点重复点五次,每次用冷风吹干 后再点,每次点样直径不超过2mm 。 6、展层:在层析缸中加入展层剂0.5cm深,加盖平 衡30分钟,将点样端浸入,密闭展层10-30min。后
取出薄层板,标出展层剂前沿位置,用电吹风热风
将薄层板吹干。
1 4℃
2 25℃ 3 60℃ 1 4℃ 2 25℃ 3 60℃
2 20
3 30 1 10 3 30 1 10 2 20
3 1∶ 6
1 1∶ 4 2 1∶ 5 2 1∶ 5 3 1∶ 6 1 1∶ 4
I (I水平试验结果总合) II (II水平试验结果总合) III(III水平试验结果总合) I/3 II/3 III/3 级差
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